An assessment of the urban water footprint and blue water scarcity: A case study for Van (Turkey) / Uma avaliação da pegada hídrica urbana e da escassez de água azul: um estudo de caso para Van, Turquia

Today, most of the world’s population faces water scarcity, while global warming, urbanization, industrialization and population increases continue to increase the severity of the pressure on water resources. Management ofwater resources plays a key role in the sustainability of agricultural production. The water footprint (WF) is different in comparison to other water statistics because it takes direct and indirect water consumption into account, and helps in the management of water resources. Within this context, the WF of Van province, which is Turkey’s most easterly located arid region, was calculated from 2004 to 2019. The study area covers lake Van, which is Turkey's largest lake, and the Van basin with an area of 23.334km² and a population of 1.136.757 (2019). In the calculations, crop (WFcrop), livestock (WFlivestock), and domestic and industrial water footprints (WFdomestic+industrial) were evaluated separately, and blue and green water footprints (WFblue and WFgreen) were analyzed in detail. According to the results, the average WF of Van province was found to be 8.73 billionm3 year-¹. Throughout the province, 87.6% of the WF is composed of WFcrop, 4.9% is WFlivestock and 7.5% is WFdomestic+industrial. Of the WFcrop, 62.5% depends on WFblue, i.e., freshwater. Most of the WFlivestock consisted of dairy cattle (49%) and sheep (38%). The average WFdomestic+industrial for 2004 to 2019 was 0.64billion m³ year-¹. The average per capita water footprint of Van province was found to be 889.9m³ year-¹ capita-¹. In addition, the province is classified as severe water scarcity (257%). This study is one of the first province-based calculations of WF in Turkey and is the first study to bring a different aspect to published literature by including residual soil moisture from the winter months. As a result of this study, the WFblue of the [...].

Hoje, a maior parte da população mundial enfrenta a escassez de água, enquanto o aquecimento global, a urbanização, a industrialização e o crescimento da população continuam a aumentar a gravidade da pressão sobre os recursos hídricos. A gestão dos recursos hídricos desempenha papel fundamental na sustentabilidade da produção agrícola. A pegada hídrica (WF) é diferente em comparação com outras estatísticas hídricas porque leva em consideração o consumo direto e indireto de água e auxilia na gestão dos recursos hídricos. Nesse contexto, o WF da província de Van, que é a região árida localizada mais a leste da Turquia, foi calculado de 2004 a 2019. A área de estudo cobre o lago Van, que é o maior lago da Turquia, e a bacia de Van, com uma área de 23,334 km² e uma população de 1.136.757 (2019). Nos cálculos, as pegadas hídricas de safra (WFcrop), pecuária (WFlivestock) e doméstica e industrial (WFdomestic+industrial) foram avaliadas separadamente, e as pegadas hídricas azul e verde (WFblue e WFgreen) foram analisadas em detalhes. De acordo com os resultados, o WF médio da província de Van foi encontrado em 8,73 bilhões de m³ ano-¹. Em toda a província, 87,6% do WF são compostos por WFcrop, 4,9% são WFlivestock e 7,5% são WFdomestic+industrial. Do WFcrop, 62,5% dependem do WFblue, ou seja, de água doce. A maior parte do gado WFlivestock era composto por gado leiteiro (49%) e ovelhas (38%). O WFdomestic+industrial médio de 2004 a 2019 foi de 0,64 bilhão de m³ ano-¹. A pegada hídrica per capita média da província de Van foi encontrada em 889,9 m³ ano-¹ capita-¹. Além disso, a região é classificada como grave escassez de água (257%). Este estudo é um dos primeiros cálculos de WF baseados em províncias na Turquia e é o primeiro estudo a trazer um aspecto diferente para a literatura publicada, incluindo a umidade residual do solo dos meses de inverno. Como resultado deste estudo, o WFblue do WFcrop está [...].

An assessment of the urban water footprint and blue water scarcity: A case study for Van (Turkey) / Uma avaliação da pegada hídrica urbana e da escassez de água azul: um estudo de caso para Van, Turquia

Today, most of the worlds population faces water scarcity, while global warming, urbanization, industrialization and population increases continue to increase the severity of the pressure on water resources. Management ofwater resources plays a key role in the sustainability of agricultural production. The water footprint (WF) is different in comparison to other water statistics because it takes direct and indirect water consumption into account, and helps in the management of water resources. Within this context, the WF of Van province, which is Turkeys most easterly located arid region, was calculated from 2004 to 2019. The study area covers lake Van, which is Turkey's largest lake, and the Van basin with an area of 23.334km² and a population of 1.136.757 (2019). In the calculations, crop (WFcrop), livestock (WFlivestock), and domestic and industrial water footprints (WFdomestic+industrial) were evaluated separately, and blue and green water footprints (WFblue and WFgreen) were analyzed in detail. According to the results, the average WF of Van province was found to be 8.73 billionm3 year-¹. Throughout the province, 87.6% of the WF is composed of WFcrop, 4.9% is WFlivestock and 7.5% is WFdomestic+industrial. Of the WFcrop, 62.5% depends on WFblue, i.e., freshwater. Most of the WFlivestock consisted of dairy cattle (49%) and sheep (38%). The average WFdomestic+industrial for 2004 to 2019 was 0.64billion m³ year-¹. The average per capita water footprint of Van province was found to be 889.9m³ year-¹ capita-¹. In addition, the province is classified as severe water scarcity (257%). This study is one of the first province-based calculations of WF in Turkey and is the first study to bring a different aspect to published literature by including residual soil moisture from the winter months. As a result of this study, the WFblue of the [...].(AU)

Hoje, a maior parte da população mundial enfrenta a escassez de água, enquanto o aquecimento global, a urbanização, a industrialização e o crescimento da população continuam a aumentar a gravidade da pressão sobre os recursos hídricos. A gestão dos recursos hídricos desempenha papel fundamental na sustentabilidade da produção agrícola. A pegada hídrica (WF) é diferente em comparação com outras estatísticas hídricas porque leva em consideração o consumo direto e indireto de água e auxilia na gestão dos recursos hídricos. Nesse contexto, o WF da província de Van, que é a região árida localizada mais a leste da Turquia, foi calculado de 2004 a 2019. A área de estudo cobre o lago Van, que é o maior lago da Turquia, e a bacia de Van, com uma área de 23,334 km² e uma população de 1.136.757 (2019). Nos cálculos, as pegadas hídricas de safra (WFcrop), pecuária (WFlivestock) e doméstica e industrial (WFdomestic+industrial) foram avaliadas separadamente, e as pegadas hídricas azul e verde (WFblue e WFgreen) foram analisadas em detalhes. De acordo com os resultados, o WF médio da província de Van foi encontrado em 8,73 bilhões de m³ ano-¹. Em toda a província, 87,6% do WF são compostos por WFcrop, 4,9% são WFlivestock e 7,5% são WFdomestic+industrial. Do WFcrop, 62,5% dependem do WFblue, ou seja, de água doce. A maior parte do gado WFlivestock era composto por gado leiteiro (49%) e ovelhas (38%). O WFdomestic+industrial médio de 2004 a 2019 foi de 0,64 bilhão de m³ ano-¹. A pegada hídrica per capita média da província de Van foi encontrada em 889,9 m³ ano-¹ capita-¹. Além disso, a região é classificada como grave escassez de água (257%). Este estudo é um dos primeiros cálculos de WF baseados em províncias na Turquia e é o primeiro estudo a trazer um aspecto diferente para a literatura publicada, incluindo a umidade residual do solo dos meses de inverno. Como resultado deste estudo, o WFblue do WFcrop está [...].(AU)

Comparative effects of extracted polyphenols from black and green tea wastes on in-vitro fermentability of feed ingredients / Efeitos comparativos dos polifenóis extraídos dos resíduos do chá preto e verde na fermentabilidade in vitro dos ingredientes da ração

The effect of using black and green tea waste extracts on the diet nutritional value was investigated with three methods of in vitro degradability, gas production, and McNiven's enzymatic digestion in the present experiment. Total phenolic compounds and total tannin for green tea extract were 20.3% and 14.8% of dry matter (DM), respectively, and for black tea were 18.7% and 12.7% of dry matter, respectively. The addition of green and black tea waste extracts reduced both gas production during incubation hours and dry matter degradability (DMD) in the diet (p < 0.05). A significantly reduced ruminal dry matter disappearance (p < 0.05) and a significantly increased post-ruminal dry matter disappearance (p < 0.05) were observed by adding black and green tea waste extracts. According to the results, the dry matter disappearance throughout the gastrointestinal tract was not significantly different between treatments. It can generally be concluded that the addition of phenolic compounds can be used depending on the nutritional strategy, such as reducing ruminal degradability and increasing rumen nutrient escape.

O efeito do uso de extratos de resíduos de chá preto e verde sobre o valor nutricional da dieta foi investigado com três métodos de degradabilidade in vitro, produção de gás e digestão enzimática de McNiven no presente experimento. Os compostos fenólicos totais e o tanino total para o extrato de chá verde foram 20,3% e 14,8% da matéria seca, respectivamente, e para o chá preto foram 18,7% e 12,7% da matéria seca, respectivamente. A adição de extratos de resíduos de chá verde e preto reduziu a produção de gases durante as horas de incubação e a degradabilidade da matéria seca da dieta (p < 0,05). Um desaparecimento de matéria seca ruminal significativamente reduzido (p < 0,05) e um desaparecimento de matéria seca pós ruminal significativamente aumentado (p < 0,05) foram observados pela adição de extratos de resíduos de chá preto e verde. De acordo com os resultados, o desaparecimento da matéria seca ao longo do trato gastrointestinal não foi significativamente diferente entre os tratamentos. Em geral, pode-se concluir que a adição de compostos fenólicos pode ser utilizada dependendo da estratégia nutricional, como redução da degradabilidade ruminal e aumento do escape ruminal de nutrientes.

