Manejo de los pacientes con cáncer de próstata localizado y recurrencia bioquímica en España: encuesta médica / Management of patients with localized prostate cancer and biochemical recurrence in Spain: A medical survey

Introducción El tratamiento de los pacientes con cáncer de próstata (CaP) está establecido en las guías de práctica clínica, las cuales se basan en estudios aleatorizados según el nivel de evidencia. En España se desconoce el grado de cumplimiento de estas guías en la práctica clínica. Objetivos Describir los perfiles de los pacientes con CaP en el momento del diagnóstico y el manejo de los pacientes con CaP localizado y con recurrencia bioquímica (RBQ) en España. Materiales y métodos Se realizó una encuesta médica en 3 especialidades médicas (85 urólogos [URO], 64 oncólogos radioterápicos [OR] y 21 oncólogos médicos [OM]). Para este estudio se elaboraron 3 cuestionarios, 2 con 22 preguntas (URO y OR) y uno con 21 preguntas (OM). Resultados La incidencia anual de CaP en los hospitales participantes (N=131) fue de 24.057 casos. La incidencia anual extrapolada a España fue de 40.531 casos. La prevalencia estimada de CaP en España es de 221.689. Cabe destacar que el 79 y el 80% de los pacientes atendidos por URO y OR, respectivamente, presentaban CaP localizado en el momento del diagnóstico. La biopsia fue la prueba diagnóstica más utilizada en las 3 especialidades, seguida de la tomografía computarizada abdominopélvica. Más del 90% de los pacientes con RBQ se sometieron a pruebas estándar. Las técnicas de imagen de nueva generación y la PET con colina/PSMA se siguen utilizando en menor medida. Actualmente, la mayoría de los pacientes con CaP localizado reciben tratamiento con cirugía o radioterapia, pero en el caso de los pacientes con RBQ, los URO y OR prefieren la radioterapia y los OM la terapia de privación androgénica exclusiva o combinada. Conclusión Este estudio describe los perfiles de los pacientes en el momento del diagnóstico y proporciona una visión general del manejo terapéutico actual del CaP localizado y con RBQ en la práctica clínica en España. (AU)

Introduction The management of patients with prostate cancer (PCa) is established in clinical practice guidelines, which are based on randomized studies according to the level of evidence. In Spain, the degree of compliance with these guidelines in clinical practice is unknown. Objectives To describe the profiles of PCa patients at the time of diagnosis and the management of patients with localized PCa and those with biochemical recurrence (BCR) in Spain. Materials and methods A medical survey was conducted in specialized care (85 urologists [UROs], 64 radiation oncologists [ROs], and 21 medical oncologists [MOs]). Three questionnaires were developed for this study with 22 (UROs and ROs) or 21 questions (MOs). Results The annual incidence of PCa was 24,057 in participating hospitals (N=131). The extrapolated annual incidence in Spain is 40,531 cases. The estimated prevalence of PCa in Spain is 221,689. Of note, 79 and 80% of patients seen by UROs and ROs, respectively had localized PCa at diagnosis. Biopsy was the most used diagnostic test among the 3 specialties, followed by abdominopelvic computer tomography. More than 90% of patients with BCR underwent standard tests. Next generation imaging tests and PET-choline/PSMA are still used residually. Most patients with localized PCa are currently treated with either surgery or radiotherapy, while for BCR patients, UROs and ROs prefer radiotherapy and MOs androgen deprivation therapy alone or in combination. Conclusion This study describes patient profiles at the time of diagnosis and provides an overview of the current therapeutic management of localized PCa and BCR in clinical practice in Spain. (AU)

Effects of nutrition education given to persons with multiple sclerosis and their families on diet quality and anthropometric and biochemical measurements / Efeito da educação nutricional dada a pessoas com esclerose múltipla e suas famílias em relação a qualidade da dieta, medidas antropométricas e bioquímicas

ABSTRACT Objective: In this study, it was aimed to investigate the effects of nutrition education given to persons with multiple sclerosis and their families on anthropometric and biochemical measurements and diet quality. Methods: Data from 51 persons with multiple sclerosis were analysed in this intervention study. The study was conducted with 3 groups. The education group consisted of only persons with multiple sclerosis, the family education group consisted of persons with multiple sclerosis and a family member living with them, and the control group consisted of persons with multiple sclerosis who had not received an education. Anthropometric and biochemical measurements and dietary quality assessments were made before (T1) and immediately after education (T2) and also 3 months after education (follow-up, T3). Results: The distribution of family education group diet quality scores showed a significant increase from "poor" to "needs improvement" at T3 compared to T1. The upper middle arm circumference measurements of the female control group were decreased at T2 and T3 [from 29.0 (23-34) cm to 28.0 (22-31) cm and to 27.5 (22-31) cm]. Women in family education group, levels of serum haemoglobin and haematocrit were higher than in control group at T2 and T3. Also, men in family education group, levels of alanine aminotransferase were lower than those in education group at follow up. Levels of total cholesterol and low-density lipoprotein cholesterol in education group were higher than those control group at T1, T2, and T3. Conclusion: This study indicates that nutrition education affects some biochemical and anthropometric measurements in persons with multiple sclerosis. Diet quality improved when receiving education together with families.

RESUMO Objetivo: Objetivou-se investigar os efeitos da educação nutricional dada a pessoas com esclerose múltipla e seus familiares, avaliação de medidas antropométricas, bioquímicas e da qualidade da dieta. Métodos: Dados de 51 participantes com esclerose múltipla foram analisados neste estudo de intervenção. O estudo foi dividido em 3 grupos, sendo o primeiro composto por indivíduos que obtiveram educação nutricional, o segundo, composto por indivíduos mais um membro da família que morava com eles e obtiveram educação nutricional, e o terceiro, grupo controle, composto por indivíduos que não obtiveram educação nutricional. Medidas antropométricas, bioquímicas e avaliações da qualidade da dieta foram feitas antes (T1) imediatamente após a educação nutricional (T2) e também 3 meses após a educação nutricional (T3). Resultados: A distribuição dos escores de qualidade da dieta do grupo de educação familiar mostrou um aumento significativo de "ruim" para "precisa melhorar" no T3 em comparação ao T1. As medidas da circunferência do braço médio do grupo controle feminino foram menores em T2 e T3 [de 29,0 (23-34) cm para 28,0 (22-31) cm e para 27,5 (22-31) cm]. Nas mulheres do grupo família, os níveis séricos de hemoglobina e hematocrito foram maiores do que no grupo controle em T2 e T3. Também nos homens do grupo família, os níveis de alanina aminotransferasa foram mais baixos do que os do grupo educação no seguimento. Os níveis de CT e LDL-C no grupo educação foram superiores aos do grupo controle em T1, T2 e T3. Conclusão: Este estudo observou que a educação nutricional afeta algumas medidas bioquímicas antropométricas em pessoas com esclerose múltipla. A qualidade da dieta melhorou quando recebeu educação junto com as famílias.

