Reabilitação de filhote órfão de andorinha-pequena-de-casa no Bosque e Zoológico Fábio Barreto em Ribeirão Preto / Rehabilitation of an orphan offspring of small home swallow conducted at the woods and zoo Fábio Barreto in Ribeirão Preto

O fenômeno do crescimento urbano afeta diretamente a fauna que vive ao redor das cidades devido à invasão das construções no habitat natural dos animais, obrigando-os a se adaptarem ao meio urbano. A interação entre seres humanos e animais dentro das cidades contribui para que animais traumatizados ou filhotes órfãos cheguem aos Centros de Triagem de Animais Silvestres (CETAS). O objetivo deste trabalho é relatar o caso de um exemplar de Andorinha-pequena-de-casa (Pygochelidon cyanoleuca). Trata-se de um filhote órfão, que foi entregue por munícipes no Bosque e Zoológico Fábio Barreto, em Ribeirão Preto. Essa espécie de andorinha se alimenta de insetos capturados durante o voo, porém, o filhote recusou todos os insetos oferecidos, obrigando a equipe do zoológico a optar por uma dieta alternativa, a qual obteve sucesso, suprindo as necessidades nutricionais em casos de emergência, quando comparada com a dieta à base de insetos, como demonstra o trabalho. O filhote foi submetido a enxerto de penas para acelerar sua reabilitação, porém, esse procedimento é difícil de ser realizado em andorinhas devido ao pequeno tamanho do animal, o que ainda não havia sido relatado na literatura. A dieta alternativa e o enxerto de penas relatados neste trabalho podem contribuir para que outros profissionais realizem os mesmos procedimentos.

The urban growth phenomenon directly affects the fauna living around towns and cities, which is caused by the invasion of constructions in animals' natural habitats, forcing them to adapt to the urban environment. The interaction between human beings and the fauna located in towns and cities contributes for the arrival of traumatized adult animals or their offspring at Wildlife Screening Centers (CETAS – Centros de Triagem de Animais Silvestres). The aim of this paper is to report the events which happened to a bird specimen, specifically the small home swallow (Pygochelidon cyanoleuca). It was an orphan offspring, which was delivered by citizens to the Woods Zoo Fábio Barreto, in Ribeirão Preto/SP. This species of swallow eats insects captured during flight. However, the bird refused to feed from the insects offered, forcing the zoo's team of caregivers to create an alternative diet, which was successful, by providing all nutritional needs in emergency cases such as this, when compared to an insect-based diet, as demonstrated in this paper. The offspring was submitted to feather grafts in order to speed up its rehabilitation, despite the fact that this procedure is difficult in swallows, due to the bird's small size, this event has not been reported so far in the literature. The alternative diet and the feather grafts reported in this paper may contribute to help other professionals to develop these procedures.

Diminuição do índice de necrose em enxertos cutâneos em coelhos mediante a aplicação de células tronco mesenquimais xenógenas / Reducing of the necrosis index in skin grafts in rabbits through application of xenogenous mesenchymal stem cells

O presente estudo teve como objetivo avaliar a inflamação em auto-enxertos cutâneos obtidos no terceiro, sétimo e décimo quarto dia de pós-operatório, além disso, buscou-se determinar diferenças no processo de cicatrização no grupo tratado com células tronco mesenquimais xenógenas em relação ao grupo controle utilizando a avaliação microscópica e imuno-histoquímico. A avaliação microscópica foi realizada utilizando cortes histológicos corados pela técnica de histoquímica com hematoxilina-eosina (HE), e a imuno-histoquímica, com cortes submetidos a anticorpos específicos. As variáveis analisadas foram quantidade de vasos, células inflamatórias, COX-2, Macrófagos e presença de necrose. Os dados foram analisados estatisticamente pelo software R. A quantidade de vasos foi maior (p<0,0001) no grupo tratamento (GT) durante o dia 3, enquanto no grupo controle (GC) foi maior no dia 7. No dia 3 houve menor porcentagem de necrose no grupo tratamento (GT) (p = 0,038). Nos demais dias avaliados não houve diferença entre a porcentagem de necrose observada nos dois tratamentos (p = 0,98), sendo de 53% para o grupo controle (GC) e 47% para o grupo tratamento (GT). Em relação ao número de macrófagos não houve diferença entre os grupos (p = 0,5637). Entretanto, entre os dias houve diferença significativa (p = 0,0223), sendo menor número de macrófagos no terceiro dia. A imunomarcação de COX-2 foi similar entre os grupos (p = 0,5637) e entre os dias (p = 0,9843). Portanto, o emprego das células tronco mesenquimais xenógenas em enxertos cutâneos promoveu menor ocorrência de necrose, favorecendo sua cicatrização, e não induziu o processo inflamatório, sendo assim factível seu uso em cirurgias reconstrutivas.

The present study aimed to assess inflammation in skin autografts obtained on the third, seventh and fourteenth postoperative day, in addition, it sought to determine differences in the healing process in the group treated with xenogenous mesenchymal stem cells in relation to to the control group using microscopic and immunohistochemical evaluation. Microscopic evaluation was performed using histological sections, stained by the hematoxylin-eosin (HE) histochemistry technique, and immunohistochemistry with sections were subjected to specific antibodies. The variables analyzed were the number of vessels, inflammatory cells (COX-2 and Macrophages) and the presence of necrosis. The data were analyzed statistically by software R. The number of vessels was higher (p< 0.0001) ) in the treatment group (GT) during day 3, while in the control group (CG) it was higher on day 7. On day 3 there was a lower percentage of necrosis in the treatment group (GT) (p = 0.038). On the other evaluated days, there was no difference between the percentage of necrosis observed in the two treatments (p = 0.98), being 53% for the control group (CG) and 47% for the treatment group (GT). Regarding the number of macrophages, there was no difference between groups (p = 0.5637). However, between days there was a significant difference (p = 0.0223), with a lower number of macrophages on the third day. The immunostaining of COX-2 was similar between groups (p = 0.5637) and between days (p = 0.9843). Therefore, the use of xenogenous mesenchymal stem cells in skin grafts promoted a lower occurrence of necrosis, favoring its healing, and did not induce the inflammatory process, thus making its use in reconstructive surgery feasible.

