Plasticizer types and whey protein coatings on internal quality and shelf life of eggs stored for 42 days

Effects of plasticizer types and whey protein concentrate (WPC) as coatings were evaluated on internal quality and shelf life of eggs stored for 42 days. Eggs were coated with WPC at 8 % solution combined with the plasticizers glycerol (GLY), sorbitol (SOR), and propylene glycol (PRO). The eggs were stored at 20 °C. Weight loss, Haugh Unit (HU), albumen and yolk pH, and yolk index (YI) were evaluated weekly from day 0 to 42 days. After, electron microscopy of the eggshell structure was performed. The data was submitted to the analysis of variance and the effects of treatment, storage time, and the interaction between these factors were evaluated. There was significant interaction between factors (treatment and periods) for weight loss (p < 0.0001), HU (p < 0.0001), albumen (p < 0.0001), and yolk pH (p < 0.0001), and YI (p < 0.0001). After 42 days, uncoated eggs showed greater weight loss (5.4 %), compared to WPC+GLY, (3.8 %), WPC+SOR (3.3 %) and WPC+PRO (3.9 %). Similar results were verified for HU at 42 days of storage. Uncoated eggs showed HU of 58.46 (B), while coated eggs showed higher values: WPC+GLY – 66.58 (A), WPC+SOR – 68.79 (A), and WPC + PRO – 71.53 (A). The plasticizers GLY, SOR and PRO, associated with WPC, demonstrated effectiveness in maintaining the quality of eggs throughout the 42 days of storage. However, WPC+SOR showed superiority in preserving quality integrity of eggs. This result can be related to the chemical structure of SOR, making the combination more efficient for storage.

Plasticizer types and whey protein coatings on internal quality and shelf life of eggs stored for 42 days

Effects of plasticizer types and whey protein concentrate (WPC) as coatings were evaluated on internal quality and shelf life of eggs stored for 42 days. Eggs were coated with WPC at 8 % solution combined with the plasticizers glycerol (GLY), sorbitol (SOR), and propylene glycol (PRO). The eggs were stored at 20 °C. Weight loss, Haugh Unit (HU), albumen and yolk pH, and yolk index (YI) were evaluated weekly from day 0 to 42 days. After, electron microscopy of the eggshell structure was performed. The data was submitted to the analysis of variance and the effects of treatment, storage time, and the interaction between these factors were evaluated. There was significant interaction between factors (treatment and periods) for weight loss (p < 0.0001), HU (p < 0.0001), albumen (p < 0.0001), and yolk pH (p < 0.0001), and YI (p < 0.0001). After 42 days, uncoated eggs showed greater weight loss (5.4 %), compared to WPC+GLY, (3.8 %), WPC+SOR (3.3 %) and WPC+PRO (3.9 %). Similar results were verified for HU at 42 days of storage. Uncoated eggs showed HU of 58.46 (B), while coated eggs showed higher values: WPC+GLY 66.58 (A), WPC+SOR 68.79 (A), and WPC + PRO 71.53 (A). The plasticizers GLY, SOR and PRO, associated with WPC, demonstrated effectiveness in maintaining the quality of eggs throughout the 42 days of storage. However, WPC+SOR showed superiority in preserving quality integrity of eggs. This result can be related to the chemical structure of SOR, making the combination more efficient for storage.(AU)

Evaluation of propanediol and cobalamin metabolism in the intestinal colonization and systemic invasion of Salmonella Enteritidis in laying hens / [Avaliação do metabolismo do propanodiol e da cobalamina na colonização intestinal e na infecção sistêmica de Salmonella Enteritidis em poedeiras]

Embora Salmonella Enteritidis (SE) seja capaz de metabolizar 1,2-propanodiol (1,2-Pd), utilizado como fonte de carbono e de energia ao longo de uma rota dependente de vitamina B12, a importância deste composto na infeção de Gallus gallus domesticus por SE permanece desconhecida. No presente estudo, foram construídos um mutante de SE sem os genes pduCDE, que codifica a propanodiol desidratase (Pdu), e outro contendo as deleções no pduCDE e também nos genes cobS e cbiA, responsáveis pela síntese de vitamina B12. Em seguida, avaliou-se a importância do metabolismo do 1,2-Pd em SE para colonização intestinal de infecção sistêmica de poedeiras comerciais. As estirpes mutantes de SE foram capazes de colonizar o intestino, de serem excretadas nas fezes e de invadir o baço e o fígado na mesma intensidade que a estirpe selvagem, o que sugere que os produtos dos genes pduC, pduD, pduE, cobS e cbiA não são essenciais durante infecção por Salmonella Enteritidis nessa espécie.(AU)

Effects of cryoprotectants and low temperatures on hatching and abnormal embryo development of Prochilodus lineatus (Characiformes: Prochilodontidae)

This study evaluated the effect of the cryoprotectants and the low temperatures on the embryonic development of Prochilodus lineatus, describing their main morphological alterations. On chilling sensitivity test, the survival rates at the twenty somites stage (20S) were 53.6% at 0ºC, and 100% in 5ºC. To test toxicity, the embryos were exposed to a graded series of 1,2-Propanediol (PROP), dimethyl sulfoxide (Me2SO4) and glycerol (GLY), terminating in a solution of high osmolarity. There was no significant difference in the embryos survival of toxicity test between series of PROP and Me2SO4 in the 6S and 20S. In the cooling protocols, were evaluated the effects of low temperature associated with cryoprotectants. At 5ºC, PROP showed survival rates above 75% in the gastrula stage (G) and above 90% in the 6S and 20S stages. High rates of abnormalities were observed, and the most recurrent were: small bodies, fins presenting uncontrolled cell growth, membrane rupture, and retraction. These results demonstrate the need to use cryoprotectant solutions, even when there is no ice nucleation, and, on the other hand, shows that high cryoprotectant concentrations promote numerous morphological lesions, compromising normal embryonic development.(AU)

Este estudo avaliou os efeitos dos crioprotetores e das baixas temperaturas no desenvolvimento embrionário de Prochilodus lineatus, descrevendo suas principais alterações morfológicas. Nos testes de sensibilidade ao frio, as taxas de sobrevivência, no estágio de vinte somitos (20S), foram de 53,6% a 0ºC e 100% a 5ºC. Nos testes de toxicidade, os embriões foram expostos a uma série graduada dos crioprotetores: 1,2-Propanediol (PROP), dimetilsulfóxido (Me2SO4) e glicerol (GLY), terminando em uma combinação de alta osmolaridade. Não houve diferença significativa na sobrevivência dos embriões nas séries do PROP e Me2SO4 nos estágios de 6S e 20S. Nos protocolos de resfriamento, foram avaliados os efeitos da baixa temperatura associados as séries crioprotetoras. A 5ºC, o PROP apresentou taxas de sobrevivência acima de 75% no estádio de gástrula (G) e acima de 90% nos estádios 6S e 20S. Foram observadas altas taxas de anormalidades sendo as mais recorrentes: corpos pequenos, nadadeiras apresentando crescimento celular descontrolado, ruptura da membrana e retração vitelínica. Estes resultados demonstram a necessidade do uso das soluções crioprotetoras, mesmo não havendo nucleação de gelo e, em contrapartida, demonstra que as elevadas concentrações crioprotetoras promovem numerosas lesões morfológicas, comprometendo o desenvolvimento embrionário.(AU)

Inclusion of propylene glycol in the diet of sheep and its effect on their lambs protein and mineral metabolites / Inclusão de propilenoglicol na dieta de ovelhas e efeito nos metabólitos proteicos e minerais de suas crias

The aim of this study was to assess the effect of propylene glycol (PG) added to the water sheep drank during lactation on protein and mineral metabolites of their suckling lambs. We assessed 24 lambs born to sheep fed levels of propylene glycol in the water (0; 1.5; 3.0 and 4.5%). The sheep were subdivided according to a completely randomized design, in a split-plot scheme. There was no interaction effect between lamb age and amount of PG provided to the sheep on the concentration of protein and mineral metabolites of the lambs. The concentration of total protein, globulin, and albumin: globulin ratio, uric acid and creatinine in the lambs was not affected by the inclusion of PG (p > 0.05). The concentration of urea and magnesium in the lambs presented a quadratic response as a function of the addition of PG; there was linear response for albumin concentration. The addition of PG to the sheeps diet and the lambs age affect the concentration of protein and mineral metabolites in the lambs. However, using PG to feed lactating sheep does not have negative effects on the lambs blood parameters, as evidenced by the absence of nutritional deficiency (protein and minerals) in the suckling lambs.

