Pesquisa de agentes transmitidos por carrapatos em fragmentos de mata urbana com presença de capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris) no município de Dourados / Research on agents transmitted by ticks in urban forest fragments with the presence of capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) in the municipality of Dourados / Investigación sobre agentes transmitidos por garrapatas en fragmentos de bosque urbano con presencia de capibaras (Hydrochoerus hydrochaeris) en el municipio de Dourados

A febre maculosa é uma doença que vem se destacando dentro das patologias que acometem seres humanos, sendo esta causada pela bactéria do gênero Rickettsia cujo principal vetor são os carrapatos do gênero Amblyomma spp. As capivaras têm sido associadas ao ciclo dessa riquetsiose por serem hospedeiras naturais destes parasitas e desta forma constituírem os vetores da doença. As capivaras são amplamente encontradas no território urbano da cidade de Dourados ­ MS. Diante disso, o presente estudo foi realizado com o objetivo de detectar o DNA de bactérias do gênero Rickettsia rickettsii em carrapatos presentes no ambiente no Parque Arnulpho Fioravanti. Os carrapatos foram coletados por meio de armadilhas de CO2 e pano de arraste no parque urbano Arnulpho Fioravanti, em Dourados - MS, local de elevado fluxo de pessoas e morada de capivaras. Nesse estudo realizou-se a identificação da espécie e estágio de vida bem como a detecção do DNA de bactérias do gênero Rickettsia por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR). Nos carrapatos coletados, independentemente da espécie, Amblyomma sculptum (58) e Amblyomma dubitatum (25), não foi detectado o DNA das bactérias do gênero Rickettsia. Esses resultados indicam que os carrapatos coletados não são vetores para a febre maculosa brasileira e que as capivaras ali presentes provavelmente estariam sadias para conviver em ambiente urbano.(AU)

Spotted fever is a disease that has been standing out among the pathologies that affect human beings, which is caused by bacteria of the genus Rickettsia whose main vector are ticks of the genus Amblyomma spp. Capybaras have been associated with the cycle of this rickettsiosis as they are natural hosts of these parasites and thus constitute the disease vectors. Capybaras are widely found in the urban territory of the city of Dourados ­ MS. Therefore, the present study was carried out with the aim of detecting the DNA of bacteria of the genus Rickettsia rickettsii in ticks present in the environment of Parque Arnulpho Fioravanti. The ticks were collected using CO2 traps and a drag cloth in the urban park Arnulpho Fioravanti, in Dourados - MS, a place with a high flow of people and home to capybaras. In this study, the identification of the species and life stage was carried out, as well as the detection of the DNA of bacteria of the genus Rickettsia through the polymerase chain reaction (PCR). In the ticks collected, regardless of the species, Amblyomma sculptum (58) and Amblyomma dubitatum (25), the DNA of bacteria of the genus Rickettsia was not detected. These results indicate that the ticks collected are not vectors for Brazilian spotted fever and that the capybaras present there would probably be healthy to live in an urban environment.(AU)

La fiebre maculosa es una enfermedad que se viene destacando entre las patologías que afectan al ser humano, la cual es causada por bacterias del género Rickettsia cuyo principal vector son las garrapatas del género Amblyomma spp. Los capibaras se han asociado con el ciclo de esta rickettsiosis, ya que son huéspedes naturales de estos parásitos y, por lo tanto, constituyen los vectores de la enfermedad. Los capibaras se encuentran ampliamente en el territorio urbano de la ciudad de Dourados - MS. Por tanto, el presente estudio se realizó con el objetivo de detectar el ADN de bacterias del género Rickettsia rickettsii en garrapatas presentes en el entorno del Parque Arnulpho Fioravanti. Las garrapatas se recolectaron mediante trampas de CO2 y un paño de arrastre en el parque urbano Arnulpho Fioravanti, en Dourados - MS, un lugar con un alto flujo de personas y hogar de capibaras. En este estudio se llevó a cabo la identificación de la especie y etapa de vida, así como la detección del ADN de bacterias del género Rickettsia mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). En las garrapatas recolectadas, independientemente de la especie, Amblyomma escultum (58) y Amblyomma dubitatum (25), no se detectó ADN de bacterias del género Rickettsia. Estos resultados indican que las garrapatas recolectadas no son vectores de la fiebre maculosa brasileña y que los capibaras presentes allí probablemente serían saludables para vivir en un entorno urbano.(AU)

Prevalence of Bartonella species in shelter cats and their ectoparasites in southeastern Brazil / Prevalência de espécies de Bartonella em gatos de abrigos e seus ectoparasitas no Sudeste do Brasil

Abstract Feline Bartonella can be transmitted to humans through cat scratches or bites, and between cats, by the flea Ctenocephalides felis. The study was carried out in order to investigate the occurrence of Bartonella DNA in cats living in shelters and their ectoparasites and the relationship between the infection status of cats and ectoparasites they host. Bartonella DNA was detected in 47.8% of the cat blood samples, 18.3% of C. felis fleas, 13.3% of flea egg pools and 12.5% of lice pools. B. henselae and B. clarridgeiae DNA were detected in cat fleas, while B. henselae, B. clarridgeiae and B. koehlerae were found in blood samples from bacteremic cats. Cats infested by positive ectoparasites showed approximately twice the odds of being infected. Our results indicate that shelter cats have high prevalence of Bartonella species that are known to be human pathogens. This highlights the importance of controlling infestations by ectoparasites to avoid cat and human infection.

Resumo Algumas espécies de Bartonella têm os felinos como principais hospedeiros reservatórios. Tais patógenos são transmitidos ao homem por intermédio da arranhadura ou mordedura de gatos e entre os gatos, por meio da pulga Ctenocephalides felis. O objetivo deste estudo foi investigar a ocorrência de DNA de Bartonella spp. em gatos de abrigos e seus ectoparasitas e a relação entre o estado de infecção dos gatos e dos ectoparasitas albergados por estes. Material genético bacteriano foi detectado em 47,8% das amostras de sangue de gatos, 18,3% das pulgas C. felis, 13,3% dos "pools" de ovos de pulgas e 12,5% dos "pools" de piolhos. DNA de B. henselae e B. clarridgeiae foi detectado em pulgas, e B. henselae, B. clarridgeiae e B. koehlerae, em amostras de sangue de gatos. Gatos infestados por ectoparasitas que carreavam DNA de Bartonella spp. demonstraram aproximadamente o dobro de chance de estarem infectados. Esses resultados indicam que os gatos de abrigos têm alta prevalência de infecção por espécies de Bartonella, capazes de causar doenças no homem. E também destacam a importância do controle e prevenção da infestação por ectoparasitas, no intuito de prevenir a infecção em gatos e humanos.

Amblyomma spp. e a relação com a febre maculosa brasileira / Amblyomma spp. and the relationship with Brazilian spotted fever / Amblyomma spp. y la relación con la fiebre maculosa brasileña

Carrapatos são artrópodes de grande importância para a saúde, principalmente por transmitirem doenças aos seus hospedeiros. Espécies do gênero Amblyomma possuem uma ampla variedade de hospedeiros, incluindo o parasitismo em humanos, podendo ser considerados potenciais transmissores de rickettsias do grupo das bactérias causadoras da Febre Maculosa Brasileira (FBM). O objetivo desse trabalho foi realizar uma revisão de literatura sobre as principais espécies deAmblyomma transmissoras da FMB. Foram realizadas pesquisas nas bases de dados de plataformas como SciELO, LILACS e PubMed, e os descritores utilizados foram: “Amblyomma” e “Febre Maculosa Brasileira”, nos idiomas português e inglês. Foram encontrados 55 trabalhos científicos e 05 teses sobre a temática e os resultados confirmaram que os carrapatos das espécies Amblyomma sculptum, A. aureolatum e A. ovale são os principais vetores da FMB, sendo a capivara, os cavalos e os cães os mais importantes reservatórios da cadeia epidemiológica da doença. As regiões Sudeste e Sul lideram os números de casos e óbitos em humanos. É importante conhecer o ciclo de vida, o ambiente e as condições ambientais favoráveis para a manutenção dessas espécies de carrapatos, a fim de diminuir a ocorrência de zoonoses transmitidas por eles, evitando também a expansão da FMB.