Reabilitação de filhote órfão de andorinha-pequena-de-casa no Bosque e Zoológico Fábio Barreto em Ribeirão Preto / Rehabilitation of an orphan offspring of small home swallow conducted at the woods and zoo Fábio Barreto in Ribeirão Preto

O fenômeno do crescimento urbano afeta diretamente a fauna que vive ao redor das cidades devido à invasão das construções no habitat natural dos animais, obrigando-os a se adaptarem ao meio urbano. A interação entre seres humanos e animais dentro das cidades contribui para que animais traumatizados ou filhotes órfãos cheguem aos Centros de Triagem de Animais Silvestres (CETAS). O objetivo deste trabalho é relatar o caso de um exemplar de Andorinha-pequena-de-casa (Pygochelidon cyanoleuca). Trata-se de um filhote órfão, que foi entregue por munícipes no Bosque e Zoológico Fábio Barreto, em Ribeirão Preto. Essa espécie de andorinha se alimenta de insetos capturados durante o voo, porém, o filhote recusou todos os insetos oferecidos, obrigando a equipe do zoológico a optar por uma dieta alternativa, a qual obteve sucesso, suprindo as necessidades nutricionais em casos de emergência, quando comparada com a dieta à base de insetos, como demonstra o trabalho. O filhote foi submetido a enxerto de penas para acelerar sua reabilitação, porém, esse procedimento é difícil de ser realizado em andorinhas devido ao pequeno tamanho do animal, o que ainda não havia sido relatado na literatura. A dieta alternativa e o enxerto de penas relatados neste trabalho podem contribuir para que outros profissionais realizem os mesmos procedimentos.(AU)

The urban growth phenomenon directly affects the fauna living around towns and cities, which is caused by the invasion of constructions in animals' natural habitats, forcing them to adapt to the urban environment. The interaction between human beings and the fauna located in towns and cities contributes for the arrival of traumatized adult animals or their offspring at Wildlife Screening Centers (CETAS Centros de Triagem de Animais Silvestres). The aim of this paper is to report the events which happened to a bird specimen, specifically the small home swallow (Pygochelidon cyanoleuca). It was an orphan offspring, which was delivered by citizens to the Woods Zoo Fábio Barreto, in Ribeirão Preto/SP. This species of swallow eats insects captured during flight. However, the bird refused to feed from the insects offered, forcing the zoo's team of caregivers to create an alternative diet, which was successful, by providing all nutritional needs in emergency cases such as this, when compared to an insect-based diet, as demonstrated in this paper. The offspring was submitted to feather grafts in order to speed up its rehabilitation, despite the fact that this procedure is difficult in swallows, due to the bird's small size, this event has not been reported so far in the literature. The alternative diet and the feather grafts reported in this paper may contribute to help other professionals to develop these procedures.(AU)

Diminuição do índice de necrose em enxertos cutâneos em coelhos mediante a aplicação de células tronco mesenquimais xenógenas / Reducing of the necrosis index in skin grafts in rabbits through application of xenogenous mesenchymal stem cells

O presente estudo teve como objetivo avaliar a inflamação em auto-enxertos cutâneos obtidos no terceiro, sétimo e décimo quarto dia de pós-operatório, além disso, buscou-se determinar diferenças no processo de cicatrização no grupo tratado com células tronco mesenquimais xenógenas em relação ao grupo controle utilizando a avaliação microscópica e imuno-histoquímico. A avaliação microscópica foi realizada utilizando cortes histológicos corados pela técnica de histoquímica com hematoxilina-eosina (HE), e a imuno-histoquímica, com cortes submetidos a anticorpos específicos. As variáveis analisadas foram quantidade de vasos, células inflamatórias, COX-2, Macrófagos e presença de necrose. Os dados foram analisados estatisticamente pelo software R. A quantidade de vasos foi maior (p<0,0001) no grupo tratamento (GT) durante o dia 3, enquanto no grupo controle (GC) foi maior no dia 7. No dia 3 houve menor porcentagem de necrose no grupo tratamento (GT) (p = 0,038). Nos demais dias avaliados não houve diferença entre a porcentagem de necrose observada nos dois tratamentos (p = 0,98), sendo de 53% para o grupo controle (GC) e 47% para o grupo tratamento (GT). Em relação ao número de macrófagos não houve diferença entre os grupos (p = 0,5637). Entretanto, entre os dias houve diferença significativa (p = 0,0223), sendo menor número de macrófagos no terceiro dia. A imunomarcação de COX-2 foi similar entre os grupos (p = 0,5637) e entre os dias (p = 0,9843). Portanto, o emprego das células tronco mesenquimais xenógenas em enxertos cutâneos promoveu menor ocorrência de necrose, favorecendo sua cicatrização, e não induziu o processo inflamatório, sendo assim factível seu uso em cirurgias reconstrutivas.(AU)

The present study aimed to assess inflammation in skin autografts obtained on the third, seventh and fourteenth postoperative day, in addition, it sought to determine differences in the healing process in the group treated with xenogenous mesenchymal stem cells in relation to to the control group using microscopic and immunohistochemical evaluation. Microscopic evaluation was performed using histological sections, stained by the hematoxylin-eosin (HE) histochemistry technique, and immunohistochemistry with sections were subjected to specific antibodies. The variables analyzed were the number of vessels, inflammatory cells (COX-2 and Macrophages) and the presence of necrosis. The data were analyzed statistically by software R. The number of vessels was higher (p< 0.0001) ) in the treatment group (GT) during day 3, while in the control group (CG) it was higher on day 7. On day 3 there was a lower percentage of necrosis in the treatment group (GT) (p = 0.038). On the other evaluated days, there was no difference between the percentage of necrosis observed in the two treatments (p = 0.98), being 53% for the control group (CG) and 47% for the treatment group (GT). Regarding the number of macrophages, there was no difference between groups (p = 0.5637). However, between days there was a significant difference (p = 0.0223), with a lower number of macrophages on the third day. The immunostaining of COX-2 was similar between groups (p = 0.5637) and between days (p = 0.9843). Therefore, the use of xenogenous mesenchymal stem cells in skin grafts promoted a lower occurrence of necrosis, favoring its healing, and did not induce the inflammatory process, thus making its use in reconstructive surgery feasible.(AU)

Autologous platelet-rich plasma action on skin autografts in horses / Ação do plasma rico em plaquetas autólogo em autoenxertos de pele em equinos

This study evaluated the action of autologous platelet-rich plasma (PRP) on cutaneous wounds, containing skin autografts, in the gluteal region of horses. Seven healthy horses were used. Two 6 x 6cm cutaneous wounds were produced on each side of the gluteal region. Eight days after wound induction, grafts were performed with skin fragments harvested from the neck, as well as the application of PRP, prepared by double-centrifugation protocol. Wounds with autografts on the left side received PRP (group T), and those with autografts on the right side did not receive treatment (group C). Macroscopic and microscopic evaluations were performed, considering the integration of autografts and retraction of wound edges, as well as neovascularization, inflammatory infiltrate, young fibroblasts, collagenization, reepithelization and autografts integration. There was no difference between the groups (P > 0.05) in relation to most macroscopic and microscopic variables. However, neovascularization was significantly greater (p = 0.0191) in group T, on the 14th day after grafting. It is concluded that PRP favors the process of skin repair with autografts in horses, since it increases the neovascularization in the initial phase of wound healing. Furthermore, the PRP seems to positively influence the integration of the skin autografts and the retraction of the wound edges.

