Eugenol and its liposome-based nano carrier reduce anxiety by inhibiting glyoxylase-1 expression in mice / Eugenol e seu nanocarreador à base de lipossoma reduzem a ansiedade ao inibir a expressão de glioxalase 1 em camundongos

The most common form of psycho-social dysfunction is anxiety with depression being related closely without any age bar. They are present with combined state of sadness, confusion, stress, fear etc. Glyoxalase system contains enzyme named glyoxalase 1 (GLO1).It is a metabolic pathway which detoxifies alpha-oxo-aldehydes, particularly methylglyoxal (MG). Methylglyoxal is mainly made by the breakdown of the glycolytic intermediates, glyceraldehyde-3-phosphates and dihydroxyacetone phosphate. Glyoxylase-1 expression is also related with anxiety behavior. A casual role or GLO-1 in anxiety behavior by using viral vectors for over expression in the anterior cingulate cortex was found and it was found that local GLO-1 over expression increased anxiety behavior. The present study deals with the molecular mechanism of protective activity of eugenol against anxiolytic disorder. A pre-clinical animal study was performed on 42 BALB/c mice. Animals were given stress through conventional restrain model. The mRNA expression of GLO-1 was analyzed by real time RT-PCR. Moreover, the GLO-1 protein expression was also examined by immunohistochemistry in whole brain and mean density was calculated. The mRNA and protein expressions were found to be increased in animals given anxiety as compared to the normal control. Whereas, the expressions were decreased in the animals treated with eugenol and its liposome-based nanocarriers in a dose dependent manner. However, the results were better in animals treated with nanocarriers as compared to the compound alone. It is concluded that the eugenol and its liposome-based nanocarriers exert anxiolytic activity by down-regulating GLO-1 protein expression in mice.

A forma mais comum de disfunção psicossocial é a ansiedade intimamente relacionada com a depressão, sem qualquer barreira de idade. Elas estão presentes em um estado combinado de tristeza, confusão, estresse, medo etc. O sistema de glioxalase contém uma enzima chamada glioxalase 1 (GLO1). É uma via metabólica que desintoxica alfa-oxo-aldeídos, particularmente metilglioxal (MG). O metilglioxal é produzido principalmente pela quebra dos intermediários glicolíticos, gliceraldeído-3-fosfatos e fosfato de diidroxiacetona. A expressão da glioxalase 1 também está relacionada ao comportamento de ansiedade. Um papel casual ou GLO1 no comportamento de ansiedade usando vetores virais para superexpressão no córtex cingulado anterior foi encontrado e descobriu-se que a superexpressão local de GLO1 aumentava o comportamento de ansiedade. O presente estudo trata do mecanismo molecular da atividade protetora do eugenol contra o transtorno ansiolítico. Um estudo pré-clínico em animais foi realizado em 42 camundongos BALB / c. Os animais foram submetidos ao estresse por meio do modelo de contenção convencional. A expressão de mRNA de GLO1 foi analisada por RT-PCR em tempo real. Além disso, a expressão da proteína GLO1 também foi examinada por imuno-histoquímica em todo o cérebro e a densidade média foi calculada. Verificou-se que as expressões de mRNA e proteínas estavam aumentadas em animais que receberam ansiedade em comparação com o controle normal. Considerando que as expressões foram diminuídas nos animais tratados com eugenol e seus nanocarreadores baseados em lipossomas de forma dependente da dose. No entanto, os resultados foram melhores em animais tratados com nanocarreadores em comparação com o composto sozinho. Conclui-se que o eugenol e seus nanocarreadores baseados em lipossomas exercem atividade ansiolítica por regulação negativa da expressão da proteína GLO1 em camundongos.

Eugenol and its liposome-based nano carrier reduce anxiety by inhibiting glyoxylase-1 expression in mice

Abstract The most common form of psycho-social dysfunction is anxiety with depression being related closely without any age bar. They are present with combined state of sadness, confusion, stress, fear etc. Glyoxalase system contains enzyme named glyoxalase 1 (GLO1).It is a metabolic pathway which detoxifies alpha-oxo-aldehydes, particularly methylglyoxal (MG). Methylglyoxal is mainly made by the breakdown of the glycolytic intermediates, glyceraldehyde-3-phosphates and dihydroxyacetone phosphate. Glyoxylase-1 expression is also related with anxiety behavior. A casual role or GLO-1 in anxiety behavior by using viral vectors for over expression in the anterior cingulate cortex was found and it was found that local GLO-1 over expression increased anxiety behavior. The present study deals with the molecular mechanism of protective activity of eugenol against anxiolytic disorder. A pre-clinical animal study was performed on 42 BALB/c mice. Animals were given stress through conventional restrain model. The mRNA expression of GLO-1 was analyzed by real time RT-PCR. Moreover, the GLO-1 protein expression was also examined by immunohistochemistry in whole brain and mean density was calculated. The mRNA and protein expressions were found to be increased in animals given anxiety as compared to the normal control. Whereas, the expressions were decreased in the animals treated with eugenol and its liposome-based nanocarriers in a dose dependent manner. However, the results were better in animals treated with nanocarriers as compared to the compound alone. It is concluded that the eugenol and its liposome-based nanocarriers exert anxiolytic activity by down-regulating GLO-1 protein expression in mice.

Resumo A forma mais comum de disfunção psicossocial é a ansiedade intimamente relacionada com a depressão, sem qualquer barreira de idade. Elas estão presentes em um estado combinado de tristeza, confusão, estresse, medo etc. O sistema de glioxalase contém uma enzima chamada glioxalase 1 (GLO1). É uma via metabólica que desintoxica alfa-oxo-aldeídos, particularmente metilglioxal (MG). O metilglioxal é produzido principalmente pela quebra dos intermediários glicolíticos, gliceraldeído-3-fosfatos e fosfato de diidroxiacetona. A expressão da glioxalase 1 também está relacionada ao comportamento de ansiedade. Um papel casual ou GLO1 no comportamento de ansiedade usando vetores virais para superexpressão no córtex cingulado anterior foi encontrado e descobriu-se que a superexpressão local de GLO1 aumentava o comportamento de ansiedade. O presente estudo trata do mecanismo molecular da atividade protetora do eugenol contra o transtorno ansiolítico. Um estudo pré-clínico em animais foi realizado em 42 camundongos BALB / c. Os animais foram submetidos ao estresse por meio do modelo de contenção convencional. A expressão de mRNA de GLO1 foi analisada por RT-PCR em tempo real. Além disso, a expressão da proteína GLO1 também foi examinada por imuno-histoquímica em todo o cérebro e a densidade média foi calculada. Verificou-se que as expressões de mRNA e proteínas estavam aumentadas em animais que receberam ansiedade em comparação com o controle normal. Considerando que as expressões foram diminuídas nos animais tratados com eugenol e seus nanocarreadores baseados em lipossomas de forma dependente da dose. No entanto, os resultados foram melhores em animais tratados com nanocarreadores em comparação com o composto sozinho. Conclui-se que o eugenol e seus nanocarreadores baseados em lipossomas exercem atividade ansiolítica por regulação negativa da expressão da proteína GLO1 em camundongos.