Comparative effects of extracted polyphenols from black and green tea wastes on in-vitro fermentability of feed ingredients / Efeitos comparativos dos polifenóis extraídos dos resíduos do chá preto e verde na fermentabilidade in vitro dos ingredientes da ração

The effect of using black and green tea waste extracts on the diet nutritional value was investigated with three methods of in vitro degradability, gas production, and McNiven's enzymatic digestion in the present experiment. Total phenolic compounds and total tannin for green tea extract were 20.3% and 14.8% of dry matter (DM), respectively, and for black tea were 18.7% and 12.7% of dry matter, respectively. The addition of green and black tea waste extracts reduced both gas production during incubation hours and dry matter degradability (DMD) in the diet (p < 0.05). A significantly reduced ruminal dry matter disappearance (p < 0.05) and a significantly increased post-ruminal dry matter disappearance (p < 0.05) were observed by adding black and green tea waste extracts. According to the results, the dry matter disappearance throughout the gastrointestinal tract was not significantly different between treatments. It can generally be concluded that the addition of phenolic compounds can be used depending on the nutritional strategy, such as reducing ruminal degradability and increasing rumen nutrient escape.(AU)

O efeito do uso de extratos de resíduos de chá preto e verde sobre o valor nutricional da dieta foi investigado com três métodos de degradabilidade in vitro, produção de gás e digestão enzimática de McNiven no presente experimento. Os compostos fenólicos totais e o tanino total para o extrato de chá verde foram 20,3% e 14,8% da matéria seca, respectivamente, e para o chá preto foram 18,7% e 12,7% da matéria seca, respectivamente. A adição de extratos de resíduos de chá verde e preto reduziu a produção de gases durante as horas de incubação e a degradabilidade da matéria seca da dieta (p < 0,05). Um desaparecimento de matéria seca ruminal significativamente reduzido (p < 0,05) e um desaparecimento de matéria seca pós ruminal significativamente aumentado (p < 0,05) foram observados pela adição de extratos de resíduos de chá preto e verde. De acordo com os resultados, o desaparecimento da matéria seca ao longo do trato gastrointestinal não foi significativamente diferente entre os tratamentos. Em geral, pode-se concluir que a adição de compostos fenólicos pode ser utilizada dependendo da estratégia nutricional, como redução da degradabilidade ruminal e aumento do escape ruminal de nutrientes.(AU)

Primary fibroblast cell cycle synchronization and effects on handmade cloned (hmc) bovine embryos / Sincronização do ciclo celular de fibroblastos primários e efeitos na produção de embriões bovinos clonados por handmade (hmc)

Spatial and temporal synchrony and compatibility between the receptor oocyte and the donor cell nucleus are necessary for the process of embryo cloning to allow nuclear reprogramming and early embryonic development. The objective of the present study was to evaluate three cell cycle synchronization methods on a primary bovine fibroblast culture for 24, 48, or 72 h. These fibroblasts were used as nuclear donors to evaluate their in vitro developmental potential and the quality of the embryos produced through handmade cloning (HMC). No differences were found between the methods used for fibroblast synchronization in G0/G1 (p > 0.05). Production of clones from fibroblasts in four groups- no treatment at 0 h and using serum restriction SR, high culture confluence HCC, and SR+HCC at 24 h- resulted in high cleavage rates that were not different. Embryo production rates were 37.9%, 29.5%, and 30.9% in the 0h, SR24h, and SR+HHC24h groups, respectively, and 19.3% in the HCC group, which was significantly different from the other three (p < 0.05). There were no differences in the quality parameter among the clones produced with fibroblasts subjected to the different synchronization. Finally, when overall clone production was compared versus parthenotes and IVF embryos, the only difference was between clones and parthenogenetic embryos with zona pellucida (30.2% vs 38.6%). The number of blastomeres from the blastocytes produced through IVF was significantly greater than those from embryos activated parthenogenetically and from clones (117, 80, 75.9, and 67.1, respectively). The evaluation of three synchronization methods at different time points did not demonstrate an increase in the percentage of fibroblasts in the G0/G1 phases of the cell cycle; however, good quality and high cloning rates were obtained, suggesting that it is not always necessary to subject the cells to any synchronization treatments, as they would yield equally good cloning results.

A sincronia espacial e temporal e a compatibilidade entre o oócito receptor e o núcleo celular doador são necessárias para o processo de clonagem de embriões a fim de permitir a reprogramação nuclear e o desenvolvimento embrionário precoce. O objetivo do presente estudo foi avaliar três métodos de sincronização do ciclo celular em uma cultura primária de fibroblastos bovinos durante 24, 48 ou 72 h. Estes fibroblastos foram utilizados como doadores nucleares para avaliar o seu potencial de desenvolvimento in vitro e a qualidade dos embriões produzidos por meio da técnica de Handmade cloning (HMC). Não foram encontradas diferenças entre os métodos utilizados para a sincronização de fibroblastos em G0 / G1 (p> 0,05). Produção de clones de fibroblastos nos quatro grupos - sem tratamento a 0 h e com restrição de soro RS, alta confluência celular ACC e RS + ACC às 24 h - resultou em altas taxas de clivagem que não foram diferentes. As taxas de produção de embriões foram de 37,9%, 29,5% e 30,9% nos grupos 0h, RS24h e RS + ACC24h, respectivamente, e 19,3% no grupo ACC, que foi significativamente diferente dos outros três (p <0,05). Não houve diferenças no parâmetro de qualidade entre os clones produzidos com fibroblastos submetidos à sincronização diferente. Finalmente, quando a produção geral de clones foi comparada versus partenotos e embriões de FIV, a única diferença foi entre clones e embriões partenogênicos com zona pelúcida (30,2% vs 38,6%). O número de blastômeros dos blastocitos produzidos através da FIV foi significativamente maior do que os de embriões ativados partenogeneticamente e de clones (117, 80, 75,9 e 67,1, respectivamente).

Primary fibroblast cell cycle synchronization and effects on handmade cloned (hmc) bovine embryos / Sincronização do ciclo celular de fibroblastos primários e efeitos na produção de embriões bovinos clonados por handmade (hmc)

Spatial and temporal synchrony and compatibility between the receptor oocyte and the donor cell nucleus are necessary for the process of embryo cloning to allow nuclear reprogramming and early embryonic development. The objective of the present study was to evaluate three cell cycle synchronization methods on a primary bovine fibroblast culture for 24, 48, or 72 h. These fibroblasts were used as nuclear donors to evaluate their in vitro developmental potential and the quality of the embryos produced through handmade cloning (HMC). No differences were found between the methods used for fibroblast synchronization in G0/G1 (p > 0.05). Production of clones from fibroblasts in four groups- no treatment at 0 h and using serum restriction SR, high culture confluence HCC, and SR+HCC at 24 h- resulted in high cleavage rates that were not different. Embryo production rates were 37.9%, 29.5%, and 30.9% in the 0h, SR24h, and SR+HHC24h groups, respectively, and 19.3% in the HCC group, which was significantly different from the other three (p < 0.05). There were no differences in the quality parameter among the clones produced with fibroblasts subjected to the different synchronization. Finally, when overall clone production was compared versus parthenotes and IVF embryos, the only difference was between clones and parthenogenetic embryos with zona pellucida (30.2% vs 38.6%). The number of blastomeres from the blastocytes produced through IVF was significantly greater than those from embryos activated parthenogenetically and from clones (117, 80, 75.9, and 67.1, respectively). The evaluation of three synchronization methods at different time points did not demonstrate an increase in the percentage of fibroblasts in the G0/G1 phases of the cell cycle; however, good quality and high cloning rates were obtained, suggesting that it is not always necessary to subject the cells to any synchronization treatments, as they would yield equally good cloning results.(AU)

A sincronia espacial e temporal e a compatibilidade entre o oócito receptor e o núcleo celular doador são necessárias para o processo de clonagem de embriões a fim de permitir a reprogramação nuclear e o desenvolvimento embrionário precoce. O objetivo do presente estudo foi avaliar três métodos de sincronização do ciclo celular em uma cultura primária de fibroblastos bovinos durante 24, 48 ou 72 h. Estes fibroblastos foram utilizados como doadores nucleares para avaliar o seu potencial de desenvolvimento in vitro e a qualidade dos embriões produzidos por meio da técnica de Handmade cloning (HMC). Não foram encontradas diferenças entre os métodos utilizados para a sincronização de fibroblastos em G0 / G1 (p> 0,05). Produção de clones de fibroblastos nos quatro grupos - sem tratamento a 0 h e com restrição de soro RS, alta confluência celular ACC e RS + ACC às 24 h - resultou em altas taxas de clivagem que não foram diferentes. As taxas de produção de embriões foram de 37,9%, 29,5% e 30,9% nos grupos 0h, RS24h e RS + ACC24h, respectivamente, e 19,3% no grupo ACC, que foi significativamente diferente dos outros três (p <0,05). Não houve diferenças no parâmetro de qualidade entre os clones produzidos com fibroblastos submetidos à sincronização diferente. Finalmente, quando a produção geral de clones foi comparada versus partenotos e embriões de FIV, a única diferença foi entre clones e embriões partenogênicos com zona pelúcida (30,2% vs 38,6%). O número de blastômeros dos blastocitos produzidos através da FIV foi significativamente maior do que os de embriões ativados partenogeneticamente e de clones (117, 80, 75,9 e 67,1, respectivamente).(AU)

Qualidade do leite, obtido por ordenha manual e mecanizada, recebido em um laticínio do município de Argirita MG / Milk quality, obtained by manual and mechanized milking, received on a dairy in the town of Argirita-MG

Milk production in Brazil is widespread all over the country in properties that feature a form of subsistence production, without any technique, up to properties with advanced technology. Search for products with higher quality is being increasingly demanded by consumers. That being said, dairy industries are requiring the producer to improve the quality of milk delivered to the dairy, especially as the Total Bacterial Count and Somatic Cell Count. These parameters you can assess the quality in production hygiene and health of the mammary gland of the herd. The present work aimed to compare the Total Bacterial Count (TBC) and the somatic cell count (SCC) of milk obtained by manual and mechanized milking and measure the temperature of the milk at the time of arrival at the dairy. Samples for carrying out the analyses were forwarded to the laboratory of milk quality of Embrapa Dairy Cattle, Juiz de Fora MG. It was concluded that this type of milking did not affect the sanitary-hygienic quality of the milk.

A produção de leite no Brasil está difundida por todo país em propriedades que apresentam uma forma de produção de subsistência, sem nenhuma técnica, até propriedades com tecnologia avançada. A busca por produtos com maior qualidade vem sendo cada vez mais exigida pelos consumidores e com o leite não vem sendo diferente. Com isso as indústrias lácteas estão exigindo do produtor a melhoria na qualidade do leite entregue ao laticínio, principalmente quanto a Contagem Bacteriana Total e a Contagem de Células Somáticas, pois com esses dois parâmetros é possível avaliar a qualidade na higiene de produção e a saúde da glândula mamária do rebanho. O presente trabalho objetivou comparar a Contagem Bacteriana Total (CBT) e a Contagem de Células Somáticas (CCS) do leite obtido por ordenha manual e mecanizada e mensurar a temperatura do leite no momento da recepção no laticínio. As amostras para a realização das análises foram encaminhadas ao Laboratório de Qualidade do Leite da Embrapa Gado de Leite, em Juiz de Fora MG. Concluiu-se que o tipo de ordenha não interferiu na qualidade higiênico-sanitária do leite, porém verificou-se a temperatura elevada do leite entregue ao laticínio, sugerindo novas pesquisas para avaliar se seria esse o motivo de valores altos para CBT.

