A avaliaçäo da adesäo, migraçäo e proliferaçäo da linhagem celular CHO=K1 frente à mutante CHO-745 deficiente na biossíntese de glicosaminoglicanos sulfatados: amostra que a integrina alfa-5beta-1 é um proteoglicano envolvido na migraçäo celular / The role of cell surface glycosaminoglycans in cell division: adhesion and proliferation of CHO cells and CHO-K1 cells and a mutant CHO-745 which is deficient in syntesis of proteoglycans due to lack of activity of xylosyl transferase

RESUMO

Na presente tese examinamos o papel dos proteoglicanos e glicosaminoglicanos na divisao celular adesao e proliferaçao de células em cultura CHO ("chinese hamster ovary") e sua mutante CHO-745 que é deficiente na síntese de glicosaminoglicanos devido a falta da enzima xilosiltransferase. Usando diferentes quantidades de células (selvagem e mutante) pouca adesao pode ser observada na presença de laminina e colágeno tipo I. Entretanto quando fibronectina e vitronectina foram usadas como substratos houve um aumento de adesao dos dois tipos celulares. Sómente a CHO selvagem mostrou adesao em funçao do tempo sobre colágeno tipo IV. Estes resultados sugerem que as duas linhagens celulares possuem diferentes propriedades de adesao. Ensaios de adesao usando colágeno tipo IV com células CHO cultivadas na presença de xilosídeo ou clorato, mostraram reduçao nos níveis de adesao, confirmando a importancia dos glicosaminoglicanos neste fenômeno. Várias evidências experimentais sugerem que os proteoglicanos de hepara sulfato estao envolvidos na adesao celular como moduladores positivos da proliferaça celular e como composto chave no processo de divisao celular. Ensaios de proliferaçao e ciclo celular demonstraram que uma diminuiçao das quantidades do proteoglicano nao inibem a proliferaçao da mutante CHO-745 quando comparadas com a célula selvagem pois os dois tipos celulares entram na fase S ao redor das 8 horas. A inteiraçoes celulas-matriz estao implicadas em uma grande variedade d funçoes. Estas inteiraçoes sao principalmente mediadas por integrinas que sa receptores da superfície celular e estao aparentemente envolvidas em adesao, migraçao e diferenciaçao. Por exemplo, a asj3, integrina está envolvida na migraçao e adesao da células sobre fibronectina. Também neste estudo, usando marcaçao radioativa com sulfato e imunoprecipitaçao...(au)