Complexos imínicos de cobre com atividade antiparasitária frente à doença de chagas / Imine copper complexes with antiparasitic activity against Chagas disease

Neste trabalho foram sintetizados e caracterizados três complexos de cobre com ligantes imínicos, com o objetivo de avaliar sua atividade tripanocida. Esses complexos foram caracterizados por diversas técnicas espectroscópicas, como UV-Vis, Infravermelho e EPR, além de análise elementar e espectrometria de massa. Juntamente com outros complexos similares previamente sintetizados pelo nosso grupo, tiveram suas atividades avaliadas frente à forma tripomastigota do parasita T. cruzi, responsável pela fase aguda da doença de Chagas, por ensaios de viabilidade celular, com determinação do valor de seus IC50, concentração em que observamos a morte de 50% da cultura celular, pela metodologia denominada MTT. Todos os complexos mostraram-se eficientes frente a tripomastigotas, apresentando valores de IC50 abaixo de 10 µM, com quatro deles obtendo índice de seletividade maior que 10, fator importante para definir agentes promissores antichagásicos. Complexos selecionados também tiveram sua atividade verificada frente à forma amastigota do parasita, responsável pela fase crônica da doença, utilizando método de imageamento por microscópio de fluorescência e contagem celular. Estudos de inibição da cruzaína, uma cisteíno-protease importante para o metabolismo do parasita foram conduzidos em colaboração com o laboratório do Prof. Wagner Alves de Souza Júdice, da Universidade de Mogi das Cruzes. Quatro dos compostos testados apresentaram atividade inibitória frente a cruzaína, sendo dois de cobre, um de zinco e um ligante livre. Os estudos também permitiram diferenciar os mecanismos de inibição dos compostos, com os complexos de cobre apresentando um mecanismo de inibição clássico e o composto de zinco e o ligante livre apresentando o mecanismo de inibição competitiva parabólica com cooperatividade

In this work, three copper complexes with iminic ligands were synthesized and characterized, with the objective of evaluating their trypanocidal activity. These complexes were characterized by several spectroscopic techniques, such as UV-Vis, Infrared and EPR, in addition to elementary analysis and mass spectrometry. Together with other similar complexes previously synthesized by our group, their activities were evaluated against the trypomastigote form of the parasite T. cruzi, responsible for the acute phase of Chagas disease, by cell viability tests, with determination of the value of their IC50, concentration in that we observed the death of 50% of the cell culture, by the methodology called MTT, all presenting IC50 values below 10 µM, with four of them obtaining a selectivity index greater than 10, important factor for defining promising antichagasic agents. Selected complexes also had their activity verified against the amastigote form of the parasite, responsible for the chronic phase of the disease, using a fluorescence microscope and cell counting imaging method. Inhibition studies of cruzain, a cysteine protease important for the metabolism of the parasite, were conducted in collaboration with the laboratory of Professor Wagner Alves de Souza Júdice at the University of Mogi das Cruzes. Four of the tested compounds showed inhibitory activity against cruzain, two of copper, one of zinc and a free ligand. The studies also allowed to differentiate the mechanisms of inhibition of the compounds, with the copper complexes presenting a classic inhibition mechanism and the zinc compound and the free ligand presenting the competitive parabolic inhibition mechanism with cooperativity

Guía de práctica clínica para el tamizaje, diagnóstico y manejo de la enfermedad renal crónica en los estadios 1 al 3 / Clinical practice guideline for the screening, diagnosis and management of chronic kidney disease in stages 1 to 3

