Expression analysis of phosphate induced genes in contrasting maize genotypes for phosphorus use efficiency / Análise da expressão de genes induzidos por fosfato em genótipos de milho contrastantes para eficiência de uso de fósforo

Phosphorus is an essential nutrient for plant growth and development. The ability of plants to acquire phosphate (Pi) from the rhizosphere soil is critical in the Brazilian Cerrado characterized by acidic soil. The induction of Pi transporters is one of the earliest molecular responses to Pi deficiency in plants. In this study, we characterize the transcriptional regulation of six (ZmPT1 to ZmPT6) high-affinity Pi transporters genes in four Pi-efficient and four Pi-inefficient maize (Zea mays) genotypes. The expression analysis indicated that Pi-starvation induced the transcription of all ZmPT genes tested. The abundance of transcripts was inversely related to Pi concentration in nutrient solution and was observed as early as five days following the Pi deprivation. The Pi-starved plants replenished with 250 µM Pi for four to five days resulted in ZmPT suppression, indicating the Pi role in gene expression. The tissue-specific expression analysis revealed the abundance of ZmPT transcripts in roots and shoots. The six maize Pi transporters were primarily detected in the upper and middle root portions and barely expressed in root tips. The expression profiles of the six ZmPTs phosphate transporters between and among Pi-efficient and Pi-inefficient genotypes showed an absence of significant differences in the expression pattern of the ZmPTs among Pi-efficient and Pi-inefficient genotypes. The results suggested that Pi acquisition efficiency is a complex trait determined by quantitative loci in maize.

O fósforo é um nutriente essencial para o crescimento e desenvolvimento das plantas. A capacidade de adquirir fosfato (Pi) é crítica para as plantas crescidas nos solos ácidos do Cerrado brasileiro. A indução de transportadores de Pi é uma das primeiras respostas moleculares à deficiência de fosfato em plantas. Neste estudo, caracterizamos a regulação transcricional de seis (ZmPT1 a ZmPT6) genes transportadores de Pi em quatro genótipos de milho (Zea mays) Pi-eficiente e quatro Pi-ineficientes. A análise de expressão indicou que a privação de Pi induziu a transcrição de todos os genes ZmPT. A abundância de transcritos foi inversamente relacionada à concentração de Pi na solução nutritiva e foi observada cinco dias após a privação de Pi. Em plantas Pi-deprivadas ocorreu supressão gênica após terem sido reabastecidas com 250 µM de Pi por quatro a cinco dias, indicando o papel do Pi na regulação da expressão gênica. A análise de expressão tecido-específico revelou a abundância de transcritos ZmPT em raízes e brotos. Os seis genes transportadores de Pi testados foram detectados principalmente nas porções superior e média das raízes e fracamente nas pontas das raízes. Os perfis de expressão dos seis genes ZmPT transportadores de fosfato nos genótipos Pi-eficientes e Pi-ineficientes mostraram uma ausência de diferenças significativas no padrão de expressão entre os genótipos Pi-eficientes e Pi-ineficientes. Os resultados indicaram que a eficiência na aquisição de Pi é uma característica complexa que envolve a participação de outros genes no milho.

Incubation variables, performance, and morphometry of the duodenal mucosa of Japanese quails (Coturnix coturnix japonica) submitted to different incubation temperatures and thermally challenged after hatching / [Variáveis de incubação, desempenho e morfometria da mucosa duodenal de codornas japonesas (Coturnix coturnix japonica) submetidas a diferentes temperaturas de incubação e desafiadas termicamente após eclosão]

This study aimed to evaluate the effects of different temperatures on incubation variables, performance, and morphometry of the duodenal mucosa of Japanese quails (Coturnix coturnix japonica) submitted to chronic heat stress after hatching. We distributed 540 eggs in three incubators with a temperature of 37.8°C and 60% of humidity. From the 6th day of incubation until hatching, the temperatures were adjusted to (37.8°C, 38.5°C and 39.5°C). After hatching, quails were evaluated for the quality score, weighed, and distributed in a completely randomized design with three incubation temperatures (37.8, 38.5, and 39.5°C) and two ambient temperatures (stress and thermoneutral). At 10, 20, 30, and 40 days they were weighed to determine the live weight (g) and weight gain(g). To collect the duodenum and determine morphometric parameters, we euthanized four quails of each treatment. The data were analyzed, and the differences between the means determined by the Tukey test at 5%. The incubation temperature of 39.5°C provided lower hatching rate and the live weight at birth; however, from the 10th day of age, increased live weight, weight gain, and positively influenced the morphological parameters of the duodenal mucosa in situations of chronic stress.(AU)

