Epidemiological relevance of dogs for the prevention of Toxoplasma gondii, Neospora caninum and Leptospira spp / Relevância epidemiológica de cães para a prevenção de Toxoplasma gondii, Neospora caninum e Leptospira spp

Abstract This study evaluated the seroprevalence of Toxoplasma gondii, Neospora caninum and Leptospira spp. in dogs from Foz do Iguaçu, Paraná, Brazil. Indirect immunofluorescent antibody test was used to detect antibodies anti-T.gondii and anti-N. caninum. Immunoenzymatic assay and microscopic serum agglutination were used for screening antibodies anti-T.gondii and anti-Leptospira spp., respectively. The results were: 67.02% of the samples reactive for T.gondii and 1.38% for N. caninum, both without statistically significant variables. For Leptospira spp. the results indicated seroprevalence of 23.11%. The analysis of the variables without distinction of serovar showed association for intrinsic characteristics as breed, age, nutritional status and dog category. The extrinsic variables as city region and access to the street presented association (p<0.05). The most prevalent serovars were: Canicola 59.47%; Bratislava 13.07% and Butembo 15.68%. Variables that make up the adjusted multiple analysis model using Leptospira spp. were: age, breed and nutritional status; serovar Canicola, sex, nutritional status and area (p<0.05); serovar Bratislava, lymphadenomegaly and presence of fleas (p<0.05). Given the results obtained, dogs can be used as sentinels for toxoplasmosis and leptospirosis in Foz do Iguaçu and other cities with similar outcomes. In addition, preventive measures should be taken by health authorities because they are zoonoses and humans are also at risk.

Resumo Este estudo avaliou a soroprevalência de Toxoplasma gondii, Neospora caninum e Leptospira spp. em cães de Foz do Iguaçu, Paraná, Brasil. O teste de imunofluorescência indireta foi utilizado para detectar anticorpos anti-T. gondii e anti-N. caninum. Ensaio imunoenzimático e soroaglutinação microscópica foram utilizados para pesquisa de anticorpos anti-T. gondii e anti-Leptospira spp., respectivamente. Os resultados obtidos foram: 67,02% (435/649) das amostras reativas para T. gondii e, 1,38% (9/649) para N. caninum, ambas com ausência de variáveis significativas estatisticamente. Para Leptospira spp. os resultados indicaram soroprevalência de 23,11% (153/649). A análise das variáveis sem distinção de sorovar mostraram associação para caraterísticas intrísecas como raça, idade, estado nutricional e categoria de cães. Para as variáveis extrínsecas, a região da cidade e ter acesso à rua mostraram associação estatística (p<0,05). Os sorovares mais prevalentes foram: Canicola com 59,47% (91/153); Bratislava 13,07% (20/153) e Butembo 15,68% (24/153). As variáveis que compõem o modelo de análise multivariada ajustada usando como desfecho Leptospira spp. foram: idade, raça, estado nutricional e área. Para o sorovar Canicola, as variáveis significantes (p<0,05) foram sexo, estado nutricional e área; para o sorovar Bratislava, as variáveis significantes (p<0,05) foram linfadenomegalia e presença de pulgas. Dos resultados obtidos, cães podem ser usados como sentinelas para infecção por T. gondii e Leptospira spp. na cidade de Foz do Iguaçu e em outras cidades com desfechos similares. Além disso, medidas preventivas devem ser tomadas pelas autoridades de saúde, pois são zoonoses e os seres humanos também estão em risco.

Clinical and epidemiological characteristics of Chagas disease in an endemic area of Sergipe State, Brazil

Abstract INTRODUCTION: We evaluated clinical and epidemiological characteristics of Trypanosoma cruzi infection in Sergipe. METHODS: In this cross-sectional study, we collected serum samples to identify serological markers of Chagas disease. A questionnaire was used, and electrocardiogram, echocardiogram, chest radiography, and contrast radiography of esophagus and colon were performed. RESULTS: T. cruzi infection seroprevalence was 12.1%, mean age of subjects was 55 years, 90% had an elementary school education, 78.6% were agriculture workers, and 60.5% had electrocardiographic abnormalities. CONCLUSIONS: A high prevalence of T. cruzi infection was observed in mostly elderly individuals.

Vimentin and Anti Vimentin Antibodies in Chagas' Disease / Vimentina e Anticorpos Anti-Vimentina na Doença de Chagas

Abstract Background: Vimentin is a main structural protein of the cell, a component of intermediate cell filaments and immersed in cytoplasm. Vimentin is mimicked by some bacterial proteins and anti-vimentin antibodies occur in autoimmune cardiac disease, as rheumatic fever. In this work we studied vimentin distribution on LLC-MK2 cells infected with T. cruzi and anti-vimentin antibodies in sera from several clinical pictures of Chagas' disease or American Trypanosomiasis, in order to elucidate any vimentin involvement in the humoral response of this pathology. Objective: We standardized an indirect immunofluorescence assay (IFI) to determine sub cellular expression in either parasites and host cells, and ELISA to evaluate anti-vimentin antibodies in sera fron chagasic patients. Methods: We analyzed the distribution of vimentin in culture cells using indirect fluorescent assays, using as external controls anti-T. cruzi sera, derived from chronic infected patients for identification of the parasites in the same model. After infection and growth of T.cruzi amastigotes, those cells express larger amounts of vimentin, with heavy staining of cytoplasm outside the parasitophorous vacuole and some particle shadowing patterns, suggesting that vimentin are associated with cell cytoplasm. Anti-vimentin antibodies were present in most American trypanosomiasis samples, but notably, they are much more present in acute (76, 9%) or clinical defined syndromes, especially cardiac disease (87, 9%). Paradoxically, they were relatively infrequent in asymptomatic (25%) infected patients, which had a clearly positive serological reaction to parasite antigens, but had low frequency of anti-vimentin antibodies, similar to controls (2,5%). Conclusion: Our current data revealed that anti-vimentin antibodies induced during T. cruzi infection could be a marker of active disease in the host and its levels could also justify drug therapy in American Trypanosomiasis chronic infection, as a large group of asymptomatic patients would be submitted to treatment with frequent adverse reactions of the available drugs. Anti-vimentin antibodies could be a marker of cardiac muscle cell damage, appearing in American Trypanosomiasis patients during active muscle cell damage.

