Zoonoses em cães e gatos atendidos em Projeto de Controle de Natalidade: Toxoplasma gondii, Leishmania spp. e Leptospira spp., sorodiagnóstico e epidemiologia / Zoonosis in dogs and cats attended by the Birth Control Project: Toxoplasma gondii, Leishmania spp. and Leptospira spp., serodiagnosis and epidemiology

A proximidade da relação homem-animal tem aumentado o risco de transmissão de doenças de caráter zoonótico. O objetivo desse trabalho foi determinar a prevalência de anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii, anti- Leishmania spp. e anti- Leptospira spp. nos cães e gatos atendidos pelo Projeto Controle de Natalidade (PCN) nos anos de 2004 a 2012 e verificar a significância estatística de variáveis ambientais e da população de estudo à presença dos agentes infecciosos. Amostras de sangue de 271 cães e 415 gatos foram colhidas por venopunção jugular ou cefálica para a posterior obtenção dos soros. Estes foram submetidos à técnica de imunofluorescência indireta para detecção de anticorpos IgG anti-T. gondii e anti-Leishmania spp. e à técnica de soroaglutinação microscópica para detecção de anticorpos anti- Leptospira spp. A tabulação dos dados foi realizada utilizando-se o pacote estatístico EpiInfo (3.4.3). Dos soros caninos examinados, 20,6% (56/271), 1,3% (3/236) e 21,6% (51/236) foram positivos para T. gondii, Leishmania spp. e Leptospira spp., respectivamente. Encontrou-se maior prevalência de anticorpos anti- T. gondii em cães sem raça definida (p=0, 0009), em cães alimentados com carne crua ou mal cozida (p= 0,0101) e naqueles que não receberam vacina polivalente (p= 0,0147). Não houve associação estatística entre as variáveis avaliadas no questionário epidemiológico para leishmaniose e leptospirose. Dos soros felinos analisados, 20,9% (87/415) foram positivos para T. gondii. Maiores prevalências foram observadas nos felinos com hábito de caçar roedores (p= 0,0388) e que não recebem água tratada (p= 0,0294). Os resultados obtidos confirmam a importância dos fatores de risco ingestão de carne crua ou mal cozida, ingestão de água não tratada e predação de roedores para infecção por T. gondii. Demonstrou-se baixa prevalência ao sorodiagnostico para Leishmania spp. Os sorovares de Leptospira spp. mais frequentes foram Copenhageni, Canicola e Butembo.(AU)

Increasing human-animal proximity has also increased risks of zoonotic disease transmission. This study measured the prevalence of anti-Toxoplasma gondii, anti-Leishmania spp. and anti-Leptospira spp. IgG antibodies in dogs and cats attended by the Birth Control Project (BCP) from 2004 to 2012 to determine which environmental variables were significantly associated with infectious agents in the study population. Blood samples from 271 dogs and 415 cats were collected by jugular or cephalic venipuncture for serological analysis. Indirect immunofluorescence assays were used to detect anti-T. gondii and anti-Leishmania spp. IgG antibodies and microscopic serum-agglutination tests were used to detect anti- Leptospira spp. antibodies. Data tabulation and statistical analyses were performed using EpiInfo (3.4.3). Among canine sera samples, 20.6% (56/271), 1.3% (3/236), and 21.6% (51/236) were positive for T. gondii, Leishmania spp., and Leptospira spp., respectively. Higher T. gondii prevalence was found in dogs of unknown breeding history (p=0.0009), those fed raw or undercooked meat (p=0.0101), and those that did not receive the polyvalent vaccine (p=0.0147). There was no statistically significant association between leishmaniosis and leptospirosis and variables evaluated in the epidemiological questionnaire. Among feline sera samples, 20.9% (87/415) were positive for T. gondii. The highest prevalence rates were observed in felines that hunted rodents (p=0.0388) and that consumed untreated water (p=0.0294). These results confirmed that ingestion of raw or undercooked meat, drinking untreated water, and predation of rodents were important risk factors for T. gondii infection. A low Leishmania spp. serodiagnostic prevalence was observed. The most frequent Leptospira spp. serovars were Copenhageni, Canicola, and Butembo.(AU)

Seroepidemiology of Leishmania spp. in dogs residing in Telêmaco Borba, Paraná, Brazil / Soroepidemiologia da Leishmania spp. em cães do município de Telêmaco Borba, Paraná, Brasil

