Toxicity of insecticides used in rice crop on the egg parasitoid Trichogramma pretiosum (Hymenoptera: Trichogrammatidae) under field conditions / Toxicidade de inseticidas utilizados na cultura do arroz sobre o parasitoide de ovos Trichogramma pretiosum (Hymenoptera: Trichogrammatidae) em condições de campo

ABSTRACT: We evaluated under field conditions the toxicity of insecticides previously identified as harmful in laboratory and semifield bioassays on the parasitoid Trichogramma pretiosum (Hymenoptera: Trichogrammatidae). The experiments were conducted during the 2019/20 and 2020/21 harvests in rice fields. Following the recommendations of the International Organization for Biological and Integrated Control (IOBC), four insecticides were applied in 64 m2 experimental plots. Subsequently, T. pretiosum was released inundatively. To verify parasitism rates, at 1, 2, 4 and 6 days after release (DAR) of the parasitoids, eggs from the host Ephestia kuehniella (Lepidoptera: Pyralidae) were offered. After determining the number of parasitized eggs, the data were grouped into a reduction coefficient (Ex) to provide a single result for the effects of the insecticides on parasitoid. For both the 2019/20 and 2020/21 evaluated crops, it was found that at 2 DAR, the highest parasitism rates occurred. In contrast, in 6 DAR, no parasitism rates were observed. Lambda-cyhalothrin, thiamethoxam, and zeta-cypermethrin were classified as moderately harmful; thiamethoxam + lambda-cyhalothrin was classified as harmful. Following IOBC guidelines, the toxicity of these products under field conditions is lower than that obtained in the laboratory or semi-field for the T. pretiosum. However, these insecticides should be avoided, or used at times that do not coincide with the release or presence of the parasitoid in the field.

RESUMO: Avaliamos em condições de campo a toxicidade de inseticidas previamente identificados como nocivos em bioensaios de laboratório e semicampo sobre o parasitóide Trichogramma pretiosum (Hymenoptera: Trichogrammatidae). Os experimentos foram conduzidos durante as safras 2019/20 e 2020/21 em lavouras de arroz. Seguindo as recomendações da International Organization for Biological and Integrated Control (IOBC), quatro inseticidas foram aplicados em parcelas experimentais de 64 m2. Posteriormente, realizou-se uma liberação inundativa de T. pretiosum. Para verificar as taxas de parasitismo, aos 1, 2, 4 e 6 dias após a liberação (DAR) dos parasitoides, ovos do hospedeiro Ephestia kuehniella (Lepidoptera: Pyralidae) foram ofertados. Após a determinação do número de ovos parasitados, os dados foram agrupados em um coeficiente de redução (Ex) para fornecer um resultado único para os efeitos dos inseticidas sobre o parasitoide. Tanto para as safras 2019/20 quanto 2020/21, verificou-se que em 2 DAR, ocorreram as maiores taxas de parasitismo. Em contraste, aos 6 DAR, não foram observadas taxas de parasitismo. Lambda-cialotrina, tiametoxam e zeta-cipermetrina foram classificados como moderadamente nocivos; tiametoxam + lambda-cialotrina foi classificado como prejudicial. Seguindo as diretrizes da IOBC, a toxicidade desses produtos em condições de campo é inferior à obtida em laboratório ou semi-campo para o T. pretiosum. Entretanto, esses inseticidas devem ser evitados, ou utilizados em momentos que não coincidam com a liberação ou presença do parasitoide a campo.

Do fall armyworms Metaflumizone resistante populations affect the activity of Trichogramma pretiosum?

Abstract The possible interference of resistant pests populations to insecticides in natural enemies in the action thas not been clarified yet. Thus, this study aimed to evaluate Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae) performance on Spodoptera frugiperda (J. E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) eggs with resistance frequency to the Metaflumizone over six generations of product exposure. Egg cards (2.0 x 7.0 cm) containing eggs from two populations of S. frugiperda, (resistant to Metaflumizone and the other susceptible), were exposed to T. pretiosum females for 24 hours in free-choice and no-choice testing in three generations (G1, G4, and G6). A completely randomized experimental design was used with 25 replications, each consisting of an egg card (experimental unit) containing 20 eggs. The parameters evaluated were: parasitism (%), emergence (%), sex ratio, number of emerged parasitoids per egg and males/females longevity. ANOVA and Tukey test (P 0.05) were applied on the results. Results showed a reduction in parasitism [41.0% (G1) and 28.4% (G4)], egg emergence (17.5%) and parasitoids/egg [16.2 (G4) and 17.2 (G6)] in eggs originating from the population with resistance frequency. Females emerging from G6 populations eggs without exposure to Metaflumizone had greater longevity (3.5 days more) than the resistant population. The sex ratio and male longevity were not affected. The results indicate a reduction in T. pretiosum activity if S. frugiperda populations have some frequency of resistance to Metaflumizone.

Resumo A possível interferência de populações de pragas resistentes na ação de inimigos naturais ainda não foi esclarecida. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar o desempenho de Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae) em ovos de Spodoptera frugiperda (J. E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) com frequência de resistência à Metaflumizona ao longo de seis gerações de exposição ao produto. Cartelas (2,0 x 7,0 cm) com ovos de duas populações de S. frugiperda, (resistente à Metaflumizona e outra suscetível), foram expostas às fêmeas de T. pretiosum por 24 horas em condições de livre escolha e sem chance de escolha por três gerações (G1, G4 e G6). O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com 25 repetições, sendo cada repetição composta por uma cartela (unidade experimental) contendo 20 ovos. Os parâmetros avaliados foram: parasitismo (%), emergência (%), razão sexual, número de parasitoides emergidos por ovo e longevidade de machos e fêmeas. ANOVA e teste de Tukey (P 0,05) foram aplicados aos dados coletados. Os resultados mostraram redução do parasitismo [41,0% (G1) e 28,4% (G4)], emergência de ovos (17,5%) e parasitoides/ovo [16,2 (G4) e 17,2 (G6)] em ovos oriundos da população com frequência de resistência. As fêmeas emergidas de ovos da população G6 sem exposição à Metaflumizona, tiveram maior longevidade (3,5 dias a mais) do que a população exposta ao inseticida. A razão sexual e a longevidade de machos não foram afetadas. Os resultados indicam uma redução na atividade de T. pretiosum se as populações de S. frugiperda apresentarem alguma frequência de resistência à Metaflumizona.

Do fall armyworm's Metaflumizone resistante populations affect the activity of Trichogramma pretiosum? / Populações da lagarta-do-cartucho resistentes à Metaflumizona afetam a atividade de Trichogramma pretiosum?

