Do alterations in gene expressions influence tumorigenesis in the transmissible venereal tumor in dogs? / Alterações nas expressões gênicas influenciam na tumorigênese no tumor venéreo transmissível em cães?

Canine transmissible venereal tumor (CTVT) is a transmissible neoplasm, which spreads naturally between dogs through the halogenic transfer of tumor cells, mainly during coitus. It is the oldest known tumoral lineage in nature and reports on gene mutations have been extended. Also, this tumor shares several genetic mutations with some cancers in humans, among them lung carcinomas, melanoma, prostate, breast, among other cancers. Thus, expression of tumor suppressor genes such as TP53, P21, and apoptosis-related genes such as BAX, BCL-2, and BCL-xL, both in vivo and in vitro (primary cell culture) were quantified. In the present study, the comparison of gene expression, the TP53 gene, in most cases, was shown to be high in the majority of tissues (65%) and primary cell culture (100%), while BCL-2, BCL-xL, and BAX presented variation among the animals analyzed. Moreover, in these situations, the results suggested that the apoptotic regulation of these genes did not occur for TP53. The P21 gene was shown to be mostly normal (70%); although, absence (6%) and underexpressions (24%) were also observed. Statistical analysis of the BCL-xL gene demonstrated significant differences between the tissues of the animals when compared to the cell cultures; however, to the other genes, no statistical difference was observed between the groups. Preliminarily, the results suggested the presence of alterations in the gene expressions of the TP53, P21, BAX, BCL-2 and BCL-xL leading to loss of function in these genes, which affect the tumorigenesis of CTVT.(AU)

O tumor venéreo transmissível canino (TVTC) se trata de uma neoplasia transmissível, que se propaga naturalmente entre os cães pela transferência halogênica de células tumorais, principalmente, durante o coito. É a mais antiga linhagem tumoral conhecida na natureza e relatos sobre mutações gênicas vêm sendo ampliadas. Além disso, este tumor compartilha uma série de mutações genéticas com alguns cânceres em seres humanos, dentre eles, carcinomas de pulmão, melanoma, próstata, mama, entre outros tipos de câncer. Assim, quantificou-se a expressão de genes supressores de tumores, como TP53, P21 e genes relacionados à apoptose, como BAX, BCL-2 e BCL-xL, tanto in vivo quanto in vitro (cultura celular primária). No presente estudo, na comparação das expressões gênicas, o gene TP53 se mostrou elevado na maioria dos casos em tecidos (65%) e em cultura celular primária (100%), enquanto BCL-2, BCL-xL e BAX apresentaram-se variáveis entre os animais analisados. Ademais, nessas situações os resultados sugerem que não ocorreu regulação apoptótica desses genes pelo TP53. O gene P21 mostrou-se, em sua maioria, normal (70%), embora a ausência (6%) e subexpressões (24%) também tenham sido observadas. A análise estatística do gene BCL-xL demonstrou diferenças significativas entre os tecidos dos animais, quando comparadas às culturas celulares, entretanto, para os demais genes, não foi observada diferença estatística entre os grupos. Preliminarmente, os resultados sugerem a presença de alterações nas expressões gênicas dos genes TP53, P21, BAX, BCL-2 e BCL-xL, levando a perda de função desses genes, os quais afetam a tumorigênese do CTVT.(AU)

Microbiological profile of different types of salads from hospital kitchens / Perfil microbiológico de diferentes tipos de saladas provenientes de cozinhas hospitalares

