Histopathological changes in Lithobates catesbeianustadpoles used as biomarkers of pesticide poisoning / Alterações histopatológicas utilizadas em girinos de Lithobates catesbeianuscomo biomarcadores de intoxicações causadas por pesticidas

The use of biological indicators has increased in recent years with the aim of investigating environ-mental pollution in aquatic environments that are vulnerable to the constant use of pesticides. Some biomarkers can help assess the health status, indicating physical, metabolic, and behavioral changes under acute and sublethal poisoning. The mixture of the active ingredients cyproconazole and pico-xystrobin is a widely used fungicide for the control of pests in cotton, rice, coffee, sugarcane, corn, soybean, and wheat. The objective of this study was to verify the occurrence of possible histopatholo-gical lesions in the liver and kidneys of bullfrog tadpoles (Lithobates catesbeianus) caused by a fungi-cide commercial formula composed of picoxystrobin and cyproconazole. The animals were subjected to different concentrations of the fungicide to determine the median lethal concentration (LC50-96h = 0.05 mg L-1), that is, the lethal dose for 50% of the animals in 96 h. After determining the value of LC50-96h, the animals were subjected to three sublethal concentrations (LC50-96h/2, LC50-96h/10, and LC-50-96h/100). Through histological biomarkers, it was verified that this fungicide changed the morphology of the animals' kidney and liver tissues in a chronic way, impairing the functioning of organs that are essential for their survival and metamorphosis, which can result in an imbalance in the biodiversity of aquatic ecosystems.(AU)

O uso de indicadores biológicos tem aumentado nos últimos anos, com o intuito de investigar a po-luição ambiental em ambientes aquáticos que são vulneráveis ao constante uso de pesticidas. Alguns biomarcadores podem ajudar a avaliar o estado de saúde, indicando alterações físicas, metabólicas e comportamentais de intoxicações agudas e subletais. A mistura dos ingredientes ativos picoxistrobina e ciproconazol é amplamente usada como fungicida para o controle de pragas da cultura de algodão, arroz, café, cana-de-açúcar, milho, soja e trigo. O objetivo deste trabalho foi verificar a ocorrência de possíveis lesões histopatológicas em fígado e rins de girinos de rã-touro (Lithobates catesbeianus) causadas pela mistura dos fungicidas picoxistrobina e ciproconazol. Os animais foram submetidos a diferentes concentrações do fungicida para determinação da concentração letal mediana (CL50-96h = 0,05 mg L-1), ou seja, a dose letal para 50% dos animais em 96 horas. Após a determinação do valor da CL50-96h, os animais foram submetidos a três concentrações subletais (CL50-96h/2, CL50-96h/10 e CL50-96h/100). Através dos biomarcadores histológicos, a pesquisa verificou que esse fungicida alterou a morfolo-gia dos tecidos renais e hepáticos dos animais de maneira crônica, prejudicando o funcionamento de órgãos que são fundamentais para sua sobrevivência e metamorfose, o que pode resultar em um desequilíbrio para a biodiversidade dos ecossistemas aquáticos.(AU)

Experimental Frog Virus 3 infection using Brazilian strain: amphibians susceptibility / Infecção experimental utilizando estirpe brasileira de Frog Virus 3: suceptibilidade de anfíbios

An alarming number of global warnings concerning amphibian mortality outbreaks have been released in recent years. Emerging diseases stand out as the main potential causes. Ranavirus is a worldwide-spread highly infectious disease capable of affecting even other ectothermic animals such as fish and reptiles. One major issue regarding this pathology is the lack of clinical signs before it leads up to death. Aiming at having a better understanding of anurans susceptibility, this study analyzed bullfrog (Lithobates catesbeianus) survival rate, when challenged with three doses of a Brazilian strain of Frog Virus 3 (FV3). The qPCR analysis indicated a low infectivity rate in these animals both as larvae and as adults. To elucidate the results, the following hypothesis was performed: 1) The amount of inoculum used on the frogs was insufficient to trigger an infection; 2) For the FV3 to produce clinical signs in this species, there is the need for a cofactor; 3) The animals did undergo FV3 infection but recovered in the course of the experiment, and 4) The inoculum utilized might have been low-virulence. Finally, the presence of actual clinical signs of ranavirus is discussed, with the more likely hypothesis.(AU)

Um número alarmante de notificações globais sobre surtos de mortalidade de anfíbios tem sido realizado nos últimos anos. As doenças emergentes destacam-se como as principais causas potenciais. O ranavírus é uma doença altamente infecciosa disseminada em todo o mundo, capaz de afetar até outros animais ectotérmicos como peixes e répteis. Uma questão importante em relação a essa patologia é a falta de sinais clínicos antes de levar à morte. Com o objetivo de compreender melhor a suscetibilidade dos anuros, o presente trabalho analisou a taxa de sobrevivência de rãs-touro (Lithobates catesbeianus), desafiadas com três doses de uma estirpe brasileira do Frog virus 3 (FV3). A análise de qPCR indicou baixa taxa de infectividade nesses animais, tanto como larvas quanto como adultos. Procurando esclarecer os resultados, foram formuladas as seguintes hipóteses: 1) A quantidade de inóculo aplicada nas rãs foi insuficiente para desencadear uma infecção; 2) Para que o FV3 dê sinais clínicos nesta espécie, é necessário um cofator; 3) Os animais sofreram infecção por FV3, mas se recuperaram no decorrer do experimento, e 4) O inóculo utilizado pode ter sido de baixa virulência. Finalmente, foi discutida a presença de sinais clínicos reais de ranavírus e levantada a hipótese mais provável(AU)

Experimental Frog Virus 3 infection using Brazilian strain: amphibians susceptibility / Infecção experimental utilizando estirpe brasileira de Frog Virus 3: suceptibilidade de anfíbios

An alarming number of global warnings concerning amphibian mortality outbreaks have been released in recent years. Emerging diseases stand out as the main potential causes. Ranavirus is a worldwide-spread highly infectious disease capable of affecting even other ectothermic animals such as fish and reptiles. One major issue regarding this pathology is the lack of clinical signs before it leads up to death. Aiming at having a better understanding of anurans susceptibility, this study analyzed bullfrog (Lithobates catesbeianus) survival rate, when challenged with three doses of a Brazilian strain of Frog Virus 3 (FV3). The qPCR analysis indicated a low infectivity rate in these animals both as larvae and as adults. To elucidate the results, the following hypothesis was performed: 1) The amount of inoculum used on the frogs was insufficient to trigger an infection; 2) For the FV3 to produce clinical signs in this species, there is the need for a cofactor; 3) The animals did undergo FV3 infection but recovered in the course of the experiment, and 4) The inoculum utilized might have been low-virulence. Finally, the presence of actual clinical signs of ranavirus is discussed, with the more likely hypothesis.(AU)

