In Vitro Cytotoxicity of White MTA, MTA Fillapex® and Portland Cement on Human Periodontal Ligament Fibroblasts

ABSTRACT

The aim of this study was to compare the in vitro cytotoxicity of white mineral trioxide aggregate (MTA), MTA Fillapex® and Portland cement (PC) on human cultured periodontal ligament fibroblasts. Periodontal ligament fibroblast culture was established and the cells were used for cytotoxic tests after the fourth passage. Cell density was set at 1.25 X10 4 cells/well in 96-well plates. Endodontic material extracts were prepared by placing sealer/cement specimens (5X3mm) in 1mL of culture medium for 72 h. The extracts were then serially two-fold diluted and inserted into the cell-seeded wells for 24, 48 and 72 h. MTT assay was employed for analysis of cell viability. Cell supernatants were tested for nitric oxide using the Griess reagent system. MTA presented cytotoxic effect in undiluted extracts at 24 and 72 h. MTA Fillapex® presented the highest cytotoxic levels with important cell viability reduction for pure extracts and at ½ and » dilutions. In this study, PC did not induce alterations in fibroblast viability. Nitric oxide was detected in extract-treated cell supernatants and also in the extracts only, suggesting presence of nitrite in the soluble content of the tested materials. In the present study, MTA Fillapex displayed the highest cytotoxic effect on periodontal ligament fibroblasts followed by white MTA and PC.

RESUMO

Resumo O objetivo deste estudo foi comparar a citotoxicidade in vitro de agregado trióxido mineral (MTA) branco, MTA Fillapex® e cimento Portland (PC) em cultura de fibroblastos de ligamento periodontal humano. A cultura de fibroblastos de ligamento periodontal foi estabelecida e as células foram utilizadas para os testes citotóxicos após a quarta passagem. A densidade celular foi ajustada em 1,25X10 4 células/poço em placas de 96 poços. Extratos dos materiais endodônticos foram preparados por meio da inserção de corpos de prova dos cimentos (5 X 3 mm) em 1 mL de meio de cultura durante 72 h. Os extratos foram diluídos serialmente na razão de ½ e inseridos aos poços contendo as células por 24, 48 e 72 h. Ensaio de MTT foi realizado para a avaliação da viabilidade celular. O sobrenadante das células foi testado em relação à presença de óxido nítrico utilizando o sistema de reagentes de Griess. O MTA apresentou efeito citotóxico quando o extrato era aplicado sem diluição durante 24 e 72 h. O MTA Fillapex apresentou os maiores níveis de citotoxicidade com importante redução da viabilidade celular quando o extrato foi aplicado puro e em diluições de ½ e ». Neste estudo, PC não induziu alterações na viabilidade de fibroblastos. Óxido nítrico foi detectado no sobrenadante de células tratadas com os extratos e ainda nos extratos somente, o que sugere a presença de nitrito no conteúdo solúvel dos materiais testados. No presente estudo, MTA Fillapex foi o material que demonstrou o maior efeito citotóxico sobre fibroblastos de ligamento periodontal seguido do MTA branco e do PC. .