Abstract The possible interference of resistant pest's populations to insecticides in natural enemies in the action thas not been clarified yet. Thus, this study aimed to evaluate Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae) performance on Spodoptera frugiperda (J. E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) eggs with resistance frequency to the Metaflumizone over six generations of product exposure. Egg cards (2.0 x 7.0 cm) containing eggs from two populations of S. frugiperda, (resistant to Metaflumizone and the other susceptible), were exposed to T. pretiosum females for 24 hours in free-choice and no-choice testing in three generations (G1, G4, and G6). A completely randomized experimental design was used with 25 replications, each consisting of an egg card (experimental unit) containing 20 eggs. The parameters evaluated were: parasitism (%), emergence (%), sex ratio, number of emerged parasitoids per egg and males/females longevity. ANOVA and Tukey test (P≤ 0.05) were applied on the results. Results showed a reduction in parasitism [41.0% (G1) and 28.4% (G4)], egg emergence (17.5%) and parasitoids/egg [16.2 (G4) and 17.2 (G6)] in eggs originating from the population with resistance frequency. Females emerging from G6 populations eggs without exposure to Metaflumizone had greater longevity (3.5 days more) than the resistant population. The sex ratio and male longevity were not affected. The results indicate a reduction in T. pretiosum activity if S. frugiperda populations have some frequency of resistance to Metaflumizone.

Resumo A possível interferência de populações de pragas resistentes na ação de inimigos naturais ainda não foi esclarecida. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar o desempenho de Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae) em ovos de Spodoptera frugiperda (J. E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) com frequência de resistência à Metaflumizona ao longo de seis gerações de exposição ao produto. Cartelas (2,0 x 7,0 cm) com ovos de duas populações de S. frugiperda, (resistente à Metaflumizona e outra suscetível), foram expostas às fêmeas de T. pretiosum por 24 horas em condições de livre escolha e sem chance de escolha por três gerações (G1, G4 e G6). O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com 25 repetições, sendo cada repetição composta por uma cartela (unidade experimental) contendo 20 ovos. Os parâmetros avaliados foram: parasitismo (%), emergência (%), razão sexual, número de parasitoides emergidos por ovo e longevidade de machos e fêmeas. ANOVA e teste de Tukey (P≤ 0,05) foram aplicados aos dados coletados. Os resultados mostraram redução do parasitismo [41,0% (G1) e 28,4% (G4)], emergência de ovos (17,5%) e parasitoides/ovo [16,2 (G4) e 17,2 (G6)] em ovos oriundos da população com frequência de resistência. As fêmeas emergidas de ovos da população G6 sem exposição à Metaflumizona, tiveram maior longevidade (3,5 dias a mais) do que a população exposta ao inseticida. A razão sexual e a longevidade de machos não foram afetadas. Os resultados indicam uma redução na atividade de T. pretiosum se as populações de S. frugiperda apresentarem alguma frequência de resistência à Metaflumizona.

Do fall armyworm's Metaflumizone resistante populations affect the activity of Trichogramma pretiosum? / Populações da lagarta-do-cartucho resistentes à Metaflumizona afetam a atividade de Trichogramma pretiosum?

The possible interference of resistant pest’s populations to insecticides in natural enemies in the action thas not been clarified yet. Thus, this study aimed to evaluate Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae) performance on Spodoptera frugiperda (J. E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) eggs with resistance frequency to the Metaflumizone over six generations of product exposure. Egg cards (2.0 x 7.0 cm) containing eggs from two populations of S. frugiperda, (resistant to Metaflumizone and the other susceptible), were exposed to T. pretiosum females for 24 hours in free-choice and no-choice testing in three generations (G1, G4, and G6). A completely randomized experimental design was used with 25 replications, each consisting of an egg card (experimental unit) containing 20 eggs. The parameters evaluated were: parasitism (%), emergence (%), sex ratio, number of emerged parasitoids per egg and males/females longevity. ANOVA and Tukey test (P≤ 0.05) were applied on the results. Results showed a reduction in parasitism [41.0% (G1) and 28.4% (G4)], egg emergence (17.5%) and parasitoids/egg [16.2 (G4) and 17.2 (G6)] in eggs originating from the population with resistance frequency. Females emerging from G6 populations eggs without exposure to Metaflumizone had greater longevity (3.5 days more) than the resistant population. The sex ratio and male longevity were not affected. The results indicate a reduction in T. pretiosum activity if S. frugiperda populations have some frequency of resistance to Metaflumizone.

A possível interferência de populações de pragas resistentes na ação de inimigos naturais ainda não foi esclarecida. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar o desempenho de Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae) em ovos de Spodoptera frugiperda (J. E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) com frequência de resistência à Metaflumizona ao longo de seis gerações de exposição ao produto. Cartelas (2,0 x 7,0 cm) com ovos de duas populações de S. frugiperda, (resistente à Metaflumizona e outra suscetível), foram expostas às fêmeas de T. pretiosum por 24 horas em condições de livre escolha e sem chance de escolha por três gerações (G1, G4 e G6). O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com 25 repetições, sendo cada repetição composta por uma cartela (unidade experimental) contendo 20 ovos. Os parâmetros avaliados foram: parasitismo (%), emergência (%), razão sexual, número de parasitoides emergidos por ovo e longevidade de machos e fêmeas. ANOVA e teste de Tukey (P≤ 0,05) foram aplicados aos dados coletados. Os resultados mostraram redução do parasitismo [41,0% (G1) e 28,4% (G4)], emergência de ovos (17,5%) e parasitoides/ovo [16,2 (G4) e 17,2 (G6)] em ovos oriundos da população com frequência de resistência. As fêmeas emergidas de ovos da população G6 sem exposição à Metaflumizona, tiveram maior longevidade (3,5 dias a mais) do que a população exposta ao inseticida. A razão sexual e a longevidade de machos não foram afetadas. Os resultados indicam uma redução na atividade de T. pretiosum se as populações de S. frugiperda apresentarem alguma frequência de resistência à Metaflumizona.

Toxicity of insecticides used in rice crop on the egg parasitoid Trichogramma pretiosum (Hymenoptera: Trichogrammatidae) under field conditions / Toxicidade de inseticidas utilizados na cultura do arroz sobre o parasitoide de ovos Trichogramma pretiosum (Hymenoptera: Trichogrammatidae) em condições de campo

We evaluated under field conditions the toxicity of insecticides previously identified as harmful in laboratory and semifield bioassays on the parasitoid Trichogramma pretiosum (Hymenoptera: Trichogrammatidae). The experiments were conducted during the 2019/20 and 2020/21 harvests in rice fields. Following the recommendations of the International Organization for Biological and Integrated Control (IOBC), four insecticides were applied in 64 m2 experimental plots. Subsequently, T. pretiosum was released inundatively. To verify parasitism rates, at 1, 2, 4 and 6 days after release (DAR) of the parasitoids, eggs from the host Ephestia kuehniella (Lepidoptera: Pyralidae) were offered. After determining the number of parasitized eggs, the data were grouped into a reduction coefficient (Ex) to provide a single result for the effects of the insecticides on parasitoid. For both the 2019/20 and 2020/21 evaluated crops, it was found that at 2 DAR, the highest parasitism rates occurred. In contrast, in 6 DAR, no parasitism rates were observed. Lambda-cyhalothrin, thiamethoxam, and zeta-cypermethrin were classified as moderately harmful; thiamethoxam + lambda-cyhalothrin was classified as harmful. Following IOBC guidelines, the toxicity of these products under field conditions is lower than that obtained in the laboratory or semi-field for the T. pretiosum. However, these insecticides should be avoided, or used at times that do not coincide with the release or presence of the parasitoid in the field.