The objective of this work was to verify the microbiological profile of different types of salads from hospital kitchens. During the period from 2010 to 2014, the Public Food Guidance Service (SOAP) received 641 samples of salads from two public hospitals in the Central West region of the São Paulo state, where they were submitted to microbiological analysis in order to determine the most probable number (MPN) of coliforms at 35 and 45ºC, carry out Salmonella spp. study and coagulase-positive staphylococci count. The results showed that in 30.56% of samples the coliform count at 35ºC was above 1,100 MPN/g and 12.17% of samples presented coliforms at 45ºC above 100 MPN/g, which is the maximum limit established by Brazilian law. The prevalence of contaminated samples among those without heat treatment was at 97.44%, and for samples with heat treatment the prevalence was at 2.56% for both cooked and braised foods. All samples were negative for Salmonella spp. presence and showed coagulase-positive staphylococci count at < 1.0 × 102 UFC/g. Although no pathogenic agents were found, the high count for indicator microorganisms in a large number of samples suggests that the practices of obtaining and manipulating these foods are inadequate, facilitating the risk of contamination with pathogens, including other agents not included in this research. Thus, food and nutrition units must pay attention to food preparation procedures, especially since these meals are served to indoor patients.

O objetivo deste trabalho foi verificar o perfil microbiológico de diferentes tipos de saladas provenientes de cozinhas hospitalares. No período de 2010 a 2014, o Serviço de Orientação à Alimentação Pública (SOAP) recebeu 641 amostras de saladas provenientes de dois hospitais públicos da região centro-oeste do estado de São Paulo, onde foram submetidas às análises microbiológicas para a determinação do número mais provável (NMP) de coliformes a 35 e 45ºC, pesquisa de Salmonella spp. e contagem de estafilococos coagulase positiva. Os resultados revelaram que em 30,56% das amostras a contagem de coliformes a 35ºC foi maior que 1.100 NMP/g, e 12,17% apresentaram coliformes a 45ºC acima de 100 NMP/g, limite máximo estabelecido pela legislação brasileira. A prevalência de amostras contaminadas sem tratamento térmico foi de 97,44% e de 2,56% para amostras com tratamento térmico, cozidas ou refogadas. Todas as amostras foram negativas para presença de Salmonella spp. e apresentaram contagem de estafilococos coagulase positiva < 1,0 × 102 UFC/g. Embora não tenham sido encontrados agentes patogênicos, as altas contagens de micro-organismos indicadores em grande parte das amostras sugerem que as práticas de obtenção e manipulação desses alimentos estão inadequadas, possibilitando risco de contaminação por patógenos, inclusive outros agentes não contemplados nesta pesquisa. Portanto, as unidades de alimentação e nutrição hospitalares devem se atentar quanto aos procedimentos de preparo de alimentos, sobretudo porque essas refeições são servidas a indivíduos hospitalizados.

Microbiological profile of different types of salads from hospital kitchens / Perfil microbiológico de diferentes tipos de saladas provenientes de cozinhas hospitalares

The objective of this work was to verify the microbiological profile of different types of salads from hospital kitchens. During the period from 2010 to 2014, the Public Food Guidance Service (SOAP) received 641 samples of salads from two public hospitals in the Central West region of the São Paulo state, where they were submitted to microbiological analysis in order to determine the most probable number (MPN) of coliforms at 35 and 45ºC, carry out Salmonella spp. study and coagulase-positive staphylococci count. The results showed that in 30.56% of samples the coliform count at 35ºC was above 1,100 MPN/g and 12.17% of samples presented coliforms at 45ºC above 100 MPN/g, which is the maximum limit established by Brazilian law. The prevalence of contaminated samples among those without heat treatment was at 97.44%, and for samples with heat treatment the prevalence was at 2.56% for both cooked and braised foods. All samples were negative for Salmonella spp. presence and showed coagulase-positive staphylococci count at < 1.0 × 102 UFC/g. Although no pathogenic agents were found, the high count for indicator microorganisms in a large number of samples suggests that the practices of obtaining and manipulating these foods are inadequate, facilitating the risk of contamination with pathogens, including other agents not included in this research. Thus, food and nutrition units must pay attention to food preparation procedures, especially since these meals are served to indoor patients.(AU)