Qualidade do leite, obtido por ordenha manual e mecanizada, recebido em um laticínio do município de Argirita MG / Milk quality, obtained by manual and mechanized milking, received on a dairy in the town of Argirita-MG

Milk production in Brazil is widespread all over the country in properties that feature a form of subsistence production, without any technique, up to properties with advanced technology. Search for products with higher quality is being increasingly demanded by consumers. That being said, dairy industries are requiring the producer to improve the quality of milk delivered to the dairy, especially as the Total Bacterial Count and Somatic Cell Count. These parameters you can assess the quality in production hygiene and health of the mammary gland of the herd. The present work aimed to compare the Total Bacterial Count (TBC) and the somatic cell count (SCC) of milk obtained by manual and mechanized milking and measure the temperature of the milk at the time of arrival at the dairy. Samples for carrying out the analyses were forwarded to the laboratory of milk quality of Embrapa Dairy Cattle, Juiz de Fora MG. It was concluded that this type of milking did not affect the sanitary-hygienic quality of the milk.(AU)

A produção de leite no Brasil está difundida por todo país em propriedades que apresentam uma forma de produção de subsistência, sem nenhuma técnica, até propriedades com tecnologia avançada. A busca por produtos com maior qualidade vem sendo cada vez mais exigida pelos consumidores e com o leite não vem sendo diferente. Com isso as indústrias lácteas estão exigindo do produtor a melhoria na qualidade do leite entregue ao laticínio, principalmente quanto a Contagem Bacteriana Total e a Contagem de Células Somáticas, pois com esses dois parâmetros é possível avaliar a qualidade na higiene de produção e a saúde da glândula mamária do rebanho. O presente trabalho objetivou comparar a Contagem Bacteriana Total (CBT) e a Contagem de Células Somáticas (CCS) do leite obtido por ordenha manual e mecanizada e mensurar a temperatura do leite no momento da recepção no laticínio. As amostras para a realização das análises foram encaminhadas ao Laboratório de Qualidade do Leite da Embrapa Gado de Leite, em Juiz de Fora MG. Concluiu-se que o tipo de ordenha não interferiu na qualidade higiênico-sanitária do leite, porém verificou-se a temperatura elevada do leite entregue ao laticínio, sugerindo novas pesquisas para avaliar se seria esse o motivo de valores altos para CBT.(AU)

Avaliação da mastite subclínica por métodos diretos e indiretos em vacas criadas no sistema semi-intensivo, no semiárido de Alagoas, Brasil

Vários fatores podem afetar a produção leiteira, porém um fator negativo e de grande importância são as infecções da glândula mamária, conhecidas como mastite, podendo se apresentar na forma clínica ou subclínica. O controle da mastite subclínica nos rebanhos ainda é um grande desafio, uma vez que, diferente da forma clínica, não apresenta alterações macroscópicas na glândula nem no leite, podendo permanecer silenciosa no rebanho, por longo período de tempo. Sua detecção ocorre apenas pela elevação da contagem de células somáticas (CCS), que corresponde ao conjunto de células de descamação do epitélio glandular mais os leucócitos liberados pelo sistema imune, em resposta às infecções intramamárias. Além de elevar a CCS no leite, a MS reduz a atividade sintética da glândula mamária e altera a composição do leite, gerando grandes prejuízos à pecuária leiteira. O objetivo do presente estudo foi avaliar a MS, por métodos diretos e indiretos, em vacas leiteiras mestiças Holandês-Gir. Para tanto, realizaram-se o California Mastitis Test (teste CMT), exames bacteriológicos, a contagem de células somáticas (CCS) e as imagens termográficas dos quartos mamários de vacas Holandês-Gir, criadas em regime semi-intensivo, em uma propriedade localizada no município de Olho Dágua das Flores, região semiárida do Estado de Alagoas. Observou-se que 75,42% (181/240) das amostras de leite por quarto mamário foram positivas para a mastite subclínica pelo teste CMT e 56% (215/384), de acordo com o resultado do exame bacteriológico. Os principais agentes etiológicos isolados foram Staphylococcus sp. (61,7%), Streptococcus sp. (14,8%) e Enterobacteriaceae (12,6%). De acordo com a CCS, 69% (331/480) das amostras de leite por quarto mamário foram positivas para a mastite subclínica (CCS > 200.000 cél./mL). Do percentual de amostras positivas pela CCS, 25,6% apresentou contagem até 500.000 cél/mL e 43,4% ultrapassou esse valor, que é o limite máximo estabelecido pela legislação brasileira que regulamenta a produção, a identidade, a qualidade, a coleta e o transporte do leite no país. As médias dos parâmetros termográficos não diferiram entre os quartos mamários sadios e com MS (p>0,05). Também não houve diferença (p>0,05) entre os parâmetros termográficos e o número de microrganismos isolados (0, 1 e 2). O CMT, a CCS e os exames bacteriológicos constataram, em consonância, que a ocorrência da MS no rebanho avaliado é elevada e que a forma de MS mais frequente é do tipo contagiosa. A termografia infravermelha não é eficiente para diagnosticar a mastite subclínica em vacas leiteiras mestiças Holandês-Gir, sob as condições de avaliação realizadas na presente pesquisa.

Among several aspects that can affect milk production, the infections of the mammary gland, known as mastitis, is a very important negative issue, which may be presented in clinical or subclinical form (SM). The control of subclinical mastitis (SM) in herds is still an important challenge because, unlike the clinical form, SM does not present macroscopic changes in the gland or in the milk, and can remain hidden in the herd for a long period of time. SM is mainly detected by the increase of somatic cell count (SCC), which corresponds to the set of cells of desquamation by the glandular epithelium added to the leukocytes released by the immune system, in response to intramammary infections. In addition to raising SCC in milk, SM reduces the synthetic activity of the mammary gland and alters the composition of the milk, generating considerable damage to dairy farming. The aim was to evaluate the association of direct and indirect methods as tools for auxiliary and early diagnosis of subclinical mastitis in Gir cows in full production, coming from the semi-arid region of the State of Alagoas. For this purpose, California Mastitis Test (CMT), bacteriological exams, somatic cell count (SCC) and thermographic images of the mammary quarters of cows reared in a semi-intensive regime were carried out on a property located in the municipality of Olho D'água das Flores, semi-arid region of the State of Alagoas. It was observed that 75.42% (181/240) of the milk samples per mammary quarter were positive for MS by the CMT test and 56% (215/384) by the bacteriological examination. The main etiologic agents isolated were Staphylococcus sp. (61.7%), Streptococcus sp. (14.8%) and Enterobacteriaceae (12.6%). According to the SCC, 69% (331/480) of milk samples per mammary quarter were positive for MS (SCC 200,000 cells/ml). From these, 25.6% had a count of up to 500,000 cells/ml and 43.4% exceeded this value, which is the maximum limit established by Brazilian legislation that regulates milk production. The averages of the thermographic parameters did not differ between the healthy mammary quarters and those with DM (p> 0.05). Likewise, there was no difference (p> 0.05) between the thermographic parameters and the number of isolated microorganisms (0, 1 and 2). The frequency of subclinical mastitis is high in the studied herd and the main type of mastitis found is contagious. Infrared thermography was not presented as an efficient indirect method to diagnose subclinical mastitis in crossbred Holstein-Gir dairy cows, under the evaluated conditions.

Detecção sorológica, molecular e diversidade genética de Anaplasma spp. em pequenos ruminantes da microrregião do Baixo Parnaíba, Maranhão

A anaplasmose, causada por bactérias do gênero Anaplasma, é importante enfermidade transmitida por carrapatos que geram prejuízos às criações de animais de produção em muitos países. Os caprinos e ovinos são suscetíveis a infecções por bactérias desse gênero e tem sido amplamente relatado em diferentes regiões do mundo. Apesar da importância deste patógeno para a sanidade animal, poucas pesquisas tem sido realizadas a fim de detectar a ocorrência desse patógeno em pequenos ruminantes, no Brasil. Desse modo, esta pesquisa teve como objetivo detectar e determinar a diversidade genética de Anaplasma spp. em pequenos ruminantes e carrapatos da região do Baixo Parnaíba Maranhense. Para isso, foram coletadas amostras de sangue de 161 animais, sendo 70 ovinos e 91 caprinos, oriundos de 4 municípios da região do Baixo Parnaíba, todos clinicamente saudáveis no momento da coleta. Foram confeccionados esfregaços sanguíneos, corados com Giemsa, para a observação de inclusões de Anaplasma spp. pela microscopia de luz. O soro dos ovinos e caprinos foram submetidos a métodos de diagnóstico sorológico, por meio do ELISA, utilizando proteína de superfície de membrana recombinante (MSP5) e o sangue, ao diagnóstico molecular para a detecção de A. marginale por meio da qPCR e cPCR. As amostras positivas foram então sequenciadas e em seguida submetidas a análise da diversidade genética pelo RepeatAnalyzer. Com isso, não foi possível observar inclusões sugestivas de Anaplasma spp. em nenhum dos esfregaços sanguíneos analisados. O levantamento sorológico detectou a presença de anticorpos anti-A. marginale em 18 animais (11,1%), sendo 2,8% caprinos e 17,5% ovinos. Foi possível identificar o DNA de A. marginale em 2 ovinos (1,24%) por meio da qPCR. A análise do sequenciamento das amostras demonstrou porcentagens de identidade variando de 90.97% a 98.79% com A. marginale, e com relação a diversidade genética, foram caracterizadas duas estirpes distintas, cada uma em um animal diferente, nunca relatadas em pequenos ruminantes, ambas pertencentes ao genótipo H foi demonstrado alta diversidade genética das estirpes entre si e na região estudada. Com base no exposto, foi possível confirmar a circulação de A. marginale em ovinos e caprinos no Estado do Maranhão, utilizando as abordagens sorológica e molecular.

Anaplasmosis, caused by bacteria of the genus Anaplasma, is an important disease transmitted by ticks that cause damage to livestock farms in many countries. Goats and sheep are susceptible to infections by bacteria of this genus and have been widely reported in different regions of the world. Despite the importance of this pathogen for animal health, little research has been carried out in order to detect the occurrence of this pathogen in small ruminants in Brazil. Thus, this research aimed to detect and determine the genetic diversity of Anaplasma spp. in small ruminants and ticks from the Baixo Parnaíba Maranhense region. For this, blood samples were collected from 161 animals, 70 sheep and 91 goats, from 4 municipalities in the Baixo Parnaíba region, all clinically healthy at the time of collection. Blood smears, stained with Giemsa, were made to observe inclusions of Anaplasma spp. by light microscopy. The serum of sheep and goats was subjected to serological diagnostic methods, using ELISA, recombinant membrane surface protein (MSP5) and blood, to the molecular diagnosis for the detection of A. marginale using qPCR and cPCR. Positive samples were then sequenced and then subjected to analysis of genetic diversity by RepeatAnalyzer program. Thus, it was not possible to observe inclusions suggestive of Anaplasma spp. in any of the blood smears analyzed. The serological survey detected the presence of anti-A. marginale antibodies in 18 animals (11.1%), with 2.8% goats and 17.5% sheep. It was possible to identify the DNA of A. marginale in 2 sheep (1.24%) using qPCR. The sequencing analysis of the samples showed identity percentages ranging from 90.97% to 98.79% with A. marginale, and with respect to genetic diversity, two distinct strains were characterized, each in a different animal, never reported in small ruminants, both belonging to the H genotype and with respect to genetic diversity, two distinct strains were characterized, each in a different animal, never reported in small ruminants, both belonging to the H genotype. High genetic diversity of the strains was demonstrated among themselves and in the studied region. Based on the above, it was possible to confirm the circulation of A. marginale in sheep and goats in the State of Maranhão, using the serological and molecular approaches.