Ticks are arthropods of great importance to health, mainly because they transmit diseases to their hosts. Species of the genus Amblyomma have a wide variety of hosts, including parasitism in humans, being considered potential transmitters of rickettsiae of the bacteria group that cause Brazilian Spotted Fever (BSF). The objective of this work was to carry out a literature review on the main species of Amblyomma that transmit BSF. Searches were carried in the databases of platforms such as SciELO, LILACS and PubMed, and the descriptors were “Amblyomma” and “Brazilian spotted fever”, in the language Portuguese and English. Were found 55 scientific workand 05 theses on the theme and the results confirmed that ticks of the species Amblyomma sculptum, A. aureolatum and A. ovaleare the main vectors of BSF, capybara, horses and dogs being the most important reservoirs of the disease's epidemiological chain. The Southeastern and Southern regions lead the numbers of cases and deaths in humans. It is important to know the life cycle, the environment and the favorable environmental conditions for the maintenance of these tick species, in order to reduce the occurrence of zoonoses transmitted by them, also avoiding the expansion of BSF.

Las garrapatas son artrópodos de gran importancia para la salud, principalmente porque transmiten enfermedades a sus huéspedes.Las especies del género Amblyomma tienen una amplia variedad de huéspedes, incluido el parasitismo en humanos, y pueden considerarse transmisores potenciales de rickettsias en el grupo de bacterias que causan la fiebre maculosa brasileña (FBM).El objetivo de este trabajo fue realizar una revisión de la literatura sobre las principales especies de Amblyomma que transmiten FMB. Se realizaron búsquedas en las bases de datos de plataformas como SciELO, LILACS y PubMed, y los descriptores utilizados fueron: "Amblyomma" y "Febre Maculosa Brasileña", en portugués e inglés. Se encontraron 55 trabajo científicos y 05 tesis sobre el tema y los resultados confirmaron que las garrapatas de las especies Amblyomma sculptum, A. aureolatum y A. ovale son los principales vectores de FMB, con capibaras, caballos y perros como los reservorios más importantes la cadena epidemiológica de la enfermedad. Las regiones sureste y sur lideran el número de casos y muertes en humanos. Es importante conocer el ciclo de vida, el medio ambiente y las condiciones ambientales favorables para el mantenimiento de estas especies de garrapatas, a fin de reducir la aparición de zoonosis transmitidas por ellos, evitando también la expansión de FMB.

Amblyomma spp. e a relação com a febre maculosa brasileira / Amblyomma spp. and the relationship with Brazilian spotted fever / Amblyomma spp. y la relación con la fiebre maculosa brasileña

Carrapatos são artrópodes de grande importância para a saúde, principalmente por transmitirem doenças aos seus hospedeiros. Espécies do gênero Amblyomma possuem uma ampla variedade de hospedeiros, incluindo o parasitismo em humanos, podendo ser considerados potenciais transmissores de rickettsias do grupo das bactérias causadoras da Febre Maculosa Brasileira (FBM). O objetivo desse trabalho foi realizar uma revisão de literatura sobre as principais espécies deAmblyomma transmissoras da FMB. Foram realizadas pesquisas nas bases de dados de plataformas como SciELO, LILACS e PubMed, e os descritores utilizados foram: “Amblyomma” e “Febre Maculosa Brasileira”, nos idiomas português e inglês. Foram encontrados 55 trabalhos científicos e 05 teses sobre a temática e os resultados confirmaram que os carrapatos das espécies Amblyomma sculptum, A. aureolatum e A. ovale são os principais vetores da FMB, sendo a capivara, os cavalos e os cães os mais importantes reservatórios da cadeia epidemiológica da doença. As regiões Sudeste e Sul lideram os números de casos e óbitos em humanos. É importante conhecer o ciclo de vida, o ambiente e as condições ambientais favoráveis para a manutenção dessas espécies de carrapatos, a fim de diminuir a ocorrência de zoonoses transmitidas por eles, evitando também a expansão da FMB.(AU)

Ticks are arthropods of great importance to health, mainly because they transmit diseases to their hosts. Species of the genus Amblyomma have a wide variety of hosts, including parasitism in humans, being considered potential transmitters of rickettsiae of the bacteria group that cause Brazilian Spotted Fever (BSF). The objective of this work was to carry out a literature review on the main species of Amblyomma that transmit BSF. Searches were carried in the databases of platforms such as SciELO, LILACS and PubMed, and the descriptors were “Amblyomma” and “Brazilian spotted fever”, in the language Portuguese and English. Were found 55 scientific workand 05 theses on the theme and the results confirmed that ticks of the species Amblyomma sculptum, A. aureolatum and A. ovaleare the main vectors of BSF, capybara, horses and dogs being the most important reservoirs of the disease's epidemiological chain. The Southeastern and Southern regions lead the numbers of cases and deaths in humans. It is important to know the life cycle, the environment and the favorable environmental conditions for the maintenance of these tick species, in order to reduce the occurrence of zoonoses transmitted by them, also avoiding the expansion of BSF.(AU)

Las garrapatas son artrópodos de gran importancia para la salud, principalmente porque transmiten enfermedades a sus huéspedes.Las especies del género Amblyomma tienen una amplia variedad de huéspedes, incluido el parasitismo en humanos, y pueden considerarse transmisores potenciales de rickettsias en el grupo de bacterias que causan la fiebre maculosa brasileña (FBM).El objetivo de este trabajo fue realizar una revisión de la literatura sobre las principales especies de Amblyomma que transmiten FMB. Se realizaron búsquedas en las bases de datos de plataformas como SciELO, LILACS y PubMed, y los descriptores utilizados fueron: "Amblyomma" y "Febre Maculosa Brasileña", en portugués e inglés. Se encontraron 55 trabajo científicos y 05 tesis sobre el tema y los resultados confirmaron que las garrapatas de las especies Amblyomma sculptum, A. aureolatum y A. ovale son los principales vectores de FMB, con capibaras, caballos y perros como los reservorios más importantes la cadena epidemiológica de la enfermedad. Las regiones sureste y sur lideran el número de casos y muertes en humanos. Es importante conocer el ciclo de vida, el medio ambiente y las condiciones ambientales favorables para el mantenimiento de estas especies de garrapatas, a fin de reducir la aparición de zoonosis transmitidas por ellos, evitando también la expansión de FMB.(AU)

Babesia vogeli in dogs from Rio Branco, South-west Amazonia, Brazil / Babesia vogeli em cães de Rio Branco, sudoeste da Amazônia, Brasil

This is the first report of Babesia vogeli molecular detection in dogs from the state of Acre, northern Brazil. This study aimed to perform the molecular detection of Babesia vogeli in dogs in the municipality of Rio Branco, Acre. Blood samples were collected from 47 dogs presenting with clinical signs comparable to hemoparasitosis. These were dogs which were attended in veterinary clinics from Rio Branco municipality, Acre. Physical examinations, packed cell volume (PCV) determination, platelet number estimation, hemoparasite investigation in the blood (collected from the pinna and peripheral blood), and polymerase chain reaction (PCR) for piroplasm based on the 18S rRNA gene, were performed. One dog (1/47, 2.1%; CI 95%: 0.1-11.3%) tested positive to Babesia vogeli in the polymerase chain reaction (PCR) assay for piroplasms and the resulting sequence showed 100% identity with Babesia vogeli isolates deposited in GenBank®. Co-infection with Ehrlichia spp. was also observed by direct examination (via blood smear). The clinical and hematological alterations observed in the positive animal were anorexia, dehydration, white mucous membranes, anemia and thrombocytopenia.(AU)

Este é o primeiro relato de detecção molecular de Babesia vogeli em cães do estado do Acre, norte do Brasil. Este estudo teve como objetivo realizar a detecção molecular de B. vogeli em amostras de sangue de 47 cães com sinais clínicos compatíveis com hemoparasitoses no município de Rio Branco, Acre. Tratavam-se de animais atendidos em clínicas veterinárias do município, sendo realizados exames físicos, determinação do volume globular (VG), estimativa do número de plaquetas, investigação de hemoparasitos no sangue (coletado da ponta da orelha e sangue periférico). Além disso, amostras de sangue foram submetidas a extração de DNA e reação em cadeia da polimerase (PCR) para amplificação de fragmentos do gene 18S rRNA de piroplasmas. Um cão (1/47, 2,1%; IC 95%: 0,1-11,3%) apresentou resultado positivo para B. vogeli na PCR para piroplasmas e a sequência resultante mostrou 100% de identidade com os isolados de B. vogeli depositados no GenBank®. Co-infecção com Ehrlichia spp. também foi observado por exame direto (esfregaço de sangue). As alterações clínicas e hematológicas observadas no animal positivo foram anorexia, desidratação, mucosas pálidas, anemia e trombocitopenia.(AU)

