Pelvic fracture in a cat - precontouring of the plate based on allogenic 3D model and its application

Background: Pelvic fractures are commonly ecountered in cats. The ilium is included in approximately 50% of pelvic fractures in cats. Although conservative management of the pelvic fracture is known to have good prognosis, surgical fixation is recommended for the pelvic fracture with ilial fractures. 3D printing is an accurate digital modeling method by converting two-dimensional (2D) images into 3D model. 3D printing in veterinary medicine has been described in the various orthopedic diseases such angular limb deformities or fractures. The use of 3D model for presurgical planning is helpful to improve the results of complex surgical interventions. The objective of this study is to identify the usefulness of fabricating 3D models based on allogenic 2D data with aid of 3D printer program. Case: A 4-year-old spayed female domestic shorthair cat presented with hindlimb lameness. Radiography revealed left ilial body fracture with multiple fractures including left tuber ischium, pubic symphysis, and bilateral cranial ramuses of pubis. Digital imaging and communication in medicine (DICOM) files of the complete ilium were extracted from a computed tomography (CT) scan of a healthy and castrated male cat of same breed. Volume rendering images were prepared by Slicer program based on DICOM files. After acquired 3D data were converted to STL (Standard Triangulation Language) file for the 3D printing machine, non-fracture involved area was removed except the left ilium using the Meshmixer® software and then data was stored as STL files again. The length of 3D model was adjusted to actual size using 3D printer firmware based on actual size of the ilial length. Subsequently, 3D modelling was performed using 3D printer. The plate was precontoured to conform to the lateral surface of the 3D model. Internal fixation using precontoured plate resulted in accurate bone alignment. The alignment of the ilium remained appropriate throughtout the follow-up period. Complete union was identified 6 months after surgery. Discussion: Although the most common method for the ilial fractures is the application of bone plates to the lateral side of the ilium, bone plate fixation is more challenging in cats owing to the small bone size and small surface area of the fracture sites compared to dogs. Therefore, it is important to make accurate presurgical planning for successful result of a surgery. 3D printing based on actual patient have several limitations including time for complete printing process and additional anesthetic episode to acquire CT images. However, in simple cases, a presurgical CT scan may not be necessary if the plate can be precisely precontured based on the data from the other patient. In this way, the additional financial burden for CT examination also might be reduced. On the other hand, technical difficulty of utilizing hardware and software, and financial availability were another drawback. However, in this current study, most of limitations regarding conventional 3D printing based on actual patient were overcome by the application of the fused deposition modeling (FDM) technology with allogenic data. In the current study, total time for fabrication of 3D model based on FDM technology, was less than 3 h, which are much shorter than the time for conventional 3D printing. The difference of the ilial length between the actual patient and the 3D model was adjusted through the firmware program. Thus, differences of the conformation or size between the 3D model and the ilium of the patient was negligible during the surgery, although 2D images were not acquired from actual patient. Intraoperative contouring of the plate was not required. In conclusion, through presurgical plate contouring by the 3D bone template based on non-patient specific data, successful treatment of the ilial fracture was possible.

Aloenxertos ósseos e enxerto sintético de hidroxiapatita em falha óssea ulnar em galinhas (Gallus gallus domesticus), aspectos radiográficos e histológicos / Bone allografts and synthetic grafts hydroxyapatite on ulnar bone defect in fowl (Gallus gallus domesticus), radiographic and histological aspects

Dos atendimentos ortopédicos realizados em aves no HCV-UFRGS, 86% são fraturas, sendo aproximadamente 30% delas cominutivas com perda óssea expressiva, justificando a importância da utilização de enxertos em fraturas de aves. O objetivo deste trabalho foi avaliar dois aloenxertos e enxerto sintético de hidroxiapatita em defeito ósseo de galinhas. Utilizaram-se 30 galinhas separadas em três grupos: aloenxerto congelado em ultra-freezer (GUF), aloenxerto congelado em nitrogênio líquido (GNL) e enxerto sintético de hidroxiapatita deficiente em cálcio (GHA). Nos três grupos, os enxertos foram aplicados com placas e parafusos bloqueados de 2mm na ulna direita das aves, avaliando-se a evolução por meio de exames radiográficos até serem completados 90 dias de pós-operatório e o resultado final mediante exame histológico. A média e desvio-padrão relacionando o tempo de consolidação óssea radiográfica foi: GNL 61,67±21,79 dias (90% de consolidação), GUF 47,14±13,50 dias (70% de consolidação) e GHA 70±18,17 dias (60% de consolidação). Houve diferença significativa no tempo de consolidação óssea entre o GUF e o GHA. Histologicamente, os enxertos do GUF foram os que estavam em consolidação mais avançada. Os aloenxertos do GNL foram superiores no preenchimento de falha óssea ulnar de galinhas.(AU)

Of the orthopedic visits performed on birds at HCV-UFRGS, 86% are fractures, and approximately 30% of them are comminuted with expressive bone loss, justifying the importance of the use of grafts in bird fractures. The objective of this work was to test two allografts and a synthetic HADC graft on finishing in Gallus gallus domesticus. 30 laying hens were used, divided in three groups: frozen allograft in ultrafreezer (UFG); frozen allograft in liquid nitrogen (LNG); calcium deficient synthetic hydroxyapatite graft (HAG). The three graft groups were exposed to serial radiographs until the 90 postoperative days, as well as the histological examination at the end of the experiment were: LNG 61.67±21.79 days (90% consolidation), UFG 47.14±13.50 days (70% consolidation) and HAG 70±18.17 days (60% consolidation). There was a significant difference in bone healing time between GUF and GHA. Histologically, GUF grafts were the ones that were in the most advanced consolidation. LNG allografts were superior in filling ulnar bone failure of fowl.(AU)

Aloenxertos ósseos e enxerto sintético de hidroxiapatita em falha óssea ulnar em galinhas (Gallus gallus domesticus), aspectos radiográficos e histológicos / Bone allografts and synthetic grafts hydroxyapatite on ulnar bone defect in fowl (Gallus gallus domesticus), radiographic and histological aspects