Comparação entre os resultados da urinálise e dosagens bioquímicas urinárias de amostras de urina coletadas pelas técnicas de cistocentese guiada por ultrassom e sondagem uretral em cães / Comparison between the results of urinalysis and urinary biochemical tests of urine samples collected by techniques ultrasound-guided cystocentesisand urethral catheterization in dogs

Objetivou-se no presente estudo comparar as técnicas de coleta de urina via sondagem uretral e cistocentese guiada por ultrassom, afim de verificar se o método de coleta pode influir nos resultados laboratoriais. Foram utilizados 12 cães machos, sem histórico de enfermidades, dos quais coletou-se cinco mililitros (mL) de urina via sondagem uretral e cinco mL via cistocentese guiada por ultrassom, ambas no mesmo momento. Posteriormente foi realizada a análise física (cor, odor, densidade, turbidez), química (urobilinogênio, glicose, corpos cetônicos, bilirrubina, proteína, nitrito, pH, sangue e leucócitos) e sedimentoscopia (avaliação de 10 campos de luz, objetiva de 40x). Cilindros urinários, cristais, corpúsculos gordurosos, espermatozoides, bactérias e células vesicais foram classificados qualitativamente como: ausentes (0), discretos (1), moderados (2) e intensos (3). Hemácias, leucócitos, e células de descamação foram quantificadas a partir da média dos campos analisados. As análises bioquímicas de microalbuminúria, creatinina e proteína total urinárias foram realizadas a partir do sobrenadante urinário, removido das amostras após centrifugação, e utilizados kits reagentes, conforme recomendação do fabricante, sendo a leitura em espectrofotômetro. Em todos os testes realizados os valores de p encontrados foram superiores 0,05 (p>0,05), excluindo-se a possibilidade de haver diferenças significativas dos resultados laboratoriais obtidos pelas duas formas de coleta.

The objective of this study was to compare two techniques of urine collection, urethral catheterization and ultrasound-guided cystocentesis, in order to verify if the collection method may influence the laboratory results. Twelve male dogs were used, with no history of diseases, of which five milliliters (mL) of urine were collected by urethral catheterization and five mL by both at the same time. Subsequently, the samples underwent physical analysis (color, smell, density andturbidity), chemical analysis (urobilinogen, glucose, ketone bodies, bilirubin, protein, nitrite, pH, blood and leukocytes) and sedimentoscopy (evaluation of 10 light fields, 40x objective). Urinary casts, fatty corpuscles, spermatozoa, bacteria and bladder epithelial cells were classified qualitatively as absent (0), discrete (1), moderate (2) and intense (3). Red blood cells, leukocytes and desquamation cells were quantified from the mean of the analyzed fields. The urine supernatants were obtained after centrifugation and were used for biochemical analyzes of microalbuminuria, urinary protein and creatinine. The reagent kits were used as recommended by the manufacturer and the samples were read by spectrophotometry. All tests presented p values higher than 0,05 (p>0,05), excluding the possibility of significant differences between the laboratory results of both forms of urine collection.

Comparação entre os resultados da urinálise e dosagens bioquímicas urinárias de amostras de urina coletadas pelas técnicas de cistocentese guiada por ultrassom e sondagem uretral em cães / Comparison between the results of urinalysis and urinary biochemical tests of urine samples collected by techniques ultrasound-guided cystocentesisand urethral catheterization in dogs

Objetivou-se no presente estudo comparar as técnicas de coleta de urina via sondagem uretral e cistocentese guiada por ultrassom, afim de verificar se o método de coleta pode influir nos resultados laboratoriais. Foram utilizados 12 cães machos, sem histórico de enfermidades, dos quais coletou-se cinco mililitros (mL) de urina via sondagem uretral e cinco mL via cistocentese guiada por ultrassom, ambas no mesmo momento. Posteriormente foi realizada a análise física (cor, odor, densidade, turbidez), química (urobilinogênio, glicose, corpos cetônicos, bilirrubina, proteína, nitrito, pH, sangue e leucócitos) e sedimentoscopia (avaliação de 10 campos de luz, objetiva de 40x). Cilindros urinários, cristais, corpúsculos gordurosos, espermatozoides, bactérias e células vesicais foram classificados qualitativamente como: ausentes (0), discretos (1), moderados (2) e intensos (3). Hemácias, leucócitos, e células de descamação foram quantificadas a partir da média dos campos analisados. As análises bioquímicas de microalbuminúria, creatinina e proteína total urinárias foram realizadas a partir do sobrenadante urinário, removido das amostras após centrifugação, e utilizados kits reagentes, conforme recomendação do fabricante, sendo a leitura em espectrofotômetro. Em todos os testes realizados os valores de p encontrados foram superiores 0,05 (p>0,05), excluindo-se a possibilidade de haver diferenças significativas dos resultados laboratoriais obtidos pelas duas formas de coleta.