Implications of domestic dogs in the epidemiology of Rickettsia parkeri strain Atlantic rainforest and Rangelia vitalii in Southeastern Brazil / Implicações dos cães domésticos na epidemiologia da Rickettsia parkeri cepa Mata Atlântica e da Rangelia vitalii no Sudeste do Brasil

This study aimed to evaluate the occurrence of diseases transmitted by Amblyomma ovale in 61 dogs monitored for three years through collections of ticks and blood, interviews, telemetry and camera traps in three areas of Serra do Mar State Park, Brazil. Blood samples were used to investigate infection by Rangelia vitalii by real-time TaqMan PCR and Rickettsia parkeri by IIFA. The collected ticks were submitted to conventional PCR to investigate the presence of R. parkeri . These data were compared with the monitoring results and interviews with the owners. Dogs considered as companion presented a risk of infection by R. parkeri strain Mata Atlantica 5.4 times higher than those not considered as companion (p = 0.009). Dogs that had at least one A. ovale collected during the campaigns had a 10 times higher risk of infection by R. parkeri strain Mata Atlantica than those who did not (p = 0.009). One dog positive for R. vitalii by real-time TaqMan PCR was parasitized by A. ovale frequently during monitoring. Sequenced ompaA - positive DNA samples had 100% identity of R. parkeri strain Mata Atlantica clone As106. From the findings, it is urgent to control domestic dogs around rainforests to reduce zoonoses transmission.(AU)

A ocorrência de doenças transmitidas por Amblyomma ovale em 61 cães monitorados por três anos através de coletas de carrapatos, sangue, entrevistas, telemetria e armadilhas fotográficas foi avaliada em três áreas do Parque Estadual da Serra do Mar - SP. Amostras de sangue foram utilizadas para investigação de Rangelia vitalii através de PCR TaqMan em tempo real e Rickettsia parkeri através da RIFI. Carrapatos coletados foram submetidos à PCR convencional para investigação de R. parkeri . Estes dados foram comparados considerando os resultados do monitoramento e entrevistas. Cães de companhia apresentaram risco de infecção pela R. parkeri cepa Mata Atlântica 5,4 vezes maior que os não considerados como de companhia (p = 0,009). Cães que tiveram pelo menos um A. ovale coletado apresentaram risco de infecção por R. parkeri cepa Mata Atlântica 10 vezes maior do que aqueles que não tiveram (p = 0,009). Um cão positivo para R. vitalii através de PCR TaqMan em tempo real foi parasitado por A. ovale durante o monitoramento. Amostras positivas para o gene ompaA possuíam 100% de identidade do clone As106 de R. parkeri cepa de Mata Atlântica. Assim, é urgente o controle de cães na Mata Atlântica para redução dos riscos de zoonoses.(AU)

Molecular survey of Babesia vogeli and Hepatozoon species in dogs from urban area of Midwestern Brazil / Levantamento molecular de Babesia vogeli e Hepatozoon spp. em cães da área urbana do Centro-Oeste do Brasil

In Brazil, the most important tickborne pathogens affecting dogs include Babesia vogeli, Ehrlichia canis, Anaplasma platys, Hepatozoon canis, and Mycoplasma haemocanis. Babesia spp. and Hepatozoon spp., transmitted by ixodid ticks, have been reported to naturally infect dogs and are widespread. The authors aimed to investigate the incidence of B. vogeli and Hepatozoon spp. infection using molecular methods to identify factors associated with the infection in dogs from urban areas of Cuiabá municipality, Midwestern Brazil. Polymerase chain reaction (PCR) assay revealed a prevalence of 9.36% (Confidence Interval-CI 95%; 2.72%; 6.79%) and 9.61% (CI 95%; 7.0%; 13.0%) among dogs for B. vogeli and Hepatozoon, respectively. DNA sequences obtained from 10 Hepatozoon PCR positive samples were sequenced and were identical to one another and, moreover, were 100% (541/541 base of pairs-bp) homologous to the corresponding 18S rDNA sequences of H. canis. Twenty-five dogs (6.02%) generated amplicons using PCR protocols for both organisms, indicating co-infection by these two protozoans. To the best of our knowledge, our study was the first molecular survey to consider the entire population of dogs from the study area. Moreover, young dogs (0-12 months of age), as well as animals living in walled houses―without access to the street―were more susceptible to infection with B. vogeli and H. canis, respectively.(AU)

No Brasil, os mais importantes patógenos transmitidos por carrapatos que acometem cães incluem Babesia vogeli, Ehrlichia canis, Anaplasma platys, Hepatozoon canis e Mycoplasma haemocanis. Babesia spp. e Hepatozoon spp., transmitidas por carrapatos ixodídeos, têm sido relatadas como capazes de infectar naturalmente cães e são amplamente distribuídos. Os autores objetivaram investigar a incidência de B. vogeli e Hepatozoon spp. por métodos moleculares para identificar fatores associados à infecção em cães da área urbana do município de Cuiabá, centro-oeste do Brasil. A reação em cadeia da polimerase (PCR) revelou uma prevalência de 9,36% (Intervalo de Confiança-IC 95%; 2,72%; 6,79%) e 9,61% (IC 95%; 7,0%; 13,0%) entre os cães para B. vogeli e Hepatozoon, respectivamente. Sequências de DNA obtidas de 10 amostras positivas para PCR de Hepatozoon foram sequenciados e eram idênticos entre si e, além disso, foram 100% (541/541 pares de base-pb) homólogos com a correspondente sequência de 18S rDNA de H. canis. Vinte e cinco (6,02%) cães geraram amplificados usando protocolos de PCR para ambos os organismos, indicando coinfecção por esses dois protozoários. Até onde sabemos, nosso estudo foi o primeiro levantamento molecular a considerar toda a população de cães da área de estudo na amostragem. Além disso, cães jovens (0-12 meses de idade), bem como animais que viviam em casas muradas - sem acesso à rua foram mais suscetíveis à infecção por B. vogeli e H. canis, respectivamente.(AU)

Molecular survey of Babesia vogeli and Hepatozoon species in dogs from urban area of Midwestern Brazil / Levantamento molecular de Babesia vogeli e Hepatozoon spp. em cães da área urbana do Centro-Oeste do Brasil

In Brazil, the most important tickborne pathogens affecting dogs include Babesia vogeli, Ehrlichia canis, Anaplasma platys, Hepatozoon canis, and Mycoplasma haemocanis. Babesia spp. and Hepatozoon spp., transmitted by ixodid ticks, have been reported to naturally infect dogs and are widespread. The authors aimed to investigate the incidence of B. vogeli and Hepatozoon spp. infection using molecular methods to identify factors associated with the infection in dogs from urban areas of Cuiabá municipality, Midwestern Brazil. Polymerase chain reaction (PCR) assay revealed a prevalence of 9.36% (Confidence Interval-CI 95%; 2.72%; 6.79%) and 9.61% (CI 95%; 7.0%; 13.0%) among dogs for B. vogeli and Hepatozoon, respectively. DNA sequences obtained from 10 Hepatozoon PCR positive samples were sequenced and were identical to one another and, moreover, were 100% (541/541 base of pairs-bp) homologous to the corresponding 18S rDNA sequences of H. canis. Twenty-five dogs (6.02%) generated amplicons using PCR protocols for both organisms, indicating co-infection by these two protozoans. To the best of our knowledge, our study was the first molecular survey to consider the entire population of dogs from the study area. Moreover, young dogs (0-12 months of age), as well as animals living in walled houses―without access to the street―were more susceptible to infection with B. vogeli and H. canis, respectively.

