Elaboración de tejido conectivo artificial autólogo de mucosa oral y evaluación de su desempeño como cobertura biológica en lesiones mucosas inducidas en conejos / Elaboration of artificial autologous connective tissue of oral mucosa and evaluation of its performance as a biological coverage in induced mucosal lesions in rabbits

RESUMEN

Para superar la escasez de tejido disponible para injerto en los tratamientos quirúrgicos convencionales de las lesiones de la mucosa bucal, se ha propuesto elaborar sustitutos de mucosa empleando las técnicas desarrolladas por la ingeniería tisular. En Colombia, este campo es incipiente y hasta ahora se conocen los primeros esfuerzos para elaborar injertos artificiales que sustituyan al tejido propio cuando éste es escaso. En investigaciones previas, nuestros grupo estandarizó un método de cultivo de fibroblastos primarios (aislados de piel humana) sobre un soporte de colágeno I. Los análisis histológicos y moleculares de los cultivos realizados mostraron la producción de matriz extracelular característica de la dermis. En el presente trabajo estandarizamos los métodos requeridos para elborar tejido conjuntivo oral, a partir de mucosa qureratinizada humana. La metodología establecida fue aplicada para desarrollar tejido conectivo oral de conejo, el cual se evaluó como injerto autólogo en heridas inducidas en los conejos fuentes de las células utilizadas en su preparación. El comportamiento de los tejidos artificiales in vitro e in vivo, en todas las etapas de su desarrollo, fue seguido histológica y molecularmente. Para los análisis histológicos se emplearon coloraciones convencionales con hematoxilina-eosina y azul de alciano. Para los estudios moleculares, se llevaron a cabo análisis de la expresión de genes de proteínas constitutivas de la matriz extracelular mediante transcripción reversa y reacción en cadena de polimerasa (RT-PCR). El conjunto de nuestros resultados indica que el tejido autólogo desarrollado in vitro funciona como cobertura biológica en heridas mucosas. Durante los procedimientos quirúrgicos se observó que los injertos artificiales se posicionan en el sitio del defecto con facilidad, favorecen la hemostasia y cubren adecuadamente la herida. A nivel histológico, a las 4 y 8 semanas, se observó presencia de epitelio plano crónico no queratinizado con una capa basal activa, proliferación fibroblástica y en algunos casos, la presencia de infiltrado inflamatorio crónico leve en el tejido conectivo subyacente