Resumo Fundamento: A Vimentina é uma proteína estrutural importante da célula, um componente dos filamentos celulares intermediários e imersa no citoplasma. Algumas proteínas bacterianas imitam a Vimentina e anticorpos anti-vimentina ocorrem em doenças cardíacas auto-imunes, como a febre reumática. Neste trabalho, estudamos a distribuição de vimentina em células LLC-MK2 infectadas com T. Cruzi e anticorpos anti-vimentina em soros de várias imagens clínicas da doença de Chagas ou tripanossomíases americanas, a fim de elucidar qualquer implicação da vimentina na resposta humoral desta patologia. Objetivo: padronizamos um teste de imunofluorescência indireta (IFI) para determinar a expressão subcelular em parasitas e células hospedeiras, e ELISA para testar anticorpos anti-vimentina em soros de pacientes chagásicos. Métodos: analisamos a distribuição de vimentina em células de cultura usando ensaios fluorescentes indiretos, utilizando como controles externos soros anti-T. Cruzi, derivados de pacientes com infecção crônica para a identificação de parasitas no mesmo modelo. Após a infecção e o crescimento de amastigotas de T. Cruzi, essas células expressam grandes quantidades de vimentina, com forte coloração do citoplasma fora da vacuola parasitófora e alguns padrões de sombreamento das partículas, sugerindo que a vimentina está associada ao citoplasma da célula. Os anticorpos anti-vimentina estavam presentes na maioria das amostras americanas de tripanossomíases, mas estão notavelmente mais presentes em síndromes agudas ou clinicamente definidas (76,9%), especialmente em doenças cardíacas (87,9%). Paradoxalmente, eram relativamente infrequentes em pacientes infectados assintomáticos (25%), que apresentavam uma reação sorológica claramente positiva aos antígenos parasitas, mas apresentavam baixa frequência de anticorpos anti-vimentina, semelhante aos controles (2,5%). Conclusão: Nossos dados atuais revelaram que os anticorpos anti-vimentina induzidos durante a infecção por T. Cruzi poderiam ser um marcador de doença ativa no hospedeiro e seus níveis também poderiam justificar o tratamento farmacológico em infecção crônica com tripanossomíase americana, uma vez que um grande grupo de pacientes assintomáticos seria submetido a tratamento com reações adversas frequentes aos medicamentos disponíveis. Os anticorpos anti-vimentina poderiam ser um marcador de danos nas células do músculo cardíaco, que aparece em pacientes com tripanossomíase americana durante o dano das células musculares ativas.

Prevalence of Trypanosoma cruzi/HIV coinfection in southern Brazil

Abstract Chagas disease reactivation has been a defining condition for acquired immune deficiency syndrome in Brazil for individuals coinfected with Trypanosoma cruzi and HIV since 2004. Although the first coinfection case was reported in the 1980s, its prevalence has not been firmly established. In order to know coinfection prevalence, a cross-sectional study of 200 HIV patients was performed between January and July 2013 in the city of Pelotas, in southern Rio Grande do Sul, an endemic area for Chagas disease. Ten subjects were found positive for T. cruzi infection by chemiluminescence microparticle immunoassay and indirect immunofluorescence. The survey showed 5% coinfection prevalence among HIV patients (95% CI: 2.0-8.0), which was 3.8 times as high as that estimated by the Ministry of Health of Brazil. Six individuals had a viral load higher than 100,000 copies per µL, a statistically significant difference for T. cruzi presence. These findings highlight the importance of screening HIV patients from Chagas disease endemic areas.

Analysis of the seroprevalence of and factors associated with Chagas disease in an endemic area in Northeastern Brazil

ABSTRACT INTRODUCTION: Chagas disease (CD) is currently considered a neglected disease; hence, identifying the factors associated with its high prevalence is essential. This study aimed to identify the seroprevalence of and the possible factors associated with CD in inhabitants of the City of Limoeiro do Norte, Northeastern Brazil. METHODS: Between April and November 2013, blood collection was conducted and a semi-structured questionnaire was administered. Blood samples that showed positive or possible serology for anti-Trypanosoma cruzi antibodies based on indirect immunofluorescence, hemagglutination indirect, and an enzyme-linked immunosorbent assay were analyzed. Associations between CD positivity and the study variables were analyzed using prevalence ratios (PR) with 95% confidence intervals (CI). RESULTS: A total of 812 individuals were analyzed, of which T. cruzi seropositivity was determined in 4.2% (34 individuals). Sociodemographic variables showing a significant association with T. cruzi positivity included age >50 years (PR = 27.6; 95% CI = 6.66-114.4), elementary level education (PR = 5.15; 95% CI = 1.83-14.47), and retirement (PR = 7.25; 95% CI = 3.72-14.14). Positivity for T. cruzi was 6.17 times higher in those who had a history of living in rammed earth houses compared with those who did not (95% CI = 2.19-17.37). There was no evidence of vertical transmission in the individuals studied. Among the individuals infected with T. cruzi, the majority reported having a comorbidity (p < 0.01). CONCLUSIONS: This study demonstrated the seroprevalence of CD and identified factors associated with a high prevalence of CD.

Neospora caninum and Toxoplasma gondii serodiagnosis in human immunodeficiency virus carriers

ABSTRACTINTRODUCTION:Neospora caninum and Toxoplasma gondii belong to the Sarcocystidae family, and both have one definitive and various intermediary hosts. Owing to their weak immune systems, immunocompromised persons might be prone to opportunistic infections. The aim of this study was to investigate the presence of anti- N. caninum and anti- T. gondii antibodies in immunocompromised individuals.METHODS:This cross-sectional study investigated the rates of N. caninum and T. gondii , as assessed using immunofluorescent antibody reaction (IFAT) with 1:50 and 1:16 dilution, respectively, in patients with human immunodeficiency virus (HIV).RESULTS:The seropositivity for N. caninum was 26.1% (81/310) in Mato Grosso do Sul and 31.2% (10/32) in Paraná and for T. gondii was 76.8% (238/310) in Mato Grosso do Sul and 68.7% (22/32) in Paraná.CONCLUSIONS:There is evidence of anti- N caninum and anti- T. gondii antibodies in patients with HIV. Other aspects of T. gondii , which is a zoonosis, and N. caninum , which might affect immunodeficient individuals, need to be evaluated and reported.

