Production of monoclonal antibodies against Streptococcus mutans antigens

ABSTRACT

Several studies have been conducted in the last decades aiming to obtain an anti-caries vaccine, however some studies have demonstrated cross reactivity between Streptococcus mutans surface antigens and the human cardiac tissue. In this work, the reactivity of five anti-Streptococcus mutans monoclonal antibodies (MoAb) (24A, 56G, C8, E8 and F6) was tested against oral streptococci, cardiac antigens and skeletal and cardiac myosins, aiming to evaluate the specificity of these MoAb. The hybrid producers of immunoglobulins of the IgG2b class were cloned by limit dilution and expanded in vivo. MoAb were tested by ELISA. The hybrid 24A reacted with S. mutans CCT 1910, S. salivarius CCT 0365 and S. pyogenes T23. No reactivity difference was observed among the tested species. Cross reactivity with heart and cardiac myosin was not confirmed and only reaction with myosin of skeletal muscle was observed (p = 0.0381). The hybrid 56G reacted with all the tested microorganisms and there was statistically significant difference between S. mutans and S. pyogenes T23 (p < 0.001). This hybrid also reacted with myosin of skeletal muscle (p = 0.0095). C8, E8 and F6 presented low reactivity against oral streptococci strains and no reactivity against cardiac antigens. The data of this study showed that the 24A and 56G anti-S. mutans MoAb presented reactivity with S. pyogenes and S. salivarius, reinforcing the occurrence of common antigens between these species. The tested MoAb presented low cross-reactivity with myosin of skeletal muscle, but anti-heart activity could not be confirmed.

RESUMO

Diversos estudos foram realizados nas últimas décadas com o intuito de se obter uma vacina anticárie dentária, mas alguns trabalhos têm demonstrado reatividade cruzada entre antígenos de superfície de Streptococcus mutans e tecido cardíaco humano. Neste trabalho, foi testada a reatividade de cinco anticorpos monoclonais (AcMo) anti-Streptococcus mutans (24A, 56G, C8, E8 e F6) contra estreptococos orais, antígenos cardíacos e miosinas esquelética e cardíaca, no intuito de avaliar a especificidade desses AcMo. Os híbridos produtores de imunoglobulinas da classe IgG2b foram clonados por diluição limite e expandidos in vivo. Os AcMo foram testados por ELISA. O híbrido 24A reagiu com S. mutans CCT 1910, S. salivarius CCT 0365 e S. pyogenes T23. Nenhuma diferença de reatividade foi detectada entre as espécies analisadas. Reatividade cruzada com coração e miosina cardíaca não foi confirmada, existindo somente reação com miosina de músculo esquelético (p = 0,0381). O híbrido 56G reagiu com todos os microrganismos testados e houve diferença estatisticamente significante entre S. mutans e S. pyogenes T23 (p < 0,001). Este híbrido também reagiu com miosina de músculo esquelético (p = 0,0095). C8, E8 e F6 apresentaram baixa reatividade contra cepas de estreptococos orais e nenhuma reatividade com antígenos cardíacos. Os dados deste trabalho demonstraram que os AcMo 24A e 56G anti-S. mutans reagiram com S. pyogenes e S. salivarius, confirmando a existência de antígenos comuns entre essas espécies. Esses AcMo avaliados apresentaram baixa reatividade cruzada com miosina de músculo esquelético, porém a atividade anticoração não foi confirmada.