O objetivo deste trabalho foi verificar o perfil microbiológico de diferentes tipos de saladas provenientes de cozinhas hospitalares. No período de 2010 a 2014, o Serviço de Orientação à Alimentação Pública (SOAP) recebeu 641 amostras de saladas provenientes de dois hospitais públicos da região centro-oeste do estado de São Paulo, onde foram submetidas às análises microbiológicas para a determinação do número mais provável (NMP) de coliformes a 35 e 45ºC, pesquisa de Salmonella spp. e contagem de estafilococos coagulase positiva. Os resultados revelaram que em 30,56% das amostras a contagem de coliformes a 35ºC foi maior que 1.100 NMP/g, e 12,17% apresentaram coliformes a 45ºC acima de 100 NMP/g, limite máximo estabelecido pela legislação brasileira. A prevalência de amostras contaminadas sem tratamento térmico foi de 97,44% e de 2,56% para amostras com tratamento térmico, cozidas ou refogadas. Todas as amostras foram negativas para presença de Salmonella spp. e apresentaram contagem de estafilococos coagulase positiva < 1,0 × 102 UFC/g. Embora não tenham sido encontrados agentes patogênicos, as altas contagens de micro-organismos indicadores em grande parte das amostras sugerem que as práticas de obtenção e manipulação desses alimentos estão inadequadas, possibilitando risco de contaminação por patógenos, inclusive outros agentes não contemplados nesta pesquisa. Portanto, as unidades de alimentação e nutrição hospitalares devem se atentar quanto aos procedimentos de preparo de alimentos, sobretudo porque essas refeições são servidas a indivíduos hospitalizados.(AU)

Microbiological profile of different types of salads from hospital kitchens / Perfil microbiológico de diferentes tipos de saladas provenientes de cozinhas hospitalares

The objective of this work was to verify the microbiological profile of different types of salads from hospital kitchens. During the period from 2010 to 2014, the Public Food Guidance Service (SOAP) received 641 samples of salads from two public hospitals in the Central West region of the São Paulo state, where they were submitted to microbiological analysis in order to determine the most probable number (MPN) of coliforms at 35 and 45ºC, carry out Salmonella spp. study and coagulase-positive staphylococci count. The results showed that in 30.56% of samples the coliform count at 35ºC was above 1,100 MPN/g and 12.17% of samples presented coliforms at 45ºC above 100 MPN/g, which is the maximum limit established by Brazilian law. The prevalence of contaminated samples among those without heat treatment was at 97.44%, and for samples with heat treatment the prevalence was at 2.56% for both cooked and braised foods. All samples were negative for Salmonella spp. presence and showed coagulase-positive staphylococci count at < 1.0 × 102 UFC/g. Although no pathogenic agents were found, the high count for indicator microorganisms in a large number of samples suggests that the practices of obtaining and manipulating these foods are inadequate, facilitating the risk of contamination with pathogens, including other agents not included in this research. Thus, food and nutrition units must pay attention to food preparation procedures, especially since these meals are served to indoor patients.(AU)

O objetivo deste trabalho foi verificar o perfil microbiológico de diferentes tipos de saladas provenientes de cozinhas hospitalares. No período de 2010 a 2014, o Serviço de Orientação à Alimentação Pública (SOAP) recebeu 641 amostras de saladas provenientes de dois hospitais públicos da região centro-oeste do estado de São Paulo, onde foram submetidas às análises microbiológicas para a determinação do número mais provável (NMP) de coliformes a 35 e 45ºC, pesquisa de Salmonella spp. e contagem de estafilococos coagulase positiva. Os resultados revelaram que em 30,56% das amostras a contagem de coliformes a 35ºC foi maior que 1.100 NMP/g, e 12,17% apresentaram coliformes a 45ºC acima de 100 NMP/g, limite máximo estabelecido pela legislação brasileira. A prevalência de amostras contaminadas sem tratamento térmico foi de 97,44% e de 2,56% para amostras com tratamento térmico, cozidas ou refogadas. Todas as amostras foram negativas para presença de Salmonella spp. e apresentaram contagem de estafilococos coagulase positiva < 1,0 × 102 UFC/g. Embora não tenham sido encontrados agentes patogênicos, as altas contagens de micro-organismos indicadores em grande parte das amostras sugerem que as práticas de obtenção e manipulação desses alimentos estão inadequadas, possibilitando risco de contaminação por patógenos, inclusive outros agentes não contemplados nesta pesquisa. Portanto, as unidades de alimentação e nutrição hospitalares devem se atentar quanto aos procedimentos de preparo de alimentos, sobretudo porque essas refeições são servidas a indivíduos hospitalizados.(AU)

