Presence of aprX gene in Pseudomonas spp. from refrigerated raw milk and their proteolytic ability / Presença do gene aprX em Pseudomonas spp. isolados de leite cru refrigerado e sua capacidade proteolítica

This study aimed to determine the frequency of Pseudomonas fluorescens, P. putida, and P. aeruginosa in refrigerated raw milk; their proteolytic potential; and your association with the aprX gene. Of the 173 isolates confirmed as belonging to Pseudomonas spp., 37% were P. fluorescens, 25.4% P. putida, and none belongs to P. aeruginosa. The aprX gene was distributed proportionally between P. putida (68%) and P. fluorescens (75%), but it was not associated with low or high proteolytic potential in both species. P. putida (16) and P. fluorescens (14) isolates with no aprX gene identified also had proteolytic potential. Considering the synthesis of proteases other than AprX by the isolates under study, we concluded that P. fluorescens and P. putida represented 62.4% of the Pseudomonas genus, with high probability of having the aprX gene and proteolytic potential. However, there was no association between the deteriorating potential with the presence of the aprX gene.(AU)

O objetivo do estudo foi verificar a frequência, em leite cru refrigerado de Pseudomonas fluorescens, P. putida e P. aeruginosa, o potencial proteolítico dos isolados e sua associação com a presença do gene aprX. Dos 173 isolados confirmados como pertencente ao gênero Pseudomonas spp, 37% foram P. fluorescens, 25,4% P. putida e nenhum pertencia à espécie P. aeruginosa. A prevalência do gene aprX se distribuiu proporcionalmente entre P.putida (68%) e P.fluorescens (75%) porém não foi associada ao baixo ou alto potencial proteolítico nas duas espécies avaliadas. P. putida (16) e P. fluorescens (14) que não tiveram o gene aprX identificado também expressaram potencial proteolítico, considerando-se a síntese de outras proteases além da AprX pelos isolados estudados. Concluiu-se que Pseudomonas fluorescens e P. putida representaram 62,4 % do gênero Pseudomonas ssp., com alta probabilidade da presença do gene aprX e potencial proteolítico, porém sem associação da expressão do potencial deteriorante com a presença do gene aprX.(AU)

Proteolytic behavior of isolated Pseudomonas spp. from refrigerated raw milk in different concentrations and storage temperatures / Comportamento proteolítico de Pseudomonas spp. isoladas de leite cru refrigerado em diferentes concentrações e temperaturas de estocagem

The objective of the work was to evaluate the multiplication capacity and proteolytic activity of different Pseudomonas spp. cell counts inoculated in milk and storaged under different temperature. Strains isolated from refrigerated raw milk (RRM) were confirmed at genus level by Polymerase Chain Reaction (PCR). The Pseudomonas spp. was cultured in cephalothin-sodium fusidate-cetrimide (CFC) agar-base (30?C for 48 h) until it reached 2 log and 6 log CFU mL-1. Three of eight strains confirmed as Pseudomonas spp were inoculated in sterile reconstituted whole milk powder and incubated at 2C, 4C, and 8C for 96 h. Primary proteolysis indices was determined by the Kjeldahl method. When taking into account the effect of storage time in Pseudomonas spp. population, it was found that the initial population (2 log CFU mL-1) showed significant difference in growth rates only from 0 h to 24 h, keeping at the same levels along 96 h. When a higher initial population was incubated (6 log CFU mL-1), it was not observed a significant difference for times tested. Related to the effect of storage time in proteolysis index, it was not observed a significant difference in samples inoculated with 2 and 6 log CFU mL-1 Pseudomonas spp. When we analyzed the influence of storage temperature on the bacterial multiplication, there was a significant difference in the Pseudomonas spp. population...

O objetivo deste trabalho foi avaliar a capacidade de multiplicação e a atividade proteolítica de diferentes populações de Pseudomonas spp. inoculadas em leite e estocadas em diferentes temperaturas. Cepas isoladas de leite cru refrigerado (LCR) tiveram o gênero confirmado pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Pseudomonas spp. foram isoladas em ágar pseudomonas adicionado de cephalothin-sodium fusidate-cetrimide (30?C por 48 h) até atingir as populações de 2 log e 6 log UFC mL-1. Três de oito cepas confirmadas como Pseudomonas spp. foram inoculadas em leite em pó integral reconstituído esterilizado e incubadas a 2C, 4C e 8C por 96 h. O índice de proteólise primária foi determinado pelo método de Kjeldahl. Considerando o efeito do tempo de estocagem na multiplicação de Pseudomonas spp., observou-se que nas baixas populações iniciais (2 log CFU mL-1) houve diferença significativa na multiplicação bacteriana apenas de 0 h para 24 h, mantendo-se estável ao longo das 96 horas de estocagem. Quando uma população inicial mais alta (6 log UFC mL-1) foi estocada, não observou-se diferença significativa entre o tempo zero e os demais testados. Em relação ao efeito do tempo de estocagem no índice de proteólise, não foi encontrada diferença significativa neste índice, nas amostras com inóculo inicial de 2 e 6 log UFC mL-1 de Pseudomonas spp. Quando foi analisado o efeito da...

Proteolytic behavior of isolated Pseudomonas spp. from refrigerated raw milk in different concentrations and storage temperatures / Comportamento proteolítico de Pseudomonas spp. isoladas de leite cru refrigerado em diferentes concentrações e temperaturas de estocagem

