Iron and zinc mycelial bioaccumulation in Agaricus subrufescens strains / Bioacumulação micelial de ferro e zinco em linhagens de Agaricus subrufescens

Agaricus subrufescens, a basidiomycete native to Brazil, is worldwide cultivated due to its medicinal properties. This fungus is capable of bioaccumulating metals in the mycelial biomass when cultured in the presence of them; however, this capacity is little explored for functional food production. This study aimed to evaluate the amount of iron or zinc bioaccumulated in the vegetative mycelium of sixteen strains of A. subrufescens. Mycelia were grown in malt extract agar added with 50 mg/L of iron or with 7.5 mg/L of zinc. The metal bioaccumulation in the mycelial biomass was strain-dependent. In general, metal can inhibit or stimulate the mycelial growth ranging from -81 to +78% for iron and from -86 to +100% for zinc. The highest bioaccumulated iron and zinc concentrations in the mycelial biomass was 2,595.65 mg/kg and 1,655.83 mg/kg, respectively and occurred in the U4-4 strain. The supplementation of mycelial biomass using iron or zinc is an alternative to develop food supplements, that can be used both in the human and animal diet and in the prevention of diseases.

Agaricus subrufescens, basidiomiceto nativo do Brasil, é cultivado mundialmente devido aos seus aspectos medicinais. Este fungo tem capacidade de bioacumulação de metais na biomassa micelial, no entanto, esta propriedade é pouco explorada para a produção de alimentos funcionais. O objetivo deste trabalho foi avaliar a quantidade de ferro ou zinco bioacumulada no micélio vegetativo de diversas linhagens de Agaricus subrufescens. Foram utilizadas 16 linhagens de A. subrufescens da coleção de culturas da Universidade Paranaense. O crescimento da biomassa micelial e a bioacumulação de ferro e zinco foram avaliados em micélio crescido em ágar extrato de malte adicionado de 50 mg L-1 de ferro ou 7,5 mg L-1 de zinco. A bioacumulação dos metais na biomassa micelial foi linhagem dependente. De forma geral, os metais podem inibir ou estimular o crescimento com variação entre de -81 a +78% para o ferro e de -86 a +100% para o zinco. A maior concentração de ferro na biomassa foi para o ferro de 2595,65 mg kg-1 e para o zinco de 1655,83 mg kg-1, ambos para a linhagem U4-4. O enriquecimento da biomassa micelial com ferro e/ou zinco é uma alternativa ao desenvolvimento de novos alimentos ou suplementos alimentares fonte de ferro e zinco de origem não-animal.

Iron and zinc mycelial bioaccumulation in Agaricus subrufescens strains / Bioacumulação micelial de ferro e zinco em linhagens de Agaricus subrufescens

Agaricus subrufescens, a basidiomycete native to Brazil, is worldwide cultivated due to its medicinal properties. This fungus is capable of bioaccumulating metals in the mycelial biomass when cultured in the presence of them; however, this capacity is little explored for functional food production. This study aimed to evaluate the amount of iron or zinc bioaccumulated in the vegetative mycelium of sixteen strains of A. subrufescens. Mycelia were grown in malt extract agar added with 50 mg/L of iron or with 7.5 mg/L of zinc. The metal bioaccumulation in the mycelial biomass was strain-dependent. In general, metal can inhibit or stimulate the mycelial growth ranging from -81 to +78% for iron and from -86 to +100% for zinc. The highest bioaccumulated iron and zinc concentrations in the mycelial biomass was 2,595.65 mg/kg and 1,655.83 mg/kg, respectively and occurred in the U4-4 strain. The supplementation of mycelial biomass using iron or zinc is an alternative to develop food supplements, that can be used both in the human and animal diet and in the prevention of diseases.(AU)

Agaricus subrufescens, basidiomiceto nativo do Brasil, é cultivado mundialmente devido aos seus aspectos medicinais. Este fungo tem capacidade de bioacumulação de metais na biomassa micelial, no entanto, esta propriedade é pouco explorada para a produção de alimentos funcionais. O objetivo deste trabalho foi avaliar a quantidade de ferro ou zinco bioacumulada no micélio vegetativo de diversas linhagens de Agaricus subrufescens. Foram utilizadas 16 linhagens de A. subrufescens da coleção de culturas da Universidade Paranaense. O crescimento da biomassa micelial e a bioacumulação de ferro e zinco foram avaliados em micélio crescido em ágar extrato de malte adicionado de 50 mg L-1 de ferro ou 7,5 mg L-1 de zinco. A bioacumulação dos metais na biomassa micelial foi linhagem dependente. De forma geral, os metais podem inibir ou estimular o crescimento com variação entre de -81 a +78% para o ferro e de -86 a +100% para o zinco. A maior concentração de ferro na biomassa foi para o ferro de 2595,65 mg kg-1 e para o zinco de 1655,83 mg kg-1, ambos para a linhagem U4-4. O enriquecimento da biomassa micelial com ferro e/ou zinco é uma alternativa ao desenvolvimento de novos alimentos ou suplementos alimentares fonte de ferro e zinco de origem não-animal.(AU)