Objetivou-se avaliar os efeitos de diferentes temperaturas de incubação sobre as variáveis de incubação, desempenho e morfometria da mucosa duodenal de codornas japonesas (Coturnix coturnix japonica) submetidas ao estresse térmico crônico por calor após eclosão. Foram distribuídos 540 ovos em três incubadoras, com temperatura de 37,8°C e umidade 60%. A partir do sexto dia de incubação até a eclosão, as temperaturas foram ajustadas para 37,8°C, 38,5°C e 39,5°C. Após a eclosão, as codornas foram avaliadas quanto ao escore de qualidade, pesadas e distribuídas em um delineamento inteiramente ao acaso, com três temperaturas de incubação (37,8ºC, 38,5ºC e 39,5°C) e duas temperaturas ambientes (estresse e termoneutro). Aos 10, 20, 30 e 40 dias, foram pesadas para determinar o peso vivo (g) e o ganho de peso(g). Quatro codornas de cada tratamento foram eutanasiadas para coleta do duodeno, para determinar os parâmetros morfométricos. Os dados foram analisados e as diferenças entre as médias foram determinadas pelo teste de Tukey a 5%. A temperatura de incubação de 39,5°C proporcionou menor taxa de eclosão e menor peso vivo ao nascer, entretanto, a partir do 10° dia de idade, essa temperatura aumentou o peso vivo, o ganho de peso e influenciou positivamente os parâmetros morfológicos da mucosa duodenal em situações de estresse crônico.(AU)

Indução do estro em cutias (Dasyprocta leporina) utilizando-se protocolos à base de prostaglandina isolada ou em associação com análogo de GnRH / Estrus induction in agoutis (Dasyprocta leporina) using protocols based on prostaglandin isolated or in association to GnRH analogue

Comparou-se a eficiência de protocolos para indução de estro em cutias. Em cinco fêmeas, foram administradas duas doses de cloprostenol (5µg) com intervalo de nove dias, via intraperitoneal; em outras cinco, administraram-se 30µg de análogo do hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRH), via intravulvar, seguidos de 5µg de cloprostenol, via intraperitoneal, após sete dias e, após mais dois dias, nova dose do análogo de GnRH. A cada três dias, a ciclicidade reprodutiva dos animais foi monitorada, por meio de coleta de sangue, para dosagem hormonal, ultrassonografia ovariana e citologia vaginal. Duas das fêmeas que receberam apenas prostaglandina, as quais estavam em fase luteal no início do tratamento, manifestaram o estro aos três e seis dias após a segunda administração da droga. Já nas fêmeas que receberam a prostaglandina associada ao análogo do GnRH, duas que originalmente estavam em fase luteal apresentaram estro aos quatro dias após o tratamento, e uma outra apenas após 10 dias. Não foram evidenciadas diferenças estatísticas quanto à eficiência dos tratamentos (P>0,05). Conclui-se que, de acordo com os protocolos utilizados, o uso da prostaglandina isolada ou em associação com análogo do GnRH para a indução do estro em cutias D. leporina apresenta eficiência limitada às fêmeas que estejam em fase luteal por ocasião do início do tratamento.(AU)

We compared the efficiency of protocols for estrus induction in agoutis. Five females received double intraperitoneal administration of cloprostenol (5µg) on a 2-days interval; other five females were treated with intravulvar administration of 30µg gonadotrophin release hormone analogue (GnRH associated to intraperitoneal administration of 5µg cloprostenol after seven days and a new administration of GnRH analogue after two days. Every 3 days, the agoutis' reproductive cycle was monitored by blood collection for hormonal analysis, ovarian ultrasound and vaginal cytology. Two females, originally in luteal phase, that received isolated prostaglandin presented estrous signs at 3 and 6 days after the second drug administration. From the females that received the association, two that were originally in luteal phase presented estrus at 4 days after treatment, and one other presented estrus only after 10 days. There was no significant statistical difference regarding the efficiency of treatments for estrus induction (P>0.05). We conclude that, according to the protocols tested in the study, the use of isolated prostaglandin or its association to GnRH analogue for estrus induction in D. leporine shows an efficiency limited to the females that were in luteal phase in the beginning of the treatment.(AU)

Indução do estro em cutias (Dasyprocta leporina) utilizando-se protocolos à base de prostaglandina isolada ou em associação com análogo de GnRH / Estrus induction in agoutis (Dasyprocta leporina) using protocols based on prostaglandin isolated or in association to GnRH analogue

