Fertilidade e suscetibilidade à criopreservação espermática: avanços e desafios / Fertility and susceptibility to sperm cryopreservation: advances and challenges

Estudos sobre a fisiologia espermática demonstram que padrões de fertilidade e funcionalidade espermática pós-criopreservação possuem relação importante com a eficiência do metabolismo energético destas células, bem como com a sua capacidade de manter a homeostase oxidativa. Os conhecimentos sobre a relação entre perfil fisiológico de espermatozoides e fertilidade foram e, ainda estão sendo, aprimorados, com o uso de análises de perfis moleculares, com destaque para a metabolômica. As análises moleculares permitiram a identificação de classes de metabólitos importantes na fisiologia espermática, bem como de potenciais biomarcadores de fertilidade, inclusive em bovinos. No entanto, ainda não há disponível uma avaliação isolada capaz de estimar o padrão de fertilidade de amostras seminais. Há vários desafios a serem superados para a validação de biomarcadores de fertilidade, principalmente considerando-se as diferenças entre perfis metabólicos de raças distintas de touros e a heterogeneidade dos ejaculados. A superação destes desafios pode ser iniciada com um maior aproveitamento dos resultados já obtidos e futuros, com a aplicação de análises mais avançadas e com eficácia em elevado número de dados. Para tal, podem ser utilizados modelos estatísticos de inteligência artificial, cuja aplicação pode aumentar a acurácia das observações obtidas, bem como aproximá-las da aplicação pelo setor de produção animal.(AU)

Studies on sperm physiology demonstrate that fertility outcomes and sperm post-cryopreservation have an important relation with sperm energy metabolism efficiency and ability to maintain oxidative homeostasis. Knowledge on sperm physiology has been enhanced, continually, with the application of molecular profiling analysis, focusing on metabolomics. Molecular analysis allowed the identification of important classes of metabolites in sperm physiology, as well as potential fertility biomarkers, including in bovine. Despite all developments, there is still no isolated assessment available capable of estimating fertility on sperm samples. There are several challenges to be overcome for the validation of fertility biomarkers, especially considering the metabolic profiles differences between bull breeds and the ejaculate heterogeneity. Overcoming these challenges could start with the application of more advanced and effective data analysis from research database already obtained, as well as future ones. To this end, statistical models of artificial intelligence can be used, whose application can increase the accuracy of the observations obtained, as well as bringing them closer to the application by the animal production sector.(AU)

Viabilidade ovariana com o uso do extrato de semente de uva: uma revisão sistemática / Ovarian viability with the use of grape seed extract: a systematic review / Viabilidad ovárica con extracto de semilla de uva: una revisión sistemática

El objetivo fue analisar sistemáticamente la literatura para verificar la influencia del extracto de semilla de uva como factor antioxidante en el tratamiento de la salud ovárica. Por medio de búsqueda y selección de literatura en artículos publicados en inglés en las bases de datos Lilacs, PubMed, SciELO, Science Direct / Elvesier y Google Scholar. Los descriptores utilizados fueron uva (uva) "AND" semilla (semilla) "AND" ovario (ovario) "OR" ovárico (ovario), con 9,100 artículos encontrados. Se realizaron lecturas de títulos, resúmenes y textos completos, 03 manuscritos cumplieron los criterios de inclusión. El uso de extracto de procianidina de semilla de uva y extracto de proantocianidina de semilla de uva obtuvo una reducción en ROS, mientras que se observó una reducción de LDL en el uso de extracto de semilla de uva. El extracto de semilla de uva puede ser beneficioso para la...

The objective was to review systematically the literature to verify the influence of grape seed extract as an antioxidant factor in the treatment of ovarian health by search and selection of literature in articles published in English in the Lilacs, PubMed, SciELO, Science Direct / Elvesier and Google Scholar databases. Descriptors used were grape (grape) AND seed (seed) AND ovary (ovary) OR ovarian (ovarian), with 9,100 articles found. Readings of titles, abstracts and full texts were performed, 03 manuscripts fulfilled the inclusion criteria. The use of grape seed procyanidin extract and grape seed proanthocyanidin extract obtained a reduction in ROS, while LDL reduction was observed in the use of grape seed extract. Conclusion: Grape seed extract can be beneficial for the viability of ovarian health, as it causes homeostasis regarding oxidative stress, however, further studies are necessary.

O objetivo foi examinar sistematicamente a literatura para verificar a influência do extrato de semente de uva como fator antioxidante no tratamento da saúde ovariana. por meio de busca e seleção da literatura em artigos publicados em língua inglesa nas bases de dados Lilacs, PubMed, SciELO, Science Direct/Elvesier e Google Acadêmico. Descritores utilizados foram grape (uva) AND seed (semente) AND ovary (ovário) OR ovarian (ovariano), sendo localizados 9.100 artigos. Realizadas leituras de títulos, resumos e textos completos, 03 manuscritos preencheram os critérios de inclusão. O uso do extrato de procianidina de semente de uva e do extrato proantocianidina de semente de uva obtiveram redução de ROS, quanto ao uso do extrato de semente de uva foi observado redução de LDL. O extrato de semente de uva pode ser benéfico para a viabilidade da saúde ovariana, pois causa homeostase a respeito do estresse oxidativo, no entanto, faz-se necessário estudos mais aprofundados.

Viabilidade ovariana com o uso do extrato de semente de uva: uma revisão sistemática / Ovarian viability with the use of grape seed extract: a systematic review / Viabilidad ovárica con extracto de semilla de uva: una revisión sistemática

El objetivo fue analisar sistemáticamente la literatura para verificar la influencia del extracto de semilla de uva como factor antioxidante en el tratamiento de la salud ovárica. Por medio de búsqueda y selección de literatura en artículos publicados en inglés en las bases de datos Lilacs, PubMed, SciELO, Science Direct / Elvesier y Google Scholar. Los descriptores utilizados fueron uva (uva) "AND" semilla (semilla) "AND" ovario (ovario) "OR" ovárico (ovario), con 9,100 artículos encontrados. Se realizaron lecturas de títulos, resúmenes y textos completos, 03 manuscritos cumplieron los criterios de inclusión. El uso de extracto de procianidina de semilla de uva y extracto de proantocianidina de semilla de uva obtuvo una reducción en ROS, mientras que se observó una reducción de LDL en el uso de extracto de semilla de uva. El extracto de semilla de uva puede ser beneficioso para la...(AU)

The objective was to review systematically the literature to verify the influence of grape seed extract as an antioxidant factor in the treatment of ovarian health by search and selection of literature in articles published in English in the Lilacs, PubMed, SciELO, Science Direct / Elvesier and Google Scholar databases. Descriptors used were grape (grape) AND seed (seed) AND ovary (ovary) OR ovarian (ovarian), with 9,100 articles found. Readings of titles, abstracts and full texts were performed, 03 manuscripts fulfilled the inclusion criteria. The use of grape seed procyanidin extract and grape seed proanthocyanidin extract obtained a reduction in ROS, while LDL reduction was observed in the use of grape seed extract. Conclusion: Grape seed extract can be beneficial for the viability of ovarian health, as it causes homeostasis regarding oxidative stress, however, further studies are necessary.(AU)