Eugenol and its liposome-based nano carrier reduce anxiety by inhibiting glyoxylase-1 expression in mice / Eugenol e seu nanocarreador à base de lipossoma reduzem a ansiedade ao inibir a expressão de glioxalase 1 em camundongos

Abstract The most common form of psycho-social dysfunction is anxiety with depression being related closely without any age bar. They are present with combined state of sadness, confusion, stress, fear etc. Glyoxalase system contains enzyme named glyoxalase 1 (GLO1).It is a metabolic pathway which detoxifies alpha-oxo-aldehydes, particularly methylglyoxal (MG). Methylglyoxal is mainly made by the breakdown of the glycolytic intermediates, glyceraldehyde-3-phosphates and dihydroxyacetone phosphate. Glyoxylase-1 expression is also related with anxiety behavior. A casual role or GLO-1 in anxiety behavior by using viral vectors for over expression in the anterior cingulate cortex was found and it was found that local GLO-1 over expression increased anxiety behavior. The present study deals with the molecular mechanism of protective activity of eugenol against anxiolytic disorder. A pre-clinical animal study was performed on 42 BALB/c mice. Animals were given stress through conventional restrain model. The mRNA expression of GLO-1 was analyzed by real time RT-PCR. Moreover, the GLO-1 protein expression was also examined by immunohistochemistry in whole brain and mean density was calculated. The mRNA and protein expressions were found to be increased in animals given anxiety as compared to the normal control. Whereas, the expressions were decreased in the animals treated with eugenol and its liposome-based nanocarriers in a dose dependent manner. However, the results were better in animals treated with nanocarriers as compared to the compound alone. It is concluded that the eugenol and its liposome-based nanocarriers exert anxiolytic activity by down-regulating GLO-1 protein expression in mice.

Resumo A forma mais comum de disfunção psicossocial é a ansiedade intimamente relacionada com a depressão, sem qualquer barreira de idade. Elas estão presentes em um estado combinado de tristeza, confusão, estresse, medo etc. O sistema de glioxalase contém uma enzima chamada glioxalase 1 (GLO1). É uma via metabólica que desintoxica alfa-oxo-aldeídos, particularmente metilglioxal (MG). O metilglioxal é produzido principalmente pela quebra dos intermediários glicolíticos, gliceraldeído-3-fosfatos e fosfato de diidroxiacetona. A expressão da glioxalase 1 também está relacionada ao comportamento de ansiedade. Um papel casual ou GLO1 no comportamento de ansiedade usando vetores virais para superexpressão no córtex cingulado anterior foi encontrado e descobriu-se que a superexpressão local de GLO1 aumentava o comportamento de ansiedade. O presente estudo trata do mecanismo molecular da atividade protetora do eugenol contra o transtorno ansiolítico. Um estudo pré-clínico em animais foi realizado em 42 camundongos BALB / c. Os animais foram submetidos ao estresse por meio do modelo de contenção convencional. A expressão de mRNA de GLO1 foi analisada por RT-PCR em tempo real. Além disso, a expressão da proteína GLO1 também foi examinada por imuno-histoquímica em todo o cérebro e a densidade média foi calculada. Verificou-se que as expressões de mRNA e proteínas estavam aumentadas em animais que receberam ansiedade em comparação com o controle normal. Considerando que as expressões foram diminuídas nos animais tratados com eugenol e seus nanocarreadores baseados em lipossomas de forma dependente da dose. No entanto, os resultados foram melhores em animais tratados com nanocarreadores em comparação com o composto sozinho. Conclui-se que o eugenol e seus nanocarreadores baseados em lipossomas exercem atividade ansiolítica por regulação negativa da expressão da proteína GLO1 em camundongos.

Eugenol and its liposome-based nano carrier reduce anxiety by inhibiting glyoxylase-1 expression in mice / Eugenol e seu nanocarreador à base de lipossoma reduzem a ansiedade ao inibir a expressão de glioxalase 1 em camundongos

The most common form of psycho-social dysfunction is anxiety with depression being related closely without any age bar. They are present with combined state of sadness, confusion, stress, fear etc. Glyoxalase system contains enzyme named glyoxalase 1 (GLO1).It is a metabolic pathway which detoxifies alpha-oxo-aldehydes, particularly methylglyoxal (MG). Methylglyoxal is mainly made by the breakdown of the glycolytic intermediates, glyceraldehyde-3-phosphates and dihydroxyacetone phosphate. Glyoxylase-1 expression is also related with anxiety behavior. A casual role or GLO-1 in anxiety behavior by using viral vectors for over expression in the anterior cingulate cortex was found and it was found that local GLO-1 over expression increased anxiety behavior. The present study deals with the molecular mechanism of protective activity of eugenol against anxiolytic disorder. A pre-clinical animal study was performed on 42 BALB/c mice. Animals were given stress through conventional restrain model. The mRNA expression of GLO-1 was analyzed by real time RT-PCR. Moreover, the GLO-1 protein expression was also examined by immunohistochemistry in whole brain and mean density was calculated. The mRNA and protein expressions were found to be increased in animals given anxiety as compared to the normal control. Whereas, the expressions were decreased in the animals treated with eugenol and its liposome-based nanocarriers in a dose dependent manner. However, the results were better in animals treated with nanocarriers as compared to the compound alone. It is concluded that the eugenol and its liposome-based nanocarriers exert anxiolytic activity by down-regulating GLO-1 protein expression in mice.(AU)

A forma mais comum de disfunção psicossocial é a ansiedade intimamente relacionada com a depressão, sem qualquer barreira de idade. Elas estão presentes em um estado combinado de tristeza, confusão, estresse, medo etc. O sistema de glioxalase contém uma enzima chamada glioxalase 1 (GLO1). É uma via metabólica que desintoxica alfa-oxo-aldeídos, particularmente metilglioxal (MG). O metilglioxal é produzido principalmente pela quebra dos intermediários glicolíticos, gliceraldeído-3-fosfatos e fosfato de diidroxiacetona. A expressão da glioxalase 1 também está relacionada ao comportamento de ansiedade. Um papel casual ou GLO1 no comportamento de ansiedade usando vetores virais para superexpressão no córtex cingulado anterior foi encontrado e descobriu-se que a superexpressão local de GLO1 aumentava o comportamento de ansiedade. O presente estudo trata do mecanismo molecular da atividade protetora do eugenol contra o transtorno ansiolítico. Um estudo pré-clínico em animais foi realizado em 42 camundongos BALB / c. Os animais foram submetidos ao estresse por meio do modelo de contenção convencional. A expressão de mRNA de GLO1 foi analisada por RT-PCR em tempo real. Além disso, a expressão da proteína GLO1 também foi examinada por imuno-histoquímica em todo o cérebro e a densidade média foi calculada. Verificou-se que as expressões de mRNA e proteínas estavam aumentadas em animais que receberam ansiedade em comparação com o controle normal. Considerando que as expressões foram diminuídas nos animais tratados com eugenol e seus nanocarreadores baseados em lipossomas de forma dependente da dose. No entanto, os resultados foram melhores em animais tratados com nanocarreadores em comparação com o composto sozinho. Conclui-se que o eugenol e seus nanocarreadores baseados em lipossomas exercem atividade ansiolítica por regulação negativa da expressão da proteína GLO1 em camundongos.(AU)

Smartphone-based rapid and low-cost method for the determination of eugenol content of clove essential oil / Método rápido e de baixo custo empregando smartphone para a determinação de eugenol em óleo essencial de cravo

ABSTRACT: The determination of eugenol in clove essential oil was performed using a smartphone-operated device, which was used for image capture and processing. The colorimetric reaction with the Folin-Ciocalteu reagent was used, and the lighting conditions were evaluated to capture images directly in 2 mL disposable vessels. The free application PhotoMetrix UVC was used for partial least squares regression calibration with suitable values (R² greater than 0.99). The accuracy of the proposed method was compared with traditional methods, such as gas chromatography (GC) and spectrophotometry, and it can be observed that there were no significant differences (Student's t-test (P > 0.05), with agreements from 97% to 101%. The smartphone method allowed the evaluation of several samples in a few minutes, with simple analysis steps and easy interpretation of the results. The miniaturized scale allowed the use of small amounts of reagents with minimal waste generation. Therefore, the proposed method can be easily operated in the field and allows the evaluation of the quality of clove essential oil in places of restricted access without the need for a laboratory structure and specialized analysts.