The objective of this study was to compare two techniques of urine collection, urethral catheterization and ultrasound-guided cystocentesis, in order to verify if the collection method may influence the laboratory results. Twelve male dogs were used, with no history of diseases, of which five milliliters (mL) of urine were collected by urethral catheterization and five mL by both at the same time. Subsequently, the samples underwent physical analysis (color, smell, density andturbidity), chemical analysis (urobilinogen, glucose, ketone bodies, bilirubin, protein, nitrite, pH, blood and leukocytes) and sedimentoscopy (evaluation of 10 light fields, 40x objective). Urinary casts, fatty corpuscles, spermatozoa, bacteria and bladder epithelial cells were classified qualitatively as absent (0), discrete (1), moderate (2) and intense (3). Red blood cells, leukocytes and desquamation cells were quantified from the mean of the analyzed fields. The urine supernatants were obtained after centrifugation and were used for biochemical analyzes of microalbuminuria, urinary protein and creatinine. The reagent kits were used as recommended by the manufacturer and the samples were read by spectrophotometry. All tests presented p values higher than 0,05 (p>0,05), excluding the possibility of significant differences between the laboratory results of both forms of urine collection.

Biochemical characterization and cytotoxic effect of the skin secretion from the red-spotted Argentina frog Argenteohyla siemersi (Anura: Hylidae)

Argenteohyla siemersi (red-spotted Argentina frog) is a casque-headed tree frog species belonging to the Hylidae family. This species has a complex combination of anti-predator defense mechanisms that include a highly lethal skin secretion. However, biochemical composition and biological effects of this secretion have not yet been studied. Methods: The A. siemersi skin secretion samples were analyzed by mass spectrometry and chromatographic analysis (MALDI-TOF/MS, RP-HPLC and GC-MS). Proteins were also studied by SDS-PAGE. Among the biological activities evaluated, several enzymatic activities (hemolytic, phospholipase A2, clotting, proteolytic and amidolytic) were assessed. Furthermore, the cytotoxic activity (cytolysis and fluorescence staining) was evaluated on myoblasts of the C2C12 cell line. Results: The MALDI-TOF/MS analysis identified polypeptides and proteins in the aqueous solution of A. siemersi skin secretion. SDS-PAGE revealed the presence of proteins with molecular masses from 15 to 55 kDa. Steroids, but no alkaloids or peptides (less than 5 KDa), were detected using mass spectrometry. Skin secretion revealed the presence of lipids in methanolic extract, as analyzed by CG-MS. This secretion showed hemolytic and phospholipase A2 activities, but was devoid of amidolytic, proteolytic or clotting activities. Moreover, dose-dependent cytotoxicity in cultured C2C12 myoblasts of the skin secretion was demonstrated. Morphological analysis, quantification of lactate dehydrogenase release and fluorescence staining indicated that the cell death triggered by this secretion involved necrosis. Conclusions: Results presented herein evidence the biochemical composition and biological effects of A. siemersi skin secretion and contribute to the knowledge on the defense mechanisms of casque-headed frogs.(AU)

Bioquímica postmortem: revisión bibliográfica / Postmortem Biochemistry. Review

Justificación:Son diversas las ocasiones en las que el médico forense requiere auxiliarse de la bioquímica postmortem para obtener información que le permita determinar la causa de muerte,especialmente en aquellos casos cuyas patologías no presentancambios morfológicos que indiquen cuáles fueron los cambios fisiopatológicos involucrados en el proceso de muerte. Se estima que su aplicación podría contribuir a resolver hasta el 10% de las muertes naturales que se estudian en la rutina forense,sin embargo, a pesar del enorme potencial de esta disciplina, la misma aún no ha sido ampliamente aplicada. Objetivo:Presentar algunas aplicaciones de la bioquímica postmortem, sus limitaciones; así como proporcionar un breve resumen de lo publicado recientemente sobre el tema.Metodología:Se realizó labúsqueda en pub med y google académico,utilizando los términos,bioquímica post mortem y tanatoquímia.Resultados:Se encontró que, pese aque la bioquímica postmortem es una disciplina que a pesar que data desde los años 40, son pocos los avances que se han realizado, debido a factores que limitan la interpretación de los resultados entre los que destacan la falta de valores de referencia y el escaso conocimiento de la dinámica del cambio postmortem de los metabolitos.Conclusiones:A pesar de las enormes aplicaciones que, desde la conceptualización teórica, la bioquímica postmortem pueda tener, su aplicación se ha visto limitada por diversos factores por lo que se requiere realizar más investigación...(AU)

Actiflagelin, a new sperm activator isolated from Walterinnesia aegyptia venom using phenotypic screening

Background Sperm contains a wealth of cell surface receptors and ion channels that are required for most of its basic functions such as motility and acrosome reaction. Conversely, animal venoms are enriched in bioactive compounds that primarily target those ion channels and cell surface receptors. We hypothesized, therefore, that animal venoms should be rich enough in sperm-modulating compounds for a drug discovery program. Our objective was to demonstrate this fact by using a sperm-based phenotypic screening to identify positive modulators from the venom of Walterinnesia aegyptia. Methods Herein, as proof of concept that venoms contain interesting compounds for sperm physiology, we fractionated Walterinnesia aegyptia snake venom by RP-HPLC and screened for bioactive fractions capable of accelerating mouse sperm motility (primary screening). Next, we purified each compound from the positive fraction by cation exchange and identified the bioactive peptide by secondary screening. The peptide sequence was established by Edman sequencing of the reduced/alkylated compound combined to LC-ESI-QTOF MS/MS analyses of reduced/alkylated fragment peptides following trypsin or V8 protease digestion. Results Using this two-step purification protocol combined to cell phenotypic screening, we identified a new toxin of 7329.38 Da (actiflagelin) that activates sperm motility in vitro from OF1 male mice. Actiflagelin is 63 amino acids in length and contains five disulfide bridges along the proposed pattern of disulfide connectivity C1-C5, C2-C3, C4- C6, C7-C8 and C9-C10. Modeling of its structure suggests that it belongs to the family of three finger toxins with a noticeable homology with bucandin, a peptide from Bungarus candidus venom. Conclusions This report demonstrates the feasibility of identifying profertility compounds that may be of therapeutic potential for infertility cases where motility is an issue.