Padrões histopatológicos e deposição de colágenos durante a progressão da fibrose hepática como fatores prognósticos da atresia de vias biliares / Histopathological and collagens deposition patterns during hepatic fibrosis progression as prognostic factors in

Atresia de vias biliares (AVB) é uma hepatopatia colestática específica da criança, de etiologia desconhecida, com evolução para fibrose hepática precoce. AVB é a principal causa de cirrose na infância e principal indicação de transplante hepático pediátrico (Tx). Compreender os fatores envolvidos na progressão da fibrose é fundamental para estabelecer tratamentos efetivos nas hepatopatias crônicas. Identificar padrões histopatológicos associados ao prognóstico da AVB permitiria melhor planejamento dos centros de transplante e adequado aconselhamento familiar. OBJETIVO: Estabelecer padrões de marcadores histopatológicos e de imunofluorescência para colágenos em biópsias hepáticas iniciais e finais de pacientes com AVB submetidos a tratamento cirúrgico. Correlacionar esses marcadores com o prognóstico da doença, definido com base no tempo de evolução até realização do Tx. MÉTODO: Avaliação histológica de alterações biliares e fibrose hepática e histomorfometria da fibrose marcada por picrossírius e da deposição dos colágenos tipos I, III, IV e V marcados por imunofluorescência indireta (IF), em biópsias hepáticas iniciais e finais de 36 pacientes com AVB submetidos à hepatoportoenterostomia de Kasai (KPE) e ao Tx nos últimos 20 anos em nossa instituição. RESULTADOS: A mediana das idades de realização da KPE foi de 12,5 semanas (6-20) e do Tx foi de 27 meses (6-120). Reação ductular e malformação de placa ductal foram mais intensas nas biópsias iniciais (p < 0,05), enquanto fibrose hepática e ductopenia apresentaram padrão progressivo (p < 0,001), sem correlações com a idade de realização da KPE nem com o tempo de evolução até Tx. A morfometria da fibrose hepática marcada pelo picrossírius nas biópsias iniciais apresentou correlação positiva com a idade da KPE (p = 0,01), mas não com a idade do Tx (p = 0,24). A deposição perissinusoidal dos colágenos dos tipos III e V foi mais intensa nas biópsias iniciais (p < 0,01), enquanto os colágenos dos tipos I e IV...

Biliary atresia (BA) is a specific cholestatic liver disease of unknown etiology that affects children and progresses to early hepatic fibrosis. BA is the main indication of pediatric liver transplantation (LTx). Understanding the factors involved in the progress of fibrosis is essential to establish effective treatment to chronic liver disease. Histopathological markers in liver biopsies could be useful to predict progression to end stage disease and to make it possible to improve planning in transplantation centers and parental orientation. OBJECTIVE: To establish histopathological or immunohistochemical markers in initial or final liver biopsies of BA patients and correlate those markers with prognosis, as defined by progression time lapse until LTx. METHOD: Histological analysis of multiple parameters of biliary alterations and morphometrical assessment of liver fibrosis were performed, besides indirect immunofluorescence assays (IF) for type I, III, IV and V collagens in initial and final liver biopsies of 36 patients with BA submitted to Kasai hepatoportoenterostomy (KPE) and LTx in the last 20 years in a single center. RESULTS: The median of the ages at KPE was 12.5 weeks (6-20) and at LTx was 27 months (6-120). Ductular reaction and ductal plate malformation were more severe in the initial biopsies (p < 0.05), while ductopenia and liver fibrosis were more severe in final biopsies (p < 0.001), though without correlation with age at KPE nor with progression time lapse until LTx. Morphometrical assessment of liver fibrosis marked by picrosirius red in initial biopsies demonstrated positive correlation with age at KPE (p = 0.01) but not with age at LTx (p = 0.24). The perisinusoidal deposition of type III and V collagens was more extended in the initial biopsies (p < 0.01), while type I and IV collagens deposition indicated progression (p < 0.01). Patients with large amounts of perisinusoidal type I collagen in the initial biopsies had worse...

Reproducibilidad de pruebas serológicas para el diagnóstico de infección por Trypanosoma cruzi en mujeres embarazadas de una zona endémica de Santander, Colombia / Reproducibility of serological tests for the diagnosis of Trypanosoma cruzi infection in pregnant women in an endemic area of Santander, Colombia

Introducción. El diagnóstico de infección por Trypanosoma cruzi en fase crónica se hace por medio de pruebas serológicas cuya reproducibilidad no está muy documentada. Objetivo. Evaluar la reproducibilidad de las pruebas serológicas ELISA, IFI y HAI para el diagnóstico de infección por T. cruzi en mujeres embarazadas de una zona endémica de Santander. Materiales y métodos. Mediante la evaluación de la tecnología diagnóstica se determinó la reproducibilidad de las pruebas serológicas ELISA, IFI y HAI en muestras de suero y elución sanguínea, seleccionadas mediante muestreo de corte transversal y pertenecientes a mujeres embarazadas de una zona endémica para enfermedad de Chagas en Santander. Se usó el software Stata, versión 10.0, para los análisis estadísticos. La prueba con la mejor reproducibilidad se determinó por medio de la comparación de los índices kappa más altos de cada técnica. Resultados. Se evaluaron 777 sueros y elución sanguíneas. En suero, la prueba ELISA (punto de corte=0,3), la IFI (punto de corte=1/32) y la HAI (punto de corte=1/16) presentaron índices kappa mayores de 0,8 (0,98, IC 95% : 0,93-1,00; 0,98, IC 95% : 0,92-1,00 y 0,88, IC 95% : 0,74-0,97, respectivamente); no se observaron diferencias estadísticamente significativas entre las tres pruebas evaluadas (p>0,05). Para la elución sanguínea, el índice kappa estuvo por debajo de 0,8 (valor kappa más alto: 0,55, IC 95% : 0,41-0,68). Conclusiones. Las tres pruebas serológicas presentaron reproducibilidad perfecta en suero, determinada mediante el índice kappa, por lo que cualquiera de ellas sería útil para establecer el diagnóstico de infección por T. cruzi . Por su simplicidad y su costo, la prueba ELISA se recomienda como prueba de elección para los programas de tamización de esta infección.

