Hyperinsulinemic hypoglycemia secondary to multiple beta cell adenomas in a boxer bitch

Background: The most frequent pancreatic tumours are derived from insulin-secreting β cells, commonly called insulinomas; these are characterised by high insulin secretion causing hypoglycemia and clinical signs such as seizures,tremors, weakness, and polyphagia, among others. In dogs, this tumour represents <0.5% of neoplasias; the majority aresolitary carcinoma masses and rarely adenomas. Insulin-secreting tumours are usually diagnosed in middle-aged or olderdogs. There is no apparent sex predilection for the disease and it has been mainly reported in medium to large breeds.Independently of whether they are adenomas or carcinomas, dogs have the same disease-free time and survival time andthe prognosis is poor.Case: An 8-year-old female Boxer was brought to the University Veterinary Hospital with a history of weakness, tremors,and generalised convulsions. Physical examination, CBC and urinalysis revealed no abnormalities. In the blood chemistryprofile, hypoglycemia was detected along with hyperinsulinemia. An abdominal ultrasound revealed the presence of twoabnormal masses located in the pancreas. The insulin:glucose ratio was 59.8. Exploratory celiotomy was performed andtwo masses were located in the mesentery, adjacent to the left pancreatic lobe, and a third was in the pancreatic tissue ofthe same lobule. All masses were resected during the same surgery. Cytology of the masses coincided with apparentlymalignant insulinoma, however, the histopathological and immunohistochemically report indicated an insulin-secretingadenoma. The patient improved clinically and remained stable for approximately 545 days, after which seizures relapsedand a new treatment was not approved. The patient died 575 days after surgery.Discussion: In dogs, pancreatic islet cell tumours correspond to endocrinologically active neoplasm that secrete hormonesand are associated with functional disorders (hyperinsulinemia) in relation to hypoglycemia...

Hyperinsulinemic hypoglycemia secondary to multiple beta cell adenomas in a boxer bitch

Background: The most frequent pancreatic tumours are derived from insulin-secreting β cells, commonly called insulinomas; these are characterised by high insulin secretion causing hypoglycemia and clinical signs such as seizures,tremors, weakness, and polyphagia, among others. In dogs, this tumour represents <0.5% of neoplasias; the majority aresolitary carcinoma masses and rarely adenomas. Insulin-secreting tumours are usually diagnosed in middle-aged or olderdogs. There is no apparent sex predilection for the disease and it has been mainly reported in medium to large breeds.Independently of whether they are adenomas or carcinomas, dogs have the same disease-free time and survival time andthe prognosis is poor.Case: An 8-year-old female Boxer was brought to the University Veterinary Hospital with a history of weakness, tremors,and generalised convulsions. Physical examination, CBC and urinalysis revealed no abnormalities. In the blood chemistryprofile, hypoglycemia was detected along with hyperinsulinemia. An abdominal ultrasound revealed the presence of twoabnormal masses located in the pancreas. The insulin:glucose ratio was 59.8. Exploratory celiotomy was performed andtwo masses were located in the mesentery, adjacent to the left pancreatic lobe, and a third was in the pancreatic tissue ofthe same lobule. All masses were resected during the same surgery. Cytology of the masses coincided with apparentlymalignant insulinoma, however, the histopathological and immunohistochemically report indicated an insulin-secretingadenoma. The patient improved clinically and remained stable for approximately 545 days, after which seizures relapsedand a new treatment was not approved. The patient died 575 days after surgery.Discussion: In dogs, pancreatic islet cell tumours correspond to endocrinologically active neoplasm that secrete hormonesand are associated with functional disorders (hyperinsulinemia) in relation to hypoglycemia...(AU)

Resistência à insulina e metabolismo de glicose na gestação, um paralelo entre equinos e humanos / Insulin resistance and glucose metabolism in pregnancy, a parallel between equines and humans

O metabolismo de glicose se adapta à gestação e lactação em várias espécies, incluindo os equinos. Essa adaptação envolve tanto o desenvolvimento progressivo fisiológico de resistência à insulina no tecido alvo, quanto o aumento na secreção de insulina pelas células β pancreáticas. A resistência a insulina, hiperinsulinemia e obesidade ou aumento da adiposidade regional são os três componentes principais da Síndrome Metabólica Equina. Ela pode levar à laminite, subfertilidade em éguas e garanhões, maior risco de distocias e aumento da chance de doenças ortopédicas e deformidades angulares em potros. Em humanos, as adaptações hematobioquímicas da gestação são conhecidas e os valores de referência em exames laboratoriais são diferentes entre mulheres gestantes e não gestantes. Em equinos ainda não existem estes valores para diagnóstico de resistência à insulina e/ou Diabetes Mellitus Gestacional em éguas prenhes. Desta forma, o objetivo desse trabalho é traçar um paralelo entre o descrito em mulheres gestantes e equinos.(AU)

Glucose metabolism adapts to gestation and lactation in several species, including horses. This adaptation involves the progressive physiological development of insulin resistance in target tissues and the increase in insulin secretion by pancreatic β cells. Insulin resistance and hyperinsulinemia together with obesity or increased regional adiposity are the three main components of Equine Metabolic Syndrome (EMS). EMS causes alterations in several systems of the body, leading to laminitis, fertility problems in mares and stallions, increased risk of dystocia and chance of orthopedic diseases and angular deformities in foals from affected mares. In humans, it is well known that due to the hematobiochemical adaptations of pregnancy, the reference values in laboratory tests are different between pregnant and non-pregnant women. Currently in equine, there are no reference values to diagnose insulin resistance and / or Gestational Diabetes Mellitus (GDM). Therefore, the objective of this review is to establish a parallel between what has been described in pregnant women and mares.(AU)

Resistência à insulina e metabolismo de glicose na gestação, um paralelo entre equinos e humanos / Insulin resistance and glucose metabolism in pregnancy, a parallel between equines and humans

O metabolismo de glicose se adapta à gestação e lactação em várias espécies, incluindo os equinos. Essa adaptação envolve tanto o desenvolvimento progressivo fisiológico de resistência à insulina no tecido alvo, quanto o aumento na secreção de insulina pelas células β pancreáticas. A resistência a insulina, hiperinsulinemia e obesidade ou aumento da adiposidade regional são os três componentes principais da Síndrome Metabólica Equina. Ela pode levar à laminite, subfertilidade em éguas e garanhões, maior risco de distocias e aumento da chance de doenças ortopédicas e deformidades angulares em potros. Em humanos, as adaptações hematobioquímicas da gestação são conhecidas e os valores de referência em exames laboratoriais são diferentes entre mulheres gestantes e não gestantes. Em equinos ainda não existem estes valores para diagnóstico de resistência à insulina e/ou Diabetes Mellitus Gestacional em éguas prenhes. Desta forma, o objetivo desse trabalho é traçar um paralelo entre o descrito em mulheres gestantes e equinos.