Dos atendimentos ortopédicos realizados em aves no HCV-UFRGS, 86% são fraturas, sendo aproximadamente 30% delas cominutivas com perda óssea expressiva, justificando a importância da utilização de enxertos em fraturas de aves. O objetivo deste trabalho foi avaliar dois aloenxertos e enxerto sintético de hidroxiapatita em defeito ósseo de galinhas. Utilizaram-se 30 galinhas separadas em três grupos: aloenxerto congelado em ultra-freezer (GUF), aloenxerto congelado em nitrogênio líquido (GNL) e enxerto sintético de hidroxiapatita deficiente em cálcio (GHA). Nos três grupos, os enxertos foram aplicados com placas e parafusos bloqueados de 2mm na ulna direita das aves, avaliando-se a evolução por meio de exames radiográficos até serem completados 90 dias de pós-operatório e o resultado final mediante exame histológico. A média e desvio-padrão relacionando o tempo de consolidação óssea radiográfica foi: GNL 61,67±21,79 dias (90% de consolidação), GUF 47,14±13,50 dias (70% de consolidação) e GHA 70±18,17 dias (60% de consolidação). Houve diferença significativa no tempo de consolidação óssea entre o GUF e o GHA. Histologicamente, os enxertos do GUF foram os que estavam em consolidação mais avançada. Os aloenxertos do GNL foram superiores no preenchimento de falha óssea ulnar de galinhas.(AU)

Of the orthopedic visits performed on birds at HCV-UFRGS, 86% are fractures, and approximately 30% of them are comminuted with expressive bone loss, justifying the importance of the use of grafts in bird fractures. The objective of this work was to test two allografts and a synthetic HADC graft on finishing in Gallus gallus domesticus. 30 laying hens were used, divided in three groups: frozen allograft in ultrafreezer (UFG); frozen allograft in liquid nitrogen (LNG); calcium deficient synthetic hydroxyapatite graft (HAG). The three graft groups were exposed to serial radiographs until the 90 postoperative days, as well as the histological examination at the end of the experiment were: LNG 61.67±21.79 days (90% consolidation), UFG 47.14±13.50 days (70% consolidation) and HAG 70±18.17 days (60% consolidation). There was a significant difference in bone healing time between GUF and GHA. Histologically, GUF grafts were the ones that were in the most advanced consolidation. LNG allografts were superior in filling ulnar bone failure of fowl.(AU)

Expression patterns of mesenchymal stem cell-specific proteins in adipose tissue-derived cells: possible immunosuppressing agent in partial allograft for restoring the urinary bladder in rabbits / Padrão de expressão de proteínas específicas das células-tronco mesenquimais derivadas de tecido adiposo: possível agente imunossupressor em aloenxerto parcial para restauração de vesícula urinária de coelhos

Adipose tissue-derived stem cells (ADSCs) are an attractive source of mesenchymal stem cells (MSCs) for use in tissue engineering and clinical applications. This paper focuses on the characterization of ADSCs used as immunosuppressive agent in rabbits undergoing partial allograft for urine bladder restorage. For this study highlighted the characterization of the ADSCs used as immunosuppressive agents in rabbits submitted to partial allograft for restoration of the urinary vesicle, using 25 animals, six months old, New Zealand. ADSCs at the third peal were characterized by the MSC-specific CD105, CD73 and CD90 expression and by the absence of the hematopoietic marker CD45, as revealed by flow cytometry analysis. Moreover, ADSCs were efficient in preventing allograft rejection from the urinary bladder, as judged by biochemical, clinical and ultrasonography analysis. Together, these results compose characterization of protein expression profiles and immunosuppressive functionality of ADSCs in rabbits, which had undergone partial allografts of the urinary bladder, foreseeing future applications in clinical practice.(AU)

As células mesenquimais derivadas de tecido adiposo (ADSCs) são uma fonte atraente de células-tronco mesenquimais (MSCs) para uso na engenharia de tecidos e suas aplicações clínicas. Este trabalho destacou a caracterização das ADSCs utilizadas como agentes imunossupressores em coelhos submetidos a aloenxerto parcial para restauração da vesícula urinária, sendo utilizados 25 animais, de seis meses de idade, Nova Zelândia. As ADSCs, após o terceiro repique, foram caracterizadas pela expressão específica de MSC CD105, CD73 e CD90 e pela ausência do marcador hematopoiético CD45, tal como revelado por análise de citometria de fluxo. Além disso, os ADSCs foram eficientes na prevenção da rejeição de aloenxertos da vesícula urinária, conforme avaliado por análises clínica, bioquímica e ultrassonográfica. Juntos, esses resultados compõem a caracterização dos perfis de expressão proteica e a funcionalidade imunossupressora de ADSCs em coelhos, que sofreram aloenxertos parciais da bexiga, prevendo futuras aplicações na prática clínica.(AU)

Expression patterns of mesenchymal stem cell-specific proteins in adipose tissue-derived cells: possible immunosuppressing agent in partial allograft for restoring the urinary bladder in rabbits / Padrão de expressão de proteínas específicas das células-tronco mesenquimais derivadas de tecido adiposo: possível agente imunossupressor em aloenxerto parcial para restauração de vesícula urinária de coelhos

Adipose tissue-derived stem cells (ADSCs) are an attractive source of mesenchymal stem cells (MSCs) for use in tissue engineering and clinical applications. This paper focuses on the characterization of ADSCs used as immunosuppressive agent in rabbits undergoing partial allograft for urine bladder restorage. For this study highlighted the characterization of the ADSCs used as immunosuppressive agents in rabbits submitted to partial allograft for restoration of the urinary vesicle, using 25 animals, six months old, New Zealand. ADSCs at the third peal were characterized by the MSC-specific CD105, CD73 and CD90 expression and by the absence of the hematopoietic marker CD45, as revealed by flow cytometry analysis. Moreover, ADSCs were efficient in preventing allograft rejection from the urinary bladder, as judged by biochemical, clinical and ultrasonography analysis. Together, these results compose characterization of protein expression profiles and immunosuppressive functionality of ADSCs in rabbits, which had undergone partial allografts of the urinary bladder, foreseeing future applications in clinical practice.(AU)

As células mesenquimais derivadas de tecido adiposo (ADSCs) são uma fonte atraente de células-tronco mesenquimais (MSCs) para uso na engenharia de tecidos e suas aplicações clínicas. Este trabalho destacou a caracterização das ADSCs utilizadas como agentes imunossupressores em coelhos submetidos a aloenxerto parcial para restauração da vesícula urinária, sendo utilizados 25 animais, de seis meses de idade, Nova Zelândia. As ADSCs, após o terceiro repique, foram caracterizadas pela expressão específica de MSC CD105, CD73 e CD90 e pela ausência do marcador hematopoiético CD45, tal como revelado por análise de citometria de fluxo. Além disso, os ADSCs foram eficientes na prevenção da rejeição de aloenxertos da vesícula urinária, conforme avaliado por análises clínica, bioquímica e ultrassonográfica. Juntos, esses resultados compõem a caracterização dos perfis de expressão proteica e a funcionalidade imunossupressora de ADSCs em coelhos, que sofreram aloenxertos parciais da bexiga, prevendo futuras aplicações na prática clínica.(AU)