The objective of the work was to evaluate the multiplication capacity and proteolytic activity of different Pseudomonas spp. cell counts inoculated in milk and storaged under different temperature. Strains isolated from refrigerated raw milk (RRM) were confirmed at genus level by Polymerase Chain Reaction (PCR). The Pseudomonas spp. was cultured in cephalothin-sodium fusidate-cetrimide (CFC) agar-base (30?C for 48 h) until it reached 2 log and 6 log CFU mL-1. Three of eight strains confirmed as Pseudomonas spp were inoculated in sterile reconstituted whole milk powder and incubated at 2C, 4C, and 8C for 96 h. Primary proteolysis indices was determined by the Kjeldahl method. When taking into account the effect of storage time in Pseudomonas spp. population, it was found that the initial population (2 log CFU mL-1) showed significant difference in growth rates only from 0 h to 24 h, keeping at the same levels along 96 h. When a higher initial population was incubated (6 log CFU mL-1), it was not observed a significant difference for times tested. Related to the effect of storage time in proteolysis index, it was not observed a significant difference in samples inoculated with 2 and 6 log CFU mL-1 Pseudomonas spp. When we analyzed the influence of storage temperature on the bacterial multiplication, there was a significant difference in the Pseudomonas spp. population...(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a capacidade de multiplicação e a atividade proteolítica de diferentes populações de Pseudomonas spp. inoculadas em leite e estocadas em diferentes temperaturas. Cepas isoladas de leite cru refrigerado (LCR) tiveram o gênero confirmado pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Pseudomonas spp. foram isoladas em ágar pseudomonas adicionado de cephalothin-sodium fusidate-cetrimide (30?C por 48 h) até atingir as populações de 2 log e 6 log UFC mL-1. Três de oito cepas confirmadas como Pseudomonas spp. foram inoculadas em leite em pó integral reconstituído esterilizado e incubadas a 2C, 4C e 8C por 96 h. O índice de proteólise primária foi determinado pelo método de Kjeldahl. Considerando o efeito do tempo de estocagem na multiplicação de Pseudomonas spp., observou-se que nas baixas populações iniciais (2 log CFU mL-1) houve diferença significativa na multiplicação bacteriana apenas de 0 h para 24 h, mantendo-se estável ao longo das 96 horas de estocagem. Quando uma população inicial mais alta (6 log UFC mL-1) foi estocada, não observou-se diferença significativa entre o tempo zero e os demais testados. Em relação ao efeito do tempo de estocagem no índice de proteólise, não foi encontrada diferença significativa neste índice, nas amostras com inóculo inicial de 2 e 6 log UFC mL-1 de Pseudomonas spp. Quando foi analisado o efeito da...(AU)

Pseudomonas spp. and P. fluorescens: population in refrigerated raw milk / Pseudomonas spp. e P. fluorescens: população em leite cru refrigerado

Raw milk samples were collected from cooling tanks (after they cooled for 48 h) in five dairy farms and the corresponding bulk tank (bulk milk transportation, BMT) when they arrived to the industry. Routine physical chemical analyzes and quantification of psychrotrophic (Pseudomonas spp. and P. fluorescens) and aerobic mesophilic (AM) populations were performed. Only relative density and titratable acidity values for samples of milk from three farms were in agreement to the quality parameters required by law. In the BMT, only the protein content has not reached the minimum value established by law, and counting was performed for AM (>105 colony forming units (CFU) mL-1) and psychrotrophic bacteria (2.8x106CFU mL-1). Pseudomonas spp. counting corresponded to 17.9% of the psychrotrophic population, and P. fluorescens was 3.4% of Pseudomonas spp . count. In milk samples from dairy farms, counts were variable for AM (3.4x105 to 3.7 x107CFU mL-1), psychrotrophic (4.0x104 to 3.1x106CFU mL-1), Pseudomonas spp. (2.3x104 to 1.8x105CFU mL-1), and P. fluorescens (62 to 8.4x103CFU mL-1). For the populations studied, no statistical difference (P>0.05) was observed between counts reported in milk samples collected in dairy farms (cooling tanks) and BMT. Therefore, the genera Pseudomonas spp. and P. fluorescens were not the most frequent psychrotrophic bacteria in this studied milk transportation line.

Amostras de leite foram coletadas de tanques de refrigeração (após 48h de refrigeração) em cinco fazendas de produção e do respectivo caminhão tanque (leite de conjunto, LC) ao chegar à indústria beneficiadora. Análises físico químicas de rotina e quantificação das populações de bactérias psicrotróficas (Pseudomonas spp. e P. fluorescens) e aeróbios mesófilos (AM) foram realizadas. Apenas os valores de densidade relativa e acidez titulável de amostras de leite de três fazendas estavam de acordo com a legislação. No LC, apenas o teor de proteína não atingiu o valor mínimo estabelecido por lei, e a contagem foi realizada para AM (>105 unidades formadoras de colônias (UFC) mL-1) e psicrotróficos (2,8x106UFC mL-1). A contagem de Pseudomonas spp. correspondeu a 17,9% da população de psicrotróficos, e 3,4% da contagem de Pseudomonas spp. eram da espécie P. fluorescens . Nas amostras de leite das fazendas de produtoras, as contagens foram variáveis para AM (3,4x105a 3,7x107UFC mL-1), psicrotróficos (4,0x104 a 3,1x106UFC mL-1), Pseudomonas spp. (2,3x104 a 1,8x105UFC mL-1) e P. fluorescens (62 a 8,4x103UFC mL-1). Para as populações estudadas, nenhuma diferença estatística (P>0,05) foi observada entre as contagens encontradas nas amostras de leite coletadas nas fazendas (tanques de resfriamento) e do LC. Portanto, o gênero Pseudomonas spp. e a espécie P. fluorescens não foram os psicrotróficos mais frequentes nesta linha de transporte de leite estudada.

Pseudomonas spp. and P. fluorescens: population in refrigerated raw milk / Pseudomonas spp. e P. fluorescens: população em leite cru refrigerado

Raw milk samples were collected from cooling tanks (after they cooled for 48 h) in five dairy farms and the corresponding bulk tank (bulk milk transportation, BMT) when they arrived to the industry. Routine physical chemical analyzes and quantification of psychrotrophic (Pseudomonas spp. and P. fluorescens) and aerobic mesophilic (AM) populations were performed. Only relative density and titratable acidity values for samples of milk from three farms were in agreement to the quality parameters required by law. In the BMT, only the protein content has not reached the minimum value established by law, and counting was performed for AM (>105 colony forming units (CFU) mL-1) and psychrotrophic bacteria (2.8x106CFU mL-1). Pseudomonas spp. counting corresponded to 17.9% of the psychrotrophic population, and P. fluorescens was 3.4% of Pseudomonas spp . count. In milk samples from dairy farms, counts were variable for AM (3.4x105 to 3.7 x107CFU mL-1), psychrotrophic (4.0x104 to 3.1x106CFU mL-1), Pseudomonas spp. (2.3x104 to 1.8x105CFU mL-1), and P. fluorescens (62 to 8.4x103CFU mL-1). For the populations studied, no statistical difference (P>0.05) was observed between counts reported in milk samples collected in dairy farms (cooling tanks) and BMT. Therefore, the genera Pseudomonas spp. and P. fluorescens were not the most frequent psychrotrophic bacteria in this studied milk transportation line.(AU)