Um número alarmante de notificações globais sobre surtos de mortalidade de anfíbios tem sido realizado nos últimos anos. As doenças emergentes destacam-se como as principais causas potenciais. O ranavírus é uma doença altamente infecciosa disseminada em todo o mundo, capaz de afetar até outros animais ectotérmicos como peixes e répteis. Uma questão importante em relação a essa patologia é a falta de sinais clínicos antes de levar à morte. Com o objetivo de compreender melhor a suscetibilidade dos anuros, o presente trabalho analisou a taxa de sobrevivência de rãs-touro (Lithobates catesbeianus), desafiadas com três doses de uma estirpe brasileira do Frog virus 3 (FV3). A análise de qPCR indicou baixa taxa de infectividade nesses animais, tanto como larvas quanto como adultos. Procurando esclarecer os resultados, foram formuladas as seguintes hipóteses: 1) A quantidade de inóculo aplicada nas rãs foi insuficiente para desencadear uma infecção; 2) Para que o FV3 dê sinais clínicos nesta espécie, é necessário um cofator; 3) Os animais sofreram infecção por FV3, mas se recuperaram no decorrer do experimento, e 4) O inóculo utilizado pode ter sido de baixa virulência. Finalmente, foi discutida a presença de sinais clínicos reais de ranavírus e levantada a hipótese mais provável(AU)

Experimental Frog Virus 3 infection using Brazilian strain: amphibians susceptibility / Infecção experimental utilizando estirpe brasileira de Frog Virus 3: suceptibilidade de anfíbios

An alarming number of global warnings concerning amphibian mortality outbreaks have been released in recent years. Emerging diseases stand out as the main potential causes. Ranavirus is a worldwide-spread highly infectious disease capable of affecting even other ectothermic animals such as fish and reptiles. One major issue regarding this pathology is the lack of clinical signs before it leads up to death. Aiming at having a better understanding of anurans susceptibility, this study analyzed bullfrog (Lithobates catesbeianus) survival rate, when challenged with three doses of a Brazilian strain of Frog Virus 3 (FV3). The qPCR analysis indicated a low infectivity rate in these animals both as larvae and as adults. To elucidate the results, the following hypothesis was performed: 1) The amount of inoculum used on the frogs was insufficient to trigger an infection; 2) For the FV3 to produce clinical signs in this species, there is the need for a cofactor; 3) The animals did undergo FV3 infection but recovered in the course of the experiment, and 4) The inoculum utilized might have been low-virulence. Finally, the presence of actual clinical signs of ranavirus is discussed, with the more likely hypothesis.

Um número alarmante de notificações globais sobre surtos de mortalidade de anfíbios tem sido realizado nos últimos anos. As doenças emergentes destacam-se como as principais causas potenciais. O ranavírus é uma doença altamente infecciosa disseminada em todo o mundo, capaz de afetar até outros animais ectotérmicos como peixes e répteis. Uma questão importante em relação a essa patologia é a falta de sinais clínicos antes de levar à morte. Com o objetivo de compreender melhor a suscetibilidade dos anuros, o presente trabalho analisou a taxa de sobrevivência de rãs-touro (Lithobates catesbeianus), desafiadas com três doses de uma estirpe brasileira do Frog virus 3 (FV3). A análise de qPCR indicou baixa taxa de infectividade nesses animais, tanto como larvas quanto como adultos. Procurando esclarecer os resultados, foram formuladas as seguintes hipóteses: 1) A quantidade de inóculo aplicada nas rãs foi insuficiente para desencadear uma infecção; 2) Para que o FV3 dê sinais clínicos nesta espécie, é necessário um cofator; 3) Os animais sofreram infecção por FV3, mas se recuperaram no decorrer do experimento, e 4) O inóculo utilizado pode ter sido de baixa virulência. Finalmente, foi discutida a presença de sinais clínicos reais de ranavírus e levantada a hipótese mais provável.

Experimental Frog Virus 3 infection using Brazilian strain: amphibians susceptibility / Infecção experimental utilizando estirpe brasileira de Frog Virus 3: suceptibilidade de anfíbios

An alarming number of global warnings concerning amphibian mortality outbreaks have been released in recent years. Emerging diseases stand out as the main potential causes. Ranavirus is a worldwide-spread highly infectious disease capable of affecting even other ectothermic animals such as fish and reptiles. One major issue regarding this pathology is the lack of clinical signs before it leads up to death. Aiming at having a better understanding of anurans susceptibility, this study analyzed bullfrog (Lithobates catesbeianus) survival rate, when challenged with three doses of a Brazilian strain of Frog Virus 3 (FV3). The qPCR analysis indicated a low infectivity rate in these animals both as larvae and as adults. To elucidate the results, the following hypothesis was performed: 1) The amount of inoculum used on the frogs was insufficient to trigger an infection; 2) For the FV3 to produce clinical signs in this species, there is the need for a cofactor; 3) The animals did undergo FV3 infection but recovered in the course of the experiment, and 4) The inoculum utilized might have been low-virulence. Finally, the presence of actual clinical signs of ranavirus is discussed, with the more likely hypothesis.

Um número alarmante de notificações globais sobre surtos de mortalidade de anfíbios tem sido realizado nos últimos anos. As doenças emergentes destacam-se como as principais causas potenciais. O ranavírus é uma doença altamente infecciosa disseminada em todo o mundo, capaz de afetar até outros animais ectotérmicos como peixes e répteis. Uma questão importante em relação a essa patologia é a falta de sinais clínicos antes de levar à morte. Com o objetivo de compreender melhor a suscetibilidade dos anuros, o presente trabalho analisou a taxa de sobrevivência de rãs-touro (Lithobates catesbeianus), desafiadas com três doses de uma estirpe brasileira do Frog virus 3 (FV3). A análise de qPCR indicou baixa taxa de infectividade nesses animais, tanto como larvas quanto como adultos. Procurando esclarecer os resultados, foram formuladas as seguintes hipóteses: 1) A quantidade de inóculo aplicada nas rãs foi insuficiente para desencadear uma infecção; 2) Para que o FV3 dê sinais clínicos nesta espécie, é necessário um cofator; 3) Os animais sofreram infecção por FV3, mas se recuperaram no decorrer do experimento, e 4) O inóculo utilizado pode ter sido de baixa virulência. Finalmente, foi discutida a presença de sinais clínicos reais de ranavírus e levantada a hipótese mais provável.

