Calidad del plasma rico en plaquetas: estudio de la activación plaquetaria / Platelet-rich plasma quality: a study on platelet activation

RESUMEN

Objetivo. El plasma rico en plaquetas (PRP) es utilizado de formacada vez más frecuente en técnicas quirúrgicas de regeneración tisular. Noobstante, el procesamiento de la sangre hasta obtener PRP puede desencadenarla activación prematura de las plaquetas y la pérdida de los factoresbioactivos. En este trabajo estudiamos la calidad de los concentradosde plaquetas obtenidos siguiendo la técnica de doble centrifugación entubo. Método. Se someten 50 ml de sangre a una primera centrifugacióna 200g 10 minutos, se recoge el sobrenadante y se centrifuga a 700g 15minutos. Posteriormente, tras eliminar las 2/3 partes del plasma, se resuspendenlas plaquetas y se analiza el grado de enriquecimiento, el estadode activación y la reserva funcional de las plaquetas. Resultados. El enriquecimientoen plaquetas del PRP fue de 364±177% (n=45) respecto delos niveles presentes en sangre total. Mediante el estudio de la expresiónde CD62 por citometría de flujo se determinó el porcentaje de plaquetasactivadas en las muestras de 8 donantes. Mientras que en la sangre no procesadase detectó un 2,7% de plaquetas activadas, tras la preparacióndel PRP éste era sólo de 3,6%, aumentando hasta el 16% en el concentradoalmacenado toda la noche a 22º C. Tras la estimulación con trombinael porcentaje de plaquetas activadas fue de 96,2%. Conclusión. Esteprotocolo de preparación de PRP no produce una activación significativade las plaquetas. La respuesta a la estimulación con trombina de los concentradosindica un buen estado de reserva plaquetaria(AU)

ABSTRACT

Objective. Platelet Rich Plasma (PRP) is an autologouspreparation currently used in oral and maxillofacial reconstructivesurgery. Blood collection and preparation of platelet concentratesmay lead to platelet activation and the premature loss of theirgranular load. In this study, we have analyzed the quality of thePRP obtained from a small volume of whole blood through a doublecentrifugation technique, so called “tube method”. Design. Weobtained 50 ml of whole blood from 45 patients and centrifugedat 200 g for 10 minutes. The plasma and buffy-coat were collectedand we then centrifuged at 700g for 15 minutes. The pellet wasresuspended after discarding 2/3 of the plasma. The plateletconcentration, platelet activation and the functional response tothrombin were analyzed in these samples. Results. By using thismethod of PRP preparation, we obtained a 364 ± 177% increasein platelet concentration in comparison with whole blood levels.Platelet activation, measured by flow cytometry analysis of CD62expression, was of 2.7% in unprocessed blood and 3.6% in freshPRP. This figure increased to 16% in PRP samples after overnightstorage at room temperature. A percentage of 96% of plateletsshowed activation in PRP samples after thrombin stimulation.Conclusion. Our results show that platelets contained in PRPconcentrates obtained by this method are not significantly activated.A good functional platelet reserve is preserved through the procedure,since platelets maintained a satisfactory response to thrombin afterPRP preparation(AU)