Introduction: The diagnosis of chronic Trypanosoma cruzi infection is supported by serological tests whose reproducibility has not been well documented. Objective: To evaluate the reproducibility of the serological tests ELISA, IFAT and IHAT for the diagnosis of T. cruzi infection in pregnant women in an endemic zone in Santander. Materials and methods: Through an evaluation study of diagnostic technologies, the reproducibility of the serological tests ELISA, IFAT and IHAT was determined in serum and eluted blood from pregnant women living in an endemic area for Chagas´ disease in Santander. The samples were selected by cross sectional sampling. The software Stata ™ version 10.0 was used for statistical analysis. By means of the comparison of the highest kappa coefficient of each technique, the test with the best reproducibility was determined. Results: A total of 777 samples were tested. In serum, ELISA (cutoff point: 0.3), IFAT (cutoff point: 1/32) and IHAT (cutoff point: 1/16) had kappa coefficients greater than 0.8 (0.98, 95% CI: 0.93-1.00; 0.98, 95% CI: 0.92-1.00 and 0.88, 95% CI: 0.74-0.97, respectively); no statistically significant differences among the three tests were found (p> 0.05). For the blood eluates, kappa coefficients were below 0.8 (highest kappa: 0.55, 95% CI: 0.41-0.68). Conclusions: For the three serological tests using serum, the reproducibility determined by the kappa coefficient was perfect. Selecting any of them is useful for the diagnosis of T. cruzi infection. Given its simplicity and cost, the ELISA test is recommended for screening for this infection.

Diagnóstico de neumocistosis a través de la inmunofluorescencia directa y la PCR anidada en pacientes con enfermedad pulmonar obstructiva crónica / Diagnosis through pneumocystosis direct immunofluorescence and nested PCR in patients with chronic obstructive pulmonary disease

La asociación EPOC- neumocitosis está descrita y existe la necesidad de optimizar la diferenciación entre enfermedad y colonización. Demostrar la presencia del Pneumocistys Jirovecci, como patógeno y/o colonizador. Estudio descriptivo, analítico, de cohorte de pacientes con diagnóstico de EPOC del Hospital General del Oeste (Caracas, Venezuela) durante el periodo de abril – julio 2012 con seguimiento hasta julio de 2013 y aplicación de la técnica de inmunofluorescencia directa (IFD) y/o PCR anidada (PCRa) en muestra de esputo (espontáneo – inducido) durante los periodos asintomáticos o durante la exacerbación del EPOC en seguimiento de un año. Se incluyeron 20 pacientes en el reclutamiento, con seguimiento al primer control de 5 pacientes; de estos solo 2 cumplieron la medición de esputo. Para la tercera evaluación una paciente había fallecido y la otra no cumplió con el seguimiento. Se demostró IFI+ en 10% de los reclutados, todos con clínica de exacerbación de la EPOC. La PCRa se demostró en 45%, 2 con exacerbación y el resto sin exacerbación. De los dos pacientes de seguimiento, una fue positiva para PCRa y no tenía exacerbación, la otra negativa por ambos métodos. Se demostró infección por Pj en los pacientes con EPOC exacerbado a través de IFI y la PCRa señala su positividad en infección pero también en aquellos sin infección o exacerbación documentando así la colonización y potencial fuente de infección para neumocistosis. Se demostró infección por Pj en paciente con exacerbación y colonización a través de la evidencia del genoma del hongo en pacientes sin exacerbación.

Pneumocistosis and COPD association is described and there is a need to differenciate between disease and colonization. To document the presence of Pnemocistys jirovecci as pathogenic or colonizer by direct immunofluoresencence technique (DIF) and/or nested polymerase chain reaction (nPCR) in sputum (spontaneous-induced) during asymptomatic periods or exacerbation of COPD during a year of follow-up. This is a a descriptive, analytic cohort of patients with COPD of the Hospital General del Oeste (Caracas, Venezuela) . They were studied during April - July 2012, with follow-up until July 2013. 20 patients were included. The first control follow up was in 5 patients with only two measures of IFI - PCRa. For the third evaluation one patient had died and the other did not comply with control. IFI + was demonstrated in 10 % of the recruits, all had COPD, exacerbation. PCRa + was demonstrated in 45%, 2 with exacerbation and all other without exacerbation. From the two followed patients one was positive for PCRn and had no exacerbation, the other was negative by both methods. Pj infection was demonstrated in patients with exacerbated COPD by IFI+ and the PCRa positivity in infection but also in those without infection or exacerbation documenting the colonization and potential source of infection for Pj. Pj infection wasdiagnosed in patients with exacerbation COPD and colonization through the evidence of the genome of the fungus in patients without exacerbation.

SEROLOGICAL SURVEY OF Ehrlichia SPECIES IN DOGS, HORSES AND HUMANS: ZOONOTIC SCENERY IN A RURAL SETTLEMENT FROM SOUTHERN BRAZIL / Investigação sorológica de espécies de Ehrlichia em cães, equinos e humanos de um assentamento rural do sul do Brasil

SUMMARY The aims of this study were to determine the seroprevalence of Ehrlichia spp. and risk factors for exposure in a restricted population of dogs, horses, and humans highly exposed to tick bites in a Brazilian rural settlement using a commercial ELISA rapid test and two indirect immunofluorescent assays (IFA) with E. canis and E. chaffeensis crude antigens. Serum samples from 132 dogs, 16 horses and 100 humans were used. Fifty-six out of 132 (42.4%) dogs were seropositive for E. canis. Dogs > one year were more likely to be seropositive for E. canis than dogs ≤ one year (p = 0.0051). Ten/16 (62.5%) and 8/16 (50%) horses were seropositive by the commercial ELISA and IFA, respectively. Five out of 100 (5%) humans were seropositive for E. canis and E. chaffeensis. Rhipicephalus sanguineus (n = 291, 97.98%) on dogs and Amblyomma cajennense (n = 25, 96.15%) on horses were the most common ticks found. In conclusion, anti-Ehrlichia spp. antibodies were found in horses; however, the lack of a molecular characterization precludes any conclusion regarding the agent involved. Additionally, the higher seroprevalence of E. canis in dogs and the evidence of anti-Ehrlichia spp. antibodies in humans suggest that human cases of ehrlichiosis in Brazil might be caused by E. canis, or other closely related species. .