Hematological and biochemical characteristics during the transport of dog snapper Lutjanus jocu (Perciformes: Lutjanidae)

The objective of this study was to evaluate stress responses in dog snapper (Lutjanus jocu) during transport by evaluating their hematological and biochemical responses. Twenty-five wild dog snapper specimens were used in the experiment (220 ± 68 g and 24.5 ± 2.5 cm total length). Blood samples were collected prior to transport (control), and fish were placed in two transport boxes, one with anesthetic and one without anesthetic. Immediately after transport and after 24 h, blood was collected from the fish that underwent each treatment (with anesthetic and without anesthetic). Biochemical and hematological results demonstrated the inefficiency of benzocaine as a stress reliever during handling and transport. Biochemical parameters revealed the effects of stress during transport, and after 24 h, glucose levels and hematological parameters (hemoglobin, erythrocytes, leukocytes, neutrophils and MCH) showed a tendency to return to control levels. This study is the first to report stress response measurements of hematological and biochemical indicators in dog snapper, representing an important basis for the planning of future experiments involving the transport and handling of this fish species.(AU)

O objetivo desde estudo foi avaliar as repostas de estresse em dentão (Lutjanus jocu) durante o procedimento de transporte, através de respostas hematológicas e bioquímicas. Vinte e cinco exemplares selvagens de dentão foram utilizados no experimento (220 ± 68 g e 24.5 ± 2.5 cm de comprimento total). Foram realizadas coletas de sangue previamente ao transporte (controle), e os demais peixes foram acondicionados em duas caixas de transporte, uma com anestésico e outra sem anestésico. Imediatamente após o transporte e após 24 h, houve coleta de sangue para cada tratamento (com anestésico e sem anestésico). Os resultados bioquímicos e hematológicos apontam a ineficiência da benzocaína como mitigador do estresse durante o manuseio e transporte. Os parâmetros bioquímicos foram capazes de detectar o efeito do estresse durante o transporte, e após 24 h os níveis de glicose e alguns parâmetros hematológicos (hemoglobina, eritrócitos, leucócitos, neutrófilos e MCH) demonstraram uma tendência de retorno aos níveis do controle. Este trabalho é o primeiro a informar os níveis de resposta basal e de estresse para indicadores hematológicos e bioquímicos em dentão, representando uma base importante para o planejamento de futuras experiências com transporte e manejo dessa espécie.(AU)

Combinaciones de bases nutritivas empleadas en el desarrollo del medio caldo nitrato / Nutritional bases combinations used in the development of nitrate broth medium

Introducción: el medio caldo nitrato es utilizado en los laboratorios de microbiología clínica como prueba bioquímica para la identificación de enterobacterias por la capacidad que tienen para reducir los nitratos a nitrito. Objetivo: evaluar diferentes combinaciones de bases nutritivas destinadas al desarrollo del medio de cultivo. Métodos: se seleccionó como material biológico un conjunto de cepas certificadas y aisladas pertenecientes a especies representativas de varios géneros de la familia de Enterobacteriaeceae. Se diseñaron cinco variantes y se utilizó como bases nutritivas la peptona de gelatina y el extracto de carne, en diferentes combinaciones y concentraciones, para determinar el incremento de absorbancia en el tiempo como indicador de la densidad microbiana y se calculó la velocidad de crecimiento. Se evaluó la capacidad funcional del medio de cultivo por la habilidad de las especies de reducir o no el nitrato a nitrito. Resultados: la mejor combinación de bases nutritivas correspondió a la de mayor concentración de peptona de gelatina (10 g/L) y extracto de carne (3 g/L). La evaluación organoléptica y fisicoquímica del medio de cultivo mostró características satisfactorias para este tipo de producto. Se comprobó la reducción satisfactoria del nitrato a nitrito, por los microorganismos empleados como control positivo. Conclusiones: el medio de cultivo caldo nitrato desarrollado, cumple con los requisitos de calidad y su funcionalidad microbiológica y permite la caracterización de especies bacterianas que poseen la capacidad de reducir los nitratos a nitritos(AU)

Introduction: the nitrate broth culture medium is used in clinical microbiology laboratories as a biochemical test for the identification of Enterobacteriaceae by the ability of these microorganisms to reduce nitrate to nitrite. Objective: to evaluate different combinations of nutritive bases for the development of the culture medium. Methods: certificed strains were selected as biological test material. The strains belong to different generu of the Enterobactericiae family. Five variants were designed with gelatin peptone and meat extract as nutrient bases at different concentrations and combinations, the growth rate was calculated by measuring the increase in absorbance over time as an indicator of microbial density. The functionality of the culture medium was evaluated by the ability of tested bacteria or reduce nitrate to nitrite Results: the best combination of nutritive bases contained the highest concentration of gelatin peptone (10 g/L) and beef extract (3 g/L). Physicochemical and sensory evaluation of the culture medium showed results characteristic for this type of product. Reductions of nitrate to nitrite were observed for all tested microorganisms choosed as the positive control. Conclusions: the nitrate broth culture medium developed complies the quality requiment and its microbiological functionality allows the characterization of bacterial species by the ir ability to reduce nitrate to nitrite(AU)

Combinaciones de bases nutritivas empleadas en el desarrollo del medio caldo nitrato / Nutritional bases combinations used in the development of nitrate broth medium

INTRODUCCIÓN: el medio caldo Nitrato es utilizado en los laboratorios de microbiología clínica como prueba bioquímica para la identificación de enterobacterias por la capacidad que tienen estos microorganismos para reducir los nitratos a nitrito. OBJETIVO: evaluar diferentes combinaciones de bases nutritivas destinadas al desarrollo del medio de cultivo. MÉTODOS: se seleccionó como material biológico un conjunto de cepas certificadas y aisladas pertenecientes a especies representativas de varios géneros de la familia de Enterobacteriaeceae. Se diseñaron cinco variantes y se utilizó como bases nutritivas la peptona de gelatina y el extracto de carne, en diferentes combinaciones y concentraciones, para determinar el incremento de absorbancia en el tiempo como indicador de la densidad microbiana y se calculó la velocidad de crecimiento. Se evaluó la capacidad funcional del medio de cultivo por la habilidad de las especies de reducir o no el nitrato a nitrito. RESULTADOS: la mejor combinación de bases nutritivas correspondió a la de mayor concentración de peptona de gelatina (10 g/L) y extracto de carne (3 g/L). La evaluación organoléptica y fisicoquímica del medio de cultivo mostró características satisfactorias para este tipo de producto. Se comprobó la reducción satisfactoria del nitrato a nitrito, por los microorganismos empleados como control positivo. CONCLUSIONES: el medio de cultivo caldo nitrato desarrollado, cumple con los requisitos de calidad y su funcionalidad microbiológica y permite la caracterización de especies bacterianas que poseen la capacidad de reducir los nitratos a nitritos.