Glucose metabolism adapts to gestation and lactation in several species, including horses. This adaptation involves the progressive physiological development of insulin resistance in target tissues and the increase in insulin secretion by pancreatic β cells. Insulin resistance and hyperinsulinemia together with obesity or increased regional adiposity are the three main components of Equine Metabolic Syndrome (EMS). EMS causes alterations in several systems of the body, leading to laminitis, fertility problems in mares and stallions, increased risk of dystocia and chance of orthopedic diseases and angular deformities in foals from affected mares. In humans, it is well known that due to the hematobiochemical adaptations of pregnancy, the reference values in laboratory tests are different between pregnant and non-pregnant women. Currently in equine, there are no reference values to diagnose insulin resistance and / or Gestational Diabetes Mellitus (GDM). Therefore, the objective of this review is to establish a parallel between what has been described in pregnant women and mares.

Insulinoma canino: relato de caso / Canine insulinoma: case reports

O insulinoma é um tumor das células ß do pâncreas, que têm a função de produzir e secretar insulina e, geralmente são malignos em cães. O presente trabalho descreve o diagnóstico e o manejo terapêutico de três casos de insulinoma. Os sinais clínicos dos animais relatados variaram de acordo com a severidade e a duração da hipoglicemia. O diagnóstico presuntivo se deu através dos sinais clínicos e da dosagem de insulina sérica no momento de mais intensa hipoglicemia e, o diagnóstico definitivo foi obtido por meio de exame histopatológico nos três casos relatados. O tratamento realizado variou de acordo com a intensidade dos sinais clínicos.(AU)

Insulinoma is a tumor of the ß cells of the pancreas, which have the function to produce and secrete insulin and are usually malignant in dogs. This paper describes the diagnosis and therapeutic management of three cases of insulinoma. The clinical signs reported animals varied according to the severity and duration of hypoglycemia. The presumptive diagnosis was based on clinical signs and serum insulin dosage at the time of hypoglycemia and more intense, the definitive diagnosis was made by histopathological examination in three of the reported cases. The treatment was varied according to the severity of clinical signs.(AU)

Insulinoma canino: relato de caso / Canine insulinoma: case reports

O insulinoma é um tumor das células ß do pâncreas, que têm a função de produzir e secretar insulina e, geralmente são malignos em cães. O presente trabalho descreve o diagnóstico e o manejo terapêutico de três casos de insulinoma. Os sinais clínicos dos animais relatados variaram de acordo com a severidade e a duração da hipoglicemia. O diagnóstico presuntivo se deu através dos sinais clínicos e da dosagem de insulina sérica no momento de mais intensa hipoglicemia e, o diagnóstico definitivo foi obtido por meio de exame histopatológico nos três casos relatados. O tratamento realizado variou de acordo com a intensidade dos sinais clínicos.(AU)

Insulinoma is a tumor of the ß cells of the pancreas, which have the function to produce and secrete insulin and are usually malignant in dogs. This paper describes the diagnosis and therapeutic management of three cases of insulinoma. The clinical signs reported animals varied according to the severity and duration of hypoglycemia. The presumptive diagnosis was based on clinical signs and serum insulin dosage at the time of hypoglycemia and more intense, the definitive diagnosis was made by histopathological examination in three of the reported cases. The treatment was varied according to the severity of clinical signs.(AU)

Malignant metastatic insulinoma in a dog

Background: Insulinomas are tumors of the pancreatic islet beta cells that secreting insulin. They are malignant neoplasms and rarely seen in dogs. Because insulinomas secrete excessive insulin and hypoglycemia occur. The most common clinical symptoms are seizures, extreme weakness, and other neurological abnormalities. The tumors typically release insulin episodically, with clinical signs being seen intermittently as a result. These are most often associated with prolonged starvation or prolonged periods of exertion. Insulinoma occurs most often in middle-aged and older dogs, averaging nine years in age. They affect both sexes and are more likely in larger breeds. The most commonly afflicted breeds are German Shepherds, Irish Setters, Boxers, Golden Retrievers and Terriers. Case: In this study, a case of malignant insulinoma with multiorgan metastasis in a 7-year-old hunting dog that brought to the clinic with complaints of constipation and inappetence were evaluated by clinical, cytological, histopathological and immunohistochemical findings. Owner stated that the animal suffers from constipation for 4 days, but no vomitus or nervous symptoms were present. Clinical efforts not solved the constipation. For to the definitive diagnosis the dog decided to underwent laparotomy. After a midline abdominal approach multiple whitish, hard and irregular metastatic tumoral masses were[...]