Objetivou-se avaliar o efeito da inclusão do propilenoglicol na água de ovelhas durante a lactação sobre os metabólitos proteicos e minerais de suas crias. Foram avaliados 24 cordeiros (as), filhos (as) de ovelhas que receberam níveis de propilenoglicol (0; 1,5; 3,0 e 4,5%) na água. As ovelhas foram distribuídas em delineamento inteiramente casualizado em esquema de parcela subdividida. Não houve efeito de interação entre a idade dos cordeiros (a)s e a quantidade(s) de propilenoglicol oferecido para as mães na concentração dos metabólitos proteicos e minerais dos cordeiros. A concentração de proteínas totais, globulinas, relação albumina:globulinas, ácido úrico e creatinina nos cordeiros não foi afetada pela inclusão de propilenoglicol na água das matrizes. A concentração de ureia e magnésio nos cordeiros apresentou resposta quadrática em função da inclusão de propilenoglicol na dieta das ovelhas, sendo que para a concentração de albumina houve resposta linear. A inclusão de propilenoglicol na dietadas ovelhas e a idade dos cordeiros alteram a concentração dos metabólitos proteicos e minerais nas crias. Contudo, a utilização do propilenoglicol na alimentação de ovelhas lactantes não proporciona efeitos negativos nos parâmetros sanguíneos dos cordeiros, o que é evidenciado pela ausência de déficit nutricional (proteína e minerais) nos cordeiros lactentes.

Effects of cryoprotectants and low temperatures on hatching and abnormal embryo development of Prochilodus lineatus (Characiformes: Prochilodontidae)

This study evaluated the effect of the cryoprotectants and the low temperatures on the embryonic development of Prochilodus lineatus, describing their main morphological alterations. On chilling sensitivity test, the survival rates at the twenty somites stage (20S) were 53.6% at 0ºC, and 100% in 5ºC. To test toxicity, the embryos were exposed to a graded series of 1,2-Propanediol (PROP), dimethyl sulfoxide (Me2SO4) and glycerol (GLY), terminating in a solution of high osmolarity. There was no significant difference in the embryos survival of toxicity test between series of PROP and Me2SO4 in the 6S and 20S. In the cooling protocols, were evaluated the effects of low temperature associated with cryoprotectants. At 5ºC, PROP showed survival rates above 75% in the gastrula stage (G) and above 90% in the 6S and 20S stages. High rates of abnormalities were observed, and the most recurrent were: small bodies, fins presenting uncontrolled cell growth, membrane rupture, and retraction. These results demonstrate the need to use cryoprotectant solutions, even when there is no ice nucleation, and, on the other hand, shows that high cryoprotectant concentrations promote numerous morphological lesions, compromising normal embryonic development.(AU)

Este estudo avaliou os efeitos dos crioprotetores e das baixas temperaturas no desenvolvimento embrionário de Prochilodus lineatus, descrevendo suas principais alterações morfológicas. Nos testes de sensibilidade ao frio, as taxas de sobrevivência, no estágio de vinte somitos (20S), foram de 53,6% a 0ºC e 100% a 5ºC. Nos testes de toxicidade, os embriões foram expostos a uma série graduada dos crioprotetores: 1,2-Propanediol (PROP), dimetilsulfóxido (Me2SO4) e glicerol (GLY), terminando em uma combinação de alta osmolaridade. Não houve diferença significativa na sobrevivência dos embriões nas séries do PROP e Me2SO4 nos estágios de 6S e 20S. Nos protocolos de resfriamento, foram avaliados os efeitos da baixa temperatura associados as séries crioprotetoras. A 5ºC, o PROP apresentou taxas de sobrevivência acima de 75% no estádio de gástrula (G) e acima de 90% nos estádios 6S e 20S. Foram observadas altas taxas de anormalidades sendo as mais recorrentes: corpos pequenos, nadadeiras apresentando crescimento celular descontrolado, ruptura da membrana e retração vitelínica. Estes resultados demonstram a necessidade do uso das soluções crioprotetoras, mesmo não havendo nucleação de gelo e, em contrapartida, demonstra que as elevadas concentrações crioprotetoras promovem numerosas lesões morfológicas, comprometendo o desenvolvimento embrionário.(AU)

Inclusion of propylene glycol in the diet of sheep and its effect on their lambs protein and mineral metabolites / Inclusão de propilenoglicol na dieta de ovelhas e efeito nos metabólitos proteicos e minerais de suas crias

The aim of this study was to assess the effect of propylene glycol (PG) added to the water sheep drank during lactation on protein and mineral metabolites of their suckling lambs. We assessed 24 lambs born to sheep fed levels of propylene glycol in the water (0; 1.5; 3.0 and 4.5%). The sheep were subdivided according to a completely randomized design, in a split-plot scheme. There was no interaction effect between lamb age and amount of PG provided to the sheep on the concentration of protein and mineral metabolites of the lambs. The concentration of total protein, globulin, and albumin: globulin ratio, uric acid and creatinine in the lambs was not affected by the inclusion of PG (p > 0.05). The concentration of urea and magnesium in the lambs presented a quadratic response as a function of the addition of PG; there was linear response for albumin concentration. The addition of PG to the sheeps diet and the lambs age affect the concentration of protein and mineral metabolites in the lambs. However, using PG to feed lactating sheep does not have negative effects on the lambs blood parameters, as evidenced by the absence of nutritional deficiency (protein and minerals) in the suckling lambs.(AU)

Objetivou-se avaliar o efeito da inclusão do propilenoglicol na água de ovelhas durante a lactação sobre os metabólitos proteicos e minerais de suas crias. Foram avaliados 24 cordeiros (as), filhos (as) de ovelhas que receberam níveis de propilenoglicol (0; 1,5; 3,0 e 4,5%) na água. As ovelhas foram distribuídas em delineamento inteiramente casualizado em esquema de parcela subdividida. Não houve efeito de interação entre a idade dos cordeiros (a)s e a quantidade(s) de propilenoglicol oferecido para as mães na concentração dos metabólitos proteicos e minerais dos cordeiros. A concentração de proteínas totais, globulinas, relação albumina:globulinas, ácido úrico e creatinina nos cordeiros não foi afetada pela inclusão de propilenoglicol na água das matrizes. A concentração de ureia e magnésio nos cordeiros apresentou resposta quadrática em função da inclusão de propilenoglicol na dieta das ovelhas, sendo que para a concentração de albumina houve resposta linear. A inclusão de propilenoglicol na dietadas ovelhas e a idade dos cordeiros alteram a concentração dos metabólitos proteicos e minerais nas crias. Contudo, a utilização do propilenoglicol na alimentação de ovelhas lactantes não proporciona efeitos negativos nos parâmetros sanguíneos dos cordeiros, o que é evidenciado pela ausência de déficit nutricional (proteína e minerais) nos cordeiros lactentes.(AU)

Perfil eletroforético do colostro de ovelhas suplementadas com propileno glicol e cobalto associado à vitamina B12 no final da gestação / Electrophoretic profile of the colostrum of ewes supplemented with propylene glycol and cobalt associated with vitamin B12 in late pregnancy

Este trabalho teve por objetivo avaliar o proteinograma do colostro de ovelhas submetidas a administração de propileno glicol e de cobalto associado à vitamina B12 no final da gestação. Dezoito ovelhas da raça Santa Inês, prenhas e com idade variando entre 18 meses a cinco anos foram distribuídas, por amostragem probabilística em três grupos experimentais, aproximadamente 30 dias antes da data prevista para o parto. No Grupo 1 (G1/n=6) foram administrados 30mL de propileno glicol P.A. via oral diariamente; no Grupo 2 (G2/n=6) foi administrado 1mg de cloreto de cobalto em solução a 1% via oral diariamente e 2mg de vitamina B12, via intramuscular semanalmente e no Grupo 3 (G3/n=6): grupo controle. Logo após o parto procedeu-se a colheita de 30mL de colostro, que foram acondicionados em recipientes apropriados e encaminhados ao laboratório. Após homogeneização, adicionou-se a cada 1.000µL de colostro, 75µL de solução de renina, que foi mantido em banho-maria a 37ºC por aproximadamente 20 minutos e centrifugado a 21.000G durante dez minutos em centrífuga refrigerada. Posteriormente, a fração intermediária, correspondente ao soro do colostro, foi aliquotada e mantida em ultrafreezer a -80oC para posterior determinação das proteínas. A determinação da proteína total do soro colostral foi realizada empregando-se reagente comercial. A separação das proteínas foi realizada utilizando-se a técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE). Foram identificadas as proteínas IgA, lactoferrina, albumina, IgG de cadeia pesada (IgGCP), ß-caseína, IgG de cadeia leve (IgGCL), ß-lactoglobulina and α-lactoalbumina, não havendo influência da administração dos suplementos na fase final da gestação sobre as concentrações protéicas do colostro.(AU)