No Brasil, os mais importantes patógenos transmitidos por carrapatos que acometem cães incluem Babesia vogeli, Ehrlichia canis, Anaplasma platys, Hepatozoon canis e Mycoplasma haemocanis. Babesia spp. e Hepatozoon spp., transmitidas por carrapatos ixodídeos, têm sido relatadas como capazes de infectar naturalmente cães e são amplamente distribuídos. Os autores objetivaram investigar a incidência de B. vogeli e Hepatozoon spp. por métodos moleculares para identificar fatores associados à infecção em cães da área urbana do município de Cuiabá, centro-oeste do Brasil. A reação em cadeia da polimerase (PCR) revelou uma prevalência de 9,36% (Intervalo de Confiança-IC 95%; 2,72%; 6,79%) e 9,61% (IC 95%; 7,0%; 13,0%) entre os cães para B. vogeli e Hepatozoon, respectivamente. Sequências de DNA obtidas de 10 amostras positivas para PCR de Hepatozoon foram sequenciados e eram idênticos entre si e, além disso, foram 100% (541/541 pares de base-pb) homólogos com a correspondente sequência de 18S rDNA de H. canis. Vinte e cinco (6,02%) cães geraram amplificados usando protocolos de PCR para ambos os organismos, indicando coinfecção por esses dois protozoários. Até onde sabemos, nosso estudo foi o primeiro levantamento molecular a considerar toda a população de cães da área de estudo na amostragem. Além disso, cães jovens (0-12 meses de idade), bem como animais que viviam em casas muradas - sem acesso à rua foram mais suscetíveis à infecção por B. vogeli e H. canis, respectivamente.

Molecular detection of Ehrlichia canis and Anaplasma platys in dogs from municipality of Belém, State of Pará, Brazil / Detecção molecular de Ehrlichia canis e Anaplasma platys em cães do município de Belém, Estado do Pará, Brasil

The occurrence of diseases transmitted by ticks in dogs is very frequent in Brazil, among these diseases we can highlight the ehrlichiosis and anaplasmosis, which are caused by Ehrlichia canis and Anaplasma platys, respectively. The objective of this study was to survey the occurrence of these pathogens in blood samples from domiciled and stray dogs from the city of Belém, Pará. Two hundred and seventy six dogs were sampled for convenience, and the DNA extracted from the blood of these animals was submitted to nested-PCR for research of E. canis and A. platys. E. canis DNA was detected in 39.4% (109/276) and A. platys DNA in 23.1% (64/276) of the samples, there was a statistically significant difference between the frequency of these agents (P<0.0001), and there was coinfection in 13.4% (37/276) of animals. The frequency of detection of these parasites was higher in stray dogs than in those domiciled for both E. canis (OR=2.84) and A. platys (OR=10.5). Considering the results, it was possible to conclude that E. canis and A. platys are present in the studied population, with stray dogs being more affected by these parasites.(AU)

A ocorrência de doenças transmitidas por carrapatos em cães é muito frequente no Brasil, dentre estas enfermidades podemos destacar a erliquiose e a anaplasmose, que são causadas por Ehrlichia canis e Anaplasma platys, respectivamente. O objetivo deste trabalho foi fazer um levantamento da ocorrência destes patógenos em amostras de sangue de cães domiciliados e errantes do município de Belém, Pará. Foram amostrados 276 cães por conveniência, sendo que o DNA extraído do sangue desses animais foi submetido à nested-PCR para a pesquisa de E. canis e A. platys. O DNA de E. canis foi detectado em 39,4% (109/276), e o DNA de A. platys em 23,1% (64/276) dos cães amostrados. Houve diferença estatisticamente significante entre a frequência desses agentes (p<0,0001), pois foi encontrada coinfecção entre os agentes em 13,4% (37/276) dos animais. A frequência de detecção desses parasitos foi maior em cães errantes do que nos domiciliados tanto para E. canis (OR=2,84) quanto para A. platys (OR=10,5). Diante dos resultados, foi possível concluir que E. canis e A. platys estão presentes na população canina estudada, sendo os cães errantes mais acometidos por esses parasitos.(AU)

Occurrence of ticks in dogs in a hospital population in the state of Espírito Santo, Brazil / Ocorrência de carrapatos em cães de população hospitalar no Espírito Santo

Ticks, along with fleas, are considered the main ectoparasites affecting dogs in Brazil. The literature is rich in reports on the occurrence of ticks, which are vectors of diseases in both dogs and humans. The study of the epidemiology of these arthropods provides important data that can help control the infestation in residential areas where dogs are present. Thus, the study of their occurrence in urban areas and veterinary services is very important. The aim of the present study was to determine the occurrence of ticks in dogs in a veterinary hospital population in the state of Espírito Santo, Brazil. Over a one-year period (July 2012 to July 2013), 1483 dogs brought to veterinary services in south-eastern Brazil were examined. Among the dogs examined, 8.97% presented tick infestation, of which 100% were identified as Rhipicephalus sanguineus sensu lato. Given that this species of tick acts as a vector for diseases, it is important that the official health services monitor the occurrence of infestation in dogs and humans, in order to identify diseases transmitted by these ticks in this region.(AU)

Os carrapatos, juntamente com as pulgas, são considerados, no Brasil, como os principais ectoparasitas do cão. A literatura é rica em relatos considerando a ocorrência de carrapatos, que são vetores de doenças para cães e humanos. O estudo da epidemiologia de artrópodes é um dado importante que pode ajudar a controlar a infestação em áreas domiciliadas com a presença de cães. Nesse sentido, o estudo de sua ocorrência em áreas urbanas e ou mesmo em serviços médicos veterinários é importante. O objetivo do presente estudo foi verificar a ocorrência de carrapatos em cães em uma população hospitalar do estado de Espírito Santo, Brasil. Durante um ano (julho de 2012 a julho de 2013), foram examinados 1483 cães atendidos em serviços hospitalares no sudeste do Brasil. Entre os cães examinados, 8,97% apresentaram infestação de carrapatos, sendo 100% deles identificados como Rhipicephalus sanguineus sensu lato. Uma vez que se trata de uma espécie de carrapato que atua como vetor de doenças, é importante que os serviços oficiais de saúde mantenham um monitoramento da ocorrência de infestação tanto em cães como em humanos, a fim de identificar doenças transmitidas por esses carrapatos nesta região.(AU)

Occurrence of ticks in dogs in a hospital population in the state of Espírito Santo, Brazil / Ocorrência de carrapatos em cães de população hospitalar no Espírito Santo

Ticks, along with fleas, are considered the main ectoparasites affecting dogs in Brazil. The literature is rich in reports on the occurrence of ticks, which are vectors of diseases in both dogs and humans. The study of the epidemiology of these arthropods provides important data that can help control the infestation in residential areas where dogs are present. Thus, the study of their occurrence in urban areas and veterinary services is very important. The aim of the present study was to determine the occurrence of ticks in dogs in a veterinary hospital population in the state of Espírito Santo, Brazil. Over a one-year period (July 2012 to July 2013), 1483 dogs brought to veterinary services in south-eastern Brazil were examined. Among the dogs examined, 8.97% presented tick infestation, of which 100% were identified as Rhipicephalus sanguineus sensu lato. Given that this species of tick acts as a vector for diseases, it is important that the official health services monitor the occurrence of infestation in dogs and humans, in order to identify diseases transmitted by these ticks in this region.(AU)

Os carrapatos, juntamente com as pulgas, são considerados, no Brasil, como os principais ectoparasitas do cão. A literatura é rica em relatos considerando a ocorrência de carrapatos, que são vetores de doenças para cães e humanos. O estudo da epidemiologia de artrópodes é um dado importante que pode ajudar a controlar a infestação em áreas domiciliadas com a presença de cães. Nesse sentido, o estudo de sua ocorrência em áreas urbanas e ou mesmo em serviços médicos veterinários é importante. O objetivo do presente estudo foi verificar a ocorrência de carrapatos em cães em uma população hospitalar do estado de Espírito Santo, Brasil. Durante um ano (julho de 2012 a julho de 2013), foram examinados 1483 cães atendidos em serviços hospitalares no sudeste do Brasil. Entre os cães examinados, 8,97% apresentaram infestação de carrapatos, sendo 100% deles identificados como Rhipicephalus sanguineus sensu lato. Uma vez que se trata de uma espécie de carrapato que atua como vetor de doenças, é importante que os serviços oficiais de saúde mantenham um monitoramento da ocorrência de infestação tanto em cães como em humanos, a fim de identificar doenças transmitidas por esses carrapatos nesta região.(AU)

Detecção de proteínas imunorreativas de Rickettsia sp. cepa Mata Atlântica

ABSTRACT: Brazilian Spotted Fever (BSF) is an infectious disease transmitted by ticks to humans. A new human rickettsial infection was reported to cause spotted fever in the State of São Paulo and was named Rickettsia sp. Strain Atlantic Forest. This study aimed to detect and identify proteins with potential to stimulate the immune system of mammalian host of this new strain described. Therefore, we performed total protein extraction Rickettsia sp. Strain Atlantic Forest. The extracted proteins were fractionated by electrophoresis. The protein bands were transferred to nitrocellulose membrane by electrical migration and subjected to Western blot for protein detection. In all, seven immunoreactive proteins were detected. Two proteins showed higher abundance, with molecular weight of 200 and 130 kDa respectively. By comparing existing proteomic maps and the molecular weight of these proteins showed that, it is suggested that the two proteins detected representing rOmpA (200 kDa) and rOmpB (130 kDa). The other detected proteins had lower occurrence and molecular weight less than 78 kDa, which may represent members of the cell surface antigens Family (Sca - Surface cell antigen). The detected proteins may serve as a study based on the development of sensitive and specific diagnostic methods in the development of vaccines and they enable further studies to more effective therapies.

