Expresion del receptor de esteroides y xenobioticos (SXR) y del gen de multirresistencia drogas (MDR1) y de los polimorfismos de las enzimas GSTs, SULTs y CYP en tumores vesicales profundos, analisis de su expresion y correlación con otros factores pronósticos / Steroid and xenobiotic receptor (SXR), multidrug resistance gene (MDR1) and GSTs, SULTs and CYP polymorphism expression in invasive bladder cancer, analysis of their expression and correlation with other prognostic factors

RESUMEN

Introducción: El receptor de esteroides y xenobióticos SXR se ha demostrado su activación por parte de numerosos medicamentos, incluidos potentes inductores del citocromo P450, como la rifampicina y el cotrimazol. La función del SXR es bien conocida, y consiste en regular de manera positiva la trascripción del citocromo P450 3A4 (CYP3A4) y el gen de multirresistencia a drogas (multidrug resistance gene) MDR1, se considera una llave clave en el mecanismo regulador del metabolismo de los xenobióticos encontrándose involucrado en todas las fases de detoxificación Múltiples enzimas involucradas en el metabolismo y la degradación de hidrocarburos policíclicos aromáticos (PAH) son polimórficas en humanos, incluyendo la glutation S-transferasa (GSTs), N-acetiltransferasa (NATs), sulfotransferas (SULTs)1A1 y el citocromo p450 (CYP)1B1. Objetivos: Los objetivos que nos hemos planteado son los siguientes 1. Analizar la expresión del factor de trascripción SXR y del MDR1 en vejiga mediante RT-PCR en tiempo real, tanto en vejiga tumoral como vejiga normal. 2. Analizar la relación de los factores clínicos y patológicos con la expresión del SXR y del MDR1. 3. Analizar la expresión de los polimorfismos de CYP1B1, GSTM1 GSTT1 y SULT1A1, y su correlación con distintos factores clínico patológicos y moleculares. Material y Métodos: De manera prospectiva se calculó un tamaño muestral necesario para este estudio. Se incluyeron 67 pacientes de dos instituciones distintas (Hospital Universitario Miguel Servet (49 HUMS) y Clínica Universitaria de Navarra (18 CUN)), diagnosticados de cáncer vesical infiltrante y tratados mediante cistectomía radical, se le realizó la determinación de la expresión de SXR y MDR1 mediante PCR cuantitativa en tiempo real, así como de los polimorfismos CYP1B1, GSTM1 GSTT1 y SULT1A1 mediante RFLP (restricción de la longitud del fragmento del polimorfismo). Se correlaciona mediante tablas de contingencia la correlación con el resto de los factores pronósticos. Resultados: La media de seguimiento de los pacientes fue de 23,7 meses, con una mediana de 28,26 meses. De los 67 pacientes estudiados, 31 pacientes (46,3%) presentaron progresión de la enfermedad, bien en forma de recidiva local, metástasis a distancia o ambos, con un tiempo medio a recidiva de 12,4 meses, mediana de 10 meses, con un rango de 1,1 mes a 31,9 meses. 36 pacientes (53,7%) no presentaron evidencia de progresión de la enfermedad. El receptor de esteroides y xenobióticos SXR así como el gen de multirresistenia a drogas (Multidrug resistance gene (MDR1)), se expresan en vejiga normal (0,94ΔCt y 0,94ΔCt) y en vejiga tumoral de la pieza de cistectomía (1,09 ΔCt y 0,45 ΔCt). Hemos analizado su expresión de manera cuantitativa y de manera cualitativa. La expresión de SXR se correlaciona con la presencia de carcinoma in situ (p=0,024), infiltración vasculo-linfática (p=0,05) mientras que MDR1 se correlaciona con la presencia de infiltración vasculo linfática (p=0,05) A su vez ambos la presencia de ambos factores se correlaciona entre ellos (p=0,011) Los polimorfismos CYP1B1, GSTM1, GSTT1 y SULT1A1, se expresan en vejiga pero su expresión no guarda correlación con ningún factor pronóstico Conclusiones: El SXR y el MDR1 se expresan tanto en vejiga normal y tumoral. Y que dicha expresión guarda una correlación con factores pronósticos con influencia en la supervivencia descritas en la literatura

ABSTRACT

Introduction: Steroid and Xenobiotic Receptor (SXR) has demonstrated its activation by numerous drugs, including cytochrome P450 potent inducers like rifampicina or cotrimazol. The role of SXR is well known, and lies regulating in a positive manner cytochrome P450 3A4 (CYP3A4) transcription and the multidrug resistance gene (MDR1), it’s considered a key in the xenobiotic detoxification mechanism, being involved in all phases of the detoxification process. Enzymes involved in Policyclic Aromatic hidrocarbures (PAH) metabolism and degradation are polymorphic in humans, including glutation S-transferases (GSTs), N-acetiltransferases (NATs), sulfotransferases (SULTs)1A1 and cytochrome p450 (CYP)1B1. Objectives: The objectives we’ve planned are 1. Analyze the expression of the transcription factor SXR and MDR1 in bladder by means of RT-PCR real time, both in normal bladder and in tumoral bladder. 2. Analyze the relation between clinical and pathological factors with the expression of SXR and MDR1. 3. Analyze the expression of the polymorphims CYP1B1, GSTM1 GSTT1 and SULT1A1 and their correlation with different clinic-pathological and molecular factors. Material and Methods: In a prospective way the size of the sample was estimated. In 67 patients from two institutions (Hospital Universitario Miguel Servet (49 HUMS) and Clinica Universitaria de Navarra (18 CUN)), diagnosed of invasive bladder cancer and treated by means of radical cystectomy, were determined the expression of both SXR and MDR1 by means of real time PCR, as well as the polymorphisms CYP1B1, GSTM1 GSTT1 y SULT1A1 by means of RFLP (Restriction fragment length polymorphism). Correlations with other prognostic factors by contingency tables were performed. Results: Average follow up was 23,7 months with a median of 28,26 months. Of the 67 patients studied, 31 patients (46,3) presented disease progression, in form of local recurrence or in distant metastasis or both. With a average time to progression of 12,4 months and a median of 10 months, with a range of 1,1 month to 31,9 month. 36 patients (53,7%) did not have any evidence of disease progression during follow up. The Steroid and Xenobiotic Receptor as well as the Multidrug Resistance Gene (MDR1) are expressed in both normal bladder (0,94ΔCt y 0,94ΔCt) and tumoral bladder in the cystectomy specimen(1,09 ΔCt y 0,45 ΔCt). We’ve analyzed their expression in a quantitative manner and in a qualitative manner. The expression of SXR correlates with the presence of ca. in situ (p=0,024), vasculo-lymphatic invasion (p=0,05) mean while MDR1 correlates with presence of vasculo-lymphatic invasion (p=0,05) Both factors are correlate between each others (p=0,011). Polymorphisms CYP1B1, GSTM1, GSTT1 and SULT1A1, are expressed in these patients but their expression doesn’t correlates with any prognostic factor Conclusions: Both SXR and MDR1 are expressed in normal bladder as well as in tumoral bladder. And their expression correlates with different prognostic factors with influence in the survival described in the literature