Evaluación de un inmunoensayo para la medida de anticuerpos anti-tiroglobulina y anti-tiroperoxidasa / Evaluation of an immunoassay for the antithyroglobulin and antithyroperoxidase measuring

RESUMEN

Introducción: La medición de los anticuerpos frente a tiroglobulina (ATG) y peroxidasa tiroidea (ATPO) es de interés para identificar pacientes con tiroiditis autoinmune.Este estudio pretende evaluar un inmunoensayo comercial de electroquimioluminiscencia para ATG y ATPO, estudiando la imprecisión, la linealidad, sensibilidad analítica, evaluación del arrastre, e influencia de interferentes endógenos.Material y métodos: La imprecisión se evaluó usando tres soluciones con diferentes concentraciones de analitos, analizándose 20 veces en la misma serie analítica y durante 20 días consecutivos, calculando el coeficiente de variación. Para el estudio de linealidad se combinaron una muestra con elevada concentración de analitos y un diluyente, obteniéndose concentraciones intermedias que se analizaron por triplicado. El límite de detección se calculó haciendo 20 determinaciones de una muestra de diluyente. El arrastre se evaluó analizando una muestra con alta concentración de anticuerpos seguida por otra con concentraciones muy bajas. El estudio de interferencias se realizó añadiendo a mezclas de suero hemolizado, Intralipid 30% y bilirrubina.Resultados: Las imprecisiones totales obtenidas (%) fueron 26,63, 9,53, y 14,9 para ATG y 21,19, 14,82 y 5,77 para ATPO. La linealidad queda definida por las ecuaciones de regresión Y=6.61+1.01X(ATG) y Y=16.37+0.97X(ATPO). El límite de detección fue 17,17 para ATG y 5 para ATPO. El arrastre no fue significativo. La hemólisis produjo interferencia significativa en ambos ensayos.Conclusiones: Las imprecisiones obtenidas son comparables a las declaradas por el fabricante. La sensibilidad analítica cumple las especificaciones del fabricante. El comportamiento de ambos ensayos es lineal y no se halla arrastre significativo. La hemólisis interfiere ambos ensayos. (AU)

ABSTRACT

Introduction: The measuring of antibodies against thyroglobulin (ATG) and thyroperoxydase (ATPO) is useful for identifying patients with autoimmunethyroiditis. This study tries to assess an electrochemiluminescent immunoassay for ATG and ATPO, evaluating imprecision, linearity, analytic sensitivity, carry-over and the influence of endogenous interferents.Material and methods: Imprecision was assessed using three pools with different analytes concentrations, performing within run and between run 20 times. Fort the linearity study a sample containing high analyte concentration and a solvent devoid of analyte were combined, obtaining intermediates concentrations, which were analyzed by triplicate. The limit of detection was calculated analyzing 20 times a sample devoid of analyte. Carry-over was evaluated analyzing a sample with a high antibody concentration followed by other one containing low antibody concentration. The interference study was carried-out adding hemolyzed, Intralipid 30% and bilirubin into sera pool.Results: Total imprecision obtained (%) were 26.63, 9.53, and 14.9 for ATG and 21.19, 14.82, and 5.77 for ATPO. Linearity was defined for the following regression equations Y=6.61+1.01X (ATG) and, Y=16.37+0.97X (ATPO). The limit of detection was 17.17 for ATG and 5 for ATPO. Carry-over was not significant. Hemolysis caused significant interference in both assays.Conclusions: Imprecision obtained were similar to the manufacturer declared ones. Analytic sensibility complies the manufacturer’s specifications. The behavior of both assays was linear and significant carry-over was not found. Hemolysis interferes in both assays. (AU)