Comparou-se a eficiência de protocolos para indução de estro em cutias. Em cinco fêmeas, foram administradas duas doses de cloprostenol (5µg) com intervalo de nove dias, via intraperitoneal; em outras cinco, administraram-se 30µg de análogo do hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRH), via intravulvar, seguidos de 5µg de cloprostenol, via intraperitoneal, após sete dias e, após mais dois dias, nova dose do análogo de GnRH. A cada três dias, a ciclicidade reprodutiva dos animais foi monitorada, por meio de coleta de sangue, para dosagem hormonal, ultrassonografia ovariana e citologia vaginal. Duas das fêmeas que receberam apenas prostaglandina, as quais estavam em fase luteal no início do tratamento, manifestaram o estro aos três e seis dias após a segunda administração da droga. Já nas fêmeas que receberam a prostaglandina associada ao análogo do GnRH, duas que originalmente estavam em fase luteal apresentaram estro aos quatro dias após o tratamento, e uma outra apenas após 10 dias. Não foram evidenciadas diferenças estatísticas quanto à eficiência dos tratamentos (P>0,05). Conclui-se que, de acordo com os protocolos utilizados, o uso da prostaglandina isolada ou em associação com análogo do GnRH para a indução do estro em cutias D. leporina apresenta eficiência limitada às fêmeas que estejam em fase luteal por ocasião do início do tratamento.(AU)

We compared the efficiency of protocols for estrus induction in agoutis. Five females received double intraperitoneal administration of cloprostenol (5µg) on a 2-days interval; other five females were treated with intravulvar administration of 30µg gonadotrophin release hormone analogue (GnRH associated to intraperitoneal administration of 5µg cloprostenol after seven days and a new administration of GnRH analogue after two days. Every 3 days, the agoutis' reproductive cycle was monitored by blood collection for hormonal analysis, ovarian ultrasound and vaginal cytology. Two females, originally in luteal phase, that received isolated prostaglandin presented estrous signs at 3 and 6 days after the second drug administration. From the females that received the association, two that were originally in luteal phase presented estrus at 4 days after treatment, and one other presented estrus only after 10 days. There was no significant statistical difference regarding the efficiency of treatments for estrus induction (P>0.05). We conclude that, according to the protocols tested in the study, the use of isolated prostaglandin or its association to GnRH analogue for estrus induction in D. leporine shows an efficiency limited to the females that were in luteal phase in the beginning of the treatment.(AU)

Caracterização histomorfológica do sistema tegumentar auricular de cateto - Pecari tajacu Linnaeus, 1758) / Histomorphological characterization of collared peccary (Pecari tajacu Linnaeus, 1758) ear integumentary system

A criopreservação de tecido somático derivado da pele de catetos consiste numa alternativa para a conservação da biodiversidade por meio da associação com a transferência nuclear. Nesse contexto, a manipulação de tecidos da pele é uma etapa crucial para o sucesso dessa biotécnica. Portanto, o objetivo do presente estudo, foi caracterizar o sistema tegumentar auricular periférico de catetos, visando aprimorar a conservação tecidual. Para tanto, fragmentos auriculares de oito animais foram avaliados quanto às camadas teciduais, aos componentes, à atividade proliferativa e à viabilidade metabólica, usando-se as colorações hematoxilina-eosina e tricrômico de Gomori, quantificação de AgNORs e microscopia eletrônica de transmissão. Assim, tamanhos de 104,2µm e 222,6µm foram observados para epiderme e derme, com uma proporção volumétrica de 36,6% e 58,7%, respectivamente. Além disso, na epiderme, foram evidenciadas as camadas basal (22,5µm), intermediárias (53,5µm) e córnea (28,2µm), com valores médios de 65,3 células epidermais, 43,4 melanócitos e 14,8 halos perinucleares. Já a derme apresentou 127 fibroblastos, com 2,5 AgNORs/nucléolo. Adicionalmente, a atividade metabólica foi de 0,243. Em conclusão, o sistema tegumentar auricular periférico de catetos possui algumas marcantes variações em relação a outros mamíferos, quanto ao número de camadas e espessura da epiderme, quantidade de células epidermais, melanócitos e parâmetros proliferativos.(AU)

The cryopreservation of somatic tissue derived from skin of collared peccaries is an alternative for biodiversity conservation through association with nuclear transfer. In this context, tissue manipulation of skin is a critical step for the success of this biotechnique. Therefore, the aim was to characterize the peripheral ear integumentary system derived from collared peccaries, directing to improve tissue conservation. Thus, ear fragments of eight animals were evaluated for tissue layers, components, proliferative activity and metabolic viability, using hematoxylin-eosin and Gomori Trichrome, AgNORs quantification and transmission electronic microscopy. Hence, sizes of 104.2 µm and 222.6 µm were observed in the epidermis and dermis, with a volumetric ratio of 36.6% and 58.7%, respectively. Moreover, basal layer (22.5 µm), intermediate (53.5 µm) and cornea (28.2 µm), with mean values of 65.3 epidermal cells, 43.4 melanocytes and 14.8 perinuclear halos were evidenced in the epidermal. Already the dermis has 127 fibroblasts with 2.5 AgNORs/nucleolus. Additionally, the metabolic activity was 0.243. In conclusion, the peripheral ear integumentary system derived from collared peccaries possessed some important variations compared to other mammals, as the number of layers and thickness of the epidermis, number of epidermal cells, melanocytes and proliferative parameters.(AU)