La enfermedad renal crónica (ERC) consiste en la pérdida progresiva de la función renal a través de cinco estadios (1, 2). Esta condición es un problema de salud pública que ocasiona daños en la calidad de vida y pérdidas socioeconómicas por la mortalidad, discapacidad y costos asociados que genera (3). Se estima que la ERC afecta al 8% a 16% de la población mundial y tanto la incidencia como mortalidad van en aumento (4). La carga de enfermedad de la ERC se ve incrementada por las comorbilidades asociadas a esta enfermedad, de tal manera que la diabetes mellitus e hipertensión arterial son condiciones frecuentemente asociadas (1, 4). En Perú, un estudio realizado en Lima y Tumbes reportó que la prevalencia de ERC fue de 20.7% y 12.9%, respectivamente, en el año 2011 (5). En adición, un estudio realizado con datos del Ministerio de Salud de Perú, evidenció que durante el periodo del 2010 al 2017, se han registrado 188686 casos de ERC, y que en el 2017 se encontró una prevalencia de 1.51%. Una encuesta nacional realizada a los asegurados del seguro social de salud, EsSalud (ENSSA2015), encontró que el 1.7% de asegurados mayores de 60 años reportó padecer de enfermedad renal crónica en el año 2015 (7). En contraste, un estudio realizado con datos del registro nacional de defunciones de Perú reportó que la incidencia de fallecimientos por ERC se incrementó entre el año 2003 y 2015, siendo Puno la región más afectada (4.1% de muertes por ERC). La tendencia creciente tanto en la incidencia como en la mortalidad de la ERC, dan cuenta que a pesar de contar con estrategias terapéuticas para su manejo, los pacientes son captados en estadios avanzados (9). Ante ello, se ha propuesto que la evaluación y el manejo oportuno y adecuado de los casos de ERC, principalmente en estadios tempranos (1 al 3), reducirían la morbimortalidad y las complicaciones de esta condición, evitando que esta enfermedad impacte en la calidad de vida de las personas que la padecen (1, 9, 10). En consecuencia, el Seguro Social de Salud (EsSalud) priorizó la realización de la presente guía de práctica clínica (GPC) para establecer lineamientos basados en evidencia y gestionar de la mejor manera los procesos y procedimientos asistenciales de la presente condición. Esta GPC fue realizada por la Dirección de Guías de Práctica Clínica, Farmacovigilancia y Tecnovigilancia del Instituto de Evaluación de Tecnologías en Salud e Investigación (IETSI) de EsSalud.

Consecuencias de la selección inadecuada de la ecuación de estimación de la tasa de filtración glomerular / Consequences of inadequate selection of estimated glomerular filtration rate equation / Consequências da seleção inadequada da equação de estimação da taxa de filtração glomerular

El objetivo del trabajo consistió en evaluar, en una muestra de estudiantes, las consecuencias sobre la Tasa de Filtración Glomerular estimada (TFGe) por MDRD-4, MDRD-4 IDMS y CKD-EPI producidas por la selección inadecuada de las fórmulas según la trazabilidad de la creatininemia utilizada y valorar el efecto sobre la categorización por estadio G de TFG al utilizar valores numéricos de MDRD-4 y MDRD-4 IDMS≥60 mL/min/1,73 m². Se realizó un estudio descriptivo, analítico, de corte transversal con 100 alumnos de bioquímica, que participaron voluntariamente. Se determinó la creatininemia por métodos Jaffé cinéticos, valores trazables y no trazables al Isotopic Dilution Mass Spectroscopy (IDMS). La TFGe se calculó por las fórmulas MDRD-4, MDRD-4 IDMS y CKD-EPI introduciendo en cada fórmula valores de creatinina trazables y no trazables a IDMS. Los estudiantes se clasificaron por categoría G según los resultados. El mal empleo de las ecuaciones respecto a la trazabilidad de la creatininemia según fueron diseñadas cambió sensiblemente los valores de TFGe (p<0,05) y la proporción de jóvenes por estadio G respecto a lo hallado con el empleo adecuado (MDRD-4. G1: 67,4% vs. 53,7%; G2: 32,6% vs. 45,3%; G3a: 0,0% vs. 1,0%. MDRD-4 IDMS. G1: 37,9% vs. 59,0%; G2: 56,8% vs. 40,0%; G3a: 5,3% vs. 1,0%. CKD-EPI. G1: 70,5% vs. 85,3%; G2: 29,5% vs. 14,7%). El uso de valores numéricos para TFGe por MDRD-4 y MDRD-4 IDMS≥60 mL/min/1,73 m² infraestimó lo obtenido con CKD-EPI, que puede informarse numéricamente en ese rango. Ambas situaciones conllevan errores que afectan la categorización funcional renal de pacientes y la prevalencia en estudios epidemiológicos.

The objective of this work was to evaluate the consequences on the estimated Glomerular Filtration Rate (eGFR) by MDRD-4, MDRD-4 IDMS and CKD-EPI produced by the inadequate equation selection according to the creatinine traceability in a sample of biochemistry students and to assess the effect on G categorization if numerical values of the MDRD-4 and MDRD-4 IDMS equations≥60 mL/ min/1.73 m² were used. A descriptive, analytical, cross-sectional study was performed between 2014- 2016, 100 volunteer students of biochemistry were studied. Creatininemia was determined by kinetic Jaffé methods, traceable and non-traceable to Isotopic Dilution Mass Spectroscopy (IDMS). The eGFR was estimated by the MDRD-4, MDRD-4 IDMS and CKD-EPI formula, by feeding each formula with traceable and non traceable creatinine values to IDMS. Students were classified by category G according to the results obtained. Inappropriate equation use regarding the traceability of the creatinine for which they were designed significantly changed eGFR values (p<0.05) and the proportion of young people per G stage compared to what was found with adequate use (MDRD-4. G1: 67.4% vs. 53.7%; G2: 32.6% vs. 45.3%; G3a: 0.0% vs. 1.0%. MDRD-4 IDMS. G1: 37.9% vs. 59.0%; G2: 56.8% vs. 40.0%; G3a: 5.3% vs. 1.0%. CKD-EPI. G1: 70.5% vs. 85.3%; G2: 29.5% vs. 14.7%). The use of numerical values for eGFR by MDRD-4 and MDRD-4 IDMS≥60mL/min/1.73 m² underestimated what was obtained with CKD-EPI, which can be reported numerically in that range. Both situations involve errors that affect patient renal functional categorization and prevalence in epidemiological studies.