Avaliamos em condições de campo a toxicidade de inseticidas previamente identificados como nocivos em bioensaios de laboratório e semicampo sobre o parasitóide Trichogramma pretiosum (Hymenoptera: Trichogrammatidae). Os experimentos foram conduzidos durante as safras 2019/20 e 2020/21 em lavouras de arroz. Seguindo as recomendações da International Organization for Biological and Integrated Control (IOBC), quatro inseticidas foram aplicados em parcelas experimentais de 64 m2. Posteriormente, realizou-se uma liberação inundativa de T. pretiosum. Para verificar as taxas de parasitismo, aos 1, 2, 4 e 6 dias após a liberação (DAR) dos parasitoides, ovos do hospedeiro Ephestia kuehniella (Lepidoptera: Pyralidae) foram ofertados. Após a determinação do número de ovos parasitados, os dados foram agrupados em um coeficiente de redução (Ex) para fornecer um resultado único para os efeitos dos inseticidas sobre o parasitoide. Tanto para as safras 2019/20 quanto 2020/21, verificou-se que em 2 DAR, ocorreram as maiores taxas de parasitismo. Em contraste, aos 6 DAR, não foram observadas taxas de parasitismo. Lambda-cialotrina, tiametoxam e zeta-cipermetrina foram classificados como moderadamente nocivos; tiametoxam + lambda-cialotrina foi classificado como prejudicial. Seguindo as diretrizes da IOBC, a toxicidade desses produtos em condições de campo é inferior à obtida em laboratório ou semi-campo para o T. pretiosum. Entretanto, esses inseticidas devem ser evitados, ou utilizados em momentos que não coincidam com a liberação ou presença do parasitoide a campo.

Do fall armyworm's Metaflumizone resistante populations affect the activity of Trichogramma pretiosum? / Populações da lagarta-do-cartucho resistentes à Metaflumizona afetam a atividade de Trichogramma pretiosum?

The possible interference of resistant pests populations to insecticides in natural enemies in the action thas not been clarified yet. Thus, this study aimed to evaluate Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae) performance on Spodoptera frugiperda (J. E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) eggs with resistance frequency to the Metaflumizone over six generations of product exposure. Egg cards (2.0 x 7.0 cm) containing eggs from two populations of S. frugiperda, (resistant to Metaflumizone and the other susceptible), were exposed to T. pretiosum females for 24 hours in free-choice and no-choice testing in three generations (G1, G4, and G6). A completely randomized experimental design was used with 25 replications, each consisting of an egg card (experimental unit) containing 20 eggs. The parameters evaluated were: parasitism (%), emergence (%), sex ratio, number of emerged parasitoids per egg and males/females longevity. ANOVA and Tukey test (P≤ 0.05) were applied on the results. Results showed a reduction in parasitism [41.0% (G1) and 28.4% (G4)], egg emergence (17.5%) and parasitoids/egg [16.2 (G4) and 17.2 (G6)] in eggs originating from the population with resistance frequency. Females emerging from G6 populations eggs without exposure to Metaflumizone had greater longevity (3.5 days more) than the resistant population. The sex ratio and male longevity were not affected. The results indicate a reduction in T. pretiosum activity if S. frugiperda populations have some frequency of resistance to Metaflumizone.(AU)

A possível interferência de populações de pragas resistentes na ação de inimigos naturais ainda não foi esclarecida. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar o desempenho de Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae) em ovos de Spodoptera frugiperda (J. E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) com frequência de resistência à Metaflumizona ao longo de seis gerações de exposição ao produto. Cartelas (2,0 x 7,0 cm) com ovos de duas populações de S. frugiperda, (resistente à Metaflumizona e outra suscetível), foram expostas às fêmeas de T. pretiosum por 24 horas em condições de livre escolha e sem chance de escolha por três gerações (G1, G4 e G6). O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com 25 repetições, sendo cada repetição composta por uma cartela (unidade experimental) contendo 20 ovos. Os parâmetros avaliados foram: parasitismo (%), emergência (%), razão sexual, número de parasitoides emergidos por ovo e longevidade de machos e fêmeas. ANOVA e teste de Tukey (P≤ 0,05) foram aplicados aos dados coletados. Os resultados mostraram redução do parasitismo [41,0% (G1) e 28,4% (G4)], emergência de ovos (17,5%) e parasitoides/ovo [16,2 (G4) e 17,2 (G6)] em ovos oriundos da população com frequência de resistência. As fêmeas emergidas de ovos da população G6 sem exposição à Metaflumizona, tiveram maior longevidade (3,5 dias a mais) do que a população exposta ao inseticida. A razão sexual e a longevidade de machos não foram afetadas. Os resultados indicam uma redução na atividade de T. pretiosum se as populações de S. frugiperda apresentarem alguma frequência de resistência à Metaflumizona.(AU)

Transferability of microssatellite markers to Trichogramma pretiosum Riley, 1879 (Hymenoptera: Trichogrammatidae) / Transferibilidade de marcadores microssatélites para Trichogramma pretiosum Riley, 1879 (Hymenoptera: Trichogrammatidae)

The biological pest control has expanded in Brazil with the Trichogramma pretiosumas the main natural enemy. The microsatellite molecular markers Simple Sequence Repeat (SSR) have been the most used, as they are multiallelic, robust and reproducible, in several species. In order to optimize future processes of identification and analysis of the parasitoid's genetic diversity, twenty markers, isolated and characterized for the parasitoid wasp Trichogramma dendrolimi,were tested in 15 generations of T. pretiosum. Those markers, ten have been transferred and can be used to evaluate the genetic variation of T. pretiosum.(AU)

O controle biológico de pragas tem expandido no Brasil com o Trichogramma pretiosumcomo o principal inimigo natural. Os marcadores moleculares microssatélites de repetição de sequência simples (SSR) temsido os mais utilizados, por serem multialélicos, robustos e reprodutíveis, em várias espécies. No intuito de otimizar futuros processos de identificação e análise de diversidade genética do parasitoide, 20marcadores, isolados e caracterizados para a vespa parasitoide Trichogramma dendrolimi, foram testados em 15 gerações de T. pretiosum. Destes marcadores, dez foram transferidos e podem ser utilizados para avaliar a variação genética de T. pretiosum.(AU)

Can Trichogramma atopovirilia Oatman & Platner replaces Trichogramma galloi Zucchi for Diatraea saccharalis (Fabricius) control?