O objetivo foi examinar sistematicamente a literatura para verificar a influência do extrato de semente de uva como fator antioxidante no tratamento da saúde ovariana. por meio de busca e seleção da literatura em artigos publicados em língua inglesa nas bases de dados Lilacs, PubMed, SciELO, Science Direct/Elvesier e Google Acadêmico. Descritores utilizados foram grape (uva) AND seed (semente) AND ovary (ovário) OR ovarian (ovariano), sendo localizados 9.100 artigos. Realizadas leituras de títulos, resumos e textos completos, 03 manuscritos preencheram os critérios de inclusão. O uso do extrato de procianidina de semente de uva e do extrato proantocianidina de semente de uva obtiveram redução de ROS, quanto ao uso do extrato de semente de uva foi observado redução de LDL. O extrato de semente de uva pode ser benéfico para a viabilidade da saúde ovariana, pois causa homeostase a respeito do estresse oxidativo, no entanto, faz-se necessário estudos mais aprofundados.(AU)

Efeitos da suplementação do meio com diferentes antioxidantes durante a maturação in vitro de oócitos de bovinos sobre o status oxidativo / Effects of medium supplementation with different antioxidants during in vitro maturation of bovine oocytes on oxidative status

Although widely used as reproductive biotechnology in cattle, in vitro embryo production (IVEP) has variable efficiency. During in vitro maturation (IVM), supplementing the medium with antioxidant potential could be an affordable alternative to increase the efficiency of IVEP, requiring the evaluation of new components, such as eugenol, β-caryophyllene, and acetyl eugenol. Thus, bovine oocytes were matured according to different antioxidants. Metaphase II oocytes were identified by Hoechst staining. The oxidative status was measured by evaluation of reactive oxygen species (ROS), and glutathione (GSH). After eight repetitions, no difference was observed among groups containing antioxidants, being all these groups superior to negative control (p<0.05). The ROS levels decreased and GSH increased in oocytes matured with EUG (p<0.05). These results indicate apositive effect of eugenol on the oxidative status of oocytes matured with this compound, showing that eugenol can be an efficient supplement in the IVM of bovine oocytes.

Efeitos da suplementação do meio com diferentes antioxidantes durante a maturação in vitro de oócitos de bovinos sobre o status oxidativo / Effects of medium supplementation with different antioxidants during in vitro maturation of bovine oocytes on oxidative status

Although widely used as reproductive biotechnology in cattle, in vitro embryo production (IVEP) has variable efficiency. During in vitro maturation (IVM), supplementing the medium with antioxidant potential could be an affordable alternative to increase the efficiency of IVEP, requiring the evaluation of new components, such as eugenol, β-caryophyllene, and acetyl eugenol. Thus, bovine oocytes were matured according to different antioxidants. Metaphase II oocytes were identified by Hoechst staining. The oxidative status was measured by evaluation of reactive oxygen species (ROS), and glutathione (GSH). After eight repetitions, no difference was observed among groups containing antioxidants, being all these groups superior to negative control (p<0.05). The ROS levels decreased and GSH increased in oocytes matured with EUG (p<0.05). These results indicate apositive effect of eugenol on the oxidative status of oocytes matured with this compound, showing that eugenol can be an efficient supplement in the IVM of bovine oocytes.(AU)

Dieta hiperlipídica induz danos hepáticos associados à dhgna sem desequilíbrio redox no fígado de camundongos Swiss / Hyperlipid diet induces NAFLD associated liver damage without redox imbalance in Swiss mice liver

A doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) é uma doença de prevalência crescente e fortemente associada ao desequilíbrio redox e à perda da homeostase glicêmica. O desenvolvimento de modelos in vivo que mimetizem características fisiopatológicas da mesma é essencial para a descoberta e o desenvolvimento de estratégias terapêuticas. Validar um modelo de DHGNA associado ao desequilíbrio redox e à intolerância à glicose, induzida por dieta hiperlipídica, de baixo custo e fácil reprodutibilidade. Dezesseis camundongos Swiss receberam dieta hiperlipidica, durante 10 semanas. Durante todo o experimento foram avaliados peso corporal, tolerância à glicose, marcadores do estresse oxidativo e morfologia hepática. A dieta hiperlipídica promoveu um aumento significativo dos níveis de triglicerídeos (p<0,05) e do peso do tecido hepático (p<0,01), além de severa inflamação, necrose e esteatose dos hepatócitos. Os animais que seguira a DH (dieta hiperlipídica) apresentaram ainda, uma menor tolerância à glicose (p <0,05), entretanto não apresentaram redução dos grupamentos tióis. O modelo de DHGNA, induzida por DH, foi associada a danos histológicos hepáticos e à intolerância à glicose, entretanto não apresentou desequilíbrio redox, sendo um modelo inviável para estudos com tratamentos com antioxidantes. O trabalho teve por objetivo validar um modelo de DHGNA induzido por dieta hiperlipídica associada a alterações na resposta glicêmica e sem modificações na homeostase redox em camundongos.

Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is an increasingly prevalent disease strongly associated with redox imbalance and loss of glycemic homeostasis. The development of in vivo models that mimics its pathophysiological characteristics is essential for the discovery and development of therapeutic strategies. To validate a NAFLD model associated with redox imbalance and low-fat diet-induced glucose intolerance and easily reproducible. Sixteen Swiss mice received a high fat diet for 10 weeks. Throughout the experiment, body weight, glucose tolerance, oxidative stress markers and liver morphology were evaluated. The hyperlipid diet promoted a significant increase in triglyceride levels (p<0.05) and liver tissue weight (p <0.01), in addition to severe inflammation, necrosis and steatosis of hepatocytes. The animals that followed the hyperlipidic diet (HD) still had a lower glucose tolerance (p<0.05), ), however it did not show reduction of thiol groups. The HD-induced NAFLD model was associated with liver histological damage and glucose intolerance, however it did not present redox imbalance, being an unfeasible model for studies with antioxidant treatments. The study aimed to validate a model of NAFLD induced by a highfat diet associated with changes in the glycemic response and without changes in redox homeostasis in mice.

Dieta hiperlipídica induz danos hepáticos associados à dhgna sem desequilíbrio redox no fígado de camundongos Swiss / Hyperlipid diet induces NAFLD associated liver damage without redox imbalance in Swiss mice liver

A doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) é uma doença de prevalência crescente e fortemente associada ao desequilíbrio redox e à perda da homeostase glicêmica. O desenvolvimento de modelos in vivo que mimetizem características fisiopatológicas da mesma é essencial para a descoberta e o desenvolvimento de estratégias terapêuticas. Validar um modelo de DHGNA associado ao desequilíbrio redox e à intolerância à glicose, induzida por dieta hiperlipídica, de baixo custo e fácil reprodutibilidade. Dezesseis camundongos Swiss receberam dieta hiperlipidica, durante 10 semanas. Durante todo o experimento foram avaliados peso corporal, tolerância à glicose, marcadores do estresse oxidativo e morfologia hepática. A dieta hiperlipídica promoveu um aumento significativo dos níveis de triglicerídeos (p<0,05) e do peso do tecido hepático (p<0,01), além de severa inflamação, necrose e esteatose dos hepatócitos. Os animais que seguira a DH (dieta hiperlipídica) apresentaram ainda, uma menor tolerância à glicose (p <0,05), entretanto não apresentaram redução dos grupamentos tióis. O modelo de DHGNA, induzida por DH, foi associada a danos histológicos hepáticos e à intolerância à glicose, entretanto não apresentou desequilíbrio redox, sendo um modelo inviável para estudos com tratamentos com antioxidantes. O trabalho teve por objetivo validar um modelo de DHGNA induzido por dieta hiperlipídica associada a alterações na resposta glicêmica e sem modificações na homeostase redox em camundongos.(AU)

Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is an increasingly prevalent disease strongly associated with redox imbalance and loss of glycemic homeostasis. The development of in vivo models that mimics its pathophysiological characteristics is essential for the discovery and development of therapeutic strategies. To validate a NAFLD model associated with redox imbalance and low-fat diet-induced glucose intolerance and easily reproducible. Sixteen Swiss mice received a high fat diet for 10 weeks. Throughout the experiment, body weight, glucose tolerance, oxidative stress markers and liver morphology were evaluated. The hyperlipid diet promoted a significant increase in triglyceride levels (p<0.05) and liver tissue weight (p <0.01), in addition to severe inflammation, necrosis and steatosis of hepatocytes. The animals that followed the hyperlipidic diet (HD) still had a lower glucose tolerance (p<0.05), ), however it did not show reduction of thiol groups. The HD-induced NAFLD model was associated with liver histological damage and glucose intolerance, however it did not present redox imbalance, being an unfeasible model for studies with antioxidant treatments. The study aimed to validate a model of NAFLD induced by a highfat diet associated with changes in the glycemic response and without changes in redox homeostasis in mice.(AU)

Control of redox homeostasis in tick blood feeding

Introduction: Ticks are hematophagous ectoparasites that cause significate economical losses. Acaricide application is themain method to tick control. However, it causes environmental contamination and selects resistant ticks. The immunological control represents a suitable method to replace or complement acaricide application. During its life cycle, female ticksingest large amounts of blood, which contains toxic components able to damage biomolecules. Understanding which molecular mechanisms and proteins are involved in avoid damages caused by blood intake in ticks and other hematophagousarthropods could help to found potential candidate antigens to compose an anti-tick vaccine.Review: Hemoglobin comprises almost 20% of mammalian blood proteins, its hydrolysis during tick digestion increasestotal free heme that can potentially generate reactive oxygen species (ROS), which easily oxidize lipids, proteins and DNA,modifying they structure and function. Lipids are more susceptible to high ROS levels. It can lead to membrane instabilityand cell death. Protein modifications caused by ROS can promote the protein loss of function and cell disturbance, however,it can also work as post-translational modifications, acting in cell signaling processes. DNA presents more efficient protective mechanisms against ROS, but damages can lead to double helix rupture. Oxidative stress is defined as a disturbance inthe balance between the production and elimination of ROS, in favor of ROS production, leading to a disruption in redoxhomeostasis and/or molecular damage. Despite the well-recognized heme oxidative power and its already demonstratedcytotoxicity, ticks are able to feed on blood, controlling the redox homeostasis without causing oxidative stress. This occurs because ticks developed physiological adaptations to transport, store, metabolize and secrete toxic components fromthe diet. The strategies, such as heme compartmentalization in specialized organelles...

Control of redox homeostasis in tick blood feeding

Introduction: Ticks are hematophagous ectoparasites that cause significate economical losses. Acaricide application is themain method to tick control. However, it causes environmental contamination and selects resistant ticks. The immunological control represents a suitable method to replace or complement acaricide application. During its life cycle, female ticksingest large amounts of blood, which contains toxic components able to damage biomolecules. Understanding which molecular mechanisms and proteins are involved in avoid damages caused by blood intake in ticks and other hematophagousarthropods could help to found potential candidate antigens to compose an anti-tick vaccine.Review: Hemoglobin comprises almost 20% of mammalian blood proteins, its hydrolysis during tick digestion increasestotal free heme that can potentially generate reactive oxygen species (ROS), which easily oxidize lipids, proteins and DNA,modifying they structure and function. Lipids are more susceptible to high ROS levels. It can lead to membrane instabilityand cell death. Protein modifications caused by ROS can promote the protein loss of function and cell disturbance, however,it can also work as post-translational modifications, acting in cell signaling processes. DNA presents more efficient protective mechanisms against ROS, but damages can lead to double helix rupture. Oxidative stress is defined as a disturbance inthe balance between the production and elimination of ROS, in favor of ROS production, leading to a disruption in redoxhomeostasis and/or molecular damage. Despite the well-recognized heme oxidative power and its already demonstratedcytotoxicity, ticks are able to feed on blood, controlling the redox homeostasis without causing oxidative stress. This occurs because ticks developed physiological adaptations to transport, store, metabolize and secrete toxic components fromthe diet. The strategies, such as heme compartmentalization in specialized organelles...(AU)

Physical preparation and antioxidant supplementation for endurance racehorses / Preparação física e suplementação antioxidante para cavalos de enduro

The objective of this review is to discuss aspects of the practice of endurance racing and alternatives to reduce oxidative stress in horses. Characterized by a high aerobic effort and requirement of the organic systems for maintenance of homeostasis, the endurance race is a form of sport for horses that demands great attention to the physical preparation of these animals and must be progressive, paying attention to the physiological parameters to evaluate the adaptation of the organism. To begin the preparation, the animals must be at least five years old and the duration can be on average of three years. Another factor that may be detrimental to the health and well-being of competing horses is the occurrence of oxidative stress, due to the accumulation of free radicals in the tissues, generating post-exercise muscle injuries. Antioxidant supplementation has been an alternative to this disorder. Several studies using compounds rich in antioxidant enzymes, such as superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione peroxidase (GPx), demonstrate positive effects on antioxidant status, markers of oxidative stress and muscle enzymes, which may represent an improvement in performance during the exercise and recovery of animals destined to the practice of equestrian sports. Therefore, a correct physical preparation becomes crucial and antioxidant supplementation may be used to maintain the health and well-being of horses destined to the equestrian endurance practice.(AU)

Objetivou-se com esta revisão discutir aspectos da prática de enduro equestre e alternativas para reduzir o estresse oxidativo em cavalos. Caracterizado por um alto esforço aeróbio e exigência dos sistemas orgânicos para manutenção da homeostase, o enduro equestre é uma modalidade de esporte para cavalos que exige grande atenção à preparação física desses animais e deve ser progressiva, atentando-se aos parâmetros fisiológicos para avaliar a adaptação do organismo. Para iniciar a preparação, os animais devem ter pelo menos cinco anos de idade e a duração pode ser em média de três anos. Outro fator que pode ser prejudicial para a saúde e o bem-estar dos cavalos concorrentes é a ocorrência de estresse oxidativo, por acúmulo de radicais livres nos tecidos, gerando lesões musculares pósexercício. A suplementação com antioxidantes tem sido uma alternativa a esta desordem. Vários estudos utilizando compostos ricos em enzimas antioxidantes, como superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa peroxidase (GPx), demonstram efeitos positivos no estado antioxidante, marcadores de estresse oxidativo e enzimas musculares, o que pode representar uma melhora no desempenho durante o exercício e recuperação de animais destinados à prática de esportes equestres. Portanto, uma preparação física correta torna-se crucial, podendo-se recorrer à suplementação antioxidante para manter a saúde e o bem-estar dos cavalos destinados à prática de enduro equestre.(AU)