Use of polyclonal antibodies, electron microscopy and histopathology to detect iridovirus-like particles in bullfrogs / Uso de anticorpos policlonais, microscopia eletrônica e histologia para detecção de partículas semelhantes ao iridovírus em rãs-touro

Iridoviruses of the Ranavirus genus have been implicated in the decline in amphibians worldwide, capable of affecting animals both in the wild and in captivity. This study aimed to detect iridovirus-like particles from three frog farms in southeastern Brazil using primary polyclonal antibodies, transmission electron microscopy (TEM) and histologic findings. The target organs were liver and kidneys. Sixty adults and sixty tadpoles of bullfrogs (Lithobates catesbeianus) were used in the study. TEM revealed the presence of iridovirus-like particles in hepatic tissue using the negative staining technique. Positive results were also observed by immunoelectron microscopy and immunocytochemistry (ICC). The histological analysis of the samples showed liver hemorrhage and corpuscles inclusion in hepatocytes as well as glomerulotubular degeneration and necrosis in the kidneys. The methods used in this study were highly efficient to detect the presence of iridovirus-like particles and possible infection of ranavirus.(AU)

Os iridovirus do gênero Ranavirus têm sido implicados no declínio dos anfíbios em todo o mundo afetando animais de vida livre e aqueles em cativeiro. O objetivo deste estudo foi detectar a presença de partículas semelhantes ao iridovírus em três ranários na região sudeste do Brasil, utilizando anticorpos policlonais primários, microscopia eletrônica de transmissão (MET) e achados histológicos. Os órgãos alvo foram o fígado e os rins. Sessenta rãs-touro adultas (Lithobates catesbeianus) e sessenta girinos da mesma espécie foram usados para o estudo. A MET revelou a presença de partículas semelhantes ao iridovírus em tecido hepático utilizando a técnica de contrastação negativa. Os resultados positivos foram também observados por imunomicroscopia eletrônica e imunocitoquímica. As análises histológicas nas mesmas amostras evidenciaram hemorragia no fígado e corpúsculos de inclusão em hepatócitos, e degeneração glomerulotubular e necrose nos rins. Os métodos usados neste estudo foram altamente eficientes na detecção de partículas semelhantes ao iridovírus e possivel infecção por ranavirus.(AU)

Use of polyclonal antibodies, electron microscopy and histopathology to detect iridovirus-like particles in bullfrogs / Uso de anticorpos policlonais, microscopia eletrônica e histologia para detecção de partículas semelhantes ao iridovírus em rãs-touro

Iridoviruses of the Ranavirus genus have been implicated in the decline in amphibians worldwide, capable of affecting animals both in the wild and in captivity. This study aimed to detect iridovirus-like particles from three frog farms in southeastern Brazil using primary polyclonal antibodies, transmission electron microscopy (TEM) and histologic findings. The target organs were liver and kidneys. Sixty adults and sixty tadpoles of bullfrogs (Lithobates catesbeianus) were used in the study. TEM revealed the presence of iridovirus-like particles in hepatic tissue using the negative staining technique. Positive results were also observed by immunoelectron microscopy and immunocytochemistry (ICC). The histological analysis of the samples showed liver hemorrhage and corpuscles inclusion in hepatocytes as well as glomerulotubular degeneration and necrosis in the kidneys. The methods used in this study were highly efficient to detect the presence of iridovirus-like particles and possible infection of ranavirus.

Os iridovirus do gênero Ranavirus têm sido implicados no declínio dos anfíbios em todo o mundo afetando animais de vida livre e aqueles em cativeiro. O objetivo deste estudo foi detectar a presença de partículas semelhantes ao iridovírus em três ranários na região sudeste do Brasil, utilizando anticorpos policlonais primários, microscopia eletrônica de transmissão (MET) e achados histológicos. Os órgãos alvo foram o fígado e os rins. Sessenta rãs-touro adultas (Lithobates catesbeianus) e sessenta girinos da mesma espécie foram usados para o estudo. A MET revelou a presença de partículas semelhantes ao iridovírus em tecido hepático utilizando a técnica de contrastação negativa. Os resultados positivos foram também observados por imunomicroscopia eletrônica e imunocitoquímica. As análises histológicas nas mesmas amostras evidenciaram hemorragia no fígado e corpúsculos de inclusão em hepatócitos, e degeneração glomerulotubular e necrose nos rins. Os métodos usados neste estudo foram altamente eficientes na detecção de partículas semelhantes ao iridovírus e possivel infecção por ranavirus.

Resposta hepática à suplementação alimentar em rãs-touro sob condição de estresse / Liver response to dietary supplementation in bullfrog under stress condition

Evaluate the hepatoprotective effect of dietary supplementation with the probiotic (Bacillus subtilis) and with beta-glucan on bullfrog in stress of high stocking density. Animals were assigned in treatments: T1: 100 animals m-2 (control); T2: 236 animals m-2; T3: 236 animals m-2 supplemented with probiotic; T4: 236 animals m-2 supplemented with beta-glucan. Evaluated survival, weight gain (WG) and the condition of liver biochemistry and histopathology. There was no statistical difference in survival between treatments (P>0.05), but were observed significant differences for WG at 30 days, between not supplemented treatments and supplemented treatments (P 0.001). Biochemical analysis showed conditions very near among animals of control treatment and animals supplemented with beta-glucan. Histopathological analysis revealed lesions and cytoplasmic rarefaction in 100% of the samples, suggesting protein deficiency. The beta-glucan reduced the effects of stress in bullfrog and has shown hepatoprotective effect, but the probiotic Bacillus subtilis was not demonstrating the same effect.(AU)

