Resumo
O Prochilodus brevis é um peixe migratório, de importância ecológica, econômica e social cujas ações antrópicas têm ameaçado sua sobrevivência. Nesse contexto, pesquisadores têm buscado estratégias que auxiliem na conservação e no cultivo dessa espécie em cativeiro. Portanto, os objetivos desse trabalho foram verificar a capacidade fecundante do sêmen criopreservado de P. brevis, definir a densidade de estocagem das pós-larvas, concentração diária de Artemia para cada pós-larva e o período de transição do alimento vivo para ração comercial na larvicultura de P. brevis. Foram realizados dois experimentos. No primeiro, o sêmen de P. brevis foi congelado em diluidor contendo solução de 5% de glicose e 10% de dimetilsulfóxido (DMSO) ou solução de 5% de glicose e 10% de metilglicol (MG). Posteriormente, o sêmen foi descongelado, avaliado e utilizado na fertilização assistida. Ovócitos foram fertilizados utilizando o sêmen descongelado e avaliados quanto à viabilidade embrionária e larval. No segundo experimento, foram testadas as densidades de estocagem de 10, 20 e 30 pós-larvas por litro de água, as concentrações diárias de 400, 600 e 800 náuplios de Artemia por pós-larva de peixe e os períodos para início da transição alimentar de quatro, seis e oito dias. Foi avaliado o desempenho em crescimento e sobrevivência das proles. O sêmen congelado em glicose e DMSO apresentou resultados de qualidade seminal superiores (P<0,001) ao congelado em glicose e MG. Somente o sêmen congelado em glicose e DMSO foi capaz de produzir larvas. As concentrações diárias de 600 e 800 náuplios de Artemia por pós-larva de P. brevis proporcionaram os melhores resultados de crescimento e sobrevivência (P<0,05) quando comparadas à concentração de 400 náuplios. Não houve diferença entre as densidades de estocagem testadas (P>0,05). No teste de transição alimentar não foram observadas diferenças (P>0,05). Conclui-se que a produção de larvas desta espécie utilizando sêmen congelado é viável, indicando-se o diluidor composto por 5% de glicose e 10% de DMSO. Assim como recomenda-se a densidade de estocagem de 30 pós-larvas/L e uma concentração diária de 600 náuplios de Artemia durante os primeiros três dias de alimentação exógena. E a partir do quarto dia deve-se fornecer, gradualmente, ração comercial (45% de proteína bruta).
Prochilodus brevis is a migratory fish of ecological, economic and social importance whose anthropic actions have threatened its survival. In this context, researchers have been looking for strategies that help in the conservation and cultivation of this species in captivity. Therefore, the objectives of this study were to verify the fecundating capacity of P. brevis cryopreserved sperm, to define the post-larvae stocking density, the daily concentration of Artemia for each post-larvae and the transition period from live to commercial feed in P. brevis larviculture. Two experiments were performed. In the first one, P. brevis sperm was frozen in a freezing media containing 5% glucose solution and 10% dimethylsulfoxide (DMSO) or 5% glucose solution and 10% methylglycol (MG). Subsequently, semen was thawed, evaluated and used in assisted fertilization. Oocytes were fertilized using thawed sperm and evaluated for embryonic and larval viability. In the second experiment, the stocking densities of 10, 20 and 30 post-larvae per liter of water, daily concentrations of 400, 600 and 800 Artemia nauplii per fish post-larvae and the periods for the beginning of four, six and eight days the feed transition were tested. The growth and survival performance of the offspring was evaluated. Sperm frozen in glucose and DMSO showed higher seminal quality results (P<0.001) than sperm frozen in glucose and MG. Only sperm frozen in glucose and DMSO was able to produce larvae. Daily concentrations of 600 and 800 Artemia nauplii per P. brevis post-larvae provided the best growth and survival results (P<0.05) when compared to the 400 nauplii concentration. There was no difference between the stocking densities tested (P>0.05). In the feed transition test no differences were observed (P>0.05). It is concluded that the production of this species larvae using frozen sperm is viable, indicating the freezing media composed of 5% glucose and 10% DMSO. As well as the stocking density of 30 post-larvae/L and a daily concentration of 600 Artemia nauplii during the first three days of exogenous feeding is recommended. And from the fourth day on, one should gradually supply commercial feed (45% crude protein).