Este estudo avaliou a ação do plasma rico em plaquetas (PRP) autólogo em feridas cutâneas, contendo autoenxertos de pele em equinos. Foram utilizados sete equinos hígidos, nos quais foram produzidas duas feridas cutâneas de 6 x 6cm, em cada um dos lados da região glútea. Oito dias após a indução das feridas, foram realizados enxertos com fragmentos de pele colhidos do pescoço, assim como a aplicação do PRP, preparado através de protocolo de dupla centrifugação. As feridas com autoenxertos do lado esquerdo receberam PRP (grupo T), e as com autoenxertos do lado direito não receberam tratamento (grupo C). Foram realizadas avaliações macroscópica e microscópica, considerando as variáveis integração dos autoenxertos e retração das bordas da ferida, além de neovascularização, infiltrado inflamatório, fibroblastos jovens, colagenização, reepitelização e integração dos autoenxertos. Não houve diferença entre os grupos (p > 0,05) em relação à maioria das variáveis macroscópicas e microscópicas. Contudo, a neovascularização foi significativamente maior (P = 0,0191) no grupo T, no 14º dia após a realização da enxertia. Conclui-se que o PRP favorece o processo de reparo da pele com autoenxertos em equinos, já que aumenta a neovascularização na fase inicial da cicatrização da ferida. Ainda, o PRP parece influenciar positivamente a integração dos autoenxertos de pele e a retração das bordas da ferida.

Autologous platelet-rich plasma action on skin autografts in horses / Ação do plasma rico em plaquetas autólogo em autoenxertos de pele em equinos

This study evaluated the action of autologous platelet-rich plasma (PRP) on cutaneous wounds, containing skin autografts, in the gluteal region of horses. Seven healthy horses were used. Two 6 x 6cm cutaneous wounds were produced on each side of the gluteal region. Eight days after wound induction, grafts were performed with skin fragments harvested from the neck, as well as the application of PRP, prepared by double-centrifugation protocol. Wounds with autografts on the left side received PRP (group T), and those with autografts on the right side did not receive treatment (group C). Macroscopic and microscopic evaluations were performed, considering the integration of autografts and retraction of wound edges, as well as neovascularization, inflammatory infiltrate, young fibroblasts, collagenization, reepithelization and autografts integration. There was no difference between the groups (P > 0.05) in relation to most macroscopic and microscopic variables. However, neovascularization was significantly greater (p = 0.0191) in group T, on the 14th day after grafting. It is concluded that PRP favors the process of skin repair with autografts in horses, since it increases the neovascularization in the initial phase of wound healing. Furthermore, the PRP seems to positively influence the integration of the skin autografts and the retraction of the wound edges.(AU)

Este estudo avaliou a ação do plasma rico em plaquetas (PRP) autólogo em feridas cutâneas, contendo autoenxertos de pele em equinos. Foram utilizados sete equinos hígidos, nos quais foram produzidas duas feridas cutâneas de 6 x 6cm, em cada um dos lados da região glútea. Oito dias após a indução das feridas, foram realizados enxertos com fragmentos de pele colhidos do pescoço, assim como a aplicação do PRP, preparado através de protocolo de dupla centrifugação. As feridas com autoenxertos do lado esquerdo receberam PRP (grupo T), e as com autoenxertos do lado direito não receberam tratamento (grupo C). Foram realizadas avaliações macroscópica e microscópica, considerando as variáveis integração dos autoenxertos e retração das bordas da ferida, além de neovascularização, infiltrado inflamatório, fibroblastos jovens, colagenização, reepitelização e integração dos autoenxertos. Não houve diferença entre os grupos (p > 0,05) em relação à maioria das variáveis macroscópicas e microscópicas. Contudo, a neovascularização foi significativamente maior (P = 0,0191) no grupo T, no 14º dia após a realização da enxertia. Conclui-se que o PRP favorece o processo de reparo da pele com autoenxertos em equinos, já que aumenta a neovascularização na fase inicial da cicatrização da ferida. Ainda, o PRP parece influenciar positivamente a integração dos autoenxertos de pele e a retração das bordas da ferida.(AU)

Região metafisária da tíbia de coelhos: uma opção para estudos dos substitutos ósseos / Metaphyseal region of the tibia of rabbits: an option for bone substitutes studies

Apresenta-se um modelo experimental de ostectomia de tíbia em coelhos para estudo de biomateriais em processos de reparação óssea. Foi realizada falha segmentar de 6mm de diâmetro na região metafisária medial proximal de tíbia de 72 coelhos as quais foram preenchidas com substituto ósseo e avaliadas clinicamente, por exame radiográfico e por meio de tomografia computadorizada feixe cônico, em diferentes tempos. Conclui-se que a metáfise medial proximal de tíbia de coelhos é adequada como modelo para estudos que avaliem o comportamento de enxertos e/ou biomateriais em falhas ósseas.

Is presented an experimental model of tibial ostectomy in rabbits to study biomaterials during bone repair process. Segmental failure of 6 mm diameter was performed in the medial proximal tibial metaphyseal region of 72 rabbits, which were filled with bone substitute and evaluated by clinical exam, X-ray, and cone beam computed tomography at different times. It is concluded that the medial proximal tibial metaphysis region of rabbits is suitable as a model for studies that evaluate the behavior of grafts and/or biomaterials on bone defects.

Clínica cirúrgica de pequenos animais: controle microbiológico na obtenção do plasma rico em plaquetas (PRP) / Microbiological control in obtaining platelet-rich plasma (PRP)

O plasma rico em plaquetas é um produto obtido por meio da centrifugação do sangue, e devido as suas propriedades de estimular a angiogênese, este é utilizado em cirurgias reconstrutivas a fim de evitar complicações pós-cirúrgicas. A coleta do sangue é feita de forma asséptica para obtenção do PRP, porém há possibilidade de contaminação bacteriana no momento da sua confecção podendo assim ocasionar complicações ao paciente. Objetivou-se ressaltar a importância do rigor no controle microbiológico do produto obtido, bem como avaliar a possibilidade de contaminação bacteriana no momento da confecção (PRP), antes do seu emprego no leito de enxertos cutâneos em coelhos. No presente estudo, apenas quatro amostras das sessenta confeccionadas apresentaram colônias bacterianas, indicando que o plasma rico em plaquetas obtido de maneira asséptica é propício e seguro em cirurgias reconstrutivas. Conclui-se que o rigor no controle microbiológico aliado a adequada desinfecção do centro cirúrgico e antissepsia do campo operatório, bem como o preparo asséptico do PRP, seu uso é indicado e seguro, não provocando riscos de contaminação da ferida cirúrgica.

Platelet-rich plasma is a product obtained by centrifuging blood, and due to its properties of stimulating angiogenesis, it is used in reconstructive surgery in order to avoid post-surgical complications. Blood collection is done aseptically to obtain platelet-rich plasma, but there is a possibility of bacterial contamination at the time of making it, thus causing complications to the patient. The objective was to emphasize the importance of rigor in the microbiological control of the product obtained, as well as to evaluate the possibility of bacterial contamination when making plateletrich plasma (PRP), before its use in the bed of skin grafts in rabbits. In the present study, only four samples of the sixty made had bacterial colonies, indicating that the platelet-rich plasma obtained aseptically is conducive and safe in reconstructive surgery. It is concluded that the rigor in microbiological control combined with adequate disinfection of the operating room and antisepsis of the operating field, as well as the aseptic preparation of the PRP, its use is indicated and safe, without causing risks of contamination of the surgical wound.