Physical preparation and antioxidant supplementation for endurance racehorses / Preparação física e suplementação antioxidante para cavalos de enduro

The objective of this review is to discuss aspects of the practice of endurance racing and alternatives to reduce oxidative stress in horses. Characterized by a high aerobic effort and requirement of the organic systems for maintenance of homeostasis, the endurance race is a form of sport for horses that demands great attention to the physical preparation of these animals and must be progressive, paying attention to the physiological parameters to evaluate the adaptation of the organism. To begin the preparation, the animals must be at least five years old and the duration can be on average of three years. Another factor that may be detrimental to the health and well-being of competing horses is the occurrence of oxidative stress, due to the accumulation of free radicals in the tissues, generating post-exercise muscle injuries. Antioxidant supplementation has been an alternative to this disorder. Several studies using compounds rich in antioxidant enzymes, such as superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione peroxidase (GPx), demonstrate positive effects on antioxidant status, markers of oxidative stress and muscle enzymes, which may represent an improvement in performance during the exercise and recovery of animals destined to the practice of equestrian sports. Therefore, a correct physical preparation becomes crucial and antioxidant supplementation may be used to maintain the health and well-being of horses destined to the equestrian endurance practice.

Objetivou-se com esta revisão discutir aspectos da prática de enduro equestre e alternativas para reduzir o estresse oxidativo em cavalos. Caracterizado por um alto esforço aeróbio e exigência dos sistemas orgânicos para manutenção da homeostase, o enduro equestre é uma modalidade de esporte para cavalos que exige grande atenção à preparação física desses animais e deve ser progressiva, atentando-se aos parâmetros fisiológicos para avaliar a adaptação do organismo. Para iniciar a preparação, os animais devem ter pelo menos cinco anos de idade e a duração pode ser em média de três anos. Outro fator que pode ser prejudicial para a saúde e o bem-estar dos cavalos concorrentes é a ocorrência de estresse oxidativo, por acúmulo de radicais livres nos tecidos, gerando lesões musculares pósexercício. A suplementação com antioxidantes tem sido uma alternativa a esta desordem. Vários estudos utilizando compostos ricos em enzimas antioxidantes, como superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa peroxidase (GPx), demonstram efeitos positivos no estado antioxidante, marcadores de estresse oxidativo e enzimas musculares, o que pode representar uma melhora no desempenho durante o exercício e recuperação de animais destinados à prática de esportes equestres. Portanto, uma preparação física correta torna-se crucial, podendo-se recorrer à suplementação antioxidante para manter a saúde e o bem-estar dos cavalos destinados à prática de enduro equestre.

Investigation of the effect of gestational diabetes on fetal cardiac tissue in streptozotocin induced in rats

Purpose: To investigate the cause of congenital anomalies resulted from gestational diabetes on fetal cardiac tissue in experimental animal study model. Methods: Totally 12 female Wistar albino rats were divided into two groups, each consisting of 6 rats. Streptozotocin (60 mg/kg) was administered intraperitoneally to the study group by dissolving in citrate solution. The rats with a blood glucose level of 200 mg/dL and above were considered to be diabetic rats. Total antioxidant status (TAS), total oxidative stress (TOS) and oxidative stress index (OSI) values were calculated in the cardiac tissues and maternal serum samples of the fetuses delivered by cesarean section after the mating process. The cardiac tissues were also subjected to histopathological examination. Results: TOS and OSI values in fetal cardiac tissues of the diabetic rats were found to be significantly higher than that of the control group (p=0.026 and p=0.005). Histopathological examination revealed that the mitotic index was lower and the cell organization was found to be damaged in the fetuses of the study group rats. Conclusion: Increased levels of free oxygen radicals considered to be due to hyperglycemia may cause congenital anomalies, especially during organogenesis period, by disrupting cell homeostasis and adversely affecting mitosis.(AU)

Influência da aplicação tópica de hidrogeis contendo nanocápsulas de indol-3-carbinol na fase aguda da cicatrização de feridas cutâneas de ratos.

A incidência de ferimentos cutâneos é alta e a cicatrização da área lesionada é essencial, uma vez que o tecido tegumentar constitui uma barreira corporal física contra os agentes lesivos. A integridade da pele, favorece a manutenção da homeostasia corpórea pois este tecido possui mecanismos de defesas antioxidantes para reduzir os efeitos nocivos gerados pelos radicais livres. Os tratamentos tópicos contendo agentes cicatrizantes se destacam por ser de fácil adesão, aplicação e diminuído risco de toxicidade, além de apresentar vantagens no processo de cicatrização. Para obtenção de cicatrização ideal, novas apresentações medicamentosas que melhorassem a qualidade e que não causem danos oxidativos ao tecido de granulação são atuais objetos de estudo. Os hidrogéis entre as formas farmacêuticas, destacam-se por sua habilidade de favorecer a cicatrização, além do amplo espectro de indicação. Agindo como carreadores de substâncias ativas, as nanocápsulas promovem a estabilidade, a liberação sustentada e a modulação da permeação cutânea do princípio ativo. Sendo assim, a associação de hidrogéis a ativos nanoencapsulados de maneira tópica mostra-se benéfica, pelo menor risco de citotoxicidade e por apresentar menores concentrações do fármaco. O indol-3-carbinol (I3C) é obtido através da hidrólise da glicobrassicina e possui atividade antitumoral, antioxidante, anti-inflamatória e antinociceptiva já validadas cientificamente, entretanto a verificação de sua atividade cicatrizante, sobretudo em estruturas nanoencapsuladas, não foi elucidada até o presente momento. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi estudar o efeito da aplicação tópica de formulações de hidrogéis contendo I3C livre e nanoencapsulado na cicatrização de feridas cutâneas de ratos. Foram utilizados 37 ratos Wistar adultos machos, distribuídos em cinco grupos experimentais (n=7-8): I) Controle; II) Alantoína 1%, III) I3C livre; IV) Nano-branca (NB) e V) Nanocápsula de I3C (N-I3C). Após o período de aclimatação, foi realizada excisão cutânea de área total de 2 cm², na pele da região dorsal, entre as escápulas. Posteriormente, os diferentes tratamentos tópicos foram aplicados na área excisada durante cinco dias experimentais. Nos dias 1(basal), 3 e 6 a área da ferida foi mensurada para avaliação da regressão (em % do basal). No sexto dia experimental os animais foram eutanasiados para análises do perfil oxidativo. Foi observado aumento do tamanho da ferida no 3º dia experimental, sendo menor nos grupos tratados, em relação ao controle. Ao 6º dia, a regressão foi menor no grupo I3C livre. O grupo que recebeu N-I3C apresentou menores níveis de peroxidação lipídica, carbonilação de proteínas e espécies reativas em relação ao controle e reduzida atividade da catalase e níveis de glutationa reduzida. Conclui-se que feridas tratadas com I3C nanoencapsulado apresentam menores danos oxidativos na fase inflamatória e proliferativa.