Malignant metastatic insulinoma in a dog

Background: Insulinomas are tumors of the pancreatic islet beta cells that secreting insulin. They are malignant neoplasms and rarely seen in dogs. Because insulinomas secrete excessive insulin and hypoglycemia occur. The most common clinical symptoms are seizures, extreme weakness, and other neurological abnormalities. The tumors typically release insulin episodically, with clinical signs being seen intermittently as a result. These are most often associated with prolonged starvation or prolonged periods of exertion. Insulinoma occurs most often in middle-aged and older dogs, averaging nine years in age. They affect both sexes and are more likely in larger breeds. The most commonly afflicted breeds are German Shepherds, Irish Setters, Boxers, Golden Retrievers and Terriers. Case: In this study, a case of malignant insulinoma with multiorgan metastasis in a 7-year-old hunting dog that brought to the clinic with complaints of constipation and inappetence were evaluated by clinical, cytological, histopathological and immunohistochemical findings. Owner stated that the animal suffers from constipation for 4 days, but no vomitus or nervous symptoms were present. Clinical efforts not solved the constipation. For to the definitive diagnosis the dog decided to underwent laparotomy. After a midline abdominal approach multiple whitish, hard and irregular metastatic tumoral masses were[...](AU)

DIFERENCIAÇÃO DE CÉLULAS TRONCO DO TECIDO ADIPOSO EM CÉLULAS PRODUTORAS DE INSULINA: comparação de diferentes composições do meio de cultivo

A diabetes mellitus (DM) tipo 1 é uma doença comum em homens e cães, com complicações sérias e sem cura. Os tratamentos disponíveis apresentam limitações e não mimetizam o controle fisiológico que a secreção de insulina, pelas células beta pancreáticas, exercem na glicemia. Neste contexto, células tronco mesenquimais (CTM) de diferentes espécies têm sido utilizadas para a diferenciação em células beta funcionais. Os cães são utilizados como modelo de estudo da DM tipo 1 humana, devido às suas similaridades quanto à apresentação e ao curso da doença. No entanto, nesta espécie, pouco se sabe sobre a diferenciação in vitro das CTM em células produtoras de insulina (CPI). O objetivo deste estudo foi diferenciar células tronco mesenquimais do tecido adiposo (CTM-TA) de cães em CPI, por diferentes composições do meio de cultura, a fim de determinar a que promove melhor diferenciação. As células isoladas da gordura peri-uterina, após a terceira passagem, apresentaram características de CTM, como elevada expressão de CD90 e CD29 e baixa expressão de CD45 e CD34, além da capacidade para se diferenciar em adipócitos, condroblastos e osteoblastos. As CTM-TA foram distribuídas em seis grupos, de acordo com os meios de cultura: 1) DMEM/F12 alta glicose sem soro fetal bovino (SFB), ß-mercaptoetanol e nicotinamida; 2) DMEM/F12 alta glicose sem SFB, ß- mercaptoetanol, nicotinamida e exendin-4; 3) DMEM/F12 alta glicose sem SFB, ß-mercaptoetanol, nicotinamida, exendin-4, suplemento B27, aminoácidos não essenciais e L-glutamina; 4) cultivo em duas etapas, sendo a primeira (8 dias), com DMEM/F12 alta glicose sem SFB, ß-mercaptoetanol, nicotinamida e a segunda, (9-16dias), com o mesmo meio, acrescido de exendin-4, suplemento B27, aminoácidos não essenciais, L-glutamina e FGFb; 5) DMEM/F12 alta glicose sem SFB e 6) DMEM/F12 baixa glicose com 10% de SFB (controle negativo). Durante a diferenciação, as células foram observadas e fotografadas aos 3, 6, 10, 13 e 16 dias. Aos 16 dias, as culturas de células foram coradas por hematoxilina-eosina e por dithizone, marcador da insulina. Foi também avaliada, por RT-PCR, a expressão dos transcritos gênicos, expressos em células beta pancreáticas, como PDX-1, BETA 2, MafA e Insulin. Durante o cultivo, as CTM-TA dos grupos 1 ao 5 tornaram-se gradualmente mais arredondas e reunidas em clusters, semelhantes às ilhotas pancreáticas. Tais mudanças ocorreram de forma diferenciada entre os grupos, sendo que no grupo 3, os clusters de células eram aparentemente mais numerosos, e formavam agregados maiores. Mas, pela coloração por dithizone, os grupos 3 e 4 foram semelhantes com relação ao tamanho da área média corada para insulina. No entanto, somente o grupo 4 apresentou número de agregados de insulina e área total de insulina corada, significativamente maior em comparação aos demais grupos. Houve também expressão de PDX-1, BETA2/NEUROD, mafA e Insulin nos grupos estudados. Conclui-se que, por manipulação da composição do meio de cultivo, é possível induzir a diferenciação das CTM-TA caninas em CPI e que no grupo 4, onde o cultivo foi realizado em duas etapas, houve a melhor diferenciação das CTM-TA em CPI.

Type 1 Diabetes mellitus (DM) is a common disease among men and dogs, which has serious complications and no cure. Available treatments have limitations and do not mimic the physiological control that insulin secretion by pancreatic beta cells exerts on glycaemia. In this context, mesenchymal stem cells (MSC) from different species have been used for differentiation into functional beta cells. Historically, dogs have been used as model for men Type 1 DM studies due to the similarities in the presentation and course of this disease between them. However, in this species, little is known about MSC in vitro differentiation into insulin-producing cells (IPCs). The aim of this study was to differentiate adipose mesenchymal stem cells (ADMSC) into IPCs, by using culture mediums with different compositions, so that the most efficient medium composition is determined. Stem cells isolated from the fat tissue close to the bitch uterus, days after the third passage, presented MSC characteristics such as high expression levels of CD90 and CD29, low expression levels of CD45 and CD34, in addition to the ability to differentiate into adipocytes, chondrocytes and osteocytes. ADMSCs were distributed among six groups, according to the culture mediums: 1) High glucose DMEM/F12 without FCS, ßmercaptoethanol, nicotinamide; 2) High glucose DMEM/F12 without FCS, ßmercaptoethanol, nicotinamide and Exendin-4; 3) High glucose DMEM/F12 without FCS, ß-mercaptoethanol, nicotinamide, Exendin-4, B27 supplement, non essential aminoacids, L-glutamine; 4) 2 stage protocol: stage 1 (8 days) with High glucose DMEM/F12 without FCS, ß- mercaptoethanol, nicotinamide and stage 2 (8 days) with High glucose DMEM/F12 without FCS, ß-mercaptoethanol, nicotinamide, Exendin-4, B27 supplement, non essential aminoacids, L-glutamine and FGFb; 5) High glucose DMEM/F12 without FCS; 6) Low glucose DMEM with 10% FCS (negative control). During differentiation, the cells were observed and photographed at day 3, 6, 10, 13 and 16. At day 16, cells were stained by Hematoxylin-Eosin and Dithizone, an insulin marker. It was also evaluated, by RT-PCR, the expression of transcription factors normally expressed in beta cells, such as PDX-1, BETA 2, MafA and Insulin. Over culture, ADMSCs from groups 1 to 5 gradually became rounder and gathered in clusters, which resembled pancreatic islets. These changes happened in a different way in the groups, so that in group 3 cell clusters were apparently more numerous and gathered in bigger aggregates. However, Dithizone staining showed that groups 3 and 4 were similar in terms of medium area stained for insulin. However, only group 4 had the number of insulin aggregates and the total area of stained insulin significantly bigger than the other groups. The expression of PDX-1, BETA 2, MafA e Insulin was also confirmed in all of the studied groups. We conclude that, by manipulating the composition of the culture medium, it is possible to induce dog ADMSCs into IPCs, and that the group 4, in which a two stage protocol was used, there was the best differentiation of dog ADMSCs into IPCs.