Cryopreservation at -75 °C of Agaricus subrufescens on wheat grains with sucrose

Abstract Agaricus subrufescens is a basidiomycete which is studied because of its medicinal and gastronomic importance; however, less attention has been paid to its preservation. This study aimed to evaluate the effect of sucrose addition to substrate and cryotube on the viability of Agaricus subrufescens cryopreserved at -20 °C and at -75 °C for one and two years. Zero, 10% or 20% sucrose was added to potato dextrose agar or wheat grain. The mycelia were cryopreserved in the absence of cryoprotectant or with sucrose solutions at 15%, 30% or 45%. After one or two years at -75 °C or at -20 °C, mycelia were thawed and evaluated about viability, initial time of growth, colony diameter and genomic stability. Cryopreservation at -20 °C is not effective to keep mycelial viability of this fungus. Cryopreservation at -75 °C is effective when sucrose is used in substrates and/or cryotubes. Without sucrose, cryopreservation at -75 °C is effective only when wheat grains are used. Physiological characteristic as mycelial colony diameter is negatively affected when potato dextrose agar is used and unaffected when wheat grain is used after two-year cryopreservation at -75 °C. The fungus genome does not show alteration after two-year cryopreservation at -75 °C.

Cryopreservation at -75 °C of Agaricus subrufescens on wheat grains with sucrose

Agaricus subrufescens is a basidiomycete which is studied because of its medicinal and gastronomic importance; however, less attention has been paid to its preservation. This study aimed to evaluate the effect of sucrose addition to substrate and cryotube on the viability of Agaricus subrufescens cryopreserved at -20 °C and at -75 °C for one and two years. Zero, 10% or 20% sucrose was added to potato dextrose agar or wheat grain. The mycelia were cryopreserved in the absence of cryoprotectant or with sucrose solutions at 15%, 30% or 45%. After one or two years at -75 °C or at -20 °C, mycelia were thawed and evaluated about viability, initial time of growth, colony diameter and genomic stability. Cryopreservation at -20 °C is not effective to keep mycelial viability of this fungus. Cryopreservation at -75 °C is effective when sucrose is used in substrates and/or cryotubes. Without sucrose, cryopreservation at -75 °C is effective only when wheat grains are used. Physiological characteristic as mycelial colony diameter is negatively affected when potato dextrose agar is used and unaffected when wheat grain is used after two-year cryopreservation at -75 °C. The fungus genome does not show alteration after two-year cryopreservation at -75 °C.(AU)

Agaricus brasiliensis polysaccharides stimulate human monocytes to capture Candida albicans, express toll-like receptors 2 and 4, and produce pro-inflammatory cytokines

Agaricus brasiliensis é um cogumelo medicinal com atividades imunomoduladoras e antitumorais atribuídas aos ß-glucanos presentes na fração polissacarídica de seu corpo de frutificação. Uma vez que os ß-glucanos aumentam a imunorresponsividade celular, neste estudo objetivamos avaliar o efeito de uma fração rica em polissacarídeos tratados com ácido (ATF) de A. brasiliensis sobre a capacidade de monócitos humanos de aderir / fagocitar células de levedura C. albicans . expressão de receptores de reconhecimento de padrões e sua capacidade de produzir citocinas. Métodos: A adesão / fagocitose de C. albicans marcada com FITC foi avaliada por citometria de fluxo. As células foram incubadas com anticorpos marcados com fluorocromo específicos para TLR2 e 4, ßGR e MR e também avaliadas por citometria de fluxo. Os monócitos foram cultivados com ATF, e os sobrenadantes da cultura foram coletados para análise da produção de citocinas in vitro por ELISA (TNF-α, IL-1ß, IL-12 e IL-10). Resultados: ATF aumentou significativamente a aderência / fagocitose de C. albicans por monócitos e isso foi associado com expressão aumentada de TLR2 e TLR4, enquanto nenhum efeito foi observado em ßGR ou MR. Além disso, a expressão de TLR4 e TLR2 foi associada a níveis mais elevados de produção in vitro de TNF-α e IL-1, respectivamente. A produção de IL-10 também foi aumentada pelo tratamento com ATF, mas não encontramos associação entre sua produção e a expressão de receptores Toll-like. Conclusão: Nossos resultados nos forneceram evidências de que polissacarídeos de A. brasiliensis afetam monócitos humanos provavelmente através da modulação de receptores Toll-like.(AU)

Agaricus brasiliensis polysaccharides stimulate human monocytes to capture Candida albicans, express toll-like receptors 2 and 4, and produce pro-inflammatory cytokines