Studies on aggressiveness of parasitoids, as assessed by their parasitism against pests, used in biological-control programs are highly important to select the most suitable species and/or strain to control insect pests. The present study investigated whether the egg parasitoid Trichogramma galloi Zucchi, an efficient control agent for sugarcane borer Diatraea saccharalis (Fabricius) in Brazil, could be replaced by Trichogramma atopovirilia Oatman & Platner, a parasitoid easier to mass-produce, since it has been found parasitizing D. saccharalis eggs in the warmest region of Brazil and Argentina. Three strains of the genus Trichogramma were compared: T. atopovirilia (ATP strain) reared on a factitious host Anagasta kuehniella (Zeller); T. atopovirilia isoline ATP-I, reared on D. saccharalis eggs for six generations; and T. galloi, reared on A. kuehniella eggs. We measured parasitism of each strain for 72 h and for the entire life span, parasitism rate per cluster of D. saccharalis eggs, number of parasitoids emerged (parasitism viability), and parasitoid life span. The results confirmed that T. galloi is the best species for D. saccharalis control, showing higher control potential, since parasitism and emergence rate were higher for this species. Although T. atopovirilia ATP-I performed reliably in all parameters, T. galloi exceeded and was the most indicated for mass-rearing in control programs for sugarcane borer.

Parasitism capacity of Trichogramma pretiosum Riley, 1879 and Telenomus remus Nixon, 1937 after ingestion of biological pesticides / Capacidade de parasitismo de Trichogramma pretiosum Riley, 1879 e Telenomus remus Nixon, 1937 após ingestão de pesticidas biológicos

Augmentative biological control (ABC) of insect pests is an environmentally sustainable alternative to synthetic insecticides. By performing BC, more than one control agent can be used for the same insect pest that is in different stages of its life cycle or for pests that simultaneously occur in the area. However, this relationship requires biosecurity for the control agents employed. The aim of this study was to evaluate the parasitism capacity of Trichogramma pretiosum Riley, 1879 and Telenomus remus Nixon, 1937 after ingestion of biological pesticides. The entomopathogens, Baculovirus Anticarsia gemmatalis nucleopolyhedrovirus (AgMNPV), Bacillus thuringiensis (Bt) var. kurstaki, Bt var. aizawai, Beauveria bassiana, and Metarhizium anisopliae; the microbiological fungicide, Trichoderma harzianum, at concentrations recommended by the manufacturer; and a negative control (pure honey) were employed in this study. Further, forced ingestion was adopted, with the treatments mixed in honey and offered as food at two dilutions (one-part product: one-part honey and one-part product: nine parts honey). Each treatment consisted of 20 individual females for each parasitoid (T. pretiosum or T. remus). The following parameters were evaluated: female longevity, number of parasitized eggs, egg viability, and number of females and males to determine the sex ratio. For T. pretiosum, B. bassiana (1 × 1013 viable conidia 100 L H2O-1), and T. harzianum (5 × 1012 viable conidia 100 L H2O-1), the longevity of their females was reduced by the 1:1 mixture; however, this mixture did not interfere with other parameters and other biological pesticides compared to the respective controls of both dilutions. The biological pesticides did not negatively influence the parameters evaluated for T. remus. The tested products had low toxicity to the egg parasitoids, T. pretiosum and T. remus. Overall, more work is still required with parasitoids in other stages of development and with other exposure methods to confirm the selectivity of products for egg parasitoids to recommend its combined use in the field.(AU)

O controle biológico aumentativo (CBA) de insetos-praga é uma alternativa ambientalmente sustentável em relação aos inseticidas sintéticos. Com a utilização do CBA, mais de um agente de controle pode ser utilizado para um mesmo inseto-praga que se encontra em diferentes estágios do seu ciclo de vida ou para pragas que ocorrem simultaneamente na área. No entanto, essa relação necessita de biossegurança para os agentes de controle envolvidos. O objetivo do trabalho foi avaliar a capacidade de parasitismo de Trichogramma pretiosum Riley, 1879 e Telenomus remus Nixon, 1937 após a ingestão de pesticidas biológicos. Os entomopatógenos Baculovírus Anticarsia gemmatalis nucleopoliedrovirus (AgMNPV), Bacillus thuringiensis var. kurstaki, Bacillus thuringiensis var. aizawai, Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae, o fungicida microbiológico Trichoderma harzianum nas concentrações recomendadas pelos fabricantes e um controle negativo (mel puro) foram utilizados nos bioensaios. A metodologia empregada foi de ingestão forçada, com os tratamentos misturados ao mel e oferecidos como alimento em duas diluições diferentes (1 parte do produto:1 parte de mel e 1 parte do produto:9 partes de mel). Cada tratamento constou de 20 fêmeas individualizadas de cada parasitoide (T. pretiosum ou T. remus). Os parâmetros avaliados foram: longevidade das fêmeas, número de ovos parasitados, viabilidade dos ovos e número de fêmeas e machos para determinação da razão sexual. Para T. pretiosum, B. bassiana (1×1013 conídios viáveis 100L H2O-1) e T. harzianum (5×1012 conídios viáveis 100L H2O-1) reduziram a longevidade das fêmeas na mistura 1:1, porém não interferiram nos demais parâmetros avaliados, bem como os demais produtos microbiológicos comerciais avaliados, quando comparados às respectivas testemunhas de ambas as diluições. Os pesticidas biológicos não influenciaram negativamente nos parâmetros avaliados de T. remus. Os produtos testados apresentam baixa toxicidade aos parasitoides de ovos T. pretiosum e T. remus. Ainda há necessidade de mais trabalhos com outros estágios de desenvolvimento dos parasitoides e outros métodos de exposição para confirmar a seletividade dos produtos aos parasitoides de ovos, para recomendar o uso conjunto destes no campo.(AU)

Sequence analysis of the internal transcribed spacer 2 (ITS2) region of rDNA for identifying Trichogramma species and evaluating genetic diversity / Análise de sequência do rDNA da região espaçadora do transcrito interno 2 (ITS2) para identificar espécies de Trichogramma e avaliar a diversidade genética

Species of Trichogramma Westwood, 1833 (Hymenoptera: Trichogrammtidae) are frequently used as biological control agents against Lepidoptera, but practical application of these egg endoparasitoids are complicated because of their complex taxonomy. This study aimed to compare sequences of internal transcribed spacer regions of ribosomal DNA (ITS2-rDNA) of Trichogramma accessions with those deposited in GenBank in order to access the reliability of the ITS2 as a barcode for discriminating species and evaluating the genetic diversity. ITS2-rDNA sequences obtained from seventeen specimens of Trichogramma confirmed previous identifications based on morphological characteristics. Multiple sequence alignment revealed the existence of highly conserved regions in ITS2 sequences while the neighbour-joining dendrogram indicated that the specimens formed three clusters comprising T. manicobai and T. marandobai (group I), T. galloi (group II) and T. pretiosum (group III). The ITS2 marker was shown to be a powerful DNA barcode for discriminating Trichogramma species and could be used to complement the morphological approach.(AU)