Pancreatic islets isolated from 2 adrenergic receptor knockout mice show reduced insulin secretion in response to nutrients / Ilhotas pancreáticas isoladas de camundongos com deleção do receptor adrenérgico 2 apresenta reduzida secreção de insulina em resposta a nutrientes

Activation of 2 adrenergic receptors by catecholamine or catecholamine-mimetic substances may enhance insulin secretion. We herein investigated KCl- and nutrient-stimulated insulin secretion in pancreatic islets isolated from 2 knockout (2KO) mice. 2KO mice showed reduced body weight, fasting hypoglycaemia associate to a similar fasting insulinemia compared to control. 2KO mice also showed reduced glucose tolerance despite the higher sensitivity to insulin. Glucose-induced insulin secretion was impaired in pancreatic islets isolated from 2KO mice. Leucine-induced (20mM) insulin secretion was diminished in pancreatic islets isolated from 2KO mice when compared to control one. The depolarizing effect of KCl on insulin secretion was also impaired in pancreatic islets from 2KO mice. These results suggested a possible role of 2 adrenergic receptors on nutrient-induced insulin secretion.(AU)

A ativação dos receptores 2-adrenérgicos por catecolaminas ou miméticos a catecolaminas podem aumentar a secreção de insulina. Nós investigamos a secreção de insulina estimulada por nutrients e KCl em ilhotas pancreáticas isoladas de camundongos com deleção dos receptores 2-adrenérgicos (2KO). Camudongos 2KO apresentaram reduzido peso corporal, hipoglicemia de jejum associada a semelhante concentração de insulina plasmática de jejum comparada ao grupo controle. Camundongos 2KO apesar de apresentarem aumento da sensibilidade a insulina também apresentaram reduzida tolerância a glicose. A secreção de insulina induzida com glicose foi alterada em ilhotas pancreáticas isoladas de camundongos 2KO. Secreção de insulina induzida por leucina (20mM) foi diminuída em ilhotas pancreáticas isoladas de camundongos 2KO quando comparado ao controle. O efeito despolarizante do KCl sobre a secreção de insulina também foi alterado em ilhotas pancreáticas de camundongos 2KO. Estes resultados sugerem um possível papel dos receptores 2- adrenérgicos na secreção de insulina induzida por nutrientes.(AU)

Hipoglicemia grave e coma hipoglicêmico em canino portador de insulinoma

Introdução: O insulinoma caracteriza-se por ser uma neoplasia originada nas células-beta das ilhotas pancreáticas. Ocorre secreção excessiva de insulina que leva a remoção e consumo excessivo de glicose e redução da produção de glicogênio. Os efeitos da hipoglicemia severa ocorrem principalmente no sistema nervoso central, no sistema musculoesquelético e gastrointestinal. Pode ocorrer de coma a convulsões, fraqueza muscular e polifagia. O tumor é mais frequente em caninos, podendo ser histologicamente carcinomas ou adenomas. É geralmente diagnosticado por exames laboratoriais, principalmente através dos valores de glicemia ou da relação insulina/glicose.Caso: Um canino fêmea da raça pastor de Shetland com 8 anos de idade e peso corporal de 8,0 kg foi apresentado em coma. Os reflexos palpebrais estavam ausentes, a temperatura corporal era de 37,5C, frequência cardíaca de 80 bpm e frequência respiratória de 14 mrpm. Após a instalação de um cateter venoso periférico na veia cefálica, iniciou-se a administração de solução de Ringer em taxa de infusão de 20 mL/kg/hora. Após coleta de sangue para exames laboratoriais de hemograma, proteínas plasmáticas totais, PT e PTT, plaquetometria, CO2 total e glicemia, foi detectada hipoglicemia severa de 20 mg/ dL. Glicose 50%, na dose de 1,0 mL/kg foi administrada lentamente. Após 10 minutos a glicemia foi detectada em 80 mg/dL. Após 2 horas

Obtenção e caracterização de células derivadas do pâncreas fetal canino

A Diabetes mellitus em cães é cada vez mais frequente, decorrente de fatores genéticos e/ou ambientais, como um distúrbio endócrino que, de forma semelhante à que ocorre em humanos, falha no controle adequado de glicose no sangue, desencadeia a hiperglicemia, glicosúria e perda de peso. A terapia celular utilizando as células beta-pancreáticas tem sido alvo de estudos, devido à grande demanda de novos casos de Diabetes mellitus e à falta de órgãos para transplantes em humanos e animais. Acredita-se que a ciência possa responder e inovar em tratamentos, encontrando a possível cura para esta doença complexa. Portanto, o objetivo deste estudo foi obter e caracterizar células derivadas do pâncreas fetal canino de animais com idades compreendidas entre 50 e 60 dias de gestação. As células pancreáticas de fetos caninos apresentam morfologia fibroblastóide e crescimento em monocamada em cultivo, apresentam células pluripotentes e proliferativas, não são tumorigênicas e apresentam expressão de PDX1, um fator de transcrição que tem papel importante na ativação do gene promotor da insulina. O pâncreas possui inervação simpática, observado por fibras nervosas TH+. Histologicamente, o pâncreas fetal canino apresenta ácinos num estágio de organização avançado, com parênquima semelhante ao encontrado no cão adulto. As ilhotas pancreáticas são distribuídas no tecido de maneira irregular, organizando-se em pequenos aglomerados de células por entre os ácinos, especialmente próximas aos vasos sanguíneos. A coloração com Ditizona permitiu inferir a presença de insulina no tecido pancreático, o que foi comprovado mediante técnica de imunofluorescência, além da presença de células que expressam o hormônio somatostatina. Os resultados desta investigação indicam que o pâncreas fetal canino demonstra características favoráveis para ser uma fonte viável de células para estudos aplicados à terapia celular em cães. Outras investigações referentes à comprovação da produção de insulina in vitro por essas células se fazem necessárias.