This study aimed to evaluate the proteinogram of the colostrum of ewes submitted to administration of propylene glycol and cobalt associated with vitamin B12 in late pregnancy. Eighteen pregnant Santa Inês ewes 18 months to 5 years old were distributed by probabilistic sampling into three experimental groups, about 30 days before the expected delivery date. In group 1 (G1/n=6), daily oral doses of 30ml propylene glycol PA were administered; Group 2 (G2/n=2) received a daily oral dosage of 1mg cobalt chloride in 1% solution and 2mg of vitamin B12 intramuscularly once a week, and Group 3 (G3/n=6) was the control group. Soon after delivery 30mL of colostrum was harvested from each ewe, which were stored in appropriate containers and sent to the laboratory. After homogenization, we added to each 1000µL of colostrum 75µL solution of rennin, which was kept in a water bath at 37°C for about 20 minutes and centrifuged at 21.000G for 10 minutes in a refrigerated centrifuge. Later, the intermediate fraction, corresponding to colostrum whey, was aliquoted and kept in a -80oC ultrafreezer for subsequent determination of proteins. The determination of the total colostral protein whey was performed using a commercial reagent, observing the linearity test for colostrum. The separation of proteins was performed using the technique of electrophoresis on polyacrylamide gel containing sodium dodecyl sulfate (SDS-PAGE). Lactoferrin, IgA, albumin, IgG heavy chain (IgGCP), ß-casein, IgG light chain (IgGCL), ß-lactoglobulin and α-lactalbumin proteins were identified. There was no influence of the administration of supplements during late pregnancy on the concentration of proteins identified in the colostrum of the ewes.(AU)

Perfil eletroforético do colostro de ovelhas suplementadas com propileno glicol e cobalto associado à vitamina B12 no final da gestação / Electrophoretic profile of the colostrum of ewes supplemented with propylene glycol and cobalt associated with vitamin B12 in late pregnancy

Este trabalho teve por objetivo avaliar o proteinograma do colostro de ovelhas submetidas a administração de propileno glicol e de cobalto associado à vitamina B12 no final da gestação. Dezoito ovelhas da raça Santa Inês, prenhas e com idade variando entre 18 meses a cinco anos foram distribuídas, por amostragem probabilística em três grupos experimentais, aproximadamente 30 dias antes da data prevista para o parto. No Grupo 1 (G1/n=6) foram administrados 30mL de propileno glicol P.A. via oral diariamente; no Grupo 2 (G2/n=6) foi administrado 1mg de cloreto de cobalto em solução a 1% via oral diariamente e 2mg de vitamina B12, via intramuscular semanalmente e no Grupo 3 (G3/n=6): grupo controle. Logo após o parto procedeu-se a colheita de 30mL de colostro, que foram acondicionados em recipientes apropriados e encaminhados ao laboratório. Após homogeneização, adicionou-se a cada 1.000μL de colostro, 75μL de solução de renina, que foi mantido em banho-maria a 37ºC por aproximadamente 20 minutos e centrifugado a 21.000G durante dez minutos em centrífuga refrigerada. Posteriormente, a fração intermediária, correspondente ao soro do colostro, foi aliquotada e mantida em ultrafreezer a -80oC para posterior determinação das proteínas. A determinação da proteína total do soro colostral foi realizada empregando-se reagente comercial. A separação das proteínas foi realizada utilizando-se a técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE). Foram identificadas as proteínas IgA, lactoferrina, albumina, IgG de cadeia pesada (IgGCP), β-caseína, IgG de cadeia leve (IgGCL), β-lactoglobulina and α-lactoalbumina, não havendo influência da administração dos suplementos na fase final da gestação sobre as concentrações protéicas do colostro.(AU)

This study aimed to evaluate the proteinogram of the colostrum of ewes submitted to administration of propylene glycol and cobalt associated with vitamin B12 in late pregnancy. Eighteen pregnant Santa Inês ewes 18 months to 5 years old were distributed by probabilistic sampling into three experimental groups, about 30 days before the expected delivery date. In group 1 (G1/n=6), daily oral doses of 30ml propylene glycol PA were administered; Group 2 (G2/n=2) received a daily oral dosage of 1mg cobalt chloride in 1% solution and 2mg of vitamin B12 intramuscularly once a week, and Group 3 (G3/n=6) was the control group. Soon after delivery 30mL of colostrum was harvested from each ewe, which were stored in appropriate containers and sent to the laboratory. After homogenization, we added to each 1000μL of colostrum 75μL solution of rennin, which was kept in a water bath at 37°C for about 20 minutes and centrifuged at 21.000G for 10 minutes in a refrigerated centrifuge. Later, the intermediate fraction, corresponding to colostrum whey, was aliquoted and kept in a -80oC ultrafreezer for subsequent determination of proteins. The determination of the total colostral protein whey was performed using a commercial reagent, observing the linearity test for colostrum. The separation of proteins was performed using the technique of electrophoresis on polyacrylamide gel containing sodium dodecyl sulfate (SDS-PAGE). Lactoferrin, IgA, albumin, IgG heavy chain (IgGCP), β-casein, IgG light chain (IgGCL), β-lactoglobulin and α-lactalbumin proteins were identified. There was no influence of the administration of supplements during late pregnancy on the concentration of proteins identified in the colostrum of the ewes.(AU)

Efeitos da fonte de proteina e suplementação lipídica sobre o desempenho de bovinos em terminação alimentados com silagens de ração total misturada

O objetivo deste estudo foi examinar o processo de conservação e o valor alimentício de silagens de ração total misturada (RTM) para bovinos de corte em terminação. Para alcançar os objetivos, dois experimentos foram conduzidos. O objetivo do Exp. 1 foi avaliar as características fermentativas e a estabilidade aeróbia de silagens de RTM formuladas com diferentes fontes de proteína e estocadas por 120 d. Os tratamentos foram: U (RTM ensilada com ureia); FSnf (RTM ensilada sem uma fonte suplementar de proteína); FS (RTM ensilada com farelo de soja) e GS (RTM ensilada com grão de soja laminado). O experimento foi realizado em delineamento inteiramente casualizado e as médias dos tratamentos foram comparadas por contrastes ortogonais: U vs. FSnf, FSnf vs. FS e FS vs. GS. O tratamento FSnf apresentou menores concentrações de PB solúvel e N-NH3, pH e contagem de clostrídios comparado ao tratamento U (P 0.03). A concentração de ácido lático tendeu a ser menor para o FSnf quando comparado ao U (P= 0.09). A concentração de etanol foi menor para o tratamento GS quando comparado ao FS (P < 0.01) e a concentração de 1,2-propanodiol foi maior para o FSnf comparado ao U (P < 0.01), menor para o FS comparado ao FSnf (P = 0.02) e maior para o GS comparado ao FS (P = 0.02). As perdas de MS durante a fermentação foram baixas (~ 3,7%) e similares entre os tratamentos. Todas as silagens permaneceram estáveis durante o período de exposição aeróbia (10 d). O objetivo do Exp. 2 foi avaliar os efeitos da fonte de proteína e da suplementação com lipídios sobre o desempenho de novilhas de corte em terminação. Quatro dietas experimentais foram preparadas. As dietas foram as mesmas utilizadas no Exp. 1, mas no tratamento FSnf o farelo de soja foi adicionado no momento da alimentação (farelo de soja não fermentado). Trinta e duas novilhas Nelore (313 ± 8.8kg) foram blocadas pelo peso vivo inicial e confinadas em baias individuais por 82 dias (21 dias para adaptação às instalações e às dietas ricas em grãos + 61 dias de comparação das dietas). A variação no CMS tendeu a ser menor para o FSnf quando comparado ao tratamento U (P = 0.08) e a espessura de gordura da picanha tendeu a ser maior para o FSnf quando comparado ao U (P = 0.09). O CMS, GMD, peso vivo final, peso de carcaça quente, espessura de gordura da picanha e o número de refeições por dia foram maiores para o GS comparado ao FS (P 0.05). O pH fecal tendeu a ser menor para o GS quando comparado ao FS (P = 0.08). O nível sérico de proteínas totais foi superior para o tratamento FSnf do que para o U e FS (P 0.03). Os níveis séricos de triglicerídeos e colesterol foram maiores para o GS do que para o FS (P 0.05). Em suma, as silagens de RTM apresentaram padrão de fermentação adequado e alta estabilidade aeróbia. A inclusão de fonte de proteína verdadeira não alterou o desempenho animal quando toda dieta foi ensilada, enquanto a adição de fonte de lipídios em dieta com alta proporção de grão de milho ensilado melhorou o desempenho de novilhas Nelore em terminação

The objective of this study was to examine the conservation process and feeding value of total mixed ration (TMR) silages. Two experiments were conducted. The objective of the Exp. 1 was to evaluate the fermentation pattern and aerobic stability of TMR silages containing different protein sources and stored by 120 d. The treatments were: ensiled TMR with urea (U); ensiled TMR with no protein supplement (SMnf); ensiled TMR with soybean meal (SM) and ensiled TMR with rolled soybean grain (SG). The experiment was carried out in a completely randomized design and the means of treatments were compared by orthogonal contrasts: U vs. SMnf, SMnf vs. SM and SM vs. SG. The treatment without a protein supplement (SMnf) had lower soluble CP and NH3-N, pH and clostridia count compared with U (P 0.03). Lactic acid concentration tended to be lower for SMnf when compared to U (P = 0.09). The ethanol concentration was lower in SG than in SM (P < 0.01) and 1.2-propanediol concentration was higher in SMnf than in U (P < 0.01), lower in SM than in SMnf (P = 0.02) and higher in SG than in SM (P = 0.02). The DM loss during fermentation was low (~3.7%) and similar among treatments. All silages remained stable during 10 d of aerobic exposure after silo opening. The objective of Exp. 2 was to evaluate the effects of protein sources and lipid supplementation on the finishing beef heifers performance. Diets were the same used in Exp. 1, but in the SMnf treatment soybean meal was added at feeding to balance diet CP. Thirty and two Nellore heifers (313 ± 8.8 kg SBW) were blocked by initial SBW and housed in individual pens for 82 days (21days for adaptation and 61 days for diet comparison). The daily DMI variation tended to be higher for U when compared to SMnf (P = 0.08) and the Biceps femoris fat thickness tended to be lower for U than SMnf treatment (P = 0.09). The DMI, ADG, final BW, HCW, Biceps femoris fat thickness and number of meals per day were higher for SG compared to SM (P 0.05). Fecal pH tended to be lower for SG when compared to SM (P = 0.08). Serum total protein concentration was higher for SMnf than U and SM (P 0.03). Triglycerides and cholesterol serum levels were higher for SG than SM treatment (P 0.05). In brief, the TMR silages showed adequate fermentation pattern and high aerobic stability. The inclusion of true protein source did not improve the animal performance when the whole TMR was ensiled, meanwhile, the soybean grain addition as a lipid source improved the finishing Nellore heifers performance.

