Resistencia enzimática a betalactámicos en el género Proteus y evaluación de los fenotipos y genotipos de resistencia a cefalosporinas de tercera y cuarta generación en Proteus mirabilis / Enzymatic resistance to betalactam antibiotics within the genus Proteus and evaluation of third and fourth generation cephalosporins resistance phenotypes and genotypes within Proteus mirabilis

RESUMEN

INTRODUCCIÓN. El objetivo de este trabajo fue evaluar la resistencia a betalactámicos en el género Proteusy caracterizar las betalactamasas responsables de dicha resistencia. MÉTODOS. Se analizaron 99 cepas (87 P. mirabilis;10 P. vulgaris, y 2, P. penneri) aisladas de pacientes atendidos en un Hospital Universitario. Los ensayos de susceptibilidad a antibióticos se realizaron de acuerdo con las recomendaciones del National Committee for Clinical Laboratory Standards. La presencia de betalactamasas de espectro extendido (BLEE)fue inferida por el método de difusión de doble disco y por la concentración inhibitoria mínima (CIM) de cefalosporinas de tercera y cuarta generación solas y en presencia de ácido clavulánico. Se estimó el punto isoeléctrico (pI) por isoelectro-enfoque y la presencia de los genes codificantes se confirmó por reacción en cadena de la polimerasa (PCR).RESULTADOS. Una betalactamasa de amplio espectro fue detectada en aquellos aislamientos resistentes apenicilinas y cefalosporinas de primera generación (28%),mientras que la enzima CTX-M-2 fue detectada en los aislamientos de P. mirabilis resistentes a cefalosporinas de tercera y cuarta generación (18%). Uno de los P. vulgaris presentó sensibilidad disminuida a cefotaxima debido a una enzima de pI 7,4, mientras que la resistencia a cefotaxima en un P. penneri fue relacionada con una enzima de pI 6,8. Ambas enzimas fueron activas sobre cefotaxima (1.000 mg/l) en el ensayo iodométrico. CONCLUSIÓN. La betalactamasa de amplio espectro en el género Proteus fue TEM-1 mientras queCTX-M-2 fue la BLEE responsable de la resistencia a cefalosporinas de tercera y cuarta generación en P. mirabilis. En P. vulgaris y P. penneri esta resistencia se asoció a la hiperproducción de la betalactamasa cromosómica (AU)

ABSTRACT

INTRODUCTION. The aim of this study was to evaluate betalactam resistance within the genus Proteus and characterize the betalactamases responsible for this resistance. METHODS. We analyzed 99 strains (87, P. mirabilis;10 P. vulgaris, and 2, P. penneri) isolated from patients at one University Hospital. Antibiotic susceptibility tests were performed according to NCCLS recommendations. Presence of extended spectrum betalactamases (ESBL)was inferred by both double disk diffusion tests andminimum inhibitory concentration (MIC) of third and fourth generation cephalosporins alone and in the presence of clavulanic acid. Isoelectric points (pI)of the enzymes were estimated by isoelectrofocusing and the presence of the encoding genes was confirmed by polymerase chain reaction (PCR).RESULTS. A broad spectrum betalactamase could be detected in those isolates (28%) resistant to penicillin and first generation cephalosporins while CTX-M-2 enzyme could be detected in P. mirabilis isolates resistant to third and fourth generation cephalosporins (18%). One of the P. vulgaris displayed reduced susceptibility to cefotaxime due to an enzyme of pI 7.4, while resistance to cefotaximein one P. penneri was related to an enzyme of pI 6.8. Both enzymes were active on cefotaxime (1,000 mg/l)in the iodometric assay. CONCLUSION. The broad extended spectrum betalactamase with in genus Proteus was TEM-1, while CTX-M-2 was the ESBL responsible for the third and fourth generation cephalosporins in P. mirabilis. In P. vulgarisand P. penneri this resistance was associated with the hyperproduction of the chromosomal encoded betalactamase (AU)