The incidence of cutaneous wounds is high and the healing of the injured area is essential, since the integumentary tissue constitutes a body barrier against the harmful agents. The integrity of the skin, favors the maintenance of body homeostasis because this tissue has an antioxidant defense mechanism to reduce the harmful effects generated by free radicals. Treatments containing healing agents stand out for being easy to adhere to, application and reduced risk of toxicity, in addition to presenting advantages in the healing process. To obtain optimal healing, new drug presentations that improve quality and do not cause oxidative damage to granulation tissue are current objects of study. Among the pharmaceutical formulas, hydrogels stand out for their ability to promote healing and be indicated for various types of wounds. On the other hand, acting as carriers of active substances, such as nanocapsules, promote stability, sustained release and modulation of skin permeation of the active principle. Therefore, an association of hydrogels with nanoencapsulated actives is highly beneficial, due to the lower risk of cytotoxicity and because it has smaller edges of the drug. Indole-3-carbinol (I3C) is superior through the hydrolysis of glycobrassicin and has antitumor, antioxidant, anti-inflammatory and antinociceptive activity that have already been scientifically validated, however the verification of its healing activity, especially in nanoencapsulated structures, has not been elucidated so far. Thus, the aim of this work was to study the effect of topical application of hydrogel formulations containing free and nanoencapsulated I3C on the healing of skin wounds in rats. There were 37 adults male Wistar rats, distributed in 5 experimental groups (n = 7-8): I) Control; II) 1% allantoin, III) free I3C; IV) Nano-blank (NB) and V) I3C nanocapsule (N-I3C). After the acclimatization period, a cutaneous excision of a total area of 2 cm² was performed on the skin of the dorsal region, between the scapulae. Subsequently, the different topical treatments were applied to the excised area for 5 experimental days. On days 1 (baseline), 3 and 6 the wound area was measured to assess regression (in% of baseline). On the sixth experimental day, the animals were euthanized for analysis of the oxidative profile. An increase in the size of the wound was observed on the 3rd experimental day, being lower in the treated groups, compared to the control. On the 6th day, regression was lower in the free I3C group. The group that received N-I3C showed lower levels of lipid peroxidation, protein carbonylation and reactive species in relation to the control and reduced catalase activity and reduced glutathione levels. It is concluded that wounds treated with nanoencapsulated I3C present less oxidative damage in the early stages of the healing process

Effects of B vitamins and hydroxy trace minerals supplementation on hepatic metabolism of beef cattle at finishing phase

Vitaminas do complexo B e micro minerais são descritos como fatores cruciais envolvidos em diversas vias biológicas do metabolismo energético, resposta imune e outras, apresentando sua biodisponibilidade comprometida em animais de alta produção. Apesar do conhecimento atual dos efeitos das vitaminas do complexo B e micro minerais no desempenho animal, seu uso como forma protegida da degradação ruminal e impacto no metabolismo do fígado em bovinos de corte na fase de terminação é pouco conhecido. O objetivo do presente estudo, então, foi compreender os efeitos da suplementação de vitaminas do complexo B protegidas e hidroxi micro minerais durante a fase de terminação no proteoma hepático. Para isto, foi utilizado 20 machos Nelore não-castrados com peso inicial de 353 ± 43 kg distribuidos aleatoriamente em um dos seguintes tratamentos: CTRL fornecimento de micro minerais orgânicos sem a suplementação de vitaminas do complexo B protegidas; SUP suplementação de hidroxi micro minerais (Cu e Zn) e de vitaminas do complexo B protegidas (B5, B6, B7, B9, e B12). Todos animais foram submetidos à mesma quantidade das dietas expermentais por um período de 106 dias e, ao final do período experimental, foi realizada biópsia do fígado. Utilizamos a técnica de proteômica shotgun combinada com análises de interação de proteínas e de vias biológicas das proteínas diferencialmente abundantes, identificando 37 proteínas mais abundantes no tratamento SUP (P < 0,10). Estas foram relacionadas ao dobramento de proteínas (P = 0,04), complexo I (P = 0,01) e IV (P = 0,01) da cadeia transportadora de elétrons, chaperonas moleculares (P = 0,01), metabolismo de glutationa (P < 0,01) e outras envolvidas na resposta ao estresse oxidativo. Estes resultados indicam que a suplementação de vitamina B e hidroxi minerais protegidos da degradação ruiminal durante a fase de terminação altera a abundância de proteinas associadas a cadeia transportadora de elétrons e outras vias de oxidação-redução, aumentando a produção de espécies reativas de oxigênio. Tais alterações parecem modular a abundância de proteínas ligadas a resposta à danos oxidativos, mantendo, assim, a homeostase celular.

Vitamin B and trace minerals are crucial molecular signals involved in many biological pathways of energy metabolism, immune response, and others, being their bioavailability compromised in high-producing ruminant animals. Despite the current knowledge of the effects of vitamin B complex and trace minerals on animal performance, their use as a rumen-protected form and its impact on liver metabolism in finishing beef cattle is poorly known. The present study aimed to assess the effects of rumen-protected B-vitamin blend and hydroxy trace minerals on the hepatic proteome. A total of 20 non-castrated Nellore males with 353 ± 43 kg of initial body weight were randomly assigned to one of the following treatments: CTRL inorganic trace minerals without supplementation of protected vitamin B blend; SUP supplementation of hydroxy trace minerals (Cu and Zn) and protected vitamin B blend (B5, B6, B7, B9, and B12). All animals were fed whit the same level of the experimental diet for 106 days and liver biopsy was performed at the end of the experimental period. We use shotgun proteomics combined with biological and network analyses of the protein differentially abundant between treatments, showing 37 proteins differentially abundant (P < 0.10) between treatment groups, where all proteins were up-regulated in the SUP treatment. These proteins were related to protein folding (P = 0.04), mitochondrial respiratory chain complex I (P = 0.01), and IV (P = 0.01), chaperonin-containing T-complex 2 (P = 0.01), glutathione metabolism (P < 0.01) and others linked to oxidative stress response. These results indicate that rumen-protect vitamin B and hydroxyl trace minerals supplementation during the finishing phase alters the abundance of proteins associated with the electron transport chain and other oxidation-reduction pathways, boosting the production of reactive oxygen species. Such alteration appears to modulate proteins linked to oxidative damage response to maintain cellular homeostasis.