Este trabalho teve como objetivo avaliar as consequências sobre a Taxa de Filtração Glomerular estimada (TFGe) por MDRD-4, MDRD-4 IDMS e CKD-EPI produzidas pela seleção inadequada das fórmulas, segundo a rastreabilidade da creatininemia utilizada e o efeito sobre a categorização por estágio G de TFG ao utilizar valores numéricos de MDRD-4 e MDRD-4 IDMS≥60 mL/min/1,73 m². Este é um estudo descritivo, analítico e de corte transversal com 100 alunos de bioquímica, que participaram em forma voluntária. Foi determinada a creatininemia através do métodos Jaffé cinéticos, valores rastreáveis e não rastreáveis ao Isotopic Dilution Mass Spectroscopy (IDMS). A TFGe foi estimada pela fórmula MDRD-4, MDRD-4 IDMS e CKD-EPI introduzindo em cada fórmula valores de creatinina rastreáveis e não rastreáveis a IDMS. Os estudantes foram classificados por categoria G conforme os resultados. Uso indevido das equações a respeito da rastreabilidade da creatinina conforme foram desenhadas, mudou sensivelmente os valores de TFGe (p<0,05) e a proporção de jovens por estágio G em relação ao encontrado com o uso adequado adecuado (MDRD-4. G1: 67,4% vs. 53,7%; G2: 32,6% vs. 45,3%; G3a: 0,0% vs. 1,0%. MDRD-4 IDMS. G1: 37,9% vs. 59,0%; G2: 56,8% vs. 40,0%; G3a: 5,3% vs. 1,0%. CKD-EPI. G1: 70,5% vs. 85,3%; G2: 29,5% vs. 14,7%). Utilizar valores numéricos para TFGe por MDRD-4 e MDRD-4 IDMS≥60mL/min/1,73 m² infraestimou o obtido com CKD-EPI, que pode informar-se numericamente nesse intervalo. Ambas as situações conduzem a erros que afetam a categorização funcional renal de pacientes e a prevalência em estudos epidemiológicos.

Caracterização e avaliação da capacidade protetora dos peptí­deos imunogênicos de Sporothrix brasiliensis / Characterization and evaluation of the protective capacity of the immunogenic peptides of Sporothrix brasiliensis

A esporotricose é uma doença crônica que envolve o tecido subcutâneo afetando seres humanos e animais, causada pelo fungo termodimórfico Sporothrix spp.. A esporotricose é endêmica na América latina, principalmente no Brasil que teve o maior surto zoonótico já registrado, ocorrendo na cidade do Rio de Janeiro. A espécie Sporothrix brasiliensis é a mais diagnosticada no surto e a mais virulenta entre as especies de Sporothrix spp., causando formas mais graves da doença. A esporotricose em gatos é endêmica, fatal e um dos principais fatores pelo alto número de casos no Rio de Janeiro. O tratamento é longo e não vem sendo o suficiente para conter o número de casos da doença. Uma vacina contra a esporotricose poderia mudar esse paradigma no Brasil. O presente trabalho obteve o proteoma da cepa S. brasiliensis 5110 por meio de uma eletroforese 2D, e caracterizou e identificou as possíveis proteínas imunogênicas do fungo por espectrometria de massa. Por meio de programas de predição, foi avaliado e sintetizado 7 sequências de aminoácidos,das proteínas identificadas com maiores chances de se acoplar a molécula MHC de classe II. Apenas 3 foram capazes de induzir proliferação in vitro, os peptídeos ZR3, ZR4 e ZR8, que foram utilizados como vacina na esporotricose subcutânea e avaliados sua eficácia por meio da carga fúngica, diâmetro das lesões, perfil celular e níveis de citocinas. Neste trabalho concluímos que o peptídeo ZR8 foi o melhor candidato à vacina na esporotricose, pois foi capaz de diminuir o diâmetro das lesões, aumentar os níveis de citocinas protetoras (IFN-γ, IL-17A e IL-1ß) e aumentar o número de células TCD4+ e CD3-/CD19+, sendo assim induzindo uma resposta imunológica protetora na esporotricose subcutânea