Autologous and homologous skin grafts treated with platelet-rich plasma (PRP): experimental study in rabbits / Enxertos cutâneos autólogos e homólogos tratados com plasma rico em plaquetas (PRP): estudo experimental em coelhos

The aim of the present study was to compare tissue repair of skin defects in rabbits submitted to autologous and homologous grafts treated or not with platelet-rich plasma (PRP). We selected nine rabbits and constituted four groups, designated as G1, in which were performed autologous graft treated with PRP; G2, autologous graft only; G3, homologous graft treated with PRP; and G4, homologous graft only. Macroscopic and histomorphometric evaluation was realized. The histomorphometric evaluation was performed by Hematoxylin/Eosin and Masson´s Trichrome staining with quantification of collagen fibers, macrophages, fibroblasts and vessels. The autologous graft treated with PRP showed positive influence on the early stage of the tissue repair process at the macroscopic evaluation, characterized by rosy color and cosmetic appearance. At the histomorphometric evaluation, there was no statistical difference in the number of macrophages and fibroblasts between the treated grafts or not with the PRP, as well as the quantification of vessels and collagen fibers. It can be concluded that PRP promotes a positive influence on the initial phase or "take" of the graft.(AU)

Objetiva-se com o presente estudo comparar a reparação tecidual de defeitos cutâneos em coelhos, submetidos a enxertos autólogos e homólogos, tratados ou não com plasma rico em plaquetas (PRP). Para isso, foram selecionados nove coelhos e constituídos quatro grupos experimentais, designados como G1, no qual foi realizado enxerto autólogo tratado com PRP; G2, enxerto autólogo; G3, enxerto homólogo tratado com PRP; e G4, enxerto homólogo. Foram realizadas avaliações macroscópica e histomorfométrica, por meio das colorações de Hematoxilina/Eosina e Tricômio de Masson, incluindo quantificação de fibras colágenas, contagem de macrófagos, fibroblastos e vasos. O uso do enxerto autólogo com PRP influenciou positivamente na fase inicial do processo de reparação tecidual à avaliação macroscópica, caracterizada por coloração rósea e de aspecto cosmético. À avaliação histomorfométrica, não houve diferença estatística quanto ao número de macrófagos e fibroblastos entre os enxertos tratados ou não com o PRP, bem como quanto às contagens de vasos e a quantificação das fibras colágenas. Conclui-se que o PRP sob a promoveu influência positiva na fase inicial ou de "pega" do enxerto autólogo.(AU)

Efficacy of faecal microbiota transplantation for treating acute colitis in horses undergoing colic surgery / Eficácia do transplante de microbiota fecal no tratamento da colite aguda em equinos submetidos a cirurgia de cólica

The report describes the outcome of four horses treated with homologous faecal microbiota transplantation (FMT) for acute colitis. The horses developed diarrhoea and fever a few days after a laparotomy to treat gastrointestinal disease. Medical records were reviewed to identify the horses as well as to describe the primary intestinal disease, clinical findings, surgical intervention, FMT protocol, outcome and follow-up of each case. The principle of the efficacy of FMT is that restoration of a balanced nonpathogenic bacterial population may be the primary defence mechanism against colonization of pathogenic bacteria in the equine gastrointestinal tract. The FMT did not produce adverse reactions and was demonstrated to rapidly control diarrhoea and fever in all cases. A complete resolution of clinical sings was observed within 24 hours when horses were given a single FMT. Further clinical studies are necessary to determine the optimal preparation and to reinforce the efficacy of FMT for treating acute colitis following colic surgery. The technique has the potential to be an inexpensive, safe and highly efficient tool for the prevention and treatment of infectious gastrointestinal diseases in horses, preventing antimicrobial resistance.(AU)

O presente relato descreve a recuperação de 4 equinos tratados com transplante homólogo de microbiota fecal (TMF) para colite aguda. Os animais desenvolveram diarreia e febre alguns dias após serem submetidos a laparotomia para tratar obstruções intestinais. Os registros médicos foram revisados para identificar os equinos, bem como para descrever a doença intestinal primária, achados clínicos, detalhes da intervenção cirúrgica, protocolo do TMF, resultados e evolução de cada caso. O princípio da eficácia do TMF é que a restauração do equilíbrio de bactérias não patogênicas pode ser o principal mecanismo de defesa contra a colonização por bactérias patogênicas no trato gastrointestinal equino. O TMF não ocasionou reações adversas e demonstrou controlar rapidamente a diarreia e a febre em todos os casos. A resolução completa dos sinais clínicos foi observada dentro de 24 horas, sendo que os cavalos receberam um único TMF. Estudos clínicos adicionais são necessários para determinar a melhor técnica de preparação e para reforçar a eficácia do TMF no tratamento da colite aguda após cirurgia de cólica. A técnica tem potencial para ser uma ferramenta de baixo custo, segura e altamente eficiente para a prevenção e tratamento de doenças infecciosas gastrointestinais em equinos, evitando a resistência antimicrobiana.(AU)

Efficacy of faecal microbiota transplantation for treating acute colitis in horses undergoing colic surgery / Eficácia do transplante de microbiota fecal no tratamento da colite aguda em equinos submetidos a cirurgia de cólica

The report describes the outcome of four horses treated with homologous faecal microbiota transplantation (FMT) for acute colitis. The horses developed diarrhoea and fever a few days after a laparotomy to treat gastrointestinal disease. Medical records were reviewed to identify the horses as well as to describe the primary intestinal disease, clinical findings, surgical intervention, FMT protocol, outcome and follow-up of each case. The principle of the efficacy of FMT is that restoration of a balanced nonpathogenic bacterial population may be the primary defence mechanism against colonization of pathogenic bacteria in the equine gastrointestinal tract. The FMT did not produce adverse reactions and was demonstrated to rapidly control diarrhoea and fever in all cases. A complete resolution of clinical sings was observed within 24 hours when horses were given a single FMT. Further clinical studies are necessary to determine the optimal preparation and to reinforce the efficacy of FMT for treating acute colitis following colic surgery. The technique has the potential to be an inexpensive, safe and highly efficient tool for the prevention and treatment of infectious gastrointestinal diseases in horses, preventing antimicrobial resistance.(AU)