Avaliou-se o efeito hepatoprotetor da suplementação alimentar com probiótico (Bacillus subtillis) e com betaglucana em rãs-touro submetidas à condição de estresse por adensamento. Os animais foram distribuídos nos tratamentos: T1: 100 animais m-2 (controle); T2: 236 animais m-2; T3: 236 animais m-2, suplementados com probiótico; e, T4: 236 animais m-2, suplementados com betaglucana. Avaliou-se sobrevivência, ganho em peso (GP) e a condição bioquímica e histopatológica dos fígados. Não foi observada diferença estatística para a sobrevivência (P>0,05), porém foram observadas diferenças significativas para o GP aos 30 dias, entre os tratamentos não suplementados e os suplementados (P 0,001). As avaliações bioquímicas mostraram condições muito próximas entre os animais do tratamento controle e aqueles suplementados com betaglucana. A análise histopatológica mostrou lesões e rarefação citoplasmática em 100% das amostras, sugerindo deficiência proteica. A betaglucana mostrou efeito hepatoprotetor, reduzindo os efeitos do estresse sobre o fígado de rã-touro, porém o probiótico Bacillus subtillis não apresentou o mesmo potencial.(AU)

Resposta hepática à suplementação alimentar em rãs-touro sob condição de estresse / Liver response to dietary supplementation in bullfrog under stress condition

Evaluate the hepatoprotective effect of dietary supplementation with the probiotic (Bacillus subtilis) and with beta-glucan on bullfrog in stress of high stocking density. Animals were assigned in treatments: T1: 100 animals m-2 (control); T2: 236 animals m-2; T3: 236 animals m-2 supplemented with probiotic; T4: 236 animals m-2 supplemented with beta-glucan. Evaluated survival, weight gain (WG) and the condition of liver biochemistry and histopathology. There was no statistical difference in survival between treatments (P>0.05), but were observed significant differences for WG at 30 days, between not supplemented treatments and supplemented treatments (P 0.001). Biochemical analysis showed conditions very near among animals of control treatment and animals supplemented with beta-glucan. Histopathological analysis revealed lesions and cytoplasmic rarefaction in 100% of the samples, suggesting protein deficiency. The beta-glucan reduced the effects of stress in bullfrog and has shown hepatoprotective effect, but the probiotic Bacillus subtilis was not demonstrating the same effect.

Avaliou-se o efeito hepatoprotetor da suplementação alimentar com probiótico (Bacillus subtillis) e com betaglucana em rãs-touro submetidas à condição de estresse por adensamento. Os animais foram distribuídos nos tratamentos: T1: 100 animais m-2 (controle); T2: 236 animais m-2; T3: 236 animais m-2, suplementados com probiótico; e, T4: 236 animais m-2, suplementados com betaglucana. Avaliou-se sobrevivência, ganho em peso (GP) e a condição bioquímica e histopatológica dos fígados. Não foi observada diferença estatística para a sobrevivência (P>0,05), porém foram observadas diferenças significativas para o GP aos 30 dias, entre os tratamentos não suplementados e os suplementados (P 0,001). As avaliações bioquímicas mostraram condições muito próximas entre os animais do tratamento controle e aqueles suplementados com betaglucana. A análise histopatológica mostrou lesões e rarefação citoplasmática em 100% das amostras, sugerindo deficiência proteica. A betaglucana mostrou efeito hepatoprotetor, reduzindo os efeitos do estresse sobre o fígado de rã-touro, porém o probiótico Bacillus subtillis não apresentou o mesmo potencial.

Frog farms as proposed in agribusiness aquaculture: economic viability based in feed conversion / A criação de rãs como proposta de agronegócio na aquicultura: viabilidade econômica baseada em conversão alimentar

Frog farming is an aquaculture activity that is represented little in the socioeconomic profile of Brazil, resulting in little technological investment and development in the food industry. However, the growing interest in the consumption of white and healthy meats, it has been projected as an alternative source of protein. The objective of this work was to estimate the economic viability of a commercial frog pond in the Southeast region of Brazil. The results demonstrated the high set up andoperating costs, where the feed and handling were considered the two aspects that define the cost of the product. The viability of the enterprise is attained only with good zootechnical rates (feed conversion ≤ 1.5:1 in the fattening phase and ≤ 2:1 in the tadpole phase) and high selling price (US$ 21.50 to 24.00 kg-1­minimal prices). The internal rate of return observed under the most viable conditions was 41.69% and payback of 2.33 years, rates commonly used in aquaculture. Therefore, thecommercial breeding of frogs is attractive if practiced with good feed conversion rates and favorable prices for market positioning in the sale of the meat as a gourmet product.(AU)

A ranicultura é uma atividade aquícola pouco representativa no perfil socioeconômico do país, acarretando em pouco investimento tecnológico e de desenvolvimento nas indústrias de insumos. Entretanto, o crescente interesse do consumo por carnes brancas e saudáveis, projeta esta atividade como uma fonte alternativa de proteína. O objetivo desta pesquisa foi estimar a viabilidade econômica de um ranário comercial na região Sudeste do Brasil. Os resultados apontaram altos custos operacionais, onde o alimento e manejo foram considerados os dois aspectos que definem o custo do produto. Por outro lado, esse estudo demonstrou a viabilidade do empreendimento, desde que se atinjam bons índices zootécnicos e elevado preço de venda (R$ 40,85 a 45,60 kg-1). A Taxa Interna de Retorno observada na condição mais viável foi de 41,69% e "payback" de 2,33 anos. Portanto acriação comercial de rãs torna-se atrativa quando praticada com índices de conversão alimentar favoráveis (≤ 1,5:1 na fase de engorda e ≤ 2:1 na fase degirino) e o posicionamento da comercialização da carne como produto "gourmet" de alto valor agregado.(AU)

Frog farms as proposed in agribusiness aquaculture: economic viability based in feed conversion / A criação de rãs como proposta de agronegócio na aquicultura: viabilidade econômica baseada em conversão alimentar

Frog farming is an aquaculture activity that is represented little in the socioeconomic profile of Brazil, resulting in little technological investment and development in the food industry. However, the growing interest in the consumption of white and healthy meats, it has been projected as an alternative source of protein. The objective of this work was to estimate the economic viability of a commercial frog pond in the Southeast region of Brazil. The results demonstrated the high set up and operating costs, where the feed and handling were considered the two aspects that define the cost of the product. The viability of the enterprise is attained only with good zootechnical rates (feed conversion ≤ 1.5:1 in the fattening phase and ≤ 2:1 in the tadpole phase) and high selling price (US$ 21.50 to 24.00 kg-¹ minimal prices). The internal rate of return observed under the most viable conditions was 41.69% and payback of 2.33 years, rates commonly used in aquaculture. Therefore, the commercial breeding of frogs is attractive if practiced with good feed conversion rates and favorable prices for market positioning in the sale of the meat as a gourmet product.(AU)