Agaricus brasiliensis é um cogumelo medicinal com atividades imunomoduladoras e antitumorais atribuídas aos ß-glucanos presentes na fração polissacarídica de seu corpo de frutificação. Uma vez que os ß-glucanos aumentam a imunorresponsividade celular, neste estudo objetivamos avaliar o efeito de uma fração rica em polissacarídeos tratados com ácido (ATF) de A. brasiliensis sobre a capacidade de monócitos humanos de aderir / fagocitar células de levedura C. albicans . expressão de receptores de reconhecimento de padrões e sua capacidade de produzir citocinas. Métodos: A adesão / fagocitose de C. albicans marcada com FITC foi avaliada por citometria de fluxo. As células foram incubadas com anticorpos marcados com fluorocromo específicos para TLR2 e 4, ßGR e MR e também avaliadas por citometria de fluxo. Os monócitos foram cultivados com ATF, e os sobrenadantes da cultura foram coletados para análise da produção de citocinas in vitro por ELISA (TNF-α, IL-1ß, IL-12 e IL-10). Resultados: ATF aumentou significativamente a aderência / fagocitose de C. albicans por monócitos e isso foi associado com expressão aumentada de TLR2 e TLR4, enquanto nenhum efeito foi observado em ßGR ou MR. Além disso, a expressão de TLR4 e TLR2 foi associada a níveis mais elevados de produção in vitro de TNF-α e IL-1, respectivamente. A produção de IL-10 também foi aumentada pelo tratamento com ATF, mas não encontramos associação entre sua produção e a expressão de receptores Toll-like. Conclusão: Nossos resultados nos forneceram evidências de que polissacarídeos de A. brasiliensis afetam monócitos humanos provavelmente através da modulação de receptores Toll-like.(AU)

Agaricus brasiliensis polysaccharides stimulate human monocytes to capture Candida albicans, express toll-like receptors 2 and 4, and produce pro-inflammatory cytokines

Abstract Background Agaricus brasiliensis is a medicinal mushroom with immunomodulatory and antitumor activities attributed to the -glucans presented in the polysaccharide fraction of its fruiting body. Since -glucans enhance cellular immunoresponsiveness, in this study we aimed to evaluate the effect of an acid-treated polysaccharide-rich fraction (ATF) of A. brasiliensis on the ability of human monocytes to adhere/phagocyte C. albicans yeast cells, their expression of pattern recognition receptors and their ability to produce cytokines. Methods Adhesion/phagocytosis of FITC-labeled C. albicans was evaluated by flow cytometry. Cells were incubated with specific fluorochrome-labeled antibodies for TLR2 and 4, GR and MR and also evaluated by flow cytometry. Monocytes were cultured with ATF, and culture supernatants were collected for analysis of in vitro cytokine production by ELISA (TNF-, IL-1, IL-12 and IL-10). Results ATF significantly increased the adherence/phagocytosis of C. albicans by monocytes and this was associated with enhanced expression of TLR2 and TLR4, while no effect was observed on GR or MR. Moreover, expression of TLR4 and TLR2 was associated with higher levels of in vitro production of TNF- and IL-1, respectively. Production of IL-10 was also increased by ATF treatment, but we found no association between its production and the expression of Toll-like receptors. Conclusion Our results provided us with evidence that A. brasiliensis polysaccharides affect human monocytes probably through the modulation of Toll-like receptors.

Blood parameters of sheep with high infection of Haemonchus contortus and treated with mushroom of the sun (Agaricus blazei) / Parâmetros sanguíneos de ovinos com alta infecção por Haemonchus contortus e tratados com cogumelo do sol (Agaricus blazei)

Blood and parasitological parameters of sheep experimentally infected with Haemonchus contortus and treated with “mushroom of the sun” (Agaricus blazei) were assessed. Lambs infected with the nematode were divided into three groups: treated with basidiocarp powder from the fungus, wormed with trichlorfon, and a control group that did not receive anthelmintic. Split-plot design analysis was performed where the treatments were defined as plots and four periods of collection were defined as subplots. Interaction between the treatments and the collection periods for the fecal egg counts per gram of feces (FEC) was observed. Treatment with “mushroom of the sun” showed anthelmintic efficacies ranging from 28.6 to 54.2%. Similar performances to weight gain were observed among the groups. A significant interaction between treatments and evaluation periods was observed for erythrocyte counts, hematocrit value, and serum concentrations of albumin and urea. The values of the mean corpuscular volume, erythrocyte distribution width, and leukocyte, neutrophil, lymphocyte, monocyte, and eosinophil counts, as well as the mean platelet volume, varied among the collection days. The administration of “mushroom of the sun” significantly reduced the FEC, did not influence on the erythrocyte count and hematocrit value, which remained within normal limits. However it increased the serum concentrations of albumin.(AU)