RESUMO: A determinação de eugenol em óleo essencial de cravo-da-índia foi realizada utilizando um dispositivo operado com smartphone para captura e processamento de imagens. Para tal desenvolvimento foi utilizada a reação colorimétrica com o reagente de Folin-Ciocalteu. Foram avaliadas diferentes condições de iluminação para a captura das imagens diretamente em frascos descartáveis de 2 mL. O aplicativo livre PhotoMetrix UVC foi usado para a calibração por regressão de mínimos quadrados parciais com valores adequados (R2 maior que 0.99). A exatidão do método proposto foi comparada com métodos tradicionais, tais como cromatografia gasosa (CG) e espectrofotometria, sem diferenças significativas (teste t de Student (P > 0,05) e com concordâncias entre 97% e 101%. O método com smartphone permitiu a avaliação de várias amostras em poucos minutos, com etapas de análise simples e com fácil interpretação dos resultados. A escala miniaturizada permitiu o uso de pequenas quantidades de reagentes e mínima geração de resíduos. Portanto, o método proposto pode ser facilmente operado em campo e permite avaliar a qualidade de óleo essencial de cravo- da- índia em locais de acesso restrito, sem a necessidade de estrutura laboratorial e analistas especializados.

Smartphone-based rapid and low-cost method for the determination of eugenol content of clove essential oil / Método rápido e de baixo custo empregando smartphone para a determinação de eugenol em óleo essencial de cravo

The determination of eugenol in clove essential oil was performed using a smartphone-operated device, which was used for image capture and processing. The colorimetric reaction with the Folin-Ciocalteu reagent was used, and the lighting conditions were evaluated to capture images directly in 2 mL disposable vessels. The free application PhotoMetrix UVC was used for partial least squares regression calibration with suitable values (R² greater than 0.99). The accuracy of the proposed method was compared with traditional methods, such as gas chromatography (GC) and spectrophotometry, and it can be observed that there were no significant differences (Student's t-test (P > 0.05), with agreements from 97% to 101%. The smartphone method allowed the evaluation of several samples in a few minutes, with simple analysis steps and easy interpretation of the results. The miniaturized scale allowed the use of small amounts of reagents with minimal waste generation. Therefore, the proposed method can be easily operated in the field and allows the evaluation of the quality of clove essential oil in places of restricted access without the need for a laboratory structure and specialized analysts.

A determinação de eugenol em óleo essencial de cravo-da-índia foi realizada utilizando um dispositivo operado com smartphone para captura e processamento de imagens. Para tal desenvolvimento foi utilizada a reação colorimétrica com o reagente de Folin-Ciocalteu. Foram avaliadas diferentes condições de iluminação para a captura das imagens diretamente em frascos descartáveis de 2 mL. O aplicativo livre PhotoMetrix UVC foi usado para a calibração por regressão de mínimos quadrados parciais com valores adequados (R2 maior que 0.99). A exatidão do método proposto foi comparada com métodos tradicionais, tais como cromatografia gasosa (CG) e espectrofotometria, sem diferenças significativas (teste t de Student (P > 0,05) e com concordâncias entre 97% e 101%. O método com smartphone permitiu a avaliação de várias amostras em poucos minutos, com etapas de análise simples e com fácil interpretação dos resultados. A escala miniaturizada permitiu o uso de pequenas quantidades de reagentes e mínima geração de resíduos. Portanto, o método proposto pode ser facilmente operado em campo e permite avaliar a qualidade de óleo essencial de cravo- da- índia em locais de acesso restrito, sem a necessidade de estrutura laboratorial e analistas especializados.

In vitro and in silico evaluation of the schistosomicidal activity of eugenol derivatives using biochemical, molecular, and morphological tools

Background Eugenol shows both antibacterial and antiparasitic activities, suggesting that it might be evaluated as an option for the treatment of praziquantel-resistant schistosome. Methods The in vitro activities of three eugenol derivatives (FB1, FB4 and FB9) on adult worms from Schistosoma mansoni were examined by fluorescence and scanning electron microscopy to analyze effects on the excretory system and integument damage, respectively. Biochemical tests with verapamil (a calcium channel antagonist) and ouabain (a Na+/K+-ATPase pump inhibitor) were used to characterize eugenol derivative interactions with calcium channels and the Na+/K+-ATPase, while in silico analysis identified potential Na+/K+-ATPase binding sites. Results The compounds showed effective doses (ED50) of 0.324 mM (FB1), 0.167 mM (FB4), and 0.340 mM (FB9). In addition, FB4 (0.322 mM), which showed the lowest ED50, ED90 and ED100 (p < 0.05), caused the most damage to the excretory system and integument, according to both fluorescence and scanning electron microscopy analysis. The death of adult worms was delayed by ouabain treatment plus FB1 (192 versus 72 hours) and FB9 (192 versus 168 hours), but the response to FB4 was the same in the presence or absence of ouabain. Besides, no changes were noted when all of the eugenol derivatives were combined with verapamil. Moreover, FB1 and FB9 inhibited Na+/K+-ATPase activity according to in silico analysis but FB4 did not show a time-dependent relationship and may act on targets other than the parasite Na+/K+-ATPase. Conclusion Eugenol derivatives, mainly FB4 when compared to FB1 and FB9, seem to act more effectively on the integument of adult S. mansoni worms.(AU)

Inhibitory activities of propolis, nisin, melittin and essential oil compounds on Paenibacillus alvei and Bacillus subtilis

Background: Natural products represent important sources of antimicrobial compounds. Propolis and compounds from essential oils comprise good examples of such substances because of their inhibitory effects on bacterial spores, including bee pathogens. Methods: Ethanol extracts of propolis (EEP) from Apis mellifera were prepared using different methods: double ultrasonication, double maceration and maceration associated with ultrasonication. Together with the antimicrobial peptides nisin and melittin, and compounds present in the essential oils of clove (Syzygium aromaticum) and cinnamon (Cinnamomum zeylanicum), assays were carried out on one Bacillus subtilis isolate and Paenibacillus alvei (ATCC 6344) against vegetative and sporulated forms, using the resazurin microtiter assay. Synergism with all the antimicrobials in association with tetracycline was verified by the time-kill curve method. Potassium and phosphate efflux, release of proteins and nucleic acids were investigated. Results: EEPs showed the same MIC, 156.25 µg/mL against B. subtilis and 78.12 µg/mL against P. alvei. The peptides showed better activities against B. subtilis (MIC of 12 µg/ mL for melittin and 37.50 µg/mL for nisin). Antimicrobials showed similar inhibitory effects, but cinnamaldehyde (39.06 µg/mL) showed the best action against P. alvei. Melittin and nisin showed the greatest capacity to reduce spores, regarding B. subtilis there was a 100% reduction at 6.25 and 0.78 µg/mL, respectively. Concerning P. alvei, the reduction was 93 and 98% at concentrations of 80 µg/mL of melittin and 15 µg/ mL of nisin. EEPs showed the highest effects on the protein release against B. subtilis and P. alvei. Nucleic acid release, phosphate and potassium efflux assays indicated bacterial cell membrane damage. Synergism between antimicrobials and tetracycline was demonstrated against both bacteria. Conclusion: All antimicrobials tested showed antibacterial activities against vegetative and sporulated forms of P. alvei and B. subtilis, especially nisin and melittin. Synergism with tetracycline and damage on bacterial cell membrane also occurred.(AU)