A ranicultura é uma atividade aquícola pouco representativa no perfil socioeconômico do país, acarretando em pouco investimento tecnológico e de desenvolvimento nas indústrias de insumos. Entretanto, o crescente interesse do consumo por carnes brancas e saudáveis, projeta esta atividade como uma fonte alternativa de proteína. O objetivo desta pesquisa foi estimar a viabilidade econômica de um ranário comercial na região Sudeste do Brasil. Os resultados apontaram altos custos operacionais, onde o alimento e manejo foram considerados os dois aspectos que definem o custo do produto. Por outro lado, esse estudo demonstrou a viabilidade do empreendimento, desde que se atinjam bons índices zootécnicos e elevado preço de venda (R$ 40,85 a 45,60 kg-¹). A Taxa Interna de Retorno observada na condição mais viável foi de 41,69% e “payback” de 2,33 anos. Portanto a criação comercial de rãs torna-se atrativa quando praticada com índices de conversão alimentar favoráveis (≤ 1,5:1 na fase de engorda e ≤ 2:1 na fase de girino) e o posicionamento da comercialização da carne como produto “gourmet” de alto valor agregado.(AU)

Toxicity of zinc sulphate for tadpoles of bullfrog (Lithobates catesbeianus): acute toxicity, chronic toxicity and hematological parameters / Toxicidade do sulfato de zinco para girinos de rã-touro (Lithobates catesbeianus): toxicidade aguda, crônica e parâmetros hematológicos

The aim of this study was to evaluate the effect of zinc sulfate (ZnSO4) on hematological parameters of bullfrog tadpoles, Lithobates catesbeianus, through acute and chronic toxicity tests. Although the toxicity of zinc for several species of fish has been studied, the toxicity of this metal is not well known to all aquatic organisms, especially for amphibians. The action of this metal ion on the respiratory system of fish occurs by precipitation of the mucus produced by the gills of fish that die by asphyxiation. The acute toxicity tests showed that LC50-96h (median lethal concentration) of zinc sulfate was 2.78 mg L-1, level considered below that set by CONAMA. Chronic toxicity tests were performed on three concentrations: CL50-96h/100 (0.0278 mg ZnSO4 L-1), LC50-96h/10 (0.278 mg ZnSO4 L-1) and LC50-96h (2.78 mg ZnSO4 L-1) during 312 hours under semi-static, and a control group (without addition of zinc sulfate). Analyses of hematological parameters indicate the occurrence of changes, showing the possibility of chronic effects in tadpoles of L. catesbeianus, which should be better studied.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do sulfato de zinco (ZnSO4) sobre os parâmetros hematológicos de girinos de rã-touro, Lithobates catesbeianus, por meio de testes de toxicidade aguda e crônica. Embora a toxicidade de zinco para várias espécies de peixes já tenha sido estudada, a toxicidade deste metal não é bem conhecida para todos os organismos aquáticos, principalmente para os anfíbios. A ação desse íon metálico sobre o sistema respiratório dos peixes ocorre pela precipitação da secreção da mucosa produzida pelas brânquias dos peixes, que morrem por asfixia. Os testes de toxicidade aguda mostraram que a CL50-96h (concentração letal média) do sulfato de zinco foi 2,78 mg L-1, nível inferior ao estabelecido pelo CONAMA. Os testes de toxicidade crônica foram realizados em três concentrações: CL50-96h/100 (0,0278 mg ZnSO4 L-1), CL50-96h/10 (0,278 mg ZnSO4 L-1) e CL50-96h (2,78 mg ZnSO4 L-1), durante 312 horas em sistema semiestático, além de um grupo controle (sem adição de sulfato de zinco). As análises dos parâmetros hematológicos evidenciaram a ocorrência de alterações, indicando a possibilidade de ocorrerem efeitos crônicos em girinos de L. catesbeianus, que devem ser melhor estudados.

Influence of incorporation of vitamin c to the diet in the productive performance of bullfrog Lithobates catesbeianus post-metamorphosed / Influência da incorporação de vitamina c à dieta no desempenho produtivo de rãs-touro Lithobates catesbeianus pós-metamorfoseadas

The experiment was developed in Marta Farm, Tremembé city, located in the State of São Paulo - Brazil, using a frogculture commercial project. The aim of this study was evaluate the performance (growth, survival and feed conversion) of bullfrogs Lithobates catesbeianus, post-metamorphosed fed with diets containing different amounts of vitamin C and their performance with the temperature. The animals were kept in 24 boxes of (2.0 x 1.0 m) with an initial density of 50 animals per square meter. The following levels of supplementation in the diet were tested: 0, 250, 500, 750, 1,000 and 2,000 mg vitamin C kg-1 of diet. The experimental design was completely randomized, with six treatments and four replicates. The parameters evaluated were: feed intake, weight gain, feed conversion and survival tax. The animals were weighed at the beginning of the experiment and every 30 days and recorded daily to room temperature. The percentage of food intake decreased with the growth of the frogs, from 3.85 to 1.2% of the live weight, and the mean of temperature decreased from 28 to 20.1°C. It was concluded that there was no influence of vitamin C on the performance (growth, survival and feed conversion) of bullfrogs in the growing stage.

O experimento foi desenvolvido no projeto de ranicultura da Fazenda Marta, localizada no município de Tremembé, no Estado de São Paulo Brasil. O objetivo foi verificar o desempenho produtivo (crescimento, sobrevivência, conversão alimentar) de rãs-touro, Lithobates catesbeianus, pós-metamorfoseadas alimentadas com dieta contendo diferentes quantidades de vitamina C e sua performance em função da temperatura. Os animais foram mantidos em 24 tanques de 2,0 x 1,0 m, em uma densidade inicial de 50 animais por metro quadrado. Foram testados os seguintes níveis de suplementação na dieta: 0, 250, 500, 750, 1.000 e 2.000 mg de vitamina C kg-1 de ração. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com seis tratamentos e quatro réplicas. Os parâmetros avaliados foram: consumo de ração, ganho de peso, conversão alimentar e taxa de sobrevivência. Os animais foram pesados no início do experimento e a cada 30 dias e diariamente registrou-se a temperatura ambiente. O percentual de consumo de ração reduziu, à medida que as rãs cresceram, de 3,85 para 1,20% do peso vivo e a temperatura ambiente diminuiu de 28,0 para 20,1°C. Pode-se concluir que não houve influência da vitamina C sobre o desempenho produtivo (crescimento, sobrevivência e conversão alimentar) de rãs-touro na fase de engorda.