Espécies de Trichogramma Westwood, 1833 (Hymenoptera: Trichogrammatidae) são freqüentemente usadas como agentes de controle biológico contra Lepidoptera, esses endoparasitóides de ovos apresentam taxonomia complexa, o que dificulta sua aplicação prática. Este estudo teve como objetivo comparar seqüências de regiões espaçadoras internas transcritas de DNA ribossômico (ITS2-rDNA) de acessos de Trichogramma com aquelas depositadas no GenBank, a fim de avaliar a confiabilidade do ITS2 barcode para discriminar espécies e avaliar a diversidade genética. As seqüências de ITS2-rDNA obtidas de dezessete espécimes de Trichogramma confirmaram identidades anteriores com base em características morfológicas. O alinhamento de múltiplas sequências revelou a existência de regiões altamente conservadas nas sequências ITS2, enquanto o dendrograma indicou que os espécimes formavam três grupos compreendendo T. manicobai e T. marandobai (grupo I), T. galloi (grupo II) e T. pretiosum (grupo III). O marcador ITS2 mostrou ser um poderoso DNA barcode para discriminar espécies de Trichogramma podendo ser usado como complemento da abordagem morfológica.(AU)

Sequence analysis of the internal transcribed spacer 2 (ITS2) region of rDNA for identifying Trichogramma species and evaluating genetic diversity

Abstract Species of Trichogramma Westwood, 1833 (Hymenoptera: Trichogrammtidae) are frequently used as biological control agents against Lepidoptera, but practical application of these egg endoparasitoids are complicated because of their complex taxonomy. This study aimed to compare sequences of internal transcribed spacer regions of ribosomal DNA (ITS2-rDNA) of Trichogramma accessions with those deposited in GenBank in order to access the reliability of the ITS2 as a barcode for discriminating species and evaluating the genetic diversity. ITS2-rDNA sequences obtained from seventeen specimens of Trichogramma confirmed previous identifications based on morphological characteristics. Multiple sequence alignment revealed the existence of highly conserved regions in ITS2 sequences while the neighbour-joining dendrogram indicated that the specimens formed three clusters comprising T. manicobai and T. marandobai (group I), T. galloi (group II) and T. pretiosum (group III). The ITS2 marker was shown to be a powerful DNA barcode for discriminating Trichogramma species and could be used to complement the morphological approach.

Resumo Espécies de Trichogramma Westwood, 1833 (Hymenoptera: Trichogrammatidae) são freqüentemente usadas como agentes de controle biológico contra Lepidoptera, esses endoparasitóides de ovos apresentam taxonomia complexa, o que dificulta sua aplicação prática. Este estudo teve como objetivo comparar seqüências de regiões espaçadoras internas transcritas de DNA ribossômico (ITS2-rDNA) de acessos de Trichogramma com aquelas depositadas no GenBank, a fim de avaliar a confiabilidade do ITS2 barcode para discriminar espécies e avaliar a diversidade genética. As seqüências de ITS2-rDNA obtidas de dezessete espécimes de Trichogramma confirmaram identidades anteriores com base em características morfológicas. O alinhamento de múltiplas sequências revelou a existência de regiões altamente conservadas nas sequências ITS2, enquanto o dendrograma indicou que os espécimes formavam três grupos compreendendo T. manicobai e T. marandobai (grupo I), T. galloi (grupo II) e T. pretiosum (grupo III). O marcador ITS2 mostrou ser um poderoso DNA barcode para discriminar espécies de Trichogramma podendo ser usado como complemento da abordagem morfológica.

Trichogramma pretiosum in field release and under different temperatures in laboratory / Trichogramma pretiosum em liberação no campo e sob diferentes temperaturas em laboratório

This study aimed to evaluate a strain of Trichogramma pretiosum native to the central region of the state Rio Grande do Sul, Brazil, under different temperatures in laboratory and the parasitism of Helicoverpa zea after releases in corn field. Trichogramma pretiosum females were kept at 18, 25 and 30 °C and had their parasitism potential evaluated. Nine plots (400 m2) of maize were installed in randomized blocks under the treatments: 1) staggered release of parasitoids in three different occasions, at three-day intervals; 2) a single release of parasitoids; 3) no release of parasitoids. Ears were collected every four days and the number of caterpillars and eggs of H. zea in the maize silk and the number of damaged ears were estimated. Evaluation started after the tassels growth and ended with the drying of the styles-stigmas. To estimate the grain mass and the ear number and mass, two lines in each plot were delimited and reserved at the end of the cultivation cycle. In laboratory, the highest parasitism rate occurred at 25 °C (35.54%) and the lowest longevity at 30 °C (6.8 days). A total of 1,063 H. zea eggs were collected in the field, 69.52% were parasitized. The mean parasitism rate was higher in T1 (staggered release, 82.77%) than in control (51.87%), but there was no difference in grain yield. Based on the parasitism capacity of the studied strain, it can be potentially used in programs of biological control of H. zea in corn crops of Rio Grande do Sul.(AU)

O estudo objetivou avaliar uma linhagem de Trichogramma pretiosum nativa da região Central do Rio Grande do Sul (Brasil) sob diferentes temperaturas em laboratório, e no parasitismo de Helicoverpa zea após liberações em área de milho. Fêmeas de T. pretiosum foram mantidas a 18, 25 e 30 °C e avaliadas quanto ao potencial de parasitismo. No campo, foram instaladas nove parcelas (400 m2) de milho híbrido em blocos ao acaso, com os seguintes tratamentos: 1) liberação de parasitoides fracionada em três vezes, em intervalos de três dias; 2) liberação em apenas uma ocasião; 3) sem liberação. A cada quatro dias foram coletadas espigas e registrados os danos e o número de lagartas e ovos de H. zea dos estilos-estigmas. A avaliação iniciou durante o pendoamento e estendeu-se até a fase de secagem dos estilos-estigma. Duas linhas em cada parcela foram reservadas para avaliação do número e da massa de espigas e grãos. Em laboratório, o maior percentual de parasitismo foi aos 25 °C (35,54%) e a menor longevidade aos 30 °C (6,8 dias). No campo, foram coletados 1.063 ovos de H. zea, dos quais 69,52% estavam parasitados. O percentual médio de parasitismo foi maior com liberação escalonada de T. pretiosum (82,77%), comparativamente ao controle (51,87%), porém, não houve diferença na produção de grãos. Tendo em vista a capacidade de parasitismo da linhagem avaliada, sugere-se que ela possui potencial para ser utilizada em programas de controle biológico da lagarta da espiga no cultivo de milho no Rio Grande do Sul.(AU)

Trichogramma pretiosum in field release and under different temperatures in laboratory / Trichogramma pretiosum em liberação no campo e sob diferentes temperaturas em laboratório

This study aimed to evaluate a strain of Trichogramma pretiosum native to the central region of the state Rio Grande do Sul, Brazil, under different temperatures in laboratory and the parasitism of Helicoverpa zea after releases in corn field. Trichogramma pretiosum females were kept at 18, 25 and 30 °C and had their parasitism potential evaluated. Nine plots (400 m2) of maize were installed in randomized blocks under the treatments: 1) staggered release of parasitoids in three different occasions, at three-day intervals; 2) a single release of parasitoids; 3) no release of parasitoids. Ears were collected every four days and the number of caterpillars and eggs of H. zea in the maize silk and the number of damaged ears were estimated. Evaluation started after the tassels growth and ended with the drying of the styles-stigmas. To estimate the grain mass and the ear number and mass, two lines in each plot were delimited and reserved at the end of the cultivation cycle. In laboratory, the highest parasitism rate occurred at 25 °C (35.54%) and the lowest longevity at 30 °C (6.8 days). A total of 1,063 H. zea eggs were collected in the field, 69.52% were parasitized. The mean parasitism rate was higher in T1 (staggered release, 82.77%) than in control (51.87%), but there was no difference in grain yield. Based on the parasitism capacity of the studied strain, it can be potentially used in programs of biological control of H. zea in corn crops of Rio Grande do Sul.(AU)