Avaliou-se os parâmetros sanguíneos e parasitológicos de ovinos infectados experimentalmente com Haemonchus contortus e tratados com “cogumelo do sol” (Agaricus blazei). Cordeiros infectados com o nematódeo foram distribuídos em três grupos: tratados com pó do basidiocarpo do fungo, vermifugados com triclorfon e grupo controle, que não recebeu anti-helmíntico. Utilizou-se delineamento em parcelas subdivididas, sendo os tratamentos as parcelas e quatro períodos de coletas, as subparcelas. Verificou-se interação dos tratamentos e dos períodos de coleta para o número de ovos por grama de fezes (OPG). O tratamento com “cogumelo do sol” apresentou eficácia anti-helmíntica variando de 28,6% a 54,2%, entretanto o desempenho foi semelhante entre os grupos. Verificou-se interação significativa dos tratamentos e os períodos avaliados para as contagens de eritrócitos, o valor do hematócrito e as concentrações séricas de albumina e ureia. Os valores do volume corpuscular médio, da amplitude de distribuição de eritrócitos, as contagens de leucócitos, neutrófilos, linfócitos, monócitos e eosinófilos, bem como o volume plaquetário médio variaram entre os dias de coleta. A administração do “cogumelo do sol” reduziu o OPG, não influenciou a contagem de eritrócitos e o valor do hematócrito, que estiveram dentro dos limites da normalidade, e aumentou significativamente as concentrações séricas de albumina.(AU)

Bioacumulação de zinco em micélio de Agaricus subrufescens / Zinc bioaccumulation in Agaricus subrufescens mycelium / Bioacumulación de zinc en micelio de Agaricus subrufescens

Fungos basidiomicetos têm a capacidade de bioacumular metais pesados, no entanto existem poucos trabalhos sobre bioacumulação de zinco em micélio de Agaricussubrufescens. O objetivo deste trabalho foi avaliar a bioacumulação de zinco em micélio vegetativo de A. subrufescens cultivado em meio sólido e líquido. O fungo foi crescido em meio sólido ou em meio líquido a base de extrato de malte adicionado de ZnSO4 a fim de obter zero; 2,5; 5; 7,5; 10; 15 ou 20 ppm de zinco. Os meios foram inoculados e após 14 dias foi determinada a biomassa e a bioacumulação de zinco. A adição de zinco no meio de cultivo inibiu o crescimento micelial e induziu a bioacumulação na biomassa tanto no cultivo sólido como no líquido. Adições acima de 7,5 ppm de zinco inibiram totalmente o crescimento micelial. O fungo crescido em meio de cultivo líquido sofre maior inibição do crescimento com a adição de zinco e maior bioacumulação que no meio sólido.(AU)

Fungi basidiomycetes have the ability to bioaccumulate heavy metals, but there are few studies on zinc bioaccumulation in the mycelium of Agaricus subrufescens. The objective of this study is to evaluate the zinc bioaccumulation in the mycelium of A. subrufescens cultivated in solid and liquid culture media. Mycelium was grown on solid or liquid medium in malt extract base added with ZnSO4 to obtain zero, 2.5, 5, 7.5, 10, 15 or 20-ppm zinc. Mycelial biomass and zinc bioaccumulation were determined 14 days after inoculation in the culture media. Addition of zinc in culture medium inhibited mycelial growth and induced biomass bioaccumulation both in solid and in liquid culture. Additions higher than 7.5-ppm zinc completely inhibited mycelial growth in culture medium. Mycelial growth in liquid culture presented greater increase of growth inhibition with the addition of zinc and greater bioaccumulation than in solid medium.(AU)

Hongos basidiomicetos tienen la capacidad de bioacumular metales pesados, sin embargo hay pocos estudios sobre la bioacumulación de zinc en el micelio de Agaricus subrufescens. El objetivo de este estudio ha sido evaluar la bioacumulación de zinc en el micelio de A. subrufescens cultivado en medio sólido y líquido. El hongo ha crecido en medio sólido o líquido a base de extracto de malta agregado de ZnSO4 para obtener cero; 2.5, 5, 7.5, 10, 15 o 20 ppm de zinc. Los medios fueron inoculados y después de 14 días se determinó la biomasa y la bioacumulación de zinc. La adición de zinc en el medio del cultivo inhibió el crecimiento micelial y indujo la bioacumulación de la biomasa tanto en el cultivo sólido como en el líquido. Adiciones superiores a 7.5 ppm de zinc inhibieron completamente el crecimiento del micelio. El hongo crecido en medio de cultivo líquido sufre mayor inhibición del crecimiento con la adición de zinc y mayor bioacumulación que en el medio sólido.(AU)

Resposta hepática à suplementação alimentar em rãs-touro sob condição de estresse / Liver response to dietary supplementation in bullfrog under stress condition

Evaluate the hepatoprotective effect of dietary supplementation with the probiotic (Bacillus subtilis) and with beta-glucan on bullfrog in stress of high stocking density. Animals were assigned in treatments: T1: 100 animals m-2 (control); T2: 236 animals m-2; T3: 236 animals m-2 supplemented with probiotic; T4: 236 animals m-2 supplemented with beta-glucan. Evaluated survival, weight gain (WG) and the condition of liver biochemistry and histopathology. There was no statistical difference in survival between treatments (P>0.05), but were observed significant differences for WG at 30 days, between not supplemented treatments and supplemented treatments (P 0.001). Biochemical analysis showed conditions very near among animals of control treatment and animals supplemented with beta-glucan. Histopathological analysis revealed lesions and cytoplasmic rarefaction in 100% of the samples, suggesting protein deficiency. The beta-glucan reduced the effects of stress in bullfrog and has shown hepatoprotective effect, but the probiotic Bacillus subtilis was not demonstrating the same effect.(AU)