O presente relato descreve a recuperação de 4 equinos tratados com transplante homólogo de microbiota fecal (TMF) para colite aguda. Os animais desenvolveram diarreia e febre alguns dias após serem submetidos a laparotomia para tratar obstruções intestinais. Os registros médicos foram revisados para identificar os equinos, bem como para descrever a doença intestinal primária, achados clínicos, detalhes da intervenção cirúrgica, protocolo do TMF, resultados e evolução de cada caso. O princípio da eficácia do TMF é que a restauração do equilíbrio de bactérias não patogênicas pode ser o principal mecanismo de defesa contra a colonização por bactérias patogênicas no trato gastrointestinal equino. O TMF não ocasionou reações adversas e demonstrou controlar rapidamente a diarreia e a febre em todos os casos. A resolução completa dos sinais clínicos foi observada dentro de 24 horas, sendo que os cavalos receberam um único TMF. Estudos clínicos adicionais são necessários para determinar a melhor técnica de preparação e para reforçar a eficácia do TMF no tratamento da colite aguda após cirurgia de cólica. A técnica tem potencial para ser uma ferramenta de baixo custo, segura e altamente eficiente para a prevenção e tratamento de doenças infecciosas gastrointestinais em equinos, evitando a resistência antimicrobiana.(AU)

Tibial tunnel enlargement and joint instability after anterior cruciate ligament reconstruction. A prospective comparison between autograft and allograft

Purpose: To investigate tibial tunnel widening and knee instability after ACL reconstruction with hamstring autograft or irradiated soft tissue allograft. Methods: Eight-two patients were divided into two groups: autograft group and allograft group. Radiographic and clinical evaluations were performed. Results: Seventy patients were followed up with median of 36.3 months (range 36-38 months). Tibial tunnel widening was at or greater than 30% for nine patients in the autograft group and 15 patients in the allograft group (P = 0.0417). The average percentage of tibial tunnel widening was 26.7 ± 4.0 % and 29.7 ± 5.3 % in autograft and allograft groups, respectively (P = 0.0090). Knee range of motion was not affected by the reconstruction operation or different grafts. Thigh atrophy improved significantly within 24 months after ACL reconstructions in both groups. ACL reconstruction with the allograft leaded to less knee stability than that with the autograft from one year after operation (P = 0.0023). There was no significant difference between two groups with respect to Lysholm score (P = 0.1925) and Tegner score (P = 0.0918) at the final follow-up. Conclusion: The allograft group reported significantly more tibial tunnel widening and knee instability compared with the autograft group.(AU)

Comparison among bone marrow mesenchymal stem and mononuclear cells to promote functional recovery after spinal cord injury in rabbits

Purpose: To investigate the efficacy of allogeneic mesenchymal stem-cells and autologous mononuclear cells to promote sensorimotor recovery and tissue rescue. Methods: Female rabbits were submitted to the epidural balloon inflation method and the intravenous cells administrations were made after 8 hours or seven days after injury induction. Sensorimotor evaluation of the hindlimbs was performed, and the euthanasia was made thirty days after the treatment. Spinal cords were stained with hematoxylin and eosin. Results: Both therapies given 8 hours after the injury promoted the sensorimotor recovery after a week. Only the group treated after a week with mononuclear cells showed no significant recovery at post-injury day 14. In the days 21 and 28, all treatments promoted significant recovery. Histopathological analysis showed no difference among the experimental groups. Our results showed that both bone marrow-derived cell types promoted significant sensorimotor recovery after injury, and the treatment made at least a week after injury is efficient. Conclusion: The possibilities of therapy with bone marrow-derived cells are large, increasing the therapeutic arsenal for the treatment of spinal cord injury.(AU)

Aspectos radiográficos do sulco intertroclear de coelhos submetidos ao enxerto osteocondral alógeno associado à terapia com células mononucleares autógenas e dexametasona / Radiographic appearance of intertrochlear groove of rabbits submitted to osteochondral graft allographs associated to the therapy with mononuclear cell autographs and dexamethasone / Aspectos radiológicos de la ranura intertroclear de conejos sometidos a injerto osteocondral alógeno asociado a la terapia con células mononucleares autógenas y dexametasona

Vinte e quatro coelhos adultos foram separados em dois grupos (n=12) - controle (GI) e tratado (GII) e submetidos ao enxerto osteocondral alógeno para reparo ósseo e cartilaginoso do sulco troclear, conservado em glicerina a 98%. Os animais do GII receberam ainda injeção intra-articular de 2,0 x 106 células mononucleares autólogas e dexametasona intramuscular. Foram realizadas avalições radiográficas aos 45 e 90 dias de pós-operatório. Nos coelhos do grupo tratado e controle não foi notado sinais de reação características de enxerto-contra-hospedeiro e aos 45 e 90 dias de pós-operatório ocorre osteólise devido aos micromovimentos na interface implante-osso e pressão efetiva nos espaços articular. A implantação de enxerto alógeno conservado em glicerina, associado à inoculação de células mononucleares autógenas e dexametasona intramuscular promove intensa neoformação óssea e com bom reparo do defeito ósseo em coelhos.(AU)

Twenty-four adult rabbits were divided two groups (n = 12), control (GI) and treated (GII), and submitted to allogenic osteochondral graft for bone and cartilage repair of the trochlear groove, preserved in 98% glycerin. The GII yet received intra-articular injection of 2,0 x 106 autologous mononuclear cells and intramuscular dexamethasone. Radiographs at 45 and 90 days postoperatively avaliations were performed. In rabbits treated and control group was not skimmed signals characteristic reaction of graft-versus-host and at 45 and 90 days postoperatively osteolysis occurs due to micro motion at the implant-bone interface and effective pressure in the joint spaces. The implantation of allograft preserved in glycerol, associated with inoculation of autologous mononuclear cells and intramuscular dexamethasone intense bone and good repair of bone defects in rabbits neogenesis occurs.(AU)

