Marcadores bioquímicos e microscópicos como ferramentas investigativas da resposta tecidual envolvidas com a associação de osso cortical bovino/colágeno em subcutâneo de ratos / Biochemical and microscopic analyses as investigative tool of tissue response involved with the association of bovine cortical bone/collagen in subcutaneous of rats

RESUMO

O objetivo deste trabalho foi avaliar a reposta tecidual à associação de osso bovino inorgânico e colágeno bovino liofilizado, implantados em subcutâneo de ratos. O composto (osso bovino + colágeno) foi acondicionado em cápsulas de colágeno transparente e posteriormente implantado no tecido conjuntivo subcutâneo de ratos. Os animais foram mortos após 10, 20, 30 e 60 dias da cirurgia e as peças recolhidas para análise microscópica e enzimática. Foram analisados os aspectos microscópicos da resposta tecidual, bem como a atividade específica da fosfatase ácida total, fosfatase ácida lisossomal, fosfatase ácida de baixa massa molecular, fosfatase ácida resistente ao tartarato (marcador de osteoclastos e alguns tipos de células gigantes multinucleadas) e da fosfatase alcalina. A análise enzimática mostrou que a atividade da fosfatase ácida lisossomal coincidiu com os períodos de maior presença de células gigantes multinucleadas inflamatórias. A análise microscópica revelou um moderado infiltrado inflamatório apenas no período de 10 dias, desaparecendo nos períodos seguintes. A presença de linfócitos e plasmócitos foi leve, sendo notada apenas no período de 10 dias. O grau de fibrosamento tendeu de moderado a intenso até o final do experimento. Dentro dos limites deste trabalho pode-se concluir que a combinação de osso cortical bovino + colágeno bovino liofilizado é biocompatível não exibindo sinais de resposta imunogênica, além disso, a atividade das fosfatases ácidas pode ser modulada em função do tempo, durante a resposta tecidual ao composto implantado em subcutâneo de ratos. O exato papel de cada uma dessas enzimas nesta complexa cadeia de eventos deve, ainda, ser investigado.

ABSTRACT

The objective of this work was to evaluate the rat tissue response under association of inorganic bovine bone and bovine collagen. Before experimentation, the association (bovine bone + collagen) was conditioned in collagen capsules and after implanted in rats subcutaneous tissue. Afterwards, the animals were killed as follows: 10, 20, 30 and 60 days after surgery. Immediately, the biopsies were collected and appropriately conditioned for both microscopic and biochemical analysis. The biochemical parameters evaluated were: specific activity of total acid phosphatase, lisossomal acid phosphatase, low molecular weight phosphatase, tartarateresistant acid phosphatase and of alkaline phosphatase. These results showed that lisossomal acid phosphatase activity coincided with the periods of bigger incidence of inflammatory multinucleated giant cells. Results from microscopic analysis showed a moderate infiltrated inflammatory at 10 days, decreasing at the following periods. Also, the presence of lymphocytes and plasmocytes was scored as light at 10 days. We found that fibrosis degrees were between moderate to intense at the final periods. Taken together, our results showed that association of cortical bovine bone plus bovine collagen is biocompatible by not showing signals of immune response. On the other hand, both acid and alkaline and phosphatase activities were modulated along the periods evaluated as responsive events.