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Teste imunoenzimático (enzyme-linked immunosorbent assay) para diagnóstico da cisitcercose bovina e estudo da cinética de produção de anticorpos contra-Cysticercus bovis / Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for imunodiagnostic of bovine cysticercosis and kinetics of antibodies production against-Cysticercus bovis
Minozzo, Joao Carlos; Thomaz-Soccol, Vanete; Olortegui, Carlos Chaves; Soares, Vando Edésio; Costa, Alvimar José da.
Afiliação
  • Minozzo, Joao Carlos; Universidade Federal do Paraná. Departamento de Patologia Básica. BR
  • Thomaz-Soccol, Vanete; Universidade Federal do Paraná. BR
  • Olortegui, Carlos Chaves; Instituto Ezequiel Dias. BR
  • Soares, Vando Edésio; Universidade Estadual Paulista. Jaboticabal. BR
  • Costa, Alvimar José da; Universidade Estadual Paulista. Centro de Pesquisa em Parasitologia. Jaboticabal. BR
Ciênc. rural ; 34(3): 857-864, maio-jun. 2004. tab, graf
Article em Pt | LILACS | ID: lil-362506
Biblioteca responsável: BR409.1
RESUMO
Um teste de ELISA indireto (ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY) foi desenvolvido para pesquisa de anticorpos contra-C. bovis em bovinos experimental e naturalmente infectados. Foram estudados três antígenos antígeno parcial de C. cellulosae, antígeno total de C. bovis e antígeno total de C. longicollis. Na padronização do ELISA foram analisadas as seguintes combinações antígeno 250 e 500ng de proteína/cavidade, diluição dos soros 50, 100, 200 e 400 vezes, diluição do conjugado (IgG de cabra anti-IgG bovina conjugada com peroxidase) 400 e 800 vezes. Do cruzamento das condições acima resultou a seguinte padronização antígeno 250ng/cavidade, soro e conjugado diluídos 100 e 400 vezes, respectivamente. O nível de corte (cut-off) da reação entre animais reagentes e não reagentes foi determinado pela média das densidades óticas de 54 soros negativos acrescidas de três desvio-padrão, resultando no valor de 0,303. Através da prova ELISA foram comparadas as reatividades dos antígenos parcial de C. cellulosae, total de C. bovis e total de C. longicollis com soros de bovinos portadores de cisticercose, empregando as diluições de soros e de conjugados padronizados anteriormente. O antígeno de C. bovis mostrou alta correlação com o teste padronizado com C. cellulosae. Entretanto, os valores de absorbância foram sensivelmente menores. Com C. longicollis observou-se reatividade bastante baixa, porém aumentando-se a quantidade de antígeno, até 3000ng/cavidade, houve um aumento proporcional da resposta. Após a padronização do teste foi analisado o comportamento imunológico de bezerros infectados experimentalmente com ovos de Taenia saginata. Dez bezerros foram infetados oralmente com 2 x 104 ovos de T. saginata. Seis bezerros não infetados foram usados como controle. Treze amostras de soro de cada animal foram analisadas. A primeira foi colhida no dia da infecção e o restante, quinzenalmente até o abate. A produção máxima de anticorpos foi observada entre 30 e 60 dias pós-infecção. Depois de 90 dias da infecção os animais foram sacrificados e o número de cistos contados e comparados com a resposta imunológica dos animais. Com o teste padronizado pesquisou-se anticorpos contra-C. bovis, em soros de bovinos considerados não portadores de cisticercos pelo serviço de inspeção e, de 20 amostras de soros analisadas, duas apresentaram valores de absorbância acima do "cut-off" indicando serem portadores de cisticercos .
Assuntos
Texto completo: 1 Coleções: 01-internacional Base de dados: LILACS Assunto principal: Testes Imunológicos / Bovinos / Ensaio de Imunoadsorção Enzimática / Infecções Tipo de estudo: Diagnostic_studies Idioma: Pt Revista: Ciênc. rural Assunto da revista: CIENCIA / SAUDE AMBIENTAL Ano de publicação: 2004 Tipo de documento: Article País de afiliação: Brasil País de publicação: Brasil
Texto completo: 1 Coleções: 01-internacional Base de dados: LILACS Assunto principal: Testes Imunológicos / Bovinos / Ensaio de Imunoadsorção Enzimática / Infecções Tipo de estudo: Diagnostic_studies Idioma: Pt Revista: Ciênc. rural Assunto da revista: CIENCIA / SAUDE AMBIENTAL Ano de publicação: 2004 Tipo de documento: Article País de afiliação: Brasil País de publicação: Brasil