La capacidad de carga, producción y composición de forrajes de tres gramíneas irrigadas o no durante la estación seca / Support capacity, production and composition of three grasses sward or not irrigated during the drought / Capacidade de suporte, produção e composição do dossel forrageiro de três gramíneas irrigadas ou não no período seco

Este estudio tuvo como objetivo evaluar la capacidad de carga, la producción y la composición morfológica de 3 gramineas irrigadas o no durante la sequía. El diseño experimental fue un arreglo factorial 3x2 con tres forrajes (Panicum maximum cv Tanzania, Cynodon spp cv Tifton 85 y Urochloa mosambicensis), de regadío o no. Los datos se sometieron a análisis de varianza y las medias se compararon mediante la prueba de Tukey al 5%. Se observó una interacción significativa (P 0,05) en la producción de MS. En Tanzania, el área sin riego presentó mayor rendimiento de MS de Urocloa, los cuales no difieren de Tifton 85. La superficie de regadío en la producción de MS de Tifton 85 fue más alta que la otra, y la Tanzania fue mayor que Urocloa. El rendimiento de materia seca promedio fue mayor en el área de riego. Se observó una interacción significativa (P 0,05) en la producción de lámina de la hoja verde (LHV). En la zona de secano de Tanzania LHV fue mayor que los otros, y la Tifton 85 y Urocloa no difirieron. La superficie de regadío en Tanzania tuvo la LHV más grande que otros, y la Tifton 85 fue mayor que el Urucloa. La producción LHV fue mayor en el área de riego. Se observó una interacción significativa (P 0,05) en hojas de relación lámina de la hoja: tallo (RLT). En dos áreas, la más grande de Tanzania RLT tenía que también, y Urocloa y Tifton 85 no difirieron. El RLT Tanzania fue el más grande de lazona de secano, el RLT Urocloa Tifton 85 y no fue diferente entre las áreas. Se observó una interacción significativa (P <0,05) en la capacidad de soporte (CS). En el secano CS Tifton 85 fue mayor que Urocloa, los cuales no difieren de Tanzania. La superficie de regadío en el CS Tifton 85 fue mayor que los otros, y el Tanzania tuvo el mayor CS Urocloa. El CS fue mayor en el área de riego

This study aimed to assess the carrying capacity, production and morphological composition of 3 or not irrigated forage during drought. The experimental design was a 3x2 factorial arrangement with three forages (Panicum maximum cv Tanzania, Cynodon spp cv Tifton 85 and Urochloa mosambicensis), irrigated or not. Data were subjected to analysis of variance and means were compared by Tukey test at 5%. It was observed a significant interaction (P 0.05) in DM production. In Tanzania the area without irrigation had higher DM yield than Urocloa, both of which did not differ from Tifton 85. Irrigated area in DM yield of Tifton 85 was higher than the other, and the Tanzania was higher than Urocloa. On average DM yield was higher in the irrigated area. It was observed a significant interaction (P 0.05) in the production of green leaf blade (GLB). In the non-irrigated area of Tanzania GLB was higher than the others, and the Tifton 85 and Urocloa did not differ. Irrigated area in Tanzania had the largest GLB than others, and the Tifton 85 was greater than the Urucloa. The GLB production was higher in the irrigated area. It was observed a significant interaction (P 0.05) in relation lamina leaf: stem ratio (RLS). In two areas the largest RLS Tanzania had that too, and Urocloa and Tifton 85 did not differ. The RLS Tanzania was the largest in the area without irrigation, the RLS Urocloa Tifton 85 and did not differ between areas. We observeda significant interaction (P<0.05) in support capacity (SC). In the non-irrigated SC Tifton 85 was higher than Urocloa, both of which did not differ from Tanzania. Irrigated area in the SCTifton 85 was higher than the others, and the Tanzania had the highest SC Urocloa. The SC was higher in the irrigated area

Objetivou-se avaliar a capacidade de suporte, produção e composição morfológica de 3 forrageiras irrigadas ou não durante a seca. O delineamento experimental foi em esquema fatorial 3x2, com 3 forragens (Panicum maximum cv Tanzânia, Cynodon spp cv Tifton 85 e Urochloa mosambicensis), irrigadas ou não. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo Teste de Tukey a 5%. Observou-se interação significativa (P 0,05) na produção de MS. Na área sem irrigação o Tanzânia apresentou maior produção de MS que o Urocloa, sendo que ambos não diferiram do Tifton 85. Na área irrigada a produção de MS do Tifton 85 foi maior que os demais, sendo que o Tanzânia foi maior que o Urocloa. Na média a produção de MS foi maior na área irrigada. Observou-se interação significativa (P 0,05) na produção de lâmina foliar verde (LFV). Na área não irrigada a LFV do Tanzânia foi maior que a dos demais, sendo que o Tifton 85 e o Urocloa não diferiram entre si. Na área irrigada o Tanzânia teve maior LFV que os demais, sendo o Tifton 85 foi maior que o Urucloa. A produção de LFV foi maior na área irrigada. Observouse interação significativa (P 0,05) na relação lamina foliar:colmo (RLC). Nas duas áreas o Tanzânia teve maior RLC que os demais, e o Urocloa e Tifton 85 não diferiram entre si. A RLC do Tanzânia foi maior na área sem irrigação, a RLC do Urocloa e Tifton 85 não diferiu entre as áreas. Observou-se interação significativa (P<0,05) na capacidade de suporte (CS). Na área não irrigada a CS do Tifton 85 foi maior que do Urocloa, sendo que ambos nãodiferiram do Tanzânia. Na área irrigada a CS do Tifton 85 foi maior que a dos demais, sendo que o Tanzânia teve maior CS que o Urocloa. A CS foi maior na área irrigada

La capacidad de carga, producción y composición de forrajes de tres gramíneas irrigadas o no durante la estación seca / Support capacity, production and composition of three grasses sward or not irrigated during the drought / Capacidade de suporte, produção e composição do dossel forrageiro de três gramíneas irrigadas ou não no período seco

Este estudio tuvo como objetivo evaluar la capacidad de carga, la producción y la composición morfológica de 3 gramineas irrigadas o no durante la sequía. El diseño experimental fue un arreglo factorial 3x2 con tres forrajes (Panicum maximum cv Tanzania, Cynodon spp cv Tifton 85 y Urochloa mosambicensis), de regadío o no. Los datos se sometieron a análisis de varianza y las medias se compararon mediante la prueba de Tukey al 5%. Se observó una interacción significativa (P 0,05) en la producción de MS. En Tanzania, el área sin riego presentó mayor rendimiento de MS de Urocloa, los cuales no difieren de Tifton 85. La superficie de regadío en la producción de MS de Tifton 85 fue más alta que la otra, y la Tanzania fue mayor que Urocloa. El rendimiento de materia seca promedio fue mayor en el área de riego. Se observó una interacción significativa (P 0,05) en la producción de lámina de la hoja verde (LHV). En la zona de secano de Tanzania LHV fue mayor que los otros, y la Tifton 85 y Urocloa no difirieron. La superficie de regadío en Tanzania tuvo la LHV más grande que otros, y la Tifton 85 fue mayor que el Urucloa. La producción LHV fue mayor en el área de riego. Se observó una interacción significativa (P 0,05) en hojas de relación lámina de la hoja: tallo (RLT). En dos áreas, la más grande de Tanzania RLT tenía que también, y Urocloa y Tifton 85 no difirieron. El RLT Tanzania fue el más grande de lazona de secano, el RLT Urocloa Tifton 85 y no fue diferente entre las áreas. Se observó una interacción significativa (P <0,05) en la capacidad de soporte (CS). En el secano CS Tifton 85 fue mayor que Urocloa, los cuales no difieren de Tanzania. La superficie de regadío en el CS Tifton 85 fue mayor que los otros, y el Tanzania tuvo el mayor CS Urocloa. El CS fue mayor en el área de riego(AU)

This study aimed to assess the carrying capacity, production and morphological composition of 3 or not irrigated forage during drought. The experimental design was a 3x2 factorial arrangement with three forages (Panicum maximum cv Tanzania, Cynodon spp cv Tifton 85 and Urochloa mosambicensis), irrigated or not. Data were subjected to analysis of variance and means were compared by Tukey test at 5%. It was observed a significant interaction (P 0.05) in DM production. In Tanzania the area without irrigation had higher DM yield than Urocloa, both of which did not differ from Tifton 85. Irrigated area in DM yield of Tifton 85 was higher than the other, and the Tanzania was higher than Urocloa. On average DM yield was higher in the irrigated area. It was observed a significant interaction (P 0.05) in the production of green leaf blade (GLB). In the non-irrigated area of Tanzania GLB was higher than the others, and the Tifton 85 and Urocloa did not differ. Irrigated area in Tanzania had the largest GLB than others, and the Tifton 85 was greater than the Urucloa. The GLB production was higher in the irrigated area. It was observed a significant interaction (P 0.05) in relation lamina leaf: stem ratio (RLS). In two areas the largest RLS Tanzania had that too, and Urocloa and Tifton 85 did not differ. The RLS Tanzania was the largest in the area without irrigation, the RLS Urocloa Tifton 85 and did not differ between areas. We observeda significant interaction (P<0.05) in support capacity (SC). In the non-irrigated SC Tifton 85 was higher than Urocloa, both of which did not differ from Tanzania. Irrigated area in the SCTifton 85 was higher than the others, and the Tanzania had the highest SC Urocloa. The SC was higher in the irrigated area(AU)

Objetivou-se avaliar a capacidade de suporte, produção e composição morfológica de 3 forrageiras irrigadas ou não durante a seca. O delineamento experimental foi em esquema fatorial 3x2, com 3 forragens (Panicum maximum cv Tanzânia, Cynodon spp cv Tifton 85 e Urochloa mosambicensis), irrigadas ou não. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo Teste de Tukey a 5%. Observou-se interação significativa (P 0,05) na produção de MS. Na área sem irrigação o Tanzânia apresentou maior produção de MS que o Urocloa, sendo que ambos não diferiram do Tifton 85. Na área irrigada a produção de MS do Tifton 85 foi maior que os demais, sendo que o Tanzânia foi maior que o Urocloa. Na média a produção de MS foi maior na área irrigada. Observou-se interação significativa (P 0,05) na produção de lâmina foliar verde (LFV). Na área não irrigada a LFV do Tanzânia foi maior que a dos demais, sendo que o Tifton 85 e o Urocloa não diferiram entre si. Na área irrigada o Tanzânia teve maior LFV que os demais, sendo o Tifton 85 foi maior que o Urucloa. A produção de LFV foi maior na área irrigada. Observouse interação significativa (P 0,05) na relação lamina foliar:colmo (RLC). Nas duas áreas o Tanzânia teve maior RLC que os demais, e o Urocloa e Tifton 85 não diferiram entre si. A RLC do Tanzânia foi maior na área sem irrigação, a RLC do Urocloa e Tifton 85 não diferiu entre as áreas. Observou-se interação significativa (P<0,05) na capacidade de suporte (CS). Na área não irrigada a CS do Tifton 85 foi maior que do Urocloa, sendo que ambos nãodiferiram do Tanzânia. Na área irrigada a CS do Tifton 85 foi maior que a dos demais, sendo que o Tanzânia teve maior CS que o Urocloa. A CS foi maior na área irrigada(AU)