Effect of the probiotic Bacillus subtilis on growing, survival and fisiology in the bullfrog (Rana catesbeiana) / Efeito do probiótico Bacillus subtilis no crescimento, sobrevivência e fisiologia de rãs-touro (Rana catesbeiana)

The probiotics are live micro-organisms in latency state that benefit the development of the animals. The objective of this work was to evaluate the effect of the Bacillus subtilis in different doses on the growing, survival and immunological and hematological analyses in the bullfrog (Rana catesbeiana) froglets. The test was developed in Experimental Frog farm of Agriculture Department, Pindamonhangaba, SP. Three doses of probiotics were tested (T1 2.5 g/kg, T2 5 g/kg and T3 10 g/kg of food). The test was carried out with three simultaneous replicates, plus control group. The products were added to froglet´s diet, mixed to the meal. The animals were previously feed with this diet for a period of 14 days and accompanied for about 42 days after metamorphose. Biometrics was performed every 7 days. It was evaluated the final weight, the survival, phagocytic capacity, phagocytic index and hematological analyses as hematocrit, hemoglobin level, erythrocyte number, absolute hematimetric indices (MCV and MCHC), differential counting of leucocytes and total counting of leucocytes and thrombocytes. The results had shown that the doses of the probiotics had produced none effect on the final weight and survival. The immunological analyses had shown that the probiotics have presented immunostimulant effect, but have not influenced the hematological parameters of the animals. &nbs

Os probióticos são micro-organismos vivos em estado de latência, que, adicionados ao alimento, beneficiam o desenvolvimento dos animais. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do probiótico Bacillus subtilis em diferentes doses sobre o crescimento, sobrevivência, análises imunológicas e hematológicas de rãs-touro (Rana catesbeiana) recém-metamorfoseadas. O teste foi desenvolvido no Ranário Experimental da Secretaria de Agricultura e Abastecimento, em Pindamonhangaba, SP. Foram utilizadas três doses do probiótico (T1 2,5 g/kg de ração, T2 5 g/kg de ração e T3 10 g/kg de ração), misturadas diretamente à ração. O teste foi conduzido com três réplicas simultâneas e um grupo controle. Os animais foram alimentados previamente com esta dieta por 14 dias e acompanhados por 42 dias após a metamorfose. As biometrias foram realizadas a cada 7 dias. Foram avaliados o peso final, a taxa de sobrevivência, a capacidade fagocítica e o índice fagocítico. Para as análises hematológicas foram determinados hematócrito, taxa de hemoglobina, número de eritrócitos e índices hematimétricos absolutos (VCM e CHCM), além da contagem diferencial e total de leucócitos e contagem total de trombócitos. Os resultados obtidos indicaram que o peso final e a sobrevivência não sofreram influência das doses do probiótico testado. As análises imunológicas mostraram que o probiótico apresentou efeito i

Histopathological evaluation of the spleen, heart, and brain of the tilapia Oreochromis niloticus (Linnaeus, 1758) exposed to mercury chloride / Avaliação histopatológica do baço, coração e encéfalo de tilápia Oreochromis niloticus (Linnaeus, 1758) exposta ao cloreto de mercúrio

The objective of this investigation was to assess the effects of the mercury chloride toxicity on the histological evidence of tilapia Oreochromis niloticus. The spleen, heart, and brain were investigated. Immature tilapia was used (27.13 ± 4.67 g and 12.44 ± 0.84 cm). The fishes (n=102) were exposed to three concentrations of mercury chloride (HgCl2): C1=0.02 mg L-1, C2=0.002 mg L-1, and C3=0.0002 mg L-1, plus the control group. Samples were collected after 3, 7, 10 and 14 days of exposure. The center of melanomacrophages of the spleen showed hyperplasia and hypertrofia, being proportional to the tested concentrations. However, in brain and heart the alterations were not relevant when compared to those observed in the control group.

O presente estudo verificou os efeitos tóxicos do cloreto de mercúrio em concentrações subletais sobre o quadro histológico da tilápia Oreochromis niloticus, analisando o baço, o coração e o encéfalo dos organismos. Para essas avaliações foram utilizados juvenis de tilápia com 27,13 ± 4,67 g e 12,44 ± 0,84 centímetros. Os animais (n=102) foram expostos a três concentrações de cloreto de mercúrio (HgCl2): C1=0,02 mg L-1; C2=0,002 mg L-1; e C3=0,0002 mg L-1, tendo-se o grupo controle como referência para os efeitos observados. O tempo total de duração do experimento foi de 14 dias, tomando-se amostras para análise no 3º, 7º, 10º e 14º dia. No baço observou-se hiperplasia e hipertrofia dos centros de melanomacrófagos, proporcionais às concentrações testadas. Entretanto, no encéfalo e no coração dos animais submetidos à experimentação, as alterações histológicas observadas não foram relevantes quando comparadas às observadas no grupo controle.

Gain in weight of bullfrong (Rana catesbeiana Shaw, 1802) reared in cages with internal structural differences / DESENVOLVIMENTO PONDERAL DE RÃS-TOURO (Rana catesbeiana SHAW, 1802), CRIADAS EM GAIOLAS COM DIDERENÇAS ESTRUTURAIS INTERNAS

No ranário da Estação Experimental de Piscicultura e Ranicultura de Pindamonhangaba, Estado de São Paulo (22°55'55"S e 45°27 22"W), pesquisou- se o ganho de peso de rãs-touro (Rana catesbeiana Shaw, 1802) criadas em gaiolas com diferentes estruturas internas e alimentadas com ração consorciada com 20% de larvas de Musca domestica. O período experimental estendeu-se de 09/03/90 a 12/12/90. As rãs foram confinadas em quatro tipos de gaiolas de fibra de vidro com características internas diferentes. O delineamento experimental foi o de um experimento em blocos casualizados, com quatro tratamentos e cinco repetições. Os tratamentos foram: gaiolas com o cocho ao nível do piso, com e sem abrigo, e gaiolas com o cocho abaixo do nível do piso, com e sem abrigo. A análise estatística dos ganhos de peso revelou que as gaiolas com abrigo propiciaram maior ganho de peso médio para as rãs, isto é, 46,40 g ou 70,91%, em média, a mais, em relação às que não possuíam abrigo, e que a posição do cocho nas gaiolas não influenciou o ganho de peso médio das rãs.