Amostras de leite foram coletadas de tanques de refrigeração (após 48h de refrigeração) em cinco fazendas de produção e do respectivo caminhão tanque (leite de conjunto, LC) ao chegar à indústria beneficiadora. Análises físico químicas de rotina e quantificação das populações de bactérias psicrotróficas (Pseudomonas spp. e P. fluorescens) e aeróbios mesófilos (AM) foram realizadas. Apenas os valores de densidade relativa e acidez titulável de amostras de leite de três fazendas estavam de acordo com a legislação. No LC, apenas o teor de proteína não atingiu o valor mínimo estabelecido por lei, e a contagem foi realizada para AM (>105 unidades formadoras de colônias (UFC) mL-1) e psicrotróficos (2,8x106UFC mL-1). A contagem de Pseudomonas spp. correspondeu a 17,9% da população de psicrotróficos, e 3,4% da contagem de Pseudomonas spp. eram da espécie P. fluorescens . Nas amostras de leite das fazendas de produtoras, as contagens foram variáveis para AM (3,4x105a 3,7x107UFC mL-1), psicrotróficos (4,0x104 a 3,1x106UFC mL-1), Pseudomonas spp. (2,3x104 a 1,8x105UFC mL-1) e P. fluorescens (62 a 8,4x103UFC mL-1). Para as populações estudadas, nenhuma diferença estatística (P>0,05) foi observada entre as contagens encontradas nas amostras de leite coletadas nas fazendas (tanques de resfriamento) e do LC. Portanto, o gênero Pseudomonas spp. e a espécie P. fluorescens não foram os psicrotróficos mais frequentes nesta linha de transporte de leite estudada.(AU)

Ovinocultura leiteira no Brasil: aspectos e fatores relacionados à composição, ao consumo e à legislação / Dairy sheep industry in Brazil: aspects and factors related to the composition, consumption and legislation

Ao longo dos últimos anos a ovinocultura leiteira vem ganhando espaço no mercado internacional e nacional brasileiro. Desta forma, esta revisão teve como objetivo projetar um delineamento da ovinocultura leiteira brasileira, com enfoque nos aspectos da legislação, da composição e da qualidade do leite. Sua exploração mostra-se bastante vantajosa e rentável, visto que, o leite de ovelha carrega consigo características tecnológicas importantes para a indústria de alimentos. Seu elevado potencial de ser transformado em derivados lácteos, que agregam alta qualidade nutricional, atrai investidores e consumidores. As altas concentrações de sólidos totais presentes no leite de ovelha permitem a formulação de queijos, iogurtes e manteigas, de rentabilidade superior a de outras espécies. Fatores como a raça, a alimentação, a estação do ano, o estágio de lactação e o estado sanitário são variáveis que influenciam diretamente na composição do leite de ovelha. No Brasil, ainda não existe legislação específica para controle da qualidade do leite de ovinos, o que demonstra a necessidade de sua criação. São poucos os estudos brasileiros que caracterizam a composição e qualidade do leite de ovelha produzido no Brasil, sendo assim, importante o estudo das suas características e fatores que determinam sua composição.

Over the past few years, the dairy sheep industry have been taking space in the Brazilian national and international market. In this way, this work aimed to design a delineation of the Brazilian dairy sheep industry, with focus on aspects of the legislation, the composition and quality of milk. The explore shows up quite advantageous and profitable, since the sheep's milk carries technological characteristics important for the food industry. Their high potential to be transformed into milk products, that add high nutritional quality, attracts investors and consumers. The high concentrations of total solids present in the sheep milk allow the formulation of cheeses, yogurts and butters, of higher profitability than other species. Factors like the breed, feed, the season, the stage of lactation and the health status are variables that directly influence on composition of sheep's milk. In Brazil, there is still no specific legislation to control the quality of sheep milk, which demonstrates the necessity of its creation. There are few Brazilian studies that characterize the composition and quality of sheep milk produced in Brazil, being important the study of its characteristics and factors that determine its composition.

Ovinocultura leiteira no Brasil: aspectos e fatores relacionados à composição, ao consumo e à legislação / Dairy sheep industry in Brazil: aspects and factors related to the composition, consumption and legislation

Ao longo dos últimos anos a ovinocultura leiteira vem ganhando espaço no mercado internacional e nacional brasileiro. Desta forma, esta revisão teve como objetivo projetar um delineamento da ovinocultura leiteira brasileira, com enfoque nos aspectos da legislação, da composição e da qualidade do leite. Sua exploração mostra-se bastante vantajosa e rentável, visto que, o leite de ovelha carrega consigo características tecnológicas importantes para a indústria de alimentos. Seu elevado potencial de ser transformado em derivados lácteos, que agregam alta qualidade nutricional, atrai investidores e consumidores. As altas concentrações de sólidos totais presentes no leite de ovelha permitem a formulação de queijos, iogurtes e manteigas, de rentabilidade superior a de outras espécies. Fatores como a raça, a alimentação, a estação do ano, o estágio de lactação e o estado sanitário são variáveis que influenciam diretamente na composição do leite de ovelha. No Brasil, ainda não existe legislação específica para controle da qualidade do leite de ovinos, o que demonstra a necessidade de sua criação. São poucos os estudos brasileiros que caracterizam a composição e qualidade do leite de ovelha produzido no Brasil, sendo assim, importante o estudo das suas características e fatores que determinam sua composição.(AU)

Over the past few years, the dairy sheep industry have been taking space in the Brazilian national and international market. In this way, this work aimed to design a delineation of the Brazilian dairy sheep industry, with focus on aspects of the legislation, the composition and quality of milk. The explore shows up quite advantageous and profitable, since the sheep's milk carries technological characteristics important for the food industry. Their high potential to be transformed into milk products, that add high nutritional quality, attracts investors and consumers. The high concentrations of total solids present in the sheep milk allow the formulation of cheeses, yogurts and butters, of higher profitability than other species. Factors like the breed, feed, the season, the stage of lactation and the health status are variables that directly influence on composition of sheep's milk. In Brazil, there is still no specific legislation to control the quality of sheep milk, which demonstrates the necessity of its creation. There are few Brazilian studies that characterize the composition and quality of sheep milk produced in Brazil, being important the study of its characteristics and factors that determine its composition.(AU)

Relationship between shape of teat and teat tip and somatic cell count (SCC) in dairy cows