Leishmaniasis is an important metazoonosis caused by protozoa of the genus Leishmania and has a heteroxenic life cycle involving invertebrate and vertebrate hosts. Transmission occurs during the blood meal of infected phlebotomine sand flies in wild species, domestic animals, and humans. The dog is a reservoir for the parasite causing visceral leishmaniasis (VL), whereas in American tegumentary leishmaniasis (ATL), dogs are erratic hosts that are accidentally infected, as in humans.Dogs are considered an important indicator of the parasite and its vectors in the environment, thus highlighting the importance of diagnosis in these animals. This study aimed to assess the seroepidemiology of Leishmania spp. in dogs in the municipality of Telêmaco Borba that were part of a castration campaign. Blood samples from 191 dogs were collected, and their owners were surveyed on various epidemiological variables. Serological analysis was performed using indirect immunofluorescence (IIF) and rapid immunochromatography (DPP®). Screening by IIF identified 13 (6.81%) positive animals, none of which were positive for the DPP® test, which is specific for VL. Statistical analysis of the questionnaire responses indicated a significant association between seropositivity and the presence of stacked or composting leaves in the backyard (p = 0.0498), forest areas (squares, woods, parks) near the residence (p = 0.0015), and poorly healing ulcerated or nodular epidermal lesions in the dog (p = 0.0138). This study revealed the presence of anti-Leishmania spp. IgG antibodies in dogs residing in Telêmaco Borba, suggesting the presence of the parasite and vectorin the environment. In addition, the existence of stacked or composting leaves in the backyard, forest areas near the residence, and epidermal lesions in dogs are factors associated with Leishmania spp. infection in pet dogs.(AU)

A leishmaniose é uma importante metazoonose causada por protozoários do gênero Leishmania, com ciclo de vida heteroxênico que envolve hospedeiros invertebrados e vertebrados. A transmissão ocorre durante o repasto sanguíneo do flebotomíneo infectado em animais domésticos e silvestres e no homem.O cão é caracterizado como reservatório do protozoário na leishmaniose visceral, já na leishmaniose tegumentar americana é um hospedeiro errático que, assim como o homem, se infecta acidentalmente. O cão ainda pode ser considerado um importante sinalizador da presença do protozoário e dos vetores no ambiente, assinalando assim a importância do diagnóstico nestes animais. Este trabalho teve como objetivo conhecer a soroepidemiologia da Leishmania spp. em cães do Município de Telêmaco Borbaque participaram de um mutirão de castração. Foram coletadas amostras de sangue de 191 cães e aplicado um questionário epidemiológico a seus proprietários. A análise sorológica foi realizada pelas técnicas Imunofluorescência Indireta (IFI) e Imunocromatografia rápida (DPP®). A triagem realizada pela IFI revelou 13 (6,81%) animais reagentes, destes nenhum apresentou positividade no teste DPP®, específico para leishmaniose visceral. A análise estatística das variáveis presentes no questionário epidemiológico indicou associação significativa entre a sorologia positiva e presença de folhas amontoadas/compostagem no quintal (p=0,0498), áreas de mata (praças, bosques, parques) nos arredores da residência (p=0,0015) e lesões ulceradas e/ou nodulares de difícil cicatrização na pele de animais (p=0,0138). Este estudo revelou que há anticorpos IgG anti-Leishmania spp. em cães do Município de Telêmaco Borba, sugerindo a presença do protozoário e do vetor no ambiente, e que a existência de folhas amontoadas/compostagem no quintal, áreas de mata nos arredores da residência e lesões na pele de animais são fatores associados à infecção por Leishmania spp. nestes cães.(AU)

Soroprevalência da Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) canina e fauna de Flebotomíneos (Diptera: Psychodidae) em Bela Vista do Paraíso, Paraná / Seroprevalence of Cutaneous Leishmaniasis (LC) in dogs and identification of vectors (Diptera: Psychodidae) in Bela Vista do Paraíso, Parana state