Efficiency of anesthetics on female gastropod Littoraria angulifera / Eficiência de anestésicos em fêmeas do gastrópode Littoraria angulifera

The present study evaluated the effect of three anesthetics at three concentrations, menthol (C10H20O) (1%, 1.5%, 2%), eugenol (C10H12O2) (0.5%, 1%, 1.5%) and magnesium chloride (MgCl2) (4%, 7%, 10%) diluted in distilled water, on the gastropod Littoraria angulifera. Twenty females were tested for each concentration with shell height varying between 18.3 and 26.1 mm (n = 180), all collected from the same site in the estuary of Barra do Sargi-Uruçuca, Bahia (Brazil). The time of induction and recovery of the sedative effect, as well as the survival rate, were assessed. The animals were kept at a temperature of 25 ± 1 °C and observations were made every 30 minutes since the beginning of the anesthesia for up to 2 hours. After this period, the animals were observed during the following 15 days for survival evaluation. Only MgCl2 caused a sedative effect on L. angulifera. At 4% and 7% MgCl2 solutions, 20% and 95% of animals were anesthetized after 2 hours, respectively, and at 10% all animals were anesthetized after 1 hour. In conclusion, L. angulifera can be efficiently anesthetized in a 10% MgCl2 solution for 1 h and the recovery occurs after 1 h with no apparent side effects on behavior and survival.

O presente estudo avaliou o efeito de três anestésicos em três concentrações, o mentol (C10H20O) (1%; 1,5%; 2%), o eugenol (C10H12O2) (0,5%; 1%; 1,5%) e o cloreto de magnésio (MgCl2) (4%; 7%; 10%), diluídos em água destilada, sobre fêmeas do gastrópode Littoraria angulifera. Para cada concentração foram utilizadas 20 fêmeas (total = 180), com altura da concha entre 18,3 e 26,1 mm, coletadas no mesmo local, no estuário da Barra do Sargi-Uruçuca, Bahia. Foram observados os tempos de indução e de recuperação do efeito sedativo, assim como a sobrevivência. Os animais foram mantidos a uma temperatura laboratorial de 25 ± 1 °C e as observações foram feitas a cada 30 minutos após a anestesia, durante 2 horas. Após o término do experimento, os animais foram observados por 15 dias quanto à sobrevivência. Apenas o MgCl2 causou efeito sedativo sobre L. angulifera, sendo que a 4% e a 7% observou-se sedação de 20% e de 95% dos animais, respectivamente, após 2 horas de anestesia, enquanto que a 10%, todos os animais foram anestesiados em 1 hora. Em conclusão, L. angulifera pode ser anestesiada de forma eficiente em uma solução de 10% de MgCl2 durante 1 h e a sua recuperação ocorre ao fim de 1 h sem nenhum efeito colateral evidente no comportamento e na sobrevivência.

Efficiency of anesthetics on female gastropod Littoraria angulifera / Eficiência de anestésicos em fêmeas do gastrópode Littoraria angulifera

The present study evaluated the effect of three anesthetics at three concentrations, menthol (C10H20O) (1%, 1.5%, 2%), eugenol (C10H12O2) (0.5%, 1%, 1.5%) and magnesium chloride (MgCl2) (4%, 7%, 10%) diluted in distilled water, on the gastropod Littoraria angulifera. Twenty females were tested for each concentration with shell height varying between 18.3 and 26.1 mm (n = 180), all collected from the same site in the estuary of Barra do Sargi-Uruçuca, Bahia (Brazil). The time of induction and recovery of the sedative effect, as well as the survival rate, were assessed. The animals were kept at a temperature of 25 ± 1 °C and observations were made every 30 minutes since the beginning of the anesthesia for up to 2 hours. After this period, the animals were observed during the following 15 days for survival evaluation. Only MgCl2 caused a sedative effect on L. angulifera. At 4% and 7% MgCl2 solutions, 20% and 95% of animals were anesthetized after 2 hours, respectively, and at 10% all animals were anesthetized after 1 hour. In conclusion, L. angulifera can be efficiently anesthetized in a 10% MgCl2 solution for 1 h and the recovery occurs after 1 h with no apparent side effects on behavior and survival.(AU)

O presente estudo avaliou o efeito de três anestésicos em três concentrações, o mentol (C10H20O) (1%; 1,5%; 2%), o eugenol (C10H12O2) (0,5%; 1%; 1,5%) e o cloreto de magnésio (MgCl2) (4%; 7%; 10%), diluídos em água destilada, sobre fêmeas do gastrópode Littoraria angulifera. Para cada concentração foram utilizadas 20 fêmeas (total = 180), com altura da concha entre 18,3 e 26,1 mm, coletadas no mesmo local, no estuário da Barra do Sargi-Uruçuca, Bahia. Foram observados os tempos de indução e de recuperação do efeito sedativo, assim como a sobrevivência. Os animais foram mantidos a uma temperatura laboratorial de 25 ± 1 °C e as observações foram feitas a cada 30 minutos após a anestesia, durante 2 horas. Após o término do experimento, os animais foram observados por 15 dias quanto à sobrevivência. Apenas o MgCl2 causou efeito sedativo sobre L. angulifera, sendo que a 4% e a 7% observou-se sedação de 20% e de 95% dos animais, respectivamente, após 2 horas de anestesia, enquanto que a 10%, todos os animais foram anestesiados em 1 hora. Em conclusão, L. angulifera pode ser anestesiada de forma eficiente em uma solução de 10% de MgCl2 durante 1 h e a sua recuperação ocorre ao fim de 1 h sem nenhum efeito colateral evidente no comportamento e na sobrevivência.(AU)

The efficacy of clove oil as an anaesthetic and in euthanasia procedure for small-sized tropical fishes

Abstract Clove oil is used as a fish anesthetic because it is a natural and inexpensive product with low toxicity risks. The goal of the present study was to determine the appropriate concentration of clove oil for small-sized tropical fish to be used in mark-recapture studies or when individuals are to be sacrificed. We applied three different clove oil concentrations (D1=0.05 mL, D2=0.10 mL and D3=0.20 mL per 500 mL of water) on three small-sized fish species. We found a negative relationship between induction time and treatment for two species (Hyphessobrycon sp.1 and Hemigrammus sp.), while concentration was unrelated to recovery time. Fish body length was positively related to induction time in the D2 treatment for Hemigrammus sp., and negatively for Hyphessobrycon sp.1 in the D1 treatment, but was unrelated to recovery time for three species and treatments. Mortality rates varied across treatments, but higher rates were observed with higher clove oil concentrations. We conclude that 0.05 mL of clove oil per 500 mL of water is the most efficient dose for studies where fish will be released back to their natural habitats, while 0.20 mL of clove oil is recommended for studies that require fish euthanization for further laboratory analyses.