Avaliou-se o efeito hepatoprotetor da suplementação alimentar com probiótico (Bacillus subtillis) e com betaglucana em rãs-touro submetidas à condição de estresse por adensamento. Os animais foram distribuídos nos tratamentos: T1: 100 animais m-2 (controle); T2: 236 animais m-2; T3: 236 animais m-2, suplementados com probiótico; e, T4: 236 animais m-2, suplementados com betaglucana. Avaliou-se sobrevivência, ganho em peso (GP) e a condição bioquímica e histopatológica dos fígados. Não foi observada diferença estatística para a sobrevivência (P>0,05), porém foram observadas diferenças significativas para o GP aos 30 dias, entre os tratamentos não suplementados e os suplementados (P 0,001). As avaliações bioquímicas mostraram condições muito próximas entre os animais do tratamento controle e aqueles suplementados com betaglucana. A análise histopatológica mostrou lesões e rarefação citoplasmática em 100% das amostras, sugerindo deficiência proteica. A betaglucana mostrou efeito hepatoprotetor, reduzindo os efeitos do estresse sobre o fígado de rã-touro, porém o probiótico Bacillus subtillis não apresentou o mesmo potencial.(AU)

Resposta hepática à suplementação alimentar em rãs-touro sob condição de estresse / Liver response to dietary supplementation in bullfrog under stress condition

Evaluate the hepatoprotective effect of dietary supplementation with the probiotic (Bacillus subtilis) and with beta-glucan on bullfrog in stress of high stocking density. Animals were assigned in treatments: T1: 100 animals m-2 (control); T2: 236 animals m-2; T3: 236 animals m-2 supplemented with probiotic; T4: 236 animals m-2 supplemented with beta-glucan. Evaluated survival, weight gain (WG) and the condition of liver biochemistry and histopathology. There was no statistical difference in survival between treatments (P>0.05), but were observed significant differences for WG at 30 days, between not supplemented treatments and supplemented treatments (P 0.001). Biochemical analysis showed conditions very near among animals of control treatment and animals supplemented with beta-glucan. Histopathological analysis revealed lesions and cytoplasmic rarefaction in 100% of the samples, suggesting protein deficiency. The beta-glucan reduced the effects of stress in bullfrog and has shown hepatoprotective effect, but the probiotic Bacillus subtilis was not demonstrating the same effect.

Avaliou-se o efeito hepatoprotetor da suplementação alimentar com probiótico (Bacillus subtillis) e com betaglucana em rãs-touro submetidas à condição de estresse por adensamento. Os animais foram distribuídos nos tratamentos: T1: 100 animais m-2 (controle); T2: 236 animais m-2; T3: 236 animais m-2, suplementados com probiótico; e, T4: 236 animais m-2, suplementados com betaglucana. Avaliou-se sobrevivência, ganho em peso (GP) e a condição bioquímica e histopatológica dos fígados. Não foi observada diferença estatística para a sobrevivência (P>0,05), porém foram observadas diferenças significativas para o GP aos 30 dias, entre os tratamentos não suplementados e os suplementados (P 0,001). As avaliações bioquímicas mostraram condições muito próximas entre os animais do tratamento controle e aqueles suplementados com betaglucana. A análise histopatológica mostrou lesões e rarefação citoplasmática em 100% das amostras, sugerindo deficiência proteica. A betaglucana mostrou efeito hepatoprotetor, reduzindo os efeitos do estresse sobre o fígado de rã-touro, porém o probiótico Bacillus subtillis não apresentou o mesmo potencial.

Antioxidant activity of Agaricus brasiliensis basidiocarps on different maturation phases

Different maturation phases of basidiocarp could affect the bioactivity and concentration of some active substances. A. brasiliensis Wasser et al.(A. blazei Murrill) has shown antitumor activity that could be related to the antioxidant activity. However there is no information of the best basidiocarp maturation phase for extracting antioxidant substances in order to determine the moment of harvesting in mushroom cultivation. The objective of this work was to evaluate the antioxidant activity of A. brasiliensis strains on different basidiocarp maturation phases. The best condition for extraction of A. brasiliensis antioxidants is with methanol as solvent at 60 ºC for 60 min. Strains with closed basidiocarp have higher antioxidant activity than with opened basidiocarp. Antioxidant activity varies in each strain. It was concluded that A. brasiliensis is a natural source of antioxidant compounds. Also there is higher antioxidant activity in closed than opened caps and consequently higher functional activity. It reinforces the synergic action among different A. brasiliensis compounds as a functional food and the importance of further investigation for isolation and characterization of antioxidant substances of A. brasiliensis. It also determines the best harvest period in order to obtain the highest antioxidant activity from basidiocarp.