Verificação da interferência do solvente propilenoglicol sobre o efeito da própolis na produção de lagartas de Bombyx mori L. (Lepidoptera: bombicidae) comparado ao extrato alcoólico de própolis / Interference of propyleneglycol solvent on the effect of propolis in the production of silkworm Bombyx mori L. (Lepidoptera: bombicidae) compared to propolis alcoholic extract / Verificación de la interferencia del solvente propilenoglicol sobre el efecto de propóleos en la producción de gusano de seda Bombyx mori L. (lepidoptera: bombicidae) comparado al extracto alcohólico de propóleos

Este experimento foi realizado no Laboratório de Sericicultura, no Campus Sede da Universidade Paranaense (UNIPAR) de Umuarama, no período de fevereiro a outubro de 2011, com o objetivo de verificar o efeito da própolis em diferentes dosagens na alimentação durante o desenvolvimento biológico do bicho-da-seda (Bombxy mori L.). O método empregado na parte experimental foi a pulverização do extrato glicólico de própolis, diluído em 500mL de água destilada nas folhas de amoreira, nas seguintes dosagens, água-controle, 25mL, 30mL, 35mL e 40mL compondo os tratamentos: controle, T1 , T2 , T3 e T4 respectivamente. As folhas de amoreira foram fornecidas cinco vezes ao dia, durante o manejo alimentar. Verificou-se, pelos resultados obtidos, que as diferentes dosagens de própolis utilizadas não interferiram no ganho de peso das lagartas, no peso dos casulos verdes, no peso da casca sérica e crisálidas, quando comparado ao tratamento controle, mas quando se compara o Controle e T4 do ensaio da primavera, respectivamente, para os teores de seda bruto e líquido, há resultados significativos. Portanto, verificou-se que o extrato glicólico de própolis, em dosagens de 40mL, pode prejudicar o teor líquido de seda em uma produção de casulos, trazendo resultados pouco apreciados dentro da sericicultura.(AU)

This experiment was performed at the Laboratory of Sericulture, at the main campus of University Paranaense (UNIPAR), in the city of Umuarama, from February to October 2011, in order to verify the effect of different doses of propolis in feeding during the biological development of silkworm (Bombyx mori L.). The method used in the experiment was the spraying of propolis glycolic extract dissolved in 500-mL distilled water on the mulberry leaves in the following water- -control dosages: 25mL, 30mL, 35mL and 40mL related to the treatment controls T1, T2, T3 and T4, respectively. Mulberry leaves were provided five times a day for feeding management. The results obtained showed that the different dosages of propolis used did not affect the weight gain of the larvae, the weight of green cocoons, shells and pupae when compared to the control treatment. However, when comparing the control and T4 from the Spring assay, respectively, to the levels of crude and net silk, significant results were noted. Thus, it can be concluded that propolis glycolic extract in 40-ml dosages may impair the net silk content in a cocoon production, presenting negative results in sericulture.(AU)

: Este experimento se llevó a cabo en el Laboratorio de Sericultura, Campus Sede de la Universidad Paranaense (UNIPAR) de Umuarama, en el período de febrero a octubre de 2011, con el fin de verificar el efecto de propóleos en diferentes concentraciones en la alimentación durante el desarrollo biológico del gusano de seda (Bombyx mori L.). El método utilizado en el experimento fue la pulverización de extracto glicólico de propóleos, disuelto en 500 ml de agua destilada en las hojas de morera, en las siguientes dosis, agua control, 25 mL, 30mL, 35 mL, y 40 mL componiendo los tratamientos: control T1 , T2 , T3 e T4 respectivamente. A las hojas de morera se les han dado cinco veces al día, durante el manejo alimentar. Se verificó, por los resultados obtenidos, que las diferentes dosis de propóleos utilizados no afectaron en la ganancia de peso de los gusanos, en el peso de los capullos verdes, en el peso de la cáscara sérica y crisálidas, en comparación con el tratamiento de control, pero cuando se compara el Control y T4 del ensayo de la primavera, respectivamente, para los niveles de seda cruda y líquida, hay resultados significativos. Por lo tanto, se encontró que el extracto glicólico de propóleos, en dosis de 40 mL, puede perjudicar la concentración líquida de seda en una producción de capullos, trayendo resultados poco apreciados dentro de la sericultura.(AU)

Biotechnological potential of Clostridium butyricum bacteria

In response to demand from industry for microorganisms with auspicious biotechnological potential, a worldwide interest has developed in bacteria and fungi isolation. Microorganisms of interesting metabolic properties include non-pathogenic bacteria of the genus Clostridium, particularly C. acetobutylicum, C. butyricum and C. pasteurianum. A well-known property of C. butyricum is their ability to produce butyric acid, as well as effectively convert glycerol to 1,3-propanediol (38.2 g/L). A conversion rate of 0.66 mol 1,3-propanediol/mol of glycerol has been obtained. Results of the studies described in the present paper broaden our knowledge of characteristic features of C. butyricum specific isolates in terms of their phylogenetic affiliation, fermentation capacity and antibacterial properties.

Efeito do aditivo químico a base de ácido propiônico e ácido fórmico em silagens de milho: perfil fermentativo e desempenho de vacas leiteiras

Ácidos orgânicos tem grande impacto na fermentação de silagens e sua estabilidade aeróbia, atuando com muita efetividade sobre fungos e leveduras. O objetivo do presente trabalho foi avaliar os benefícios da adição de ácidos orgânicos no processo de ensilagem, tanto para a forragem ensilada quanto no consumo voluntário dos animais. O estudo foi dividido em duas etapas: Exp. 1) Foi testado o aditivo químico Lupro-Mix® NA (35% ácido propiônico, 21% de formato de sódio, 20% de ácido fórmico, 4% propionato de sódio e 20% de água) em silos experimentais de milho planta inteira. Os tratamentos foram os seguintes: (i) sem aditivo (controle); (ii) Lupro-Mix® NA (4L por tonelada de matéria natural). O delineamento utilizado foi o inteiramente casualizado com quatro repetições por tratamento. O aditivo foi significativamente eficiente em reduzir o teor de etanol, 1.2 propanodiol, lactato de etila, acetato de etila da silagem, assim como as perdas de MS. Houve também expressivo aumento de ácido propiônico em relação ao tratamento controle, refletindo assim em maior estabilidade aeróbia da massa tratada. A silagem com Lupro-Mix® NA, apresentou resultado satisfatório quanto a manutenção da estabilidade aeróbia e redução de perdas da silagem. Exp. 2) O mesmo aditivo testado em silos laboratoriais foi testado em silagens com escala comercial em silos tipo bag para alimentar vacas em lactação. Em um delineamento de reversão simples, as vacas foram distribuídas em blocos casualizados em 10 pares de dois animais, aleatoriamente distribuídas, dentro de cada bloco, em dois tratamentos (i) silagem sem aditivo (controle); (ii) silagem com Lupro-Mix® NA (4L por tonelada de matéria natural). Os resultados apontaram para redução numérica no tempo de ingestão dos animais alimentados com silagens tratadas. Da mesma forma, numericamente houve aumento do consumo de matéria seca, da produção de leite, leite corrigido para 4% de gordura, e energia do leite, além de uma tendência no incremento de proteína no leite. O uso do aditivo químico Lupro-Mix® NA se mostrou eficiente no controle de perdas, estabilidade aeróbia, além de indícios de melhoria no desempenho de vacas leiteiras.