Clínica cirúrgica de pequenos animais: controle microbiológico na obtenção do plasma rico em plaquetas (PRP) / Microbiological control in obtaining platelet-rich plasma (PRP)

O plasma rico em plaquetas é um produto obtido por meio da centrifugação do sangue, e devido as suas propriedades de estimular a angiogênese, este é utilizado em cirurgias reconstrutivas a fim de evitar complicações pós-cirúrgicas. A coleta do sangue é feita de forma asséptica para obtenção do PRP, porém há possibilidade de contaminação bacteriana no momento da sua confecção podendo assim ocasionar complicações ao paciente. Objetivou-se ressaltar a importância do rigor no controle microbiológico do produto obtido, bem como avaliar a possibilidade de contaminação bacteriana no momento da confecção (PRP), antes do seu emprego no leito de enxertos cutâneos em coelhos. No presente estudo, apenas quatro amostras das sessenta confeccionadas apresentaram colônias bacterianas, indicando que o plasma rico em plaquetas obtido de maneira asséptica é propício e seguro em cirurgias reconstrutivas. Conclui-se que o rigor no controle microbiológico aliado a adequada desinfecção do centro cirúrgico e antissepsia do campo operatório, bem como o preparo asséptico do PRP, seu uso é indicado e seguro, não provocando riscos de contaminação da ferida cirúrgica.(AU)

Platelet-rich plasma is a product obtained by centrifuging blood, and due to its properties of stimulating angiogenesis, it is used in reconstructive surgery in order to avoid post-surgical complications. Blood collection is done aseptically to obtain platelet-rich plasma, but there is a possibility of bacterial contamination at the time of making it, thus causing complications to the patient. The objective was to emphasize the importance of rigor in the microbiological control of the product obtained, as well as to evaluate the possibility of bacterial contamination when making plateletrich plasma (PRP), before its use in the bed of skin grafts in rabbits. In the present study, only four samples of the sixty made had bacterial colonies, indicating that the platelet-rich plasma obtained aseptically is conducive and safe in reconstructive surgery. It is concluded that the rigor in microbiological control combined with adequate disinfection of the operating room and antisepsis of the operating field, as well as the aseptic preparation of the PRP, its use is indicated and safe, without causing risks of contamination of the surgical wound.(AU)

Região metafisária da tíbia de coelhos: uma opção para estudos dos substitutos ósseos / Metaphyseal region of the tibia of rabbits: an option for bone substitutes studies

Apresenta-se um modelo experimental de ostectomia de tíbia em coelhos para estudo de biomateriais em processos de reparação óssea. Foi realizada falha segmentar de 6mm de diâmetro na região metafisária medial proximal de tíbia de 72 coelhos as quais foram preenchidas com substituto ósseo e avaliadas clinicamente, por exame radiográfico e por meio de tomografia computadorizada feixe cônico, em diferentes tempos. Conclui-se que a metáfise medial proximal de tíbia de coelhos é adequada como modelo para estudos que avaliem o comportamento de enxertos e/ou biomateriais em falhas ósseas.(AU)

Is presented an experimental model of tibial ostectomy in rabbits to study biomaterials during bone repair process. Segmental failure of 6 mm diameter was performed in the medial proximal tibial metaphyseal region of 72 rabbits, which were filled with bone substitute and evaluated by clinical exam, X-ray, and cone beam computed tomography at different times. It is concluded that the medial proximal tibial metaphysis region of rabbits is suitable as a model for studies that evaluate the behavior of grafts and/or biomaterials on bone defects.(AU)

Região metafisária da tíbia de coelhos: uma opção para estudos dos substitutos ósseos / Metaphyseal region of the tibia of rabbits: an option for bone substitutes studies

Apresenta-se um modelo experimental de ostectomia de tíbia em coelhos para estudo de biomateriais em processos de reparação óssea. Foi realizada falha segmentar de 6mm de diâmetro na região metafisária medial proximal de tíbia de 72 coelhos as quais foram preenchidas com substituto ósseo e avaliadas clinicamente, por exame radiográfico e por meio de tomografia computadorizada feixe cônico, em diferentes tempos. Conclui-se que a metáfise medial proximal de tíbia de coelhos é adequada como modelo para estudos que avaliem o comportamento de enxertos e/ou biomateriais em falhas ósseas.

Is presented an experimental model of tibial ostectomy in rabbits to study biomaterials during bone repair process. Segmental failure of 6 mm diameter was performed in the medial proximal tibial metaphyseal region of 72 rabbits, which were filled with bone substitute and evaluated by clinical exam, X-ray, and cone beam computed tomography at different times. It is concluded that the medial proximal tibial metaphysis region of rabbits is suitable as a model for studies that evaluate the behavior of grafts and/or biomaterials on bone defects.

Effects of canine adipose-derived mesenchymal stem cells on the epithelialization of rabbits' skin autograft (Oryctolagus cuniculus) / Efeitos das células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo de cães na epitelização de autoenxertos de pele em coelhos (Oryctolagus cuniculus)

The present study aimed to evaluate the effects of mesenchymal stem cells derived from canine adipose tissue in the healing process of full-thickness mesh skin grafts in rabbits. The stem cells were collected from young dogs; and, after characterization, remained in cryopreservation, in independent doses containing 2 x 106 cells. The mesh distal limb graft technique was performed in 60 rabbits, divided into three groups, CG (Control Group), GT1 (Intralesional Stem Cell Treated Group), and GT2 (Intravenous Stem Cell Treated Group), containing 20 animals each. After grafting, each group was randomly divided into four subgroups according to euthanasia time 3, 7, 14, and 30 days, containing five animals in each group. Animals of GT1_14, GT1_30, and GT2_14, GT2_30 subgroups received a second dose of xenogeneic cells on the seventh day. Meanwhile, animals from GT1_30 and GT2_30 received the third dose of xenogeneic cells on day 14. The groups treated with xenogeneic stem cells positively affected type III collagen re-epithelialization and deposition, and possibly GT1 had a controlled inflammatory response. However, no effect on angiogenesis. Thus, it was possible to demonstrate tolerance and therapeutic action of mesenchymal stem cells from canine adipose tissue in skin grafts in rabbits.(AU)

O presente estudo teve como principal objetivo avaliar os efeitos das células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo de cães no processo de cicatrização de autoenxertos de pele de espessura total em malha em coelhos. As células-tronco foram coletadas de cães jovens, após a caracterização estas permaneceram em criopreservação, em doses individuais contendo 2 x 106 células. A técnica de enxerto em malha na região distal do membro foi realizada em 60 coelhos, divididos em três grupos, GC (Grupo Controle), GT1 (Grupo tratado com células-tronco intralesional) e GT2 (Grupo tratado com células-tronco via endovenosa), contendo 20 animais cada. Imediatamente após a enxertia, cada grupo foi dividido aleatoriamente em quatro subgrupos, de acordo com o tempo de eutanásia 3, 7, 14 e 30 dias contendo cinco animais cada. Animais dos subgrupos GT1_14, GT1_30 e GT2_14, GT2_30 receberam uma segunda dose de células xenógenas no sétimo dia. Ademais, animais do GT1_30 e do GT2_30 receberam a terceira dose de células xenógenas no dia 14. Os grupos tratados com células-tronco xenógenas tiveram um efeito positivo na reepitelização e deposição de colágeno tipo III, e possivelmente, o GT1 teve uma resposta inflamatória controlada, entretanto o efeito na angiogênese não foi observado. Dessa forma, foi possível demonstrar que houve tolerância e ação terapêutica das células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo de cães em enxertos de pele em coelhos.(AU)