INTRODUCTION: the nitrate broth culture medium is used in clinical microbiology laboratories as a biochemical test for the identification of Enterobacteriaceae by the ability of these microorganisms to reduce nitrate to nitrite. OBJECTIVE: to evaluate different combinations of nutritive bases for the development of the culture medium. METHODS: certificed strains were selected as biological test material. The strains belong to different generu of the Enterobactericiae family. Five variants were designed with gelatin peptone and meat extract as nutrient bases at different concentrations and combinations, the growth rate was calculated by measuring the increase in absorbance over time as an indicator of microbial density. The functionality of the culture medium was evaluated by the ability of tested bacteria or reduce nitrate to nitrite RESULTS: the best combination of nutritive bases contained the highest concentration of gelatin peptone (10 g/L) and beef extract (3 g/L). Physicochemical and sensory evaluation of the culture medium showed results characteristic for this type of product. Reductions of nitrate to nitrite were observed for all tested microorganisms choosed as the positive control. CONCLUSIONS: the nitrate broth culture medium developed complies the quality requiment and its microbiological functionality allows the characterization of bacterial species by the ir ability to reduce nitrate to nitrite

Production of xylanases by an Aspergillus niger strain in wastes grain / Produção de xilanases por uma linhagem de Aspergillus niger em resíduos de grãos

Many fungi are used in order to extract products from their metabolism through bioprocesses capable of minimizing adverse effects caused by agro- industrial wastes in the environment. The aim of this study was to evaluate the xylanase production by an Aspergillus niger strain, using agro-industrial wastes as substrate. Brewer's spent grain was the best inducer of xylanase activity. Higher levels of xylanase were obtained when the fungus was grown in liquid Vogel medium, pH 5.0, at 30ºC, during 5 days. The temperature for optimum activity was 50ºC and optimum pH 5.0. The enzyme was stable at 50ºC, with a half-life of 240 min. High pH stability was verified from pH 4.5 to 7.0. These characteristics exhibited by A. niger xylanase turn this enzyme attractive for some industrial applications, such as in feed and food industries. Additionally, the use of brewer's spent grain, an abundantly available and low-cost residue, as substrate for xylanase production can not only add value and decrease the amount of this waste, but also reduce xylanase production cost.

Muitos fungos são utilizados com a finalidade de extrair produtos de seu metabolismo, por meio de bioprocessos capazes de minimizar efeitos nocivos que resíduos agroindustriais causam ao meio ambiente. O objetivo deste estudo foi avaliar a produção de xilanases por uma linhagem de Aspergillus niger, empregando resíduos agroindustriais como substrato. O bagaço de malte foi o melhor resíduo indutor da atividade xilanásica. Maiores níveis de xilanases foram obtidos quando o fungo foi cultivado em meio líquido de Vogel, pH 5,0, a 30ºC, durante cinco dias. A temperatura ótima estabelecida para a atividade xilanásica foi a de 50ºC e o pH ótimo 5,0. A enzima foi estável a 50ºC, apresentando uma meia vida de 240 min. Elevada estabilidade enzimática foi verificada entre os pH 4,5 e 7,0. As características bioquímicas exibidas pela xilanase produzida por A. niger tornam esta enzima atraente para determinadas aplicações industriais, como as indústrias de ração animal e alimentícia. Adicionalmente, a utilização do bagaço de malte, um resíduo disponível em abundância e de baixo custo como substrato para a produção de xilanases poderá não somente adicionar valor a este resíduo, como também reduzir os custos de produção destas enzimas.

Efeitos do polietilenoglicol 3350 e de soluções acidificantes e alcalinizantes sobre o perfil bioquímico de éguas hígidas / Effects of polyethylene glycol 3350 and alkalizing and acidifying solutions on the biochemical profile of healthy mares

Avaliou-se o perfil bioquímico de cinco éguas hígidas tratadas com polietilenoglicol 3350 (PEG); ou com polietilenoglicol 3350+Ringer lactato (PEG+RL); ou com solução isotônica poliônica enteral (SIPE); ou com solução isotônica poliônica enteral associada ao Ringer lactato intravenoso (SIPE+RL); ou com solução de cloreto de sódio a 0,9% (NaCl 0,9%). Os parâmetros avaliados foram: sódio, cloreto, potássio, cálcio ionizado, fósforo, magnésio total, proteínas totais, albumina, creatinina, ureia e osmolaridade calculada no soro de sangue venoso. O tratamento PEG não alterou os parâmetros bioquímicos. O PEG+RL diminuiu o fósforo. O SIPE diminuiu o fósforo e aumentou o cloreto. O SIPE+RL aumentou o sódio, e o NaCl 0,9% ocasionou o aumento do cloreto e a redução da osmolaridade sérica. Concluiu-se que o tratamento PEG associado ao Ringer lactato pode provocar o aparecimento de hipofosfatemia, o SIPE ocasiona hipercloremia, o NaCl 0,9% diminui a osmolaridade sérica e o SIPE+RL provoca hipernatremia.

The biochemical profile of five healthy mares treated with polyethylene glycol 3350 (PEG); or polyethylene glycol 3350+Ringer lactate intravenous (PEG+RL); or enteral polionic isotonic solution (EPIS); or enteral polionic isotonic solution associated with Ringer lactate intravenous (EPIS+RL); or chloride sodium solution 0.9% (NaCl 0.9%) was evaluated. The parameters evaluated were: sodium, chloride, potassium, ionized calcium, phosphorus, total magnesium, total protein, albumin, creatinine, urea, and calculated serum osmolality of venous blood. PEG treatment did not alter biochemical parameters. PEG+RL decreased phosphorus. SIPE decreased phosphorus and increased chloride. The EPIS+RL caused an increase of sodium and NaCl 0.9% caused an increase of chloride and a reduction of serum osmolarity. It is concluded that PEG treatment associated with Ringer lactate solution can cause the appearance of hypophosphatemia, EPIS causes hyperchloremia, NaCl 0.9% decreases the serum osmolality and EPIS+RL causes hypernatremia.

