Cell activation state influences the modulation of HLA-DR surface expression on human monocytes/macrophages by parenteral fish oil lipid emulsion / El estado de activación celular influye en la modulación de la expresión del HLA-DR sobre la superficie de monocitos/macrófagos humanos por una emulsión lipídica parenteral de aceite de pescado

ABSTRACT

Abnormal surface expression of HLA-DR by leukocytes is associated with a poor prognosis in critical care patients. Critical care patients often receive total parenteral nutrition with lipid emulsion (LE). In this study we evaluated the influence of fish oil LE (FO) on human monocyte/macrophage (Mφ) expression of surface HLA-DR under distinct activation states. Mononuclear leukocytes from the peripheral blood of healthy volunteers (n=18) were cultured for 24 hours without LE (control) or with 3 different concentrations (0.1, 0.25, and 0.5%) of the follow LE a) pure FO b) FO in association (11-v/v) with LE composed of 50% medium-chain trygliceride and 50% soybean oil (MCTSO), and c) pure MCTSO. The leukocytes were also submitted to different cell activation states, as determinate by addition time no INF-γ addition, 18 hours before, or at the time of LE addition. HLA-DR expression on Mφ surface was evaluated by flow cytometry using specific monoclonal antibodies. In relation to controls (for 0.1%, 0.25%, and 0.5% 100) FO decreased the expression of HLA-DR when added alone [in simultaneously-activated Mφ, for 0.1% 70 (59 ± 73); for 0.25% 51 (48 ± 56); and for 0.5% 52.5 (50 ± 58)] or in association with MCTSO [in simultaneously-activated Mφ, for 0.1% 50.5 (47 ± 61); for 25% 49 (45 ± 52); and for 0.5% 51 (44 ± 54) and in previously-activated Mf, for 1.0% 63 (44 ± 88); for 0.25% 70 (41 ± 88); and for 0.5% 59.5 (39 ± 79)] in culture medium (Friedman p < 0.05). In relation to controls (for 0.1%, 0.25%, and 0.5% 100), FO did not influence the expression of these molecules on non-activated Mφ [for 0.1% 87.5 (75±93); for 0.25% 111 (98 ± 118); and for 0.5% 101.5 (84 ± 113)]. Results show that parenteral FO modulates the expression of HLA-DR on human Mφ surface accordingly to leukocyte activation state. Further clinical studies evaluating the ideal moment of fish oil LE infusion to modulate leukocyte functions may contribute to a better understanding of its immune modulatory properties (AU)

RESUMEN

La expresión anómala del HLA-DR sobre la superficie de los leucocitos se asocia con un pronóstico sombrío en pacientes críticos. A menudo, estos pacientes reciben nutrición parenteral total con una emulsión lipídica (EL). En este estudio, evaluamos la influencia de una EL de aceite de pescado (AP) en la expresión del HLA-DR en la superficie de monocitos/macrófagos humanos (MΦ) bajo diferentes estados de activación. Se cultivaron leucocitos mononucleares de sangre periférica de voluntarios sanos (n = 18) durante 24 horas sin la EL (control) o con 3 concentraciones distintas (0,1, 0,25 y 0,5%) de la siguiente EL a) AP puro b) AP en asociación con EL (11 v/v) compuesta de 50% de triglicéridos de cadena media y 50% de aceite de soja (TCMAS), y c) TCMAS puro. También sometimos a los leucocitos a diferentes estados de activación celular, determinado por INF-γ tiempo de adición no INF-γ adición 18 horas antes, o en el momento de añadir la EL. La expresión del HLA-DR sobre la superficie de los MΦ se evaluó mediante citometría de flujo utilizando anticuerpos monoclonales específicos. En relación con los controles (para 0,1%, 0,25% y 0,5% 100) el AP disminuyó la expresión de HLA-DR cuando se añadía solo [en MΦ activados simultáneamente, para 0,1% 70 (59 ± 73); para 0,25% 51 (48 ± 56); y para 0,5% 52.5 (50 ± 58)] o en asociación con TCMAS [en MΦ activados simultáneamente para 0,1% 50,5 (47 ± 61); para 0,25%(45 ± 52); y para 0,5% 51 (44 ± 54) y en MΦ previamente activados para 0,1% 63 (44 ± 88); para 0,25% 70 (41 ± 88); y para 0,5% 59,5 (39 ± 79)] en el medio de cultivo (Friedman p < 0,05). Con respecto a los controles, (para 0,1%, 0,25% y 0,5% 100), el AP no influyó en la expresión de estas moléculas en MΦ no activados [para 0,1% 87,5 (75 ± 93); para 0,25% 111 (98 ± 118); y para 0,5% 101,5 (84 ± 113)]. Los resultados muestran que el AP parenteral modula la expresión del HLA-DR sobre la superficie de los MΦ humanos en función del estado de activación leucocitaria. Estudios clínicos adicionales que evalúen el momento idóneo de añadir la infusión de EL con aceite de pescado para modular las funciones leucocitarias podrían contribuir a entender mejor sus propiedades inmunomoduladoras (AU)