O trabalho teve como objetivo determinar a soroprevalência da Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) canina no município de Bela Vista do Paraíso, Paraná, comparar as técnicas de imunofluorescência indireta (IFI) e ensaio imunoenzimático (ELISA) e identificar as espécies de flebotomíneos presentes, possivelmente envolvidas no ciclo do parasito. Amostras de sangue de 489 cães foram submetidas à pesquisa de anticorpos anti-Leishmania sp. pela IFI e ELISA. Foram consideradas positivas as amostras que apresentaram título ≥ 40 na IFI e densidade ótica ≥ 0.174 no ELISA. Entre as amostras analisadas, 222 (45,4%) foram reagentes pela IFI e 189 (38,7%) pelo ELISA. Comparando-se os testes foram encontradas 176 amostras positivas (36,0%) e 254 negativas (51,9%) para ambas as técnicas. A sensibilidade do ELISA foi de 79,3% e a especificidade foi de 95,1%. O coeficiente global do teste foi de 87,0% com coeficiente Kappa de 0,75. A análise das variáveis para cães com sorologia positiva pela IFI demonstrou diferença significativa em relação à ausência de matas e ausência de convívio com outras espécies animais. Em cães sororeagentes pelo ELISA as variáveis que apresentaram diferença significativa foram o tipo de mata ciliar existente no ambiente, a ausência de lixo, o esgoto a céu aberto e lançado diretamente em rios ou córregos e do lixo lançado em terreno baldio, queimado ou enterrado. O resultado obtido com a captura dos flebotomíneos foi a predominância do Lutzomyia whitmani com 79,9% das espécies coletadas. Os resultados demonstraram que a LTA está amplamente disseminada na população canina do município de Bela Vista do Paraíso, e que tanto a IFI como o ELISA podem ser utilizados para o diagnóstico. Deste modo o cão apresenta-se como um elo entre o ciclo silvestre e o peridomiciliar da LTA, podendo tornar-se um sinalizador do agente no ecossistema da doença nesse ecossistema.

The aim of this study was to determine the seroprevalence of Cutaneous Leishmaniasis (CL) in dogs of Bela Vista do Paraiso, Parana state, compare the IFA and ELISA techniques and identify the vectors possibly involved in the cycle of the parasite. Were collected blood samples from 489 dogs that were subjected to detection of anti-Leishmania sp. by IFA and by ELISA. Were considered positive samples ≥40 titers in IFA and for ELISA ≥ 0.174 optical density. Among the samples analyzed, 222 (45.4%) were positive by IFA and 189 (38.7%) by ELISA. Comparing the tests were found 176 positive samples (36.0%) and 254 negative (51.9%) for both techniques. The sensitivity of ELISA was 79.3% and specificity was 95.1%. The global coefficient of the test was 87.0% with kappa coefficient of 0.75. Analysis of variables for dogs with positive serology by IFA showed significant differences regarding the absence of forests and lack of contact with other animal species. Positive sera by ELISA in dogs variables that showed significant differences were the type of riparian vegetation existing in the environment, the lack of garbage, open sewers and released directly into rivers or streams and garbage thrown on wasteland, burned or buried. The result obtained with the capture of sandflies was the predominance of Lutzomyia whitmani with 79.9% of the species collected. The result obtained with the capture of sandflies was the predominance of Lutzomyia whitmani with 79.9% of the species collected. The results showed that the LTA is widespread in the canine population of Bela Vista do Paraiso, and both the IFI and ELISA can be used for diagnosis. So the dog appears as a link between wild and peridomestic cycle of CL may become an amplifier of disease in this ecosystem.

Bovine anaplasmosis: epidemiological and clinical aspects, and control / Anaplasmose bovina: aspectos epidemiológicos, clínicos e controle

Anaplasma marginale (Theiler 1910) is an obligatory intraerythrocytic rickettsia of susceptible ruminants, transmitted biologically by ticks and mechanically by flies and fomites. Following transmission, A. marginale multiplies within mature erythrocytes and the resulting diseases is characterized by anemia, weight loss, abortion, and death. Anaplasmosis is an economically important disease affecting dairy and beef cattle being present in north, central and south America, Australian and African southeast. Several serologic tests, including complement fixation, card agglutination, immunofluorescent-antibody (IFA) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) have been utilized for epidemiological studies and international movements of animals. The prevalence of Anaplasmosis around the world varies from 2% to 100%, depending on the region, assay utilized and animal age. In Brazil, several epidemiological inquires realized in different states, showed rates varying from 16,3% to 100% seropositive animals. The propose of this work was to collect information on the epidemiology, clinical and control of bovine Anaplasmosis.

