Efeito da inibição dos receptores de fator de crescimento endotelial vascular na angiogênese tumoral em carcinomas espinocelulares de cabeça e pescoço / Effect of vascular endothelial growth factor receptors inhibition on tumor angiogenesis in head and neck squamous cell carcinoma

RESUMO

O fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) tem sido considerado o principal indutor da angiogenese tumoral por sua ligacao a receptores especificos tirosina-quinase presentes nas celulas endoteliais (VEGFR). Uma importante via reguladora da angiogenese e caracterizada pela ligacao do VEGF ao seu receptor VEGFR-2 ativando a via de sinalizacao de PI3-K, que estimula a expressao da proteina antiapoptotica Bcl-2 elevando a expressao de citocinas pro-angiogenicas CXCL-8 e CXCL-1, o que resulta na proliferacao de celulas endoteliais. Recentemente, foi descoberta uma droga com acao antiangiogenica denominada de PTK787/ZK 222584 (PTK/ZK), que se mostrou um potente inibidor do receptor tirosina-quinase de VEGF, sem aparente efeito citotoxico em celulas que nao expressam esses receptores. Visando a melhor compreensao do mecanismo de acao e da via de atuacao antiangiogenica VEGF/VEGFR do PTK/ZK nos carcinomas espinocelulares de cabeca e pescoco, foram desenvolvidos estudos in vitro e in vivo avaliando-se a expressao de Bcl-2, CXCL-8 e CXCL-1. No presente estudo foi utilizado um modelo experimental de angiogenese humana em camundongos imunodeprimidos que receberam co-implantes de celulas tumorais e endoteliais ou apenas celulas endoteliais, tratados com administracao oral de PTK/ZK por 21 dias. A progressao tumoral nos animais foi avaliada por meio de imagem de bioluminescencia. Apos o sacrificio dos camundongos, os implantes foram incluidos em parafina sendo obtidos cortes de 3'mü'm para analise da densidade vascular e de 7'mü'm para a tecnica de microdisseccao a laser visando a avaliacao de RNA por meio de RT-PCR e PCR em tempo real nas celulas malignas e endoteliais. Concomitantemente, experimentos in vitro de co-cultura de celulas tumorais e endoteliais foram realizados para a analise de expressao de Bcl-2, CXCL-8 e CXCL-1 avaliados por meio de RT-PCR, Western Blot e teste ELISA. Os resultados demonstraram uma redução importante da expressão de Bcl-2, bem como...