Veinticuatro conejos adultos fueron divididos en dos grupos (n = 12) - control (GI) y tratado (GII) y sometidos a injerto osteocondral alógeno para reparo óseo y cartilaginoso de ranura tróclea, conservado en glicerina a 98%. Los animales del GII recibieron inyección interarticular de 2,0 x 106 células mononucleares autólogas y dexametasona intramuscular. Se realizó evaluaciones radiográficas a los 45 y 90 días posoperatorio. En los conejos tratados y del grupo control no se ha notado señales de reacciones características de injerto contra hospedero, y a los 45 y 90 días de posoperatorio ocurrió osteólisis debido a los micro movimientos en la interfaz, implante óseo y presión efectiva en los espacios articular. La implantación de injerto alógeno conservado en glicerina, asociado a la inoculación de células mononucleares autógenas y dexametasona intramuscular, promueve intensa neo formación ósea y con buen reparo del defecto óseo en conejos.(AU)

Aspectos radiográficos do sulco intertroclear de coelhos submetidos ao enxerto osteocondral alógeno associado à terapia com células mononucleares autógenas e dexametasona / Radiographic appearance of intertrochlear groove of rabbits submitted to osteochondral graft allographs associated to the therapy with mononuclear cell autographs and dexamethasone / Aspectos radiológicos de la ranura intertroclear de conejos sometidos a injerto osteocondral alógeno asociado a la terapia con células mononucleares autógenas y dexametasona

Vinte e quatro coelhos adultos foram separados em dois grupos (n=12) - controle (GI) e tratado (GII) e submetidos ao enxerto osteocondral alógeno para reparo ósseo e cartilaginoso do sulco troclear, conservado em glicerina a 98%. Os animais do GII receberam ainda injeção intra-articular de 2,0 x 106 células mononucleares autólogas e dexametasona intramuscular. Foram realizadas avalições radiográficas aos 45 e 90 dias de pós-operatório. Nos coelhos do grupo tratado e controle não foi notado sinais de reação características de enxerto-contra-hospedeiro e aos 45 e 90 dias de pós-operatório ocorre osteólise devido aos micromovimentos na interface implante-osso e pressão efetiva nos espaços articular. A implantação de enxerto alógeno conservado em glicerina, associado à inoculação de células mononucleares autógenas e dexametasona intramuscular promove intensa neoformação óssea e com bom reparo do defeito ósseo em coelhos.

Twenty-four adult rabbits were divided two groups (n = 12), control (GI) and treated (GII), and submitted to allogenic osteochondral graft for bone and cartilage repair of the trochlear groove, preserved in 98% glycerin. The GII yet received intra-articular injection of 2,0 x 106 autologous mononuclear cells and intramuscular dexamethasone. Radiographs at 45 and 90 days postoperatively avaliations were performed. In rabbits treated and control group was not skimmed signals characteristic reaction of graft-versus-host and at 45 and 90 days postoperatively osteolysis occurs due to micro motion at the implant-bone interface and effective pressure in the joint spaces. The implantation of allograft preserved in glycerol, associated with inoculation of autologous mononuclear cells and intramuscular dexamethasone intense bone and good repair of bone defects in rabbits neogenesis occurs.

Veinticuatro conejos adultos fueron divididos en dos grupos (n = 12) - control (GI) y tratado (GII) y sometidos a injerto osteocondral alógeno para reparo óseo y cartilaginoso de ranura tróclea, conservado en glicerina a 98%. Los animales del GII recibieron inyección interarticular de 2,0 x 106 células mononucleares autólogas y dexametasona intramuscular. Se realizó evaluaciones radiográficas a los 45 y 90 días posoperatorio. En los conejos tratados y del grupo control no se ha notado señales de reacciones características de injerto contra hospedero, y a los 45 y 90 días de posoperatorio ocurrió osteólisis debido a los micro movimientos en la interfaz, implante óseo y presión efectiva en los espacios articular. La implantación de injerto alógeno conservado en glicerina, asociado a la inoculación de células mononucleares autógenas y dexametasona intramuscular, promueve intensa neo formación ósea y con buen reparo del defecto óseo en conejos.

Bacterial cellulose and bacterial cellulose/polycaprolactone composite as tissue substitutes in rabbits' cornea / Celulose bacteriana e composto de celulose bacteriana/policaprolactone para substituto tissular na córnea de coelho

In order to test the performance of bacterial cellulose/polycaprolactone composite (BC/PCL) and pure bacterial cellulose (BC) as tissue substitutes in rabbits' cornea, a superficial ulcer containing 5mm in diameter and 0.2mm deep was made in the right cornea of 36 rabbits, then a interlayer pocket was created from the basis of this ulcer. Twelve rabbits received BC/PCL membrane and 12 were treated with BC membranes, both membranes with 8mm in diameter. The remaining rabbits received no membrane constituting the control group. The animals were clinically followed up for 45 days. Three animals of each group were euthanized at three, seven, 21, and 45 days after implantation for histological examination of the cornea along with the implant. Clinical observation revealed signs of moderate inflammatory process, decreasing from day 20th in the implanted groups. Histology showed absence of epithelium on the membranes, fibroplasia close to the implants, lymph inflammatory infiltrate with giant cells, collagen disorganization, with a predominance of immature collagen fibers in both groups with implants. Although inflammatory response is acceptable, the membranes used does not satisfactorily played the role of tissue substitute for the cornea during the study period.(AU)

Com objetivo de testar o desempenho do compósito celulose bacteriana/policaprolactona (CB/PCL) e da celulose bacteriana pura (CB) como substitutos teciduais em córnea de coelhos, foi realizada uma úlcera superficial de 5 mm de diâmetro e 0,2 mm de profundidade na córnea direita de 36 coelhos, criando-se um bolso interlamelar a partir da base dessa úlcera. Doze animais receberam a membrana do compósito CB/PCL e 12 foram tratados com membranas de CB, ambas com 8 mm de diâmetro, os coelhos restantes não receberam nenhuma membrana, constituindo o grupo controle. Os animais foram acompanhados clinicamente até 45 dias. Três animais de cada grupo sofreram eutanásia aos três, sete, 21 e 45 dias após o implante das membranas para análise histológica da córnea juntamente com o implante. À observação clínica, houve sinais de processo inflamatório moderado, diminuindo a partir do 20º dia nos grupos implantados. A histologia demonstrou ausência de epitélio sobre as membranas, fibroplasia próxima aos implantes, infiltrado inflamatório linfo-histiocitário com células gigantes, desorganização do colágeno, com predominância de fibras imaturas de colágeno em ambos os grupos com implantes. Embora a resposta inflamatória seja aceitável, as membranas utilizadas não desempenharam satisfatoriamente o papel de substituto tecidual para a córnea, no período estudado.(AU)

Bacterial cellulose and bacterial cellulose/polycaprolactone composite as tissue substitutes in rabbits' cornea / Celulose bacteriana e composto de celulose bacteriana/policaprolactone para substituto tissular na córnea de coelho