RESUMO Objetivou-se determinar a soroprevalência de Ehrlichia spp. e os fatores de risco associados a exposição em uma população restrita de cães, cavalos e humanos altamente expostos a picadas de carrapatos em um assentamento rural brasileiro utilizando um teste comercial de ELISA rápido e dois testes de imunofluorescência indireta (IFI) com antígenos brutos de E. canis e E. chaffeensis. Amostras de soro de 132 cães, 16 cavalos e 100 humanos foram utilizadas. Cinquenta e seis/132 (42,4%) cães foram soropositivos para E. canis. Cães > um ano apresentaram mais chance de serem soropositivos para E. canis do que cães ≤ um ano (p = 0,0051). Dez/16 (62,5%) e 8/16 (50%) cavalos foram soropositivos pelo ELISA comercial e IFI, respectivamente. Cinco/100 (5%) humanos foram soropositivos para E. canis e E. chaffeensis. Rhipicephalus sanguineus (n = 291, 97,98%) nos cães e A. cajennense (n = 25, 96,15%) nos cavalos foram os carrapatos mais encontrados. Concluindo, anticorpos anti-Ehrlichia spp. foram encontrados em cavalos; entretanto, a ausência de uma caracterização molecular impede qualquer conclusão sobre agente envolvido. Além disso, a alta soroprevalência de E. canis em cães e a evidência de anticorpos anti-Ehrlichia sp. em humanos, sugere que os casos de erliquiose humana no Brasil possam ser causados por E. canis ou outra espécie intimamente relacionada. .

Sexually transmitted diseases in a specialized STD healthcare center: epidemiology and demographic profile from january 1999 to december 2009 / Epidemiologia e perfil de impacto das doencas sexualmente transmissiveis atendidas num centro de saude especializado de janeiro de 1999 a dezembro de 2009

BACKGROUND: Sexually Transmitted Diseases are still considered a serious public health problem in Brazil and worldwide. OBJECTIVE: To examine Sexually Transmitted Diseases prevalence and the sickness impact profile of STDs in a reference health center specializing in the treatment of Sexually Transmitted Diseases. METHOD: We collected epidemiological, demographic, clinical and laboratory data from the medical records and interviews of 4,128 patients who had attended the center from January 1999 to December 2009. RESULTS: Male patients outnumbered (76%) females (24%), Caucasians outnumbered (74.3%) those of mixed race (14.8%), blacks (10.8%) and Asians (0.1%). STD occurrence was higher in the 20-29 age group (46.2%) This population included 34.7% high school graduates, 8.7% college graduates and 0.8% illiterates. As for affective-sexual orientation, 86.5% were heterosexual, 7.8% homosexual and 5.5% bisexual. Regarding patients' sexual practices over the previous 30 days, 67.7% reported sexual intercourse with one person, 8.6% had had sex with two persons and 3.9%, with three or more people. The highest incidence of STD was condyloma acuminata, affecting 29.4% of all the patients, genital candidiasis 14.2%, and genital herpes 10.6%. Of the 44.3% who submitted to serologic testing for HIV detection 5% were positive, with a ratio of 6.8 males to 1 female. CONCLUSIONS: STD prevalence remains high in Brazil and it is ...

FUNDAMENTOS: As Doenças Sexualmente Transmissíveis continuam sendo consideradas um grave problema de Saúde Pública no Brasil e no Mundo. OBJETIVO: Conhecer a epidemiologia de um serviço de saúde público brasileiro especializado em Doenças Sexualmente Transmissíveis e o perfil de impacto das principais doenças diagnosticadas nesse serviço. MÉTODO: Realizou-se a avaliação epidemiológica, clínica e laboratorial de 4.128 pacientes atendidos num ambulatório especializado em Doenças Sexualmente Transmissíveis, no período compreendido entre janeiro de 1999 a dezembro de 2009. RESULTADOS: Houve predomínio dos pacientes do sexo masculino (76%) em relação aos do sexo feminino (24%); da raça branca (74,3%) sobre as raças parda (14,8%), negra (10,8%) e amarela (0,1%). A ocorrência das Doenças Sexualmente Transmissíveis foi maior na faixa etária de 20 a 29 anos, com 46,2%. Na população estudada, 34,7% dos pacientes completaram o ensino médio, 8,7% o curso superior e 0,8% eram analfabetos. Em relação à orientação afetivo-sexual, 86,5% eram heterossexuais, 7,8% se relacionavam somente com pessoas do mesmo sexo e 5,5% bissexuais. Em relação a prática sexual nos últimos 30 dias, 67,7% declararam ter mantido relação sexual com apenas um parceiro, 8,6% com dois e 3,9% com três ou mais parceiros. As ...

Comparison of conventional serology and PCR methods for the routine diagnosis of Trypanosoma cruzi infection

Introduction Trypanosoma cruzi, a flagellated protozoan, is the etiologic agent of Chagas disease, and it is estimated that approximately 5 million people in Brazil are infected with this parasite. This work aimed to compare the current diagnostic methods for Chagas disease, including conventional serological (IFAT and ELISA) and molecular techniques (PCR), to introduce PCR as an auxiliary technique. Methods A total of 106 chagasic patients were evaluated: 88 from endemic areas of Parana, 6 from São Paulo, 3 from Minas Gerais, 3 from Rio Grande do Sul, 1 from Bahia and 5 from the Santa Catarina T. cruzi outbreak. The samples were analyzed by conventional serological methods (IFAT, ELISA), hemoculture and PCR to confirm Chagas disease. Results When IFAT was used to determine antibody levels, the sensitivity was 81.7% for patients with the cardiac form of the disease and 100% for the other clinical forms. In contrast, ELISA showed 84% sensitivity and 100% specificity. The use of serological and molecular techniques and their implications for the diagnosis of Chagas disease in non-endemics area are discussed. Conclusions PCR constitutes an excellent support methodology for the laboratory diagnosis of Chagas disease due to its high sensitivity and specificity. .