Effects of canine adipose-derived mesenchymal stem cells on the epithelialization of rabbits' skin autograft (Oryctolagus cuniculus) / Efeitos das células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo de cães na epitelização de autoenxertos de pele em coelhos (Oryctolagus cuniculus)

The present study aimed to evaluate the effects of mesenchymal stem cells derived from canine adipose tissue in the healing process of full-thickness mesh skin grafts in rabbits. The stem cells were collected from young dogs; and, after characterization, remained in cryopreservation, in independent doses containing 2 x 106 cells. The mesh distal limb graft technique was performed in 60 rabbits, divided into three groups, CG (Control Group), GT1 (Intralesional Stem Cell Treated Group), and GT2 (Intravenous Stem Cell Treated Group), containing 20 animals each. After grafting, each group was randomly divided into four subgroups according to euthanasia time 3, 7, 14, and 30 days, containing five animals in each group. Animals of GT1_14, GT1_30, and GT2_14, GT2_30 subgroups received a second dose of xenogeneic cells on the seventh day. Meanwhile, animals from GT1_30 and GT2_30 received the third dose of xenogeneic cells on day 14. The groups treated with xenogeneic stem cells positively affected type III collagen re-epithelialization and deposition, and possibly GT1 had a controlled inflammatory response. However, no effect on angiogenesis. Thus, it was possible to demonstrate tolerance and therapeutic action of mesenchymal stem cells from canine adipose tissue in skin grafts in rabbits.(AU)

O presente estudo teve como principal objetivo avaliar os efeitos das células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo de cães no processo de cicatrização de autoenxertos de pele de espessura total em malha em coelhos. As células-tronco foram coletadas de cães jovens, após a caracterização estas permaneceram em criopreservação, em doses individuais contendo 2 x 106 células. A técnica de enxerto em malha na região distal do membro foi realizada em 60 coelhos, divididos em três grupos, GC (Grupo Controle), GT1 (Grupo tratado com células-tronco intralesional) e GT2 (Grupo tratado com células-tronco via endovenosa), contendo 20 animais cada. Imediatamente após a enxertia, cada grupo foi dividido aleatoriamente em quatro subgrupos, de acordo com o tempo de eutanásia 3, 7, 14 e 30 dias contendo cinco animais cada. Animais dos subgrupos GT1_14, GT1_30 e GT2_14, GT2_30 receberam uma segunda dose de células xenógenas no sétimo dia. Ademais, animais do GT1_30 e do GT2_30 receberam a terceira dose de células xenógenas no dia 14. Os grupos tratados com células-tronco xenógenas tiveram um efeito positivo na reepitelização e deposição de colágeno tipo III, e possivelmente, o GT1 teve uma resposta inflamatória controlada, entretanto o efeito na angiogênese não foi observado. Dessa forma, foi possível demonstrar que houve tolerância e ação terapêutica das células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo de cães em enxertos de pele em coelhos.(AU)

Surgical sponge associated with platelets rich plasma in skin mesh grafts and layer in rabbits (Oryctolagus cuniculus) / Esponja cirúrgica associada com plasma rico em plaquetas em enxertos cutâneos em malha e camada em coelhos (Oryctolagus cuniculus)

The aim of this study was to evaluate of the efficacy of PRP employment associated with surgical sponges to improve the integration of the graft in the recipient bed. It was held at the Veterinary Hospital UNESP, Campus of Jaboticabal - SP, a study of 64 rabbits, divided into eight groups with eight animals. The groups were divided in control with saline solution 0,9%, control with PRP both without the sponge, surgical sponge with PRP, surgical sponge without PRP, and were used mesh and layer grafts in the respective groups. The data were submitted to statistical analysis (paired t-test, Kruskal-Wallis test, with subsequent use of the multiple comparison tests of Dunn, analysis of variance (F) test, Tukey test, P< 0.05). Edema and exudate with 3 and 3 and 7 days (P= 0,03 e P= 0,0049); coloring on the 14th day (P= 0,0001); cosmetic appearance on the 7th and 14th day (P= 0,0026 and P= 0,0001); mononuclear cells (P= 0,01) and polymorphonuclear (P= 0,01); fibroblast proliferation (P= 0,01); collagenous (P= 0,05); hemorrhage (P-007); necrosis and re-epithelialization (P= 0,2928 and P= 0,1). We concluded that the use of Platelet Rich Plasma Gel on skin grafts associated with a sponge as a compressive dressing promote the skin graft survival without a previous granulation tissue.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do PRP associado com esponjas cirúrgicas na integração do enxerto ao leito receptor. Realizou-se, no Hospital Veterinário da Unesp, Jaboticabal, SP, um estudo com 64 coelhos, separados em oito grupos, com oito animais. Os grupos foram: Gprpc (PRP, sem esponja cirúrgica, enxerto camada), Gprpce (PRP, esponja cirúrgica, enxerto camada), Gcc (solução fisiológica 0,9%, sem esponja cirúrgica, enxerto camada), Gcce (solução fisiológica 0,9%, esponjas cirúrgicas, enxerto camada), Gprpm (PRP, sem esponja cirúrgica, enxerto malha), Gprpme (PRP, esponja cirúrgica, enxerto malha), Gcm (solução fisiológica 0,9%, sem esponja cirúrgica, enxerto malha) e Gcce (solução fisiológica 0,9%, esponjas cirúrgicas, malha). Os dados foram analisados pelo teste t emparelhado, Kruskal-Wallis, análise de variância, e teste de Tukey (P<0,05). Edema e exsudato presente com três e sete dias (P=0,03 e P=0,0049); coloração cianótica no 14º dia (P=0,0001); aspecto cosmético bom no sétimo e no 14º dia (P=0,00026 e P=0,0001); presença de células mononucleares (P=0,01) e polimorfonucleares (P=0,01); proliferação de fibroblastos discreta (P=0,01); colagenização intensa (P=0,05); hemorragia discreta (P=0,007); ausência de diferença significativa em necrose e reepitelização (P=0,2928 e P=0,1). Conclui-se que o emprego do PRP gel em enxertos cutâneos associando esponjas cirúrgicas como curativo compressivo favorece sua integração ao leito receptor sem a presença prévia de tecido de granulação.(AU)

Surgical sponge associated with platelets rich plasma in skin mesh grafts and layer in rabbits (Oryctolagus cuniculus) / Esponja cirúrgica associada com plasma rico em plaquetas em enxertos cutâneos em malha e camada em coelhos (Oryctolagus cuniculus)