Caracterização histomorfológica do sistema tegumentar auricular de cateto - Pecari tajacu Linnaeus, 1758) / Histomorphological characterization of collared peccary (Pecari tajacu Linnaeus, 1758) ear integumentary system

A criopreservação de tecido somático derivado da pele de catetos consiste numa alternativa para a conservação da biodiversidade por meio da associação com a transferência nuclear. Nesse contexto, a manipulação de tecidos da pele é uma etapa crucial para o sucesso dessa biotécnica. Portanto, o objetivo do presente estudo, foi caracterizar o sistema tegumentar auricular periférico de catetos, visando aprimorar a conservação tecidual. Para tanto, fragmentos auriculares de oito animais foram avaliados quanto às camadas teciduais, aos componentes, à atividade proliferativa e à viabilidade metabólica, usando-se as colorações hematoxilina-eosina e tricrômico de Gomori, quantificação de AgNORs e microscopia eletrônica de transmissão. Assim, tamanhos de 104,2µm e 222,6µm foram observados para epiderme e derme, com uma proporção volumétrica de 36,6% e 58,7%, respectivamente. Além disso, na epiderme, foram evidenciadas as camadas basal (22,5µm), intermediárias (53,5µm) e córnea (28,2µm), com valores médios de 65,3 células epidermais, 43,4 melanócitos e 14,8 halos perinucleares. Já a derme apresentou 127 fibroblastos, com 2,5 AgNORs/nucléolo. Adicionalmente, a atividade metabólica foi de 0,243. Em conclusão, o sistema tegumentar auricular periférico de catetos possui algumas marcantes variações em relação a outros mamíferos, quanto ao número de camadas e espessura da epiderme, quantidade de células epidermais, melanócitos e parâmetros proliferativos.(AU)

The cryopreservation of somatic tissue derived from skin of collared peccaries is an alternative for biodiversity conservation through association with nuclear transfer. In this context, tissue manipulation of skin is a critical step for the success of this biotechnique. Therefore, the aim was to characterize the peripheral ear integumentary system derived from collared peccaries, directing to improve tissue conservation. Thus, ear fragments of eight animals were evaluated for tissue layers, components, proliferative activity and metabolic viability, using hematoxylin-eosin and Gomori Trichrome, AgNORs quantification and transmission electronic microscopy. Hence, sizes of 104.2 µm and 222.6 µm were observed in the epidermis and dermis, with a volumetric ratio of 36.6% and 58.7%, respectively. Moreover, basal layer (22.5 µm), intermediate (53.5 µm) and cornea (28.2 µm), with mean values of 65.3 epidermal cells, 43.4 melanocytes and 14.8 perinuclear halos were evidenced in the epidermal. Already the dermis has 127 fibroblasts with 2.5 AgNORs/nucleolus. Additionally, the metabolic activity was 0.243. In conclusion, the peripheral ear integumentary system derived from collared peccaries possessed some important variations compared to other mammals, as the number of layers and thickness of the epidermis, number of epidermal cells, melanocytes and proliferative parameters.(AU)

Morfologia e dinâmica testicular em cutias (Dasyprocta prymnolopha) adultas / Testicular morphology and dynamic in adult agoutis (Dasyprocta prymnolopha)

Este trabalho objetivou apresentar a caracterização da morfologia do testículo de cutia (Dasyproctaprymnolopha) macho, com o intuito de colaborar com o conhecimento da morfofisiologia reprodutiva da espécie. Foram utilizados testículos de 47 animais, com idade entre um e dois anos, pesos homogêneos (2,08 ± 0,23kg), oriundos do Núcleo de Estudos e Preservação de Animais Silvestres do Centro de Ciências Agrárias da Universidade Federal do Piauí. As estruturas foram dissecadas, descritas, e fragmentos foram processados para a microscopia de luz, sendo, posteriormente avaliada a atividade gonadal. Observou-se que os testículos são órgãos elipsoides alongados, podendo ser encontrados na região inguinal ou na cavidade abdominal, não apresentando um escroto bem delimitado. Verificou-se também parênquima com característica histológica padrão para o órgão em mamíferos, com a identificação de oito tipos de associações celulares, caracterizando os estádios do ciclo do epitélio seminífero, com menor e maior frequência dos estádios 3 e 5, respectivamente.(AU)