Mycobacterium genavense infection in two species of captive snakes

Background: Mycobacterium is an important zoonotic agent with companion, livestock and wildlife animals reportedly playing a role as reservoirs. Although its association with reptiles has been described, the disease cycle remains to be fully established, particularly in snakes. Accordingly, this study aimed to report the occurrence of mycobacteriosis with clinical pneumonia in one exotic python snake (Python molurus) and one native green snake (Philodryas olfersii) from the Sorocaba Zoo, São Paulo state, Brazil. Methods: Diagnosis was based on necropsy, histopathological examination, Ziehl-Neelsen stain and immunohistochemistry. Results: Using a nested PCR followed by DNA sequencing and bioinformatics analysis, the causative Mycobacterium species was identified as Mycobacterium genavense. Conclusion: Mycobacterium genavense is an infectious zoonotic agent of animal and public health concerns.(AU)

Mycobacterium genavense infection in two species of captive snakes

Mycobacterium is an important zoonotic agent with companion, livestock and wildlife animals reportedly playing a role as reservoirs. Although its association with reptiles has been described, the disease cycle remains to be fully established, particularly in snakes. Accordingly, this study aimed to report the occurrence of mycobacteriosis with clinical pneumonia in one exotic python snake (Python molurus) and one native green snake (Philodryas olfersii) from the Sorocaba Zoo, São Paulo state, Brazil. Methods: Diagnosis was based on necropsy, histopathological examination, Ziehl-Neelsen stain and immunohistochemistry. Results: Using a nested PCR followed by DNA sequencing and bioinformatics analysis, the causative Mycobacterium species was identified as Mycobacterium genavense. Conclusion: Mycobacterium genavense is an infectious zoonotic agent of animal and public health concerns.(AU)

Mycobacterium genavense infection in two species of captive snakes

Mycobacterium is an important zoonotic agent with companion, livestock and wildlife animals reportedly playing a role as reservoirs. Although its association with reptiles has been described, the disease cycle remains to be fully established, particularly in snakes. Accordingly, this study aimed to report the occurrence of mycobacteriosis with clinical pneumonia in one exotic python snake (Python molurus) and one native green snake (Philodryas olfersii) from the Sorocaba Zoo, São Paulo state, Brazil. Methods: Diagnosis was based on necropsy, histopathological examination, Ziehl-Neelsen stain and immunohistochemistry. Results: Using a nested PCR followed by DNA sequencing and bioinformatics analysis, the causative Mycobacterium species was identified as Mycobacterium genavense. Conclusion: Mycobacterium genavense is an infectious zoonotic agent of animal and public health concerns.

PCR and qPCR for detection of Porcine Circovirus type 2 (PCV2) in captive white-lipped (Tayassu pecari) and collared (Tayassu tajacu) peccaries from Southern Brazil / PCR e qPCR para detecção de Circovírus Suíno tipo 2 (PCV2) em catetos (Pecari tajacu) e queixadas (Tayassu pecari) de cativeiro do Sul do Brasil

Porcine circovirus type 2 (PCV2) is an emergent virus found in commercial pig farms and may cause clinical or subclinical infection. The collared peccary (Pecari tajacu) and white-lipped peccary (Tayassu pecari) may also be infected by PCV2. Accordingly, the aim of this study was to identify PCV2 in whole blood samples of captive peccaries (16 collared and 6 white-lipped) by conventional and quantitative PCR (qPCR). Although the housekeeping gene (c-myc) DNA was successfully amplified, all 22 peccaries tested were negative for PCV2 by both molecular methods. In conclusion, although PCV2 may be endemic in free ranging wild pigs of Central and Northern Brazil, lack of serological and molecular PCV2 evidence (in whole blood) of both captive and free-range wild pigs may indicate low risk of disease in Southern Brazil.