Organic acids have a great impact on silage fermentation and aerobic stability, acting very effectively against fungi and yeast. The objective of the present study was to evaluate the impact of a chemical additive in the fermentation profile of whole plant corn silage (WPCS) with high dry matter content and the dairy cows' performance fed with re-ensiled WPCS. The study was divided into two trials: Trial 1) The chemical additive Lupro-Mix® NA (35% propionic acid, 21% sodium formate, 20% formic acid, 4% sodium propionate and 20% water) was added in whole plant corn with high dry matter (~40%) and ensiled in experimental silos. The treatments were as follows: (i) without additive (control); (ii) Lupro-Mix® NA (4L per ton of natural matter). A completely randomized design with four replications per treatment was used. The additive was significantly efficient in reducing ethanol content, 1.2 propanediol, ethyl lactate, ethyl acetate, as well as DM losses. There was also a significant increase of propionic acid in relation to the control treatment, thus reflecting in greater aerobic stability of the treated mass. The silage with Lupro-Mix® NA showed a satisfactory result in the maintenance of the aerobic stability and reduction of the silage losses. Trial 2) The same additive tested in laboratory silos was tested on commercial scale silages in bag silos to feed lactating. In a cross over design, the cows were distributed in randomized blocks in 10 pairs of two animals, randomly distributed, within each block, in two treatments (i) silage without additive (control); (ii) silage with Lupro-Mix® NA (4L per ton of natural matter). The results pointed to a numerical reduction in the ingestion time of the animals fed treated silages. Similarly, numerically there was an increase in dry matter intake, milk yield, 4% fat corrected milk, and milk energy, as well as a trend towards increased protein content and yield. The use of Lupro-Mix® NA chemical additive reduces DM losses, improves aerobic stability and dairy cow performance.

Consumo, digestibilidade e parâmetros fisiológicos de ovelhas suplementadas com níveis crescentes de propilenoglicol na água / Intake, digestibility and physiological parameters of sheep supplemented with increasing levels of propylene glycol in water

The aim of this study was to evaluate the intake, digestibility and physiologic parameters of sheep supplemented with increasing levels of propylene glycol. The research and data collection were performed in the Capim Branco experimental farm, which belongs to the Federal University of Uberlândia, lasting 75 days. Therefore, five sheep were used, housed in metabolic cages with slatted floor, feeder and drinker. Corn silage and mineral core specific for the species were used as feed. The rations  were divided into two meals and offered to the animals at 08:00 h and at 16:00 h. Water was supplied ad libitum and already mixed with propylene glycol. The inclusion levels of propylene glycol were 0, 1.5, 3.0, 4.5 and 6.0%. The variables studied were: feed intake, feeding behavior, water intake, propylene glycol consumption, fecal score, digestibility, physiologic parameters, ruminal pH and temperature of the rumen fluid. The inclusion of propylene glycol at increasing levels reduced water consumption and did not change the intake and digestibility of matter. Furthermore, the inclusion of propylene glycol did not alter the physiological parameters of sheep, such as ruminal movements, rectal temperature and respiratory rate, which shows that this compound may be added to the diet of sheep to the level of 6%.

Objetivou-se com o presente trabalho avaliar o consumo, digestibilidade e parâmetros fisiológicos de ovelhas suplementadas com níveis crescentes de propilenoglicol. O ensaio experimental foi conduzido no Setor de Caprinos e Ovinos da Universidade Federal de Uberlândia e teve duração de 75 dias. Foram utilizadas 5 ovelhas da raça Santa Inês, alojadas em gaiolas metabólicas, com piso ripado, bebedouro e comedouro. Foi utilizada como ração a silagem de milho e núcleo mineral específico para a espécie. As rações foram divididas em duas refeições e oferecidas aos animais às 08 horas e às 16 horas. A água foi ofertada ad libitum e misturada ao propilenoglicol. Os níveis de inclusão de propilenoglicol foram 0; 1,5; 3,0; 4,5 e 6,0%. As variáveis estudadas foram: consumo de alimento, comportamento alimentar, consumo de água, consumo de propilenoglicol, escore fecal, digestibilidade, parâmetros fisiológicos, pH ruminal e temperatura do líquido ruminal. A inclusão de propilenoglicol em níveis crescentes na água reduz o consumo de água e não altera o consumo e a digestibilidade da matéria seca. Ademais, a inclusão de propilenoglicol não altera os parâmetros fisiológicos de ovelhas, como movimentos ruminais, temperatura retal e frequência respiratória, o que evidencia que esse composto pode ser adicionado na dieta de ovelhas até o nível de 6%.

Consumo, digestibilidade e parâmetros fisiológicos de ovelhas suplementadas com níveis crescentes de propilenoglicol na água / Intake, digestibility and physiological parameters of sheep supplemented with increasing levels of propylene glycol in water

The aim of this study was to evaluate the intake, digestibility and physiologic parameters of sheep supplemented with increasing levels of propylene glycol. The research and data collection were performed in the Capim Branco experimental farm, which belongs to the Federal University of Uberlândia, lasting 75 days. Therefore, five sheep were used, housed in metabolic cages with slatted floor, feeder and drinker. Corn silage and mineral core specific for the species were used as feed. The rations  were divided into two meals and offered to the animals at 08:00 h and at 16:00 h. Water was supplied ad libitum and already mixed with propylene glycol. The inclusion levels of propylene glycol were 0, 1.5, 3.0, 4.5 and 6.0%. The variables studied were: feed intake, feeding behavior, water intake, propylene glycol consumption, fecal score, digestibility, physiologic parameters, ruminal pH and temperature of the rumen fluid. The inclusion of propylene glycol at increasing levels reduced water consumption and did not change the intake and digestibility of matter. Furthermore, the inclusion of propylene glycol did not alter the physiological parameters of sheep, such as ruminal movements, rectal temperature and respiratory rate, which shows that this compound may be added to the diet of sheep to the level of 6%.(AU)

Objetivou-se com o presente trabalho avaliar o consumo, digestibilidade e parâmetros fisiológicos de ovelhas suplementadas com níveis crescentes de propilenoglicol. O ensaio experimental foi conduzido no Setor de Caprinos e Ovinos da Universidade Federal de Uberlândia e teve duração de 75 dias. Foram utilizadas 5 ovelhas da raça Santa Inês, alojadas em gaiolas metabólicas, com piso ripado, bebedouro e comedouro. Foi utilizada como ração a silagem de milho e núcleo mineral específico para a espécie. As rações foram divididas em duas refeições e oferecidas aos animais às 08 horas e às 16 horas. A água foi ofertada ad libitum e misturada ao propilenoglicol. Os níveis de inclusão de propilenoglicol foram 0; 1,5; 3,0; 4,5 e 6,0%. As variáveis estudadas foram: consumo de alimento, comportamento alimentar, consumo de água, consumo de propilenoglicol, escore fecal, digestibilidade, parâmetros fisiológicos, pH ruminal e temperatura do líquido ruminal. A inclusão de propilenoglicol em níveis crescentes na água reduz o consumo de água e não altera o consumo e a digestibilidade da matéria seca. Ademais, a inclusão de propilenoglicol não altera os parâmetros fisiológicos de ovelhas, como movimentos ruminais, temperatura retal e frequência respiratória, o que evidencia que esse composto pode ser adicionado na dieta de ovelhas até o nível de 6%.(AU)

Effect of length of storage on reconstituted sorghum grain silages treated with sodium benzoate on nutritive value and dairy cow performance

A ensilagem de grãos úmidos geralmente aumenta a digestão do amido e da proteína devido a proteólise durante o armazenamento. Porém, o tempo de armazenamento é fundamental para permitir que a matriz proteica seja degradada. O objetivo central desse trabalho foi avaliar o efeito do tempo de estocagem em silagens de sorgo grão reconstituído (SSGR) no desempenho de vacas leiteiras. De forma simultânea foi avaliado o efeito do benzoato de sódio no valor nutritivo de silagens de sorgo grão reconstituído. A hipótese foi que o uso de benzoato de sódio em SSGR reduz a atividade proteolítica devido suas propriedades antimicrobianas impactando no desempenho animal. Uma sequência de dois experimentos com vacas leiteiras da raça Holandesa foram formatados. O primeiro experimento avaliou o efeito de diferentes tempos de estocagem em SSGR tratadas ou não com benzoato de sódio (0.2 % base na matéria natural). Silagens não tratadas (Controle) e tratadas com aditivo (Benzoato) foram armazenadas por 30 ou 90 dias antes do fornecimento. Vinte vacas leiteiras (168 ± 87 dias em lactação) foram usadas em cinco quadrados latinos replicados 4 × 4 em arranjo fatorial 2 × 2. Sorgo grão foi reconstituído para 35 % de umidade em ambos os experimentos e ensilados em tambores plásticos com capacidade de 200-L. Os tratamentos foram: SSGR armazenados por 30 dias sem aditivo (30 CON), SSGR armazenados por 30 dias com benzoato de sódio (30 BEN), SSGR armazenados por 90 dias sem aditivo (90 BEN) ou SSGR armazenados por 90 dias com benzoato de sódio (90 BEN). Prolongando o tempo de armazenamento a concentração de 1,2-propanodiol e proteína solúvel aumentaram. A produção de leite foi maior em favor das vacas alimentadas com silagens armazenadas por 90 dias comparadas à 30 dias (31.2 vs. 30.0 kg/d). A digestibilidade do amido (89.3 vs. 86.9%) e da proteína (57.1 vs. 54.0%) foi maior para silagens armazenadas por 90 dias. O benzoato de sódio reduziu a concentração de etanol (0.20 vs. 0.08% of DM), porém não alterou ao nível de significância estatística adotada nesse trabalho a proteína solúvel (CON = 18.9 vs. BEN = 15.6% of PB) e o N-amoniacal (CON = 4.38 vs. BEN = 3.94 % of N). O segundo experimento foi conduzido com 12 vacas leiteiras (170 ± 47 DEL) para avaliar o efeito do benzoato de sódio no valor nutritivo e desempenho de vacas leiteiras alimentadas com SSGR estocadas por 150 dias, tratadas (Benzoato) ou não (Controle) com benzoato de sódio. Uma dieta padrão contendo sorgo grão seco moído foi fornecida por 14 dias. No final do período de adaptação, os animais foram pareados dois a dois e distribuídos aleatoriamente a um de dois tratamentos (Controle ou Benzoato) fornecidos por 28 dias. Durante o período experimental as vacas receberam a mesma dieta sendo o sorgo seco totalmente substituído por SSGR. Silagens tradadas com benzoato de sódio tiveram menor concentração de etanol (0.84 vs. 0.18 % de MS) e etil lactato (388 vs. 157 mg/kg de MS) como consequência de uma menor população de leveduras (4.73 vs. 2.52 log ufc/g). A proteína solúvel foi reduzida nas silagens tratadas (26.2 vs. 20.6 % da PB). A estabilidade aeróbia foi mais alta nas silagens tratadas (51 vs. 146 h). Em conclusão, estender o tempo de estocagem em SSGR aumentou a eficiência alimentar e do uso do nitrogênio devido ao aumento na digestibilidade do amido e da proteína. O benzoato de sódio promoveu respostas típicas na fermentação de silagens, e não alterou o desempenho animal.