Resumo O óleo de cravo é recomendado como anestésico para peixes por ser produto de origem natural, baixo custo e apresentar poucos riscos de intoxicação. O objetivo deste trabalho foi determinar concentrações adequadas de óleo de cravo para anestesiar ou eutanasiar peixes de pequeno porte em ambiente natural. Foram testadas três concentrações do anestésico (D1=0,05 mL, D2=0,10 mL e D3=0,20 mL) em três espécies de peixes de pequeno. Houve uma relação negativa entre o tempo para a sedação dos indivíduos e a concentração para duas espécies (Hyphessobrycon sp.1 e Hemigrammus sp.), porém não foi encontrada relação entre o tempo para recuperação e as concentrações. Os exemplares maiores de Hemigrammus sp. levaram mais tempo para serem sedados no tratamento D2, já o contrário foi observado para Hyphessobrycon sp.1 no tratamento D1, enquanto que não houve efeito do comprimento no tempo de recuperação das três espécies. A mortalidade dos indivíduos variou entre as três concentrações do anestésico e as maiores taxas de mortalidade ocorreram nas maiores concentrações. Desse modo, a concentração de 0,05 mL é eficiente para estudos que envolvem manuseio e a soltura dos peixes, enquanto que a concentração de 0,20 mL é recomendada em estudos onde os peixes precisam ser sacrificados.

The efficacy of clove oil as an anaesthetic and in euthanasia procedure for small-sized tropical fishes

Abstract Clove oil is used as a fish anesthetic because it is a natural and inexpensive product with low toxicity risks. The goal of the present study was to determine the appropriate concentration of clove oil for small-sized tropical fish to be used in mark-recapture studies or when individuals are to be sacrificed. We applied three different clove oil concentrations (D1=0.05 mL, D2=0.10 mL and D3=0.20 mL per 500 mL of water) on three small-sized fish species. We found a negative relationship between induction time and treatment for two species (Hyphessobrycon sp.1 and Hemigrammus sp.), while concentration was unrelated to recovery time. Fish body length was positively related to induction time in the D2 treatment for Hemigrammus sp., and negatively for Hyphessobrycon sp.1 in the D1 treatment, but was unrelated to recovery time for three species and treatments. Mortality rates varied across treatments, but higher rates were observed with higher clove oil concentrations. We conclude that 0.05 mL of clove oil per 500 mL of water is the most efficient dose for studies where fish will be released back to their natural habitats, while 0.20 mL of clove oil is recommended for studies that require fish euthanization for further laboratory analyses.

Resumo O óleo de cravo é recomendado como anestésico para peixes por ser produto de origem natural, baixo custo e apresentar poucos riscos de intoxicação. O objetivo deste trabalho foi determinar concentrações adequadas de óleo de cravo para anestesiar ou eutanasiar peixes de pequeno porte em ambiente natural. Foram testadas três concentrações do anestésico (D1=0,05 mL, D2=0,10 mL e D3=0,20 mL) em três espécies de peixes de pequeno. Houve uma relação negativa entre o tempo para a sedação dos indivíduos e a concentração para duas espécies (Hyphessobrycon sp.1 e Hemigrammus sp.), porém não foi encontrada relação entre o tempo para recuperação e as concentrações. Os exemplares maiores de Hemigrammus sp. levaram mais tempo para serem sedados no tratamento D2, já o contrário foi observado para Hyphessobrycon sp.1 no tratamento D1, enquanto que não houve efeito do comprimento no tempo de recuperação das três espécies. A mortalidade dos indivíduos variou entre as três concentrações do anestésico e as maiores taxas de mortalidade ocorreram nas maiores concentrações. Desse modo, a concentração de 0,05 mL é eficiente para estudos que envolvem manuseio e a soltura dos peixes, enquanto que a concentração de 0,20 mL é recomendada em estudos onde os peixes precisam ser sacrificados.

IMPACTO DA ADIÇÃO DE ETANOL NO CULTIVO IN VITRO DE FOLÍCULOS PRÉ-ANTRAIS OVINOS ISOLADOS E AVALIAÇÃO DA EFICIÊNCIA DO EUGENOL DURANTE O CULTIVO IN VITRO DE FOLÍCULOS PRÉ-ANTRAIS CAPRINOS INCLUSOS NO TECIDO OVARIANO

Os objetivos do presente estudo foram: 1) avaliar os efeitos do etanol e do FSH sobre o desenvolvimento folicular, secreção de esteroides, expressão de mRNA (BAX, BCL2, AQP3, CX43, INHBA, HSD3B, KITLG, HSPA1A, CYP19A1 e FSHR), retomada da meiose e perfil metabólico de folículos secundários ovinos isolados cultivados in vitro por 18 dias (Fase 1); 2) investigar o efeito da adição de eugenol (10, 20 e 40 M), ácido ascórbico (50 g/mL) e anetol (300 g/mL) sobre a sobrevivência, ativação, diâmetro folicular e oocitário, produção de espécies reativas de oxigênio, capacidade antioxidante do meio após o cultivo in vitro por 7 dias de folículos pré-antrais caprinos inclusos no tecido ovariano (in situ) (Fase 2 - etapa 1); comparar a imunomarcação de calreticulina, trimetilação da histona (H3K4me3) e expressão de mRNA (CAT, KDM1AX1, KDM3A e ERP29) entre os tratamentos controle, Eugenol na concentração 40 M (melhor concentração de eugenol obtida na etapa anterior), ácido ascórbico e anetol (Fase 2 - etapa 2). Para o cultivo na forma isolada, os folículos ovarianos foram cultivados por 18 dias nos seguintes tratamentos: -MEM+ (controle cultivado), -MEM+ suplementado com 100 ng/mL de rbFSH (FSH recombinante bovino) ou 0.2%-v/v de Etanol (AL). Para o cultivo in situ, fragmentos ovarianos foram fixados imediatamente (tratamento controle não cultivado) ou distribuídos aleatoriamente e cultivados por 1 ou 7 dias nos seguintes tratamentos: -MEM+ (controle cultivado), -MEM+ suplementado com 50 g/mL de ácido ascórbico (AA), ou com 300 g/mL de anetol (ANE 300), ou diferentes concentrações de eugenol a 10 (EUG 10), 20 (EUG 20) ou 40 M (EUG 40). Os resultados da fase 1 demonstraram que o tratamento AL obteve uma maior produção de estradiol (P <0,05), maior percentagem de retomada da meiose (P = 0,057) e maiores níveis de RNAm para CYP19A1 e FSHR em relação ao controle. No tocante ao perfil metabólico, os níveis de alguns íons, que são provavelmente, aminoácidos, lipídios, um análogo do GMPc e um derivado do metabolismo do fosfoinositol, foram maiores (P<0,05) nos tratamentos AL e FSH do que no controle. Os resultados da fase 2-etapa 1 (cultivo in situ) demonstraram que, em geral, o EUG 40 melhorou a sobrevivência, ativação e crescimento folicular e oocitário em relação aos demais tratamentos testados (P<0,05). Já na fase 2-etapa 2, esse tratamento resultou em maiores taxas de viabilidade, reduziu a produção de ROS, aumentou a capacidade antioxidante do meio, reduziu a trimetilação da histona 3, aumentou a produção de calreticulina, a expressão de RNAm das KDMs e de ERP29 em relação ao meio controle. Em conclusão, o etanol aumentou a produção de estradiol e a retomada da meiose, bem como apresentou um perfil metabólico diferente do grupo controle após cultivo in vitro folículos pré-antrais ovinos isolados (fase 1). Além disso, a adição de eugenol na concentração de 40 M melhorou de forma eficiente a sobrevivência e o desenvolvimento de folículos pré-antrais caprinos cultivados in vitro e reduziu a produção de EROs (fase 2).

