Evaluation of the interaction of citral, geraniol and thymol on the poultry red mite Dermanyssus gallinae (DE GEER, 1778) under in vitro conditions / Avaliação da interação de citral, geraniol e timol no ácaro-vermelho-das-aves Dermanyssus gallinae(DE GEER, 1778) em condições in vitro

The control of Dermanyssus gallinaein small productions of laying hens is carried out by using chemical methods. However, its indiscriminate use has generated resistance and environmental pollution problems. This problem has encouraged the use of natural substances to control mites. Thus, the objective of this work was to evaluate the acaricidal activity of the bioactivecitral (Ci), geraniol (Ge) and thymol (Thy) on D. gallinae under in vitro conditions using six concentrations (0.05, 1, 2, 3, 4 and 5g/mL). In addition, the interactions of the mixtures of the three bioactive were evaluated through binary (1:1) and tertiary (1:1:1) combinations. The interaction between of the combination of bioactive was performed by using CompuSyn software and calculating the combination index (CI). LC50, LC90, and LC99with 95% confidence limits were estimated by Probit analysis. The bioactive Ci, Ge and Thy showacaricidal activity on the poultry red mite. The combination of Ge:Thy and Ci:Ge showed very strong synergism with CI of 0.084 and 0.052, whereas Ci:Thy showed strong synergism with CI of 0.122 at a concentration of 0.05g/mL. Thetertiary combination in 1:1:1 showed a higher toxic effect and strong synergistic effects at low concentrations with 100% mortality at 1g/mL concentration with a CI of 0.147. The combination of natural bioactive could be an additional way to control D. gallinae without putting thewelfare of the birds at risk and would be an environmentally friendly measure.(AU)

O controle de Dermanyssus gallinaeem pequenas produções de poedeiras é realizado por métodos químicos.No entanto, seu uso indiscriminado tem gerado problemas de resistência e poluição ambiental. Este problema tem incentivado o uso de substâncias naturais para o controle de ácaros. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade acaricida dos bioativos citral (Ci), geraniol (Ge) e timol (Thy) sobre D. gallinaeem condições in vitro utilizando seis concentrações (0,05, 1, 2, 3, 4 e 5g/mL). Além disso, as interações das misturas dos três bioativos foram avaliadas por meio decombinações binárias (1:1) e terciárias (1:1:1). O sinergismo da combinação dos bioativos foi realizado utilizando o software CompuSyn e calculando o índice de combinação (CI). LC50, LC90e LC99com limites de confiança de 95% foram estimados por análise Probit. Os bioativos Ci, Ge e Thy apresentam atividade acaricida sobre o ácaro-vermelho-da-aves. A combinação de Ge:Thy e Ci:Ge apresentou sinergismo muito forte com CI de 0,084 e 0,052, enquanto Ci:Thy apresentou forte sinergismo com CI de 0,122 na concentração de 0,05g/mL. A combinação terciária em 1:1:1 apresentou maior efeito tóxico e fortes efeitos sinérgicos em baixas concentrações com 100% de mortalidade em concentração de 1g/mL com CI de 0,147. A combinação de bioativos naturais poderia ser uma forma adicional de controle deD. gallinaesem colocar em risco o bem-estar das aves e seria uma medida ecologicamente correta.(AU)

Inhibitory activities of propolis, nisin, melittin and essential oil compounds on Paenibacillus alvei and Bacillus subtilis