Background: Mastitis is characterized by inflammation of the mammary gland, usually caused by pathogens, these infections may be classified as either clinical or subclinical, which are responsible for physical, chemical and bacteriological changes in milk and/or changes in the glandular tissue. The shape of both teat and teat tip are among the factors that may predispose to the development of clinical and subclinical mastitis, it is therefore important that they have a desirable morphology so that they are less susceptible to pathogens. The aim of this study was to investigate the relationship between teat shape and Somatic Cell Count (SCC) in dairy cattle.Materials, Methods & Results: The research was carried out in two dairy farms located in the municipality of Arapongas, Parana state, Brazil. Data were obtained from 150 Holstein cows variety black and white, where 597 teat shape and teat tip were evaluated during entry into the milking parlor. The teat shape was classified as desirable; bottle-shaped; cone-shaped; short; funnel-shaped; plump; and pencil-shaped, while the teat tip was classified as round; flat; funnel shape (inverted); disk, and pointed (hyperkeratosis). The somatic cell count (SCC) was carried out by flow cytometry by the equipment Somacount 500®1. The variable SCC was evaluated taking into account the shape of the teat, then two groups were formed...(AU)

Losses in milk production and quality due to milk somatic cell count and heat stress of Holsteins cows in temperate climate / Perdas na produção e qualidade do leite devido contagem de células somáticas no leite e estresse térmico de vacas da raça Holandesa em clima temperado

The aims of present study were to evaluate the effects of milk somatic cell count (SCC) and heat stress on yield and milk composition of cows in a herd for commercial production in a temperate region during the period 2008-2012. Data from the monthly milk test-day records of 161±9 Holstein, totaling 9,650 milkings, were provided by the Association of Holstein Cattle Breeders of Parana State, and analyzed by descriptive analysis, correlation, analysis of variance, and regression analysis. The average daily milk yield was 31.78 kg/cow, which decreased to 29.31% when the somatic cell score (SCS) was 9, and to 11% when the Equivalent Temperature Index (ETI) was 32 or above. Lactose content decreased from SCS 0 until 9 and fat content decreased from SCS 1 until 9, totaling decrease 7.88 and 9.23%, respectively, when the SCS was 9. An opposite effect was observed for the protein content, which increased by 3.6% at SCS 8, when compared to SCS 0. Losses were observed in the daily total solids production from the SCS 0, totaling 30.64% at SCS 9.The increase in ETI to 32 or above reduced all milk constituents as much as 3.42%, except protein. These results, combined with the losses in milk yield at that ETI level, led to a decrease of up to 12.74% of milk solids. It is concluded that since losses in milk quality and yield resulting from SCC and ETI are significant, actions to prevent infection in the mammary gland and to provide a comfortable environment for dairy cattle are needed even in temperate regions.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a influencia da contagem de células somáticas (CCS) no leite e o estresse térmico sobre a produção e composição do leite de vacas de um rebanho de produção comercial em região de clima temperado, durante o período de 2008 a 2012. Os dados do dia de controle leiteiro de 161±9 vacas Holandesas, totalizando 9650 ordenhas, foram fornecidos pela Associação Paranaense de Criadores de Bovinos da Raça Holandesa e analisados através de estatística descritiva, correlação, análise de variância e regressão. A produção média diária de leite foi de 31,78 kg/vaca, com diminuição de 29,31% quando o escore de contagem de células somáticas (ECS) foi 9 e até 11% quando o Índice de Temperatura Equivalente (ITE) foi 32 ou maior. Os teores de lactose decresceram a partir do ECS 0 até 9 e de gordura a partir de ECS 1 até 9, totalizando diminuição de 7,88 e 9,23%, respectivamente, quando o ECCS foi 9. Um efeito inverso foi observado em relação ao teor de proteína, o qual aumentou 3,6% com ECS 8, comparado com o ECS 0. A produção diária de sólidos totais iniciou perdas a partir do ECS 0 e totalizou perdas de 30,64% quando este foi 9. O aumento do ITE até 32 ou mais diminuiu a concentração de todos os componentes do leite, exceto de proteína, em valores de até 3,42% da concentração. Estes efeitos, somados a diminuição na produção diária de leite com este nível de ITE, totalizaram perdas de até 12,74% na produção de sólidos totais. Conclui-se que as perdas de produção e qualidade de leite com o aumento da CCS e ITE são significativas e podem justificar a adoção de medidas para prevenir infecções na glândula mamária e conforto de vacas leiteiras, mesmo em região de clima temperado.(AU)

Relationship between shape of teat and teat tip and somatic cell count (SCC) in dairy cows

Background: Mastitis is characterized by inflammation of the mammary gland, usually caused by pathogens, these infections may be classified as either clinical or subclinical, which are responsible for physical, chemical and bacteriological changes in milk and/or changes in the glandular tissue. The shape of both teat and teat tip are among the factors that may predispose to the development of clinical and subclinical mastitis, it is therefore important that they have a desirable morphology so that they are less susceptible to pathogens. The aim of this study was to investigate the relationship between teat shape and Somatic Cell Count (SCC) in dairy cattle.Materials, Methods & Results: The research was carried out in two dairy farms located in the municipality of Arapongas, Parana state, Brazil. Data were obtained from 150 Holstein cows variety black and white, where 597 teat shape and teat tip were evaluated during entry into the milking parlor. The teat shape was classified as desirable; bottle-shaped; cone-shaped; short; funnel-shaped; plump; and pencil-shaped, while the teat tip was classified as round; flat; funnel shape (inverted); disk, and pointed (hyperkeratosis). The somatic cell count (SCC) was carried out by flow cytometry by the equipment Somacount 500®1. The variable SCC was evaluated taking into account the shape of the teat, then two groups were formed...

Occurrence of pathogens causing subclinical mastitis in Jaguapitã county, state of Paraná - Brazil / Ocorrência de patógenos causadores de mastite subclínica no município de Jaguapitã, estado do Paraná - Brasil

O objetivo desta pesquisa foi identificar a ocorrência dos patógenos causadores de mastite subclínica em um rebanho leiteiro tipo B no município de Jaguapitã, estado do Paraná, Brasil. Foram realizados 400 testes de Califórnia Mastite Teste (CMT) em amostras de leite de 100 animais, totalizando 400 tetos. Dentre os animais testados 55% reagiram ao CMT apresentando grau dois ou superior, com 157 tetos positivos. Após as amostras de leite dos 157 tetos serem submetidos à cultura em ágar sangue, 25,48% (40/157) não apresentaram crescimento ou houve crescimento de mais de duas colônias bacterianas, 28,03% (44/157) foram observadas Staphylococcus coagulase negativa (CNS), 8,28% (13/157) Streptococcus uberis, 7,64% (12/157) Staphylococcus aureus, 7,64% (12/157) Corynebacterium spp, 7,01% (11/157) Staphylococcus intermedius, 4,46% (7/157) Staphylococcus hyicus, 3,82% (6/157) Bacillus spp., 2,55% (4/157) para Streptococcus dysgalacteae, Enterobactéria e Leveduras. Conclui-se que a CNS é o mais relevante agente causador de mastite subclínica.(AU)