Análise da função sistólica ventricular esquerda em pacientes com doença de Chagas e função sistólica global e segmentar do ventrículo esquerdo normais através de um novo método de imagem em ecocardiografia: análise da deformação bidimensional / Analysis of the left ventricular systolic function of patients with Chagas disease and normal global and segmental left ventricular systolic function using a new echocardiographic technique: speckle tracking imaging

Fundamento: Apesar dos avanços no controle da transmissão da doença de Chagas, estima-se que ainda existam cerca de 2,5 milhões de portadores crônicos no Brasil. A forma crônica cardíaca desta doença apresenta alta morbimortalidade e estratégias que possam reconhecer o dano ao miocárdio de forma precoce podem ter grande utilidade. A análise da deformação do miocárdio quantifica a contratilidade miocárdica regional e global e recentemente foram desenvolvidos programas que permitem que essa análise possa ser feita pelo ecocardiograma. Objetivos: Determinar se pacientes com doença de Chagas crônica com fração de ejeção do ventrículo esquerdo (VE) normal possuem alterações da função sistólica do VE identificadas pela análise da deformação miocárdica bidimensional (strain ou deformação bidimensional). Metodologia: Pacientes com doença de Chagas crônica sem lesão cardíaca aparente (SLC) ou no estágio A da forma cardíaca (eletrocardiograma alterado com função sistólica global e segmentar normais no ecocardiograma) foram examinados usando-se ecocardiógrafo Vivid 7 (GE Medical Systems). A análise do strain global e segmentar (direções longitudinal, circunferencial e radial) foi realizada através do programa Echopac (GE Medical Systems). Voluntários saudáveis (exame físico, eletrocardiograma e ecocardiograma normais e sorologia para doença de Chagas negativa) constituíram o grupo controle (C). Os grupos foram comparados por análise de variância (ANOVA). Os pacientes tinham idade entre 18 e 60 anos. Resultados: Foram avaliados 52 pacientes SLC, 29 no estágio A e 25 controles que não diferiram entre si nas variáveis de idade, diâmetros cavitários e fração de ejeção de VE...

Background: Despite advances in the control of Chagas disease transmission, 2.5 millions of Brazilians are estimated to be chronic infected by Trypanosoma cruzi. Thecardiac form of the chronic Chagas disease present high morbimortality and anystrategy able to detect early myocardial damage is welcome. Myocardial contractilitycan be noninvasively quantified by speckle tracking analysis yielding values of globaland segmental two-dimensional deformation or strain.Objectives: We sought to determine if patients with chronic Chagas disease and normalleft ventricular (LV) ejection fraction present abnormalities in myocardial contractilityidentified by two-dimensional strain analysis. Methods: Echocardiograms of patients at the chronic phase of the Chagas disease withunapparent cardiac damage (ICD) or with the stage A of the cardiac form (changes inelectrocardiogram but with normal global and segmental LV systolic function at theechocardiogram) were performed using Vivid 7 (GE Medical Systems) machine. Two dimensional global and segmental LV longitudinal, circumferential and radial strain weredetermined by off-line analysis using Echopac software (GE medical System)...

Factors associated with Leishmania chagasi infection in domestic dogs from Teresina, State of Piauí, Brazil / Fatores associados à infecção por Leishmania chagasi em cães domiciliados de Teresina, Estado do Piauí, Brasil

INTRODUCTION: Many studies have evaluated risk factors for human visceral leishmaniasis, but few have focused on the infection among dogs. The objective of this study was to assess the association between peridomestic socioeconomic and environmental factors and the presence of dogs seropositive for Leishmania chagasi in the City of Teresina, Brazil. METHODS: This case-control study was based on the results of a routine seroepidemiological survey among domestic dogs carried out in 2007. Serological tests were performed by means of indirect immunofluorescence antibody test. All dwellings in which at least one seropositive dog was detected were considered cases, and controls were a random sample of dwellings in which only seronegative dogs were identified. Associations between variables were expressed as odds ratios (OR) and their respective 95% confidence intervals (95%CI) estimated using multivariate logistic regression. RESULTS: Dwellings with a history of dogs removed by the visceral leishmaniasis control program in the last 12 months had five-fold higher odds of having at least one seropositive dog as compared with dwellings having no history of dog removal (OR = 5.19; 95%CI = 3.20-8.42). Dwellings with cats had 58% increased odds of dog infection as compared with those having no cats (OR = 1.58; 95%CI = 1.01-2.47). CONCLUSIONS: Identification of factors associated with canine visceral leishmaniasis might be used for the delimitation of areas of higher risk for human visceral leishmaniasis, since infection in dogs generally precedes the appearance of human cases.

INTRODUÇÃO: Diversos estudos avaliaram fatores de risco para leishmaniose visceral humana, mas poucos focalizaram a infecção canina. O objetivo deste estudo é avaliar a associação entre condições sócio-ambientais peridomiciliares e a presença de cães sorologicamente positivos para Leishmania chagasi em Teresina, Brasil. MÉTODOS: Estudo caso-controle baseado nos resultados de inquérito soroepidemiológico de rotina entre cães domésticos no ano de 2007. O exame sorológico foi realizado por meio de reação de imunofluorescência indireta. Foram consideradas como casos todas as residências que albergassem pelo menos um cão soropositivo, enquanto o grupo controle correspondeu a uma amostra aleatória das residências onde somente cães soronegativos foram registrados. Associações entre as variáveis foram expressas por meio da razão de chance ou odds ratio (OR) e respectivos intervalos de 95% de confiança (IC95%) estimados mediante regressão logística multivariada. RESULTADOS: Residências com história de pelo menos um cão recolhido pelo programa de controle da leishmaniose visceral nos últimos 12 meses apresentaram chance cerca de 5 vezes mais alta de terem cães infectados em comparação com residências sem história de cães removidos no período (OR = 5,19; IC95% = 3,20-8,42). Residências com presença de gatos apresentaram chance 58% mais alta de terem cães infectados em comparação com aquelas sem gatos (OR = 1,58; IC95% = 1,01-2,47). CONCLUSÕES: A identificação de fatores associados à leishmaniose visceral canina pode ser útil para a delimitação de áreas sob maior risco para leishmaniose visceral humana, na medida em que a infecção canina geralmente precede a ocorrência de casos humanos.

Paracoccidioidomycosis: sarcoid-like form in childhood / Paracoccidioidomicose: forma clínica sarcoídica na infância

Paracoccidioidomycosis is a chronic, subacute or rarely acute mycosis, with visceral and cutaneous involvement. It is potentially fatal. Children account for about 5-10% of cases. In this study, we describe the relevance of discussing possible differential diagnoses as well as the importance of early treatment.

Paracoccidioidomicose é uma micose crônica, subaguda ou raramente aguda, com comprometimento visceral e tegumentar, sendo potencialmente fatal. As crianças representam cerca de 5 a 10% dos casos. A seguir, descreve-se a necessidade da discussão dos diagnósticos diferenciais cabíveis bem como a importância do início precoce do tratamento.