Sporotrichosis is a chronic disease, which involves the subcutaneous tissue affecting humans and animals caused by the thermodymorphic fungus Sporothrix spp. Sporotrichosis is endemic in Latin America, mainly in Brazil that had the largest zoonotic outbreak ever recorded, occurring in the city of Rio de Janeiro. The Sporothrix brasiliensis is the species more diagnosed in the outbreak and most virulent, causing severe forms of the disease. Sporotrichosis in cats is endemic, fatal and the main factors due to the high number of cases of the disease in Rio de Janeiro. The treatment is long, and has not been enough to contain the number of cases of sporotrichosis. A vaccine against sporotrichosis could change this paradigm in Brazil. The present work obtained the proteome of S. brasiliensis 5110 strain by 2D electrophoresis, and characterized and identified possible immunogenic proteins by mass spectrometry. By prediction programs were evaluated and synthesized 7 peptide sequence from antigenic proteins that have the highest chances of coupling to the MHC class II molecule. From these 7 peptides only 3 were able to induce proliferation in vitro, called ZR3, ZR4 and ZR8 peptides, that were used as a vaccine in subcutaneous sporotrichosis and evaluated their efficacy through fungal load, lesion diameter, cell profile and cytokine levels. We conclude that ZR8 peptide was the best candidate for sporotrichosis vaccine, since it was able to decrease the lesion diameter, increase the levels of protective cytokines (IFN-γ, IL-17A and IL-1ß) and increase the number of CD4+ T cells and CD3-/CD19+ inducing a protective immune response in subcutaneous sporotrichosis

Caracterização e avaliação da capacidade protetora dos peptí­deos imunogênicos de Sporothrix brasiliensis / Characterization and evaluation of the protective capacity of the immunogenic peptides of Sporothrix brasiliensis

A esporotricose é uma doença crônica que envolve o tecido subcutâneo afetando seres humanos e animais, causada pelo fungo termodimórfico Sporothrix spp.. A esporotricose é endêmica na América latina, principalmente no Brasil que teve o maior surto zoonótico já registrado, ocorrendo na cidade do Rio de Janeiro. A espécie Sporothrix brasiliensis é a mais diagnosticada no surto e a mais virulenta entre as especies de Sporothrix spp., causando formas mais graves da doença. A esporotricose em gatos é endêmica, fatal e um dos principais fatores pelo alto número de casos no Rio de Janeiro. O tratamento é longo e não vem sendo o suficiente para conter o número de casos da doença. Uma vacina contra a esporotricose poderia mudar esse paradigma no Brasil. O presente trabalho obteve o proteoma da cepa S. brasiliensis 5110 por meio de uma eletroforese 2D, e caracterizou e identificou as possíveis proteínas imunogênicas do fungo por espectrometria de massa. Por meio de programas de predição, foi avaliado e sintetizado 7 sequências de aminoácidos,das proteínas identificadas com maiores chances de se acoplar a molécula MHC de classe II. Apenas 3 foram capazes de induzir proliferação in vitro, os peptídeos ZR3, ZR4 e ZR8, que foram utilizados como vacina na esporotricose subcutânea e avaliados sua eficácia por meio da carga fúngica, diâmetro das lesões, perfil celular e níveis de citocinas. Neste trabalho concluímos que o peptídeo ZR8 foi o melhor candidato à vacina na esporotricose, pois foi capaz de diminuir o diâmetro das lesões, aumentar os níveis de citocinas protetoras (IFN-γ, IL-17A e IL-1ß) e aumentar o número de células TCD4+ e CD3-/CD19+, sendo assim induzindo uma resposta imunológica protetora na esporotricose subcutânea

Sporotrichosis is a chronic disease, which involves the subcutaneous tissue affecting humans and animals caused by the thermodymorphic fungus Sporothrix spp. Sporotrichosis is endemic in Latin America, mainly in Brazil that had the largest zoonotic outbreak ever recorded, occurring in the city of Rio de Janeiro. The Sporothrix brasiliensis is the species more diagnosed in the outbreak and most virulent, causing severe forms of the disease. Sporotrichosis in cats is endemic, fatal and the main factors due to the high number of cases of the disease in Rio de Janeiro. The treatment is long, and has not been enough to contain the number of cases of sporotrichosis. A vaccine against sporotrichosis could change this paradigm in Brazil. The present work obtained the proteome of S. brasiliensis 5110 strain by 2D electrophoresis, and characterized and identified possible immunogenic proteins by mass spectrometry. By prediction programs were evaluated and synthesized 7 peptide sequence from antigenic proteins that have the highest chances of coupling to the MHC class II molecule. From these 7 peptides only 3 were able to induce proliferation in vitro, called ZR3, ZR4 and ZR8 peptides, that were used as a vaccine in subcutaneous sporotrichosis and evaluated their efficacy through fungal load, lesion diameter, cell profile and cytokine levels. We conclude that ZR8 peptide was the best candidate for sporotrichosis vaccine, since it was able to decrease the lesion diameter, increase the levels of protective cytokines (IFN-γ, IL-17A and IL-1ß) and increase the number of CD4+ T cells and CD3-/CD19+ inducing a protective immune response in subcutaneous sporotrichosis