This study meant to characterize the morphology of the testicle from (Dasyprocta prymnolopha) agouti males, in order to collaborate with the knowledge of reproductive morphophysiology of the specie. Testicles were used from 47 animals aged between 1 and 2 years, homogeneous weight (2.08±0.23kg), coming from the Centre for the Study and Conservation of Wild Animals of Agricultural Sciences Center of the Federal University of Piauí. The structures were dissected, described and fragments were processed for light microscopy, and, subsequently, gonadal activity was evaluated. Testes were observed to be elongated ellipsoidal bodies that can be found in the groin or in the abdominal cavity, not having a clearly defined scrotum. We also could see parenchymal with standard histological characteristic for the mammalian body, with the identification of eight types of cell associations, characterized epithelium Seminiferous stages of the cycle, with lower and higher frequency of stages 3 and 5, respectively.(AU)

Morfologia e dinâmica testicular em cutias (Dasyprocta prymnolopha) adultas / Testicular morphology and dynamic in adult agoutis (Dasyprocta prymnolopha)

Este trabalho objetivou apresentar a caracterização da morfologia do testículo de cutia (Dasyproctaprymnolopha) macho, com o intuito de colaborar com o conhecimento da morfofisiologia reprodutiva da espécie. Foram utilizados testículos de 47 animais, com idade entre um e dois anos, pesos homogêneos (2,08 ± 0,23kg), oriundos do Núcleo de Estudos e Preservação de Animais Silvestres do Centro de Ciências Agrárias da Universidade Federal do Piauí. As estruturas foram dissecadas, descritas, e fragmentos foram processados para a microscopia de luz, sendo, posteriormente avaliada a atividade gonadal. Observou-se que os testículos são órgãos elipsoides alongados, podendo ser encontrados na região inguinal ou na cavidade abdominal, não apresentando um escroto bem delimitado. Verificou-se também parênquima com característica histológica padrão para o órgão em mamíferos, com a identificação de oito tipos de associações celulares, caracterizando os estádios do ciclo do epitélio seminífero, com menor e maior frequência dos estádios 3 e 5, respectivamente.(AU)

This study meant to characterize the morphology of the testicle from (Dasyprocta prymnolopha) agouti males, in order to collaborate with the knowledge of reproductive morphophysiology of the specie. Testicles were used from 47 animals aged between 1 and 2 years, homogeneous weight (2.08±0.23kg), coming from the Centre for the Study and Conservation of Wild Animals of Agricultural Sciences Center of the Federal University of Piauí. The structures were dissected, described and fragments were processed for light microscopy, and, subsequently, gonadal activity was evaluated. Testes were observed to be elongated ellipsoidal bodies that can be found in the groin or in the abdominal cavity, not having a clearly defined scrotum. We also could see parenchymal with standard histological characteristic for the mammalian body, with the identification of eight types of cell associations, characterized epithelium Seminiferous stages of the cycle, with lower and higher frequency of stages 3 and 5, respectively.(AU)

Morphology and vascularization of the corpus luteum of peccaries (Pecari tajacu, Linnaeus, 1758) throughout the estrous cycle / Morfologia e vascularização do corpo lúteo de catetos (Pecari tajacu, Linnaeus, 1758) ao longo do ciclo estral

The current paper characterizes the changes in morphology and vascularization of the corpus luteum of collared peccaries during the estrous cycle and correlates progesterone synthesis (P4). Twenty females were subjected to a treatment for estrus synchronization; an ear implant containing 1.5 mg of norgestomet was implanted on D0, whereas on D9 the peccaries received an IM injection of eCG 200UI and 50g of PGF2a. The animals were divided into four groups (G1, G2, G3 and G4) and euthanized on post-ovulation days 3, 12, 18 and 22. The ovaries were collected and the corpora lutea were measured and processed for histological and vascular density (Dv). Blood was collected for dosage of P4 serum. The morphology of the ovaries, the corpora lutea and P4 varied significantly during the estrous cycle (P<0.001). There was a significant co-relationship between weight and length of the ovaries and CL (r = 0.66, r = 0.52, P<0.05, respectively) and between weight, length and width of the CL and P4 (r = 0.51, r = 0.54 and r = 0.68, P<0.05, respectively). The luteal Dv was highly influenced by the estrous cycle phase (P<0.0001). The P4 and luteal Dv concentrations were higher in G2 and evidenced maximum secretory activity, with a highly significant correlation (P<0.0001). Assessed lutein parameters may estimate the phase of the estrous cycle in peccaries and the functional activity of the corpus luteum.(AU)