Mecanismos moleculares da ação tóxica pró-oxidante de 1,4-diamino-2-butanona, um análogo de putrescina, sobre células de mamíferos e Trypanosoma cruzi / The Molecular mechanisms of pro-oxidant activity of 1,4-diamino-2-butanone, a putrescine analogue, to mammalian cells and Trypanosoma cruzi

Compostos α-aminocarbonilícos como ácido 5-aminolevulínico (ALA) e aminoacetona (AA) apresentam um grande potencial pró-oxidante, pois sofrem reações de enolização e subseqüente oxidação aeróbica, com a formação de espécies radicalares de oxigênio, íons NH4+ e α-oxoaldeídos potencialmente citotóxicos. A α-aminocetona 1,4-diamino-2-butanona (DAB), um análogo da putrescina, é um agente microbicida de vários parasitas incluindo Trypanosoma cruzi. Acredita-se que o mecanismo de morte desencadeado por DAB nos parasitas seja por meio da inibição competitiva da ornitina descarboxilase (ODC), importante enzima do metabolismo de poliaminas, muito embora tenha sido observado de igual forma danos oxidativos nestes parasitas quando tratados com DAB. O objetivo deste trabalho é esclarecer o mecanismo de oxidação química de DAB e sua ação pró-oxidante à cultura de células de mamíferos (LLC-MK2 e RKO), assim como sua atividade microbicida contra tripomastigotas de Trypanosoma cruzi. Demonstramos aqui que DAB, quimicamente similar ao ALA e AA, sofre reação de oxidação catalisada por íons fosfato, e por íons de metais de transição como Fe(II) e Cu(II), resultando na formação de radicais de oxigênio, H2O2, NH4+, 2-oxo-4-aminobutanal como produto principal da oxidação de DAB e de compostos ciclicos de caracter pirrólico. Danos oxidativos observados em ferritina, apotransferrina e liposomos de cardiolipina e fosfatidilcolina (20:80) contribuem para a nossa hipótese de ação pró-oxidante de DAB. O tratamento de células de mamíferos das linhagens LLC-MK2 (IC50 1,5 mM, tratamento de 24 h) e RKO (IC50 0,3 mM, tratamento de 24 h) com DAB levou à alteração do balanço redox celular, à ativação de resposta antioxidante e ao desencadeamento de morte celular via apoptose e parada de ciclo celular. Em culturas de tripomastigotas de T. cruzi o tratamento com DAB culminou na redução da motilitidade e viabilidade destes parasitas (IC50 0,2 mM, tratamento de 4 h), assim como depleção do...

α-Aminocarbonyl componds such as 5-aminolevunilic acid (ALA) and aminoacetone (AA) have been shown to exhibit pro-oxidant properties. These compounds undergo phosphate-catalyzed enolization in physiological pH and subsequent aerobic oxidation, yielding reactive oxygen species, NH4+ ions and an α-oxoaldehyde highly cytotoxic. The α-aminoketone 1,4-diamino-2-butanone (DAB) is a putrescine analogue and a microbicidal agent to various parasites including Trypanosoma cruzi. The mechanism of DAB toxicity to these parasites is attributed to DAB competitive inhibition of ornithine decarboxylase (ODC), a key enzyme on polyamine biosynthesis, although it has also been shown DAB isto implicated in oxidative damage to these parasites. Our aim is to clarify the mechanism of DAB aerobic oxidation and of its putative pro-oxidant activity to mammalian cell cultures (LLC-MK2 and RKO cell linages) and to Trypanosoma cruzi trypomastigotes. Here we show that, similar to ALA and AA, DAB undergoes aerobic oxidation in presence of phosphate ions and of transition metal ions such as Fe(II) and Cu(II), yielding oxygen radicals, H2O2, NH4+ and 2-oxo-4-aminobutanal accompanied by its condensation cyclic products displaying pyrrolic characteristics. Oxidative alterations to ferritin, apotransferrin and liposomes of cardiolipin and phosphatidylcholine (20:80) were observed under DAB treatment strongly supporting our hypothesis of DAB pro-oxidative activity. DAB treatment of mammalian cultured cells LLC-MK2 (IC50 1.5 mM, 24 h incubation) and RKO (IC50 0.3 mM, 24 h incubation) resulted in redox imbalance, induction of antioxidant response, activation of apoptosis pathway and cell cycle arrest. DAB is shown here to trigger Trypanosoma cruzi trypomastigotes decreased parasite motility and viability (IC50 0.2 mM, 4 h incubation), as well as redox thiol imbalance parallel to increase TcSOD activity. In addition, DAB efficiently hampered host cell (LLC-MK2) invasion by trypomastigotes...

Acetilação radicalar de amino ácidos, peptídeos e nucleobases pelos sistemas biacetilo/peroxinitrito e metilglioxal/peroxinitrito / Radical acetylation of aminoacids, peptides, and nucleobases by the biacetyl or methylglyoxal/peroxynitrite systems