Metabolic interactions between hyperhomocysteinemia and endothelin-1 among Tunisian patients with acute coronary diseases

BACKGROUND: Acute coronary syndromes (ACS) are complex and polygenic diseases which are a real problem of public health. These syndromes require multidisciplinary studies to understand the pathogenesis mechanisms and metabolic interactions between different risk factors.This study aimed to explore the variation of two coronary risk parameters not mentioned by Framingham cohorts, hyperhomocysteinemia and endothelin-1 (ET-1) in Tunisian coronary and the study of the variation of these parameters based on various cardiac risk factors and metabolic relationship between them.To 157 coronary and 142 healthy subjects, the concentration of homocysteine was quantified by fluorescence polarization immunoassay; the concentration of ET-1 was measured by an analytical technique, the High Performance Liquid Chromatography (HPLC) coupled with mass spectrometry. RESULTS: Our study showed that homocysteine and ET-1 were significantly higher in patients compared to healthy subjects (24.40 ± 12.5 µmol/L vs 7.44 ± 2.5 µmol/L p <0.00001) for homocysteine and (15.2 ± 5.3 nmol/L vs 7.1 ± 2.7 nmol/L, p <0.00001) for ET-1. On the other hand, homocysteine varies according to tobacco and diabetes while ET-1 depends on the sex, hypertension, smoking, obesity and dyslipidemia and a statistically negative correlation was shown between homocysteine and ET-1 in coronary patients (r = -0.66 p <0.00001. CONCLUSION: The study of the variation of these two parameters in coronary patients and metabolic exploration of the relationship between homocysteine and ET-1 according to various risk factors and the interactions between themselves facilitates the decision of therapeutic treatment.

Prevalence of visual impairment in El Salvador: inequalities in educational level and occupational status / Prevalencia de deficiencia visual en El Salvador: desigualdades según el nivel educativo y la situación laboral

OBJECTIVE: To examine the prevalence of blindness, visual impairment, and related eye diseases and conditions among adults in El Salvador, and to explore socioeconomic inequalities in their prevalence by education level and occupational status, stratified by sex. METHODS: Based upon the Rapid Assessment of Avoidable Blindness (RAAB) methodology, this nationwide sample comprised 3 800 participants (3 399 examined) ≥ 50 years old from 76 randomly selected clusters of 50 persons each. The prevalence of blindness, visual impairment and related eye diseases and conditions, including uncorrected refractive error (URE), was calculated for categories of education level and occupational status. Multiple logistic regression models were fitted to calculate odds ratios (ORs) and 95% confidence intervals (CIs) and stratified by sex. RESULTS: Age-adjusted prevalence was 2.4% (95% CI: 2.2-2.6) for blindness (men: 2.8% (95% CI: 2.5-3.1); women: 2.2% (95% CI: 1.9-2.5)) and 11.8% (95% CI: 11.6-12.0) for moderate visual impairment (men: 10.8% (95% CI: 10.5-11.1); women: 12.6% (95% CI: 12.4-12.8)). The proportion of visual impairment due to cataract was 43.8% in men and 33.5% in women. Inverse gradients of socioeconomic inequalities were observed in the prevalence of visual impairment. For example, the age-adjusted OR (AOR) was 3.4 (95% CI: 2.0-6.4) for visual impairment and 4.3 (95% CI: 2.1-10.4) for related URE in illiterate women compared to those with secondary education, and 1.9 (95% CI: 1.1-3.1) in cataract in unemployed men. CONCLUSIONS: Blindness and visual impairment prevalence is high in the El Salvador adult population. The main associated conditions are cataract and URE, two treatable conditions. As socioeconomic and gender inequalities in ocular health may herald discrimination and important barriers to accessing affordable, good-quality, and timely health care services, prioritization of public eye health care and disability policies should be put in place, particularly among women, the unemployed, and uneducated people.