The aim of this study was to evaluate of the efficacy of PRP employment associated with surgical sponges to improve the integration of the graft in the recipient bed. It was held at the Veterinary Hospital UNESP, Campus of Jaboticabal - SP, a study of 64 rabbits, divided into eight groups with eight animals. The groups were divided in control with saline solution 0,9%, control with PRP both without the sponge, surgical sponge with PRP, surgical sponge without PRP, and were used mesh and layer grafts in the respective groups. The data were submitted to statistical analysis (paired t-test, Kruskal-Wallis test, with subsequent use of the multiple comparison tests of Dunn, analysis of variance (F) test, Tukey test, P< 0.05). Edema and exudate with 3 and 3 and 7 days (P= 0,03 e P= 0,0049); coloring on the 14th day (P= 0,0001); cosmetic appearance on the 7th and 14th day (P= 0,0026 and P= 0,0001); mononuclear cells (P= 0,01) and polymorphonuclear (P= 0,01); fibroblast proliferation (P= 0,01); collagenous (P= 0,05); hemorrhage (P-007); necrosis and re-epithelialization (P= 0,2928 and P= 0,1). We concluded that the use of Platelet Rich Plasma Gel on skin grafts associated with a sponge as a compressive dressing promote the skin graft survival without a previous granulation tissue.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do PRP associado com esponjas cirúrgicas na integração do enxerto ao leito receptor. Realizou-se, no Hospital Veterinário da Unesp, Jaboticabal, SP, um estudo com 64 coelhos, separados em oito grupos, com oito animais. Os grupos foram: Gprpc (PRP, sem esponja cirúrgica, enxerto camada), Gprpce (PRP, esponja cirúrgica, enxerto camada), Gcc (solução fisiológica 0,9%, sem esponja cirúrgica, enxerto camada), Gcce (solução fisiológica 0,9%, esponjas cirúrgicas, enxerto camada), Gprpm (PRP, sem esponja cirúrgica, enxerto malha), Gprpme (PRP, esponja cirúrgica, enxerto malha), Gcm (solução fisiológica 0,9%, sem esponja cirúrgica, enxerto malha) e Gcce (solução fisiológica 0,9%, esponjas cirúrgicas, malha). Os dados foram analisados pelo teste t emparelhado, Kruskal-Wallis, análise de variância, e teste de Tukey (P<0,05). Edema e exsudato presente com três e sete dias (P=0,03 e P=0,0049); coloração cianótica no 14º dia (P=0,0001); aspecto cosmético bom no sétimo e no 14º dia (P=0,00026 e P=0,0001); presença de células mononucleares (P=0,01) e polimorfonucleares (P=0,01); proliferação de fibroblastos discreta (P=0,01); colagenização intensa (P=0,05); hemorragia discreta (P=0,007); ausência de diferença significativa em necrose e reepitelização (P=0,2928 e P=0,1). Conclui-se que o emprego do PRP gel em enxertos cutâneos associando esponjas cirúrgicas como curativo compressivo favorece sua integração ao leito receptor sem a presença prévia de tecido de granulação.(AU)

Autologous and homologous skin grafts treated with platelet-rich plasma (PRP): experimental study in rabbits / Enxertos cutâneos autólogos e homólogos tratados com plasma rico em plaquetas (PRP): estudo experimental em coelhos

The aim of the present study was to compare tissue repair of skin defects in rabbits submitted to autologous and homologous grafts treated or not with platelet-rich plasma (PRP). We selected nine rabbits and constituted four groups, designated as G1, in which were performed autologous graft treated with PRP; G2, autologous graft only; G3, homologous graft treated with PRP; and G4, homologous graft only. Macroscopic and histomorphometric evaluation was realized. The histomorphometric evaluation was performed by Hematoxylin/Eosin and Masson´s Trichrome staining with quantification of collagen fibers, macrophages, fibroblasts and vessels. The autologous graft treated with PRP showed positive influence on the early stage of the tissue repair process at the macroscopic evaluation, characterized by rosy color and cosmetic appearance. At the histomorphometric evaluation, there was no statistical difference in the number of macrophages and fibroblasts between the treated grafts or not with the PRP, as well as the quantification of vessels and collagen fibers. It can be concluded that PRP promotes a positive influence on the initial phase or "take" of the graft.(AU)

Objetiva-se com o presente estudo comparar a reparação tecidual de defeitos cutâneos em coelhos, submetidos a enxertos autólogos e homólogos, tratados ou não com plasma rico em plaquetas (PRP). Para isso, foram selecionados nove coelhos e constituídos quatro grupos experimentais, designados como G1, no qual foi realizado enxerto autólogo tratado com PRP; G2, enxerto autólogo; G3, enxerto homólogo tratado com PRP; e G4, enxerto homólogo. Foram realizadas avaliações macroscópica e histomorfométrica, por meio das colorações de Hematoxilina/Eosina e Tricômio de Masson, incluindo quantificação de fibras colágenas, contagem de macrófagos, fibroblastos e vasos. O uso do enxerto autólogo com PRP influenciou positivamente na fase inicial do processo de reparação tecidual à avaliação macroscópica, caracterizada por coloração rósea e de aspecto cosmético. À avaliação histomorfométrica, não houve diferença estatística quanto ao número de macrófagos e fibroblastos entre os enxertos tratados ou não com o PRP, bem como quanto às contagens de vasos e a quantificação das fibras colágenas. Conclui-se que o PRP sob a promoveu influência positiva na fase inicial ou de "pega" do enxerto autólogo.(AU)

Histochemical and immunohistochemical evaluation of angiogenesis in rabbits (Oryctolagus cuniculus) submitted to skin grafts associated with platelet-rich plasma / Histoquímica e imunohistoquíca na avaliação da angiogênese em coelhos submetidos ao emprego de enxertos cutâneos associado com plasma rico em plaquetas

Histochemical staining consists of a set of specific chemical reactions of structures or tissue-endogenous substances. Immunohistochemistry allows verification of proteins in tissues related to biological and pathological factors. The standardization of methods to assess angiogenesis resulting from formation of new blood vessels in procedures with stimulants is important to facilitate the implementation of research as well as to assist interpretation of data. In rabbits some markers of angiogenesis antibodies in the skin are not standardized because of cross-reactions that may occur because the antibodies are made from such animals.The aim of this study was to analyze the immunohistochemical methods through dyes and immunohistochemical markers angiogenesis in rabbits (Oryctolagus cuniculus) having undergone reconstructive surgery with skin grafts associated with plasma angiogenesis stimulator rich in platelets, in order to evaluate which method would be better to visualize the vessels, as well as to evaluate which antibody would promote better immunostaining, and find the differences between the methods and to standardize the methodology to be applied in experiments using rabbits. Sixteen rabbits were used, split into two groups of eight animals: Gprp (plasma rich in platelets) and Gc (control, saline solution, 9%). The same technique of reconstructive surgery using graft mesh was performed on each rabbit. The groups differed only in the application of platelet-rich plasma before the surgical wound synthesis. Samples for evaluation of angiogenesis were collected 15 days after the surgical procedure. The dyes Hematoxylin & Eosin and Masson's Trichrome were used in the histochemical study to evaluate vascular proliferation. Markers CD31, CD34 and Caveolin-1 was used for the immunohistochemical study. The evaluation between the groups (Gprp and Gc) in regard to the categorical variable (vascular proliferation intensity) used the Kruskal-Wallis test with p values equal to or less than 0.05 being considered significant. The immunohistochemistry was subjected to analysis of variance for a completely randomized design, with two groups and five repetitions (medium) and 5% significance level. Multiple comparison of groups resulted in the Tukey test (p=0.05) used. The amount of vascular proliferation assessed by histochemical method HE and Masson's Trichrome was found to be a significant variable in Gprp when compared with group Gc. When evaluating the methods used, there was no significant difference. There was no difference in the three markers which were used for correlating microvessels; however, there was more intense staining of vessels when Caveolin-1 Antibody was used. This caused intense marking of the capillaries and small vessels, as well as of larger vessels. When using CD31 and CD34, the same was observed, but it was not as intense as with Caveolin-1; though some cases showed sincere and discreet marking. The results of this study demonstrated that the histochemical methods performed are effective for semi-quantitative assessment of angiogenesis. The immunohistochemical comparison of Caveolin-1, CD31, and CD34 as markers of angiogenesis in rabbits showed that both antibodies could immunostain the newly formed vessels; but the Caveolin-1 showed better immunostaining in small and medium-sized vessels, as well as a minor presence in the background. Although not specific markers for angiogenesis, they can be used as immunohistochemical markers of vascular endothelium in rabbits.(AU)