Regulação da Atividade Macrofágica pela Aspirina 15 cH in vitro

Plaquetas e endotélio de vasos interagem em direção da homeostase circulatória durante processos inflamatórios, contudo, efeitos paradoxais podem ocorrer em função do balanço entre mediadores anti e prótrombóticos. A administração de uma única e alta dose de Aspirina pode ocasionar a formação de trombos arteriais em oito a dez dias. Tem-se observado que Aspirina ultradiluída também promove trombogênese após uma hora de administração, porém não é sabido se ambos os casos envolvem a mesma via regulatória. Os efeitos antitrombóticos de altas doses podem ser revertidos pela ação protrombótica da Aspirina ultradiluída. Para compreender os mecanismos envolvidos nessa regulação, postula-se que a Aspirina ultradiluída tenha seu mecanismo de ação relacionado a efeito rebote envolvendo COX-2 e células inflamatórias, como macrófagos. Objetivo: Estudar os efeitos da Aspirina 15 cH sobre macrófagos ativados ou não por LPS, um ativador de COX-2. Métodos: Água, água sucussionada e Aspirina 200 µg/ml foram usadas como controle. A atividade macrofágica foi estudada mediante avaliação de espraiamento; dosagens de óxido nítrico, peróxidos, citocinas, quimiocinas; expressão de receptores TLR4, viabilidade celular e produção intracelular de espécies reativas de oxigênio. Resultados: O tratamento das células com Aspirina 15 cH levou ao aumento no spreading e produção de H2O2 com a mesma magnitude do LPS, mas anulou seu efeito quando administrados ambos conjuntamente. A Aspirina 200 µg/ml produziu efeito anti-inflamatório clássico em todos os parâmetros analisados, revertendo os efeitos do LPS. A água sucussionada per se mostrou efeitos pró-inflamatórios independente do LPS, como aumento de spreading e redução de IL 10; ação regulatória sobre a produção de TNF e H2O2 e aumento na atividade oxidativa celular, com efeito paradoxal após estímulo com LPS. O tratamento com Aspirina 15 cH não alterou a atividade oxidativa intracelular, mas água sucussionada elevou o número absoluto de células que expressam essa atividade. A expressão de TLR-4, por sua vez, foi significativamente maior nos grupos tratados com LPS, independentemente dos co-tratamentos. Conclusão: O efeito paradoxal da Aspirina 15 cH observado in vivo foi reproduzido neste modelo in vitro. A Aspirina 15 cH isoladamente ou em associação com LPS produz efeitos antagônicos, com reversão de efeitos sobre spreading e produção de H2O2. Especula-se que sua ação seja sobre as proteínas dos microtúbulos, favorecendo o spreading. A Aspirina 200 µg/ml produz efeitos anti-inflamatórios clássicos e a água sucussionada produz efeitos pró-inflamatórios e regulação de TNF e H2O2 após o estímulo com LPS.

Introduction: platelets and endothelium interact towards circulatory homeostasis during inflammatory processes however, paradoxical effects may occur due to the balance between anti and prothrombotic mediators. The administration of a single high dose of Aspirin can lead to the formation of arterial thrombi in eight to ten days. It has been observed that ultra-diluted aspirin also promotes thrombogenesis after one hour of administration, but it is not known whether both cases involve the same regulatory pathway. The antithrombotic effects of high doses can be reversed by the prothrombotic action of ultra-diluted aspirin. To understand the mechanisms involved in this regulation, it is postulated that ultra-diluted aspirin has its mechanism of action related to a rebound effect involving COX-2 and inflammatory cells, such as macrophages. Objective: To study the effects of Aspirin 15 cH on macrophages activated or not by LPS, a COX-2 activator. Methods: Water, sucussed water and Aspirin 200 µg/ml were used as controls. The macrophage activity was studied by means of spreading evaluation; nitric oxide, peroxides, cytokines, and chemokines measurements; expression of TLR4 receptors; cell viability and intracellular production of reactive oxygen species. Results: The treatment of cells with Aspirin 15 cH led to increase in the cell spreading and production of H2O2, with the same magnitude as LPS did, but nullified its effect when both were administered together. Aspirin 200 µg/ml produced a classic anti-inflammatory effect in all parameters analyzed, reversing the effects of LPS. Sucussed water per se showed pro-inflammatory effects independent of LPS, such as increase in the cell spreading and reduction of IL 10; as well as regulatory action on the production of TNF and H2O2. Moreover, it increased the cellular oxidative activity, with paradoxical effect after stimulation with LPS. Treatment with Aspirin 15 cH did not change the intracellular oxidative activity, but sucussed water increased the absolute number of cells that express this activity. TLR-4 expression, in turn, was significantly higher in LPS-treated groups, regardless of the co-treatments. Conclusion: The paradoxical effect of Aspirin 15 cH observed in vivo was reproduced in this in vitro model. Aspirin 15 cH alone or in association with LPS produces antagonistic effects, with reversal of the effects on spreading and production of H2O2. It is speculated that it could act on microtubule proteins, favoring the spreading. Aspirin 200 µg/ml produces classic anti-inflammatory effects and sucussed water produces pro-inflammatory effects and regulation of TNF and H2O2 after being stimulated with LPS.

Suplementação de Probiótico (Bacillus cereus e Bacillus subtilis) em dietas para Rhamdia quelen e seus efeitos no desenvolvimento reprodutivo e zootécnico

Bactérias probióticas atuam no intestino do hospedeiro para o equilíbrio da microbiota, desencadeando diferentes efeitos direcionados a homeostase. Nesse sentido, estudos relacionados ao uso de aditivo probiótico para o jundiá são de extrema relevância para o desenvolvimento produtivo de espécies nativas. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de aditivo probiótico (Bacillus subtilis e Bacillus cereus) em dietas para jundiá Rhamdia quelen sobre o desempenho produtivo, reprodutivo e respostas fisiológicas. Foram utilizados 300 juvenis de jundiá com peso inicial médio de 17,35±0,97g, alimentados durante 90 dias com dietas contendo níveis crescentes do aditivo probiótico (0,15; 0,30; 0,45 e; 0,60 g. Kg-1 de ração de B. subtilis e B. cereus nas concentrações de 4×1011 UFC) e uma dieta controle. O experimento foi dividido em duas etapas, sendo o ensaio 1: desempenho zootécnico e ensaio 2: desempenho reprodutivo. No desempenho produtivo, a composição centesimal, rendimento de carcaça, parâmetro bioquímicos séricos e estresse oxidativo apresentaram alterações quando utilizado probiótico nas dietas. O desenvolvimento das vilosidades intestinais dos jundiás foi influenciado pela inclusão do aditivo probiótico nas dietas, assim como a atividade de células muco-secretoras no tecido. O crescimento dos hepatócitos apresentou diferenciações quanto aos níveis de probiótico. Na avaliação do desenvolvimento reprodutivo dos peixes, nos machos o aditivo influenciou no volume seminal relativo, sobrevivência dos espermatozoides, índices gonadossomático, hepatossomático e gordura viscerossomática, frequência de batimento transposto, velocidade de deslocamento, taxa de motilidade e retilinearidade. Nas fêmeas, o uso do probiótico influenciou na proporção de fêmeas desovantes, taxa de fertilização e gordura viscerossomática. O uso do probiótico influenciou no desenvolvimento das células germinativas, integridade hepática e características de desenvolvimento dos hepatócitos. Portanto, a inclusão de 0,60g. kg-1 de probiótico em dietas para jundiás proporciona o desenvolvimento dos peixes, maximizando processos fisiológicos, mantendo a saúde dos animais e melhorando o desempenho produtivo e reprodutivo