Avaliação de bovinos expostos a alta concentração de metais pesados e sua relação com a mudança da microbiota intestinal, ruminal e respiratória e o desenvolvimento de resistência a antimicrobianos

Casos de contaminação ambiental originados a partir de erros humanos estão ganhando cada vez mais espaço na mídia, alertando a todos quanto a fragilidade do meio ambiente perante os acontecimentos. Problemas técnicos e estruturais de barragens foram destaque na mídia nacional e internacional, ao qual geraram consequências inimagináveis tanto pela contaminação ambiental quanto pela morte de centenas pessoas no Estado de Minas Gerais, Brasil. Em 2015, o município mineiro de Mariana foi severamente acometido pelo vazamento de mais de 43 milhões de metros cúbicos de rejeito de minério de ferro devido ao rompimento da barragem do Fundão. A isso, o ambiente da região também sofre com o contínuo despejo de esgotos domésticos e agropecuários, contendo elementos nocivos ao equilíbrio ambiental. Os metais pesados podem, por vários mecanismos, desencadear a resistência a antibióticos e a modificação da microbiota, impactando na saúde dos animais e, consequentemente, na economia da região, além de ocasionar consequências negativas a saúde humana. O presente trabalho teve como objetivo estudar bovinos leiteiros criados na região de Mariana, Minas Gerais (impactada por resíduos tóxicos), quanto a saúde, ocorrência de resistência bacteriana aos antimicrobianos e as possíveis mudanças na microbiota desses animais. A água do rio também foi avaliada quanto a presença de metais pesados e bactérias resistentes a antimicrobianos. Cinquenta e oito fêmeas bovinas leiteiras foram estudadas, sendo 28 criadas em Mariana, Minas Gerais (F1) e 30 criadas em Caldas, Minas Gerais (local sem histórico de contaminação ambiental) (F2). Foram obtidas amostras de sangue total (para obtenção de soro), swab fecal e nasal profundo, líquido ruminal e água dos dois locais. Fez-se a avaliação física e do perfil renal e hepático dos animais, bem como da concentração de metais pesados no soro e na água utilizando a metodologia de fluorescência de raio-x. Estudou-se o microbioma e resistoma intestinal, ruminal e respiratório e, por fim, a presença de bactérias resistentes à antimicrobianos nas amostras de água. No momento da visita às propriedades, os animais não apresentavam nenhuma manifestação clínica decorrente de intoxicação por metais pesados. Houve detecção de arsênio e alumínio em animais de ambas regiões estudadas, em concentração abaixo do limite máximo seguro para a espécie. Quando ao metagenoma bovino, o microbioma e resistoma de F1 foi diferente de F2. A abundância relativa e prevalência de genes de resistência a antimicrobianos foi maior em F1 que em F2. As amostras de F1 apresentaram alta presença de genes de resistência a antibióticos, metais, biocidas e de multirresistência. A análise da água do rio indicou a presença de alumínio e ferro em concentrações consideradas abaixo do limite estabelecido pelos órgãos reguladores. O estudo microbiológico da água revelou inúmeras bactérias resistentes a antibióticos e metais pesados como arsênio e mercúrio e com a análise genética sugeriu-se a ocorrência da co-resistência. Sabendo que a contaminação por metais pesados afeta o microbioma e resistoma animal, a qualidade da água e o equilíbrio ambiental, ações ambientais em relação à mineração são necessárias e urgentes, como construção e manutenção adequadas de barragens, buscas por métodos de extração mineral menos danosos e com menor produção de rejeitos, adequado tratamento de rejeitos e avaliação continuada da presença e disseminação de genes de resistência. Essas ações são fundamentais para garantir a proteção ambiental, animal, e do sistema de produção de alimentos das consequências perigosas decorrentes do alto despejo de contaminantes.

Cases of environmental contamination originating from human errors are gaining more and more space in the media, alerting everyone to the fragility of the environment in the face of events. Technical and structural problems of dams were highlighted in the national and international media, which generated unimaginable consequences both for the environmental contamination and for the death of hundreds of people in the State of Minas Gerais, Brazil. In 2015, the mining municipality of Mariana was severely affected by the spill of over 43 million cubic meters of iron ore tailings due to the collapse of the Fundão dam. As a result, the region's environment also suffers from the continuous dumping of domestic and agricultural sewage, containing elements harmful to the environmental balance. Heavy metals can, by various mechanisms, trigger resistance to antibiotics and the modification of the microbiota, impacting the health of animals and, consequently, the economy of the region, in addition to causing negative consequences to human health. This study aimed to study dairy cattle raised in the region of Mariana, Minas Gerais (impacted by toxic waste), regarding health, the occurrence of bacterial resistance to antimicrobials, and possible changes in the microbiota of these animals. The river water was also evaluated for the presence of heavy metals and bacteria resistant to antimicrobials. Fourty-eight cattle females were studied, 28 raised in Mariana, Minas Gerais (F1), and 30 raised in Caldas, Minas Gerais (place without a history of environmental contamination) (F2). Samples of whole blood (to obtain serum), fecal and deep nasal swab, ruminal fluid, and water were obtained from both locations. The physical and renal and hepatic profiles of the animals were evaluated, as well as the concentration of heavy metals in serum and water using the x-ray fluorescence methodology. The intestinal, ruminal, and respiratory microbiome and resistome were studied and, finally, the presence of antimicrobial- resistant bacteria in the water samples. At the time of the visit to the properties, the animals did not show any clinical manifestation due to heavy metal poisoning. There was the detection of arsenic and aluminum in animals from both regions studied, in concentrations below the maximum safe limit for the species. As for the bovine metagenome, the F1 microbiome and resistome were different from F2. The relative abundance and prevalence of antimicrobial resistance genes were higher in F1 than in F2. F1 samples showed a high presence of antibiotics, metal, biocide, and multidrug resistance genes. The analysis of the river water indicated the presence of aluminum and iron in concentrations considered below the limit established by Organs regulatory agencies. The microbiological study of water revealed innumerable bacteria resistant to antibiotics and heavy metals such as arsenic and mercury and with genetic analysis, the occurrence of co-resistance was suggested. Knowing that heavy metal contamination affects the microbiome and animal resistome, water quality, and environmental balance, environmental actions concerning mining are necessary and urgent, such as adequate construction and maintenance of dams, searches for less harmful mineral extraction methods and with less production of tailings, adequate tailings treatment and continued evaluation of the presence and dissemination of resistance genes. These actions are fundamental to guarantee the environmental, animal, and food production system protection from the dangerous consequences resulting from the high dumping of contaminants.

CARACTERIZAÇÃO DE COMPOSTOS QUÍMICOS ASSOCIADOS AO QUEIJO MINAS ARTESANAL

O objetivo do presente estudo foi caracterizar o queijo Minas artesanal de acordo com sua região de produção, ao avaliar os perfis de ácidos graxos e compostos voláteis, bem como a composição centesimal e físico-química das amostras de queijo obtidas. Foram obtidas 78 amostras provenientes de produtores cadastrados junto ao Instituto Mineiro de Agropecuária - IMA, atendendo às exigências sanitárias, tempo mínimo de maturação e métodos de produção característicos dos queijos de cada região (Canastra, Serro, Serra do Salitre, Araxá, Triângulo Mineiro, Cerrado, Campo das Vertentes). Em relação à caracterização físico-química e centesimal, a análise de variância apresentou diferença significativa (p<0,05) para as variáveis Nitrogênio Solúvel em TCA 12% (%NNP), Nitrogênio Solúvel em pH 4,6 (%NS), índices de extensão e profundidade de maturação (%EM; %PM), cinzas, oxidação, gordura e pH. Todas as amostras de queijo analisadas atenderam ao disposto no Decreto Nº 44.864, de 1º de agosto de 2008, que estabelece uma umidade máxima de até 45,9% para o queijo Minas artesanal. As regiões apresentaram comportamento diferente para a análise de componentes principais (PCA) em relação às variáveis avaliadas. Os resultados obtidos indicaram que existe diferença na composição físico-química e centesimal entre os queijos oriundos de regiões distintas em relação às variáveis avaliadas. Para a caracterização do perfil lipídico dos queijos analisados, foram observadas diferenças significativas (p<0,05) entre a maioria dos compostos identificados e as regiões estudadas. Os queijos da região da Serra do Salitre e Araxá apresentaram-se similares no que diz respeito ao ácido capróico (C6:0), total de ácidos graxos poliinsaturados (POL) e a razão entre poliinsaturados e saturados (POL/SAT). O ácido palmítico (C16:0) foi o mais representativo dentro do grupo dos graxos saturados e os ácidos oléico (C18:1N9C) e linoléico (C18:2N6C) foram os mais expressivos no grupamento de graxos monoinsaturados e poli-insaturados dos queijos das distintas regiões, respectivamente. Os resultados encontrados neste estudo comprovam que existe diferença em relação ao perfil de ácidos graxos do queijo Minas artesanal e a região no qual é produzido. Contudo, não foi possível estabelecer uma identificação por origem em função da composição e do perfil de ácidos graxos. Em relação ao perfil de compostos voláteis, foi identificado um total de 166 compostos entre os grupos químicos aldeído (20), cetona (17), ácido carboxílico (20), terpeno (6), éster (57), hidrocarboneto (15) e álcool (31). Os terpenos -pinene e caryophyllene-oxide demonstraram ser possíveis marcadores vegetais para os queijos das regiões Canastra e Serro, uma vez que estes compostos não foram identificados nas demais regiões. Ao avaliar o perfil de compostos voláteis por meio da PCA de maneira geral, todas as regiões apresentaram comportamento diferente e, ao avaliar os grupos químicos de compostos de forma isolada, as regiões da Canastra e Serro se mostraram divergentes e as demais regiões apresentaram-se relativamente semelhantes, exceto no que se refere aos compostos cetônicos.Os resultados encontrados no presente estudo nos permitem concluir que, apesar de serem observadas interações semelhantes entre alguns compostos e regiões, muitos deles diferem em relação à origem dos queijos podendo, portanto, fornecer diretrizes sobre padrões de compostos químicos em diferentes locais de produção. Não obstante, são necessários mais estudos que avaliem o perfil de compostos voláteis dos queijos Minas artesanais para que seja possível caracterizá-los quimicamente de acordo com sua região de origem, contribuindo para a concessão do título de Indicação Geográfica.