The objectives of the present study were: 1) to evaluate the effects of ethanol and FSH on follicular development, steroid secretion, mRNA expression (BAX, BCL2, AQP3, CX43, INHBA, HSD3B, KITLG, HSPA1A, CYP19A1, and FSHR), resumption of meiosis, and metabolic profile of isolated ovine secondary follicles in vitro cultured for 18 days (Phase 1); 2) to investigate the effect of addition eugenol (10, 20 and 40 M), ascorbic acid (50 g/mL) and anethole (300 g/mL) on survival, activation, follicular and oocyte diameter, production of reactive species of oxygen, the antioxidant capacity of the medium after in vitro culture for 7 days of goat preantral follicles enclosed in the ovarian tissue (in situ) (Phase 2 - step 1); to compare calreticulin, histone methylation (H3K4me3) immunostaining and mRNA expression for CAT, KDM1AX1, KDM3A, and ERP29 among control, 40 M Eugenol (best eugenol concentration obtained in the phase 2- step 1), ascorbic acid and anethole treatments (Phase 2 - step 2). With regard to the in vitro follicle culture in the isolated form (phase 1, ovarian follicles were cultured for 18 days in the following treatments: -MEM+ (cultured control), -MEM+ supplemented with 100 ng/mL of rbFSH (recombinant bovine FSH) or 0.2%-v/v of Ethanol (AL). In the phase 2, ovarian fragments were either fixed immediately (non-cultured control treatment) or randomly distributed and cultured for 1 or 7 days in the following treatments: -MEM+ (cultured control), -MEM+ supplemented with 50 g/mL acid ascorbic (AA), or with 300 g/mL of anethole (ANE 300), or different concentrations of eugenol at 10 (EUG 10), 20 (EUG 20) or 40 M (EUG 40). The results of phase 1 demonstrated that the AL treatment had higher estradiol production (P < 0.05), higher percentage of meiosis resumption (P = 0.057), and mRNA levels for CYP19A1 and FSHR compared to the control. Regarding the metabolic profile, the levels of some ions, which are probably amino acids, lipids, a cGMP analog, and a derivative of phosphoinositol metabolism, were higher (P<0.05) in AL and FSH treatments than in the control. The results of phase 2-step 1 (in situ culture) showed that, in general, EUG 40 improved the survival, activation, and follicular and oocyte growth compared to the other tested treatments (P<0.05). In the phase 2-step 2, EUG 40 treatment resulted in higher viability rate, reduced ROS production, increased the antioxidant capacity of the medium, reduced histone 3 methylation expression, increased calreticulin expression, the mRNA levels for KDM1AX1, KDM3A, and ERP29 when compared to control. In conclusion, ethanol increased estradiol production and meiosis resumption, as well as presented a different metabolic profile than the control group after in vitro culture of isolated ovine preantral follicles (phase 1). Furthermore,the addition of eugenol at 40 M improved significantly the survival and development of in vitro cultured goat preantral follicles and reduced the production of ROS (phase 2).

Clove oil as anesthetic for guppy / Óleo de cravo como anestésico para guppy

The present study evaluated different concentrations of clove oil for anesthesia of guppy (Poecilia reticulata). Adult female, male and juveniles fish were used to assess the influence of the anesthesia. The animals were individually submitted to the following clove oil concentrations: 50, 75, 100, 125 and 150 mg L-1. The induction, recovery stages and mortality 96 hours after the experiment were evaluated. All fish exposed to experimental concentrations reached the final stage of anesthesia. Adult female and male and juveniles guppies respond differently to anesthesia induction by clove oil. Thus, it is recommended the use of clove oil on concentrations of 125 mg L-1 for adult males and from 75 mg L-1 to 150 mg L-1 for adult females and juveniles animals.(AU)

O presente estudo avaliou diferentes concentrações de óleo de cravo para anestesia de guppy (Poecilia reticulata). Foram utilizados fêmeas adultas, machos adultos e juvenis para avaliar a influência da anestesia. Os animais foram submetidos, individualmente, às seguintes concentrações de óleo de cravo: 50, 75, 100, 125 e 150 mg L-1. Foram avaliados os estágios de indução, recuperação e a mortalidade até 96h após o experimento. Todos os peixes expostos às concentrações experimentais atingiram o estágio final de anestesia. Verificou-se que fêmeas adultas, machos adultos e juvenis de guppy respondem de formas diferentes à indução anestésica pelo óleo de cravo. Dessa forma, recomenda-se a utilização do óleo de cravo nas concentrações de 125 mg L-1 para machos e de 75 a 150 mg L-1 para fêmeas e juvenis.(AU)

Clove oil as anesthetic for guppy / Óleo de cravo como anestésico para guppy

The present study evaluated different concentrations of clove oil for anesthesia of guppy (Poecilia reticulata). Adult female, male and juveniles fish were used to assess the influence of the anesthesia. The animals were individually submitted to the following clove oil concentrations: 50, 75, 100, 125 and 150 mg L-1. The induction, recovery stages and mortality 96 hours after the experiment were evaluated. All fish exposed to experimental concentrations reached the final stage of anesthesia. Adult female and male and juveniles guppies respond differently to anesthesia induction by clove oil. Thus, it is recommended the use of clove oil on concentrations of 125 mg L-1 for adult males and from 75 mg L-1 to 150 mg L-1 for adult females and juveniles animals.

O presente estudo avaliou diferentes concentrações de óleo de cravo para anestesia de guppy (Poecilia reticulata). Foram utilizados fêmeas adultas, machos adultos e juvenis para avaliar a influência da anestesia. Os animais foram submetidos, individualmente, às seguintes concentrações de óleo de cravo: 50, 75, 100, 125 e 150 mg L-1. Foram avaliados os estágios de indução, recuperação e a mortalidade até 96h após o experimento. Todos os peixes expostos às concentrações experimentais atingiram o estágio final de anestesia. Verificou-se que fêmeas adultas, machos adultos e juvenis de guppy respondem de formas diferentes à indução anestésica pelo óleo de cravo. Dessa forma, recomenda-se a utilização do óleo de cravo nas concentrações de 125 mg L-1 para machos e de 75 a 150 mg L-1 para fêmeas e juvenis.

