Desenvolvimento e avaliaçåo de um ensaio imunoenzimático para o diagnóstico sorológico da infecçåo pelo herpesvírus bovino 1 / Development and evaluation of an enzyme-linked immunosorbent assay for the serological diagnosis of the bovine herpesvirus 1 infection

RESUMO

Um ensaio imunoenzimático (ELISA) indireto utilizando antígeno não purificado foi desenvolvido para o diagnóstico sorológico da infecção pelo herpesvírus bovino 1 (BoHV-1). Nos experimentos de padronização várias substâncias bloqueadoras de reações inespecíficas foram avaliadas em diferentes concentrações e associações. Os melhores resultados foram obtidos utilizando-se leite em pó desnatado (5 por cento) como solução de bloqueio e o tampão de diluição dos soros/conjugado acrescido de células MDBK (10 por cento), soro de eqüino (10 por cento) e leite em pó desnatado (1 por cento). O sistema foi avaliado frente a uma coleção de soros bovinos positivos (n=60) e negativos (n=62) para o BoHV-1 por meio da técnica de soro-neutralização (SN). O ELISA indireto padronizado nesse estudo, quando comparado com a SN, apresentou 98,3 por cento de sensibilidade e 96,8 por cento de especificidade (kappa 0,93), valores que possibilitam a sua implantação na rotina laboratorial para o diagnótico sorológico da infecção pelo BoHV-1. O desenvolvimento de um sistema de ELISA indireto utilizando antígeno não purificado facilita a elaboração da técnica, reduz o custo de produção e possibilita a sua aplicação em inquéritos soroepidemiológicos da infecção pelo BiHV-1 em rebanhos bovinos.