Background: Natural products represent important sources of antimicrobial compounds. Propolis and compounds from essential oils comprise good examples of such substances because of their inhibitory effects on bacterial spores, including bee pathogens. Methods: Ethanol extracts of propolis (EEP) from Apis mellifera were prepared using different methods: double ultrasonication, double maceration and maceration associated with ultrasonication. Together with the antimicrobial peptides nisin and melittin, and compounds present in the essential oils of clove (Syzygium aromaticum) and cinnamon (Cinnamomum zeylanicum), assays were carried out on one Bacillus subtilis isolate and Paenibacillus alvei (ATCC 6344) against vegetative and sporulated forms, using the resazurin microtiter assay. Synergism with all the antimicrobials in association with tetracycline was verified by the time-kill curve method. Potassium and phosphate efflux, release of proteins and nucleic acids were investigated. Results: EEPs showed the same MIC, 156.25 µg/mL against B. subtilis and 78.12 µg/mL against P. alvei. The peptides showed better activities against B. subtilis (MIC of 12 µg/ mL for melittin and 37.50 µg/mL for nisin). Antimicrobials showed similar inhibitory effects, but cinnamaldehyde (39.06 µg/mL) showed the best action against P. alvei. Melittin and nisin showed the greatest capacity to reduce spores, regarding B. subtilis there was a 100% reduction at 6.25 and 0.78 µg/mL, respectively. Concerning P. alvei, the reduction was 93 and 98% at concentrations of 80 µg/mL of melittin and 15 µg/ mL of nisin. EEPs showed the highest effects on the protein release against B. subtilis and P. alvei. Nucleic acid release, phosphate and potassium efflux assays indicated bacterial cell membrane damage. Synergism between antimicrobials and tetracycline was demonstrated against both bacteria. Conclusion: All antimicrobials tested showed antibacterial activities against vegetative and sporulated forms of P. alvei and B. subtilis, especially nisin and melittin. Synergism with tetracycline and damage on bacterial cell membrane also occurred.(AU)

Effectiveness and interaction of the association of Flumioxazin and Pyroxasulfone in the control of Guinea grass (Panicum maximum) / Eficácia e interação da associação de Flumioxazin e Pyroxasulfone para controle de capim-colonião (Panicum maximum)

The infestation of difficult-to-control weeds in a crop has direct negative effects on growth and development as they compete for water, light, and nutrients, in addition to hindering the harvest, and in the specific case of sugarcane they can reduce the longevity of the field. Normally, formulated mixture of herbicides, applied in pre-emergence conditions, is used to achieve a greater weed spectrum, longer residual effect, and lower costs. However, a mixture of two molecules can cause diverse effects, such as antagonism, synergism, or additives effects; therefore, it is important to know the interaction involved in each mixture used. In this way, this work has been developed to assess possible interactions of the association of the herbicides flumioxazin and pyroxasulfone applied in pre-emergence conditions, as well as assessing the effectiveness of the mixture control in Guinea grass (Panicum maximum). The study was conducted in greenhouse conditions in 5 L plastic pots, and the treatments consisted of a 4 x 4 factorial design: four flumioxazin doses (0, 50, 100, and 200 g ha-1) and four pyroxasulfone doses (0, 50, 100, and 200 g ha-1). The experimental design was the randomized block, with percentage control and residual dry mass evaluations at 35 days after application (DAA). The interaction data were analyzed using the Colby's model, and the control effectiveness data were analyzed using the F-test, followed by Tukey test, when significant. The effectiveness of the association between the herbicides flumioxazin and pyroxasulfone on Guinea grass was proven when applied in pre-emergence conditions with averages above 90% of control. The interaction between the herbicides flumioxazin and pyroxasulfone has been considered additive by Colby's model.(AU)