Clove oil and menthol as anesthetic for platy / Óleo de cravo e mentol como anestésicos para o platy

Studies with anesthetics in ornamental fish is still poor; so the aim of this study was to evaluate the induction and recovery times of platys (Xiphophorus maculatus) exposed to anesthetics clove oil and menthol. For the experiment, we used two groups of 40 juveniles fish, which were subjected to concentrations of 50, 100, 150 and 200 mg L-1 of the clove oil and 50, 100, 150, 200 and 250 mg L-1 of the menthol. In all concentrations evaluated of both anesthetics, animals reached deep anesthesia stage, without mortality observations after 96 h of the experiment. The concentrations 100 to 200 mg L-1 of clove oil and 100 to 250 mg L-1 of menthol provided a period of anesthetic induction and recovery considered within the ideal range. Thus, it is concluded that these anesthetic drugs, used in optimal concentrations, are effective for platys anesthesia.(AU)

Estudos com anestésicos em peixes ornamentais ainda são incipientes; dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar os tempos de indução e recuperação de platys (Xiphophorus maculatus) expostos aos anestésicos óleo de cravo e mentol. Para a realização do experimento, foram utilizados dois grupos de 40 juvenis, os quais foram submetidos às concentrações de 50, 100, 150 e 200 mg L-1 de óleo de cravo e 50, 100, 150, 200 e 250 mg L-1 de mentol. Em todas as concentrações avaliadas de ambos os anestésicos os animais atingiram o estágio de anestesia profunda, sem observação de mortalidade após 96 h do experimento. As concentrações de 100 a 200 mg L-1 de óleo de cravo e 100 a 250 mg L-1 de mentol foram as que proporcionaram um período de indução e recuperação anestésica dentro da faixa considerada ideal. Dessa forma, conclui-se que os anestésicos, utilizados nas concentrações ideais, são eficazes para anestesia de platys.(AU)

Efeito do eugenol como agente mitigador do estresse no transporte de juvenis de tilápia do Nilo / Eugenol effect as a mitigate agent of stress in transport of Nile tilapia juveniles

O Brasil se destaca no cenário americano como um dos países com maior potencial para a piscicultura, principalmente a dulcícola. A tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) se destaca sendo a espécie mais cultivada em nosso país. Metodologias para diminuir a interferência de agentes estressores nas funções vitais e fisiológicas dos peixes são importantes durante o manejo. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito do eugenol nas respostas metabólicas e iônicas de juvenis de tilápia do Nilo, submetidos ao transporte em sacos plásticos, em diferentes densidades, a fim de verificar a eficiência do produto como agente mitigador do estresse. O eugenol foi utilizado na concentração de 15mg/L em água. As densidades avaliadas foram 4, 7 e 10 peixes L-1, equivalente a 140, 245 e 350g L-1. Após quatro horas de transporte foram avaliados os parâmetros metabólicos (glicose e lactato) e iônicos (cloreto, magnésio e cálcio), bem como a qualidade da água nos sacos plásticos. Em relação aos dois parâmetros metabólicos, o uso do eugenol com o intuito de diminuir as respostas do estresse não foi satisfatório. Houve elevação no nível de glicose nas densidades 140 e 350g L-1 imediatamente ao término do transporte, e o teor de lactato dos peixes na densidade 245g L-1 aumentou 24 horas depois, indicando que os animais não conseguiram manter a homeostase inicial. Dentre as concentrações de íons avaliados, o magnésio foi o que sofreu maior variação. Podemos concluir que a adição de 15mg L-1 de eugenol na água durante o transporte de juvenis de tilápia do Nilo nas densidades de 140, 245 e 350g L-1 não foi capaz de minimizar as respostas ao estresse.(AU)

Brazil stands out in the American scene as one of the countries with the greatest potential for fish farming mainly in fresh water. Nile tilapia (Oreochromis niloticus) stands out being the most cultivated fish species in our country. Methodologies to reduce the interference of stressors agents in vital and physiological functions of fishes are important during handling. This study aimed to evaluate the effect of eugenol in the metabolic and ionic responses of juvenile Nile tilapia, submitted to transport in plastic bags, at different densities in order to verify the efficiency of the product as an mitigate agent of stress. Eugenol was used at a concentration of 15mg L-1 in water. The evaluated densities were 4, 7 and 10 fish L-1, which were equivalent to 140, 245 and 350g L-1. After four hours of transport the metabolic (glucose and lactate) and ions parameters (chloride, magnesium and calcium) were evaluated, as well as the water quality in the plastic bags. For the two metabolic parameters, the use of the eugenol in order to reduce the stress response was not satisfactory. There was an increase in blood glucose level at the densities of 140 and 350g L-1 immediately after termination of the transport, and the level of fish lactate content at the density of 245g L-1 had increased after 24 hours indicating that the animals could not maintain the initial homeostasis. Among the concentrations of the evaluated ions magnesium suffered the greater variation. We can conclude that the addition of 15 mg L-1 of eugenol in the water during the transport of juvenile Nile tilapia at densities of 140, 245 and 350g L-1 was not able to minimize stress responses.(AU)

EFEITOS TÓXICOS DE PLANTAS MEDICINAIS E SUA APLICABILIDADE EM PEIXES DE INTERESSE COMERCIAL

O uso de produtos naturais com propriedades sedativas e anestésicas são importantes alternativas para minimizar o estresse decorrente das práticas envolvidas na aquicultura, uma vez que apresentam maior eficácia, segurança e menor risco de efeitos adversos, que produtos de origem sintética. Estudos comprovaram que os óleos essenciais extraídos da espécie vegetal Ocimum basilicum, bem como o eugenol, apresentam propriedades sedativas e anestésicas em peixes, sendo considerados, portanto, alternativas promissoras aos anestésicos tradicionais. Nesse contexto, a primeira parte deste estudo objetivou investigar os efeitos hematológicos, bioquímicos, metabólicos e deposição residual de O. basilicum e composto eugenol nas duas principais espécies de importância comercial para a aquicultura brasileira, tilápia-do-Nilo Oreochromis niloticus e tambaqui Colossoma macrompomum. Também foi avaliado o efeito do extrato aquoso de Serjania erecta, quando adicionado na água de cultivo de juvenis de pacu Piaractus mesopotamicus. O artigo 1 determinou a eficácia sedativa e modulação da frequência ventilatória do óleo essencial de O. basilicum e eugenol, em tilápia-do-Nilo O. niloticus. Alterações comportamentais e batimento opercular foram avaliados em uma exposição de 90 min em concentrações baixas para o possível uso dessas substâncias no transporte dessa espécie. Tanto o óleo essencial de O. basilicum como o eugenol são recomendados para sedação e transporte dessa espécie na concentração de 20 L L-1 devido à diminuição da excreção de amônia e à manutenção do equilíbrio. No artigo 2 foram determinados os efeitos hematológicos, bioquímicos e o nível de deposição residual do óleo essencial de O. basilicum e eugenol em filé de tilápia-do-Nilo submetidas ao transporte por 2 h. O nível residual dos constituintes metil chavicol e eugenol no filé de tilápia-do-Nilo foi de 20,52 ± 2,05 g kg-1 e 75,04 ± 3,76 g kg-1 , respectivamente. Ambos os anestésicos naturais apresentam capacidade sedativa e não causam danos, mas promoveram alterações típicas de ajustes fisiológicos durante estresse de transporte. No artigo 3 foi verificada a eficácia sedativa e anestésica do óleo essencial de O. basilicum em tambaqui C. macropomum, bem como o tempo de recuperação dos animais. Avaliou-se também, seus efeitos após manejo de biometria sobre os parâmetros sanguíneos, osmorregulatórios, metabolismo e resposta imune inespecífica. O óleo essencial de O. basilicum foi eficaz e seguro para juvenis de tambaqui, atuando como agente redutor e/ou atenuante as respostas secundárias ao estresse de manejo, sem apresentar efeitos deletérios sobre parâmetros do sistema imune inespecífico, metabolismo de energia, carboidratos e lipídeos. No artigo 4 foi avaliado os efeitos morfofisiológicos da adição do extrato aquoso de S.erecta na água de cultivo de pacu P. mesopotamicus. Foi observado toxicidade sendo que a CL50-4 h foi estimada em 57,43 µg ml-1 . Maior (p<0.05) concentração de glicose e menor (p<0.05) nível de sódio plasmático foi observado quando os peixes foram expostos a concentração de 50 µg mL-1 de S. erecta. Além disso, a exposição a este extrato causou severas alterações histológicas em brânquias e fígado de pacu P. mesopotamicus.