Probiotic bacteria act in the host's intestine to balance the microbiota, triggering different effects directed to homeostasis. In this sense, studies related to the use of probiotic additive for silver catfish are extremely relevant for the productive development of native species. The objective was to evaluate the effect of probiotic additive (Bacillus subtilis and Bacillus cereus) in diets for silver catfish Rhamdia quelen on the productive performance, reproductive and physiological responses. 300 silver catfih juveniles with an average initial weight of 17.35 ± 0.97g were used, fed for 90 days with diets containing increasing levels of the probiotic additive (0.15; 0.30; 0.45 and 0.60 g. Kg-1 of feed of B. subtilis and B. cereus in concentrations of 4×1011 CFU) and a control diet. The experiment was divided into two stages, with trial 1: productive performance and trial 2: reproductive performance. In the productive performance, the centesimal composition, carcass yield, serum biochemical parameters and oxidative stress showed changes when using probiotics in diets. The development of the intestinal villi of the silver catfish was influenced by the inclusion of the probiotic additive in the diets, as well as the activity of mucus-secreting cells in the tissue. The growth of hepatocytes showed differences in terms of probiotic levels. In the evaluation of the reproductive development of fish, in males the additive influenced the relative seminal volume, sperm survival, gonadosomatic, hepatosomatic and viscerosomatic fat, frequency of transposed beating, displacement speed, motility rate and rectilinearity. In females, the use of probiotic influenced the proportion of spawning females, fertilization rate and viscerosomatic fat. The use of probiotic influenced the development of germ cells, liver integrity and development characteristics of hepatocytes. Therefore, the inclusion of 0.60g. kg-1 of probiotic in diets for silver catfish provides the development of fish, maximizing physiological processes, maintaining the health of animals and improving the productive and reproductive performance

POTENCIAL ANTIOXIDANTE DOS BIOATIVOS PRESENTES NO ÓLEO ESSENCIAL DE Syzygium aromaticum L. NA MATURAÇÃO IN VITRO DE OÓCITOS BOVINOS

O óleo essencial de Syzygium aromaticum (OESA) possui comprovada atividade antioxidante. Contudo, por seus bioativos serem de diferentes constituições, é necessária a aplicação de estudos bioguiados para denotar o maior potencial antioxidante do OESA, bem como determinar a concentração ideal. Assim, considerando que a produção in vitro de embriões (PIVE) em bovinos apresenta eficiência variável em virtude das condições de estresse oxidativo, a suplementação do meio com esses compostos pode ser uma alternativa para otimizar a técnica. Portanto, o objetivo foi avaliar o potencial antioxidante dos bioativos isolados do OESA em oócitos bovinos, sobre a maturação nuclear e citoplasmática, viabilidade das células do cumulus, níveis de espécies reativas de oxigênio (EROs), níveis de glutationa intracelular (GSH), potencial de membrana mitocondrial (m), desenvolvimento embrionário partenogenético (Etapa 1); e diferentes concentrações do bioativo definido na primeira etapa sobre os mesmos parâmetros (Etapa 2). Para tanto, oócitos foram maturados nas seguintes suplementações: OESA20 (20 g/mL OESA), EUG (83 M eugenol), -CA (19 M -cariofileno), ACT (12 M acetato de eugenila), CIS (100 M cisteamina) e controle (sem antioxidante) para a Etapa 1; e eugenol E83 (83 M eugenol), E100 (100 M eugenol), E120 (120 M eugenol), controle positivo (100 M cisteamina) e controle negativo (sem antioxidante) para Etapa 2. Na etapa 1, todos os antioxidantes foram superiores ao controle nas taxas de metáfase II (MII, P < 0,05). Contudo, EUG, OESA20 e CIS aumentaram as taxas de extrusão do primeiro corpúsculo polar (1CP, P < 0,05). Além disso, EUG apresentou taxas de expansão e viabilidade das células do cumulus superiores aos demais grupos (P < 0,05). As taxas de maturação citoplasmática por distribuição mitocondrial foram maiores nos grupos EUG e ACT, e para os padrões de agregação mitocondrial se destacaram EUG, ACT e CIS (P < 0,05). Os níveis de EROs foram reduzidos e os de GSH aumentaram com o EUG e CIS (P < 0,05). Ainda, todos os grupos mostraram menores níveis de m comparado ao grupo controle e -CA (P < 0,05). EUG, OESA20 e CIS promoveram maiores taxas de clivagem e qualidade embrionária, mas o EUG promoveu uma maior taxa de blastocistos e estruturas com 8 células (P < 0,05). Apesar da ação dos demais bioativos serem positivas, o eugenol promoveu a maior atividade e foi usado na etapa seguinte. Na etapa 2, as taxas de MII foram superiores para E83 quando comparados aos demais grupos (P < 0,05). E83, E120 e o controle positivo aumentaram as taxas de 1CP (P < 0,05). E83 e controle positivo resultaram em expansão e viabilidade de células cumulus superiores (P < 0,05). A maturação citoplasmática não diferiu entre os grupos com antioxidantes, mas, a agregação mitocondrial se destacou em E83 e controle positivo (P < 0,05). Um m menor foi mostrado nos grupos suplementados com antioxidantes (P < 0,05). Os níveis de EROs reduziram com os grupos E83 e controle positivo, e os de GSH aumentaram com esses e o E120 (P < 0,05). A taxa de clivagem e o número de blastocistos eclodidos foi maior em E83, assim como a qualidade embrionária (P < 0,05). Em conclusão, apesar do -CA e ACT terem efeitos antioxidantes, 83 M de eugenol adicionado aos meios de MIV foi a mais interessante alternativa entre os bioativos para a manutenção da qualidade de oócitos bovinos, bem como promover o aumento do subsequente desenvolvimento embrionário.

The Syzygium aromaticum essential oil (EOSA) has proven antioxidant activity. Nevertheless, because its bioactive substances are of different constitutions, it is necessary to apply bioguided studies to denote the greater antioxidant potential of EOSA, as well as to determine the ideal concentration. Thus, considering that the in vitro embryo production (IVEP) in cattle has variable efficiency, due to oxidative stress conditions, medium supplementation with these compounds may be an alternative to optimize the technique. Therefore, the aim was to evaluate the antioxidant potential of EOSA bioactives in bovine oocytes on nuclear and cytoplasmic maturation, viability of cumulus cells, levels of reactive oxygen species (ROS), levels of intracellular glutathione (GSH), mitochondrial membrane potential (m), parthenogenetic embryonic development (Step 1); and different concentrations of the bioactive defined in the first step on the same parameters (Step 2). Oocytes were matured in the following supplements: EOSA20 (20 g/mL EOSA), EUG (83 M eugenol), -CA (19 M -caryophyllene), ACT (12 M acetyl acetate), CYS (100 M cysteamine) and control (without antioxidant) for step 1; and E83 (83 M eugenol), E100 (100 M eugenol), E120 (120 M eugenol), positive control (100 M cysteamine) and negative control (without antioxidant) for step 2. In the step 1, all antioxidants were superior to the control for metaphase II (MII) rates (P < 0.05). Nevertheless, EUG, EOSA20 and CYS increased the extrusion rates of the first polar body (1PB, P < 0.05). Moreover, EUG showed a superior expansion and viability of the cumulus cells rates (P < 0.05). The rates of cytoplasmic maturation by mitochondrial distribution were higher in the EUG and ACT, and for the patterns of mitochondrial aggregation EUG, ACT and CYS stood out (P < 0.05). ROS levels were reduced and GSH levels were increased with EUG and CYS (P < 0.05). All groups showed lower levels of m compared to the control and -CA (P < 0.05). EUG, EOSA20 and CYS promoted higher rates of cleavage and embryonic quality, but EUG promoted a higher rate of blastocysts and structures with 8 cells in the cleavage (P < 0.05). Although the action of the other bioactive agents was positive, eugenol promoted the greatest activity and was used in the next step. In the step 2, the MII rates were higher in the E83 when compared other groups (P < 0.05). E83, E120 and the positive control increased the rates of 1PB (P < 0.05). E83 and positive control resulted in higher expansion and viability of cumulus cells (P < 0.05). Cytoplasmic maturation did not differ among groups with antioxidants, but mitochondrial aggregation stood out in E83 and positive control (P < 0.05). A lower m was shown in the groups supplemented with antioxidants (P < 0.05). The ROS levels decreased with E83 and positive control, and the GSH levels increased with these and the E120 (P < 0.05). The cleavage rate and the number of hatched blastocysts was higher in the E83, as well as the embryonic quality (P < 0.05). In conclusion, although -CA and ACT have positive antioxidant effects, 83 M of eugenol added to IVM medium was the most interesting alternative among bioactive agents for maintaining the quality of bovine oocytes, as well as promoting the increase of subsequent embryonic development.

