El suero de pacientes con enfermedad arterial periférica activa el sistema inmunitario innato a través de los receptores Toll-Like 4 de las células endoteliales / The serum of patients with peripheral arterial disease activates the inate immune system through Toll-Like 4 receptors of the endothelial cells

RESUMEN

Introducción: La activación de los receptores de la inmunidad innata induce un viraje fenotípico proinflamatorio de la célula endotelial provocando la síntesis de moléculas de adhesión y la liberación de citocinas por el endotelio. Objetivos: Nuestro objetivo es determinar la activación del sistema inmunitario innato a través de los receptores Toll-Like 4 (TLR4) tras la exposición de células endoteliales humanas previamente sanas a suero humano de pacientes con enfermedad arterial periférica. Pacientes y métodos: Estudio experimental traslacional. Se obtuvo suero de 30 pacientes y de 15 sujetos sanos pareados por edad y sexo. Se determinaron los niveles de proteína C reactiva (hsPCR). Las muestras de suero se incubaron en cultivo celular de endotelio de aorta humana. Se analizó la expresión génica de los receptores TLR4 en el cultivo tras su estimulación con suero. Resultados: Los niveles de hsPCR fueron mayores en pacientes que en sujetos sanos (0,92 ± 0,4 vs. 0,46 ± 0,04 log10-mg/dl, p < 0,0001) y en pacientes con isquemia crítica frente a pacientes claudicantes (1,27 ± 0,4 vs. 0,74 ± 0,2 log10-mg/dl, p = 0,01). La expresión de TLR4 fue mayor tras la exposición del cultivo al suero de pacientes que tras la exposición al suero de sujetos sanos (X10-log10-QR 1,59 ± 0,4 vs. 1,09 ± 0,3, p < 0,0001) sin diferencias en función de la situación clínica (X10-log10-QR 1,81 ± 0,5 [isquemia crítica] vs. 1,50 ± 0,4 [claudicación intermitente], p = 0,16). Conclusiones: El suero de pacientes con enfermedad arterial periférica induce una transformación genotípica proaterosclerótica de la célula endotelial a través de los receptores de membrana TLR4 de la inmunidad innata (AU)

ABSTRACT

Introduction: The activation of the innate immunity induces a pro-inflammatory phenotypic shift of endothelial cells triggering the synthesis of adhesion molecules and the release of cytokine factors by the endothelium. Objectives: The aim of the study is to determine the activation of the innate immune system through the «Toll-Like 4» receptor (TLR4) after the exposure of previously healthy human endothelial cells to serum of peripheral arterial disease patients. Patients and methods: Experimental translational study. Serum was obtained from 30 patients and 15 healthy subjects age and sex matched. The serum levels of C-reactive protein (hsCRP) were measured. All samples were incubated in cell culture of human aortic endothelial cells. The genomic expression of TLR4 receptor by cell culture after serum stimulation was analysed. Results: Levels of hsCRP were higher in patients than in healthy subjects (0.92 ± 0.4 vs. 0.46 ± 0.04 log10-mg/dl P < 0.0001), and in critical limb ischemia patients than in claudication patients (1.27 ± 0.4 vs. 0.74 ± 0.2 log10-mg/dl, P = 0.01). The expression of TLR4 was higher after the exposure of cell culture to patient's serum than after the exposure to healthy subjects serum (X10-log10-RQ 1.59 ± 0,4 vs. 1.09 ± 0.3, P < .0001). There were no differences of TLR4 expression according to clinical severity (X10-log10-RQ 1.81 ± 0,5 [critical limb ischemia] vs. 1.50 ± 0,4 [intermittent claudication], P = 0.16). Conclusions: The serum of peripheral arterial disease patients induces a genotypic pro-atherosclerotic shift of endothelial cells through TLR4 membrane receptors of the innate immunity (AU)