VP1 sequencing protocol for foot and mouth disease virus molecular epidemiology.

Les séquences de nucléotides des souches de terrain du virus de la fièvre aphteuse nous aident à comprendre la distribution et l'évolution des lignées virales présentes dans les différentes régions du monde. Les auteurs décrivent les grandes lignes d'un protocole pratique, basé sur l'amplification en chaîne par polymérase couplée à une transcription inverse (RT-PCR) et sur le séquençage, qui peut être utilisé pour générer des séquences d'ARN codant pour la région VP1 (1D) du virus de la fièvre aphteuse. Le protocole permet de procéder à une sélection parmi un panel de PCR et de marqueurs de séquençage dans le but de caractériser les gènes de divers isolats représentant les sept sérotypes du virus de la fièvre aphteuse. Les auteurs décrivent également une liste de séquences pouvant servir de cadre à l'analyse phylogénétique, dont des séquences prototypes pour tous les topotypes proposés du virus de la fièvre aphteuse. Les données techniques détaillées et les séquences prototypes fournies par les auteurs peuvent être utilisées par les Laboratoires de référence pour la fièvre aphteuse et d'autres institutions, en vue d'harmoniser l'épidémiologie moléculaire du virus de la fièvre aphteuse.

RESUMEN

Las secuencias nucleotídicas de las cepas salvajes del virus de la fiebre aftosa nos ayudan a entender la distribución y evolución de los linajes víricos circulantes en distintas regiones del mundo. Los autores exponen sucintamente un práctico procedimiento de reacción en cadena de la polimerasa acoplada a transcripción inversa (RT-PCR) y de secuenciación que se puede utilizar para generar secuencias de ARN que codifican la región VP1 (1D) del virus de la fiebre aftosa. El protocolo ofrece la posibilidad de elegir entre todo un repertorio de cebadores de PCR y de secuenciación en el que están representados los siete serotipos víricos existentes con objeto de caracterizar genéticamente diversas cepas aisladas sobre el terreno. Los autores también presentan una lista de secuencias que comprende secuencias prototípicas de todos los topotipos propuestos del virus, a fin de proporcionar un marco de referencia para el análisis filogenético. Los laboratorios de referencia para la fiebre aftosa, así como otros establecimientos, pueden servirse de las detalladas técnicas y las secuencias prototípicas aquí presentadas para armonizar el estudio de la epidemiología molecular del virus de la fiebre aftosa.