Tratamentos térmicos do calxisto para uso como camada de cobertura no cultivo de Agaricus brasiliensis

Casing layer choice is one of the most important phases on Agaricus brasiliensis cultivation. Besides the importance of it few studies report the use of different heat treatments to control the microbiota in alternative casing layers. Thus, the objective of this work was to evaluate the effect of pasteurized or autoclaved lime schist as an alternative casing layer on A. brasiliensis cultivation. The fungus was previously grown on wheat grains and transferred to a substratum previously composted. After substratum mycelium colonization a pasteurized or autoclaved lime schist casing layer was added on. It was evaluated the biological efficiency, the number and mass of produced mushroom and the production flush along cultivation. It was concluded that autoclaved lime schist casing layer decreases period of production, biological efficiency, number and mass of cultivated mushrooms. However pasteurized lime schist casing layer is the most efficient on A. brasiliensis cultivation.

A escolha da camada de cobertura é uma das mais importantes etapas do cultivo de Agaricus brasiliensis. Apesar dessa importância, poucos estudos relatam o uso de diferentes tratamentos térmicos para o controle da microbiota em camadas de cobertura alternativas. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da pasteurização e da autoclavagem do material alternativo calxisto para utilização como camada de cobertura no cultivo de A. brasiliensis. O fungo foi inicialmente crescido em grãos de trigo e transferido para meio de cultivo previamente compostado. Após a completa colonização, a camada de cobertura (calxisto) pasteurizada ou autoclavada foi adicionada. Avaliaram-se a eficiência biológica, o número e a biomassa de cogumelos produzidos e o fluxo de produção. Concluiu-se que a camada de cobertura com calxisto autoclavado reduzem o tempo de produção, a eficiência biológica e o número e a biomassa de cogumelos cultivados. Entretanto, a camada de cobertura com o calxisto pasteurizado é a mais eficiente para o cultivo de A. brasiliensis.

Tratamentos térmicos do calxisto para uso como camada de cobertura no cultivo de Agaricus brasiliensis

Casing layer choice is one of the most important phases on Agaricus brasiliensis cultivation. Besides the importance of it few studies report the use of different heat treatments to control the microbiota in alternative casing layers. Thus, the objective of this work was to evaluate the effect of pasteurized or autoclaved lime schist as an alternative casing layer on A. brasiliensis cultivation. The fungus was previously grown on wheat grains and transferred to a substratum previously composted. After substratum mycelium colonization a pasteurized or autoclaved lime schist casing layer was added on. It was evaluated the biological efficiency, the number and mass of produced mushroom and the production flush along cultivation. It was concluded that autoclaved lime schist casing layer decreases period of production, biological efficiency, number and mass of cultivated mushrooms. However pasteurized lime schist casing layer is the most efficient on A. brasiliensis cultivation.

A escolha da camada de cobertura é uma das mais importantes etapas do cultivo de Agaricus brasiliensis. Apesar dessa importância, poucos estudos relatam o uso de diferentes tratamentos térmicos para o controle da microbiota em camadas de cobertura alternativas. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da pasteurização e da autoclavagem do material alternativo calxisto para utilização como camada de cobertura no cultivo de A. brasiliensis. O fungo foi inicialmente crescido em grãos de trigo e transferido para meio de cultivo previamente compostado. Após a completa colonização, a camada de cobertura (calxisto) pasteurizada ou autoclavada foi adicionada. Avaliaram-se a eficiência biológica, o número e a biomassa de cogumelos produzidos e o fluxo de produção. Concluiu-se que a camada de cobertura com calxisto autoclavado reduzem o tempo de produção, a eficiência biológica e o número e a biomassa de cogumelos cultivados. Entretanto, a camada de cobertura com o calxisto pasteurizado é a mais eficiente para o cultivo de A. brasiliensis.

Tratamentos térmicos do calxisto para uso como camada de cobertura no cultivo de Agaricus brasiliensis

Casing layer choice is one of the most important phases on Agaricus brasiliensis cultivation. Besides the importance of it few studies report the use of different heat treatments to control the microbiota in alternative casing layers. Thus, the objective of this work was to evaluate the effect of pasteurized or autoclaved lime schist as an alternative casing layer on A. brasiliensis cultivation. The fungus was previously grown on wheat grains and transferred to a substratum previously composted. After substratum mycelium colonization a pasteurized or autoclaved lime schist casing layer was added on. It was evaluated the biological efficiency, the number and mass of produced mushroom and the production flush along cultivation. It was concluded that autoclaved lime schist casing layer decreases period of production, biological efficiency, number and mass of cultivated mushrooms. However pasteurized lime schist casing layer is the most efficient on A. brasiliensis cultivation.

A escolha da camada de cobertura é uma das mais importantes etapas do cultivo de Agaricus brasiliensis. Apesar dessa importância, poucos estudos relatam o uso de diferentes tratamentos térmicos para o controle da microbiota em camadas de cobertura alternativas. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da pasteurização e da autoclavagem do material alternativo calxisto para utilização como camada de cobertura no cultivo de A. brasiliensis. O fungo foi inicialmente crescido em grãos de trigo e transferido para meio de cultivo previamente compostado. Após a completa colonização, a camada de cobertura (calxisto) pasteurizada ou autoclavada foi adicionada. Avaliaram-se a eficiência biológica, o número e a biomassa de cogumelos produzidos e o fluxo de produção. Concluiu-se que a camada de cobertura com calxisto autoclavado reduzem o tempo de produção, a eficiência biológica e o número e a biomassa de cogumelos cultivados. Entretanto, a camada de cobertura com o calxisto pasteurizado é a mais eficiente para o cultivo de A. brasiliensis.