Ensiling high moisture grain often increases starch and protein digestibilities due proteolysis during storage. However, the length of storage is fundamental to allow great protein matrix break down. The central objective of this work was to evaluate the effect of length of storage of reconstituted sorghum grain silage (RSGS) on dairy cows performance. Simultaneously it was evaluated the effect of sodium benzoate on silage nutritive value and its impact on animal performance. The hypothesis was that sodium benzoate reduces proteolitic activity due its antimicrobial properties. Two sequential experiments with mid-lactation Holstein dairy cows were set. The first experiment evaluated the effect of different length of storages on RSGS treated or not with sodium benzoate (0.2% as fed). Silages treated with additive (Benzoate) and non-treated (Control) were stored for 30 or 90 days prior feeding. Twenty mid-lactation dairy cows with 168 ± 87 days in milk (DIM) were used in 5 replicated 4 × 4 Latin square design with a 2 × 2 factorial arrangement. Dry ground sorghum grain was reconstituted to 35% moisture and ensiled in 200-L plastic drums. Treatments were: RSGS stored for 30 days without additive (30 CON), RSGS stored for 30 days with sodium benzoate (30 BEN), RSGS stored for 90 days without additive (90 CON) and RSGS stored for 90 days with sodium benzoate (90 BEN). Lengthening silage storage increased 1,2-propanediol concentration and protein solubility of silages. Milk yield was greater in favor of cows fed silage stored for 90 days compared to 30 days (31.2 vs. 30.0 kg/d). Starch (89.3 vs. 86.9%) and protein (57.1 vs. 54.0%) digestibility was also greater for silages stored for 90 days compared to 30 days. Sodium benzoate reduced silage ethanol concentration (0.20 vs. 0.08% of DM), but did not altered statistically protein solubility (CON = 18.9 vs. BEN = 15.6% of CP) or ammonium-N (CON = 4.38 vs. BEN = 3.94 % of N). The second trial were conducted with 12 mid-lactation dairy cows (170 ± 47 DIM) to evaluated the effect of sodium benzoate on nutritive value and dairy cows performance fed RSGS stored for 150 days, treated (Benzoate) or not (Control) with sodium benzoate. Cows received a standard diet containing dry ground sorghum for 14 days. At the end of adaptation period, cows were paired blocked and randomly assigned to one of two treatments (Control or Benzoate) for 28 experimental days. During experimental period cows received the same diet with the exception of dry ground sorghum, which was totally replaced with RSGS. Silages treated with sodium benzoate had low ethanol (0.84 vs. 0.18 % of DM) and ethyl-lactate (388 vs. 157 mg/kg of DM) concentration as a consequence of low yeast population (4.73 vs. 2.52 log cfu/g). Soluble protein was reduced on treated silages (26.2 vs. 20.6 % of CP). Aerobic stability was higher for treated silages (51 vs. 146 h). Dairy cow performance was not altered by treating silages with sodium benzoate. In conclusion, extending the length of storage of RSGS increased dairy cows use feed efficient and nitrogen use efficiency due higher starch and protein digestibility. Sodium benzoate promoted typical response on silage fermentation and did not alter animal performance.

Novel lactic acid bacteria strains as inoculant for alfalfa and corn silages and microbiome of rehydrated corn and sorghum grain silages

Este estudo foi dividido em cinco capítulos Capítulo 1 - O experimento foi conduzido em um delineamento inteiramente casualizado com três repetições, baseado em um arranjo fatorial 6 × 6, com 6 inoculantes: T1-Controle (CTRL), T2- Inoculante comercial contendo Lactobacillus plantarum + Pediococcus pentosaceus - (CI), T3- Lactobacillus pentosus 14.7SE (LPE), T4- Lactobacillus plantarum 3.7E (LP), T5- Pediococcus pentosaceus 14.15SE (PP), T6- Lactobacillus plantarum 3.7E + Pediococcus pentosaceus 14.15SE (LP + PP); e seis períodos de fermentação: 1, 3, 7, 14, 28 e 56 dias. A alfafa foi emurchecida por 6 h e aumentou o teor de matéria seca (MS) para 368 g/kg. A população de levedura e o teor de proteína bruta (PB) reduziram durante o processo de fermentação. Maiores taxas de declínio de pH na primeira semana de fermentação foram observadas para as silagens inoculadas. Entre os inoculantes, a estirpe PP resultou em menores valores de pH a partir de 14 d de fermentação e menor concentração de ácido acético no último dia de fermentação. As populações de enterobactérias e mofos foram mais eficientemente controladas pelas novas estirpes nos dias 56 e 28, respectivamente. A digestibilidade in vitro da matéria seca foi maior nas silagens inoculadas com PP do que LP (64.45 vs. 61.18% MS). A adição de P. pentosaceus influenciou positivamente todos os parâmetros avaliados, resultando em silagem de melhor qualidade. Capítulo 2 Avaliamos os efeitos de estirpes selvagens de Lactobacillus buchneri sobre a composição química, perfil fermentativo e estabilidade aeróbia de silagens de milho após 90 dias de fermentação. O experimento foi conduzido em um delineamento inteiramente casualizado, com três repetições e 13 tratamentos constituídos por 1-água (CRTL), 2 - estirpe comercial de L. buchneri (CI) e 11 estirpes selvagens de L. buchneri: 3- estirpe 56.1, 4- estirpe 56.2, 5- estirpe 56.4, 6- estirpe 56.7, 7- estirpe 56.8, 8- estirpe 56.9, 9- estirpe 56.21, 10- estirpe 56.22, 11- estirpe 56.25, 12- estirpe 56.26 e 13- estirpe 56.27. Observou-se efeito de tratamento (P < 0.05) no pH e nos teores de WSC, N-NH3, ácido lático, acético e propiônico, etanol e 1,2-propanodiol. O menor pH foi encontrado nas silagens CTRL e os maiores valores foram observados nas silagens 56.1, 56.4 e 56.9 (3.65 vs. 3.84). A silagem CTRL apresentou maior carboidrato solúvel em água residual do que as silagens CI, 56.2 e 56.7 e maior concentração de ácido lático do que CI e 56.4. As concentrações mais baixas de N-NH3 foram observadas nas silagens 56.1 e 56.7, ao contrário, as maiores concentrações foram encontradas nas silagens 56.8 e 56.21 (7.11 vs. 10.01% do nitrogênio total). A silagem 56.1 apresentou mais altas concentrações de ácidos acético e propiônico. Nesta silagem também foi observado maior produção de etanol em relação às silagens CI, 56.7, 56.9, 56.22, 56.25 e 56.26. As populações de enterobactérias, mofos & leveduras, os teores de MS, PB, fibra insolúvel em detergente neutro, fibra insolúvel em detergente ácido e a recuperação de MS após 90 dias de fermentação não foram afetadas (P > 0.05) pelos tratamentos. A silagem inoculada com 56.1 apresentou maior estabilidade aeróbia do que a silagem não inoculada (68.25 vs. 36 h). A cepa de L. buchneri 56.1 tem potencial para ser utilizada como inoculante microbiano em silagem de milho. Capítulos 3 e 4 - Exploramos as sucessões das populações bacterianas e fúngicas e avaliamos os impactos causados por inoculantes contendo Lactobacillus plantarum + Propionibacterium acidipropionici e Lactobacillus buchneri nessas populações em grãos de milho e sorgo reidratados e suas silagens por sequenciamento de nova geração após 0, 3, 7, 21, 90 e 360 dias de fermentação. Proteobacteria e Firmicutes foram predominantemente encontrados no início e durante os períodos intermediários de fermentação, respectivamente, em ambos os grãos. Espécies de Lactobacillus e Weissella foram as principais bactérias envolvidas na fermentação de silagens de grãos de milho e sorgo reidratados. Aspergillus spp. predominaram na fermentação de grãos de milho, enquanto a levedura Wickerhamomyces anomalus foi o principal fungo encontrado nas silagens de grãos de sorgo. O inoculante contendo L. plantarum e P. acidipropionici foi mais eficiente em promover crescimento de Lactobacillus spp. e manter maior estabilidade da comunidade bacteriana durante períodos mais longos de armazenamento em ambas as silagens, já a adição de inoculante não resultou em grandes alterações na população fúngica de silagens de grãos de sorgo reidratado. Capítulo 5 - Avaliou-se o efeito da ensilagem no perfil fermentativo, no corn silage processing score (CSPS) e no perfil de ácidos graxos de cadeia longa (AGCL) em planta inteira de milho. Onze híbridos de milho foram colhidos e cada uma das 11 amostras foi homogeneizada manualmente e alocada em 4 amostras de aproximadamente 600 g cada. Cada uma das 4 amostras foi aleatoriamente designada para 1 de 2 tratamentos (0 ou 120 d de ensilagem) e seladas a vácuo em bags. A concentração de MS não foi afetada (P > 0.10) pela ensilagem e teve média de 36.2% as fed. Os efeitos sobre o pH são provavelmente atribuídos a 7.7% -, 1.0% - e 1.2% - maiores concentrações de ácido lático, acético e isobutírico, respectivamente, para 120 d comparado com 0 d. As concentrações de N-NH3 aumentaram (P = 0.001) com a ensilagem, como esperado. As concentrações de amido e CSPS não foram afetadas (P > 0.10) pela ensilagem e tiveram média de 31.2% MS e 28.8%, respectivamente. Não foram observados efeitos de ensilagem no perfil de AGCL na maioria dos ácidos graxos incluindo C16:0, C18:0, C18:1, C18:2 e C18:3 (P > 0.10). Mais pesquisas são necessárias para elucidar sob quais condições o tempo de ensilagem aumenta o CSPS.