The aim of this research was to identify the occurrence of pathogens causing subclinical mastitis in grade B milk farms of the Jaguapitã county, state of Paraná, Brazil. California Mastitis Test (CMT) were carried out in 400 milk samples from 100 animals and 157 teats from 55 animals (55%) were positive, showed score two or higher to CMT. When these 157 positive samples to CMT were transported for bacterial culture in blood agar, 25.48% (40/157) samples showed no bacterial growth or more than two types of bacterial colonies grew, 28.03% (44/157) were Coagulase-negative staphylococci (CNS), 8.28% (13/157) were Streptococcus uberis, 7.64% (12/157) were Staphylococcus aureus, 7.64% (12/157) were Corynebacterium spp, 7.01% (11/157) were Staphylococcus intermedius, 4.46% (7/157) were Staphylococcus hyicus, 3.82% (6/157) were Bacillus spp., 2.55% (4/157) were Streptococcus dysgalacteae, Enterobacteria and Yeasts. We conclude that CNS is the most relevant subclinical mastitis causative agent.(AU)

Efeito da inulina e da oligofrutose nas características físico-químicas, microbiológicas e sensoriais de bebidas lácteas simbióticas / Effect of inulin and oligofructose on the physicochemical, microbiological and sensory characteristics of symbiotic dairy beverages

The aim of this study was to verify the effect of inulin and oligofructose on the physicochemical, microbiological and sensory characteristics of symbiotic dairy beverages. Four formulations were made: 1) a control (C); 2) a sample with added Lactobacillus paracasei (P); 3) a sample with added L. paracasei and inulin (PI); and 4) a sample with added L. paracasei and oligofructose (PO). The probiotic population, pH, and acidity of the products were evaluated once a week for 21 days while refrigerated (5±1°C). Possible contaminating microorganisms (coliforms, E. coli, and Salmonella spp.) were investigated after three days of storage. Sensorial acceptance and purchase intention were evaluated seven days after manufacture. Dairy beverages presented with L. paracasei populations above 8.50 log CFU/mL during the whole storage period. Significantly (p<0.05) lower pH values were observed in P and PI, and higher acidity values were found in all formulations throughout storage. The dairy beverages were considered to be a promising matrix for the probiotic microorganism L. paracasei. The prebiotic additions (inulin and oligofructose) did not interfere with the overall acceptance and intention to purchase the beverages.(AU)

O objetivo deste estudo foi verificar o efeito da inulina e da oligofrutose nas características físico-químicas, microbiológicas e sensoriais de bebidas lácteas simbióticas. Foram desenvolvidas quatro formulações de bebidas: controle (C), com adição de Lactobacillus paracasei (P), com adição de L. paracasei e inulina (PI) e com adição de L. paracasei e oligofrutose (PO). As populações do micro-organismo probiótico, o pH e a acidez dos produtos foram avaliados semanalmente, durante armazenamento refrigerado (5±1°C) por 21 dias. A pesquisa de possíveis micro-organismos contaminantes (coliformes, E. coli e Salmonella spp.) foi realizada após três dias de refrigeração. A aceitabilidade sensorial e a intenção de compra foram avaliadas sete dias após a produção. As populações observadas para o micro-organismo probiótico L. paracasei foram superiores a 8,50 log UFC/mL durante toda a vida de prateleira dos produtos. Houve redução significativa nos valores de pH para P e PI e aumento significativo na acidez para todas as formulações (p<0,05) ao longo do armazenamento. As bebidas lácteas apresentaram-se como uma matriz promissora para veiculação de L. paracasei. A adição dos ingredientes prebióticos (inulina e oligofrutose) às bebidas lácteas não interferiram na viabilidade de L. paracasei e na aceitabilidade global e na intenção de compras das bebidas.(AU)

Determinação do risco de consumo de leite cru relacionado à intoxicação estafilocócia / Assessment of the risk of raw milk consumiption related to staphylococcal food poisoning

This study aimed to identify the risks of staphylococcal food poisoning due to the consumption of raw milk. Fifty-one farms in Londrina (PR) and 50 in Pelotas (RS) were analyzed, to determine the population of coagulase-positive staphylococci (UFC/ mL), as well as to verify the ability of producing Staphylococcal Enterotoxin A (SEA) by immunodifusion (OSP), the presence of the gene for the production of SEA (PCR) in the cultures, and the research of enterotoxin (SEA to SEE) in milk samples using ELISA commercial kit. Considering the 101 farms analyzed, 19 (18.8%) presented coagulase-positive staphylococci count above 105 UFC/mL. For the evaluation of the enterotoxigenic ability (SEA) by the OSP technique, six cultures coagulase-positive (5.5%) were positive to the test and identified as S. aureus. From the coagualse-negative sample, one (5.5%) was OSP positive. For the evaluation of the presence of the gene for EEA synthesis, 51 cultures of staphylococci were tested. From this total, 14 (27.45%) presented the gene, and from that, only 5 (9.81%) cultures were capable of expressing it in the technique of the OSP. The morphologic characteristic of the evaluated cultures that had enterotoxigenic capacity, from the 14 (33,3%) cultures that presented the gene for EEA production, 05 (11.9%) were characterized as typical cultures of S.aureus in Baird Parker agar. All the 12 milk samples studied for the presence of EEA to EEE in milk were negative. Thus, it can be concluded that there is extensive contamination of raw milk for staphylococci coagulase, however, most of the isolated strains were not enterotoxigenic or did not express such a characteristic. Only 9.81% of the tested colonies expressed the gene and effectively produced SEA. None of the samples had sufficient counts to produce detectable amounts of SEA. The milk samples did not present risk to cause staphylococcal food poisoning if consumed in natura until the collection moment.