In order to test the performance of bacterial cellulose/polycaprolactone composite (BC/PCL) and pure bacterial cellulose (BC) as tissue substitutes in rabbits' cornea, a superficial ulcer containing 5mm in diameter and 0.2mm deep was made in the right cornea of 36 rabbits, then a interlayer pocket was created from the basis of this ulcer. Twelve rabbits received BC/PCL membrane and 12 were treated with BC membranes, both membranes with 8mm in diameter. The remaining rabbits received no membrane constituting the control group. The animals were clinically followed up for 45 days. Three animals of each group were euthanized at three, seven, 21, and 45 days after implantation for histological examination of the cornea along with the implant. Clinical observation revealed signs of moderate inflammatory process, decreasing from day 20th in the implanted groups. Histology showed absence of epithelium on the membranes, fibroplasia close to the implants, lymph inflammatory infiltrate with giant cells, collagen disorganization, with a predominance of immature collagen fibers in both groups with implants. Although inflammatory response is acceptable, the membranes used does not satisfactorily played the role of tissue substitute for the cornea during the study period.(AU)

Com objetivo de testar o desempenho do compósito celulose bacteriana/policaprolactona (CB/PCL) e da celulose bacteriana pura (CB) como substitutos teciduais em córnea de coelhos, foi realizada uma úlcera superficial de 5 mm de diâmetro e 0,2 mm de profundidade na córnea direita de 36 coelhos, criando-se um bolso interlamelar a partir da base dessa úlcera. Doze animais receberam a membrana do compósito CB/PCL e 12 foram tratados com membranas de CB, ambas com 8 mm de diâmetro, os coelhos restantes não receberam nenhuma membrana, constituindo o grupo controle. Os animais foram acompanhados clinicamente até 45 dias. Três animais de cada grupo sofreram eutanásia aos três, sete, 21 e 45 dias após o implante das membranas para análise histológica da córnea juntamente com o implante. À observação clínica, houve sinais de processo inflamatório moderado, diminuindo a partir do 20º dia nos grupos implantados. A histologia demonstrou ausência de epitélio sobre as membranas, fibroplasia próxima aos implantes, infiltrado inflamatório linfo-histiocitário com células gigantes, desorganização do colágeno, com predominância de fibras imaturas de colágeno em ambos os grupos com implantes. Embora a resposta inflamatória seja aceitável, as membranas utilizadas não desempenharam satisfatoriamente o papel de substituto tecidual para a córnea, no período estudado.(AU)

Functional restoration of the equine long digital extensor tendon submitted to homologous jugular graft after partial tenectomy / Restabelecimento funcional do tendão extensor digital longo submetido a implante de enxerto jugular homólogo pós-ressecção parcial em equinos

The functional restoration of the equine long digital extensor tendon after partial tenectomy was studied comparing one group submitted to homologous jugular graft (GE) and other group without graft used as control (GC). The animals were submitted to partial resection of the long digital extensor tendon with skin excision, followed by jugular graft suture in the GE. The wounds were treated by second intention and the limbs were supported with a bandage and cast. The horses were stall confined and monitored daily for lameness, wound tendon healing (planimetry and ultrasonography evaluation), limb functional restoration and cast sores. The repair tissue showed initial vascularization and developed granulation tissue. Three horses from GC had exuberant granulation tissue. The tendon functional restoration time from GE was significant less (average time of 28.3 days) than GC (45.9 days). The planimetry was significant different at 10 and 20 days, but it was similar at the final of experiment. Ultrasonographic exams showed the newly formed tendon tissue surrounding the implanted grafts with obvious circulatory activity, however with less organization comparing to the previous tendon before the lesion. Incorporation of a homologous jugular graft improved the quality of the repair tissue in equine extensor tendons avoiding the exuberant granulation tissue development and reduced tendon functional restoration time.

Em equinos foi estudado o restabelecimento funcional do membro submetido a tenectomia parcial do extensor digital longo. Comparou-se comparando-se um grupo de animais com aplicação de enxerto jugular homólogo fixado em glutaraldeído (GE) com um grupo sem a utilização de enxertos (GC). Os animais foram submetidos à tenectomia segmentar do extensor digital longo, com retirada de pele e de segmento do tendão, seguindo a sutura do enxerto nos animais do GE. As feridas foram tratadas por segunda intenção com curativo, bandagem e tala. Entre os grupos comparou-se as feridas macroscopicamente, o tempo de restabelecimento funcional do membro (dias), planimetria das feridas e aspectos ultrassonográficos do tendão e da região. As feridas mostraram semelhança entre os grupos com sangramento e granulação. Em três animais do GC houve granulação exuberante. Os enxertos aplicados mostraram-se escurecidos e justapostos à granulação sem exuberância nos animais do GE. O tempo de restabelecimento funcional do tendão no GE foi significativamente menor (tempo médio de 28,3 dias) que o GC (45,9 dias) As planimetrias diferiram significativamente (P < 0,05) nos momentos 10 e 20 (dias), sendo semelhantes no momento final. Exames ultrassonográficos no pós-operatório houve a observação do "tecido" neoformado envolvendo o enxerto implantado, sem sobrepô-lo, não ultrapassando as bordas da ferida e não organizado como o tendão pré-existente, e com evidente atividade circulatória visível pela movimentação do sangue na granulação neoformada. O enxerto aplicado na falha de tendão reduziu o tempo de restabelecimento funcional do membro e sugere contribuir na inibição da formação de granulação exuberante.

Functional restoration of the equine long digital extensor tendon submitted to homologous jugular graft after partial tenectomy / Restabelecimento funcional do tendão extensor digital longo submetido a implante de enxerto jugular homólogo pós-ressecção parcial em equinos

The functional restoration of the equine long digital extensor tendon after partial tenectomy was studied comparing one group submitted to homologous jugular graft (GE) and other group without graft used as control (GC). The animals were submitted to partial resection of the long digital extensor tendon with skin excision, followed by jugular graft suture in the GE. The wounds were treated by second intention and the limbs were supported with a bandage and cast. The horses were stall confined and monitored daily for lameness, wound tendon healing (planimetry and ultrasonography evaluation), limb functional restoration and cast sores. The repair tissue showed initial vascularization and developed granulation tissue. Three horses from GC had exuberant granulation tissue. The tendon functional restoration time from GE was significant less (average time of 28.3 days) than GC (45.9 days). The planimetry was significant different at 10 and 20 days, but it was similar at the final of experiment. Ultrasonographic exams showed the newly formed tendon tissue surrounding the implanted grafts with obvious circulatory activity, however with less organization comparing to the previous tendon before the lesion. Incorporation of a homologous jugular graft improved the quality of the repair tissue in equine extensor tendons avoiding the exuberant granulation tissue development and reduced tendon functional restoration time.(AU)