This study was divided into five chapters Chapter 1 - The experiment was carried out under a completely randomized design with three replicates based on a 6 × 6 factorial arrangement, with 6 inoculants: T1- control (CTRL), T2- commercial inoculant containing Lactobacillus plantarum + Pediococcus pentosaceus (CI), T3- Lactobacillus pentosus 14.7SE (LPE), T4- Lactobacillus plantarum 3.7E (LP), T5- Pediococcus pentosaceus 14.15SE (PP), T6- Lactobacillus plantarum 3.7E + Pediococcus pentosaceus 14.15SE (LP+PP); and six fermentation periods: 1, 3, 7, 14, 28 and 56 days. Alfalfa was wilted for 6 h and increased the dry matter (DM) content to 368 g/kg as fed. The crude protein (CP) and yeast population decreased during the fermentation process. Highest pH decline rates in the first week of fermentation were observed for inoculated silages. Among inoculants, the PP strain resulted in lowest pH values from 14 d of fermentation and lowest acetic acid concentration in the last day of fermentation. Enterobacteria and molds populations were more efficiently controlled by new strains at day 56 and 28, respectively. The in vitro dry matter digestibility was higher in PP than LP silages (64.45 vs. 61.18% DM). Adding of P. pentosaceus alone resulted in positive influence on all evaluated parameters, thus providing better silage quality. Chapter 2 We evaluated the effects of wild strains of Lactobacillus buchneri on chemical composition, fermentative profile and aerobic stability of corn silages after 90 days of fermentation. The experiment was carried out under a completely randomized design with three replicates and 13 treatments consisted in 1- water (CRTL), 2- commercial L. buchneri strain (CI), and 11 wild strains of L. buchneri: 3- strain 56.1, 4- strain 56.2, 5- strain 56.4, 6- strain 56.7, 7- strain 56.8, 8- strain 56.9, 9- strain 56.21, 10- strain 56.22, 11- strain 56.25, 12- strain 56.26, and 13- strain 56.27. A treatment effect (P < 0.05) was observed on pH, WSC, NH3-N, lactic, acetic and propionic acids, ethanol and 1,2-propanediol concentrations. The lowest pH was observed in CTRL silages, contrary, 56.1, 56.4, and 56.9 silages had the highest values (3.65 vs. 3.84). CTRL silages had higher residual WSC than CI, 56.2 and 56.7 silages and higher lactic acid concentration than CI and 56.4. The lowest NH3-N concentrations were observed in 56.1 and 56.7 silages conversely the highest concentrations were found in 56.8 and 56.21 (7.11 vs. 10.01% of total nitrogen). Inoculated silages with 56.1 strain had the highest acetic and propionic acids concentrations and higher ethanol production than CI, 56.7, 56.9, 56.22, 56.25, and 56.26 silages. The populations of enterobacteria and yeasts & molds, DM, CP, neutral detergent fiber, acid detergent fiber contents and DM recovery after 90 d of fermentation were not affected (P > 0.05) by treatment. Silage treated with 56.1 strain had higher aerobic stability than non-inoculated silages (68.25 vs. 36 h). The L. buchneri strain 56.1 has the potential to be used as microbial inoculant in corn silage. Chapters 3 and 4 - We explored the succession of bacterial and fungal populations, and evaluated the impacts caused by Lactobacillus plantarum + Propionibacterium acidipropionici and Lactobacillus buchneri inoculants on those communities of rehydrated corn and sorghum grains and their silages by next-generation sequencing after 0, 3, 7, 21, 90 and 360 days of fermentation. Proteobacteria was predominantly in both grains at the beginning of the fermentation and Firmicutes phylum throughout the fermentation periods. Species of Lactobacillus and Weissella were the main bacteria involved in the fermentation of rehydrated corn and sorghum grain silages. Aspergillus spp. molds were predominant in corn grain fermentation while the yeast Wickerhamomyces anomalus was the major fungal in sorghum grain silages. The inoculant containing L. plantarum and P. acidipropionici was more efficient in promoting a sharply growth of Lactobacillus spp. and maintaining greater stability of the bacterial community during longer periods of storage in both grains silages. The addition of inoculant did not have an influencial effect on fungal population of rehydrated sorghum grain silages. Chapter 5 - It was evaluated the effect of ensiling on the fermentation profile, corn silage processing score (CSPS) and long-chain fatty acids (LCFA) profile of whole-plant corn. Eleven corn hybrids were obtained at harvest. Each of the 11 samples was homogenized manually and allocated into 4 samples of approximately 600 g each. Each of the 4 samples was randomly assigned to 1 of 2 treatments (0 or 120 d of ensiling) and vacuum-sealed in nylon-polyethylene standard barrier vacuum pouches. Concentration of DM was unaffected (P > 0.10) by ensiling and averaged 36.2% as fed. The effects on pH is likely attributed to 7.7%-, 1.0%- and 1.2%-units greater (P < 0.02) lactic, acetic and isobutyric acids concentrations, respectively, for 120 d compared with 0 d. Concentrations of NH3-N increased (P = 0.001) with ensiling, as expected. Starch concentrations and CSPS was unaffected (P > 0.10) by ensiling and averaged 31.2% of DM and 28.8%, respectively. No effects of ensiling were observed on LCFA profile of major FA including C16:0, C18:0, C18:1, C18:2, and C18:3 FA (P > 0.10). Further research is warranted to elucidate under which conditions ensiling time enhances the CSPS.

Administração de propilenoglicol, cobalto e vitamina B12 às ovelhas e seus reflexos sobre o perfil eletroforético das proteínas séricas nas suas crias / Administration of propylene glycol, cobalt and vitamin B12 to sheep and its effects on the electrophoretic profile of serum proteins of the lambs

Este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar a influência da administração de propilenoglicol, cobalto e vitamina B12, sobre o perfil eletroforético das proteínas séricas nas ovelhas e respectivas crias. O estudo foi realizado utilizando-se 18 ovelhas prenhes que foram divididas em grupos de forma aleatória aos 30 dias antes da data prevista para o parto, para serem fornecidos os suplementos até o momento antecedente ao parto. Os grupos foram os seguintes: Grupo 1 (G1/n=6) Grupo Controle; Grupo 2 (G2/n=6) Grupo Cobalto e Vitamina B12 (em que foi fornecido 1mg de cobalto via oral diariamente e 2 mg de vitamina B12 via intramuscular semanalmente); e Grupo 3 (G3/n=6) Grupo Propilenoglicol (administração de 30 mL de propilenoglicol via oral diariamente). Com isso, pôde-se observar que as frações proteicas em sua maioria sofrem variações com o desenvolvimento etário, em especial as proteínas totais séricas, albumina, beta-globulina e gama-globulina e o fator determinante para essas variações foi a ingestão do colostro. Além disso, não houve influência da ingestão dos componentes pelas ovelhas sobre o perfil destas variáveis nos borregos.