Diabetes mellitus in dogs is increasingly common, due to genetic and/or environmental factors such as an endocrine disorder, similarly to what occurs in humans, failure to adequately control blood glucose triggers hyperglycemia, glycosuria and weight loss. Cell therapy using the pancreatic beta cells has been the subject of studies, due to the great demand of new cases of diabetes mellitus and the lack of organs for transplants in humans and animals. It is believed that science can respond and innovate treatments, finding a possible cure for this disease complex. Therefore, the objective of this study was to obtain and characterize derived cells from canine fetal pancreas, of animals aged between 50 and 60 days of gestation. The pancreatic cells of canine fetuses exhibit fibroblastoid morphology and growth in monolayer culture, exhibit pluripotent and proliferative cells, are not tumorigenic and have PDX1 expression, a transcription factor that plays an important role in the activation of the insulin gene promoter. The pancreas has sympathetic innervation observed by TH+ nerve fibers. Histologically, the fetal pancreatic acini canine presents an advanced stage organization with similar parenchyma that found in adult dog. The pancreatic islets are distributed in the fabric unevenly, organizing themselves into small clusters of cells through the acini, especially close to the blood vessels. Staining with Dithizone allowed inferring the presence of insulin in the tissue, which was confirmed by immunofluorescence, in addition to cells that express somatostatin. The results of this investigation indicate that the canine fetal pancreas shows favorable characteristics to be a feasible source of cells for cell therapy applied to studies in dogs. Further investigation regarding the evidence of in vitro production of insulin by these cells are required.

Implicações da insulina na função ovariana e desenvolvimento embrionário / Implications of insulin in ovarian function and embryonic development

A insulina é um hormônio essencialmente envolvido na regulação da concentração da glicose na circulação, além de atuar no crescimento celular e no desenvolvimento de uma ampla variedade de tipos celulares, incluindo o ovário. Em geral, os efeitos desse hormônio nas células ovarianas de mamíferos são positivos, estimulando nas células da granulosa a sua proliferação, a atividade da aromatase e a produção de esteróides, além de ser um fator regulador da maturação oocitária. Assim, este artigo tem como objetivo relatar os principais efeitos biológicos da insulina na reprodução de fêmeas. Ao longo deste trabalho, foram mostrados aspectos relacionados à estrutura e ação da insulina e seu receptor, presença da insulina e seu receptor no ovário e o papel deste hormônio na reprodução de fêmeas. A insulina é um hormônio de caráter anabólico, produzido pelas células ẞ pancreáticas. A sua ação na célula inicia-se pela sua ligação ao receptor de membrana plasmática. No ambiente ovariano, a insulina é um importante modulador do desenvolvimento folicular, esteroidogênese, maturação oocitária e subseqüente desenvolvimento embrionário. Assim, hormônios metabólicos, como a insulina, regulam o desenvolvimento folicular modulando o recrutamento, o desenvolvimento e a maturação folicular. Apesar dos grandes avanços científicos ocorridos sobre os mecanismos de ação da insulina, ainda verifica-se a necessidade de mais estudos com a finalidade de explicar melhor seus efeitos na foliculogênese em mamíferos, bem como a influência desses efeitos na posterior maturação dos oócitos crescidos in vitro.

Insulin is a hormone essentially involved in the blood glucose level regulation, besides it acts on cell growth and development of a several variety of cell types, including the ovarian cells. In general, the effects of this hormone in ovarian cells of mammals are positive, it stimulates in granulosa cells proliferation, aromatase activity and steroid production, also it is a factor that regulates the oocyte maturation. Therefore, this review described the main biological effects of insulin in female mammalian reproduction, with emphasis on ovarian folliculogenesis, oocyte maturation and embryonic development. This paper shows the structure and action aspects of insulin and its receptor, the presence of insulin and its receptor in the ovary and the role of this hormone in female reproduction. Insulin is an anabolic hormone produced by pancreatic ẞ cells. Its action starts in the cell by binding to the in cell plasma membrane receptor. In the ovarian environment, insulin is an important modulator of follicular development, steroidogenesis, oocyte maturation and subsequent embryonic development. Thus, metabolic hormones such as insulin regulate the follicular development by modulating the follicular recruitment, development and maturation. Despite significant scientific advances that have occurred on the mechanisms of insulin action, there is yet to be better explained its effects on folliculogenesis in mammals, as well as the influence of these effects in the subsequent maturation of oocytes grown in vitro.

ADMINISTRAÇÃO DA MELATONINA EXÓGENA SOBRE A HISTOFISIOLOGIA RENAL E ESTRESSE OXIDATIVO EM RATOS ADULTOS INDUZIDOS AO DIABETES