Biacetilo (2,3-butanediona) é um contaminante de comida e cigarro, também implicado na hepatoxicidade do álcool e em doenças pulmonares. O metilglioxal (MG), um α-oxoaldeído reativo frequentemente associado ao diabetes e envelhecimento, é produto da fragmentação oxidativa de trioses fosfato, acetona e aminoacetona. Por sua vez, peroxinitrito - um potente oxidante, agente nitrante e nucleófilo formado in vivo pela reação controlada por difusão do ânion radical superóxido com o radical óxido nítrico (k ~1010 M-1s-1) é capaz de se adicionar a CO2 e compostos carbonílicos, gerando produtos potencialmente tóxicos ou sinalizadores celulares. Aminoácidos, peptídeos e nucleobases podem ser acetilados nos grupos amina e na porção desoxiribose. Relativamente ao tratamento com peroxinitrito isolado, níveis superiores de 3-nitrotirosina foram detectados quando tirosina foi tratada com peroxinitrito/biacetilo ou metilglioxal. Ambos os grupos amina de lisina (Lys) ou um deles de derivados de lisina bloqueados e um deles (Ac-Lys-OMe, Z-Lys-OMe) foram acetilados pelo sistema biacetilo ou metilglioxal/peroxinitrito. Em tetrapeptídeos sintéticos contendo lisina como aminoácido amino-terminal (H-KALA-OH, Ac-KALA-OH and H-K(Boc)ALA-OH), a lisina foi acetilada pelo sistemas dicarbonilico/peroxinitrito no grupo α-amina (em maior extensão) e/ou no ε-amina (em menor extensão). No conjunto, estes resultados podem ser interpretados à luz do mecanismo proposto para a reação de compostos α-dicarbonílicos com peroxinitrito, o qual envolve sequencialmente: (i) adição nucleofílica de peroxinitrito à carbonila; (ii) homólise do aduto peroxinitroso formado, liberando •NO2 e um radical oxila do reagente carbonílico; (iii) β-clivagem do radical oxila a um ácido carboxílico (ácido acético no caso de biacetilo e ácido fórmico, a partir de metilglioxal) e radical acetila; (iv) captação do radical acetila pelo oxigênio molecular dissolvido dando acetato, ou por aminoácido ou nucleobase...

Diacetyl (2,3-butanedione) is a food and cigarette contaminant recently implicated in alcohol hepatotoxicity and lung disease. In turn, methylglyoxal (MG) is an α-oxoaldehyde frequently associated with diabetes and aging that is putatively formed by the oxidative fragmentation of trioses phosphate, acetone and aminoacetone. Peroxynitrite - a potent oxidant, nitrating agent and nucleophile formed in vivo by the diffusion-controlled reaction of superoxide radical with nitric oxide (k ~1010 M-1s-1) - is able to form adducts with carbon dioxide and carbonyl compounds. When initially present in the reaction mixtures before addition of ONOO-, amino acids, peptides and nucleobases undergo acetylation at the amino group and purine moieties in the presence of biacetyl or methylglyoxal. Higher levels of 3-nitrotyrosine nitration were measured when peroxynitrite/biacetyl or metilglioxal was added to tyrosine, in comparison with peroxynitrite alone. Both amino groups of L-lysine or one of the amino groups of L-lysine derivatives (Z-Lys-OH and Ac-Lys-OH) were acetylated by biacetyl and methylglyoxal/peroxynitrite system. Using tetrapeptides containing lysine at the terminal amino acid (H-KALA-OH, Ac-KALA-OH and H-K(Boc)ALA-OH), the lysine residue was acetylated at both or either α-amino (major adduct) and ε-amino group (minor adduct). Altogether these data can be interpreted by the mechanism proposed to describe the reaction of α-dicarbonyls with peroxynitrite as follows: (i) nucleophilic addition of peroxynitrite to the carbonyl group of the reagent; (ii) homolysis of the formed peroxynitroso carbonyl adduct to •NO2 and a carbonyloxyl radical; (iii) β-cleavage of the oxyl radical to acetyl radical plus acetic acid (from diacetyl) or formic acid (from methylglyoxal); (iv) competitive scavenging of the acetyl radical by dissolved molecular oxygen and by added amino acid, peptide or nucleobase, ultimately yielding acetate or acetylated biomolecule. If occurring in vivo...

Isolamento e resistência a antimicrobianos de cepas de Streptococcus spp. provenientes de rãs-touro (Lithobates catesbeianus) / Isolation and antimicrobial resistance of Streptococcus spp. strains from bullfrog (Lithobates catesbeiana)

Twelve bullfrogs were selected from two commercial frog farms and clinically diagnosed as attacked by Streptococcus disease. Sixty samples were collected, and Streptococcus spp. was isolated from all bullfrog, being 12 (100%) from the encephalus, seven from the kidneys (58.3%), three from the liver (25%), two from the spleen (16.6%), and one from the ascitic liquid (8.3%). Streptococcus "-hemolytic were isolated from all the 60 samples, which were sensible to chloramphenicol (100%), gentamycin (100%), vancomycin (96%), cefotaxime (96%), and cefoxitine (92%).

Relações entre parâmetros antropométricos, de composição corporal, bioquímicos e clínicos em indivíduos com Síndrome Metabólica / Relationship between anthropometric, biochemical and clinical parameters and body composition in individuals with Metabolic Syndrome

Metabolic syndrome is characterized as a set of cardiovascular risk factors that includes abdominal obesity, insulin resistance, dyslipidemia and elevated blood pressure. This study aimed to investigate the relation between anthropometric indicators and body composition, as well as alterations in the biochemical profile in adult individuals with this syndrome. This is a cross-sectional study on individuals with metabolic syndrome registered with in the Cardiovascular Health Attention Program (PROCARDIO) of the Health Division at the Federal University of Viçosa. Anthropometric, biochemical and clinical evaluations were carried out with these individuals and the NCEP-ATP III criterion was adopted to diagnose the syndrome. The chi-square, odds ratio, t-Student, Mann-Whitney and correlation tests were used to analyze the data. This sample, predominantly female, showed women with high levels of body fat and waist circumference. The men showed an elevated fasting glycemia as well as an accumulation of abdominal fat. It was found that individuals with excessive weight presented a risk waist circumference and also mixed dyslipidemia. Excessive body fat was observed in individuals with hypertension, fasting hyperglycemia and high BMI. Older individuals were more vulnerable to hypertension and hyperglycemia.