Este trabalho teve como objetivo identificar os riscos de intoxicação estafilocócica pelo consumo de leite cru. Foram analisadas amostras de 51 propriedades em Londrina (PR) e 50 em Pelotas (RS), com o objetivo de determinar a população de estafilococos coagulase-positivos (UFC/mL) em leite, verificar a capacidade de produzir enterotoxina estafilocócica A (EEA) através do teste de imunodifusão (OSP), a presença do gene para produção EEA (PCR) nas culturas isoladas e a pesquisa de enterotoxina (EEA a EEE) nas amostras de leite através do kit comercial ELISA. Das 101 amostras, 19 (18,8%) apresentaram contagens de estafilococos coagulase positivos (ECP) acima de 105 UFC/mL. Quanto à capacidade enterotoxigênica das culturas isoladas (OSP), seis culturas produtoras de coagulase (5,5%) foram positivas no teste e identificadas como S. aureus. Das amostras coagulase negativas, 1 foi positiva no OSP (5,5%). Quanto à presença do gene para síntese de EEA, das 51 culturas de estafilococos testadas, 14 (27,45%) apresentaram o gene, sendo que, destas, somente 5 (9,81%) culturas foram capazes de expressá-lo na técnica do OSP. Quanto à característica morfológica das culturas avaliadas para a capacidade enterotoxigênica, 14 (33,3%) culturas que apresentaram o gene para produção de EEA foram caracterizadas como culturas típicas de S. aureus no ágar Baird Parker. Das amostras (12) utilizadas para pesquisa de EEA a EEE no leite, em nenhuma se detectou a presença de EE. Pode-se concluir que há extensa contaminação do leite cru por estafilococos coagulase-positivos, embora a maioria das colônias isoladas não fosse enterotoxigênica ou não expressasse esta característica. Somente 9,81% das colônias testadas expressaram o gene e efetivamente produziram EEA. Nenhuma das amostras apresentou enterotoxina detectável no leite. As amostras de leite testadas não apresentaram risco de causar intoxicação estafilocócica (EEA) se consumidas in natura até o momento da coleta.

Determinação do risco de consumo de leite cru relacionado à intoxicação estafilocócia / Assessment of the risk of raw milk consumiption related to staphylococcal food poisoning

This study aimed to identify the risks of staphylococcal food poisoning due to the consumption of raw milk. Fifty-one farms in Londrina (PR) and 50 in Pelotas (RS) were analyzed, to determine the population of coagulase-positive staphylococci (UFC/ mL), as well as to verify the ability of producing Staphylococcal Enterotoxin A (SEA) by immunodifusion (OSP), the presence of the gene for the production of SEA (PCR) in the cultures, and the research of enterotoxin (SEA to SEE) in milk samples using ELISA commercial kit. Considering the 101 farms analyzed, 19 (18.8%) presented coagulase-positive staphylococci count above 105 UFC/mL. For the evaluation of the enterotoxigenic ability (SEA) by the OSP technique, six cultures coagulase-positive (5.5%) were positive to the test and identified as S. aureus. From the coagualse-negative sample, one (5.5%) was OSP positive. For the evaluation of the presence of the gene for EEA synthesis, 51 cultures of staphylococci were tested. From this total, 14 (27.45%) presented the gene, and from that, only 5 (9.81%) cultures were capable of expressing it in the technique of the OSP. The morphologic characteristic of the evaluated cultures that had enterotoxigenic capacity, from the 14 (33,3%) cultures that presented the gene for EEA production, 05 (11.9%) were characterized as typical cultures of S.aureus in Baird Parker agar. All the 12 milk samples studied for the presence of EEA to EEE in milk were negative. Thus, it can be concluded that there is extensive contamination of raw milk for staphylococci coagulase, however, most of the isolated strains were not enterotoxigenic or did not express such a characteristic. Only 9.81% of the tested colonies expressed the gene and effectively produced SEA. None of the samples had sufficient counts to produce detectable amounts of SEA. The milk samples did not present risk to cause staphylococcal food poisoning if consumed in natura until the collection moment.(AU)

Este trabalho teve como objetivo identificar os riscos de intoxicação estafilocócica pelo consumo de leite cru. Foram analisadas amostras de 51 propriedades em Londrina (PR) e 50 em Pelotas (RS), com o objetivo de determinar a população de estafilococos coagulase-positivos (UFC/mL) em leite, verificar a capacidade de produzir enterotoxina estafilocócica A (EEA) através do teste de imunodifusão (OSP), a presença do gene para produção EEA (PCR) nas culturas isoladas e a pesquisa de enterotoxina (EEA a EEE) nas amostras de leite através do kit comercial ELISA. Das 101 amostras, 19 (18,8%) apresentaram contagens de estafilococos coagulase positivos (ECP) acima de 105 UFC/mL. Quanto à capacidade enterotoxigênica das culturas isoladas (OSP), seis culturas produtoras de coagulase (5,5%) foram positivas no teste e identificadas como S. aureus. Das amostras coagulase negativas, 1 foi positiva no OSP (5,5%). Quanto à presença do gene para síntese de EEA, das 51 culturas de estafilococos testadas, 14 (27,45%) apresentaram o gene, sendo que, destas, somente 5 (9,81%) culturas foram capazes de expressá-lo na técnica do OSP. Quanto à característica morfológica das culturas avaliadas para a capacidade enterotoxigênica, 14 (33,3%) culturas que apresentaram o gene para produção de EEA foram caracterizadas como culturas típicas de S. aureus no ágar Baird Parker. Das amostras (12) utilizadas para pesquisa de EEA a EEE no leite, em nenhuma se detectou a presença de EE. Pode-se concluir que há extensa contaminação do leite cru por estafilococos coagulase-positivos, embora a maioria das colônias isoladas não fosse enterotoxigênica ou não expressasse esta característica. Somente 9,81% das colônias testadas expressaram o gene e efetivamente produziram EEA. Nenhuma das amostras apresentou enterotoxina detectável no leite. As amostras de leite testadas não apresentaram risco de causar intoxicação estafilocócica (EEA) se consumidas in natura até o momento da coleta.(AU)

Milk contamination in different points of the process: I) Aerobic mesophilics and psychrotrophics microorganisms / Contaminação do leite em diferentes pontos do processo de produção: I. Microrganismos aeróbios mesófilos e psicrotróficos

To improve the microbiology quality of the milk produced in Brazil, steps like the refrigeration have been implanted in the dairy sector but, temperatures of 4oC are selective for psycrotrophics microorganisms. These microorganisms, irrespective of their optimum growth temperature, are able to multiply in refrigeration temperature and produce heat-resistant extra celular enzymes that can cause changes, especially in dairy products and UHT milk. This work has the objective to determine the main points of milk contamination in dairy process and the effect of refrigeration on the control and multiplication of microorganisms. Five properties located in Londrina city- PR were aviated. Different points have been assessed in the dairy process and mesophilics (35oC/48hs) and psychrotrophics (21oC/25hs) microorganisms were researched. The main contamination points found were the milk cans, bulk milk tanks, residual water in the dairy equipments and teats bad cleaned. The residual water on the bulk milk tanks, on the cans, teats bad cleaned and the dairy centrifuge equipment were the main source of psychrotrophics. The quantity of psycrotrophics in all points assessed were greater than the ideal limit (10% of the mesophilic count). In the refrigerated milk, the psychrotrophics count over came the mesophilics count, showing that the mesophilics count can under estimate the real microflora

