Head dimensions of Brahman and their crossbred bull spermatozoa are affected by cryopreservation

RESUMEN

El objetivo de este estudio fue determinar el efecto de la criopreservación sobre las características morfométricas de las cabezas de espermatozoides de toros Brahman y sus mestizos. Cinco eyaculados fueron colectados de 4 toros y diluidos a 30°C en una solución de leche descremada-yema de huevo. Por cada muestra se hicieron dos frotis uno del semen diluido, antes de su congelación en vapores de nitrógeno líquido, y otro de semen descongelado una semana después de la congelación. Todos los frotis fueron secados al aire y coloreados con Hemacolor®. Se analizaron las dimensiones de la cabeza espermática para un mínimo de 150 espermatozoides por muestra mediante el Sperm Class Analyser® (SCA). El procedimiento GLM se realizó para evaluar el efecto de la criopreservación sobre las dimensiones morfométricas de las cabezas espermáticas. Las cabezas espermáticas de los toros fueron significativamente (P<0,001) menores en los espermatozoides criopreservados que en las muestras frescas para la longitud (9,00 µm vs. 9,43 µm), el ancho (4,82 µm vs. 5,13 µm), el perímetro (32,46 µm vs. 33,69 µm) y el área (36,20 µm²vs. 39,97 µm²) para todos los toros. Así mismo, se encontraron diferencias (P<0,001) de todos los parámetros morfométricos de los toros evaluados, encontrándose dimensiones de cabeza menores en las muestras descongeladas. La variabilidad individual (CV) de las medidas de cabeza espermática de los toros osciló entre el 5,9 y el 10,2 por ciento para las muestras frescas y descongeladas, respectivamente. En conclusión, este estudio indica que el proceso de criopreservación de semen de toro afecta la morfometría, al reducir las dimensiones de la cabeza espermática de toros Brahman y sus cruces. Las diferencias entre los toros evaluados puede ser indicativo de diferencias individuales al proceso de criopreservación.

ABSTRACT

The objective of this study was to determine the effect of cryopreservation on morphometrics characteristic of Brahman and their crossbred bull sperm heads. Five ejaculates were collected from 4 bulls and diluted at 30°C in a skim milk-egg yolk extender. Two microscope slides were prepared from single extended sperm samples prior to freezing in nitrogen vapors, and another one after thawing, sperm smears were prepared as described above. All slides were air dried and stained with Hemacolor®. Sperm-head dimensions for a minimum of 150 sperm heads/samples were analysed from each sample by means of the Sperm-Class Analyser® (SCA), and the mean measurements recorded. A GLM procedure was performed to evaluate the effect of cryopreservation on sperm head morphometric dimensions. Bull sperm heads were significantly (P<0.001) smaller in frozen-thawed spermatozoa than in the extended samples for length (9.00 µm vs. 9.43 µm), width (4.82 µm vs. 5.13 µm), perimeter (32.46 µm vs. 33.69 µm) and area (36.20 µm2 vs. 39.97 µm2) for all bulls. Also, differences (P<0.001) were found within all bulls for whole morphometric parameters. The individual variability of sperm head measurements across all bulls ranged from 5.9% to 10.2% for fresh and thawed samples, respectively. In conclusion, the present study indicate that cryopreservation of bull semen did affect the morphometry to reduce the dimensions of Brahman and crossbred bull sperm heads. The differences among bulls may be indicative of the individual bull resistance to the cryopreservation process.