The use of natural products with sedative and anesthetic properties are important alternatives to minimize the stress resulting from the practices involved in aquaculture, since they present greater efficiency, safety and less risk of adverse effects, than products of synthetic origin. Studies have shown that essential oils extracted from the vegetable species Ocimum basilicum, as well as eugenol, have sedative and anesthetic properties in fish, and are therefore considered promising alternatives to traditional anesthetics. In this context, the first part of this study aimed to investigate the hematological, biochemical, metabolic effects and residual deposition of O. basilicum and eugenol compound in the two main species of commercial importance for Brazilian aquaculture, Nile tilapia Oreochromis niloticus and also tambaqui Colossoma macrompomum. The effect of the aqueous extract of Serjania erecta was also evaluated, when added to the water of cultivation of juveniles of pacu Piaractus mesopotamicus. Article 1 determined the sedative efficacy and modulation of the ventilatory frequency of the essential oil of O. basilicum and eugenol, in Nile tilapia O. niloticus. Behavioral changes and opercular beat were evaluated at a 90 min exposure in low concentrations for the possible use of these substances in the transport of this species. Both the essential oil of O. basilicum and eugenol are recommended for sedation and transport of this species at a concentration of 20 L L-1 due to the decrease in ammonia excretion and the maintenance of balance. In article 2, the hematological and biochemical effects and the level of residual deposition of the essential oil of O. basilicum and eugenol in Nile tilapia fillet were subjected to transport for 2 h. The residual level of the methyl chavicol and eugenol constituents in the Nile tilapia fillet was 20.52 ± 2.05 g kg-1 and 75.04 ± 3.76 g kg-1 , respectively. Both natural anesthetics have a sedative capacity and do not cause damage, but promoted changes typical of physiological adjustments during transport stress. In article 3, the sedative and anesthetic efficacy of the essential oil of O. basilicum in tambaqui C. macropomum was verified, as well as the recovery time of the animals. It was also evaluated, its effects after handling biometrics on blood, osmoregulatory parameters, metabolism and non-specific immune response. The essential oil of O. basilicum was effective and safe for juvenile tambaqui, acting as a reducing agent and / or attenuating secondary responses to management stress, without presenting deleterious effects on parameters of the non-specific immune system, energy metabolism, carbohydrates and lipids. In article 4, the morphophysiological effects of the addition of the aqueous extract of S. erecta in the water of pacu P. mesopotamicus cultivation were evaluated. Toxicity was observed and the CL50-4 h was estimated at 57.43 µg ml-1 . Higher (p <0.05) glucose concentration and lower (p <0.05) plasma sodium level was observed when fish were exposed to a concentration of 50 µg mL-1 of S. erecta. In addition, exposure to this extract caused severe histological changes in gills and liver of pacu P. mesopotamicus.

QUALIDADE DE OVOS DE POEDEIRAS COMERCIAIS ALIMENTADAS COM ÓLEOS ESSECIAIS COMO ADITIVO ALTERNATIVO

Os antimicrobianos, de uma forma geral, têm sido utilizados como aditivos na alimentação de aves tanto para manter a saúde, uso terapêutico e profilático, quanto para aumentar seu desempenho, como promotores de crescimento. Diante disso, objetivou-se avaliar a qualidade dos ovos de poedeiras comerciais alimentadas com dietas contendo óleos essenciais e aditivo promotor de crescimento. Foram avaliados ovos de aves alojadas em granja situada na região de Bela Vista de Goiás, da linhagem Lohmann Brown com 60 semanas de idade ao início das coletas. O delineamento utilizado foi inteiramente casualisado em esquema fatorial 3 x 6 (tipos de arraçoamento x semanas de coletas), com 15 repetições de um ovo, totalizando 270 unidades experimentais. Os tipos de rações foram o premix acrescido de óleos essenciais de cravo da índia e tomilho; premix contendo o promotor de crescimento Halquinol e premix mineral e vitamínico sem nenhum tipo de aditivo (ração controle). As variáveis analisadas foram: altura do albúmen, peso do ovo, Unidade Haugh, coloração da gema e peso da casca. A utilização de óleo essenciais de tomilho e cravo-da-índia na dieta de poedeiras mostrou-se eficaz na qualidade de ovos, para as variáveis peso de ovo, unidade Haugh e coloração da gema nas condições avaliadas.

Antimicrobials, in general, have been used as additives in poultry feed both to maintain health, therapeutic and prophylactic use, and to increase their performance,used as growth promoters. Therefore, the objective was to evaluate the quality of poultry eggs fed diets containing essential oils and growth-promoting additives. Birds' eggs housed in a farm located in the Bela Vista de Goiás region, of the Lohmann Brown lineage at 60 weeks of age, were evaluated. The design used was entirely random in a 3 x 6 factorial scheme (types of feeding x collection weeks), with 15 repetitions of an egg, totaling 270 experimental units. The types of feed were the premix plus essential oils of cloves and thyme; premix containing the growth promoter called Halquinol and standard mineral and vitamin premix (control). The variables analyzed were: albumen height, egg weight, Haugh Unit, yolk color and shell weight. The use of essential oil of thyme and clove in the laying diet proved to be effective in egg quality, for the variables egg weight, Haugh unit and yolk color under the evaluated conditions.

Clove oil and menthol as anesthetic for platy / Óleo de cravo e mentol como anestésicos para o platy

Studies with anesthetics in ornamental fish is still poor; so the aim of this study was to evaluate the induction and recovery times of platys (Xiphophorus maculatus) exposed to anesthetics clove oil and menthol. For the experiment, we used two groups of 40 juveniles fish, which were subjected to concentrations of 50, 100, 150 and 200 mg L-1 of the clove oil and 50, 100, 150, 200 and 250 mg L-1 of the menthol. In all concentrations evaluated of both anesthetics, animals reached deep anesthesia stage, without mortality observations after 96 h of the experiment. The concentrations 100 to 200 mg L-1 of clove oil and 100 to 250 mg L-1 of menthol provided a period of anesthetic induction and recovery considered within the ideal range. Thus, it is concluded that these anesthetic drugs, used in optimal concentrations, are effective for platys anesthesia.

Estudos com anestésicos em peixes ornamentais ainda são incipientes; dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar os tempos de indução e recuperação de platys (Xiphophorus maculatus) expostos aos anestésicos óleo de cravo e mentol. Para a realização do experimento, foram utilizados dois grupos de 40 juvenis, os quais foram submetidos às concentrações de 50, 100, 150 e 200 mg L-1 de óleo de cravo e 50, 100, 150, 200 e 250 mg L-1 de mentol. Em todas as concentrações avaliadas de ambos os anestésicos os animais atingiram o estágio de anestesia profunda, sem observação de mortalidade após 96 h do experimento. As concentrações de 100 a 200 mg L-1 de óleo de cravo e 100 a 250 mg L-1 de mentol foram as que proporcionaram um período de indução e recuperação anestésica dentro da faixa considerada ideal. Dessa forma, conclui-se que os anestésicos, utilizados nas concentrações ideais, são eficazes para anestesia de platys.