OBJETIVO: Analizar la prevalencia de la ceguera, la deficiencia visual, y las enfermedades y afecciones oculares relacionadas en adultos de El Salvador, y explorar las desigualdades socioeconómicas en cuanto a su prevalencia según el nivel educativo y la situación laboral, estratificados por sexos. MÉTODOS: Se adoptó el método de Evaluación Rápida de la Ceguera Evitable, y se escogió una muestra a escala nacional de 3 800 participantes (de ellos se examinaron 3 399) de 50 años de edad o mayores, pertenecientes a 76 agrupamientos seleccionados aleatoriamente y constituidos por 50 personas cada uno. Se calculó la prevalencia de la ceguera, la deficiencia visual y las enfermedades y afecciones oculares relacionadas, incluido el error de refracción no corregido, según las diferentes categorías de nivel educativo y situación laboral. Se emplearon modelos de regresión logística múltiple para calcular las razones de posibilidades (OR) y los intervalos de confianza (IC) de 95%, y se estratificaron por sexos. RESULTADOS: La prevalencia ajustada por edad fue de 2,4% (IC de 95%: 2,2-2,6) para la ceguera (hombres: 2,8% [IC de 95%: 2,5-3,1]; mujeres: 2,2% [IC de 95%: 1,9-2,5]) y de 11,8% (IC de 95%: 11,6-12,0) para la deficiencia visual moderada (hombres: 10,8% [IC de 95%: 10,5-11,1]; mujeres: 12,6% [IC de 95%: 12,4-12,8]). La proporción de deficiencias visuales debidas a catarata fue de 43,8% en los hombres y de 33,5% en las mujeres. En la prevalencia de la deficiencia visual se observaron gradientes inversos de desigualdades socioeconómicas. Por ejemplo, la OR ajustada por edad fue de 3,4 (IC de 95%: 2,0-6,4) para la deficiencia visual y de 4,3 (IC de 95%: 2,1-10,4) para el error de refracción no corregido relacionado en las mujeres analfabetas, en comparación con las que tenían un nivel de educación secundaria, y fue de 1,9 (IC de 95%: 1,1-3,1) para la catarata en los hombres desempleados. CONCLUSIONES: La prevalencia de ceguera y deficiencia visual es alta en la población adulta de El Salvador. Las principales afecciones asociadas son la catarata y el error de refracción no corregido, ambas tratables. Puesto que las desigualdades socioeconómicas y de género en materia de salud ocular pueden ser indicativas de discriminación y de la existencia de barreras importantes para obtener acceso a servicios de atención de salud asequibles, de buena calidad y oportunos, es preciso dar prioridad a la atención oftalmológica pública y a las políticas dirigidas a corregir la discapacidad, en particular en las mujeres y en las personas desempleadas y sin formación.

Comparative proteomics analysis of chronic atrophic gastritis: changes of protein expression in chronic atrophic gastritis without Helicobacter pylori infection

Chronic atrophic gastritis (CAG) is a very common gastritis and one of the major precursor lesions of gastric cancer, one of the most common cancers worldwide. The molecular mechanism underlying CAG is unclear, but its elucidation is essential for the prevention and early detection of gastric cancer and appropriate intervention. A combination of two-dimensional gel electrophoresis and mass spectrometry was used in the present study to analyze the differentially expressed proteins. Samples from 21 patients (9 females and 12 males; mean age: 61.8 years) were used. We identified 18 differentially expressed proteins in CAG compared with matched normal mucosa. Eight proteins were up-regulated and 10 down-regulated in CAG when compared with the same amounts of proteins in individually matched normal gastric mucosa. Two novel proteins, proteasome activator subunit 1 (PSME1), which was down-regulated in CAG, and ribosomal protein S12 (RPS12), which was up-regulated in CAG, were further investigated. Their expression was validated by Western blot and RT-PCR in 15 CAG samples matched with normal mucosa. The expression level of RPS12 was significantly higher in CAG than in matched normal gastric mucosa (P < 0.05). In contrast, the expression level of PSME1 in CAG was significantly lower than in matched normal gastric mucosa (P < 0.05). This study clearly demonstrated that there are some changes in protein expression between CAG and normal mucosa. In these changes, down-regulation of PSME1 and up-regulation of RPS12 could be involved in the development of CAG. Thus, the differentially expressed proteins might play important roles in CAG as functional molecules.