Em equinos foi estudado o restabelecimento funcional do membro submetido a tenectomia parcial do extensor digital longo. Comparou-se comparando-se um grupo de animais com aplicação de enxerto jugular homólogo fixado em glutaraldeído (GE) com um grupo sem a utilização de enxertos (GC). Os animais foram submetidos à tenectomia segmentar do extensor digital longo, com retirada de pele e de segmento do tendão, seguindo a sutura do enxerto nos animais do GE. As feridas foram tratadas por segunda intenção com curativo, bandagem e tala. Entre os grupos comparou-se as feridas macroscopicamente, o tempo de restabelecimento funcional do membro (dias), planimetria das feridas e aspectos ultrassonográficos do tendão e da região. As feridas mostraram semelhança entre os grupos com sangramento e granulação. Em três animais do GC houve granulação exuberante. Os enxertos aplicados mostraram-se escurecidos e justapostos à granulação sem exuberância nos animais do GE. O tempo de restabelecimento funcional do tendão no GE foi significativamente menor (tempo médio de 28,3 dias) que o GC (45,9 dias) As planimetrias diferiram significativamente (P < 0,05) nos momentos 10 e 20 (dias), sendo semelhantes no momento final. Exames ultrassonográficos no pós-operatório houve a observação do "tecido" neoformado envolvendo o enxerto implantado, sem sobrepô-lo, não ultrapassando as bordas da ferida e não organizado como o tendão pré-existente, e com evidente atividade circulatória visível pela movimentação do sangue na granulação neoformada. O enxerto aplicado na falha de tendão reduziu o tempo de restabelecimento funcional do membro e sugere contribuir na inibição da formação de granulação exuberante.(AU)

Comparison of lyophilization, and freezing in honey as techniques to preserve cortical bone allografts used to repair experimental femoral defects in domestic adult cats / Comparação de enxerto ósseo cortical autógeno e implante ósseo cortical alógeno conservados no mel, congelados ou liofilizados na substituição de segmento diafisário do fêmur de gatos domésticos

Cats with orthopedic conditions are a prominent part of the clinical work of veterinary. Conditions such as comminuted fractures, bone tumors and non-unions are often difficult to repair and may require the use of bone grafts for treatment. This study evaluated cortical bone allografts preserved in honey, frozen or lyophilized for correcting long bone defects created in the diaphysis of the right femur of domestic cats (n=24). In the control group (n=6), the defect was repaired using autogenous cortical bone graft. In the remaining animals (n=6/group), the defect was repaired with cortical bone allografts preserved in honey, frozen or lyophilized. Success of graft incorporation and length of time for consolidation were assessed through clinical, radiographic and histological evaluations performed up to 180 days. In the control, frozen, honey and lyophylized groups, respectively, success of graft incorporation was 91.6%, 83.3%, 75%, and 25%, with corresponding mean length of time for consolidation of 83.1, 78, 105 and 120 days. Incorporation percentage in the lyophilized group was significantly lower than in the frozen and control groups. In conclusion, bone grafts preserved in honey or frozen were effective for repairing cortical defects in the femurs of cats as compared to autogenous cortical bone grafts.(AU)

Afecções ortopédicas em gatos são frequentes, podendo-se encontrar fraturas cominutivas, neoplasias ósseas ou não-uniões de fraturas. Uma opção para o tratamento dessas afecções é a utilização de enxerto ou implante ósseo. O objetivo deste trabalho foi avaliar implantes ósseos corticais alógenos conservados em mel, congelados ou liofilizados na substituição de segmento diafisário do fêmur de felinos. Foi confeccionada uma falha óssea na diáfise do fêmur de 24 felinos. Em seis felinos a falha foi preenchida com o próprio osso removido e nos outros 18 animais, com implantes ósseos corticais alógenos conservados em mel, congelados ou liofilizados. Os animais foram avaliados clínica, radiográfica e histologicamente durante 180 dias. A incorporação foi de 91,6% no grupo controle, com tempo médio para consolidação de 83,1 dias; no mel foi de 75%, com tempo médio de 105 dias; no congelado foi de 83,3% com tempo médio de 78 dias e no liofilizado foi de 25%, com tempo médio de 120 dias. A porcentagem de consolidação foi significativamente menor no grupo liofilizado em relação aos grupos congelado e controle. É possível concluir que os implantes ósseos autógenos e os conservados no mel e congelados são eficazes no preenchimento de defeito cortical em fêmur de felinos.(AU)

Variação da força de resistência à micro-tração de fragmentos de ossos corticais preservados em diversos meios e a fresco: estudo experimental em coelhos / Variation of the resistance force to the micro-traction of fragments of cortical bones preserved in several means and fresh: Experimental study in rabbits

Devido ao crescente uso dos aloenxertos nas cirurgias ortopédicas, há a necessidade do conhecimento de suas características biomecânicas ao longo do tempo de preservação. O presente trabalho consistiu na análise da força de resistência à micro-tração de amostras de ossos corticais de coelho preservadas em diversos meios por até 180 dias e a fresco. Os resultados revelaram que a resistência e o tempo de preservação apresentaram uma relação inversamente proporcional, significando que, quanto maior o tempo de preservação, menor a resistência física avaliada no ensaio biomecânico de resistência à micro-tração. Dos meios utilizados, a glicerina apresentou menores valores quanto ao teste de resistência, demonstrando, após 30 dias de preservação, apenas 24,58 por cento da força presente no osso a fresco e, aos 180 dias, 1,76 por cento. As amostras submetidas à autoclavagem também demonstraram baixos valores ao final do experimento, quando permaneceram com apenas 12,31 por cento da força presente no osso a fresco. Os ossos preservados em plasma homólogo, líquido de dakin e aqueles criopreservados apresentaram os melhores índices de resistência ao final do experimento, permanecendo, respectivamente, com 82,47; 70,34 e 66,72 por cento da força máxima quando comparados com a resistência dos ossos frescos. Concluiu-se que a escolha do método e o tempo de preservação interferiu diretamente na biomecânica dos ossos corticais, promovendo a diminuição da capacidade de resistência à tração ao longo do período de preservação.(AU)