O estudo objetivou avaliar uma linhagem de Trichogramma pretiosum nativa da região Central do Rio Grande do Sul (Brasil) sob diferentes temperaturas em laboratório, e no parasitismo de Helicoverpa zea após liberações em área de milho. Fêmeas de T. pretiosum foram mantidas a 18, 25 e 30 °C e avaliadas quanto ao potencial de parasitismo. No campo, foram instaladas nove parcelas (400 m2) de milho híbrido em blocos ao acaso, com os seguintes tratamentos: 1) liberação de parasitoides fracionada em três vezes, em intervalos de três dias; 2) liberação em apenas uma ocasião; 3) sem liberação. A cada quatro dias foram coletadas espigas e registrados os danos e o número de lagartas e ovos de H. zea dos estilos-estigmas. A avaliação iniciou durante o pendoamento e estendeu-se até a fase de secagem dos estilos-estigma. Duas linhas em cada parcela foram reservadas para avaliação do número e da massa de espigas e grãos. Em laboratório, o maior percentual de parasitismo foi aos 25 °C (35,54%) e a menor longevidade aos 30 °C (6,8 dias). No campo, foram coletados 1.063 ovos de H. zea, dos quais 69,52% estavam parasitados. O percentual médio de parasitismo foi maior com liberação escalonada de T. pretiosum (82,77%), comparativamente ao controle (51,87%), porém, não houve diferença na produção de grãos. Tendo em vista a capacidade de parasitismo da linhagem avaliada, sugere-se que ela possui potencial para ser utilizada em programas de controle biológico da lagarta da espiga no cultivo de milho no Rio Grande do Sul.(AU)

Phylogeny of the Trichogramma endosymbiont Wolbachia, an alpha-proteobacteria (Rickettsiae) / Filogenia do endosimbionte Wolbachia em Trichogramma, an alpha-proteobacteria (Rickettsiae)

Wolbachia (Hertig) endosymbionts are extensively studied in a wide range of organisms and are known to be transmitted through the egg cytoplasm to the offsping. Wolbachia may cause several types of reproductive modifications in arthropods. In Trichogramma species, parthenogenesis-inducing Wolbachia bacteria allow females wasps to produce daughters from unfertilized eggs and these bacteria are present in at least 9% of all Trichogramma species. Phylogenetic studies have led to the subdivision of the Wolbachia clade in five supergroups (A, B, C, D and E) and Wolbachia from Trichogramma belong to supergroup B. Here, using the wsp gene, four groups of Wolbachia that infect Trichogramma species were distinguished and the addition of a new group Ato was suggested due to the addition of Wolbachia from Trichogramma atopovirilia (Oatman and Platner). Specific primers were designed and tested for the Ato group. Seventy-five percent of all evaluated Wolbachia strains from Trichogramma fell within Sib group.(AU)

Endosimbiontes do gênero Wolbachia (Hertig) são extensivamente estudados em uma ampla gama de organismos e são conhecidos por serem transmitidos via citoplasma do ovo hospedeiro para seu descendente. Wolbachia pode causar vários tipos de alterações reprodutivas nos artrópodes. Nas espécies de Trichogramma, a reprodução partenogenética induzida por Wolbachia, possibilita as fêmeas dos parasitoides a produção de fêmeas a partir de ovos não fertilizados e estas bactérias estão presentes em pelo menos 9% de todas as espécies de Trichogramma. Estudos filogenéticos têm levado a subdivisão do clado Wolbachia em cinco supergrupos (A, B, C, D and E). Wolbachia em Trichogramma pertence ao supergrupo B. Com o gene wsp foi possível se distinguir quatro grupos de Wolbachia que infectam Trichogramma e adicionar um novo grupo (Ato) devido a inclusão de Wolbachia detectada em Trichogramma atopovirilia (Oatman and Platner, 1983). Primers específicos foram construídos e testados para o grupo Ato. Setenta e cinco por cento de todas as linhagens de Wolbachia que infectam Trichogramma se enquadraram dentro do grupo Sib.(AU)

Selection of parasitoids of the genus Trichogramma (Hymenoptera: Trichogrammatidae) and parasitism at different eggs ages of Duponchelia fovealis (Lepidoptera: Crambidae) / Seleção de parasitoides do gênero Trichogramma (Hymenoptera: Trichogrammatidae) e parasitismo em ovos de diferentes idades de Duponchelia fovealis (Lepidoptera: Crambidae)

The European pepper moth Duponchelia fovealis (Zeller, 1847) (Lepidoptera: Crambidae), despite being among the principal pests of strawberries in Brazil. However, biological control methods are rarely documented for this pest. In the current study, the goal was to select promising Trichogramma strains to enable the control of D. fovealis and to determine the acceptance of different ages of host eggs by the parasitoid. In the first bioassay, evaluations were done on the biological parameters of five strains of Trichogramma pretiosum Riley and one of Trichogramma galloi Zucchi (Hymenoptera: Trichogrammatidae). The best performance came from the strains, Tp18 (T. pretiosum) and Tg (T. galloi), showing parasitism and viability higher than 50 and 90%, respectively. Another bioassay revealed the acceptance of both these species (Tp18 and Tg) for different ages of D. fovealis eggs. All host ages were accepted by T. pretiosum (Tp18) and T. galloi, with a preference for younger eggs (65% parasitism). Adult emergence, number of individuals per egg and sex ratio revealed no significant differences with respect to the host age. The current study provides pertinent data on the selection and performance of Trichogramma species on D. fovealis eggs of different ages.

A traça do morangueiro Duponchelia fovealis (Zeller, 1847) (Lepidoptera: Crambidae) é uma das principais pragas da cultura do morango no Brasil. Entretanto, métodos de controle biológico desta praga são raramente documentados. Este trabalho teve como objetivo selecionar linhagens de Trichogramma e avaliar o parasitismo de diferentes idades de ovos de D. fovealis. Foram avaliados os parâmetros biológicos de cinco linhagens de Trichogramma pretiosum Riley e uma de Trichogramma galloi Zucchi (Hymenoptera: Trichogrammatidae). As espécies/linhagens com melhor desempenho foram Tp18 (T. pretiosum) e Tg (T. galloi), com taxas de parasitismo e viabilidade acima de 50 e 90%, respectivamente. Em seguida, foi avaliada a suscetibilidade das duas espécies (Tp18 e Tg) em diferentes idades de ovos de D. fovealis. Todas as idades do ovo hospedeiro avaliadas foram aceitas pelos dois parasitoides e houve uma maior tendência a parasitar ovos mais jovens. Em todas as idades do hospedeiro houve emergência de parasitoides adultos, e sem diferença significativa entre idades. As variáveis número de indivíduos por ovo e razão sexual não apresentaram diferença significativa quanto à idade do hospedeiro. O atual estudo fornece informações sobre a seleção e o desempenho de espécies de Trichogramma em diferentes idades de ovos de D. fovealis.