RESUMO: A Febre Maculosa Brasileira (FMB) é uma doença infecciosa, transmitida por carrapatos ao homem. Uma nova riquetsiose humana foi descrita como causadora de Febre Maculosa no Estado de São Paulo, sendo denominada de Rickettsia sp. cepa Mata Atlântica. O presente trabalho teve como objetivo detectar e identificar proteínas com potencial de estimular o sistema imune de hospedeiro mamífero, desta nova cepa descrita. Para tanto, foi realizado a extração proteica total de Rickettsia sp. cepa Mata Atlântica. As proteínas extraídas foram fracionadas por eletroforese. As bandas proteicas foram transferidas para membranas de nitrocelulose por migração elétrica e submetidas à técnica de Western-blot, para detecção proteica. Ao todo sete proteínas imunorreativas foram detectadas. Duas proteínas apresentaram maior abundancia, com peso molecular, de 200 e 130 kDa respectivamente. Através da comparação de mapas proteômicos existentes e pelo peso molecular que estas proteínas apresentaram, sugere-se que as duas proteínas detectadas representem rOmpA (200 kDa) e rOmpB (130 kDa). As demais proteínas detectadas apresentaram menor ocorrência e peso molecular inferior a 78 kDa, podendo representar membros da família de antígenos de superfície celular (Sca - Surface cell antigen). As proteínas detectadas poderão servir como base de estudo na elaboração de métodos diagnósticos sensíveis e específicos, no desenvolvimento de vacinas, além de possibilitarem novos estudos para terapias mais eficazes.

Soroprevalência de anticorpos homólogos antiBorrelia burgdorferi em equinos de uso militar no Brasil / Seroprevalence of homologous antiBorrelia burgdorferi antibodies in horses of military use in Brazil

A maioria das atividades de treinamento militar transcorre em ambiente de risco para aquisição de doenças de transmissãovetorial, incluindo importantes zoonoses e doenças emergentes/reemergentes. O objetivo deste estudo foi relatar a ocorrênciade anticorpos homólogos da classe IgG anti-Borrelia burgdorferi em equinos de uso militar no Brasil, assim como analisar osfatores de risco associados à soropositividade nos animais. Foram estudados dois plantéis de equinos, sendo um no municípiode Resende, estado do Rio de Janeiro, tendo sido encontrada prevalência de 29,9%, e outro no município de São Borja, estadodo Rio Grande do Sul, com prevalência de 44,7%, totalizando 474 animais e prevalência de 39,24%. Na análise dos fatores derisco associados, observou-se que a infestação por carrapatos constituiu-se no fator de risco para a soropositividade. A evidênciade circulação de Borrelia spp. com soroprevalência nos equinos reforça seu papel como sentinela, sendo fator de alerta parapotencial ocorrência de casos humanos. Os resultados obtidos reforçam a importância da vigilância epidemiológica dos carrapatosvetores e sua associação tanto com agentes infecciosos de risco para a saúde do efetivo militar humano, como nos equinos deuso militar nas regiões avaliadas. Isto também realça a necessidade da adoção de medidas de proteção coletivas e individuaisvisando mitigar o risco de doenças transmitidas por carrapatos em atividades militares.(AU)

Most military training activities take place at risk for the acquisition of vector-borne diseases, including important zoonosis andemerging/reemerging diseases This study aimed to analyze the seroprevalence of homologous antibodies antiBorrelia burgdorferiin horses for military use in Brazil, as well as to analyze the risk factors associated with seropositivity in animals. Two herds ofhorses for military use were studied, one in the city of Resende, state of Rio de Janeiro, having been found prevalence of 29.9%,and in São Borja, state of Rio Grande do Sul, with prevalence 44,7% to 474 animals and prevalence of 39,3%. In the analysis ofrisk factors, it was observed that the tick infestation constituted risk factors for seropositivity. Evidence of Borrelia spp. circulationwith seroprevalence in horses reinforces its role as sentinels, and alert factor for potential occurrence of human cases. Theseresults support the importance of epidemiological surveillance of vector ticks and its association with agents of risk to the health ofhorses for military use, in the evaluated areas. This also highlights the need to adopt collective and individual protection measuresto mitigate the risk of tick-borne diseases in military activities.(AU)

Brazilian borreliosis with special emphasis on humans and horses

Borreliosis caused by Borrelia burgdorferi sensu lato is a cosmopolitan zoonosis studied worldwide; it is called Lyme disease in many countries of the Northern Hemisphere and Lyme-like or Baggio-Yoshinari Syndrome in Brazil. However, despite the increasing number of suspect cases, this disease is still neglected in Brazil by the medical and veterinary communities. Brazilian Lyme-like borreliosis likely involves capybaras as reservoirs and Amblyomma and Rhipicephalus ticks as vectors. Thus, domestic animals can serve as key carriers in pathogen dissemination. This zoonosis has been little studied in horses in Brazil. The first survey was performed in the state of Rio de Janeiro, and this Brazilian Borreliosis exhibits many differences from the disease widely described in the Northern Hemisphere. The etiological agent shows different morphological and genetic characteristics, the disease has a higher recurrence rate after treatment with antibiotics, and the pathogen stimulates intense symptoms such as a broader immune response in humans. Additionally, the Brazilian zoonosis is not transmitted by the Ixodes ricinus complex. With respect to clinical manifestations, Baggio-Yoshinari Syndrome has been reported to cause neurological, cardiac, ophthalmic, muscle, and joint alterations in humans. These symptoms can possibly occur in horses. Here, we present a current panel of studies involving the disease in humans and equines, particularly in Brazil.(AU)

Detecção de proteínas imunorreativas de Rickettsia sp. cepa Mata Atlântica / Detection of immunoreactive proteins of Rickettsia sp. Atlantic Forest strain

A Febre Maculosa Brasileira (FMB) é uma doença infecciosa, transmitida por carrapatos ao homem. Uma nova riquetsiose humana foi descrita como causadora de Febre Maculosa no Estado de São Paulo, sendo denominada de Rickettsia sp. cepa Mata Atlântica. O presente trabalho teve como objetivo detectar e identificar proteínas com potencial de estimular o sistema imune de hospedeiro mamífero, desta nova cepa descrita. Para tanto, foi realizado a extração proteica total de Rickettsia sp. cepa Mata Atlântica. As proteínas extraídas foram fracionadas por eletroforese. As bandas proteicas foram transferidas para membranas de nitrocelulose por migração elétrica e submetidas à técnica de Western-blot, para detecção proteica. Ao todo sete proteínas imunorreativas foram detectadas. Duas proteínas apresentaram maior abundancia, com peso molecular, de 200 e 130 kDa respectivamente. Através da comparação de mapas proteômicos existentes e pelo peso molecular que estas proteínas apresentaram, sugere-se que as duas proteínas detectadas representem rOmpA (200 kDa) e rOmpB (130 kDa). As demais proteínas detectadas apresentaram menor ocorrência e peso molecular inferior a 78 kDa, podendo representar membros da família de antígenos de superfície celular (Sca - Surface cell antigen). As proteínas detectadas poderão servir como base de estudo na elaboração de métodos diagnósticos sensíveis e específicos, no desenvolvimento de vacinas, além de possibilitarem novos estudos para terapias mais eficazes.(AU)

Brazilian Spotted Fever (BSF) is an infectious disease transmitted by ticks to humans. A new human rickettsial infection was reported to cause spotted fever in the State of São Paulo and was named Rickettsia sp. Strain Atlantic Forest. This study aimed to detect and identify proteins with potential to stimulate the immune system of mammalian host of this new strain described. Therefore, we performed total protein extraction Rickettsia sp. Strain Atlantic Forest. The extracted proteins were fractionated by electrophoresis. The protein bands were transferred to nitrocellulose membrane by electrical migration and subjected to Western blot for protein detection. In all, seven immunoreactive proteins were detected. Two proteins showed higher abundance, with molecular weight of 200 and 130 kDa respectively. By comparing existing proteomic maps and the molecular weight of these proteins showed that, it is suggested that the two proteins detected representing rOmpA (200 kDa) and rOmpB (130 kDa). The other detected proteins had lower occurrence and molecular weight less than 78 kDa, which may represent members of the cell surface antigens Family (Sca - Surface cell antigen). The detected proteins may serve as a study based on the development of sensitive and specific diagnostic methods in the development of vaccines and they enable further studies to more effective therapies.(AU)