A nefropatia associada ao diabetes mellitus é uma das mais sérias e comuns complicações microvasculares do diabetes tipo 1 e tipo 2 e os seus efeitos nos rins são principalmente resultantes da hiperglicemia. O objetivo do trabalho foi avaliar se a administração da melatonina pode neutralizar os efeitos adversos da nefropatia diabética induzida pela estreptozotocina, melhorando diretamente características como função renal, pressão arterial e o estresse oxidativo. Para tanto, foram utilizados 50 ratos albinos, divididos nos seguintes grupos: GC: ratos sem indução ao diabetes; GD: ratos induzidos ao diabetes e tratados com placebo; GDM: ratos induzidos ao diabetes e tratados com melatonina na dosagem de 10mg/kg durante 20 dias; GDMS: ratos induzidos ao diabetes e tratados simultaneamente com melatonina; GDI: ratos induzidos ao diabetes e tratados com insulina na dose de 5U/dia durante 20 dias. Os resultados mostraram que a administração da melatonina simultaneamente a indução do diabetes foi capaz de produzir efeitos benéficos nas alterações encontradas nos animais diabéticos, atuando de maneira positiva ao reduzir o peso dos rins e o índice organossomático, tendência a redução dos valores hiperglicêmicos, proteção das células beta pancreáticas refletidos nos valores de insulina, recuperação dos níveis plasmáticos do óxido nítrico, bem como minimizou as alterações histológicas, reduzindo também o acúmulo de glicogênio e colágeno nos rins desses animais. Além disso, os valores de creatinina e uréia apresentaram-se equivalentes aos dos animais do grupo controle. Melatonina também reduziu os níveis de TBARS e a taxa de células apoptóticas. No entanto, não interferiu significativamente sobre os níveis da GSH, ganho de peso corporal e pressão arterial. Assim, concluimos que a administração da melatonina simultaneamente a indução do diabetes atuou de maneira benéfica sobre a histofisiologia renal de animais com o quadro de nefropatia diabética, comprovando sua capacidade antioxidante e protetora sobre os rins.

Nephropathy associated with diabetes mellitus is one of the most serious and common microvascular complications of type 1 diabetes and type 2 and its effects are primarily on the kidney resulting from hyperglycemia. The objective was to evaluate whether the administration of melatonin may neutralize the adverse effects of diabetic nephropathy streptozotocin-induced, improving directly characteristics as kidney function, blood pressure and oxidative stress. Therefore, 50 albino rats were divided into the following groups were used: GC: rats without inducing diabetes; GD: rats induced diabetes and treated with placebo; GDM: rats induced diabetes and treated with melatonin at a dose of 10mg/kg for 20 days; GDMS: rats induced diabetes and treated simultaneously with melatonin; GDI: and diabetes induced rats treated with insulin at a dose of 5 U/day for 20 days. The results showed that administration of melatonin simultaneously induction of diabetes was able to produce beneficial effects on the changes seen in diabetic animals, acting positively to reduce the weight of the kidneys and the organossomatic index, tend to reduce the hyperglycemic values, protection of pancreatic beta cells reflected in insulin values, recovery of plasma levels of nitric oxide, as well as minimized the histological changes also reduce the accumulation of glycogen and collagen kidney of these animals. Furthermore, the values of creatinine and urea showed to be comparable to those of the control group animals. Melatonin also reduced the TBARS and the rate of apoptotic cells. However, did not interfere significantly on the GSH levels, body weight gain and blood pressure. Thus, we conclude that the administration of melatonin simultaneously diabetes induction acted beneficially on renal histophysiology animals with diabetic nephropathy frame, proving its antioxidant capacity and protective on the kidneys.

Insulinoma canino: estudo retrospectivo de seis casos (2003-2012) / Canine insulinoma: retrospective study of 6 cases (2003-2012)

Os insulinomas são tumores malignos raros em cães, oriundos das células beta pancreáticas que produzeminsulina e levam a hipoglicemia. O objetivo do presente estudo retrospectivo foi descrever seiscasos de insulinoma canino. Os cães incluídos no estudo apresentavam faixa etária entre 7 e 16 anos,sendo 4 fêmeas e 2 machos. O diagnóstico baseou-se nos sinais clínicos e dosagem de insulina sérica porradioimunoensaio no momento de hipoglicemia (n=6), além da presença de massa pancreática por examede imagem (n=4). Todos os cães apresentaram como sinais iniciais a incoordenação, fraqueza e/ouconvulsões e a média de tempo até o diagnóstico foi de 2,2 meses. A hipoglicemia (média 34,67 ± 13,54mg/dL referência 70 110mg/dL) era a única alteração laboratorial presente e a hiperinsulinemia acimade 20 μu/mL (média 118 ± 75,11 μu/mL) se confirmou em todos dos cães. Apenas 4 apresentavamtumor visível no momento do diagnóstico. O exame histopatológico realizado em 3 cães confirmou ocaráter maligno dos tumores (carcinomas neuroendócrinos) e a avaliação imunohistoquímica de doiscasos demonstrou marcação positiva somente para insulina. Cães com sinais de fraqueza ou convulsãodevem ser sempre submetidos à avaliação glicêmica. Naqueles em que a hipoglicemia, mesmo que leve,for documentada, a dosagem de insulina sérica se faz necessária.(AU)

Insulinomas are rare malignant tumors in dogs, originating from pancreatic β cells that produceinsulin and lead to hypoglycemia. The aim of this retrospective study is to evaluate six cases ofcanine insulinomas. We included six diagnosed dogs aged between 7 and 16 years (4 females and 2males). The diagnosis was based on clinical signs associated with the measurement of serum insulinby radioimmunoassay at the time of hypoglycemia (n = 6), and the presence of pancreatic mass byimaging exams (n = 4). All dogs showed initial signs of lack of coordination, weakness, and / orseizures. The average time to diagnosis was 2.2 months. Hypoglycemia (mean 34.67 ± 13.54 mg/dL - Reference 70 110 mg/dL) was the only laboratory abnormality present and hyperinsulinemia above 20 μU/mL (mean 118 ± 75.11 μU/mL) was confirmed in all of the dogs. Only 4 dogs hadvisible tumor at the time of diagnosis. The histopathological examination confirmed the malignanttumors in 3 dogs (neuroendocrine carcinomas) and immunohistochemical evaluation of two casesshowed positive staining only for insulin. Dogs showing signs of weakness or seizure should alwaysbe evaluated for glucose levels. Those in whom hypoglycemia, even if mild, is documented, shouldcheck serum insulin levels.(AU)

Insulinoma canino: estudo retrospectivo de seis casos (2003-2012) / Canine insulinoma: retrospective study of 6 cases (2003-2012)