Antineoplasic activity of Agaricus brasiliensis basidiocarps on different maturation phases

The fungus Agaricus brasiliensis is a Basidiomycete studied because of its immunomodulation and/or antitumor substances. The objective of this study was to verify the Agaricus brasiliensis antineoplasic activity in vivo on different basidiocarp maturation phases on Sarcoma 180 cells implanted in mice. Sarcoma cells were implanted in mice and after seven days mice were divided in three groups. The first group was treated with saline solution, the second group was treated with closed basidiocarp extract solution and the third group was treated with opened basidiocarp extract solution. After 30 days of being daily orally treated with these three solutions all animals suffered euthanasia, and the splenic index, tumor mass and volume were determined. No significant differences of the tumor growth inhibition in function of the different basidiocarp maturation phases for the Agaricus brasiliensis strain were observed. The in vivo basidiocarp antineoplasic average activity was 89.22%.

Productivity, biological efficiency, and number of Agaricus blazei mushrooms grown in compost in the presence of Trichoderma sp. and Chaetomium olivacearum contaminants

This experiment was carried out to evaluate the effect of the fungi Trichoderma sp. and Chaetomium olivacearum on the productivity, biological efficiency and number of Agaricus blazei mushrooms grown in compost (mixture of crushed sugarcane, coast-cross grass trash, soybean meal, gypsum, and calcitic limestone). The experiment consisted of 3 treatments (Trichoderma sp., C. olivacearum, and a control) with 8 replications each (box containing 12kg of compost colonized by A. blazei). Later, 150g of inoculum of each contaminant fungus (Trichoderma sp. and C. olivacearum) were distributed on the surface of the compost previously colonized by A. blazei. The experiment was conducted in a greenhouse with a plastic roof, under relative humidity of about 60-90% and temperature between 20-34ºC. Productivity was determined from the relation between fresh weight of the mushroom and fresh weight of the compost. Biological efficiency was determined from the relation between fresh weight of the mushroom and dry weight of the compost at the end of the harvesting period. Based on results obtained, the contaminant fungi did not affect the productivity, biological efficiency, and number of A. blazei mushrooms grown in compost when introduced into previously colonized composts.

Foi avaliado o efeito dos fungos contaminantes Trichoderma sp. e C. olivacearum na produtividade, eficiência biológica e número de cogumelos da produção do A. blazei em composto (mistura de cana-de-açúcar, palha de capim coast-cross, farelo de soja, gesso e calcário calcítico). O delineanamento foi inteiramente casualizado com três tratamentos (Trichoderma sp., C. olivacearum e testemunha) e oito repetições (caixa com 12 kg de composto colonizado com A. blazei). Após a colonização do composto pelo A. blazei, adicionou-se 150g de inóculo à base de triticale de cada um dos fungos contaminantes na superfície do composto seguido da camada de cobertura. O experimento foi conduzido em estufa com cobertura plástica, umidade relativa entre 60-90% e temperatura de 20-34ºC. A produtividade foi determinada pela relação entre a massa fresca de basidiomas e a massa úmida do composto. A eficiência biológica foi determinada pela relação entre a massa fresca de basidiomas e a massa seca do composto ao final do período de colheita. De acordo com os resultados obtidos, os fungos contaminantes C. olivacearum e Trichoderma sp. não afetaram a produtividade, eficiência biológica e número de cogumelos da produção do A. blazei em compostos previamente colonizados.

Influência de Agaricus blazei Murrill sobre o tumor sólido de Ehrlich e linfonodos poplíteos de camundongos / Influence of Agaricus blazei Murrill in solid Ehrlich tumor and popliteal lymph nodes in mice

Estudou-se a influência do tratamento diário com filtrado aquoso de Agaricus blazei Murrill (ABM) (25mg/ml), via oral, por 17 e 57 dias, em camundongos inoculados com tumor sólido de Ehrlich (TSE) por meio da curva de crescimento tumoral, do peso relativo do tumor, da contagem de regiões organizadoras de nucléolos (AgNORs) e dos padrões histológicos das massas tumorais e linfonodos poplíteos. Os animais que ingeriram o extrato aquoso do ABM por 57 dias apresentaram menor (P<0,05) crescimento do TSE, no segundo e terceiro dias, fase inflamatória do crescimento tumoral. Quanto ao peso relativo das massas tumorais, valores de AgNORs, padrões morfoistopatológicos do TSE e ocorrência de processos metastáticos, não houve alteração significativa (P>0,05) entre os animais tratados e não tratados.(AU)