No ranário da Estação Experimental de Piscicultura e Ranicultura de Pindamonhangaba, Estado de São Paulo (22°55'55"S e 45°27 22"W), pesquisou- se o ganho de peso de rãs-touro (Rana catesbeiana Shaw, 1802) criadas em gaiolas com diferentes estruturas internas e alimentadas com ração consorciada com 20% de larvas de Musca domestica. O período experimental estendeu-se de 09/03/90 a 12/12/90. As rãs foram confinadas em quatro tipos de gaiolas de fibra de vidro com características internas diferentes. O delineamento experimental foi o de um experimento em blocos casualizados, com quatro tratamentos e cinco repetições. Os tratamentos foram: gaiolas com o cocho ao nível do piso, com e sem abrigo, e gaiolas com o cocho abaixo do nível do piso, com e sem abrigo. A análise estatística dos ganhos de peso revelou que as gaiolas com abrigo propiciaram maior ganho de peso médio para as rãs, isto é, 46,40 g ou 70,91%, em média, a mais, em relação às que não possuíam abrigo, e que a posição do cocho nas gaiolas não influenciou o ganho de peso médio das rãs.

Gain in weight of bullfrong (Rana catesbeiana Shaw, 1802) reared in cages with internal structural differences / DESENVOLVIMENTO PONDERAL DE RÃS-TOURO (Rana catesbeiana SHAW, 1802), CRIADAS EM GAIOLAS COM DIDERENÇAS ESTRUTURAIS INTERNAS

No ranário da Estação Experimental de Piscicultura e Ranicultura de Pindamonhangaba, Estado de São Paulo (22°55'55"S e 45°27 22"W), pesquisou- se o ganho de peso de rãs-touro (Rana catesbeiana Shaw, 1802) criadas em gaiolas com diferentes estruturas internas e alimentadas com ração consorciada com 20% de larvas de Musca domestica. O período experimental estendeu-se de 09/03/90 a 12/12/90. As rãs foram confinadas em quatro tipos de gaiolas de fibra de vidro com características internas diferentes. O delineamento experimental foi o de um experimento em blocos casualizados, com quatro tratamentos e cinco repetições. Os tratamentos foram: gaiolas com o cocho ao nível do piso, com e sem abrigo, e gaiolas com o cocho abaixo do nível do piso, com e sem abrigo. A análise estatística dos ganhos de peso revelou que as gaiolas com abrigo propiciaram maior ganho de peso médio para as rãs, isto é, 46,40 g ou 70,91%, em média, a mais, em relação às que não possuíam abrigo, e que a posição do cocho nas gaiolas não influenciou o ganho de peso médio das rãs.

No ranário da Estação Experimental de Piscicultura e Ranicultura de Pindamonhangaba, Estado de São Paulo (22°55'55"S e 45°27 22"W), pesquisou- se o ganho de peso de rãs-touro (Rana catesbeiana Shaw, 1802) criadas em gaiolas com diferentes estruturas internas e alimentadas com ração consorciada com 20% de larvas de Musca domestica. O período experimental estendeu-se de 09/03/90 a 12/12/90. As rãs foram confinadas em quatro tipos de gaiolas de fibra de vidro com características internas diferentes. O delineamento experimental foi o de um experimento em blocos casualizados, com quatro tratamentos e cinco repetições. Os tratamentos foram: gaiolas com o cocho ao nível do piso, com e sem abrigo, e gaiolas com o cocho abaixo do nível do piso, com e sem abrigo. A análise estatística dos ganhos de peso revelou que as gaiolas com abrigo propiciaram maior ganho de peso médio para as rãs, isto é, 46,40 g ou 70,91%, em média, a mais, em relação às que não possuíam abrigo, e que a posição do cocho nas gaiolas não influenciou o ganho de peso médio das rãs.

Comparison of four bullfrong (Rana catesbeiana Shaw, 1802) rearing systems : Tanque ilha, Confinamento, Anfigranja, and Gaiolas. 1 Gain in weight; 2 Operational cost / COMPARAÇÃO DE QUATRO SISTEMAS DE ENGORDA DE RÃS-TOURO (Rana catesbeiana SHAW, 1802) : TANQUE-ILHA, CONFINAMENTO, ANFRIGRANJA E GAIOLAS. 1 DESENVOLVIMENTO PONDERAL; 2 CUSTO OPERACIONAL

In the experimental outdoor facilities planned for frog culture in the Fishery and Frog Culture Station of Pindamonhangaba, São Paulo State, Brazil (22° 55' 55"S and 45° 27' 22"W), the gain in weight of bullfrogs and the operational cost of four rearing systems: Tanque-Ilha, Confinamento, Anfigranja, and Gaiolas, were studied. The methodology attended the specifications preconized by the authors of the systems, and they have in common the same animal density and the same food and physical management of the animals. The experimental design was that of a total randomized experiment with four treatments, represented by each one of the systems, and four repetitions. For the analysis of the results, the data were adjusted by a model that includes the effects of the systems and the size of the animals, by the initial number of frogs, through the analysis of covariance. The data were processed by the Harvey's minimum square method. The conclusion indicated that the Tanque-Ilha system was that which rendered a greater gain in the mean weight of the frogs, that means, 17.9% more than the Anfigranja system, 43.2% more than the Confinamento system, and 172.6% more than the Gaiolas system, by a cost of Cr$ 1,970.00 (US$ 1.14) per kilogram of alive frog. This work also evidenced the importance, for frog culture, of the practice by separating the animals in different groups of size for canni

No Ranário da Estação Experimental de Piscicultura e Ranicultura de Pindamoniiangaba, Estado de São Paulo (22° 55' 55"S e 45° 27' 22"W), pesquisou-se o desenvolvimento ponderal e o custo operacional de quatro sistemas de engorda de rãs-touro: Tanque-Ilha, Confinamento, Anfigranja e Gaiolas. A metodologia atendeu às especificações preconizadas pelos autores dos sistemas, a qual tem em comum a mesma densidade e manejos físico e alimentar dos animais. Para o delineamento experimental adotou-se um modelo inteiramente casualizado, com quatro tratamentos representados pelos sistemas, com quatro repetições. Para análise dos resultados procedeu-se ao ajuste dos dados através de um modelo que inclui os efeitos dos sistemas e do tamanho dos animais, pelo número inicial de rãs, através de uma análise de covariância. O processamento dos dados foi efetuado pelo método dos quadrados mínimos, apresentado por Harvey. A conclusão indicou que o sistema Tanque-Ilha foi o que propiciou um maior ganho de peso médio para as rãs, isto é, 17,9% a mais que o sistema Anfigranja, 43,2% a mais que o sistema Confinamento e 172,6% a mais que o sistema Gaiolas, a um custo de Cr$ 1.970,00 (US$ 1,14) por quilograma de rã viva. O trabalho também evidenciou a importância, para a ranicultura, da prática de triagens utilizadas no controle do canibalismo e do efeito da temperatura ambiente no ganho de peso, devendo