The aim of the present study was to characterize artisanal Minas cheese according to its region of production, by evaluating the profiles of fatty acids and volatile compounds, as well as the chemical and physico-chemical composition of the cheese samples obtained. 78 samples were obtained from producers registered in the Instituto Mineiro de Agropecuária - IMA, meeting the sanitary requirements, minimum ripening time and production methods with the characteristics of the cheeses from each region (Canastra, Serro, Serra do Salitre, Araxá, Triângulo Mineiro, Cerrado, Campo das Vertentes). Regarding physico-chemical and centesimal characterization, the analysis of variance showed a significant difference (p <0.05) for the variables Soluble Nitrogen in TCA 12% (% NNP), Soluble Nitrogen in pH 4.6 (% NS), indexes of extension and depth of maturation (% EM; %PM), ash, oxidation, fat and pH. All the cheese samples analyzed complied with the provisions of Decree No. 44,864, of August 1, 2008, which establishes a maximum humidity of up to 45.9% for artisanal Minas cheese. The regions showed different behavior for the principal component analysis (PCA) in relation to the variables evaluated.The results obtained indicated that there is a difference in the physico-chemical and centesimal composition between cheeses from different regions in relation to the evaluated variables. For the characterization of the lipid profile of the cheeses analyzed, significant differences (p <0.05) were observed between most of the compounds identified and the regions studied. The cheeses from the Serra do Salitre and Araxá regions were similar regarding the capróic acid (C6: 0), total polyunsaturated fatty acids (POL) and the ratio between polyunsaturated and saturated (POL / SAT). Palmitic acid (C16: 0) was the most representative within the group of saturated fatty acids and the oleic (C18: 1N9C) and linoleic acid (C18: 2N6C) were the most expressive in the group of monounsaturated and polyunsaturated fatty cheeses, respectively, from different regions. The results found in this study prove that there is a difference in relation to the fatty acid profile of artisanal Minas cheese and the region in which it is produced. However, it was not possible to establish an identification by origin depending on the composition and profile of fatty acids. Regarding the profile of volatile compounds, 166 compoundswas identified between the chemical groups aldehyde (20), ketone (17), carboxylic acid (20), terpene (6), ester (57), hydrocarbon (15) and alcohol (31). The -pinene and caryophyllene-oxide terpenes proved to be possible vegetable markers for cheeses from the Canastra and Serro regions, since these compounds were not identified in the other regions. When assessing the profile of volatile compounds through PCA in general, all regions showed different behavior and, when evaluating the chemical groups of compounds in isolation, the regions of Canastra and Serro were divergent and the other regions present themselves relatively similar, except for ketone compounds.The results found in the present study allow us to conclude that, although similar interactions are observed between some compounds and regions, many of them differ in relation to the origin of the cheeses and can therefore provide guidelines on patterns of chemical compounds in different production sites. Nevertheless, further studies are needed to assess the profile of volatile compounds in artisanal Minas cheeses so that it is possible to characterize them chemically according to their region of origin, contributing to the granting of the title of Geographical Indication.

TRANSFERÊNCIA GÊNICA DE FIBROBLASTOS, OÓCITOS E EMBRIÕES SUÍNOS MEDIADA POR POLIETILENOIMINA

SOUZA, A. P. Transferência gênica de fibroblastos, oócitos e embriões suínos mediada por polietilenoimina. 2019. 87p. Tese (Doutorado em Ciência Animal. Área: Produção Animal) Universidade do Estado de Santa Catarina. Programa de Pós-graduação em Ciência Animal, Lages, 2019. Diferentes metodologias são utilizadas para produzir suínos transgênicos, entre elas estão microinjeção pronuclear, transferência gênica mediada por espermatozoide, microinjeção de vetores retrovirais em oócitos, transferência nuclear de células somáticas previamente modificadas. Todos esses métodos foram capazes de produzir com sucesso suínos transgênicos. Porém, ainda apresentam limitações, como a baixa integração do transgene e baixo percentual de animais produzidos, ainda, algumas são caras e laboriosas. Assim, torna-se relevante o desenvolvimento de métodos e padronizações que aumentem a eficiência e melhorem a relação custo-benefício da produção de suínos geneticamente modificados. A Polietilenoimina (PEI) é um polímero catiônico, que condensa o DNA em partículas carregadas positivamente, formando complexos que se ligam aos resíduos de superfície aniônicos e são levados para dentro da célula por endocitose. Tem-se descrito o uso da PEI como um bom agente transfectante numa ampla gama de tipos celulares, apesar disso, até o momento não há um protocolo desenvolvido para este polímero visando a transfecção de células na espécie suína. Diante disto, o objetivo do presente trabalho desenvolver protocolos de transfecção celular eficiente para fibroblastos fetais, oócitos e embriões suínos. Para isso, o presente trabalho foi realizado em duas etapas. A etapa I consistiu no desenvolvimento de um protocolo para de transfecção gênica para fibroblastos fetais suínos (FFS). Para isso foram conduzidos 3 experimentos. No experimento 1 foi avaliada a capacidade da PEI de ser internalizada em diferentes concentrações (0,625; 1,25; 2,5; 5; 10; 20; 40 e 80g/mL) por incubação em diferentes períodos (0,5, 1 e 2 horas). O experimento 2 foi realizado para determinar a melhor razão polímero/eDNA, sendo o grau de complexação avaliado por eletroforese em gel de agarose. No experimento 3, a transfecção foi realizada baseada nos resultados dos experimentos anteriores. Para a transfecção, foram utilizadas as concentrações 10 e 40g/mL, a razão N/P igual a 2, por um período de incubação de 0,5h. Não foi verificada diferença entre as concentrações de PEI utilizadas na porcentagem de células positivas para GFP, no entanto, a concentração de 40g/mL causou maiores danos as células transfectadas. Além disso, a GFP foi expressa por um período de 3 dias, o que sugere que o plasmídeo atingiu o núcleo dos fibroblastos, tendo o gene sido expresso de forma não transiente. A etapa II, consistiu no desenvolvimento de um protocolo para de transfecção gênica para oócitos e embriões suínos. Nesta etapa foram conduzidos 2 experimentos. No experimento 1 foi avaliada a capacidade da PEI de ser internalizada em diferentes concentrações (10; 20; 40 e 80g/mL). No experimento 2, baseado nos resultados do experimento 1, as transfecções foram realizadas utilizando as concentrações 20 e 80g/mL, a razão de PEI/ eDNA igual a 2, por 0,5h de incubação. Nesta etapa foi demostrado que a PEI, diferente de outros agentes transfectantes, tem a capacidade de passar a zona pelúcida, sendo o protocolo desenvolvido foi capaz de produzir blastocistos transgênicos para GFP, tanto de oócitos e embriões transfectados. Os resultados apresentados neste trabalho mostram que através da transfecção gênica mediada pela polietilenoimina foi possível gerar fibroblastos e blastocistos suínos transgênicos para proteína verde fluorescente de forma eficiente.

SOUZA, A. P. Polyethyleneimine-mediated gene transfer in swine fibroblast, oocyte and embryos. 2019. 87p. Doctoral Thesis in Animal Science. Area of concentration: Animal Production Santa Catarina State University. Animal Science Postgraduate Program, Lages, 2018. Different methodologies are used to produce transgenic pigs, among them are pronuclear microinjection, sperm-mediated gene transfer, microinjection of retroviral vectors into oocytes, and nuclear transfer of previously modified somatic cells. These methods are able to successfully produce transgenic pigs. However, limitations such as low transgene integration and low percentage of animals produced, furthermore some are expensive and laborious. The development of methods and standards increases the efficiency and improve the cost-benefit ratio of genetically modified pig production becomes relevant. Polyethyleneimine (PEI) is a cationic polymer which condenses the DNA into positively charged particles forming complexes that bind to the anionic surface residues and are carried into the cell by endocytosis. The use of PEI as a transfectant agent in a wide range of cell types has been described, however, so far has not been yet a protocol developed for this polymer to transfect of cells into the swine species. In view of this, the objective of the present work was to develop efficient cellular transfection protocols for fetal fibroblasts, oocytes and swine embryos. The present work was carried out in two stages. Stage I consisted of the development of a protocol for gene transfection for swine fetal fibroblasts (FFS). Therefore, 3 experiments were conducted. In the experiment 1, the capacity of the PEI to be internalized at different concentrations (0.625, 1.25, 2.5, 5, 10, 20, 40 and 80g / mL) by incubation at different periods (0.5, 1 and 2 hours). Experiment 2 was performed to determine the best polymer / eDNA ratio, and the degree of complexation was evaluated by agarose gel electrophoresis. In experiment 3, transfection was performed based on the results of the above experiments. For transfection, the concentrations 10 and 40 g / mL were used, the N / P ratio was 2, for an incubation period of 30 minutes. No difference was found between the concentrations of PEI used in the percentage of GFP positive cells, however, the concentration of 40 g / ml caused greater damage to the transfected cells. In addition that, GFP was expressed for a period of 3 days, suggesting that the plasmid reached the fibroblast nucleus, and the gene was expressed non-transiently. Stage II consisted of the development of a protocol for gene transfection for oocytes and swine embryos. In this stage 2 experiments were conducted. In the experiment 1, the capacity of the PEI to be internalized in different concentrations (10; 20; 40 and 80g/mL) was evaluated. In experiment 2, based on the results of experiment 1, transfections were performed using concentrations of 20 and 80g / mL, the PEI / eDNA ratio was 2, for 0,5 hours of incubation. In this step it was demonstrated that PEI, unlike other transfecting agents, has the ability to pass the zona pellucid, and the protocol developed was able to produce transgenic blastocysts for GFP, both oocytes and transfected embryos. The results presented in this work show that through polyethyleneimine-mediated gene transfection it was possible to generate transgenic fibroblasts and swine blastocysts to efficiently express fluorescent green protein.

CINOMOSE EM CÃES NATURALMENTE INFECTADOS: TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS E ANÁLISE FILOGENÉTICA DO GENE DA HEMAGLUTININA DO VÍRUS DA CINOMOSE

A cinomose canina é uma das enfermidades infectocontagiosas mais importantes que acomete os cães. É uma doença causada pelo vírus da Cinomose (Canine Distemper Virus - CDV), um Paramyxovirus, do gênero Morbillivirus, de ocorrência mundial, sem sazonalidade, sem predileção de sexo ou raça, apresenta maior incidência em animais jovens, podendo acometer todas as idades. No Brasil, pesquisas sobre o uso de técnicas que comparam os diferentes testes diagnósticos direto para o vírus da cinomose (CDV) associado a análise molecular e filogenética do mesmo ainda continuam escassas. Além disso, são poucos os estudos sobre epidemiologia molecular que relatam diferenças marcantes na análise filogenética do gene hemaglutinina (H) do CDV entre os isolados de campo e as cepas de referência do CDV, especialmente àquelas utilizadas na produção de vacinas. Dessa maneira, o presente trabalho tem como principal objetivo avaliar os principais métodos diagnósticos laboratoriais para identificação do CDV em cães com suspeita de cinomose associando à análise filogenética do gene H dos isolados de campo. O Ensaio imunocromatografico direto (IC), a RT-PCR e a Nested-PCR foram avaliados para detecção do CDV em diferentes amostras clínicas (urina, suabes retais e conjuntivais) de 62 animais suspeitos de cinomose, provenientes do atendimento ambulatorial do hospital veterinário da Unesp (Jaboticabal-SP) e de clínicas particulares da região. Após detecção viral as amostras foram submetidas a sequenciamento seguida de análise filogenética do gene H do CDV. Um total de 42 animais foram positivos em pelo menos uma das técnicas utilizadas neste experimento. As técnicas moleculares (RT-PCR e Nested-PCR) demonstraram maior sensibilidade que o ensaio comercial de IC. Os resultados obtidos da análise filogenética do gene H sugeriram que o grupo de isolados do CDV no Brasil são distintos das cepas vacinais e são mais relacionados genotipicamente aos isolados Europeus 1/Sul-Americanos 1. Em conclusão, a técnica Nested-PCR aplicada na detecção do CDV em suabes retais revelou-se o método mais eficaz e sensível para identificação desse vírus, que associado a análise filogenética pode ser classificado em um clado diferente das cepas vacinais sugerindo um potencial de infecção para os cães domésticos inclusive os vacinados.