Resumo
A curimatã comum é um peixe reofílico, importante componente do ecossistema fluvial e apreciado na culinária nordestina. No entanto, ações antrópicas têm ameaçado sua sobrevivência. Desta forma, surge nos pesquisadores, o interesse no desenvolvimento de protocolos de conservação do material genético, como a criopreservação seminal. Logo, a determinação do meio de congelação e da taxa de descongelação adequados, são passos fundamentais que possibilitarão a utilização dessa biotecnologia na produção de curimatã comum, reduzindo os riscos à sua sobrevivência. Portanto, o objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito de diferentes soluções diluidoras e taxas de descongelação sobre a qualidade do sêmen criopreservado de P. brevis. Para isso, 18 horas antes da coleta de sêmen, os machos receberam dose única de extrato hipofisário de carpa. Cada animal foi sedado com solução à base de eugenol e o sêmen foi coletado. As amostras foram diluídas em quatro meios de congelação (5% Glicose + Metilglicol 10%; 5% Glicose + Dimetilsulfóxido 10%; 0,9% NaCl + Metilglicol 10%; 0,9% NaCl + Dimetilsulfóxido 10%) envasadas em palhetas de 0,25 mL e congeladas em vapor de nitrogênio líquido. O sêmen foi descongelado após sete dias em três taxas de descongelação: 25 °C 30 s-1; 30 °C 16 s-1; 40 °C 12 s-1. Foram feitas as análises de motilidade, vitalidade e morfologia com auxílio de sistema automatizado de análise seminal (CASA). As características do sêmen in natura assemelharam-se, em sua maioria, às encontradas na literatura. Para o sêmen criopreservado, os maiores resultados de motilidade total e velocidade curvilinear (VCL) foram obtidos utilizando Glicose e DMSO, independente da taxa de descongelação empregada. Para a velocidade em linha reta (VSL) e velocidade média do percurso (VAP), o DMSO proporcionou os melhores resultados, independente do diluente e da taxa de descongelação. No que se refere à vitalidade, os maiores índices foram alcançados quando se utilizou DMSO e as taxas de descongelação de 30 °C 16 s-1 ou 40 °C 12 s-1. Quanto à análise morfológica, a maior porcentagem de espermatozoides normais foi obtida utilizando as taxas de 25 °C 30 s-1 e 40 °C 12 s-1, independente do meio de congelação. A qualidade seminal sofre interferência do meio de congelação, bem como da interação entre seus componentes (diluente e crioprotetor) e da taxa de descongelação empregada. Sob as condições metodológicas empregadas, recomenda-se a criopreservação do sêmen de P. brevis em 5% Glicose + DMSO 10% e descongelação a 30 °C durante 16 segundos ou 40 °C durante 12 segundos.
Curimatã comum is a migratory fish, an important component of river ecosystem and appreciated in the northeastern cuisine. However, human activities have threatened their survival. Thus arises in the researchers the interest in the development of genetic material storage protocols, such as seminal cryopreservation. Therefore, determining the appropriate freezing media and thawing rate are fundamental steps that will enable the use of this biotechnology in the production of common curimatã, reducing the risk to their survival. Therefore, the aim of this study was to evaluate the effect of different freezing media and thawing rates on the quality of P. brevis cryopreserved semen. For that, 18 hours before semen collection, males received a single dose of pituitary extract of carp. Each animal was sedated with eugenol solution-based and the semen was collected. Samples were diluted in four freezing media (5% Glucose + methyl glycol 10%; 5% Glucose + Dimethylsulfoxide 10%; 0.9% NaCl + methyl glycol 10%, 0.9% NaCl + Dimethylsulfoxide 10%) loaded in straws 0, 25 mL and frozen in liquid nitrogen vapor. The semen was thawed after seven days in three thawing rates: 25 °C 30 sec-1; 30 °C 16 sec-1; 40 °C 12 sec-1. The motility, vitality and morphology analyzes were performed by computer assisted sperm analysis (CASA). The in natura semen characteristics resembled, mostly, those found in the literature. For cryopreserved semen, the greatest results of total motility and curvilinear velocity (VCL) were obtained using Glucose and DMSO, regardless of thawing rate employed. For the straight-line velocity (VSL) and average path velocity (VAP), DMSO showed the best results, regardless of the diluent and thawing rate. As regards the vitality, the highest values were achieved when DMSO and thawing rates 30 °C/16 sec or 40 °C/12 sec were used. As to morphological analysis, the greatest percentage of normal sperm cells was obtained using the rates 25 °C/30 sec and 40 °C/12 sec, regardless of freezing media. The sperm quality suffers interference from the freezing media, as well as the interaction between its components (diluent and cryoprotectant) and the thawing rate used. Under the methodological conditions employed, it is recommended to P. brevis semen cryopreservation the use 5% Glucose + cryoprotectant DMSO 10% and thawing rate at 30 °C for 16 seconds or 40 °C for 12 seconds.