Detecção de proteínas imunorreativas de Rickettsia sp. cepa Mata Atlântica / Detection of immunoreactive proteins of Rickettsia sp. Atlantic Forest strain

Brazilian Spotted Fever (BSF) is an infectious disease transmitted by ticks to humans. A new human rickettsial infection was reported to cause spotted fever in the State of São Paulo and was named Rickettsia sp. Strain Atlantic Forest. This study aimed to detect and identify proteins with potential to stimulate the immune system of mammalian host of this new strain described. Therefore, we performed total protein extraction Rickettsia sp. Strain Atlantic Forest. The extracted proteins were fractionated by electrophoresis. The protein bands were transferred to nitrocellulose membrane by electrical migration and subjected to Western blot for protein detection. In all, seven immunoreactive proteins were detected. Two proteins showed higher abundance, with molecular weight of 200 and 130 kDa respectively. By comparing existing proteomic maps and the molecular weight of these proteins showed that, it is suggested that the two proteins detected representing rOmpA (200 kDa) and rOmpB (130 kDa). The other detected proteins had lower occurrence and molecular weight less than 78 kDa, which may represent members of the cell surface antigens Family (Sca - Surface cell antigen). The detected proteins may serve as a study based on the development of sensitive and specific diagnostic methods in the development of vaccines and they enable further studies to more effective therapies.(AU)

A Febre Maculosa Brasileira (FMB) é uma doença infecciosa, transmitida por carrapatos ao homem. Uma nova riquetsiose humana foi descrita como causadora de Febre Maculosa no Estado de São Paulo, sendo denominada de Rickettsia sp. cepa Mata Atlântica. O presente trabalho teve como objetivo detectar e identificar proteínas com potencial de estimular o sistema imune de hospedeiro mamífero, desta nova cepa descrita. Para tanto, foi realizado a extração proteica total de Rickettsia sp. cepa Mata Atlântica. As proteínas extraídas foram fracionadas por eletroforese. As bandas proteicas foram transferidas para membranas de nitrocelulose por migração elétrica e submetidas à técnica de Western-blot, para detecção proteica. Ao todo sete proteínas imunorreativas foram detectadas. Duas proteínas apresentaram maior abundancia, com peso molecular, de 200 e 130 kDa respectivamente. Através da comparação de mapas proteômicos existentes e pelo peso molecular que estas proteínas apresentaram, sugere-se que as duas proteínas detectadas representem rOmpA (200 kDa) e rOmpB (130 kDa). As demais proteínas detectadas apresentaram menor ocorrência e peso molecular inferior a 78 kDa, podendo representar membros da família de antígenos de superfície celular (Sca - Surface cell antigen). As proteínas detectadas poderão servir como base de estudo na elaboração de métodos diagnósticos sensíveis e específicos, no desenvolvimento de vacinas, além de possibilitarem novos estudos para terapias mais eficazes.(AU)

PESQUISA DE INFECÇÃO POR RIQUÉTSIAS DO GRUPO DA FEBRE MACULOSA EM CÃES, EQUINOS, CAPIVARAS E EM SEUS RESPECTIVOS CARRAPATOS EM REGIÕES SOB VIGILÂNCIA EPIDEMIOLÓGICA NO MUNICÍPIO DE GOIÂNIA GOIÁS

As riquetsioses são doenças infecciosas, zoonoses, que possuem como agente etiológico bactérias gram-negativas, intracelulares obrigatórias, do gênero Rickettsia. No Brasil, a Febre Maculosa (FM) causada por Rickettsia rickettsi apresenta grande importância em saúde pública devido à alta letalidade (acima de 50%) em humanos e por ser transmitida por carrapatos, principalmente Amblyomma sculptum e Amblyomma aureolatum, que permanecem na natureza pela presença de hospedeiros que atuam como amplificadores da bactéria. Rickettsia parkeri cepa Mata Atlântica é considerado o agente etiológico de uma nova riquetsiose do Grupo da Febre Maculosa (GFM) associada a casos brandos, sem registro de óbitos, transmitida pelo carrapato Amblyomma ovale. Cães, capivaras e equinos são constantemente parasitados por carrapatos, sendo assim considerados excelentes sentinelas da situação epidemiológica da FM. Em Goiás, região centro-oeste do país, apesar da ocorrência de casos confirmados, sendo um no município de Goiânia, há poucos estudos sobre a situação epidemiológica da febre maculosa, evidenciando-se a necessidade de abranger a realização de pesquisas sobre a circulação de riquétsias do GFM transmitidas por carrapatos, sobretudo, em Goiânia. O objetivo deste estudo foi realizar no município de Goiânia GO, a pesquisa de infecção por quatro espécies de riquétsias: Rickettsia rickettsii, Rickettsia parkeri e Rickettsia amblyommatis, espécies do GFM; e Rickettsia bellii, uma espécie de patogenicidade desconhecida que infecta uma variedade de carrapatos que parasitam seres humanos. Entre março a dezembro de 2020, amostras sorológicas de 165 cães, 44 equinos e 8 capivaras foram testadas pela técnica de reação de imunofluorescência indireta (RIFI). Carrapatos coletados desses animais e do ambiente foram testados para a presença de DNA riquetsial pela reação em cadeia da polimerase (PCR). Ao total, 25,4% (42/165) dos cães, 22,72% (10/44) dos equinos e 75% (6/8) das capivaras foram sororreativos para pelo menos um dos três antígenos de Rickettsia spp. No geral, sete espécies de carrapatos foram identificadas, Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s.l.), Rhipicephalus microplus, Amblyomma ovale, Amblyomma sculptum, Amblyomma dubitatum, Amblyomma rotundatum e Dermacentor nitens. Dos carrapatos testados na PCR, foi detectado DNA de Rickettsia spp. em dois exemplares de A. dubitatum oriundos de duas capivaras. Apesar da detecção de DNA de Rickettsia spp. não pertencentes ao GFM, a soropositividade de animais domésticos e capivaras para Rickettsia spp., evidencia a circulação de riquétsias na região. Por fim, este estudo contribui para o conhecimento sobre a epidemiologia das riquetsioses, no município de Goiânia, Goiás, centro-oeste do Brasil e reforça a importância dos estudos sorológicos e moleculares nas demais regiões do país com poucos casos ou áreas silenciosas onde há fatores de risco para a transmissão de Rickettsia spp. do GFM para humanos.

Rickettsiosis are infectious diseases, zoonoses, which gram-negative, mandatory intracellular bacteria, of the genus Rickettsia, are the etiologic agent. In Brazil, Spotted Fever (SF) caused by Rickettsia rickettsii is of great importance in public health due to the high lethality (above 50%) in humans and because it is transmitted by ticks, mainly Amblyomma sculptum and Amblyomma aureolatum, which remain in nature by presence of hosts that act as amplifiers of the bacteria. Rickettsia parkeri cepa Mata Atlântica is considered the etiologic agent of a new rickettsial disease of the Spotted Fever Group (SFG) associated with mild cases, with no death record, transmitted by the tick Amblyomma ovale. Dogs, capybaras and horses are constantly parasitized by ticks, thus being considered excellent sentinels of the SF epidemiological situation. In Goiás, in the midwest region of the country, despite the occurrence of confirmed cases, one in the municipality of Goiânia, there are few studies on the epidemiological situation of spotted fever, showing the need to cover the conduct of research on the circulation of SFG rickettsiae transmitted by ticks, especially in Goiânia. The objective of this study was to carry out in the city of Goiânia - GO, the search for infection by four species of rickettsiae: Rickettsia rickettsii, Rickettsia parkeri and Rickettsia amblyommatis, species of the GFM; and Rickettsia bellii, a species of unknown pathogenicity that infects a variety of ticks that parasitize humans. Between March and December 2020, serological samples from 165 dogs, 44 horses and 8 capybaras were tested using the indirect immunofluorescence assay (IFA). Ticks collected from these animals and from the environment were tested for the presence of rickettsial DNA by polymerase chain reaction (PCR). In total, 25.4% (42/165) of dogs, 22.72% (10/44) of horses and 75% (6/8) of capybaras were seroreactive for at least one of the three Rickettsia spp antigens. Overall, seven tick species were identified, Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s.l.), Rhipicephalus microplus, Amblyomma ovale, Amblyomma sculptum, Amblyomma dubitatum, Amblyomma rotundatum and Dermacentor nitens. Of the ticks tested in PCR, DNA from Rickettsia spp. was detected in two copies of A. dubitatum from two capybaras. Despite the detection of Rickettsia spp. not belonging to the SFG, the seropositivity of domestic animals and capybaras for Rickettsia spp., shows the circulation of rickettsiae in the region. Lastly, this study contributes to the knowledge about the epidemiology of rickettsial diseases in the city of Goiânia, Goiás, Midwest Brazil and reinforces the importance of serological and molecular studies in other regions of the country with silent cases or areas where there are factors of risk for transmission of Rickettsia spp. of SFG to humans.