Comparison of four bullfrong (Rana catesbeiana Shaw, 1802) rearing systems : Tanque ilha, Confinamento, Anfigranja, and Gaiolas. 1 Gain in weight; 2 Operational cost / COMPARAÇÃO DE QUATRO SISTEMAS DE ENGORDA DE RÃS-TOURO (Rana catesbeiana SHAW, 1802) : TANQUE-ILHA, CONFINAMENTO, ANFRIGRANJA E GAIOLAS. 1 DESENVOLVIMENTO PONDERAL; 2 CUSTO OPERACIONAL

In the experimental outdoor facilities planned for frog culture in the Fishery and Frog Culture Station of Pindamonhangaba, São Paulo State, Brazil (22° 55' 55"S and 45° 27' 22"W), the gain in weight of bullfrogs and the operational cost of four rearing systems: Tanque-Ilha, Confinamento, Anfigranja, and Gaiolas, were studied. The methodology attended the specifications preconized by the authors of the systems, and they have in common the same animal density and the same food and physical management of the animals. The experimental design was that of a total randomized experiment with four treatments, represented by each one of the systems, and four repetitions. For the analysis of the results, the data were adjusted by a model that includes the effects of the systems and the size of the animals, by the initial number of frogs, through the analysis of covariance. The data were processed by the Harvey's minimum square method. The conclusion indicated that the Tanque-Ilha system was that which rendered a greater gain in the mean weight of the frogs, that means, 17.9% more than the Anfigranja system, 43.2% more than the Confinamento system, and 172.6% more than the Gaiolas system, by a cost of Cr$ 1,970.00 (US$ 1.14) per kilogram of alive frog. This work also evidenced the importance, for frog culture, of the practice by separating the animals in different groups of size for canni

No Ranário da Estação Experimental de Piscicultura e Ranicultura de Pindamoniiangaba, Estado de São Paulo (22° 55' 55"S e 45° 27' 22"W), pesquisou-se o desenvolvimento ponderal e o custo operacional de quatro sistemas de engorda de rãs-touro: Tanque-Ilha, Confinamento, Anfigranja e Gaiolas. A metodologia atendeu às especificações preconizadas pelos autores dos sistemas, a qual tem em comum a mesma densidade e manejos físico e alimentar dos animais. Para o delineamento experimental adotou-se um modelo inteiramente casualizado, com quatro tratamentos representados pelos sistemas, com quatro repetições. Para análise dos resultados procedeu-se ao ajuste dos dados através de um modelo que inclui os efeitos dos sistemas e do tamanho dos animais, pelo número inicial de rãs, através de uma análise de covariância. O processamento dos dados foi efetuado pelo método dos quadrados mínimos, apresentado por Harvey. A conclusão indicou que o sistema Tanque-Ilha foi o que propiciou um maior ganho de peso médio para as rãs, isto é, 17,9% a mais que o sistema Anfigranja, 43,2% a mais que o sistema Confinamento e 172,6% a mais que o sistema Gaiolas, a um custo de Cr$ 1.970,00 (US$ 1,14) por quilograma de rã viva. O trabalho também evidenciou a importância, para a ranicultura, da prática de triagens utilizadas no controle do canibalismo e do efeito da temperatura ambiente no ganho de peso, devendo

Toxicity of zinc sulphate for tadpoles of bullfrog (Lithobates catesbeianus): acute toxicity, chronic toxicity and hematological parameters / Toxicidade do sulfato de zinco para girinos de rã-touro (Lithobates catesbeianus): toxicidade aguda, crônica e parâmetros hematológicos

The aim of this study was to evaluate the effect of zinc sulfate (ZnSO4) on hematological parameters of bullfrog tadpoles, Lithobates catesbeianus, through acute and chronic toxicity tests. Although the toxicity of zinc for several species of fish has been studied, the toxicity of this metal is not well known to all aquatic organisms, especially for amphibians. The action of this metal ion on the respiratory system of fish occurs by precipitation of the mucus produced by the gills of fish that die by asphyxiation. The acute toxicity tests showed that LC50-96h (median lethal concentration) of zinc sulfate was 2.78 mg L-1, level considered below that set by CONAMA. Chronic toxicity tests were performed on three concentrations: CL50-96h/100 (0.0278 mg ZnSO4 L-1), LC50-96h/10 (0.278 mg ZnSO4 L-1) and LC50-96h (2.78 mg ZnSO4 L-1) during 312 hours under semi-static, and a control group (without addition of zinc sulfate). Analyses of hematological parameters indicate the occurrence of changes, showing the possibility of chronic effects in tadpoles of L. catesbeianus, which should be better studied.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do sulfato de zinco (ZnSO4) sobre os parâmetros hematológicos de girinos de rã-touro, Lithobates catesbeianus, por meio de testes de toxicidade aguda e crônica. Embora a toxicidade de zinco para várias espécies de peixes já tenha sido estudada, a toxicidade deste metal não é bem conhecida para todos os organismos aquáticos, principalmente para os anfíbios. A ação desse íon metálico sobre o sistema respiratório dos peixes ocorre pela precipitação da secreção da mucosa produzida pelas brânquias dos peixes, que morrem por asfixia. Os testes de toxicidade aguda mostraram que a CL50-96h (concentração letal média) do sulfato de zinco foi 2,78 mg L-1, nível inferior ao estabelecido pelo CONAMA. Os testes de toxicidade crônica foram realizados em três concentrações: CL50-96h/100 (0,0278 mg ZnSO4 L-1), CL50-96h/10 (0,278 mg ZnSO4 L-1) e CL50-96h (2,78 mg ZnSO4 L-1), durante 312 horas em sistema semiestático, além de um grupo controle (sem adição de sulfato de zinco). As análises dos parâmetros hematológicos evidenciaram a ocorrência de alterações, indicando a possibilidade de ocorrerem efeitos crônicos em girinos de L. catesbeianus, que devem ser melhor estudados.