El síndrome metabólico se caracteriza como un conjunto de factores de riesgo cardiovascular, incluidas ahí: obesidad abdominal, resistencia a la insulina, dislipidemias y presión arterial elevada. Este estudio tuvo por objetivo investigar la relación entre los indicadores antropométricosy la composición física, así como alteraciones en el perfil bioquímico en personas adultas con este síndrome. Un estudio transversal en personas con síndrome metabólico que están registradas en PROCARDIO, el programa para la atencióna la salud cardiovascular, en la División de Salud de la Universidad Federal de Viçosa, Minas Gerais, Brasil. Evaluaciones antropométrica, bioquímica y clínica se realizaron en esos individuos y el criterio NCEP-ATP III fue utilizado para diagnosticar el síndrome. El análisis de los datos se hizo por medio del quicuadrado, razón de probabilidad, t-Student, Mann-Whitney y correlación. Esta muestra, formada predominantemente de mujeres, las cuales presentaron elevados niveles de grasa corporal y circunferencia de la cintura. Ya los hombres mostraron alta glucemia de ayuno y acumulación de grasa abdominal. Se encontró que las personas con sobrepeso presentan circunferencia de la cintura de riesgo y también dislipidemia mixta. El exceso de grasa corporal se ha observado en individuos con hipertensión arterial, glucemia de ayuno elevada y alto índicede masa corporal. Personas de edad avanzada presentaron mayor son más vulnerabilidad a la hipertensión y la glucemia elevada.

A Síndrome Metabólica é caracterizada como um conjunto de fatores de risco cardiovascular que inclui obesidade abdominal, resistência insulínica, dislipidemia e pressão arterial elevada. Esse estudo teve como objetivo investigara relação entre indicadores antropométricos e de composição corporal, bem como alterações no perfil bioquímico em indivíduos adultos que apresentam essa síndrome. Trata-se de um estudo de caráter transversal em indivíduos portadores da síndrome metabólica, cadastrados no PROCARDIO, Programa de Atenção à Saúde Cardiovascular, da Divisão de Saúde da Universidade Federal de Viçosa. Realizou-se avaliação antropométrica, bioquímica e clínica desses indivíduos e adotou-se os critérios do NCEP-ATP III para diagnosticar a síndrome. Utilizou-se os testes do qui-quadrado, oddsratio, t-Student, Mann-Whitney e correlação para análise dos dados. Na amostra estudada, houve predominância do sexo feminino, com as mulheres apresentando valores elevados de gordura corporal e circunferência da cintura. Já os homens apresentaram elevada glicemia de jejum além do acúmulo de gordura abdominal. Constatou-se que indivíduos com excesso de peso apresentaram circunferência da cintura de risco, apresentando também dislipidemia mista. O excesso de gordura corporal foi verificado em indivíduos com hipertensão arterial, hiperglicemia de jejum e IMC elevado. Indivíduos mais velhos apresentaram-se mais vulneráveis à hipertensão arterial e à hiperglicemia.

Atividade quimiopreventiva do ácido fólico quando suplementado continuamente durante as etapas iniciais da hepatocarcinogênese em ratos / Chemoprevention of early rat hepatocarcinogenesis with folic acid supple

A ingestão de folato é inversamente associada com o risco de diversos cânceres. Apesar da deficiência dessa vitamina ser classicamente considerada fator de risco para câncer de fígado, não existem estudos avaliando o efeito da suplementação com ácido fólico (AF) durante as etapas iniciais da hepatocarcinogênese. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da suplementação com AF continuamente durante as etapas de iniciação e seleção/promoção da hepatocarcinogênese em ratos. Os animais receberam diariamente 0,08 mg (grupo AF8) ou 0,16 mg (grupo AF16) de AF/100 g de peso corpóreo ou água (grupo controle [GC]). Após duas semanas de tratamento, todos os animais foram submetidos ao modelo de hepatocarcinogênese do “Hepatócito Resistente” (iniciação com dietilnitrosamina, seleção/promoção com 2-acetilaminofluoreno e hepatectomia parcial a 70%). A eutanásia dos animais ocorreu após 8 semanas de tratamento. Quando comparado ao GC, o grupo AF16, mas não o AF8, apresentou menores nódulos macroscópicos (p<0,05), menor (p<0,05) número de lesões pré-neoplásicas (LPN) persistentes, maior (p<0,05) número de LPN em remodelação, menor (p<0,05) proliferação celular nas LPN persistentes, menos (p<0,05) danos no DNA hepático e tendência (p<0,10) a apresentar menor expressão de c-myc em LPN microdissecadas. Não foram observadas diferenças significativas (p>0,05) entre os grupos experimentais com relação à indução de apoptose nas LPN persistentes e em remodelação bem como no padrão de metilação global do DNA em LPN microdissecadas. Em resumo, a suplementação com AF durante as etapas iniciais da hepatocarcinogênese resultou em atividade quimiopreventiva de forma dose-efeito. Alteração no fenótipo das LPN, inibição de danos no DNA hepático e da expressão de c-myc representam relevantes efeitos celulares e moleculares dessa vitamina.

Dietary intake of folate is inversely associated with the risk of several malignancies. Although folate deficiency is associated with liver cancer, there is no data on folic acid (FA) supplementation during hepatocarcinogenesis. The aim of the present study was to evaluate the effect of FA supplementation during early hepatocarcinogenesis. Rats receiving daily 0.08 mg (FA8 group) or 0.16 mg (FA16 group) of FA/100 g body weight or water (CO group, controls) were used. After a 2 week-treatment, all animals were submitted to the resistant hepatocyte model of hepatocarcinogenesis (initiation with diethylnitrosamine, selection/promotion with 2-acetylaminofluorene and partial hepatectomy). All animals were euthanized after 8 weeks of treatment. When compared to CO group, FA16 group, but not FA8 group, presented: smaller (p < 0.05) macroscopic nodules; reduced (p < 0.05) number of persistent and increased (p < 0.05) number of remodeling preneoplastic lesions (PNL); reduced (p < 0.05) cell proliferation in persistent PNL; decreased (p < 0.05) hepatic DNA damage; and a tendency (p < 0.10) of decreased c-myc expression in microdissected PNL. No differences (p > 0.05) were observed between CO, FA8 and FA16 groups regarding apoptosis in both persistent and remodeling PNL, and global DNA methylation pattern in microdissected PNL. In conclusion, FA supplementation during early hepatocarcinogenesis resulted in a dose-response chemopreventive activity. Reversion of PNL phenotype and inhibition of DNA damage and of c-myc expression represent relevant FA cellular and molecular effects.