Anaplasma marginale (Theiler 1910) é uma rickettsia intraeritrocítica obrigatória de ruminantes susceptíveis, transmitida, biológica e mecanicamente por carrapatos e insetos hematófagos. Determina as formas clínicas aguda, superaguda, leve, crônica, com um período pré-patente de 20 a 40 dias seguido por parasitemia e intensa anemia, provocando perdas com um custo estimado de 40 a 100 milhões de dólares anuais. O A. marginale está amplamente distribuído nas regiões tropicais, subtropicais e temperadas do mundo, sendo causa primária de anaplasmose em bovinos, estando presente na América do Norte, América Central, América do Sul, Austrália, e Sudeste Africano. A prevalência varia de 2,1% avaliada pelo teste de Fixação de Complemento, 85,9% pelo ELISA a 100% pelo Teste do Cartão. No Brasil, sua prevalência varia entre 16,3% a 100% quando avaliadas pelo TCR, 68 a 98% pela IFI e 87,5% pelo cELISA, nos diferentes Estados e regiões do Brasil. A. marginale confere imunidade de origem humoral e celular que não é dependente de infecção persistente. O objetivo deste trabalho foi reunir informações sobre os aspectos epidemiológicos, clínicos e controle da anaplasmose bovina.

Bovine anaplasmosis: epidemiological and clinical aspects, and control / Anaplasmose bovina: aspectos epidemiológicos, clínicos e controle

Anaplasma marginale (Theiler 1910) is an obligatory intraerythrocytic rickettsia of susceptible ruminants, transmitted biologically by ticks and mechanically by flies and fomites. Following transmission, A. marginale multiplies within mature erythrocytes and the resulting diseases is characterized by anemia, weight loss, abortion, and death. Anaplasmosis is an economically important disease affecting dairy and beef cattle being present in north, central and south America, Australian and African southeast. Several serologic tests, including complement fixation, card agglutination, immunofluorescent-antibody (IFA) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) have been utilized for epidemiological studies and international movements of animals. The prevalence of Anaplasmosis around the world varies from 2% to 100%, depending on the region, assay utilized and animal age. In Brazil, several epidemiological inquires realized in different states, showed rates varying from 16,3% to 100% seropositive animals. The propose of this work was to collect information on the epidemiology, clinical and control of bovine Anaplasmosis.  

Anaplasma marginale (Theiler 1910) é uma rickettsia intraeritrocítica obrigatória de ruminantes susceptíveis, transmitida, biológica e mecanicamente por carrapatos e insetos hematófagos. Determina as formas clínicas aguda, superaguda, leve, crônica, com um período pré-patente de 20 a 40 dias seguido por parasitemia e intensa anemia, provocando perdas com um custo estimado de 40 a 100 milhões de dólares anuais. O A. marginale está amplamente distribuído nas regiões tropicais, subtropicais e temperadas do mundo, sendo causa primária de anaplasmose em bovinos, estando presente na América do Norte, América Central, América do Sul, Austrália, e Sudeste Africano. A prevalência varia de 2,1% avaliada pelo teste de Fixação de Complemento, 85,9% pelo ELISA a 100% pelo Teste do Cartão. No Brasil, sua prevalência varia entre 16,3% a 100% quando avaliadas pelo TCR, 68 a 98% pela IFI e 87,5% pelo cELISA, nos diferentes Estados e regiões do Brasil. A. marginale confere imunidade de origem humoral e celular que não é dependente de infecção persistente. O objetivo deste trabalho foi reunir informações sobre os aspectos epidemiológicos, clínicos e controle da anaplasmose bovina.    

Seroepidemiology of Leishmania spp. in dogs residing in Telêmaco Borba, Paraná, Brazil / Soroepidemiologia da Leishmania spp. em cães do município de Telêmaco Borba, Paraná, Brasil