Colorações histoquímicas consistem de um conjunto de reações químicas específicas das estruturas ou substâncias endógenas do tecido. Logo a Imunohistoquímica permite observar proteínas presentes nos tecidos relacionadas com fatores determinantes do comportamento biológico e patológico. A padronização dos métodos que avaliam a angiogênese decorrente de procedimentos que utilizam substâncias estimulantes à formação de novos vasos são importantes, a fim de facilitar a execução das pesquisas, bem como auxiliar na interpretação dos dados, visto que em coelhos alguns anticorpos marcadores de angiogênese na pele ainda não são padronizadas em virtude das reações cruzadas que podem ocorrer devido aos anticorpos serem confeccionados a partir de tais animais. Objetivou-se analisar os métodos histoquímicos por meio das colorações e imunohistoquímicas com marcadores de angiogênese em coelhos (Oryctolagus cuniculus) submetidos ao emprego de enxertos cutâneos associado com estimulador de angiogênese plasma rico em plaquetas, a fim de avaliar qual método seria melhor para visualização dos vasos, bem como avaliar qual anticorpo promoveria melhor imunomarcação, buscando-se assim encontrar a diferenças entre os métodos e padronizar a metodologia a ser aplicada em experimentos que utilizem coelhos. Utilizou-se 16 coelhos, separados em dois grupos com oito animais, compreendendo os grupos Gprp (plasma rico em plaquetas) e Gc (controle, solução fisiológica 0,9%). Em todos os animais foi realizada a mesma técnica de cirurgia reconstrutiva de enxertia do tipo malha, os grupos diferiram apenas a aplicação do plasma rico em plaquetas antes da síntese da ferida cirúrgica. As amostras para avaliação da angiogênese foram coletadas após 15 dias do procedimento cirúrgico. Utilizou-se no estudo histoquímico as colorações Hematoxilina & Eosina e Tricrômico de Masson para avaliação da proliferação vascular, e os anticorpos CD31 e CD34 e Caveolina - 1 para avaliação imunohistoquímica. A comparação entre os grupos (Gprp e Gc) em relação à variável categórica (intensidade de proliferação vascular) foi utilizado o teste de Kruskal-Wallis, com valores de p iguais ou inferiores a 0,05 foram considerados significativos. Os dados imuno-histoquímico foram submetidos à análise de variância para um delineamento inteiramente ao acaso, com 2 grupos e 5 repetições (médias) e nível de significância de 5%. Nas comparações múltiplas das médias dos grupos, utilizou-se o teste de Tukey (α = 0,05). A intensidade de proliferação vascular avaliada pelo método histoquímico HE e Tricômico de Masson encontrou-se que tal variável foi significativa no Gprp, quando comparado com o Gc. Avaliando os métodos utilizados não houve diferença significativa. A contagem microvascular (MVC) realizada com os diferentes marcadores (Caveolina-1, CD31 e CD34) foi significativa no Gprp. Correlacionando a contagem microvascular dos três marcadores utilizados não houve diferença significativa, no entanto observou-se marcação mais intensa dos vasos utilizando o anticorpo Caveolina-1, sendo intensa a marcação dos capilares, vasos de pequeno calibre, bem como em vasos maiores. Nas avaliações de CD31 e CD34 observou que houve imunomarcação dos vasos, porém não foi intensa como a Caveolina-1, alguns casos apresentaram fundo, bem como marcação discreta. Os resultados encontrados neste estudo evidenciaram os métodos histoquímicos são eficazes para avaliação semiquantitativa da angiogênese. A comparação imunohistoquímicas da Caveolina-1, CD31 e CD34 como marcadores de angiogênese em coelhos evidenciaram que ambos os anticorpos são capazes de imunomarcar os vasos neoformados, porém a Caveolina-1 apresentou melhor imunomarcação de vasos de pequeno e médio calibre, bem como menor presença de fundo, embora não seja um marcador específico para angiogênese pode ser utilizada como marcador imunohistoquímico de endotélio vascular em coelhos.(AU)

Epitelização de enxertos cutâneos em feridas recentes de coelhos tratados com membrana amniótica canina e/ou laserterapia / Skin graft epithelialization in rabbit fresh wounds treated with amniotic membrane and/or laser therapy

A enxertia cutânea é uma técnica cirúrgica simples e bastante útil para o reparo de feridas, principalmente aquelas onde existe dificuldade da aplicação do fechamento primário ou de outras técnicas reconstrutivas. Entretanto, para a sobrevivência do enxerto, é necessário que o leito da ferida esteja saudável e com presença de tecido de granulação exuberante. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a aplicação da membrana amniótica e da laserterapia como potenciais estimulantes da cicatrização em enxertos aplicados em feridas sem tecido de granulação. Foram utilizados 42 coelhos, divididos em quatro grupos: grupo controle (GC), grupo membrana (GM), grupo laser (GL) e grupo membrana e laser (GML), submetidos a avaliações macro e microscópicas. Na avaliação macroscópica, foi possível notar que os pacientes dos grupos nos quais a membrana amniótica foi utilizada (GM e GML) apresentaram evidências associadas à acentuada reação inflamatória, à falha de integração do enxerto e à consequente necrose dele. Já os pacientes do GL apresentaram melhor aspecto do enxerto no último dia de avaliação. Na análise microscópica, observou-se intensa integração do enxerto à derme, reepitelização acentuada e escassas células inflamatórias no local do enxerto no GL. O contrário foi observado nos pacientes do GM e GML, nos quais aparentemente houve rejeição da membrana. A formação de colágeno não se correlacionou com outros fatores, como inflamação e necrose, em nenhum dos grupos de tratamento. Dessa forma, é possível afirmar que a laserterapia mostrou ser efetiva, contribuindo para o processo cicatricial e a integração do enxerto. Já a membrana amniótica canina não deve ser utilizada para esse fim, pois provoca intensa reação inflamatória, além de impedir a nutrição do enxerto.(AU)