Selection of parasitoids of the genus Trichogramma (Hymenoptera: Trichogrammatidae) and parasitism at different eggs ages of Duponchelia fovealis (Lepidoptera: Crambidae) / Seleção de parasitoides do gênero Trichogramma (Hymenoptera: Trichogrammatidae) e parasitismo em ovos de diferentes idades de Duponchelia fovealis (Lepidoptera: Crambidae)

The European pepper moth Duponchelia fovealis (Zeller, 1847) (Lepidoptera: Crambidae), despite being among the principal pests of strawberries in Brazil. However, biological control methods are rarely documented for this pest. In the current study, the goal was to select promising Trichogramma strains to enable the control of D. fovealis and to determine the acceptance of different ages of host eggs by the parasitoid. In the first bioassay, evaluations were done on the biological parameters of five strains of Trichogramma pretiosum Riley and one of Trichogramma galloi Zucchi (Hymenoptera: Trichogrammatidae). The best performance came from the strains, Tp18 (T. pretiosum) and Tg (T. galloi), showing parasitism and viability higher than 50 and 90%, respectively. Another bioassay revealed the acceptance of both these species (Tp18 and Tg) for different ages of D. fovealis eggs. All host ages were accepted by T. pretiosum (Tp18) and T. galloi, with a preference for younger eggs (65% parasitism). Adult emergence, number of individuals per egg and sex ratio revealed no significant differences with respect to the host age. The current study provides pertinent data on the selection and performance of Trichogramma species on D. fovealis eggs of different ages.(AU)

A traça do morangueiro Duponchelia fovealis (Zeller, 1847) (Lepidoptera: Crambidae) é uma das principais pragas da cultura do morango no Brasil. Entretanto, métodos de controle biológico desta praga são raramente documentados. Este trabalho teve como objetivo selecionar linhagens de Trichogramma e avaliar o parasitismo de diferentes idades de ovos de D. fovealis. Foram avaliados os parâmetros biológicos de cinco linhagens de Trichogramma pretiosum Riley e uma de Trichogramma galloi Zucchi (Hymenoptera: Trichogrammatidae). As espécies/linhagens com melhor desempenho foram Tp18 (T. pretiosum) e Tg (T. galloi), com taxas de parasitismo e viabilidade acima de 50 e 90%, respectivamente. Em seguida, foi avaliada a suscetibilidade das duas espécies (Tp18 e Tg) em diferentes idades de ovos de D. fovealis. Todas as idades do ovo hospedeiro avaliadas foram aceitas pelos dois parasitoides e houve uma maior tendência a parasitar ovos mais jovens. Em todas as idades do hospedeiro houve emergência de parasitoides adultos, e sem diferença significativa entre idades. As variáveis número de indivíduos por ovo e razão sexual não apresentaram diferença significativa quanto à idade do hospedeiro. O atual estudo fornece informações sobre a seleção e o desempenho de espécies de Trichogramma em diferentes idades de ovos de D. fovealis.(AU)

Effect of increasing rate of insecticides on its selectivity for Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae) / Efeito do aumento de dose de inseticidas sobre sua seletividade para Trichogramma pretiosum Riley (Hymenoptera: Trichogrammatidae)

The present study evaluated the effect of different rates of chlorantraniliprole, chlorantraniliprole + lambda-cyhalothrin, spinosad, and chlorfenapyr on their selectivity for the pupae and adults of Trichogramma pretiosum. The negative effect of majority of the insecticides tested on most of the parasitoids was directly proportional to the rate of the insecticide applied. Chlorantraniliprole at a rate of 10 g a.i. ha-¹ was classified as harmless (class 1) to both pupae and adults of the parasitoid. The effect of chlorantraniliprole at a rate of 20 to 50 g a.i. ha-¹ varied from harmless (class 1) to slightly harmful (class 2) to the adults of T. pretiosum. Chlorantraniliprole 10 + lambda-cyhalothrin at 5 g a.i. ha-¹ was classified as harmless (class 1) to the pupae and moderately harmful (class 3) to the adults of T.pretiosum. On the contrary, the highest rate of chlorantraniliprole 50 + lambda-cyhalothrin tested (i.e., 25 g a.i. ha-¹) was classified as slightly harmful (class 2) to the pupae and harmful (class 4) to the adults of the parasitoid. Similarly, increasing the application rate of spinosad and chlorfenapyr also exhibited an increase in toxicity. Spinosad at a rate of 24 g a.i. ha-¹ was classified as slightly harmful (class 2)and harmless (class 1) to the pupae and adults of T. pretiosum, respectively. Spinosad at 96 g a.i. ha-¹ was classified as both moderately harmful (class 3) and harmful (class 4) to the pupae of the parasitoid. Chlorfenapyr at a rate of 192 g a.i. ha-¹ was classified as both slightly harmful (class 2) and moderately harmful (class 3) to the pupae of T. pretiosum, whereas chlorfenapyr at 336 g a.i. ha-¹ was categorized as slightly harmful (class 3) and harmful (class 4) to the pupae. These results indicate that an increase in the rate of insecticide affected T. pretiosum negatively.[...](AU)

O presente estudo avaliou o efeito de diferentes taxas de clorantraniliprole, clorantraniliprole + lambdacialotrina,espinosade, e clorfenapir na seletividade para as pupas e adultos de Trichogramma pretiosum. O efeito negativo da maioria dos inseticidas testados nos parasitoides foi diretamente proporcional à dose do inseticida aplicado. O clorantraniliprole na dose de 10 g a.i. ha-¹ foi classificado como seletivo(classe 1) para pupas e adultos do parasitoide. O efeito do clorantraniliprole na dose de 20 a 50 g a.i. ha-¹ variou de seletivo (classe 1) a levemente prejudicial (classe 2) aos adultos de T. pretiosum. Clorantraniliprole 10 + lambda-cialotrina a 5 g a.i. ha-¹ foi classificado como seletivo (classe 1) para as pupas e moderadamente prejudicial (classe 3) aos adultos de T. pretiosum. Ao contrário, a dose mais alta de clorantraniliprole 50 + lambda-cialotrina testada (isto é, 25 g a.i. ha-¹) foi classificada como moderadamente prejudicial (classe 3) para as pupas e nociva (classe 4) para os adultos do parasitoide. Da mesma forma, o aumento da taxa de aplicação de espinosade e clorfenapir também apresentou aumento na toxicidade. O spinosade na dose de 24 g a.i. ha-¹ foi classificado como levemente prejudicial (classe 2) e seletivo (classe 1) às pupas e adultos de T. pretiosum, respectivamente. Espinosade 96 ga.i. ha-¹ foi classificado como moderadamente prejudicial (classe 3) e nocivas (classe 4) para as pupas do parasitoide. Clorofenapir 192 g a.i. ha-¹ foi classificado como levemente prejudicial (classe 2) e moderadamente prejudicial (classe 3) às pupas de T. pretiosum, enquanto o clorfenapir a 336 g a.i.ha-¹ foi categorizado como moderadamente prejudicial (classe 3) e nociva (classe 4) às pupas. Estes resultados indicam que um aumento na dose de inseticida afetou negativamente o T. pretiosum.[...](AU)