Leishmaniasis is an important metazoonosis caused by protozoa of the genus Leishmania and has a heteroxenic life cycle involving invertebrate and vertebrate hosts. Transmission occurs during the blood meal of infected phlebotomine sand flies in wild species, domestic animals, and humans. The dog is a reservoir for the parasite causing visceral leishmaniasis (VL), whereas in American tegumentary leishmaniasis (ATL), dogs are erratic hosts that are accidentally infected, as in humans.Dogs are considered an important indicator of the parasite and its vectors in the environment, thus highlighting the importance of diagnosis in these animals. This study aimed to assess the seroepidemiology of Leishmania spp. in dogs in the municipality of Telêmaco Borba that were part of a castration campaign. Blood samples from 191 dogs were collected, and their owners were surveyed on various epidemiological variables. Serological analysis was performed using indirect immunofluorescence (IIF) and rapid immunochromatography (DPP®). Screening by IIF identified 13 (6.81%) positive animals, none of which were positive for the DPP® test, which is specific for VL. Statistical analysis of the questionnaire responses indicated a significant association between seropositivity and the presence of stacked or composting leaves in the backyard (p = 0.0498), forest areas (squares, woods, parks) near the residence (p = 0.0015), and poorly healing ulcerated or nodular epidermal lesions in the dog (p = 0.0138). This study revealed the presence of anti-Leishmania spp. IgG antibodies in dogs residing in Telêmaco Borba, suggesting the presence of the parasite and vectorin the environment. In addition, the existence of stacked or composting leaves in the backyard, forest areas near the residence, and epidermal lesions in dogs are factors associated with Leishmania spp. infection in pet dogs.

A leishmaniose é uma importante metazoonose causada por protozoários do gênero Leishmania, com ciclo de vida heteroxênico que envolve hospedeiros invertebrados e vertebrados. A transmissão ocorre durante o repasto sanguíneo do flebotomíneo infectado em animais domésticos e silvestres e no homem.O cão é caracterizado como reservatório do protozoário na leishmaniose visceral, já na leishmaniose tegumentar americana é um hospedeiro errático que, assim como o homem, se infecta acidentalmente. O cão ainda pode ser considerado um importante sinalizador da presença do protozoário e dos vetores no ambiente, assinalando assim a importância do diagnóstico nestes animais. Este trabalho teve como objetivo conhecer a soroepidemiologia da Leishmania spp. em cães do Município de Telêmaco Borbaque participaram de um mutirão de castração. Foram coletadas amostras de sangue de 191 cães e aplicado um questionário epidemiológico a seus proprietários. A análise sorológica foi realizada pelas técnicas Imunofluorescência Indireta (IFI) e Imunocromatografia rápida (DPP®). A triagem realizada pela IFI revelou 13 (6,81%) animais reagentes, destes nenhum apresentou positividade no teste DPP®, específico para leishmaniose visceral. A análise estatística das variáveis presentes no questionário epidemiológico indicou associação significativa entre a sorologia positiva e presença de folhas amontoadas/compostagem no quintal (p=0,0498), áreas de mata (praças, bosques, parques) nos arredores da residência (p=0,0015) e lesões ulceradas e/ou nodulares de difícil cicatrização na pele de animais (p=0,0138). Este estudo revelou que há anticorpos IgG anti-Leishmania spp. em cães do Município de Telêmaco Borba, sugerindo a presença do protozoário e do vetor no ambiente, e que a existência de folhas amontoadas/compostagem no quintal, áreas de mata nos arredores da residência e lesões na pele de animais são fatores associados à infecção por Leishmania spp. nestes cães.

Clinical, pathological and serologic aspects of experimental toxoplasmosis in young dogs / Aspectos clínicos, patológicos e sorológicos da toxoplasmose experimental em cães jovens

Toxoplasmosis is a disease caused by Toxoplasma gondii, that affects all warm- blooded- animals including human beings. The lack of information about the clinical response of dogs to T. gondii infection led us to experimentally inoculate nine young dogs with three different strains of T. gondii. The animals were examine daily during 30 days. Lymph node enlargement was the only clinical alteration detected in all dogs. Ophthalmologic changes were observed in seven dogs. T. gondii was isolated in blood and urine in all dogs and the disease was confirmed histopathologically. Serologic, hematologic, and biochemical changes compatible with T. gondii infection were observed. Our findings characterize clinical and laboratory changes in toxoplasmosis in young dogs.