O circovírus suíno tipo 2 (PCV2) é um vírus emergente encontrado em granjas comerciais de suínos que pode causar infecção clínica ou subclínica. Os catetos (Pecari tajacu) e as queixadas (Tayassu pecari) também podem se infectar com PCV2. Deste modo, o objetivo deste estudo foi identificar o PCV2 em amostras de sangue total de pecaris de cativeiro (16 catetos e seis queixadas) por PCR convencional e quantitativo (qPCR). Embora o gene constitutivo (c-myc) tenha sido amplificado com sucesso, todas as 22 amostras de pecaris avaliadas foram negativas para PCV2 em ambos os métodos moleculares. Em conclusão, embora o PCV2 seja endêmico em suínos selvagens de vida livre do Centro e Norte do Brasil, a ausência de evidência sorológica e molecular de PCV2 (em sangue total) de ambos pecaris de cativeiro e de vida livre no Sul do Brasil podem indicar baixo risco de doença no Sul do Brasil.

PCR and qPCR for detection of Porcine Circovirus type 2 (PCV2) in captive white-lipped (Tayassu pecari) and collared (Tayassu tajacu) peccaries from Southern Brazil / PCR e qPCR para detecção de Circovírus Suíno tipo 2 (PCV2) em catetos (Pecari tajacu) e queixadas (Tayassu pecari) de cativeiro do Sul do Brasil

Porcine circovirus type 2 (PCV2) is an emergent virus found in commercial pig farms and may cause clinical or subclinical infection. The collared peccary (Pecari tajacu) and white-lipped peccary (Tayassu pecari) may also be infected by PCV2. Accordingly, the aim of this study was to identify PCV2 in whole blood samples of captive peccaries (16 collared and 6 white-lipped) by conventional and quantitative PCR (qPCR). Although the housekeeping gene (c-myc) DNA was successfully amplified, all 22 peccaries tested were negative for PCV2 by both molecular methods. In conclusion, although PCV2 may be endemic in free ranging wild pigs of Central and Northern Brazil, lack of serological and molecular PCV2 evidence (in whole blood) of both captive and free-range wild pigs may indicate low risk of disease in Southern Brazil.(AU)

O circovírus suíno tipo 2 (PCV2) é um vírus emergente encontrado em granjas comerciais de suínos que pode causar infecção clínica ou subclínica. Os catetos (Pecari tajacu) e as queixadas (Tayassu pecari) também podem se infectar com PCV2. Deste modo, o objetivo deste estudo foi identificar o PCV2 em amostras de sangue total de pecaris de cativeiro (16 catetos e seis queixadas) por PCR convencional e quantitativo (qPCR). Embora o gene constitutivo (c-myc) tenha sido amplificado com sucesso, todas as 22 amostras de pecaris avaliadas foram negativas para PCV2 em ambos os métodos moleculares. Em conclusão, embora o PCV2 seja endêmico em suínos selvagens de vida livre do Centro e Norte do Brasil, a ausência de evidência sorológica e molecular de PCV2 (em sangue total) de ambos pecaris de cativeiro e de vida livre no Sul do Brasil podem indicar baixo risco de doença no Sul do Brasil.(AU)

Avaliação da unidade analítica na detecção de Salmonella spp em frangos a varejo / Evaluation of the analytical unit for detecting Salmonella spp. in poultry at retail

Mais de 95 por cento das salmoneloses humanas são de origem alimentar e, entre os alimentos envolvidos na transmissão estão os produtos de origem animal, especialmente os de maior relevância, os produtos avícolas. Diante desta questão, o Ministério de Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) estabeleceu um programa com a finalidade de reduzir e monitorar a contaminação por Salmonella spp. nas carcaças de aves. Neste estudo, foi comparada a eficiência de duas metodologias de análises (o enxágue da carcaça e a excisão da pele) para recuperação de células da bactéria, bem como para a verificação da ocorrência do agente patogênico em amostras coletadas na região de Botucatu, SP. Em 100 carcaças analisadas, computando-se os resultados de ambas as metodologias, 43 por cento (43/100) estavam contaminadas por Salmonella spp. Por meio de metodologia de enxágue foram detectadas 81,40 por cento (35/43) amostras com resultados positivos e 51,16 por cento (22/43) pela técnica de excisão. Embora a técnica de enxague tenha detectado número superior de amostras positivas, não houve diferença estatística (p > 0,05) entre os resultados obtidos pelas duas metodologias. Estudos adicionais devem ser realizados, dada à importância das carcaças de frango na veiculação de Salmonella spp. e sua consequente introdução no ambiente de preparação de alimentos. (AU)

