Avaliação da função plaquetária na infecção pelo HIV-1 / Platelet activation and cell death pathways in platelets isolated from HIV/AIDS patients

RESUMO

A terapia antirretroviral de alta potência (TARV) aumentou significativamente a sobrevida e a qualidade de vida dos pacientes portadores de HIV/AIDS, levando, por conseguinte, à cronificação da doença. Neste novo cenário epidemiológico, cresce a importância de complicações cardiovasculares como o infarto agudo do miocárdio e a trombose venosa profunda. A plaqueta tem papel central na gênese destas complicações e seu papel na infecção pelo HIV-1 começa a ser explorado na literatura. No presente trabalho objetivamos avaliar a função plaquetária durante a infecção pelo HIV-1, especificamente o grau de ativação, disfunção mitocondrial, morte celular, produção de óxido nítrico e resposta a estímulos agonistas. Para tal, avaliamos 30 voluntários saudáveis e 26 pacientes infectados pelo HIV- 1 em acompanhamento no Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas (IPEC) da Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ) de Janeiro de 2012 a Janeiro de 2013. Dentre os pacientes infectados avaliados, 17 apresentavam uso regular de TARV e tinham a carga viral para HIV-1 no sangue periférico indetectável (< 50 cópias/mm3 ) e 9 apresentavam carga viral para HIV-1 no sangue periférico detectável (> 50 cópias/mm3 ). Observamos que a plaqueta dos dois grupos de pacientes portadores de HIV/AIDS analisados exibe um aumento no perfil de ativação (expressão de P-selectina e exposição de fosfatidilserina), aumento na produção de óxido nítrico e menor indução da expressão de P-selectina após estímulo com trombina, quando comparada à resposta da plaqueta de indivíduos controles. Além disso, observamos sinais claros de ativação da via intrínseca de apoptose (diminuição do potencial de membrana mitocondrial, aumento na produção de superóxido mitocondrial, exposição de fosfatidilserina e ativação de caspase 9) mesmo com o controle da replicação viral, atingido com o uso regular de TARV...

ABSTRACT

The advent of highly active antiretroviral therapy (HAART) has increased life expectancy and the quality of life of patients living with HIV/AIDS. Now, new clinical data emphasizes long term complications of HIV-1 infection, such as cardiovascular diseases. Blood human platelets have a pivotal role in thrombus formation and their physiology during the course of HIV-1 infection has recently begun to be explored. The aim of the present study is to build up this literature by characterizing platelet activation, mitochondrial dysfunction, apoptosis and response to agonist stimulus in HIV/AIDS patients and control subjects. From January of 2012 to January of 2013 we included 30 healthy volunteers and 33 HIV-1 infected subjects from the outpatient clinic of Evandro Chagas Clinical Research Institute (IPEC), Oswaldo Cruz Foundation (FIOCRUZ). Among the HIV-1 population, 18 patients were under HAART therapy and had achieved virological suppression (viral load in peripheral blood < 50 copies/mm3 ) and 9 patients had uncontrolled viral replication (viral load in peripheral blood > 50 copies /mm3 ). We noted that HIV-1 infected individuals exhibit increased platelet activation (P-selectin expression and fosfatidilserine exposition), enhanced nitric oxide (NO) production and abnormal response to agonistic stimulus (thrombin). Moreover, we noted marked sigs of intrinsic apoptotic pathway activation (decreased transmembrane mitochondrial potential, increased superoxide production, fosfatidilserine exposure and caspase 9 activation) in patients under virological suppression achieved through HAART...