A refrigeração do leite na propriedade e o transporte a granel são medidas cuja implantação visa a melhoria da qualidade microbiológica do leite produzido no país, mas temperaturas em torno de 4ºC selecionam uma microbiota denominada psicrotrófica, que independentemente de sua temperatura ótima de crescimento, multiplica-se bem sob refrigeração e produz enzimas termorresistentes, que comprometem a qualidade principalmente de derivados lácteos e leite UAT. Este trabalho tem como objetivo determinar os principais pontos de contaminação do leite por mesófilos e psicrotróficos no processo de produção leiteira, bem como a eficiência da refrigeração no controle do crescimento destes microrganismos. Avaliou-se cinco (5) propriedades leiteiras da região de Londrina- PR, analisando-se diversos pontos do processo de produção e pesquisando-se microrganismos aeróbios mesófilos (35ºC/48hs) e psicrotróficos (21ºC/25 hs). Os principais pontos de contaminação foram os latões, tanques de expansão, água residual de equipamentos e utensílios de ordenha e tetos higienizados inadequadamente. Água residual dos tanques de expansão, de latões, tetos higienizados inadequadamente e a clarificadora foram os pontos com maior contagem de psicrotróficos. A quantidade de psicrotróficos encontrada em todos os segmentos do processo de produção pesquisados, foi superior ao que considera-se tolerável (10% da qua

Efeito da inulina e da oligofrutose nas características físico-químicas, microbiológicas e sensoriais de bebidas lácteas simbióticas / Effect of inulin and oligofructose on the physicochemical, microbiological and sensory characteristics of symbiotic dairy beverages

The aim of this study was to verify the effect of inulin and oligofructose on the physicochemical, microbiological and sensory characteristics of symbiotic dairy beverages. Four formulations were made: 1) a control (C); 2) a sample with added Lactobacillus paracasei (P); 3) a sample with added L. paracasei and inulin (PI); and 4) a sample with added L. paracasei and oligofructose (PO). The probiotic population, pH, and acidity of the products were evaluated once a week for 21 days while refrigerated (5±1°C). Possible contaminating microorganisms (coliforms, E. coli, and Salmonella spp.) were investigated after three days of storage. Sensorial acceptance and purchase intention were evaluated seven days after manufacture. Dairy beverages presented with L. paracasei populations above 8.50 log CFU/mL during the whole storage period. Significantly (p<0.05) lower pH values were observed in P and PI, and higher acidity values were found in all formulations throughout storage. The dairy beverages were considered to be a promising matrix for the probiotic microorganism L. paracasei. The prebiotic additions (inulin and oligofructose) did not interfere with the overall acceptance and intention to purchase the beverages.

O objetivo deste estudo foi verificar o efeito da inulina e da oligofrutose nas características físico-químicas, microbiológicas e sensoriais de bebidas lácteas simbióticas. Foram desenvolvidas quatro formulações de bebidas: controle (C), com adição de Lactobacillus paracasei (P), com adição de L. paracasei e inulina (PI) e com adição de L. paracasei e oligofrutose (PO). As populações do micro-organismo probiótico, o pH e a acidez dos produtos foram avaliados semanalmente, durante armazenamento refrigerado (5±1°C) por 21 dias. A pesquisa de possíveis micro-organismos contaminantes (coliformes, E. coli e Salmonella spp.) foi realizada após três dias de refrigeração. A aceitabilidade sensorial e a intenção de compra foram avaliadas sete dias após a produção. As populações observadas para o micro-organismo probiótico L. paracasei foram superiores a 8,50 log UFC/mL durante toda a vida de prateleira dos produtos. Houve redução significativa nos valores de pH para P e PI e aumento significativo na acidez para todas as formulações (p<0,05) ao longo do armazenamento. As bebidas lácteas apresentaram-se como uma matriz promissora para veiculação de L. paracasei. A adição dos ingredientes prebióticos (inulina e oligofrutose) às bebidas lácteas não interferiram na viabilidade de L. paracasei e na aceitabilidade global e na intenção de compras das bebidas.

Occurrence of pathogens causing subclinical mastitis in Jaguapitã county, state of Paraná - Brazil / Ocorrência de patógenos causadores de mastite subclínica no município de Jaguapitã, estado do Paraná - Brasil

O objetivo desta pesquisa foi identificar a ocorrência dos patógenos causadores de mastite subclínica em um rebanho leiteiro tipo B no município de Jaguapitã, estado do Paraná, Brasil. Foram realizados 400 testes de Califórnia Mastite Teste (CMT) em amostras de leite de 100 animais, totalizando 400 tetos. Dentre os animais testados 55% reagiram ao CMT apresentando grau dois ou superior, com 157 tetos positivos. Após as amostras de leite dos 157 tetos serem submetidos à cultura em ágar sangue, 25,48% (40/157) não apresentaram crescimento ou houve crescimento de mais de duas colônias bacterianas, 28,03% (44/157) foram observadas Staphylococcus coagulase negativa (CNS), 8,28% (13/157) Streptococcus uberis, 7,64% (12/157) Staphylococcus aureus, 7,64% (12/157) Corynebacterium spp, 7,01% (11/157) Staphylococcus intermedius, 4,46% (7/157) Staphylococcus hyicus, 3,82% (6/157) Bacillus spp., 2,55% (4/157) para Streptococcus dysgalacteae, Enterobactéria e Leveduras. Conclui-se que a CNS é o mais relevante agente causador de mastite subclínica.

The aim of this research was to identify the occurrence of pathogens causing subclinical mastitis in grade B milk farms of the Jaguapitã county, state of Paraná, Brazil. California Mastitis Test (CMT) were carried out in 400 milk samples from 100 animals and 157 teats from 55 animals (55%) were positive, showed score two or higher to CMT. When these 157 positive samples to CMT were transported for bacterial culture in blood agar, 25.48% (40/157) samples showed no bacterial growth or more than two types of bacterial colonies grew, 28.03% (44/157) were Coagulase-negative staphylococci (CNS), 8.28% (13/157) were Streptococcus uberis, 7.64% (12/157) were Staphylococcus aureus, 7.64% (12/157) were Corynebacterium spp, 7.01% (11/157) were Staphylococcus intermedius, 4.46% (7/157) were Staphylococcus hyicus, 3.82% (6/157) were Bacillus spp., 2.55% (4/157) were Streptococcus dysgalacteae, Enterobacteria and Yeasts. We conclude that CNS is the most relevant subclinical mastitis causative agent.