Os insulinomas são tumores malignos raros em cães, oriundos das células beta pancreáticas que produzeminsulina e levam a hipoglicemia. O objetivo do presente estudo retrospectivo foi descrever seiscasos de insulinoma canino. Os cães incluídos no estudo apresentavam faixa etária entre 7 e 16 anos,sendo 4 fêmeas e 2 machos. O diagnóstico baseou-se nos sinais clínicos e dosagem de insulina sérica porradioimunoensaio no momento de hipoglicemia (n=6), além da presença de massa pancreática por examede imagem (n=4). Todos os cães apresentaram como sinais iniciais a incoordenação, fraqueza e/ouconvulsões e a média de tempo até o diagnóstico foi de 2,2 meses. A hipoglicemia (média 34,67 ± 13,54mg/dL – referência 70 – 110mg/dL) era a única alteração laboratorial presente e a hiperinsulinemia acimade 20 μu/mL (média 118 ± 75,11 μu/mL) se confirmou em todos dos cães. Apenas 4 apresentavamtumor visível no momento do diagnóstico. O exame histopatológico realizado em 3 cães confirmou ocaráter maligno dos tumores (carcinomas neuroendócrinos) e a avaliação imunohistoquímica de doiscasos demonstrou marcação positiva somente para insulina. Cães com sinais de fraqueza ou convulsãodevem ser sempre submetidos à avaliação glicêmica. Naqueles em que a hipoglicemia, mesmo que leve,for documentada, a dosagem de insulina sérica se faz necessária.

Insulinomas are rare malignant tumors in dogs, originating from pancreatic β cells that produceinsulin and lead to hypoglycemia. The aim of this retrospective study is to evaluate six cases ofcanine insulinomas. We included six diagnosed dogs aged between 7 and 16 years (4 females and 2males). The diagnosis was based on clinical signs associated with the measurement of serum insulinby radioimmunoassay at the time of hypoglycemia (n = 6), and the presence of pancreatic mass byimaging exams (n = 4). All dogs showed initial signs of lack of coordination, weakness, and / orseizures. The average time to diagnosis was 2.2 months. Hypoglycemia (mean 34.67 ± 13.54 mg/dL - Reference 70 – 110 mg/dL) was the only laboratory abnormality present and hyperinsulinemia above 20 μU/mL (mean 118 ± 75.11 μU/mL) was confirmed in all of the dogs. Only 4 dogs hadvisible tumor at the time of diagnosis. The histopathological examination confirmed the malignanttumors in 3 dogs (neuroendocrine carcinomas) and immunohistochemical evaluation of two casesshowed positive staining only for insulin. Dogs showing signs of weakness or seizure should alwaysbe evaluated for glucose levels. Those in whom hypoglycemia, even if mild, is documented, shouldcheck serum insulin levels.

Insulina e captação de glicose no corpo lúteo canino / Insulin and glucose uptake in canine corpus luteum

O diestro é a fase luteínica na cadela caracterizada pelo aumento de progesterona (P4) sérica na primeira metade e por flutuações de 17β-estradiol (E2) na segunda metade. O corpo lúteo (CL) é uma glândula endócrina temporária, que passa por um processo de desenvolvimento, manutenção e regressão, atingindo atividade secretória plena quando sua formação está completa. A insulina é o hormônio anabólico essencial para a manutenção da homeostase de glicose e do crescimento e diferenciação celular, sendo secretado pelas células β pancreáticas. A sinalização intracelular da insulina começa com a sua ligação a um receptor de membrana específico, o que desencadeia uma série de ações metabólicas. Sabe-se que uma das consequências desta ligação é a translocação de transportadores de glicose 4 (GLUT4; gene SLC2A4) para que ocorra a captação de glicose. Nosso grupo demonstrou a expressão de GLUT4 no corpo lúteo de cadelas, expressão esta regulada diferencialmente ao longo do diestro. A presença deste transportador levou-nos a hipotetizar que a insulina seja importante para regulação da função luteínica. [...] Esses resultados apontam a insulina, bem como o IL6 e o NFKB como fatores importantes que desempenham um papel na função do CL canino e trazem o CL para o grupo de tecidos que respondem ao estímulo insulínico aumentando a expressão de GLUT4 e consequentemente a captação de glicose. Além disso, estes eventos parecem sofrer controle adicional pelos hormônios esteróides

Diestrus is the luteal phase in dogs characterized by an increase in progesterone (P4) levels in the first half and fluctuations of 17β-estradiol (E2) in the second half. The corpus luteum (CL) is a temporary endocrine gland, which undergoes a process of development, maintenance and regression, reaching full secretory activity when its formation is complete. Insulin is an anabolic hormone essential for the maintenance of glucose homeostasis, cell growth and differentiation, and is secreted by pancreatic beta cells. Intracellular signaling of insulin begins with its binding to a specific membrane receptor, which triggers a series of metabolic actions. It is known that one consequence of this connection is the translocation of glucose transporters 4 (GLUT4; gene SLC2A4) for glucose uptake. Our group demonstrated the expression of GLUT4 in the canine corpus luteum in a time-related manner throughout diestrus. The presence of this transporter led us to hypothesize that insulin is important for the regulation of luteal function.[…] These results point towards a regulatory function 14 exerted by insulin, IL6 and NFKB in the canine CL and place this organ among the insulin sensitive ones, which respond to insulin stimuli increasing GLUT4 expression and glucose uptake. Moreover, these events seems to undergo a further control by steroid hormones

Insulina e captação de glicose no corpo lúteo canino / Insulin and glucose uptake in canine corpus luteum

O diestro é a fase luteínica na cadela caracterizada pelo aumento de progesterona (P4) sérica na primeira metade e por flutuações de 17β-estradiol (E2) na segunda metade. O corpo lúteo (CL) é uma glândula endócrina temporária, que passa por um processo de desenvolvimento, manutenção e regressão, atingindo atividade secretória plena quando sua formação está completa. A insulina é o hormônio anabólico essencial para a manutenção da homeostase de glicose e do crescimento e diferenciação celular, sendo secretado pelas células β pancreáticas. A sinalização intracelular da insulina começa com a sua ligação a um receptor de membrana específico, o que desencadeia uma série de ações metabólicas. Sabe-se que uma das consequências desta ligação é a translocação de transportadores de glicose 4 (GLUT4; gene SLC2A4) para que ocorra a captação de glicose. Nosso grupo demonstrou a expressão de GLUT4 no corpo lúteo de cadelas, expressão esta regulada diferencialmente ao longo do diestro. A presença deste transportador levou-nos a hipotetizar que a insulina seja importante para regulação da função luteínica. [...] Esses resultados apontam a insulina, bem como o IL6 e o NFKB como fatores importantes que desempenham um papel na função do CL canino e trazem o CL para o grupo de tecidos que respondem ao estímulo insulínico aumentando a expressão de GLUT4 e consequentemente a captação de glicose. Além disso, estes eventos parecem sofrer controle adicional pelos hormônios esteróides (AU)