Novas funções da proteina AIRE: 1) seu papel na resposta mediada por dectina-1 em fagocitos mononucleares humanos: 2) sua associação com a queratina 17, proteina dos filamentos intermediarios / New roles of AIRE protein

A Poliendocrinopatia autoimune associada a candidíase e distrofia ectodérmica (APECED) é um síndrome caracterizado pela presença de pelo menos dois sintomas clínicos, endocrinopatia autoimune, sendo que as mais comuns são hipoparatiroidismo, doença de Addison, além de candidíase mucocutânea crônica. É também comum nos pacientes o desenvolvimento de distrofia ectodérmica, como distrofia nas unhas ou alopécia. O APECED é produzido por mutações no gene AIRE, que codifica uma proteína com propriedades reguladoras na transcrição de proteínas ectópicas no timo, o que estaria envolvido na seleção negativa de células T auto-reativas, e conseqüentemente no desenvolvimento da doença autoimune. No entanto a associação da deficiência da proteína AIRE com a suscetibilidade a candidíase ou a distrofia ectodérmica permanecem obscuras. No presente trabalho, investigamos a possibilidade que esta associação esteja envolvida com a expressão e função da proteína AIRE no ambiente extra-tímico. Usando células de sangue periférico de pacientes com mutações no AIRE...

The autoimmune polyendocrinopathy candidiasis and ectodermal dystrophy (APECED) is characterized by the presence of two from three major clinical symptoms: Addison's disease, and/or hypoparathyroidism, and/or chronic mucocutaneous candidiasis. These patients develop also ectodermal dystrophies like nail dystrophy and alopecia. APECED is caused by mutations in the autoimmune regulator gene (AIRE). This gene encodes a protein with DNA binding capacity that can transcriptionally modulate ectopic peripheral tissue antigen (PTA) expression in the thymus, facilitating T cell negative selection. Defects in AIRE may be related with the development of multipleendocrine failure of autoimmune origin in patients with APECED. In spite of this, the role of AIRE deficiency in the C. albicans susceptibility or ectodermal dystrophy, common features in APECED patients, remains to be elucidated. In the present work we explored the hypothesis that candidiasis and ectodermal dystrophy are associated with the extra-thymic role of AIRE...

Análise proteômica da forma tripomastigota de uma população de Trypanosoma cruzi susceptível e outra resistente ao benzonidazol / Proteomic analysis of trypomastigotes of Trypanosoma cruzi a population of susceptible and resistant to benznidazole another

A Doença de Chagas é um grande problema de saúde pública na América Latina. Atualmente nos países das Américas Central e do Sul há de 16 a 20 milhões de pessoas infectadas pelo Trypanosoma cruzi e 40 milhões sob risco da infecção. O tratamento da Doença de Chagas com os nitroderivados, benzonidazol e nifurtimox, apresenta consideráveis efeitos colaterais, além de baixa eficácia na fase crônica da doença e variações na eficácia em pacientes de diferentes origens geográficas. Este fato pode ser explicado pela resistência natural do T. cruzi aos nitroderivados. A resistência a drogas tem um grande impacto na quimioterapia da Doença de Chagas, aumentando a falha terapêutica e limitando as opções de tratamento. Através de estudos dos mecanismos de resistência do T. cruzi a drogas, novos alvos bioquímicos poderão ser identificados. O objetivo deste trabalho é. identificar proteínas nas formas tripomastigotas do T. cruzi que possam estar envolvidas no mecanismo de resistência ao benzonidazol. Devido às diferenças entre as formas morfoevolutivas do parasito, é importante que o mecanismo de resistência seja estudado nas diferentes fases do seu ciclo de vida. Além disso, a análise proteômica é particularmente importante porque a regulação da expressão gênica nestes organismos ocorre por mecanismos de controle pós-transcricionais. As formas tripomastigotas foram obtidas através de infecção in vitro de células Vero com duas populações de T. cruzi: BZR, selecionada in vivo com resistência ao benzonidazol, e seu par susceptível,BZS (Murta & Romanha, 1998).

Para garantir a qualidade das amostras de tripomastigotas, a contaminação da cultura de células e parasitos por Mycoplasma foi monitorada através da PCR gênero-específica e da observação de células ao microscópio óptico de fluorescência. A diferença de susceptibilidade determinada in vitro ao Bz entre as populações BZR e BZS de T. cruzi foi de aproximadamente 8 vezes quando avaliamos a atividade direta da droga. sobre as formas tripomastigotas, e de 2 a 3 vezes sobre a liberação dos parasitos de. células infectadas. Formas tripomastigotas das duas populações foram produzidas, purificadas e concentradas em quantidade suficiente para a análise por eletrofores e bidimensional. Proteína total das duas populações foi analisada por eletroforese bidimensional e as imagens dos 6 géis bidimensionais de 17cm (triplicatas de cada população) foram analisadas pelo software PDQuest. As proteínas diferencialmente expressas entre as duas populações foram indicadas a partir de análise quantitativa da intensidade dos spots detectados e pareados entre os géis bidimensionais de xv cada população. 244 spots foram analisados e 23 spots apresentaram intensidade diferencial entre as populações, sendo: 3 expressos somente na população BZR e 5 somente na população BZS, 5 mais expressos na população BZR e 10 mais expressos na população BZS. Estes spots serão localizados nos géis, excisados e digeridos por Tripsina para identificação por espectrometria de massa