This work was carried out to evaluate the influence of administration of propilene glycol, cobalt and vitamin B12, on the electrophoretic profile of serum proteins on sheep and their offspring. The study was conducted using 18 pregnant ewes which were randomly divided into groups at 30 days before the date scheduled for delivery in order to be given supplements until the date preceding the birth. The groups were as follows: Group 1 (G1/n=6) Control Group; Group 2 (G2/n=6) Cobalt and Vitamin B12 (wich was received 1mg of cobalt orally daily and 2mg of vitamin B12, intramuscularly weeckly); and Group 3 (G3/n=6) Propylene Glycol (administration of 30mL of propylene glycol orally daily). We observed that mosto f the protein fractions vary with age development, particularly total serum protein, albumin, beta-globulin and gamma-globulin, and the determinant factor for these changes is colostrum intake. Furthermore, there was no influence of intake by sheep of the components studied on the profile of these variables in lambs.

Administração de propilenoglicol, cobalto e vitamina B12 às ovelhas e seus reflexos sobre o perfil eletroforético das proteínas séricas nas suas crias / Administration of propylene glycol, cobalt and vitamin B12 to sheep and its effects on the electrophoretic profile of serum proteins of the lambs

Este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar a influência da administração de propilenoglicol, cobalto e vitamina B12, sobre o perfil eletroforético das proteínas séricas nas ovelhas e respectivas crias. O estudo foi realizado utilizando-se 18 ovelhas prenhes que foram divididas em grupos de forma aleatória aos 30 dias antes da data prevista para o parto, para serem fornecidos os suplementos até o momento antecedente ao parto. Os grupos foram os seguintes: Grupo 1 (G1/n=6) Grupo Controle; Grupo 2 (G2/n=6) Grupo Cobalto e Vitamina B12 (em que foi fornecido 1mg de cobalto via oral diariamente e 2 mg de vitamina B12 via intramuscular semanalmente); e Grupo 3 (G3/n=6) Grupo Propilenoglicol (administração de 30 mL de propilenoglicol via oral diariamente). Com isso, pôde-se observar que as frações proteicas em sua maioria sofrem variações com o desenvolvimento etário, em especial as proteínas totais séricas, albumina, beta-globulina e gama-globulina e o fator determinante para essas variações foi a ingestão do colostro. Além disso, não houve influência da ingestão dos componentes pelas ovelhas sobre o perfil destas variáveis nos borregos.(AU)

This work was carried out to evaluate the influence of administration of propilene glycol, cobalt and vitamin B12, on the electrophoretic profile of serum proteins on sheep and their offspring. The study was conducted using 18 pregnant ewes which were randomly divided into groups at 30 days before the date scheduled for delivery in order to be given supplements until the date preceding the birth. The groups were as follows: Group 1 (G1/n=6) Control Group; Group 2 (G2/n=6) Cobalt and Vitamin B12 (wich was received 1mg of cobalt orally daily and 2mg of vitamin B12, intramuscularly weeckly); and Group 3 (G3/n=6) Propylene Glycol (administration of 30mL of propylene glycol orally daily). We observed that mosto f the protein fractions vary with age development, particularly total serum protein, albumin, beta-globulin and gamma-globulin, and the determinant factor for these changes is colostrum intake. Furthermore, there was no influence of intake by sheep of the components studied on the profile of these variables in lambs.(AU)

QUALIDADE DAS CÉLULAS ESPERMÁTICAS CRIOPRESERVADAS OBTIDAS DE TECIDO TESTICULAR DE GATOS DOMÉSTICOS: INFLUÊNCIA DO TAMANHO DOS FRAGMENTOS E AVALIAÇÃO DOS CRIOPROTETORES

Esta pesquisa teve por justificativa ampliar os estudos acerca da criopreservação de tecido gonadal e células espermáticas de gatos domésticos, podendo servir de modelo experimental para felinos selvagens. Objetivou-se comparar os efeitos da criopreservação sobre diferentes tamanhos de fragmentos testiculares, empregando dois crioprotetores. Utilizaram-se os testículos de 31 gatos domésticos, submetidos à orquiectomia eletiva. Os testículos foram pesados e apenas os que apresentarem pesos entre 1 e 2 g foram empregados. O tecido testicular foi dissecado e cortado em fragmentos de tamanhos pré-determinados (0,3cm3 e 0,5cm3). Uma amostra foi direcionada para as avaliações a fresco: integridade de membrana e do DNA; histopatologia; incidência de apoptoses por imuno-histoquímica; e índice de peroxidação lipídica - TBARS. A criopreservação foi feita em meio Tris-gema Equex STM suplementado com 3% de crioprotetores (glicerol e propanediol) através da técnica congelação rápida. Após a descongelação, foram realizados os mesmos testes iniciais. Os primeiros resultados obtidos com os 12 gatos iniciais apontaram na avaliação histomorfológica e pelo teste de lipoperoxidação lipídica que o glicerol foi mais eficiente que o propanediol na criopreservação de fragmentos testiculares de gatos domésticos de 0,5cm3 (Capítulo 2). No experimento seguinte, avaliaram-se os fragmentos testiculares de outros 31 gatos domésticos, seccionados nos mesmos tamanhos e criopreservados nas mesmas condições do experimento anterior, empregando-se 3% glicerol ou 3% propanediol no meio diluente Tris-gema Equex STM, utilizando a técnica de congelamento rápido, seguindo das avaliações pelos testes para dano ao DNA dos espermatozoides por meio da acridina laranja; e análise dos fragmentos teciduais semi-quantitativamente por histomorfologia e imuno-histoquímica. A avaliação imuno-histoquímica foi mais eficiente em verificar os danos às células tubulares seminíferas, sendo possível observar a marcação diferenciada da caspase presente no citoplasma e núcleo das células espermáticas, bem como na cabeça dos espermatozoides. Por meio da caspase foram verificado que os fragmentos frescos já apresentavam danos consideráveis as células teciduais e que não diferiram dos achados para os fragmentos criopreservados, demonstrando a eficiência do protocolo de congelação adotado, sem a observação de superioridade entre os dois tamanhos de fragmentos ou entre os crioprotetores. Contudo, a avaliação apenas do espermatozoides tanto pela técnica de acridina laranja, como pela imuno-histoquímica, pode-se verificar a inferioridade do propanediol em relação ao glicerol para fragmentos de 0,5 cm³ (Capítulo 3). Novas pesquisas que possam complementar os testes realizados neste estudo, como o cultivo dos fragmentos, a fertilização in vitro por meio de ICSI, ou ainda, o uso dos fragmentos para xenotrasnplantes poderiam avaliar com maior acurácia os achados das pesquisas reportadas nesta tese.

This research had the justification to broaden the studies about the cryopreservation of gonadal tissue and sperm cells of domestic cats, and could serve as an experimental model for wild cats. The objective of this study was to compare the effects of cryopreservation on different sizes of testicular fragments using two cryoprotectants. The testicles of 31 domestic cats submitted to elective orchiectomy were used. The testes were weighed and only those weighing between 1 and 2 g were used. The testicular tissue was dissected and cut into fragments of predetermined sizes (0.3cm3 and 0.5cm3). A sample was directed to fresh evaluations: membrane integrity and DNA; histopathology; incidence of apoptosis by immunohistochemistry; and lipid peroxidation index - TBARS. Cryopreservation was done on Tris-egg yolk Equex STM medium supplemented with 3% cryoprotectants (glycerol and propanediol) by the rapid freezing technique. After thawing, the same initial tests were performed. The first results obtained with the 12 initial cats showed that glycerol was more efficient than propanediol in the cryopreservation of testicular fragments of domestic cats of 0.5 cm3 (Chapter 2). In the following experiment, the testicular fragments from 31 other domestic cats, sectioned in the same sizes and cryopreserved under the same conditions as in the previous experiment, were evaluated using 3% glycerol or 3% propanediol in the Tris- egg yolk Equex STM medium, using rapid freezing technique, followed by evaluations for DNA damage of the spermatozoa by acridine orange; and analysis of the tissue fragments semi-quantitatively by histomorphology and immunohistochemistry. The immunohistochemical evaluation was more efficient in verifying the damage to the seminiferous tubular cells, being possible to observe the differentiated marking of the caspase present in the cytoplasm and nucleus of the sperm cells, as well as in the spermatozoa head. By caspase, it was verified that the fresh fragments already presented considerable damage to the tissue cells and did not differ from the findings for the cryopreserved fragments, demonstrating the efficiency of the adopted freezing protocol, without the observation of superiority between the two sizes of fragments or between the cryoprotectants. However, the evaluation of spermatozoa by both acridine orange and immunohistochemistry, the inferiority of propanediol to glycerol can be verified for fragments of 0.5 cm³ (Chapter 3). New research that could complement the tests performed in this study, such as the culture of fragments, in vitro fertilization using ICSI, or the use of fragments for xenotransplantation could more accurately assess the findings of the research reported in this thesis.