Due to the increasing use of cortical bone allografts in orthopedic surgeries, de knowledge of its biomechanics characteristics during preservation time is needed. The present study consisted in the analyses of the resistance power to the micro-traction of samples of rabbit cortical bones preserved in several means for up to 180 days and fresh. The results showed that the resistance and the preservation time presented an inversely proportional relation, meaning that, the longer the time of preservation, the shorter the physical resistance evaluated in the biomechanical rehearsal of resistance to the micro-traction. The glycerin has presented lower values in relation to the resistance test, showing, after 30 days, only 24.58 percent of the present power in the fresh bone, and by 180 days, 1.76 percent. The samples submitted to autoclavation also showed low values by the end of the experiment, while they remained with just 12.31 percent of the power present in the fresh bone. The bones preserved in homologous plasma, Dakin liquid and the ones cryopreserved showed the best levels of resistance at the end of the experiment, remaining, respectively with 82.47, 70.34 and 66.72 percent of the maximum power, while compared with the resistance of the fresh bones. The conclusion is that the choice of methodology and time of preservation interfered directly in the biomechanics of the cortical bones, promoting decrease of the resistance capacity to the traction along the period of preservation.(AU)

Ureteroneocistostomia extravesical modificada pela sondagem ureterovesical peroperatória no autotransplante renal em cães / Extravesical ureteroneocystostomy modified by the ureterovesical probe peroperative in kidney autotransplantation in dogs

Realizou-se, em sete cães adultos, o auto transplante renal esquerdo associado à nefrectomia contralateral para avaliação da técnica de ureteroneocistostomia extravesical modificada pela sondagem ureterovesical peroperatória. Durante a sutura do ureter na bexiga, foi mantida uma sonda uretral na região da anastomose ureterovesical, o que facilitou a realização da técnica cirúrgica e permitiu a confecção de anastomose de diâmetro adequado. A avaliação do rim transplantado e do ureter correspondente foi feita mediante ultra-sonografia a cada sete dias durante as seis primeiras semanas de pós-operatório, período em que também se fez o exame clínico diário de todos os animais. No último dia (42°) da avaliação a curto prazo, realizou-se a urografia excretora. Em seguida, manteve-se acompanhamento clínico periódico dos sete cães por um período mínimo de quatro meses, sem que fosse detectada qualquer alteração digna de nota. A técnica de reconstrução do trato urinário utilizada mostrou-se eficiente, não se observando nenhuma complicação urológica no pós-operatório de todos os animais.(AU)

To test a modified extravesical ureteroneocystostomy using a urethral probe like a stent just on the peroperative time, seven adult mongrel dogs underwent bilateral nephrectomy followed by unilateral autotransplantation. The other kidney was discarded. The evaluation of the animals was made by ultrasonography and clinical exams for the first six weeks after the surgery. The excretory urography was made on the end of this period. Then, the clinical exams were done by at least four months in each dog, without any complication. The technique of urinary tract reconstruction was considered efficient, without urological complications on the postoperative time of all the dogs.(AU)

Implante da membrana amniótica criopreservada em associação ou não com transplante de limbo no tratamento de úlceras profundas de córnea em cães

Objetivo: avaliar a aplicação clínica do implante da membrana amniótica canina criopreservada associada ou não ao transplante de limbo e do recobrimento conjuntival 360º no tratamento de úlceras de córnea profundas. Métodos: quinze cães com ulceração corneal clínica profunda foram alocados em três grupos: GI= recobrimento conjuntival 360º (n=5); GII= implante no bordo da úlcera de membrana amniótica associada ao recobrimento com a terceira pálpebra (n=5) e GIII= implante de membrana amniótica associado ao transplante de limbo córneoescleral autólogo e ao recobrimento com a terceira pálpebra (n=5). Os parâmetros clínicos avaliados foram: blefarospasmo, secreção ocular, vascularização corneal, defeito epitelial, opacificação corneal e qualidade cicatricial em seis momentos (inicial, 1, 3, 7, 15 e 30 dias de posoperatório). Resultados: no GI, não se observou aderência do recobrimento conjuntival 360º na úlcera (n=2), deiscência da sutura do recobrimento conjuntival (n=2), sinéquia anterior (n=2) e intensa quemose (n=1). Nos GII e GIII não foram observadas estas complicações. Os animais do GII e GIII apresentaram cicatrização epitelial no M15 e o GI somente M30 (p<0,05). Com relação aos outros parâmetros oftálmicos, a diferença foi significante entre momentos inicial e final no mesmo grupo (blefarospasmo, secreção ocular, vascularização). A cicatriz corneal apresentouse de maneira mais intensa, densa e desorganizada no GI. Conclusão: o implante da membrana amniótica associada ou não ao transplante de limbo demonstrou ser mais eficaz no tratamento de úlceras profunda de córnea, quando comparado ao recobrimento conjuntival 360º

Purpose: to evaluate the clinical application of implant of the canine cryopreserved amniotic membrane (DMEM plus DMSO 1:1) with or without limbal transplantation and 360° conjunctival flap in the treatment of progressive corneal ulceration. Methods: 15 dogs of the different breeds, males and females, aging four months to four years old with deep corneal ulceration and different clinical progression were divided in two groups: GI=360° conjunctival graft (n=5); GII=implant of amniotic membrane, sutured at the edge of the ulcer with epithelial side facing up, associated with the third eyelid flap (n=5) and GIII=implant of amniotic membrane associated with the transplantation of autologous limbal cornealscleral and covering with the third eyelid flap (n=5). The comparative analysis between groups was: complications of the technique used, blepharospasm, ocular secretion, corneal vascularization, epithelial defect and corneal opacification in six moments (first emergency care, surgery and 3, 7, 15 and 30 days of postoperative). It was used a score scale for subjective quantified of the ocular signs. Results: in GI, it was observed the non adherence of the conjunctival graft to the ulcer (n=2), dehiscence of the suture (n=2), anterior synechia (n=2) and intense chemosis (n=1). In GII and GIII, it was not observed these complications. GII and GIII showed epithelial healing in M15 and GI only M30 (p<0,05). The other ophthalmic parameters, the difference was significant between initial and final in the same group (blepharospasm, ocular discharge, vascularization). The corneal scar presented in a more intense, dense and disorganized in GI. Conclusions: According to the clinical results, the cryopreserved amniotic membrane implant or not in association with transplantation of limbo showed to be more effective in the treatment of deep corneal ulcers compared to the 360° conjunctival flap