Evaluación de diferentes muestras clínicas y líneas celulares en el aislamiento de enterovirus en pacientes pediátricos / Evaluation of different clinical samples and cell lines in the isolation of enterovirus in pediatric patients

RESUMEN

Fundamento Evaluar prospectivamente la eficacia de diferentes muestras clínicas y líneas celulares en el aislamiento de Enterovirus en pacientes pediátricos. Métodos: Durante el período comprendido entre julio de 1997 y julio de 1999 se han analizado muestras procedentes de 102 lactantes (< 2 años) con un síndrome febril de etiología desconocida. Todas las muestras tras su decontaminación fueron sembradas en las líneas celulares MRC-5, Hep-2 y Vero mediante el sistema shell-vial . A los 2-3 días de incubación a 37 °C las monocapas fueron reveladas con un anticuerpo monoclonal anti-VP1, siendo las cepas posteriormente identificadas como Poliovirus, ECHO-virus y Coxsackie mediante anticuerpos específicos. Resultados: Se han estudiado 96 muestras (45 de frotis faríngeo, 28 de heces, 13 de líquido cefalorraquídeo, 5 de sangre, 4 de orina y un lavado broncoalveolar). En 48 pacientes (47 por ciento) se aisló algún Enterovirus, correspondiendo a 60 muestras (62,5 por ciento). Se aislaron Enterovirus en el 75,5 por ciento de los frotis faríngeos, el 71,4 por ciento de las heces, el 30,7 por ciento de los líquidos cefalorraquídeos, una en sangre (20 por ciento) y en el lavado broncoalveolar. En 28 pacientes se disponía de forma simultánea de un frotis faríngeo y de heces; en este grupo, el empleo simultáneo de ambas permitió el diagnóstico en 26 casos (92,8 por ciento). De los 60 Enterovirus aislados, 59 (98,3 por ciento) lo fueron en la línea MRC-5, 23 (38,3 por ciento) en la Hep-2 y 14 (23,3 por ciento) en la Vero, observándose diferencias significativas entre la MRC-5 y las restantes. De los 60 Enterovirus aislados, 30 (50 por ciento) fueron identificados como ECHO-virus, 15 (25 por ciento) como Poliovirus vacunal, 12 (20 por ciento) no pudieron ser tipificados y 3 (5 por ciento) no crecieron. La línea MRC-5 ha resultado ser significativamente superior para el aislamiento de cada uno de los diferentes tipos de Enterovirus. Conclusiones: Para la obtención del máximo rendimiento diagnóstico frente a la sospecha de infección por Enterovirus es necesario utilizar varias muestras, preferentemente las más cercanas al foco infectivo (líquido cefalorraquídeo y sangre). La línea celular MRC-5 ha resultado ser la más eficaz en el aislamiento de los Enterovirus independientemente del tipo de muestra o del género vírico. El método de shell-vial permite el aislamiento y la identificación de los Enterovirus aislados en muestras clínicas (AU)