Phylogeny of the Trichogramma endosymbiont Wolbachia, an alpha-proteobacteria (Rickettsiae)

Abstract Wolbachia (Hertig) endosymbionts are extensively studied in a wide range of organisms and are known to be transmitted through the egg cytoplasm to the offsping. Wolbachia may cause several types of reproductive modifications in arthropods. In Trichogramma species, parthenogenesis-inducing Wolbachia bacteria allow females wasps to produce daughters from unfertilized eggs and these bacteria are present in at least 9% of all Trichogramma species. Phylogenetic studies have led to the subdivision of the Wolbachia clade in five supergroups (A, B, C, D and E) and Wolbachia from Trichogramma belong to supergroup B. Here, using the wsp gene, four groups of Wolbachia that infect Trichogramma species were distinguished and the addition of a new group Ato was suggested due to the addition of Wolbachia from Trichogramma atopovirilia (Oatman and Platner). Specific primers were designed and tested for the Ato group. Seventy-five percent of all evaluated Wolbachia strains from Trichogramma fell within Sib group.

Resumo Endosimbiontes do gênero Wolbachia (Hertig) são extensivamente estudados em uma ampla gama de organismos e são conhecidos por serem transmitidos via citoplasma do ovo hospedeiro para seu descendente. Wolbachia pode causar vários tipos de alterações reprodutivas nos artrópodes. Nas espécies de Trichogramma, a reprodução partenogenética induzida por Wolbachia, possibilita as fêmeas dos parasitoides a produção de fêmeas a partir de ovos não fertilizados e estas bactérias estão presentes em pelo menos 9% de todas as espécies de Trichogramma. Estudos filogenéticos têm levado a subdivisão do clado Wolbachia em cinco supergrupos (A, B, C, D and E). Wolbachia em Trichogramma pertence ao supergrupo B. Com o gene wsp foi possível se distinguir quatro grupos de Wolbachia que infectam Trichogramma e adicionar um novo grupo (Ato) devido a inclusão de Wolbachia detectada em Trichogramma atopovirilia (Oatman and Platner, 1983). Primers específicos foram construídos e testados para o grupo Ato. Setenta e cinco por cento de todas as linhagens de Wolbachia que infectam Trichogramma se enquadraram dentro do grupo Sib.

Phylogeny of the Trichogramma endosymbiont Wolbachia, an alpha-proteobacteria (Rickettsiae)

Abstract Wolbachia (Hertig) endosymbionts are extensively studied in a wide range of organisms and are known to be transmitted through the egg cytoplasm to the offsping. Wolbachia may cause several types of reproductive modifications in arthropods. In Trichogramma species, parthenogenesis-inducing Wolbachia bacteria allow females wasps to produce daughters from unfertilized eggs and these bacteria are present in at least 9% of all Trichogramma species. Phylogenetic studies have led to the subdivision of the Wolbachia clade in five supergroups (A, B, C, D and E) and Wolbachia from Trichogramma belong to supergroup B. Here, using the wsp gene, four groups of Wolbachia that infect Trichogramma species were distinguished and the addition of a new group Ato was suggested due to the addition of Wolbachia from Trichogramma atopovirilia (Oatman and Platner). Specific primers were designed and tested for the Ato group. Seventy-five percent of all evaluated Wolbachia strains from Trichogramma fell within Sib group.

Resumo Endosimbiontes do gênero Wolbachia (Hertig) são extensivamente estudados em uma ampla gama de organismos e são conhecidos por serem transmitidos via citoplasma do ovo hospedeiro para seu descendente. Wolbachia pode causar vários tipos de alterações reprodutivas nos artrópodes. Nas espécies de Trichogramma, a reprodução partenogenética induzida por Wolbachia, possibilita as fêmeas dos parasitoides a produção de fêmeas a partir de ovos não fertilizados e estas bactérias estão presentes em pelo menos 9% de todas as espécies de Trichogramma. Estudos filogenéticos têm levado a subdivisão do clado Wolbachia em cinco supergrupos (A, B, C, D and E). Wolbachia em Trichogramma pertence ao supergrupo B. Com o gene wsp foi possível se distinguir quatro grupos de Wolbachia que infectam Trichogramma e adicionar um novo grupo (Ato) devido a inclusão de Wolbachia detectada em Trichogramma atopovirilia (Oatman and Platner, 1983). Primers específicos foram construídos e testados para o grupo Ato. Setenta e cinco por cento de todas as linhagens de Wolbachia que infectam Trichogramma se enquadraram dentro do grupo Sib.

Sequence analysis of the internal transcribed spacer 2 (ITS2) region of rDNA for identifying Trichogramma species and evaluating genetic diversity

Abstract Species of Trichogramma Westwood, 1833 (Hymenoptera: Trichogrammtidae) are frequently used as biological control agents against Lepidoptera, but practical application of these egg endoparasitoids are complicated because of their complex taxonomy. This study aimed to compare sequences of internal transcribed spacer regions of ribosomal DNA (ITS2-rDNA) of Trichogramma accessions with those deposited in GenBank in order to access the reliability of the ITS2 as a barcode for discriminating species and evaluating the genetic diversity. ITS2-rDNA sequences obtained from seventeen specimens of Trichogramma confirmed previous identifications based on morphological characteristics. Multiple sequence alignment revealed the existence of highly conserved regions in ITS2 sequences while the neighbour-joining dendrogram indicated that the specimens formed three clusters comprising T. manicobai and T. marandobai (group I), T. galloi (group II) and T. pretiosum (group III). The ITS2 marker was shown to be a powerful DNA barcode for discriminating Trichogramma species and could be used to complement the morphological approach.

Resumo Espécies de Trichogramma Westwood, 1833 (Hymenoptera: Trichogrammatidae) são freqüentemente usadas como agentes de controle biológico contra Lepidoptera, esses endoparasitóides de ovos apresentam taxonomia complexa, o que dificulta sua aplicação prática. Este estudo teve como objetivo comparar seqüências de regiões espaçadoras internas transcritas de DNA ribossômico (ITS2-rDNA) de acessos de Trichogramma com aquelas depositadas no GenBank, a fim de avaliar a confiabilidade do ITS2 barcode para discriminar espécies e avaliar a diversidade genética. As seqüências de ITS2-rDNA obtidas de dezessete espécimes de Trichogramma confirmaram identidades anteriores com base em características morfológicas. O alinhamento de múltiplas sequências revelou a existência de regiões altamente conservadas nas sequências ITS2, enquanto o dendrograma indicou que os espécimes formavam três grupos compreendendo T. manicobai e T. marandobai (grupo I), T. galloi (grupo II) e T. pretiosum (grupo III). O marcador ITS2 mostrou ser um poderoso DNA barcode para discriminar espécies de Trichogramma podendo ser usado como complemento da abordagem morfológica.