In vitro culture of Neoechinorhynchus buttnerae (Acanthocephala: Neoechinorhynchidae): Influence of temperature and culture media / Cultivo in vitro de Neoechinorhynchus buttnerae (Acanthocephala: Neoechinorhynchidae): influência da temperatura e dos meios de cultura

ABSTRACT

Abstract Infection by the acantocephalan Neoechinorhynchus buttnerae is considered one of most important concerns for tambaqui fish (Colossoma macropomum ) production. Treatment strategies have been the focus of several in vivo studies; however, few studies have been undertaken on in vitro protocols for parasite maintenance. The aim of the present study was to develop the best in vitro culture condition for N. buttnerae to ensure its survival and adaptation out of the host to allow for the testing of substances to be used to control the parasite. To achieve this, parasites were collected from naturally infected fish and distributed in 6-well culture plates under the following treatments in triplicate 0.9% NaCl, sterile tank water, L-15 Leibovitz culture medium, L-15 Leibovitz + agar 2% culture medium, RPMI 1640 culture medium, and RPMI 1640 + agar 2% culture medium. The plates containing the parasites were maintained at 24 °C, 28 °C, and 32 °C. The RPMI 1640 + agar 2% culture medium showed the best survival of 24 days at 24 °C. No body alterations such as swollen parasites, body deformation, dehydration and hardening were observed in the RPMI 1640 + 2% culture medium.

RESUMO

Resumo A infecção pelo acantocéfalo Neoechinorhynchus buttnerae é considerada uma das preocupações mais importantes para produção de tambaqui (Colossoma macropomum). Estratégias de tratamento têm sido o foco de vários estudos in vivo ; entretanto, poucos estudos foram realizados em protocolos in vitro para manutenção do parasito. O objetivo deste estudo foi desenvolver a melhor condição de cultura in vitro para N. buttnerae para garantir sua sobrevivência e adaptação fora do hospedeiro, a ser utilizado para teste com substâncias no controle do parasito. Para isso, os parasitos foram coletados de peixes naturalmente infectados e distribuídos em placas de cultura de 6 poços sob os seguintes tratamentos em triplicata 0.9% NaCl, água estéril do tanque, meio de cultura L-15 Leibovitz, meio de cultura L-15 Leibovitz + ágar 2%, meio de cultura RPMI 1640, e meio de cultura RPMI 1640 + ágar 2%. As placas contendo os parasitos foram mantidos a 24 °C, 28 °C, e 32 °C. O meio de cultura RPMI 1640 + ágar 2% apresentou a melhor sobrevivência de 24 dias a 24 °C. Nenhuma alteração corporal tais como inchaço dos parasitos, deformação corporal, desidratação e endurecimento foram observados no meio de cultura RPMI 1640 + ágar 2%.