A toxoplasmose é causada pelo Toxoplasma gondii , que acomete todos os animais de sangue quente inclusive o homem. A falta de informação na literatura da resposta clínica dos cães à infecção pelo T. gondii levou-nos a inocular experimentalmente nove cães jovens com três diferentes cepas, onde foram acompanhados durante 30 dias. Nesse período observou-se aumento de volume dos linfonodos em todos os cães inoculados e alterações oftalmológicas em sete cães. Titulo de anticorpos anti- T.gondii observados já 4º DPI demonstraram a precocidade da resposta nestes animais. O T. gondii foi isioaldo no sangue e urina da todos os cães e a doença foi confirmada histopatologicamnete. Alterações sorológicas, hematológicas e bioquímicas observadas, foram compatíveis com infecção pelo T.gondi. Assim os achados clínicos e laboratoriais foram característicos da toxoplasmose em cães jovens.

Zoonoses em cães e gatos atendidos em Projeto de Controle de Natalidade: Toxoplasma gondii, Leishmania spp. e Leptospira spp., sorodiagnóstico e epidemiologia / Zoonosis in dogs and cats attended by the Birth Control Project: Toxoplasma gondii, Leishmania spp. and Leptospira spp., serodiagnosis and epidemiology

A proximidade da relação homem-animal tem aumentado o risco de transmissão de doenças de caráter zoonótico. O objetivo desse trabalho foi determinar a prevalência de anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii, anti- Leishmania spp. e anti- Leptospira spp. nos cães e gatos atendidos pelo Projeto Controle de Natalidade (PCN) nos anos de 2004 a 2012 e verificar a significância estatística de variáveis ambientais e da população de estudo à presença dos agentes infecciosos. Amostras de sangue de 271 cães e 415 gatos foram colhidas por venopunção jugular ou cefálica para a posterior obtenção dos soros. Estes foram submetidos à técnica de imunofluorescência indireta para detecção de anticorpos IgG anti-T. gondii e anti-Leishmania spp. e à técnica de soroaglutinação microscópica para detecção de anticorpos anti- Leptospira spp. A tabulação dos dados foi realizada utilizando-se o pacote estatístico EpiInfo (3.4.3). Dos soros caninos examinados, 20,6% (56/271), 1,3% (3/236) e 21,6% (51/236) foram positivos para T. gondii, Leishmania spp. e Leptospira spp., respectivamente. Encontrou-se maior prevalência de anticorpos anti- T. gondii em cães sem raça definida (p=0, 0009), em cães alimentados com carne crua ou mal cozida (p= 0,0101) e naqueles que não receberam vacina polivalente (p= 0,0147). Não houve associação estatística entre as variáveis avaliadas no questionário epidemiológico para leishmaniose e leptospirose. Dos soros felinos analisados, 20,9% (87/415) foram positivos para T. gondii. Maiores prevalências foram observadas nos felinos com hábito de caçar roedores (p= 0,0388) e que não recebem água tratada (p= 0,0294). Os resultados obtidos confirmam a importância dos fatores de risco ingestão de carne crua ou mal cozida, ingestão de água não tratada e predação de roedores para infecção por T. gondii. Demonstrou-se baixa prevalência ao sorodiagnostico para Leishmania spp. Os sorovares de Leptospira spp. mais frequentes foram Copenhageni, Canicola e Butembo.

Increasing human-animal proximity has also increased risks of zoonotic disease transmission. This study measured the prevalence of anti-Toxoplasma gondii, anti-Leishmania spp. and anti-Leptospira spp. IgG antibodies in dogs and cats attended by the Birth Control Project (BCP) from 2004 to 2012 to determine which environmental variables were significantly associated with infectious agents in the study population. Blood samples from 271 dogs and 415 cats were collected by jugular or cephalic venipuncture for serological analysis. Indirect immunofluorescence assays were used to detect anti-T. gondii and anti-Leishmania spp. IgG antibodies and microscopic serum-agglutination tests were used to detect anti- Leptospira spp. antibodies. Data tabulation and statistical analyses were performed using EpiInfo (3.4.3). Among canine sera samples, 20.6% (56/271), 1.3% (3/236), and 21.6% (51/236) were positive for T. gondii, Leishmania spp., and Leptospira spp., respectively. Higher T. gondii prevalence was found in dogs of unknown breeding history (p=0.0009), those fed raw or undercooked meat (p=0.0101), and those that did not receive the polyvalent vaccine (p=0.0147). There was no statistically significant association between leishmaniosis and leptospirosis and variables evaluated in the epidemiological questionnaire. Among feline sera samples, 20.9% (87/415) were positive for T. gondii. The highest prevalence rates were observed in felines that hunted rodents (p=0.0388) and that consumed untreated water (p=0.0294). These results confirmed that ingestion of raw or undercooked meat, drinking untreated water, and predation of rodents were important risk factors for T. gondii infection. A low Leishmania spp. serodiagnostic prevalence was observed. The most frequent Leptospira spp. serovars were Copenhageni, Canicola, and Butembo.