Ferramentas para avaliação da funcionalidade da mitocôndria espermática / Tools for evaluating the functionality of sperm mitochondria

A mitocôndria é a principal fonte de energia para a motilidade e a homeostase espermática. Durante afosforilação oxidativa são produzidos metabólitos, denominados espécies reativas de oxigênio (EROs), as quaisdesempenham papel fundamental nos processos fisiológicos. No entanto, disfunções mitocondriais podem causardesequilíbrio entre a produção de EROs e os mecanismos antioxidantes, provocando o estresse oxidativo, letalpara a célula espermática. Assim, como essa organela está envolvida tanto nos processos fisiológicos quanto nospatológicos dos espermatozoides, fica clara a importância de se avaliar sua funcionalidade. Portanto, o objetivodesta revisão é descrever as possíveis técnicas de avaliação da funcionalidade das mitocôndrias espermáticas pormeio da atividade e do potencial da membrana mitocondrial, da mensuração dos níveis de ATP e ADP e damensuração dos níveis de cálcio.(AU)

Mitochondria are the major source of energy for sperm motility and to the homeostasis. During theoxidative phosphorylation metabolites called Reactive Oxygen Species (ROS), are produced and play a key rolefor the physiological processes. However, mitochondrial dysfunctions can cause an imbalance between ROSproduction and antioxidant mechanisms cause oxidative stress, lethal for spermatozoa. Thus, as this organelle isinvolved both in physiological or pathological processes of sperm, it is clear the importance of evaluating itsfunctionality. Therefore, the aim of this review is to describe the possible techniques for assessing functionalityof sperm mitochondria and these assessments of activity and mitochondrial membrane potential, measuring thelevels of ATP and ADP and measurement the levels of calcium.(AU)

Ferramentas para avaliação da funcionalidade da mitocôndria espermática / Tools for evaluating the functionality of sperm mitochondria

A mitocôndria é a principal fonte de energia para a motilidade e a homeostase espermática. Durante afosforilação oxidativa são produzidos metabólitos, denominados espécies reativas de oxigênio (EROs), as quaisdesempenham papel fundamental nos processos fisiológicos. No entanto, disfunções mitocondriais podem causardesequilíbrio entre a produção de EROs e os mecanismos antioxidantes, provocando o estresse oxidativo, letalpara a célula espermática. Assim, como essa organela está envolvida tanto nos processos fisiológicos quanto nospatológicos dos espermatozoides, fica clara a importância de se avaliar sua funcionalidade. Portanto, o objetivodesta revisão é descrever as possíveis técnicas de avaliação da funcionalidade das mitocôndrias espermáticas pormeio da atividade e do potencial da membrana mitocondrial, da mensuração dos níveis de ATP e ADP e damensuração dos níveis de cálcio.

Mitochondria are the major source of energy for sperm motility and to the homeostasis. During theoxidative phosphorylation metabolites called Reactive Oxygen Species (ROS), are produced and play a key rolefor the physiological processes. However, mitochondrial dysfunctions can cause an imbalance between ROSproduction and antioxidant mechanisms cause oxidative stress, lethal for spermatozoa. Thus, as this organelle isinvolved both in physiological or pathological processes of sperm, it is clear the importance of evaluating itsfunctionality. Therefore, the aim of this review is to describe the possible techniques for assessing functionalityof sperm mitochondria and these assessments of activity and mitochondrial membrane potential, measuring thelevels of ATP and ADP and measurement the levels of calcium.

Effects of L-arginine supplementation on the expression of genes involved with oxidative stress in swine embryos and fetuses

Durante o período inicial da gestação em leitoas com alta prolificidade, pode ocorrer estresse oxidativo elevado, que está associado com complicações na gravidez e tem influência negativa sobre o desenvolvimento dos conceptos. A arginina é um aminoácido condicionalmente essencial e tem conhecida capacidade antioxidante. No presente estudo, foram avaliados os efeitos da suplementação com 1,0 % de L-arginina (ARG) sobre genes e proteínas relacionadas ao estresse oxidativo de embriões (25 dias) e fetos (35 dias) de marrãs comerciais. Aos 25 dias de idade, não houve diferença estatística para os valores obtidos na expressão gênica entre os tratamentos. Houve tendência de dois genes nos fetos das marrãs do grupo controle (CON), SOD2 (P = 0,09) gene produtor de antioxidantes e EIF2AK4 (P = 0,07) relacionado com a fosforilação e ativação do fator de transcrição nrf2, que ativa diversos genes antioxidantes que fazem parte de sua via. A abundância de proteínas também não apresentou diferença significativa entre os tratamentos e em ambas as idades para as proteínas nrf2 e sod2. Estes resultados sugerem que a suplementação de L-arginina no período inicial da gestação em marrãs (ambas de 25 e 35 dias de idade) com o objetivo de diminuir as concentrações de ROS e o dano oxidativo, não foi eficaz, já que em ambos os tratamentos, a maioria dos genes e proteínas não apresentou diferença em seu desempenho para manter a homeostase redox, e os genes que apresentaram tendência em sua expressão não influenciaram a abundância de proteínas antioxidantes.

During early gestation in highly prolific gilts, elevated oxidative stress is reported to be associated with pregnancy complications and negatively influence conceptuses development. Arginine is a conditionally essential amino acid and have a known antioxidant capability. In the present work, it was evaluated the effects of 1.0% L-arginine supplementation (ARG) on oxidative stress related genes and proteins of commercial gilts embryos (25 days) and fetuses (35 days). In 25 days of age, there was no statistical difference between the treatments in gene expression. There was a trend of two genes in fetuses from control gilts (CON), SOD2 (P= 0.09) an antioxidant-producing gene and EIF2AK4 (P= 0.07) related with the phosphorylation and activation of nrf2 transcription factor, with activate numerous antioxidant genes in its pathway. Protein abundance also did not present a statistically difference between treatments and in both ages for the nrf2 and sod2 proteins. These results suggest that supplementation of L-arginine in early gestation in gilts (25 and 35 days of age) with the objective to lessen ROS concentrations and oxidative stress damage, is not effective, as in both treatments (ARG and CON), most genes and proteins did not present a significant difference in its performance to maintain a redox homeostasis, and the genes with a trend in its expression did not influence the antioxidant proteins abundance.