Occurrence and molecular characterization of different virulence-associated genes of Cronobacter sakazakii isolates from some foods and dust samples / Ocorrência e caracterização molecular de diferentes genes associados à virulência de Cronobacter sakazakii detectados em alguns alimentos e amostras de poeira

ABSTRACT

ABSTRACT Among the Cronobacter genus, Cronobacter sakazakii is the most common species posing a severe health risk for newborns, infants and children. Some infant formulas, cereal-based foods, and food production environments may be the potential reservoirs of C. sakazakii. This pathogen possesses different virulence factors encoded by different virulence genes. Therefore, characterizing these genes is important for distinguishing pathogenic strains from nonpathogenic ones. The objective of this study was to characterize some virulence genes [OmpA, OmpX, zpx, and Cpa] by real-time polymerase chain reaction (PCR) in C. sakazakii isolates from a total of 120 samples (20 each of milk powder, starch, rice flour, semolina, infant formula and dust samples from food production environments). Overall, 13 isolates (7 from milk powder, 2 rice flour, 1 semolina, and 3 dust) were cultured, identified by bioMérieux API® 20E test kit, and then subjected to real-time PCR application for screening the target virulence-associated genes. Our results showed that all of 13 isolates were positive for the virulence genes OmpA, OmpX, zpx, and Cpa. In summary, our study revealed that some of the analyzed foods and environmental samples were contaminated with pathogenic C. sakazakii with its virulence-associated markers, far above the allowable limit; and therefore, this level of contamination may pose a severe health threat for newborns, infants, and children.

RESUMO

RESUMO Dentre o gênero Cronobacter, Cronobacter sakazakii é a espécie mais comum que representa um grave risco para a saúde dos recém-nascidos, bebês e crianças. Algumas formulas infantis paracrianças, alimentos a base de cereais e locais de produção de alimentos, foram considerados como potenciais locais de contaminação de C. sakazakii. Este patógeno possui diferentes agentes de virulência codificados por diferentes genes de virulência. Portanto, a caracterização dos genes é importante para distinguir as cepas patogênicas das não patogênicas. O objetivo deste estudo foi caracterizar os diferentes genes de virulência [OmpA, OmpX, zpx, and Cpa] em C. sakazakii isolados em um total de 120 amostras (20 de cada uma delas - leite em pó, amido, farinha de arroz, sêmola, comida para bebês e amostras de poeira provenientes dos ambientes de produção de alimentos) por reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR). No total, foram cultivadas 13 estirpes (7 de leite em pó, 2 de farinha de arroz, 1 de sêmola e 3 poeiras) e depois identificadas pelo kit de teste bioMérieux API® 20E. As estirpes identificadas foram submetidas ao PCR em tempo real para caracterizar os genes alvo associados à virulência. Os resultados mostraram que todos os genes C. sakazakii isolados eram patogenicos e positivos às OmpA, OmpX, zpx e Cpa com um padrão de coexistência. Em resumo, o nosso estudo revelou que os alimentos e os ambientes de produção de alimentos analisados ​​constituíam uma ameaça à saúde dos recém-nascidos, bebês e crianças devido à contaminação por C. sakazakii patogênico como marcadores associados à virulência.