Losses in milk production and quality due to milk somatic cell count and heat stress of Holsteins cows in temperate climate / Perdas na produção e qualidade do leite devido contagem de células somáticas no leite e estresse térmico de vacas da raça Holandesa em clima temperado

The aims of present study were to evaluate the effects of milk somatic cell count (SCC) and heat stress on yield and milk composition of cows in a herd for commercial production in a temperate region during the period 2008-2012. Data from the monthly milk test-day records of 161±9 Holstein, totaling 9,650 milkings, were provided by the Association of Holstein Cattle Breeders of Parana State, and analyzed by descriptive analysis, correlation, analysis of variance, and regression analysis. The average daily milk yield was 31.78 kg/cow, which decreased to 29.31% when the somatic cell score (SCS) was 9, and to 11% when the Equivalent Temperature Index (ETI) was 32 or above. Lactose content decreased from SCS 0 until 9 and fat content decreased from SCS 1 until 9, totaling decrease 7.88 and 9.23%, respectively, when the SCS was 9. An opposite effect was observed for the protein content, which increased by 3.6% at SCS 8, when compared to SCS 0. Losses were observed in the daily total solids production from the SCS 0, totaling 30.64% at SCS 9.The increase in ETI to 32 or above reduced all milk constituents as much as 3.42%, except protein. These results, combined with the losses in milk yield at that ETI level, led to a decrease of up to 12.74% of milk solids. It is concluded that since losses in milk quality and yield resulting from SCC and ETI are significant, actions to prevent infection in the mammary gland and to provide a comfortable environment for dairy cattle are needed even in temperate regions.

O objetivo deste estudo foi avaliar a influencia da contagem de células somáticas (CCS) no leite e o estresse térmico sobre a produção e composição do leite de vacas de um rebanho de produção comercial em região de clima temperado, durante o período de 2008 a 2012. Os dados do dia de controle leiteiro de 161±9 vacas Holandesas, totalizando 9650 ordenhas, foram fornecidos pela Associação Paranaense de Criadores de Bovinos da Raça Holandesa e analisados através de estatística descritiva, correlação, análise de variância e regressão. A produção média diária de leite foi de 31,78 kg/vaca, com diminuição de 29,31% quando o escore de contagem de células somáticas (ECS) foi 9 e até 11% quando o Índice de Temperatura Equivalente (ITE) foi 32 ou maior. Os teores de lactose decresceram a partir do ECS 0 até 9 e de gordura a partir de ECS 1 até 9, totalizando diminuição de 7,88 e 9,23%, respectivamente, quando o ECCS foi 9. Um efeito inverso foi observado em relação ao teor de proteína, o qual aumentou 3,6% com ECS 8, comparado com o ECS 0. A produção diária de sólidos totais iniciou perdas a partir do ECS 0 e totalizou perdas de 30,64% quando este foi 9. O aumento do ITE até 32 ou mais diminuiu a concentração de todos os componentes do leite, exceto de proteína, em valores de até 3,42% da concentração. Estes efeitos, somados a diminuição na produção diária de leite com este nível de ITE, totalizaram perdas de até 12,74% na produção de sólidos totais. Conclui-se que as perdas de produção e qualidade de leite com o aumento da CCS e ITE são significativas e podem justificar a adoção de medidas para prevenir infecções na glândula mamária e conforto de vacas leiteiras, mesmo em região de clima temperado.

Determinação do perigo de consumo de leite cru relacionado a intoxicação estafilocócica

Staphylococcus aureus enterotoxigênico é um dos principais agentes associados a intoxicação alimentar, cujo principal reservatório são os homens e os animais. Os relatos de intoxicação são frequentemente associados à ingestão da dose tóxica mínima de 100 ng e alimentos com contagens de estafilococos entre 105 106 UFC/ g ou mL de alimento. Neste estudo objetivou-se determinar o perigo do consumo do leite cru causar intoxicações estafilocócicas. Neste trabalho foram avaliadas 51 propriedades em Londrina (PR) e 50 em Pelotas (RS), determinando-se a contagem de estafilococos coagulase positivos (UFC/ mL), a capacidade de produzirem a Enterotoxina Estafilocócica A (EEA) verificada em imunodifusão (OSP), a presença do gene para produção de EEA (PCR) nas culturas e a pesquisa de enterotoxina (EEA a EEE) nas amostras de leite utilizando-se de kit comercial de ELISA. Das 101 amostras, 19 (18,8%) apresentaram contagens de estafilococos coagulase positivos (ECP) acima de 105 UFC/mL. Quanto à capacidade enterotoxigênica das culturas isoladas (OSP), testou-se 127 culturas, sendo 109 coagulase positivas e 18 coagulase negativas. Seis culturas produtoras de coagulase foram positivas no teste, representando 5,5% das amostras. Todas foram identificadas como S. aureus. Das amostras coagulase negativas, 1 foi positiva no OSP representando 5,5%. Para avaliação quanto à presença do gene para síntese de EEA testou-se 51 culturas de estafilococos. Deste total 14 (27,45%) apresentaram o gene, sendo que destas somente 5 (9,81%) culturas foram capazes de expressá-lo na técnica do OSP, representando apenas 03 diferentes amostras de leite. Quanto a característica morfológica das culturas avaliadas para a capacidade enterotoxigênica, das 14 (33,3%) culturas que apresentaram o gene para produção de EEA, inclusive as 05 (11,9%) que expressaram este gene, foram caracterizadas como culturas típicas de S. aureus no agar Baird Parker. Para pesquisa de EEA a EEE no leite, selecionou-se amostras com contagens de estafilococos superiores a 105 UFC /mL e/ou que apresentaram estafilococos portadores do gene eea, totalizando 12 amostras de leite, e em nenhuma se detectou a presença de EE. A contagem de aeróbios mesófilos das amostras de leite que apresentaram estafilococos com capacidade enterotoxigênica, não pareceu interferir no crescimento dos estafilococos coagulase positivos ou negativos. Pode-se concluir que há extensa contaminação do leite cru por estafilococos coagulase positivos. As amostras de leite testadas não apresentaram perigo de causar intoxicação estafilocócica se consumidas “in natura” até o momento da coleta. Mas deve-se considerar que a utilização do leite cru como matéria prima para produção de derivados, como o queijo, apresenta perigo potencial, já que foi identificada a presença de S. aureus com o gene para síntese de EEA e capacidade de expressão, que poderiam, dependendo das condições, se multiplicarem e produzirem enterotoxina