Padronização e avaliação de um teste de elisa competitivo utilizando a proteína recombinante msp5-pr1 para o diagnóstico sorológico da anaplasmose bovina

Anaplasma marginale (Rickettsiales: Anaplasmataceae) é o agente etiológico da anaplasmose bovina que se encontra distribuída mundialmente afetando regiões tropicais e subtropicais. É transmitido por vetores, sendo a doença caracterizada clinicamente por febre, anemia hemolítica, perda de peso, aborto e morte. A. marginale possui seis Proteínas Majoritárias de Superfície (MSPs) caracterizadas e designadas MSP1a (105 kDa), MSP1b (100 kDa), MSP2 (36 kDa), MSP3 (86 kDa), MSP4 (31 kDa), MSP5 (19 kDa). Estas proteínas estão envolvidas em importantes eventos entre as células do hospedeiro e o parasita, como respostas humoral e celular, transporte de nutrientes, adesão e invasão de eritrócitos e variação antigênica. A MSP5 é uma proteína altamente conservada entre o isolados estudados de diferentes regiões geográficas, inclusive centrale de Anaplasma centrale e A. ovis. O presente trabalho teve como objetivo padronizar e avaliar um teste imunoenzimático um teste imunoenzimático competitivo (cELISA-PR1), utilizando a rMSP5 do isolado PR1 de A. marginale desenvolvido para o diagnóstico sorológico de anaplasmose. O gene msp5 foi clonado no plasmídio pRSETB e expresso em Escherichia coli BL21 Star (DE3) One Shot (Invitrogen®). O seqüenciamento do gene msp5 mostrou 98% identidade com os isolados Florida e Saint Maries, 97% com isolados Brasil-Pernambuco e Havana; e 91% com A. centrale. A proteína recombinante rMSP5 a partir do isolado PR1 (rMSP5-PR1) foi reconhecida pelo anticorpo de monoclonal ANAF16C1 em Western blotting. O cELISA-PR1 e a IFI foram comparados com cELISA pela análise de 283 soros bovinos, sendo 135 amostras negativas oriundas da região de Santa Vitória do Palmar - RS, e 147 amostras de soros positivas de bovinos naturalmente infectados com A. marginale que obtiveram densidade óptica inferior a 0,490 em 490nm (DO490) através do cELISA foram selecionadas de 245 amostras da região Sul do Brasil. Os testes apresentaram especificidade de 100% e 99,3%, sensibilidade de 100% e 98%, com um coeficiente kappa de 0,993 e 0,978, respectivamente. Na comparação de cELISA-PR1 e IFI com cELISA, a análise de 245 amostras de soros de bovinos naturalmente infectados com A. marginale na região de Sul do Brasil apresentou uma prevalência de 77,55%, 81,63% e 76,73% respectivamente, com especificidade de 96,7% e 98,9%, sensibilidade de 98,9%, 96,3% e um coeficiente kappa de 0,956 e 0,699, respectivamente. Conclui-se, através dos resultados obtidos, que cELISA-PR1 pode ter uso semelhante ao cELISA em testes diagnósticos contra A. marginale durante a infecção aguda, avaliação sorológica, e identificação de bovinos portadores sãos. A soroprevalência de A. marginale foi determinada em 223 amostras de soros de bovinos com dois anos de idade ou mais, da Região de Centro-Sul no Estado de Paraná: região de Ponta Grossa, Guarapuava e Laranjeiras; através da pesquisa de anticorpos da classe IgG contra A. marginale por ensaio imunoenzimático de competição cELISA-PR1. De todos os soros bovinos analisados, 130 (58,74%) reagiram ao cELISA-PR1, uma porcentagem significativa de animais, sendo esta região de instabilidade de enzoótica, susceptível à infecção por A. marginale e ao desenvolvimento de anaplasmose. O tipo de exploração da propriedade, sistema de criação e manejo, a presença de outros animais (ovino, caprino, eqüinos, animais silvestres), forma de comercialização de animais não apresentou diferença significativa entre as variáveis analisadas aprese