ISOLAMENTO DE AGENTES RIQUETSIAIS DE EQUINOS E CARRAPATOS DE VIDA LIVRE PROCEDENTES DE ÁREAS ENDÊMICAS PARA FEBRE MACULOSA BRASILEIRA NO ESTADO DO RIO DE JANEIRO

Doenças transmitidas por carrapatos representam um grande desafio dentro da medicina humana e veterinária. Dentre essas doenças destaca-se aquelas provocadas por agentes pertencentes a ordem Rickettsiales. Dentro desta ordem pode-se destacar os gêneros Anaplasma e Rickettsia. Ambos os agentes são transmitidos por carrapatos têm e são relevantes dentro da Saúde Única. Cultivo em linhagens de células a partir de carrapatos podem auxiliar no isolamento e diagnóstico desses hemoparasitos. Dentro desse contexto, este estudo teve como objetivo isolar por meio de cultivo celular hemoparasitos a partir de carrapatos e sangue de equinos procedentes de áreas endêmicas para Febre Maculosa no estado do Rio de Janeiro. Ao todo foram coletados 858 espécimes de carrapatos e sangue de 125 equinos. Os carrapatos foram divididos em diferentes pools de acordo com espécie e sexo, e preparados para o processamento do cultivo de células embrionárias de carrapatos. Em seguida, foram transferidos para frascos de cultivo contendo células embrionárias de Ixodes scapularis (ISE6). No terceiro dia de cultivo após as células começarem a se desprender do fundo do frasco de cultivo, foi observado através de microscopia óptica a partir de um esfregaço corado com panótipo rápido®, estruturas possuindo forma cocobacilar semelhantes as Rickettsia spp. Já a partir do sangue dos 125 equinos, apenas uma amostra apresentou inclusões sugestivas para Anaplasma spp. Tais amostras foram submetidos à técnica de PCR para confirmação da espécie, utilizando-se para a detecção de Rickettsia spp. os primers dos genes gltA, ompB e htrA e para a confirmação de Anaplasma spp. o primer que codifica o gene 23S. Apenas o pool contendo 3 machos e 3 fêmeas de Amblyomma dubitatum demonstrou resultado positivo paras os genes gltA e htrA e negativo para ompB. Tal amostra foi submetida ao método sanger para sequenciamento genético e seu resultado avaliado no programa BioEdit e comparada com as demais sequências já depositadas no GenBank, as quais deram uma similaridade de 97% para R. bellii. Em relação ao sangue do equino, confirmou-se o resultado positivo na PCR. A utilização da linhagem celular ISE6 se demonstrou bastante eficaz no isolamento de R. bellii e Anaplasma spp., sendo uma nova e promissora opção para cultivo de rickettsias.

Tick-borne diseases represent a major challenge within human and veterinary medicine. Among these diseases, those caused by agents belonging to the order of the Rickettsiales stand out. Within this order, the genera Anaplasma and Rickettsia can be highlighted. Both agents transmitted by ticks and of importance for Unique Health aiming at the concept of One Health. Cultivation in cell lines from ticks can assist in the isolation and diagnosis of these hemoparasites. This study aimed to isolate hemoparasites from ticks and blood of horses from areas endemic for Spotted Fever in the state of Rio de Janeiro by means of cell culture. In total, 865 specimens of ticks and blood were collected from 125 horses. Ticks were divided into different pools according to species and sex, identified and washed with sterilization protocol for crop processing. Then they were transferred to culture flasks containing embryonic cells of Ixodes scapularis (ISE6). On the third day of culture after the cells started to detach from the bottom of the culture flask, it was observed through optical microscopy from a smear stained with rapid panotype®, structures having a cocobacillary shape similar to Rickettsia spp. From the blood of the 125 horses, only one sample presented inclusions suggestive for Anaplasma spp. Such samples were submitted to the PCR technique to confirm the species, using for the detection of Rickettsia spp. the primers of the gltA, ompB and htrA genes and for the confirmation of Anaplasma spp. the primer that encodes the 23S gene. Only the pool containing 3 males and 3 females of Amblyomma dubitatum demonstrated positive results for the gltA and htrA genes and negative for ompB. The sample was then submitted to the sanger method for genetic sequencing and its result evaluated in the BioEdit program and compared with the other sequences already deposited in GenBank, which gave a 97% similarity to R. bellii. Regarding the horse's blood, the positive result in PCR was confirmed. The use of the ISE6 cell line is very effective in isolating R. bellii and other hemoparasites, being a promising new option for the cultivation of rickettsiae.

"Pesquisa de Borrelia spp. em cães do município de Belágua, Maranhão - Brasil"

O gênero Borrelia é composto por três grupos filogenéticos: Borrelia spp. do grupo Lyme, Borrelia spp. do grupo Febre Recorrente e Borrelia associada aos répteis. Borrelia spp. são espiroquetas transmitidas por artrópodes que usam uma variedade de hospedeiros vertebrados como reservatórios para completar total ou parcialmente seu ciclo de vida. Desta forma, enfermidades que tem como vetores os carrapatos devem ser pesquisados visando o conhecimento das zoonoses, como por exemplo a Febre Recorrente transmitida por carrapatos e a doença de Lyme. Estudar a frequência de animais positivos, como forma de exercer a vigilância epidemiológica, especialmente em casos de zoonoses, torna-se importante, visto que algumas espécies de animais domésticos como os cães podem atuar como sentinelas para a enfermidade. Assim, objetivou-se encotrar bactérias do gênero Borrelia em amostras de sangue de cães domésticos no município de Belágua pertencente à Mesorregião Leste Maranhense. Foi realizado um estudo transversal composto por cães domiciliados de ambos os sexos preferencialmente com idade a partir de 6 meses. Aplicou-se um questionário semiestruturado com os proprietários dos animais com o intuito de obter informações relacionados ao manejo e comportamento do animal. Coletou-se, em média, 5mL de sangue de 206 cães. Para pesquisa do DNA de Borrelia foi realizada nested-PCR. A primeira reação amplifica um fragmento com 665 pares de bases, e a segunda reação é a nested-PCR, que amplifica um fragmento com 354 pares de bases. Para todas as reações Borrelia anserina cepa PL foi usada como controle positivo. A população total desse estudo foi composta por cães domiciliados na zona urbana. Quanto ao sexo, o número de fêmeas foram 109 (52,9%) e machos 97 (47%). Verificou-se que não há diferenças significativas em relação à proporção macho e fêmea (p>0.05). Quanto à faixa etária, 56 (27,1%) da população canina apresentavam idade igual ou inferior a 12 meses. Animais com idade de um a três anos constituíam 72,8% (150) da população. Quanto as atividades de caça, 86,3% não desempenham essa atividade no município de Belágua. Não se observou amplificação de DNA de Borrelia em nenhuma das amostras de sangue coletadas, e assim entendendo que os cães não estavam ativamente infectados por Borrelia spp. no momento da coleta. Diante dos achados, uma sugestão para futuras pesquisas é necessidade de realizar nas amostras estudadas ensaios sorológicos para detectar anticorpos anti-proteína A imunogênica de Borrelia (BipA) e anti-glicerofosfodiéster fosfodiesterase (GlpQ) para conhecer se os cães na região foram expostos as espiroquetas, podendo ser útil na avaliação do papel do cão como sentinela para Febre Recorrente transmitida por carrapatos.