Objetivou-se caracterizar as variações na morfologia e vascularização do corpo lúteo (CL) de catetos durante ciclo estral (CE) e correlacioná-las com a concentração de progesterona (P4). Vinte fêmeas de cateto foram submetidas a tratamento de sincronização do estro; no D0 receberam implante auricular contendo 1,5mg de norgestomet, no D9 injeção via IM de 200UI de eCG e 50µg de PGF2α. Os animais foram divididos em quatro grupos (G1, G2, G3 e G4) e eutanasiados nos dias três, 12, 18 e 22 pós-ovulação. Os ovários foram coletados e os CL foram mensurados e processados para avaliação histológica e da densidade vascular (Dv). O sangue foi coletado para dosagem da P4 sérica. A morfologia dos ovários, CL e a concentração de P4 variaram significativamente durante o CE (P<0,001). Houve correlação significativa entre peso e comprimento dos ovários e CL (r = 0,66, r = 0,52, P<0,05, respectivamente) e entre peso, comprimento e largura do CL e a concentração de P4 (r=0,51, r=0,54 e r=0,68; P<0,05, respectivamente). A Dv do CL se mostrou muito influenciada pela fase do CE (P<0,001) e apresentou alta correlação significativa (P< 0,001). No G2 os maiores valores de P4 e Dv confirmaram máxima atividade secretória do CL nesse estádio. Os parâmetros luteínicos avaliados podem ser usados para estimar a fase do ciclo estral em catetos e a atividade funcional do CL.(AU)

Adrenal glands of Spix's yellow-toothed cavy (Galea spixii, Wagler, 1831): morphological and morphometric aspects / Glândulas adrenais de preás (Galea spixii, Wagler, 1831): aspectos morfológicos e morfométricos

Considering the physiological importance and need of greater morphophysiological knowledge of adrenal glands, the aims of present study were compare the morphometric data between left and right adrenal of male and female; perform a histological, scanning and transmission electron microscopy study showing tissue constitution of glands; finally, in order to define the presence and correct site of the cytochrome P450c17 expression in adrenal glands, immunohistochemical study of this enzyme was performed in 18 adrenal glands (right n=9 and left n=9) of nine adult Galea spixii (four males and five females). Right adrenal was more cranially positioned than left adrenal; dimensions (weight, length and width) of right adrenal was larger than left adrenal; no differences between male and female body and adrenal measurements were found; the morphology of cells and different amounts of lipid droplets may be related to the different demands of steroid hormones production, related to each zone of the adrenal cortex; and, the cytochrome P450c17 immunolocalization in fasciculate and reticular zone may be related with synthesis of 17-hydroxy-pregnenolone, 17-hydroxy-progesterone, dehydroepiandrosterone or androstenedione.(AU)

Considerando a importância fisiológica e a necessidade de melhor conhecimento morfofisiológico das glândulas adrenais, os objetivos do presente estudo foram comparar dados morfométricos entre adrenais direitas e esquerdas de machos e fêmeas; realizar estudos histológicos e microscopia eletrônica de varredura e transmissão revelando a constituição tecidual das glândulas; finalmente, foi realizado estudo imunohistoquímico com objetivo de definir a presença e correto sítio de expressão da citocromo P450c17 nas glândulas adrenais em 18 glândulas adrenais (direita n=9 e esquerda n=9) de nove Galea spixii adultos (quatro machos e cinco fêmeas). A glândula adrenal direita estava posicionada mais cranialmente que a adrenal esquerda; as dimensões (peso, comprimento e largura) da glândula adrenal direita foram maiores que as da esquerda; não houve diferença entre as medidas corpóreas e das adrenais entre machos e fêmeas; a morfologia das células e diferentes quantidades de gotículas lipídicas podem estar relacionadas a diferentes demandas na produção de hormônios esteroides relacionados a cada zona do córtex adrenal; e, a imunolocalização da citocromo P450 na zona fasciculada e reticular pode estar relacionado com a síntese de 17-hidroxi-pregnenolona, 17-hidroxi-progesterona, dehidroepiandrosterona ou androstenediona.(AU)

Adrenal glands of Spix's yellow-toothed cavy (Galea spixii, Wagler, 1831): morphological and morphometric aspects