Canine distemper is one of the most important infectious diseases that affects dogs. It is a Canine Distemper Virus (CDV), a Paramyxovirus, of the genus Morbillivirus, a global deforest, without seasonality, without predilection of sex or race, that is constituted by the majority of the animals, being able to affect all ages. In Brazil, research on the use of techniques that compare the different direct diagnostic tests for the distemper virus (CDV) associated with a molecular and phylogenetic analysis of the same are still scarce. In addition, there are some studies on molecular epidemiology that report differences in the phylogenetic analysis of the hemagglutinin (H) gene from CDV between the fields of action and as a reference for CDV, especially the practices used in the production of vaccines. Thus, the main objective of this study is to identify laboratory diagnoses for the identification of CDV in dogs with suspected pair association to the phylogenetic analysis of the H gene of the field isolates. The direct immunochromatographic (CI) assay, RT-PCR and nested-PCR were evaluated for the detection of CDV in different animal species (urine, swabs and conjunctival) of 62 suspected cases of distemper from the outpatient clinic of the Unesp (Jaboticabal-SP) and the private medical records of the region. After viral detection as sequential sequencing followed by phylogenetic analysis of the CDV H gene. A total of 42 animals were positive at least one of the experiment techniques in this experiment. As molecular techniques (RT-PCR and Nested-PCR) demonstrated greater sensitivity than the commercial IC test. The results obtained from the phylogenetic analysis of the H gene suggest that the group of CDV cells in Brazil are distinct from the vaccine strains and are more commonly genotyped to the following European 1 / South American 1. In conclusion, a Nested-PCR technique. CDV can be used as a more effective and sensitive method to virus infection, which is associated with a phylogenetic analysis that can be classified into one of the different clones of the vaccines, suggesting a potential for infection for animals that include the vaccinated.

Avaliação de marcadores internos e externos para estimar o consumo e a digestibilidade da matéria seca em bovinos

A determinação do consumo de alimentos é uma valiosa ferramenta na hora da tomada de decisões de manejo do rebanho. O uso de marcadores, sejam internos ou externos, é atualmente a técnica mais utilizada para estimar o consumo em animais de produção. Três experimentos foram conduzidos. Em vacas de leite alimentadas com silagem de milho com 45% de concentrado, a recuperação fecal (RF) média de TiO2 foi maior do que a RF de Cr2O3 e ambas foram maiores do que a unidade. A RF não foi afetada pelo método de coleta de fezes, mas, as estimativas de digestibilidade da matéria seca e produção fecal (PF) foram. A dupla de marcadores Cr2O3+i fibra detergente ácido indigestível (iADF) produziu estimativas de consumo de matéria seca (CMS) acuradas. Em novilhos alimentados com diferentes fontes de forragem, a RF do TiO2 foi próxima a 1 e este marcador produziu estimativas de PF adequadas. A RF foi afetada pela fonte de forragem que compunha a dieta e nenhum dos marcadores produziu estimativas de CMS acuradas. Em tourinhos Nelore alimentados com dietas compostas de silagem de milho ou feno de Tifton-85 e diferentes relações de volumoso:concentrado, a RF média dos marcadores internos lignina brometo de acetila (LBA), fibra detergente ácido indigestível (iFDN), (iFDA) e cutina foi diferente de 100%. Os marcadores Cr2O3 e TiO2 tiveram RF menor e maior que 100%, respectivamente. A combinação de marcadores internos e externos para estimar o CMS produziu resultados acurados e satisfatórios, principalmente as duplas Cr2O3 e iFDN ou iFDA. Os marcadores internos LBA e cutina merecem mais estudos. O método de coleta GRAB produziu estimativas de DMS, PF e CMS acuradas, as quais foram iguais ou melhores que as produzidas pelo método de coleta BULK. Independentemente do método de coleta de fezes e da composição da dieta, é necessário estabelecer a RF real dos marcadores que serão usados em experimento para obter estimativas corretas. Nenhum dos marcadores teve RF completa e consistente nos 3 experimentos. A cutina e LBA tiveram RF menor do que a unidade em todas as dietas e falharam em produzir estimativas acuradas de DMS. Quando qualquer dos dois foi pareado com Cr2O3 ou TiO2 as estimativas de CMS também não foram acuradas. Das fibras indigestíveis, iFDN e iFDA, a segunda foi mais acurada em estimar o CMS quando pareada com Cr2O3. As estimativas de PF corrigida foram acuradas para Cr2O3 em diferentes dietas sob metodologia de coleta GRAB. O mesmo não foi observado para o TiO2, que produziu estimativas enviesadas inclusive após a correção. O método de dosagem dos marcadores externos é extremadamente importante já que afeta e determina em grande medida os resultados. Qualquer que seja o método, este deve permitir ao animal comportar-se e alimentar-se normalmente sem comprometer seu desempenho. Os métodos de coleta GRAB podem substituir a coleta total de fezes (CTF) (após determinação da RF) o que poderá abrir novas possibilidades para estudos com animais em pastagem ou alojados em baias coletivas.

Feed intake assessment is a valuable tool for herd management decisions. The use of markers, either internal or external, is currently the most used technique for estimating feed intake in production animals. Three experiments were conducted with beef and dairy cattle. In dairy cows fed a corn silage based diet with 45% concentrate, the average fecal recovery (FR) of TiO2 was higher than FR of Cr2O3 and both FR were more than unity. The FR was unaffected by the fecal sampling procedure but, estimates for dry-matter digestibility (DMD) and fecal output (FO) were affected. The Cr2O3+ indigestible acid detergent fiber (iADF) marker pair produced accurate dry-matter intake (DMI) estimates. In steers fed diets with different forage sources FR of TiO2 was close to 1 and this marker produced adequate FO estimates. The FR was affected by the forage source that composed the diet and none of the marker pairs produced accurate DMI estimates. In young Nelore bulls fed corn silage or Tifton-85 hay based diets with varying F:C ratios, the average FR of internal markers acetyl bromide lignin (ABL), indigestible neutral detergent fiber (iNDF), iADF and cutin was different from 100%. Markers Cr2O3 and TiO2 had FR lower and higher than 100%, respectively. The combination of internal and external markers to estimate DMI produced satisfactory and accurate results, particularly Cr2O3 based pairs with iNDF and iADF. Internal markers ABL and cutin deserve more attention. The GRAB sampling procedures yielded accurate DMD, FO and DMI estimates, which were as good as or better than BULK sampling procedures. Regardless of the fecal sampling method and the composition of the diet, it is necessary to establish the FR of the markers to be used in each experiment, in order to obtain correct estimates. None of the markers had complete FR consistent throughout the 3 experiments. Cutin and ABL had lower than unity FR on all diets and failed to produce accurate DMD estimates. When either one was paired with Cr2O3 or TiO2, DMI estimates were also not accurate. Of the indigestible fibers, iNDF and iADF, the later was more accurate in estimating DMI when paired with Cr2O3. Consistently throughout the experiments, FR was lower than and higher than unity for internal and external markers, respectively. Corrected FO estimates were accurate for Cr2O3 on various diets under GRAB sampling. The same was not true for TiO2, which even after FR correction was applied failed to produce accurate FO estimates consistently. The method of dosing the external markers is extremely important and greatly affects and determines results. Whichever the method, it must allow the animals to display normal feeding behavior and not affect performance. The GRAB sampling procedures can replace TFC (once FR is established) which may open new possibilities for pasture based or collectively housed animals.

AVALIAÇÃO DE METODOLOGIAS QUE DETERMINAM ESTRESSE EM POEDEIRAS COMERCIAIS

CESAR, Paula Horácio. Avaliação de metodologias que determinam estresse em poedeiras comerciais. 2017. 69f. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal - Área de Concentração: Produção Animal) - Universidade do Estado de Santa Catarina. Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal, Lages, 2017. Com o objetivo de avaliar metodologias que indicam estresse em poedeiras comerciais, um experimento foi conduzido no Setor de Avicultura do CAV/UDESC, utilizando 48 poedeiras da linhagem HyLine Brown com 79 semanas de idade. As aves foram alojadas em gaiolas apropriadas e submetidas a um período de muda induzida durante 10 dias de jejum alimentar, avaliando cinco metodologias para indicativo de estresse (concentração de corticosterona plasmática - CORT, relação heterófilo/linfócito - H/L, catalase - CAT, glutationa reduzida - GSH e níveis de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico - TBARS), em seis dias de coleta de amostras de sangue (zero, dois, quatro, seis, oito e 10 dias do período de jejum alimentar). Adotou-se um delineamento inteiramente casualizado com oito repetições por dia de coleta, sendo cada ave considerada como uma unidade experimental. As coletas para as metodologias CORT e relação H/L iniciaram às 16 h e as demais às 8 h. Para determinar a concentração de CORT e a relação H/L foi coletado sangue da veia ulnar e as demais a veia jugular. Em cada coleta, oito aves foram selecionadas aleatoriamente, e após o procedimento, retornavam às gaiolas. O teste de Shapiro-Wilk foi aplicado para verificar a normalidade dos dados e as variáveis apresentaram distribuição normal. Realizou-se estudo de regressão polinomial para determinar o momento de máximo estresse para cada metodologia. Como todos os métodos fornecem resultados quantitativos foi possível utilizar a correlação de Pearson. Todas as análises estatísticas foram realizadas com o auxílio do pacote estatístico SAS (2009). As metodologias que avaliaram a concentração de CORT, GSH e TBARS apresentaram comportamento quadrático na regressão polinomial com momentos de máximo estresse aos 4,3; 4,3 e 5,5 dias de jejum alimentar, respectivamente. As aves no dia zero apresentaram uma média de CORT plasmática de 1,76 ng/ml, com posterior aumento progressivo do hormônio até atingir o pico de estresse (4,3 dias). A relação H/L apresentou comportamento linear crescente no estudo de regressão polinomial, com momento de máximo estresse aos 10 dias de muda induzida. A atividade da CAT apresentou comportamento linear decrescente na análise de regressão polinomial. Para os coeficientes de correlação de Pearson, considerando todos os momentos de coleta, não houve uma alta correlação entre as metodologias, não sendo possível a substituição de um método pelo outro. Conclui-se que as metodologias da concentração de CORT plasmática, relação H/L, concentração de GSH e atividade da enzima CAT são indicadas para mensurar estresse em poedeiras comerciais submetidas à muda induzida por jejum alimentar, porém, cada uma apresenta um momento diferente de máximo estresse, impossibilitando a utilização de apenas um método em substituição aos demais.