The influence of daily administration of Agaricus blazei Murrill (ABM) aqueous solution (25mg/ml) during 17 and 57 days in mice bearing solid Ehrlich tumor was studied. Tumoral growth, tumoral and spleenic relative weights, nucleoly organization regions AgNORs values and tumor and popliteal lymph nodes histopathology were daily evaluated. The animals that received ABM during 57 days showed lower values (P<0.05) of tumoral growth on second and third days after the period corresponding to the inflammatory phase of tumoral growth. The relative weight of the tumor and AgNORs values were similar (P>0.05) between treated and non-treated animals. No difference in microscopic evaluation of the tumors in treated and non-treated animals was seen and metastasis in popliteal nodes of the tumor occurred in all the animals.(AU)

Antiviral activity of Agaricus blazei Murrill ss. Heinem extract against human and bovine herpesviruses in cell culture

The aqueous extract of Agaricus blazei Murill ss. Heinem, a basidiomycete native from Brazil, frequently used by popular medicine, mainly in the form of tea, was assessed to its antiviral action against herpes simplex type 1 (HSV-1) and bovine herpes type 1 (BoHV-1) in HEp-2 cell culture. Viral replication inhibition was evaluated by plaque assay and immunofluorescence test. The extract demonstrated virucide action for both viruses, being more effective against HSV-1, inhibiting its infectivity in 78.4 and 73.9% at the concentrations of 50 and 100 µg/mL, respectively moreover, reduction in 47% the number of fluorescent cells was observed for both concentrations. The extract also showed discrete therapeutic activity. These results suggest that A. blazei extract acts mainly in the viral particle, however, the effect during virus replication can not be ruled out.

O extrato aquoso de Agaricus blazei Murill ss. Heinem, um basidiomiceto nativo do Brasil, usado na medicina popular, na forma de chá, foi avaliado quanto suas propriedades antivirais contra herpes simplex tipo 1 (HSV-1) e herpes bovino tipo 1 (BoHV-1) em cultura de células HEp-2. A inibição da replicação viral foi monitorada pelos ensaio de placa e reação de imunofluorescência. O extrato apresentou atividade virucida mais efetiva do que terapêutica para ambos os vírus, sendo mais efetivo portanto para HSV-1, inibindo em mais de 70% o número de plaques e em cerca de 47% o número de células apresentando fluorescência específica, nas concentrações de 50 e 100 µg/mL, nas duas técnicas utilizadas. Os resultados obtidos sugerem que o extrato aquoso de A. blazei deve agir principalmente sobre a partícula viral, embora a inibição durante o ciclo replicativo do vírus não deva ser excluída.

Antimutagenic action of Lentinula edodes and Agaricus blazei on Aspergillus nidulans conidia

The antimutagenic effect of the mushrooms Lentinula edodes and Agaricus blazei was studied on conidia of Aspergillus nidulans when exposed to short wave ultraviolet light. Two strains of A. nidulans were used. For the preparation of the extracts, the fresh mushrooms were left in aqueous infusion for 12 hours and heated in a water bath for 15 min at 100ºC, and then the material was filtered. The dehydrated mushrooms were left in aqueous infusion for 12 hours and to filtrated. Both filtrates were used as extracts. A. nidulans conidia were incubated for three hours in water and in mushroom extracts and only after were exposed to UV light (pre-treatment). A. nidulans conidia were suspended in water and in mushroom extracts and immediately submitted to UV light (post-treatment). Conidial suspension in water and in mushroom extracts but without exposure to the mutagenic agent were used as controls. After mutagenic treatment, it was observed an increase in the survival rate of the A. nidulans and a decrease in the percentage of morphologic mutants on conidia treated with mushroom extracts. Our results demonstrated the radioprotective and antimutagenic effect of L. edodes and A. blazei mushrooms on eukaryotic cells when exposed to UV radiation.

O efeito antimutagênico dos cogumelos Lentinula edodes e Agaricus blazei foram estudados sobre conídios de Aspergillus nidulans quando expostos à luz ultravioleta de comprimento de onda curto. Duas linhagens de A. nidulans foram usadas. Para o preparo dos extratos, os cogumelos frescos permaneceram em infusão aquosa por 12 horas e em seguida foram aquecidos em banho-maria por 15 min à 100ºC e a seguir o material foi filtrado. Os cogumelos desidratados foram deixados em infusão aquosa por 12 horas e a seguir filtrados. Ambos os filtrados foram usados como extratos. Os conídios de A. nidulans foram incubados por três horas em água e em extrato de cogumelo e somente após foram expostos a luz ultravioleta (pré-tratamento). Conídios de A. nidulans foram incubados em água e em extrato de cogumelo e imediatamente submetidos à luz ultravioleta (pós-tratamento). Conídios incubados em água e em extrato de cogumelo, mas sem exposição ao agente mutagênico, foram usados como controle. Após tratamento mutagênico, observou-se um aumento na taxa de sobrevivência de A. nidulans e uma diminuição na porcentagem de mutantes morfológicos em conídios tratados com extrato de cogumelos. Nossos resultados demonstram o efeito radioprotetor e antimutagênico dos cogumelos L. edodes e A. blazei sobre células eucarióticas submetidas à radiação UV.