Abstract Considering the physiological importance and need of greater morphophysiological knowledge of adrenal glands, the aims of present study were compare the morphometric data between left and right adrenal of male and female; perform a histological, scanning and transmission electron microscopy study showing tissue constitution of glands; finally, in order to define the presence and correct site of the cytochrome P450c17 expression in adrenal glands, immunohistochemical study of this enzyme was performed in 18 adrenal glands (right n=9 and left n=9) of nine adult Galea spixii (four males and five females). Right adrenal was more cranially positioned than left adrenal; dimensions (weight, length and width) of right adrenal was larger than left adrenal; no differences between male and female body and adrenal measurements were found; the morphology of cells and different amounts of lipid droplets may be related to the different demands of steroid hormones production, related to each zone of the adrenal cortex; and, the cytochrome P450c17 immunolocalization in fasciculate and reticular zone may be related with synthesis of 17-hydroxy-pregnenolone, 17-hydroxy-progesterone, dehydroepiandrosterone or androstenedione.

Resumo Considerando a importância fisiológica e a necessidade de melhor conhecimento morfofisiológico das glândulas adrenais, os objetivos do presente estudo foram comparar dados morfométricos entre adrenais direitas e esquerdas de machos e fêmeas; realizar estudos histológicos e microscopia eletrônica de varredura e transmissão revelando a constituição tecidual das glândulas; finalmente, foi realizado estudo imunohistoquímico com objetivo de definir a presença e correto sítio de expressão da citocromo P450c17 nas glândulas adrenais em 18 glândulas adrenais (direita n=9 e esquerda n=9) de nove Galea spixii adultos (quatro machos e cinco fêmeas). A glândula adrenal direita estava posicionada mais cranialmente que a adrenal esquerda; as dimensões (peso, comprimento e largura) da glândula adrenal direita foram maiores que as da esquerda; não houve diferença entre as medidas corpóreas e das adrenais entre machos e fêmeas; a morfologia das células e diferentes quantidades de gotículas lipídicas podem estar relacionadas a diferentes demandas na produção de hormônios esteroides relacionados a cada zona do córtex adrenal; e, a imunolocalização da citocromo P450 na zona fasciculada e reticular pode estar relacionado com a síntese de 17-hidroxi-pregnenolona, 17-hidroxi-progesterona, dehidroepiandrosterona ou androstenediona.

Cultivo in vitro de células derivadas de pele em mamíferos silvestres - estado da arte / In vitro culture of wild mammals skin derived cells - state of art

O cultivo de células somáticas derivadas da pele consiste numa técnica de relevante aplicabilidade,tanto para a investigação básica quanto para o uso em biotécnicas reprodutivas. Além disso, o cultivo de célulasda pele derivadas de mamíferos silvestres tem sido uma etapa interessante na formação de criobancos, visando àpreservação da biodiversidade genética. Assim, o objetivo desta revisão é apresentar os progressos técnicosalcançados no cultivo de células somáticas em mamíferos silvestres, destacando as principais variaçõesencontradas nos meios e evidenciando os avanços em algumas espécies.

The culture of somatic cells derived from skin is a technique of important applicability, both for basicresearch and for the use in reproductive biotechnologies. Moreover, skin cell culture derived from wildmammals has been an interesting step to build a cryobank, aimed at preserving genetic biodiversity. Thus, theaim of this review is to present the technical progress achieved in the somatic cell culture in wild mammals,highlighting the main variances found in the media and showing the progress in some species.

Cultivo in vitro de células derivadas de pele em mamíferos silvestres - estado da arte / In vitro culture of wild mammals skin derived cells - state of art

O cultivo de células somáticas derivadas da pele consiste numa técnica de relevante aplicabilidade,tanto para a investigação básica quanto para o uso em biotécnicas reprodutivas. Além disso, o cultivo de célulasda pele derivadas de mamíferos silvestres tem sido uma etapa interessante na formação de criobancos, visando àpreservação da biodiversidade genética. Assim, o objetivo desta revisão é apresentar os progressos técnicosalcançados no cultivo de células somáticas em mamíferos silvestres, destacando as principais variaçõesencontradas nos meios e evidenciando os avanços em algumas espécies.(AU)

The culture of somatic cells derived from skin is a technique of important applicability, both for basicresearch and for the use in reproductive biotechnologies. Moreover, skin cell culture derived from wildmammals has been an interesting step to build a cryobank, aimed at preserving genetic biodiversity. Thus, theaim of this review is to present the technical progress achieved in the somatic cell culture in wild mammals,highlighting the main variances found in the media and showing the progress in some species.(AU)

Reproductive efficiency of adult and prepubertal goats subjected to repeated follicular aspiration / Eficiência reprodutiva em cabras adultas e pré-púberes após repetidas sessões de aspiração folicular

