A comparative immunohistochemical and quantitative study of the epiligament of the medial collateral and anterior cruciate ligament in rat knee / Estudio inmunohistoquímico y cuantitativo del epiligamento del ligamento colateral medial y cruzado anterior en rodilla de rata

ABSTRACT

SUMMARY: The aim of the present study was to evaluate the importance of the epiligament for the difference in the healing potential of the knee anterior cruciate and medial collateral ligament. To do so, we compared the structure of the anterior cruciate and the medial collateral ligament and evaluated the differences in the expression of collagen types I, III and V in a rat knee. We have also conducted a comparative quantitative analysis of the number of cells per mm2 in the two ligaments. Tissue samples were obtained from the anterior cruciate and medial collateral ligament of 10 knee joints taken from five 8-month-old Wistar rats. We used standard hematoxylin and eosin staining, in addition to immunohistochemical staining with monoclonal antibodies against collagen types I, III and V. A semi-quantitative analysis of the expression was made through ImageJ, while Student's T-test was used for the statistical analysis. Our results showed higher expression of all collagen types in the epiligament, compared to the ligament proper and difference in the expression between the medial collateral and the anterior cruciate ligament in favor of the first. We also reported a statistically significant difference in the number of cells per mm2 between the two ligaments and their epiligaments. Our findings show a higher number of cells and a stronger expression of certain collagen types in the epiligament of the medial collateral compared to the anterior cruciate ligament, which may be related to the difference in their healing potential.

RESUMEN

RESUMEN El objetivo del presente estudio fue evaluar la importancia del epiligamento para la diferencia en el potencial de curación del ligamento cruzado anterior y colateral medial de la rodilla. Comparamos la estructura del ligamento cruzado anterior y el ligamento colateral medial y evaluamos las diferencias en la expresión de los tipos de colágeno I, III y V en una rodilla de rata. También se realizó un análisis cuantitativo comparativo del número de células por mm2 en los dos ligamentos. Se obtuvieron muestras de tejido del ligamento cruzado anterior y colateral medial de 10 articulaciones de rodilla tomadas de cinco ratas Wistar de 8 meses de edad. Utilizamos tinción estándar con hematoxilina y eosina, además de tinción inmunohistoquímica con anticuerpos monoclonales contra colágeno tipo I, III y V. Se realizó un análisis semicuantitativo de la expresión mediante ImageJ, mientras que para el análisis estadístico se utilizó la prueba T de Student. Nuestros resultados mostraron una mayor expresión de todos los tipos de colágeno en el epiligamento, en comparación con el ligamento y una diferencia en la expresión entre el ligamento colateral medial y el ligamento cruzado anterior. También informamos una diferencia estadísticamente significativa en el número de células por mm2 entre los dos ligamentos y sus epiligamentos. Nuestros hallazgos muestran un mayor número de células y una expresión mayor de ciertos tipos de colágeno en el epiligamento colateral medial en comparación con el ligamento cruzado anterior, lo que puede estar relacionado con la diferencia en su potencial de curación.