Análise do efeito da ativação dos receptores tipo toll 2 (TLR-2) sobre a replicação do HIV -1 em células primárias humanas / Analysis of the effect of activation of toll-like receptors 2 (TLR-2) on the replication of HIV-1 in primary human

RESUMO

Pacientes infectados pelo HIV1 apresentam aumentada permeabilidade intestinal, a qual permite a passagem para a circulação sanguínea de produtos microbianos, fenômeno conhecido por translocação microbiana. Dentre os produtos translocados são encontrados vários ligantes dos receptores do tipo Toll (TRL). A ativação de TLR desencadeia uma complexa cascata de sinalização, induz a síntese de diversas citocinas, e modula a função de células dendríticas (CDs), macrófagos e linfócitos, células-alvo da infecção pelo HIV1. Estudos experimentais mostram que a ativação de TLRs influencia a replicação do HIV1, como, por exemplo, a ativação de TLR4 e TLR3 resulta em diminuição da replicação viral. No entanto, os estudos relacionados à ativação de TLR2 e HIV1 são escassos. Assim, em nosso estudo, resolvemos analisar o efeito da ativação de TLR2 sobre a replicação do HIV1 em PBMCs e macrófagos primários humanos infectados in vitro. Para isto, PBMCs e macrófagos obtidos de doadores saudáveis foram infectados pelo HIV1 e em seguida expostos ao Zymosaqn ou Pam3CSK4, ambos ligantes de TLR2, e a replicação viral foi avaliada pela detecção da proteína viral p24 nos sobredanantes de cultura. Vimos que tanto o Zymosan quanto o Pam3CSK4 inibem de forma potente (até 90 porcento) a replicação do isolado Ba L (trópico para CCR5) de HIV1 em PBMCs e macrófagos, assim como isolados primários trópicos para CCR5 e CXCR4. o tratamento das células com os ligantes de TLR2 antes da infecção também induziu a queda da replicação viral. Ambos os ligantes de TLR2 induziram aumento da produção das beta quimiocinas CCL3, CCL4 e CCL5 em macrófagos e PBMCs, e de IL10 em macrófagos. A imuno-neutralização das beta quimiocinas diminuiu expressivamente o seu efeito inibitório sobre a replicação do HIV1. sugerindo que estas moléculas participam da inibição da replicação do HIV1 resultante da ativação de TLR2. no entanto, a neutralização do receptor de IL10 não produziu resultados semelhantes. A expressão dos receptores celulares CD4, CCR5 e CXCR4 não foi alterada quando macrófagos e PBMCs foram tratados com Pam3CSK4. observamos, ainda, que a proteína quinase R (PKR) é ativada por Pam3CSK4 tanto em macrófagos quanto em PBMCs. Estes resultados mostram que a ativação de TLR2 resulta em uma potente inibição da replicação do HIV1 em PBMCs e macrófagos, e sugerem que as beta quimiocinas estão envolvidas neste fenômeno. Nossos achados ressaltam o papel anti-HIV1 resultante da ativação de TLR2, e indicam que novos estudos devem ser realizados para esclarecer, com maior profundidade, os mecanismos envolvidos neste processo.