The objective of this study was to assess the reproductive response of adult and prepubertal goats subjected to repeated laparoscopic ovum pick-up (LOPU). The study animals were divided into two groups, specifically, adult nanny goats (GA, n=10) and prepubertal nanny goats (GP, n=10), which were subjected to estrous synchronization and ovarian stimulation for LOPU. Both groups underwent six LOPU procedures at seven-day intervals and were subsequently subjected to controlled mating and pregnancy diagnosis to evaluate their future fertility. The study showed a reduction in the number of follicles visualized and in the amount and quality of the oocytes that were recovered and exposed to in vitro maturation. As indicated by the fertility test, however, no complications were found during the laparoscopic procedures that would impair the reproductive future of the animals. Therefore, a viable number of oocytes were obtained even with the decreased reproductive efficiency, proving that repeated LOPUs do not interfere with the reproductive of adult and prepubertal nanny goats. These results indicate a positive aspect of this procedure, allowing for increasing reproductive performance of this kind, when used for the production in vitro.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta reprodutiva de cabras adultas e pré-púberes submetidas a repetidas aspirações foliculares por videolaparoscopia (LOPU). Os animais do estudo foram divididos em dois grupos, especificamente cabras adultas (GA, n = 10) e pré-púberes (GP, n = 10), que foram submetidas a sincronização de estro e estimulação ovariana para LOPU. Ambos os grupos foram submetidos a seis procedimentos LOPU em intervalos de sete dias e foram posteriormente submetidos à monta controlada e posterior diagnóstico de gestação para avaliar sua fertilidade. O estudo mostrou uma diminuição do número de folículos visualizados, na quantidade e na qualidade dos oócitos que foram recuperados e expostos à maturação in vitro. Tal como indicado pelo teste de fertilidade, no entanto, não foram observadas grandes complicações durante os procedimentos laparoscópicos que pudessem prejudicar o futuro reprodutivo dos animais. Portanto, foi obtido um número de oócitos viáveis, mesmo com a diminuição da eficiência reprodutiva, provando que repetidas LOPU não interferem na reprodutividade de animais adultos e pré-púberes. Estes resultados indicam um aspecto positivo desse procedimento, possibilitando um aumento da eficiência reprodutiva dessa espécie quando utilizado para a produção in vitro.(AU)

Establishing the hypoosmotic swelling test for sperm analysis in collared peccaries (Pecari tajacu) / Estabelecimento do teste hiposmótico para a análise de sêmen de catetos (Pecari tajacu)

Soluções hiposmóticas com diferentes concentrações (0, 50, 100, 150, 200mOsm/L) foram testadas para a avaliação funcional da membrana espermática de catetos (n=13). Foi verificado que o número de espermatozoides reagidos diminuía (P<0,05) de acordo com o aumento da osmolaridade do meio. A maior porcentagem (71,8%) de espermatozoides reagidos, bem como a menor variação nas respostas osmóticas, foi detectada com o uso de água destilada (0mOsm/L) (P<0,05), a qual também apresentou a menor variação nos resultados, de acordo com os erros padrão verificados. Em conclusão, a água destilada aparenta ser uma solução adequada para o uso no teste hiposmótico para sêmen de catetos.(AU)

Antimicrobial activity of an L-amino acid oxidase isolated from Bothrops leucurus snake venom

Some snake venom proteins present enzymatic activities, such as L-amino acid oxidase (LAAO). The aim of this paper was to investigate the effect of Bothrops leucurus total venom (BleuTV) and its fraction LAAO (BleuLAAO) on bacteria, yeast, and promastigote forms of Leishmania amazonensis and Leishmania chagasi, and epimastigote forms of Trypanosoma cruzi. BleuTV was isolated with a Protein Pack 5PW® (Waters Corporation, USA), and several fractions were obtained. BleuLAAO was purified to high molecular homogeneity, and its N-terminal amino acid sequence shared a high degree of amino acid conservation with other LAAOs. BleuTV inhibited Staphylococcus aureus growth in a dose-dependent manner, with a minimum inhibitory concentration (MIC) of 25 ìg/mL, which corresponded to its minimum lethal concentration (MLC). BleuTV also inhibited the growth of promastigote forms of L. chagasi and L. amazonensis, with respective IC50 values of 1.94 ìg/mL and 5.49 ìg/mL. Furthermore, it repressed T. cruzi growth with an IC50 of 1.14 ìg/mL. However, BleuLAAO did not inhibit the growth of the microorganisms studied and was not toxic to macrophages. BleuTV had low toxicity against macrophages at the concentrations studied. In conclusion, whole venom from Bothrops leucurus inhibited the growth of some microorganisms, including S. aureus, Leishmania sp., and T. cruzi.(AU)