The genus Borrelia is composed of three phylogenetic groups: Borrelia spp. from the Lyme group, Borrelia spp. from the Recurrent Fever group and Borrelia associated with reptiles. Borrelia spp. are arthropod-borne spirochetes that use a variety of vertebrate hosts as reservoirs to fully or partially complete their life cycle. Thus, diseases that have ticks as vectors should be researched in order to understand zoonoses, such as relapsing fever transmitted by ticks and Lyme borreliosis. Studying the frequency of positive animals, as a way of exercising epidemiological surveillance, especially in cases of zoonoses, is important, since some species of domestic animals such as dogs can act as sentinels for the disease. Thus, the objective was to find bacteria of the genus Borrelia in blood samples from domestic dogs in the municipality of Belágua, belonging to the Mesoregion East Maranhense. A cross-sectional study was carried out with domesticated dogs of both sexes, preferably aged from 6 months. A semi-structured questionnaire was applied to the owners of the animals in order to obtain information related to the handling and behavior of the animal. On average, 5mL of blood were collected from 206 dogs. For Borrelia DNA research, nested-PCR was performed. The first reaction amplifies a fragment with 665 base pairs, and the second reaction is the nested-PCR, which amplifies a fragment with 354 base pairs. For all reactions Borrelia anserina strain PL was used as a positive control. The total population of this study consisted of dogs domiciled in the urban area. As for sex, the number of females was 109 (52.9%) and males 97 (47%). It was found that there are no significant differences regarding the male and female ratio (p>0.05). As for the age group, 56 (27.1%) of the canine population were aged less than or equal to 12 months. Animals aged one to three years constituted 72.8% (150) of the population. As for hunting activities, 86.3% do not carry out this activity in the municipality of Belágua. Borrelia DNA amplification was not detected in any of the collected blood samples, thus understanding that the dogs were not actively infected by Borrelia spp. at the time of collection. In view of the findings, a suggestion for future research is the need to perform serological tests in the studied samples to detect antibodies to Borrelia immunogenic protein A (BipA) and anti-glycerophosphodiester phosphodiesterase (GlpQ) to know if dogs in the region were exposed to relapsing fever group borreliae, which may be useful in evaluating the dog's role as a sentinel for tick-borne recurrent fever. Keywords: Borrelia spp. Dogs. tick-borne relapsing fever. Lyme borreliosis. Maranhão

PREVALÊNCIA DE PATÓGENOS TRANSMITIDOS POR CARRAPATOS EM CÃES DE UMA REGIÃO LITORÂNEA DO ESTADO DO CEARÁ, NORDESTE DO BRASIL

As doenças transmitidas por carrapatos são de grande importância para a saúde animal e humana, sendo algumas consideradas zoonóticas. As enfermidades transmitidas por esses ectoparasitos podem ser virais, bacterianas e parasitárias. Dentre os patógenos que podem ser transmitidos aos cães, destacam-se os protozoários Babesia vogeli e Hepatozoon spp. e as bactérias Ehrlichia canis e Rickettsia spp. A circulação desses patógenos na população canina já foi documentada em grande parte do Nordeste do Brasil. Contudo, não existe informação sobre a ocorrência desses agentes na região litorânea do Ceará, estado localizado no Nordeste brasileiro. Esse estudo objetivou determinar pela primeira vez a ocorrência de B. vogeli, Hepatozoon spp., E. canis e Rickettsia spp. em cães e seus ectoparasitos em uma região litorânea do Ceará, a Vila de Jericoacoara. Esse estudo também investigou os possíveis aspectos epidemiológicos das doenças causadas por esses patógenos. Amostras de sangue foram coletadas de 153 animais e características epidemiológicas foram obtidas por questionário. Os cães foram avaliados quanto às alterações clínicas e inspecionados quanto à presença de ectoparasitos. As amostras sanguíneas foram submetidas à PCR em tempo real para detecção do DNA de E. canis e B. vogeli, PCR convencional para detecção do DNA de Hepatozoon spp. e reação de imunofluorescência indireta (RIFI) para detecção de anticorpos anti-Rickettsia spp. Amostras positivas para Hepatozoon spp. foram submetidas ao sequenciamento. O perfil hematológico dos animais foi determinado por hemograma. Os ectoparasitos encontrados foram identificados por chaves dicotômicas. As análises estatísticas foram realizadas no programa SPSS. Dos 153 cães, 39,2% (60/153) estavam infectados ou expostos a, no mínino, um dos quatro patógenos. A positividade para B. vogeli, E. canis e Hepatozoon spp. foi de 15% (23/153), 13,7% (21/153) e 11,8% (18/153), respectivamente. O sequenciamento indicou que a espécie encontrada era H. canis. A RIFI detectou anticorpos anti-Rickettsia spp. em 13% (20/153) dos cães, sendo 7.2% (11/153) positivos para o provável antígeno homólogo (PAH) Rickettsia amblyommatis. Nove animais (21,6%) apresentavam-se coinfectados. As coinfecções estavam presentes nas seguintes combinações: 55,5% (5/9) dos cães com E. canis e H. canis; 33,3% (3/9) com E. canis e B. vogeli; 11,1% (1/9) com B. vogeli e H. canis. Com relação aos carrapatos, todos pertenciam à espécie Rhipicephalus sanguineus s.l. O hemograma e o exame clínico indicaram alterações compatíveis com doenças transmitidas por carrapatos. Foi identificada correlação somente entre animais menores de 3 anos e positividade para B. vogeli (p<0,05). Não foi detectada associação estatística entre sexo, raça, acesso à rua e presença de ectoparasitos com a infecção ou exposição aos patógenos pesquisados. Os resultados desse estudo confirmaram a circulação de patógenos de importância veterinária no Nordeste brasileiro e evidenciaram a exposição dos cães a uma espécie de Rickettsia com potencial zoonótico, indicando a necessidade de implantação de medidas de controle vetorial.

Tick-borne diseases are of great importance for animal and human health, some being considered zoonotic. The diseases transmitted by these ectoparasites can be viral, bacterial and parasitic. Among the pathogens that can be transmitted to dogs are the protozoa Babesia vogeli and Hepatozoon spp. and the bacteria Ehrlichia canis and Rickettsia spp. The circulation of these pathogens in the dog population has already been documented in a large part of Northeastern Brazil. However, there is no information on the occurrence of these agents in the coastal region of Ceará, a state located in Northeastern Brazil. This study aimed to determine for the first time the occurrence of B. vogeli, Hepatozoon spp., E. canis and Rickettsia spp. in dogs and their ectoparasites in a coastal region of Ceará, Vila de Jericoacoara. This study also investigated the possible epidemiological aspects of diseases caused by these pathogens. Blood samples were collected from 153 animals and epidemiological characteristics were obtained by questionnaire. Dogs were evaluated for clinical changes and inspected for the presence of ectoparasites. Blood samples were submitted to real-time PCR for detection of DNA from E. canis and B. vogeli, conventional PCR for detection of DNA from Hepatozoon spp. and indirect immunofluorescence reaction (IFAT) for detection of anti-Rickettsia spp. Positive samples for Hepatozoon spp. were submitted to sequencing. The animals' hematological profile was determined by hemogram. The ectoparasites found were identified by dichotomous keys. Statistical analyzes were performed using the SPSS program. Of the 153 dogs, 39.2% (60/153) were infected or exposed to at least one of the four pathogens. Positivity for B. vogeli, E. canis and Hepatozoon spp. was 15% (23/153), 13.7% (21/153) and 11.8% (18/153), respectively. Sequencing indicated that the species found was H. canis. RIFI detected anti-Rickettsia spp. in 13% (20/153) of the dogs, being 7.2% (11/153) positive for the probable homologous antigen (PAH) Rickettsia amblyommatis. Nine animals (21.6%) were co-infected. Co-infections were present in the following combinations: 55.5% (5/9) of dogs with E. canis and H. canis, 33.3% (3/9) with E. canis and B. vogeli, 11.1% (1/9) with B. vogeli and H. canis. Regarding ticks, all belonged to the species Rhipicephalus sanguineus s.l. Blood count and clinical examination indicated alterations compatible with tick-borne diseases. Correlation was identified only between animals younger than 3 years and positivity for B. vogeli (p<0.05). No statistical association was detected between sex, race, street access and the presence of ectoparasites with infection by the studied pathogens. The results of this study confirmed the circulation of pathogens of veterinary importance in Northeastern Brazil and evidenced the infection or exposure of dogs to a species of Rickettsia with zoonotic potential, indicating the need to implement vector control measures.