Immunoglobulin E Reactivity and Allergenic Potency of Morus papyrifera (Paper Mulberry) Pollen

RESUMEN

Antecedentes El polen de la morera del papel se considera uno de los aeroalérgenos más relevantes en Pakistán, cuyas propiedades alergénicas no han sido estudiadas hasta el momento actual. Objetivo: El objetivo de este estudio fue caracterizar el perfil de sensibilización de los pacientes alérgicos a las proteínas de este polen que contribuye a la polinosis en Pakistán. Métodos: La extracción de las proteínas de este polen fue realizada mediante diferentes protocolos. La unión de la IgE a proteínas del polen de la morera del papel, perteneciente a la familia de las moráceas fue determinada mediante InmunoCAP e Inmunoblotting utilizando suero de 29 pacientes alérgicos a este polen con prueba cutánea positiva. Se realizó test de liberación de histamina in vitro para determinar la potencia alergénica de los extractos de polen y de un alérgeno parcialmente purificado. Se secuenciaron la N-terminal y MALDI-TOF/TOF para identificar la proteína. Resultados: En cuanto a los resultados obtenidos se confirmó la sensibilización a dicho polen mediante ImmunoCAP frente a polen de Morus alba en 23 de los 29 pacientes alérgicos al polen de morera del papel. Una proteína de 10 kDa del extracto de dicho polen se consideró como el alérgeno mayor sobre el resto de las proteínas reactivas a la IgE. El suero del 79% de los pacientes reaccionó con este alérgeno de 10 kDa, el cual mostró capacidad para liberar histamina in vitro en 3 de 4 pacientes. La secuenciación N-terminal y MALDI-TOF/TOF arrojó una secuencia de aminoácidos con ausencia de homología con otras proteínas conocidas. Conclusiones: En conclusión, los pacientes alérgicos al polen de morera del papel están sensibilizados a múltiples alérgenos de este polen. Se identifica una nueva proteína de 10 kDa como alérgeno mayoritario que deberá ser investigado con fines diagnósticos y terapéuticos (AU)

ABSTRACT

Background: Paper mulberry (Morus papyrifera) pollen is considered to be one of the most clinically relevant aeroallergens in Pakistan. To date, the allergenicity of the pollen has not been investigated. Objective: To characterize the sensitization profile of mulberry-allergic patients and the proteins of paper mulberry pollen contributing to pollinosis in the Pakistani population. Methods: Proteins were extracted from mulberry pollen using different protocols. Immunoglobulin (Ig) E binding proteins to mulberry pollen was determined by ImmunoCAP testing and immunoblotting using sera from 29 mulberry pollen–allergic patients with positive skin prick test results to mulberry pollen antigens. The histamine release assay was performed in vitro to determine the allergenic potency of pollen extracts and a partially purified mulberry pollen allergen. The protein was identified using N-terminal sequencing and matrix-assisted laser desorption/ionization–time of flight spectrometry (MALDI-TOF/TOF). Results: IgE sensitization to mulberry pollen was confirmed by positive ImmunoCAP results to pollen from Morus alba (white mulberry) in 23 out of 29 mulberry pollen–allergic patients. A 10-kDa protein from the paper mulberry pollen extract was considered a major allergen, along with additional IgE-reactive proteins. Sera from 79% of the patients reacted to the 10-kDa allergen, which showed substantial capacity to trigger histamine release in 3 out of 4 patients. N-terminal sequencing and MALDI-TOF/TOF yielded an amino acid sequence with no homology to known proteins. Conclusions: Mulberry-allergic patients are sensitized to multiple mulberry pollen allergens. We identified a novel 10-kDa protein that was a major allergen and should be further investigated for diagnostic and therapeutic purposes (AU)