CESAR, Paula Horácio. Evaluation of methodologies that measure stress in commercial laying hens. 2017. 69f. Dissertation (MSc in Animal Science Area: Animal Production) Santa Catarina State University. Postgraduate Program in Animal Science, Lages, 2017. With the aim to investigate methodologies that indicate stress in commercial laying hens, the study was conducted at Poultry Sector of the CAV/UDESC, using 48 HyLine Brown hens, with were 79 wk of age. The hens were housed in appropriate cages and the molt was induced by feed withdrawal for 10 days, five methodologies were investigated (corticosterone plasmatic level - CORT, heterophil:lymphocyte ratio - H/L, catalase - CAT, reduced glutathione - GSH and level of thiobarbituric acid reactive substances - TBARS), in six days of blood samples collect (zero, two, four, six, eight and 10 days of feed withdrawal). The experimental design was completely randomized with eight replicate per day of collection, each hen was considered as an experimental unit. The collections for methods CORT and H/L ratio were obtained at 1600 h and the rest at 0800 h. To determine CORT level and H/L ratio the blood samples were collected from wing vein and jugular vein for other methodologies. In each collection, eight hens were randomly assigned and after procedure they returned to the cages. The Shapiro-Wilk test was applied to verify the normality of the data and the variables presented normal distribution. It was used polynomial regression analysis to determine the moment of maximum stress for each methodology. As all methods provide quantitative results it was possible to use Pearson correlation. Data analysis was done with the SAS (2009). CORT levels, GSH and TBARS there were a quadratic effect in polynomial regression analysis with moment of maximum stress to 4,3; 4,3 and 5,5 days of feed withdrawal, respectively. The hens at day zero had a mean plasma CORT of 1.76 ng/ml with subsequent progressive increase of the hormone until reaches the peak of stress (4.3 days). The H/L ratio had growing linear effect in polynomial regression analysis, with moment of maximum stress to 10 days of forced molted. The enzyme activity of CAT had decreasing linear effect in polynomial regression analysis. For the Pearson correlation coefficients, considering all collection moments, there was not a high correlation between the methods, therefore it is not possible to substitute one method with another. It was concluded that the methodologies of CORT plasmatic levels, H/L ratio, concentration of GSH and activity of the CAT enzyme are indicated to measure stress in commercial laying hens submitted to forced molted induced by feed withdrawal, however, each one has a different moment of maximum stress, making it impossible to use only one method to replace the others.

INFLUÊNCIA DA ADIPONECTINA SOBRE A MATURAÇÃO DE OÓCITOS IN VITRO NO MODELO CAPRINO

No Brasil a caprinocultura é uma atividade em potencial crescimento, isso pode ser evidenciado com maior intensidade na região nordeste, que detém a grande maioria do rebanho caprino brasileiro. Com isso, a demanda por investimentos nessa atividade vem sendo expressiva nos últimos anos, exigindo assim, maior tecnificação para melhoria e expansão desse setor. Nesse sentido, as biotecnologias voltadas para reprodução demonstram ser instrumentos eficazes, e nelas destacamos a Produção in vitro de embriões (PIVE) que promove a multiplicação de genéticas superiores em um espaço de tempo mais curto que os métodos tradicionais. Entretanto, ainda há muito para se avançar com essa técnica na espécie caprina, uma vez que, atualmente seus resultados nessa espécie ainda são variáveis e limitados o que implica em limitação a nível comercial. A adiponectina é um hormônio proteico produzido predominantemente pelo tecido adiposo, pode ser uma alternativa de incremento nessa área. Algumas de suas funções estão relacionadas à reprodução da fêmea, como influência positiva sobre a esteroidogênese e também sobre a maturação de oócitos in vitro em algumas espécies, incluindo a espécie caprina. Este trabalho teve como objetivo investigar se: 1) a adiponectina influencia a maturação meiótica de oócitos caprinos; 2) a via MAPK MEK1/2 medeia os efeitos da adiponectina durante a maturação in vitro e 3) a adiponectina afeta de forma diferente a abundância de RNAm de genes relevantes para a transdução de sinal da adiponectina em oócitos e células cumulus. A adição de adiponectina (5 µg/mL) durante a maturação de oócitos caprinos afetou a porcentagem de oócitos que completaram a maturação nuclear com sucesso (P < 0,05). A maturação nuclear de oócitos estimulada pela adiponectina foi significativamente prejudicada quando o inibidor específico de MEK ½ (U0126) foi adicionado ao meio de maturação. Não houve evidência de qualquer diferença induzida pela adiponectina na relativa abundância dos transcritos dos genes AdipoR1, AdipoR2, AMPK1, PPAR e PPAR. A expressão de AMPK2 foi significativamente inibida nas células do cumulus oriundas de complexos cumulus-oócitos maturados com 5 µg/mL de adiponectina comparados com aqueles maturados com 0 µg/mL (P < 0,05). Em conclusão, a adiponectina melhora a maturação meiótica de oócitos caprinos através da via MAPK MEK 1/2. Adicionalmente, efeitos sobre os níveis do transcrito AMPK2 foram detectados nas células do cumulus mas não nos oócitos.

In Brazil, goat farming is an activity in potential growth, this can be evidenced with greater intensity in the northeast region, which holds the great majority of the Brazilian goat herd. As a result, the demand for investments in this activity has been significant in recent years, thus requiring more technification to improve and expand this sector. In this sense, biotechnologies turned to reproduction are effective instruments, in which we highlight the In-vitro production of embryos (PIVE) that promotes the multiplication of superior genetics in a shorter period of time than traditional methods. However, there is still a long way to go with this technique in the caprine species, since its results in this species are still variable and limited, which implies limitation on the commercial level. Adiponectin is a protein hormone produced predominantly by adipose tissue, which may be an alternative to increase in this area. Some of its functions are related to female reproduction, as a positive influence on steroidogenesis and also on in vitro maturation of oocytes in some species, including the goat species. This study aimed to investigate whether: 1) adiponectin influences the meiotic maturation of goat oocytes; 2) the MAPK MEK1 / 2 pathway mediates the effects of adiponectin during in vitro maturation, and 3) adiponectin differentially affects the mRNA abundance of genes relevant for adiponectin signal transduction in oocytes and cumulus cells. The addition of adiponectin (5 g / mL) during the maturation of goat oocytes affected the percentage of oocytes that successfully completed nuclear maturation (P <0.05). Adiponectin-stimulated nuclear maturation of oocytes was significantly impaired when the specific MEK ½ (U0126) inhibitor was added to the maturation medium. There was no evidence of any difference induced by adiponectin in the relative abundance of the transcripts of the genes AdipoR1, AdipoR2, AMPK1, PPAR and PPAR. AMPK2 expression was significantly inhibited in cumulus cells from cumulus-oocyte complexes matured with 5 g / mL adiponectin compared to those matured at 0 g / mL (P <0.05). In conclusion, adiponectin improves meiotic maturation of goat oocytes via MAPK MEK 1/2. In addition, effects on AMPK2 transcript levels were detected in cumulus cells but not in oocytes.

Transporte de oócitos bovinos em meio de maturação por diferentes períodos de tempo sem controle da atmosfera gasosa / Transport of bovine oocytes in maturation medium for different periods of time whithout controlled gaseous atmosphere

Avaliou-se a viabilidade do transporte de oócitos em meio quimicamente definido, e analisou-se a necessidade da adição ou não de hormônios neste meio. Os oócitos do grupo-controle (0h) foram maturados por 24h em estufa de CO2, e os dos grupos experimentais foram transportados em incubadora portátil. No experimento I, as taxas de clivagem foram similares (P>0,05) para os grupos 0h (59,7 por cento), 3h (53,5 por cento) e 9h (48,8 por cento), e houve redução nos grupos 6h (46,1 por cento) e 12h (43,8 por cento). Essas taxas foram semelhantes entre os grupos 3h, 6h, 9h e 12h. A produção de blastocistos não foi diferente (P>0,05) para os grupos 0h (38,0 por cento), 3h (32,3 por cento), 6h (27,3 por cento) e 9h (24,8 por cento), e houve redução no grupo 12h (18,9 por cento). Essas taxas foram semelhantes entre os grupos 6h, 9h e 12h. No experimento II, não houve diferença (P>0,05) entre as taxas de clivagem para os grupos 0h (71,4 por cento), 3h (70,3 por cento), 6h (56,0 por cento) com hormônios, e os grupos 3h (64,8 por cento) e 6h (54,1 por cento) sem hormônios. A produção de blastocistos foi similar (P>0,05) para os grupos 0h (46,1 por cento), 3h com hormônios (45,8 por cento) e 3h sem hormônios (41,1 por cento), porém houve redução nos grupos 6h com hormônios (35,5 por cento) e 6h sem hormônios (33,5 por cento). Essas taxas foram semelhantes entre os grupos 3h sem hormônios e 6h com e sem hormônios. Estes resultados indicam que é possível otransporte de oócitos bovinos por um período de até nove horas, e que a adição de hormônios neste meio não influencia os índices de clivagem e de blastocistos.(AU)

The viability of the transport of the bovine oocytes was evaluated in chemically defined medium and the need for the addition or not of hormones in this medium was analyzed. The oocytes in the control group (0h) were matured for 24h in CO2 incubator, and in experimental groups they were transported in portable incubator. In experiment I, the cleavage rates were similar (P>0.05) to the groups 0h (59.7 percent), 3h (53.5 percent), and 9h (48.8 percent), but they decreased in groups 6h (46.1 percent) and 12h (43.8 percent), however, these rates were similar among the groups 3h, 6h, 9h, and 12h. The production of blastocysts was not different (P>0.05) for groups 0h (38.0 percent), 3h (32.3 percent), 6h (27.3 percent), and 9h (24.8 percent), but there was a reduction in the 12h group (18.9 percent). These rates were similar among the groups 6h, 9h and 12h. In experiment II, no significant difference (P>0.05) was observed among the rates of cleavage for the groups 0h (71.4 percent), 3h with (70.3 percent) and without hormones (64.8 percent), and 6h with (56.0 percent) and without hormones (54.1 percent). The production of blastocysts was similar (P>0.05) for groups 0h (46.1 percent) and 3h with (45.8 percent) and without hormones (41.1 percent), but decreased in groups 6h with (35.5 percent) and without hormones (33.5 percent). These rates were similar among the groups 3h without, 6h with and without hormones. These results indicate the possibility of the transport of bovine oocytes up to 9h, and the addition of hormones in this medium does not influence the rates of cleavage and blastocysts.(AU)