Seroepidemiology of Trypanosoma cruzi infection in the semiarid rural zone of the State of Rio Grande do Norte, Brazil / Soroepidemiologia da infecção pelo Trypanosoma cruzi na zona rural do semiárido do Estado do Rio Grande do Norte, Brasil

INTRODUCTION: A seroepidemiological survey was carried out to evaluate Trypanosoma cruzi infection in an endemic area of the State of Rio Grande do Norte, Brazil, involving rural residents. METHODS: Sixteen municipalities were randomly selected, 15 from the west mesoregion and one from the central, with an estimated population of 83,852 individuals. A total of 1,950 blood samples were collected in the west mesoregion and 390 in Caicó. Anti-T. cruzi antibodies were detected using the Chagatest® ELISA HAI-hemagglutination kits and indirect immunofluorescence. As sera presented indeterminate results, TESAcruzi® western blot was performed to confirm reactivity. RESULTS: An estimated seroprevalence of 6.5% was determined for the west mesoregion and 3.3% for Caicó. Seropositivity rises progressively with the age of individuals, up to 40 years in Caicó and up to 50 years in the west mesoregion. Only educational level and knowledge regarding the triatomine were associated with seropositivity. No seroreactive individuals under 18 years of age were identified. CONCLUSIONS: Infection by T. cruzi remains high and is concentrated in municipalities in the central western area of the west mesoregion; however, evidence suggests a decline in vector transmission in this mesoregion and in Caicó. Epidemiological variables appear not to influence seropositivity, with the exception of education and knowledge concerning the triatomine, among seroreactive individuals from the west mesoregion.

INTRODUÇÃO: A infecção pelo Trypanosoma cruzi foi avaliada em uma área endêmica do Estado do Rio Grande do Norte, Brasil, por inquérito soroepidemiológico amostral em moradores da zona rural. MÉTODOS: Dezesseis municípios foram sorteados, 15 da mesorregião oeste e um da central, com população estimada em 83.852 indivíduos. Foram coletadas 1.950 amostras de sangue no oeste e 390 em Caicó. A detecção de anticorpos anti-T. cruzi foi realizada usando os kits Chagatest® ELISA, HAI-hemaglutinação e a reação de imunofluorescência indireta. Nos soros com resultados indeterminados foi realizado o western blot TESAcruzi® para confirmação da reatividade. RESULTADOS: A estimativa da soroprevalência revelou 6,5% para a mesorregião oeste e 3,3% em Caicó. A soropositividade eleva-se progressivamente com a idade dos indivíduos até a quinta década de vida em Caicó e na sexta década na mesorregião oeste. Apenas o grau de escolaridade e o conhecimento do triatomíneo evidenciaram associação à soropositividade. Não foram identificados indivíduos sororreativos com idade inferior a 18 anos. CONCLUSÕES: A infecção pelo T. cruzi persiste mais elevada e concentrada em municípios da área central da mesorregião oeste, mas evidências sugerem o declínio da transmissão vetorial nessa mesorregião e em Caicó. As variáveis epidemiológicas parecem não exercer influência na soropositividade, à exceção da escolaridade e conhecimento do triatomíneo entre indivíduos sororreativos da mesorregião oeste.

Serosurvey of hantavirus infection in humans in the border region between Brazil and Argentina / Estudo sorológico de infecção por hantavírus em humanos na região de fronteira, entre Brasil e Argentina

INTRODUCTION: According to reports by the Ministry of Health, in the far western region of the State of Santa Catarina, there have been no reports of hantavirus pulmonary syndrome, a zoonotic disease transmitted by feces of infected rodents. A seroepidemiological study of residents of this region, was conducted, with the aim of determining the presence of hantavirus infections. A total of 340 volunteers of both genus, from the towns of Belmonte and Paraíso, were studied. METHODS: The serum of these patients was collected and used to detect IgG antibodies against recombinant N protein of Araraquara hantavirus, by ELISA assay. The positive samples were then titrated and confirmed by immunofluorescence assay. RESULTS: This study demonstrated the presence of IgG antibodies against hantavirus N protein in 3.5 percent of the population. The most frequent occupation was farm worker, 81 percent had direct and indirect contact with rodents, 91.7 percent of positive cases were farm workers, indicating that the probable cause of infection occurred during barn cleaning. These antibodies are noteworthy, given that the levels of antibodies were verified in individuals whose contact with hantavirus may have occurred many years ago. CONCLUSIONS: This study shows the circulation of hantavirus in the region, a fact that until now, had not reported. All the serum reagents had contact with the pathogen, but did not develop pulmonary and cardiovascular syndrome. It is important to remain alert, because hantavirus is a serious and emerging disease of some relevance.

INTRODUÇÃO: De acordo com relatórios do Ministério da Saúde, na região do extremo oeste do Estado de Santa Catarina, não há relatos de síndrome pulmonar por hantavírus, doença zoonótica transmitida por excretas de roedores contaminados. Com a finalidade de demosntrar a infecção por hantavírus, um estudo soroepidemiológico de moradores da região foi realizado. Assim, foi estudado um total de 340 voluntários de ambos os gêneros, dos municípios de Belmonte e Paraíso. MÉTODOS: O soro destes pacientes foi coletado e usado para a detecção de anticorpos IgG contra a proteína N recombinante de hantavírus Araraquara, pelo teste de ELISA. As amostras positivas foram tituladas e confirmadas por imunofluorescência indireta. RESULTADOS: Este estudo demonstrou a presença de anticorpos IgG contra a proteína N hantavírus em 3,5 por cento da população. A ocupação de lavrador foi a mais frequente, e 81 por cento tiveram contato direto e indireto com os roedores, 91,7 por cento dos casos positivos foram os agricultores, a causa provável da infecção foi através da limpeza de celeiros. Estes anticorpos são notáveis, dado que os níveis de anticorpos são encontrados nos indivíduos cujo contato com o hantavírus pode ter ocorrido há muitos anos. CONCLUSÕES: Este estudo mostra a circulação de hantavírus na região, um fato que até então não havia relatado, todos os reagentes soro tiveram contato com o patógeno, mas não desenvolveram a síndrome pulmonar e cardiovascular. É preciso estar alerta, porque é uma doença grave e emergente com grande importância.