Análise proteômica da forma tripomastigota de uma população de Trypanosoma cruzi susceptível e outra resistente ao benzonidazol

A Doença de Chagas é um grande problema de saúde pública na América Latina. Atualmente nos países das Américas Central e do Sul há de 16 a 20 milhões de pessoas infectadas pelo Trypanosoma cruzi e 40 milhões sob risco da infecção. O tratamento da Doença de Chagas com os nitroderivados, benzonidazol e nifurtimox, apresenta consideráveis efeitos colaterais, além de baixa eficácia na fase crônica da doença e variações na eficácia em pacientes de diferentes origens geográficas. Este fato pode ser explicado pela resistência natural do T. cruzi aos nitroderivados. A resistência a drogas tem um grande impacto na quimioterapia da Doença de Chagas, aumentando a falha terapêutica e limitando as opções de tratamento. Através de estudos dos mecanismos de resistência do T. cruzi a drogas, novos alvos bioquímicos poderão ser identificados. O objetivo deste trabalho é. identificar proteínas nas formas tripomastigotas do T. cruzi que possam estar envolvidas no mecanismo de resistência ao benzonidazol. Devido às diferenças entre as formas morfoevolutivas do parasito, é importante que o mecanismo de resistência seja estudado nas diferentes fases do seu ciclo de vida. Além disso, a análise proteômica é particularmente importante porque a regulação da expressão gênica nestes organismos ocorre por mecanismos de controle pós-transcricionais. As formas tripomastigotas foram obtidas através de infecção in vitro de células Vero com duas populações de T. cruzi: BZR, selecionada in vivo com resistência ao benzonidazol, e seu par susceptível,BZS (Murta & Romanha, 1998).

Para garantir a qualidade das amostras de tripomastigotas, a contaminação da cultura de células e parasitos por Mycoplasma foi monitorada através da PCR gênero-específica e da observação de células ao microscópio óptico de fluorescência. A diferença de susceptibilidade determinada in vitro ao Bz entre as populações BZR e BZS de T. cruzi foi de aproximadamente 8 vezes quando avaliamos a atividade direta da droga. sobre as formas tripomastigotas, e de 2 a 3 vezes sobre a liberação dos parasitos de. células infectadas. Formas tripomastigotas das duas populações foram produzidas, purificadas e concentradas em quantidade suficiente para a análise por eletrofores e bidimensional. Proteína total das duas populações foi analisada por eletroforese bidimensional e as imagens dos 6 géis bidimensionais de 17cm (triplicatas de cada população) foram analisadas pelo software PDQuest. As proteínas diferencialmente expressas entre as duas populações foram indicadas a partir de análise quantitativa da intensidade dos spots detectados e pareados entre os géis bidimensionais de xv cada população. 244 spots foram analisados e 23 spots apresentaram intensidade diferencial entre as populações, sendo: 3 expressos somente na população BZR e 5 somente na população BZS, 5 mais expressos na população BZR e 10 mais expressos na população BZS. Estes spots serão localizados nos géis, excisados e digeridos por Tripsina para identificação por espectrometria de massa

Aplicaçäo da técnica de espectrometria de massa, tipo quadrupolo, acoplada à fonte de plasma induzido por argônio (ICP/MS), na determinaçäo de elementos - traço em água, em líquido de diálise e em soro de pacientes renais crônicos submetidos a tratamento de hemodiálise / Technical application of mass spectrometry, quadrupole type, coupled to plasma source introduced by argon (ICP/MS) in the determination of elements - water trace in dialysis liquid and in serum of chronic renal patients submitted the hemodialysis tre

Utilizando a técnica de espectrometria de massa, tipo quadrupolo, acoplada à fonte de plasma induzido por argônio, foi possível avaliar o perfil de alguns elementos - traço no soro de pacientes com insuficiência renal crônica em tratamento de hemodiálise e comparar ao grupo controle. Adicionalmente, esses elementos foram dosados na água utilizada para o preparo das soluções dialíticas e no dialisato. Os resultados indicam que, nos pacientes submetidos à hemodiálise, as concentrações séricas de manganês, cobre, zinco, selênio e bário estäo reduzidas e que as de alumínio, níquel, estrôncio e molibdênio estäo elevadas, quando comparadas ao grupo controle. Os sais utilizados na preparaçäo do dialisato foram considerados a principal fonte de contaminaçäo dos pacientes por estrôncio...