Comparação do método microbiológico e qPCR na quantificação de Salmonella spp. nas diversas etapas do abate de aves e sob simulação do varejo

O presente trabalho teve como objetivo avaliar a técnica da PCR em tempo real após a etapa de pré-enriquecimento (qPCR) em relação ao Método Microbiologia Convencional (MMC) na detecção e quantificação de Salmonella spp. em carcaças de frangos naturalmente ou artificialmente contaminadas. Alem disso, foi possível realizar a identificação sorológica e avaliação de resistência antimicrobiana nas cepas isoladas. No total, foram avaliadas 33 amostras de diferentes lotes de produção, tendo sido colhidas ainda na indústria em três pontos: Pós-Sangria (PS), Pós depenagem (PD), Pós Chiller (PC) e amostras embaladas estocadas a 5°C por 72 horas classificadas como Simulação do Varejo (SV), sendo durante todo o processo, a mesma carcaça utilizada para todos os pontos. Do total de amostras contaminadas por Salmonella spp., 33 (100%) foram oriundas da pós sangria, 13 (39%) pós-depenagem, 19 (58%) pós-chiller e 10 (30%) da simulação do varejo. Na avaliação qualitativa (ausência e presença) a MMC mostrou-se numericamente mais eficiente, mas sem diferença significativa entre as técnicas testadas. Quantitativamente a qPCR apresentou um desempenho melhor. Realizando a concordância entre os métodos testados destacamos Especificidade de 96%, Sensibilidade de 79%, e Prevalência de 23,5% na análise qualitativa e Especificidade de 90%, Sensibilidade de 92% e Prevalência de 28,7% na análise quantitativa. Observou-se ainda que as cepas mais encontradas neste trabalho foram S. Mbandaka, S. Senftenberg e S. Enteritidis. Na análise do antibiograma as cepas apresentaram maior resistência ao ácido nalidixico, com alta significância (P<0,05) e observou-se também a presença de 5 cepas Multi Drogas Resistentes

This study aimed to evaluate the use of real-time PCR after pre-enrichment (qPCR) against the Traditional Method Microbiology (MMC) on the detection and quantification of Salmonella spp. in naturally and artificially contaminated broilers carcasses. In addition, serological identification and evaluation of antimicrobial resistance in positive strains was observed. In total, 33 samples from different production batches were evaluated and taken in the industry in three points: Post-Bleeding (PS), After plucking (PD) Post Chiller (PC) and packed samples stored at 5°C for 72 hours, classified as Retail Simulation (SV), and using the same carcass for evaluation in all points, during the whole process. Out of the total analyzed samples, (33) 100% after bleeding, (13) 39% post-plucking, 19 (58%) post-chiller and 10 (30%) of retail simulation were contaminated by Salmonella spp. The qualitative assessment (presence and absence) MMC showed a little more efficiency but no significant difference between the techniques tested. Quantitatively qPCR showed a better performance. The correlation between the tested methods highlights qualitatively a specificity of 96%, sensitivity of 79%, and prevalence of 23.5%; specificity of 90%, sensitivity of 92% and prevalence of 28.7% in the quantitative analysis. It was also observed that the most commonly strains found in this study were S. Mbandaka, S. Senftenberg and S. Enteritidis and among the antibiotics tested nalidixic acid was the most resistant with high significance (P <0.05) and the presence of 5 Multi Drug Resistant strains was observed

Salmonella spp. em carcaças de frangos : avaliação do método de preparo da amostra e do efeito da estocagem sob refrigeração sobre a recuperação do patógeno

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