Diestrus is the luteal phase in dogs characterized by an increase in progesterone (P4) levels in the first half and fluctuations of 17β-estradiol (E2) in the second half. The corpus luteum (CL) is a temporary endocrine gland, which undergoes a process of development, maintenance and regression, reaching full secretory activity when its formation is complete. Insulin is an anabolic hormone essential for the maintenance of glucose homeostasis, cell growth and differentiation, and is secreted by pancreatic beta cells. Intracellular signaling of insulin begins with its binding to a specific membrane receptor, which triggers a series of metabolic actions. It is known that one consequence of this connection is the translocation of glucose transporters 4 (GLUT4; gene SLC2A4) for glucose uptake. Our group demonstrated the expression of GLUT4 in the canine corpus luteum in a time-related manner throughout diestrus. The presence of this transporter led us to hypothesize that insulin is important for the regulation of luteal function.[…] These results point towards a regulatory function 14 exerted by insulin, IL6 and NFKB in the canine CL and place this organ among the insulin sensitive ones, which respond to insulin stimuli increasing GLUT4 expression and glucose uptake. Moreover, these events seems to undergo a further control by steroid hormones (AU)

Ação do flavonóide naringina sobre a secreção de insulina em células ß pancreáticas BRINBD11,justifica seu emprego em suplementaçãonutricional para animais / Action of flavonoid naringin on insulin secretion in pancreatic B cells, justifies its use in nutritional supplements for animals

A domesticação de cães e gatos transformou caçadores de presas protéicas em sedentários com dietasde alto teor energético que demandam maior produção de insulina pelas células β pâncreáticas,resultando em falência destas e consequente desenvolvimento do diabetes mellitus tipo II. O flavonoidenaringina pode influenciar na secreção de insulina, quer por suas propriedades antioxidantesou por seus efeitos de modulação de cascatas intracelulares e da expressão gênica, porém os estudossobre este relevante papel são escassos. O presente trabalho teve como objetivo investigar o efeitoinsulinotrópico sinérgico a glicose do flavonoide naringina em células da linhagem BRIN-BD11, umtipo celular híbrido de células β pancreáticas e insulinoma de rato o qual apresenta efetiva respostasecretória à glicose. Observou-se uma tendência ao aumento da atividade secretória destas células tratadascom naringina, que foi avaliada pela quantificação da insulina nos sobrenadantes dos cultivosempregando-se radioimunoensaio. Todavia faz-se necessária maior investigação para comprovaçãodos resultados, bem como elucidação dos mecanismos envolvidos e, por conseguinte, indicação deuso de dietas suplementadas com flavonoides para animais diabéticos.(AU)

Taming dogs and cats transformed protein prey`s hunters in sedentary high drifted energy whichdemand more insulin output by β cells, it ensue in β cells fault and diabetes II development. Besidesan antioxidant role, the flavonoids may influence insulin secretion by regulation of intracellular pathwaysignaling and gene expression. The present work consist on assessment of the protective effectof flavonoids naringin in pancreatic β cells. BRIN-BD11 cells is a useful model of clonal pancreatic βcell insulin secretion for studies with stability in culture. Insulin concentrations were mensured byradioimmoassay. Treatment with naringin appeared to be beneficial for the increasing of the cellssecretory activity. Thus, further studies are required to determine possible properties of flavonoids ininsulin secretion by β cells in vivo and its indication in diabetics animals diets.(AU)

Ação do flavonóide naringina sobre a secreção de insulina em células ß pancreáticas BRINBD11,justifica seu emprego em suplementaçãonutricional para animais / Action of flavonoid naringin on insulin secretion in pancreatic B cells, justifies its use in nutritional supplements for animals

A domesticação de cães e gatos transformou caçadores de presas protéicas em sedentários com dietasde alto teor energético que demandam maior produção de insulina pelas células β pâncreáticas,resultando em falência destas e consequente desenvolvimento do diabetes mellitus tipo II. O flavonoidenaringina pode influenciar na secreção de insulina, quer por suas propriedades antioxidantesou por seus efeitos de modulação de cascatas intracelulares e da expressão gênica, porém os estudossobre este relevante papel são escassos. O presente trabalho teve como objetivo investigar o efeitoinsulinotrópico sinérgico a glicose do flavonoide naringina em células da linhagem BRIN-BD11, umtipo celular híbrido de células β pancreáticas e insulinoma de rato o qual apresenta efetiva respostasecretória à glicose. Observou-se uma tendência ao aumento da atividade secretória destas células tratadascom naringina, que foi avaliada pela quantificação da insulina nos sobrenadantes dos cultivosempregando-se radioimunoensaio. Todavia faz-se necessária maior investigação para comprovaçãodos resultados, bem como elucidação dos mecanismos envolvidos e, por conseguinte, indicação deuso de dietas suplementadas com flavonoides para animais diabéticos.

Taming dogs and cats transformed protein prey`s hunters in sedentary high drifted energy whichdemand more insulin output by β cells, it ensue in β cells fault and diabetes II development. Besidesan antioxidant role, the flavonoids may influence insulin secretion by regulation of intracellular pathwaysignaling and gene expression. The present work consist on assessment of the protective effectof flavonoids naringin in pancreatic β cells. BRIN-BD11 cells is a useful model of clonal pancreatic βcell insulin secretion for studies with stability in culture. Insulin concentrations were mensured byradioimmoassay. Treatment with naringin appeared to be beneficial for the increasing of the cellssecretory activity. Thus, further studies are required to determine possible properties of flavonoids ininsulin secretion by β cells in vivo and its indication in diabetics animals diets.