Skin grafting is a simple surgical technique and useful to repair wounds, especially those where there is a difficulty to apply primary closure skin or other reconstructive techniques. However, for graft survival a healthy wound bed and the presence of an exuberant granulation tissue are necessary. This study aimed to evaluate the application of amniotic membrane and laser therapy as potential healing stimulants in grafts applied in wounds without granulation tissue. For this, we used 42 rabbits divided into four treatment groups, control group (CG), membrane group (MG), laser group (LG) and membrane and laser group (MLG), submitted to macroscopic and microscopic evaluation. The macroscopic examination showed that the patients of the groups where the amniotic membrane was used in order to stimulate re-epithelialization (MG and MLG) presented evidences associated with severe inflammatory reaction, graft integration failure and consequent necrosis. LG patients apparently had the best graph aspect in the last valuation date. Microscopic examination showed intense integration of the graft to the dermis, high re-epithelialization level, and scarce inflammatory cells in the graft site of LG patients. The opposite was observed in patients in the MG and MLG groups, where a rejection of the membrane was observed. Finally, collagen formation was not correlated with other factors such as inflammation and necrosis in any of the treatment groups. We can conclude that laser therapy was effective, contributing to the healing process and integration of the graft. Thus, canine amniotic membrane should not be used for this purpose because it causes intense inflammatory reaction besides avoiding graft nutrition.(AU)

Epitelização de enxertos cutâneos em feridas recentes de coelhos tratados com membrana amniótica canina e/ou laserterapia / Skin graft epithelialization in rabbit fresh wounds treated with amniotic membrane and/or laser therapy

A enxertia cutânea é uma técnica cirúrgica simples e bastante útil para o reparo de feridas, principalmente aquelas onde existe dificuldade da aplicação do fechamento primário ou de outras técnicas reconstrutivas. Entretanto, para a sobrevivência do enxerto, é necessário que o leito da ferida esteja saudável e com presença de tecido de granulação exuberante. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a aplicação da membrana amniótica e da laserterapia como potenciais estimulantes da cicatrização em enxertos aplicados em feridas sem tecido de granulação. Foram utilizados 42 coelhos, divididos em quatro grupos: grupo controle (GC), grupo membrana (GM), grupo laser (GL) e grupo membrana e laser (GML), submetidos a avaliações macro e microscópicas. Na avaliação macroscópica, foi possível notar que os pacientes dos grupos nos quais a membrana amniótica foi utilizada (GM e GML) apresentaram evidências associadas à acentuada reação inflamatória, à falha de integração do enxerto e à consequente necrose dele. Já os pacientes do GL apresentaram melhor aspecto do enxerto no último dia de avaliação. Na análise microscópica, observou-se intensa integração do enxerto à derme, reepitelização acentuada e escassas células inflamatórias no local do enxerto no GL. O contrário foi observado nos pacientes do GM e GML, nos quais aparentemente houve rejeição da membrana. A formação de colágeno não se correlacionou com outros fatores, como inflamação e necrose, em nenhum dos grupos de tratamento. Dessa forma, é possível afirmar que a laserterapia mostrou ser efetiva, contribuindo para o processo cicatricial e a integração do enxerto. Já a membrana amniótica canina não deve ser utilizada para esse fim, pois provoca intensa reação inflamatória, além de impedir a nutrição do enxerto.(AU)

Skin grafting is a simple surgical technique and useful to repair wounds, especially those where there is a difficulty to apply primary closure skin or other reconstructive techniques. However, for graft survival a healthy wound bed and the presence of an exuberant granulation tissue are necessary. This study aimed to evaluate the application of amniotic membrane and laser therapy as potential healing stimulants in grafts applied in wounds without granulation tissue. For this, we used 42 rabbits divided into four treatment groups, control group (CG), membrane group (MG), laser group (LG) and membrane and laser group (MLG), submitted to macroscopic and microscopic evaluation. The macroscopic examination showed that the patients of the groups where the amniotic membrane was used in order to stimulate re-epithelialization (MG and MLG) presented evidences associated with severe inflammatory reaction, graft integration failure and consequent necrosis. LG patients apparently had the best graph aspect in the last valuation date. Microscopic examination showed intense integration of the graft to the dermis, high re-epithelialization level, and scarce inflammatory cells in the graft site of LG patients. The opposite was observed in patients in the MG and MLG groups, where a rejection of the membrane was observed. Finally, collagen formation was not correlated with other factors such as inflammation and necrosis in any of the treatment groups. We can conclude that laser therapy was effective, contributing to the healing process and integration of the graft. Thus, canine amniotic membrane should not be used for this purpose because it causes intense inflammatory reaction besides avoiding graft nutrition.(AU)

Histochemical and immunohistochemical evaluation of angiogenesis in rabbits (Oryctolagus cuniculus) submitted to skin grafts associated with platelet-rich plasma / Histoquímica e imunohistoquíca na avaliação da angiogênese em coelhos submetidos ao emprego de enxertos cutâneos associado com plasma rico em plaquetas

Histochemical staining consists of a set of specific chemical reactions of structures or tissue-endogenous substances. Immunohistochemistry allows verification of proteins in tissues related to biological and pathological factors. The standardization of methods to assess angiogenesis resulting from formation of new blood vessels in procedures with stimulants is important to facilitate the implementation of research as well as to assist interpretation of data. In rabbits some markers of angiogenesis antibodies in the skin are not standardized because of cross-reactions that may occur because the antibodies are made from such animals.The aim of this study was to analyze the immunohistochemical methods through dyes and immunohistochemical markers angiogenesis in rabbits (Oryctolagus cuniculus) having undergone reconstructive surgery with skin grafts associated with plasma angiogenesis stimulator rich in platelets, in order to evaluate which method would be better to visualize the vessels, as well as to evaluate which antibody would promote better immunostaining, and find the differences between the methods and to standardize the methodology to be applied in experiments using rabbits. Sixteen rabbits were used, split into two groups of eight animals: Gprp (plasma rich in platelets) and Gc (control, saline solution, 9%).(AU)

Colorações histoquímicas consistem de um conjunto de reações químicas específicas das estruturas ou substâncias endógenas do tecido. Logo a Imunohistoquímica permite observar proteínas presentes nos tecidos relacionadas com fatores determinantes do comportamento biológico e patológico. A padronização dos métodos que avaliam a angiogênese decorrente de procedimentos que utilizam substâncias estimulantes à formação de novos vasos são importantes, a fim de facilitar a execução das pesquisas, bem como auxiliar na interpretação dos dados, visto que em coelhos alguns anticorpos marcadores de angiogênese na pele ainda não são padronizadas em virtude das reações cruzadas que podem ocorrer devido aos anticorpos serem confeccionados a partir de tais animais. Objetivou-se analisar os métodos histoquímicos por meio das colorações e imunohistoquímicas com marcadores de angiogênese em coelhos (Oryctolagus cuniculus) submetidos ao emprego de enxertos cutâneos associado com estimulador de angiogênese plasma rico em plaquetas, a fim de avaliar qual método seria melhor para visualização dos vasos, bem como avaliar qual anticorpo promoveria melhor imunomarcação, buscando-se assim encontrar a diferenças entre os métodos e padronizar a metodologia a ser aplicada em experimentos que utilizem coelhos.(AU)