Expressão gênica de citocinas em pacientes com toxoplasmose sintomática

RESUMO

Este estudo avaliou os níveis de expressão de mRNA de 9 citocinas empacientes com toxoplasmose ocular e disseminada. Foram analisadas 77 amostrasclínicas divididas em 4 Grupos. Foram incluídos no estudo amostras de autopsiasparafinadas de cérebro e pulmão provenientes de 11 pacientes com a coinfecçãotoxoplasmose disseminada e AIDS (Grupo I). As células mononucleares do sangueperiférico (PBMC) foram isoladas de 23 pacientes com toxoplasmose ocular (GrupoII) e 9 indivíduos com toxoplasmose crônica) (Grupo III). A seguir, as amostras dePBMC foram estimuladas in vitro com antígeno de Toxoplasma gondii. Os controlesnegativos (Grupo IV) foram constituídos por 7 amostras de PBMC de indivíduossoronegativos para toxoplasmose e 16 amostras de tecido parafinado (cérebro epulmão) de pacientes negativos para toxoplasmose e HIV. A expressão de mRNApara IFN-γ, TNF-α, TGF-β, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12, IL-17 e, IL-27 foi determinadapor qPCR. Os resultados mostraram um aumento significativo dos níveis deexpressão de mRNA de IL-6 e IL-10 nos pacientes com toxoplasmose ocular.Esses pacientes também apresentaram menor expressão de mRNA de IFN-γ doque os indivíduos crônicos. Nos pacientes com a coinfecção toxoplasmosedisseminada e AIDS foram detectados níveis de expressão de mRNA de TGF-β eIL-6 no cérebro e pulmão. IL-6 foi significativamente menor do que o TGF-β. Até omomento, este é o primeiro estudo a investigar a resposta imune de pacientes comtoxoplasmose sintomática através do perfil de expressão de mRNA das citocinasde interesse.

ABSTRACT

This study evaluated levels of mRNA expression of 9 cytokines from patientswith ocular and disseminated toxoplasmosis. A total of 77 clinical samples wasanalyzed and they were divided into 4 Groups. The Group I was constituted ofautopsy samples (cerebral and pulmonary paraffin tissues) from 11 patients withdisseminated toxoplasmosis and AIDS. The peripheral blood mononuclear cells(PBMC) were isolated from 23 patients with ocular toxoplasmosis (Group II) and 9individuals with chronic toxoplasmosis (Group III). Next, PBMC samples werestimulated with in vitro with a crude Toxoplasma gondii antigen. Negative controls(Group IV) consisted of 7 PBMC from patients seronegative for toxoplasmosis and16 paraffin tissue samples (brain and lung) from patients negative for toxoplasmosisand HIV. mRNA expression for IFN-γ, TNF-α, TGF-β, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12, IL-17and IL-27 was determined by qPCR. The results showed a significant increase inlevels of mRNA expression for IL-6, IL-10 and TGB-β in patients with oculartoxoplasmosis. These patients also had lower mRNA expression for IFN-γ thanthose chronic individuals. In patients with disseminated toxoplasmosis and AIDS,levels of mRNA expression for TGF-β and IL-6 were detected in the brain and lung.IL-6 was significantly lower than TGF-β. To date, this is the first study to investigatean immune response of patients with symptomatic toxoplasmosis through themRNA expression profile of the cytokines of interest.