Smooth muscle antibodies and cryoglobulinemia are associated with advanced liver fibrosis in Brazilian hepatitis C virus carriers

Cryoglobulinemia and non-organ-specific-autoantibody are biomarkers of autoimmunity of the chronic infection caused by hepatitis C virus (HCV). In this work, we report the association between the presence of smooth muscle antibodies (SMA) and cryoglobulinemia and chronic liver disease in HCV carriers. Sixty-five untreated HCV patients, 38 women and 27 men were included in this study. Cryoglobulinemia was tested by cryoprecipitation, SMA by indirect fluorescent antibody test, and liver fibrosis and hepatocellular inflammation activity was investigated by histology of liver biopsy using the METAVIR score. The prevalence of SMA in the patients was 33.8 percent and cryoglobulinemia was demonstrated in 36.9 percent patients. Cryoglobulinemia and SMA seropositivity was associated with advanced fibrosis (p < 0.05). The presence of SMA and cryoglobulinemia was not associated with hepatocellular inflammation activity, age, carrier gender or HCV genotype. We concluded that liver biopsy should be recommended for HCV carriers that are seropositive for SMA or cryoglobulinemia.

Morbidade da doença de Chagas em pacientes autóctones da microrregião do Rio Negro, Estado do Amazonas / Morbidity of Chagas disease among autochthonous patients from the Rio Negro microregion, State of Amazonas

INTRODUÇÃO: Foi realizado um estudo soroepidemiológico e clínico em 152 indivíduos residentes no município de Barcelos, Estado do Amazonas. Avaliou-se a soroprevalência da infecção chagásica e a morbidade da doença de Chagas. MÉTODOS: Os testes sorológicos foram a imunofluorescência indireta, ELISA convencional e recombinante e o Tesa-blot. Foram considerados soropositivos 38 pacientes, duvidosos 31 e soronegativos negativos 83. Os 38 casos soropositivos foram pareados com 38 controles soronegativos da mesma idade, sexo e submetidos à avaliação epidemiológica, clínica, eletro e ecocardiográfica, sendo que, 29 pares fizeram exame radiológico do esôfago. RESULTADOS: A soropositividade foi 19,9 vezes mais frequente nos trabalhadores do extrativismo em geral e 10,4 vezes mais frequente no extrativismo da piaçaba. Aplicou-se o teste de reconhecimento com o vetor local do gênero Rhodnius e 86,7 por cento dos pacientes soropositivos o reconheceram, enquanto somente 34,2 por cento dos soronegativos o fizeram. O ECG mostrou-se alterado em 36,8 por cento nos soropositivos e em 21,5 por cento nos soronegativos, enquanto o ecocardiograma mostrou alterações em 31,6 por cento nos soropositivos e 18,4 por cento nos soronegativos. Precordialgia e palpitações foram mais frequentes nos soropositivos. O estudo clínico do aparelho digestivo e radiológico do esôfago não mostrou alterações significativas. CONCLUSÕES. A doença de Chagas na região estudada pode ser considerada uma doença ocupacional.

INTRODUCTION: A seroepidemiological and clinical study was conducted on 152 autochthonous individuals living in the district of Barcelos, State of Amazonas, to evaluate the seroprevalence of Chagas infection and morbidity of Chagas disease. METHODS: The serological tests used were indirect immunofluorescence, conventional and recombinant ELISA and immunoblot (Tesa-blot). Thirty-eight patients were considered seropositive; 31 were considered serodoubtful; and 83 were considered seronegative. The 38 seropositive cases were paired with 38 seronegative controls of the same age and sex, and underwent epidemiological and clinical evaluations, electrocardiograms and echocardiograms. Twenty-nine pairs underwent radiological examinations of the esophagus. RESULTS: Seropositivity was 19.9 times more frequent among workers gathering plant materials from the forests and 10.4 times more frequent among piassaba gatherers. Eighty six point seven percent of the seropositive individuals recognized the genus Rhodnius as the local vector, while only 34.2 percent of the seronegative individuals recognized this. The EKG was abnormal in 36.8 percent of the seropositive individuals and in 21.5 percent of the seronegative individuals, while the echocardiogram showed abnormalities in 31.6 percent of the seropositive and 18.4 percent of the seronegative individuals. Precordialgia and palpitation were more frequent among the seropositive individuals. Clinical evaluation on the digestive system and X-ray on the esophagus did not show significant abnormalities. CONCLUSIONS: Chagas disease in the study region can be considered to be an occupational disease.

Accidental infection by Trypanosoma cruzi follow-up by the polymerase chain reaction: case report / Infecção acidental pelo Trypanosoma cruzi acompanhada pela reação em cadeia da polimerase: relato de caso

We report a case of accidental infection by Trypanosoma cruzi in a 42-year-old female patient who presented an inoculation chagoma. Laboratory confirmation was based on examination of fresh blood, Giemsa-stained blood smear, immunoenzyme test (EIA-IgG), indirect immunofluorescence (IIF-IgM, IgG) and polymerase chain reaction (PCR). Only the PCR gave a positive result, and the EIA test was inconclusive. Two treatments with benznidazole were necessary. PCR was the only technique that continued to give positive results for approximately two months (65 days, or 2.2 months) following the second treatment and negative results from 96 days (3.2 months) to 850 days (28.3 months). We concluded that the presence of an inoculation chagoma and use of PCR were important and decisive for diagnosis and follow-up of the case.

Reportamos caso de infecção acidental pelo Trypanosoma cruzi em paciente do gênero feminino, 42 anos, que apresentou chagoma de inoculação. A confirmação laboratorial foi realizada pelo exame de sangue a fresco, esfregaço corado com Giemsa, imunoenzimaensaio (ELISA-IgG), imunofluorescência indireta (IFI-IgM, IgG) e reação em cadeia da polimerase (PCR). Somente a PCR foi positiva e a ELISA foi inconclusiva. Dois tratamentos com benznidazol foram necessários. PCR foi a única técnica que permaneceu positiva por aproximadamente dois meses (65 dias ou 2,2 meses) após o segundo tratamento e negativa de 96 dias (3,2 meses) a 850 dias (28,3 meses). Concluimos que a presença do chagoma de inoculação e o uso da PCR foram importantes e decisivos para o diagnóstico e o acompanhamento do caso.