A infestação de plantas daninhas de difícil controle em uma cultura exerce efeitos negativos diretos no seu crescimento e desenvolvimento, competindo por água, luz e nutrientes, além de dificultar a colheita e, no caso específico da cana-de-açúcar, pode reduzir a longevidade do canavial. Normalmente, a mistura formulada de herbicidas em condições de pré-emergência é utilizada na cultura de cana-de-açúcar, para se alcançar maior espectro de ação, longo efeito residual e redução de custos. No entanto, uma mistura de duas moléculas pode resultar em efeitos sinérgicos, antagônicos ou aditivos, portanto, é importante conhecer a interação envolvida em cada mistura utilizada. Desta forma, este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar possíveis interações da associação dos herbicidas flumioxazin e pyroxasulfone aplicados em condições de pré-emergência, bem como avaliar a eficácia de controle da mistura em capim-colonião (Panicum maximum). O experimento foi realizado em condição de casa-de-vegetação em vasos plásticos com capacidade de 5 L, e os tratamentos constaram de esquema fatorial 4 x 4, quatro doses do herbicida flumioxazin (0, 50, 100 e 200 g ha-1) e quatro doses do herbicida pyroxasulfone (0, 50, 100 e 200 g ha-1). Adotou-se o esquema experimental de blocos ao acaso, com avaliações percentuais de controle, e massa seca residual aos 35 dias após a aplicação (DAA). Os dados da interação foram analisados utilizando-se o modelo de Colby, e os dados de eficácia de controle foram analisados por meio do teste F e do teste de Tukey. A eficácia da associação entre os herbicidas flumioxazin e pyroxasulfone sobre o capim-colonião foi comprovada na aplicação em condições de pré-emergência, com médias acima de 90% de controle. A interação dos herbicidas flumioxazin e pyroxasulfone foi considerada aditiva pelo modelo de Colby.(AU)

Lime sulfur to control citrus flat mite and its interactions with the entomopathogenic fungus Lecanicillium muscarium

Lime sulfur is one of the few products indicated to control Brevipalpus yothersi in Brazilian organic citrus orchards. Other strategies, such as the use of entomopathogenic fungi should be evaluated, and Lecanicillium muscarium is one of the basic choices for pest management. Knowledge of the interactions between lime sulfur and this entomopathogen is critical for developing control strategies. With this goal, it was conducted the toxicological characterization of lime sulfur to B. yothersi and the compatibility evaluation with L. muscarium. Finally, the effects of L. muscarium and lime sulfur mixtures on B. yothersi control were evaluated. Product evaluation for B. yothersi was done through direct and residual contact bioassay, and different concentrations of lime sulfur mixed in potato dextrose agar culture medium were used to evaluate compatibility with L. muscarium. Lime sulfur was effective against adults of B. yothersi and caused eggs unviability of up to 71.0%, at a dose of 80 L per 2,000 L of H2O. The lethal concentration (LC50 and LC99) of lime sulfur estimated for mite adults were 246.62 and 858.5 µg of sulfur per mL of H2O (ppm a.i.). Lime sulfur concentrations of 180 to 560 ppm a.i. showed promise for use in combination with L. muscarium. However, concentrations of 1,000 and 5,600 ppm significantly reduced colony size and the number of spores/colony. The mixture of 100 and 180 ppm a.i. of lime sulfur with L. muscarium (108 conidia·mL­1) was not able to reduce the lethal time of entomopathogen on B. yothersi.

Isobolographic analysis reveals antinociceptive synergism between Ph1 recombinant toxin and morphine in a model of cancer pain in C57BL/6J mice

Abstract Background: Phoneutria nigriventer venom contains Ph1. This toxin and its recombinant form have a remarkable analgesic potential that is associated with blockage of voltage-gated calcium channels and TRPA1 receptors. Although morphine is a mainstay drug to treat moderate and severe pain related to cancer, it has serious and dose-limiting side effects. Combining recombinant Ph1 and morphine to treat pain is an interesting approach that has been gaining attention. Therefore, a quantitative and reliable method to establish the strength of the antinociceptive interaction between these two substances is necessary. The present study was designed to investigate the nature of the functional antinociceptive (analgesic) interaction between Ph1 recombinant toxin and morphine in a model of cancer pain. Methods: Melanoma was produced by intraplantar inoculation of B16-F10 cells into the right paw of C57BL/6J mice. Von Frey filaments measured the paw-withdrawal threshold after intrathecal administration of morphine, recombinant Ph1, and their combination. Thermal hyperalgesia was assessed using Hargreaves apparatus. The degree of interaction was evaluated using isobolographic analysis. Spontaneous and forced motor performance was assessed with the open-field and rotarod tests, respectively. Results: Co-administration of recombinant Ph1 and morphine synergistically reverses the melanoma-induced mechanical hyperalgesia. The potency of the mixture, measured as the effective dose to reach 50% of maximum possible effect (MPE) in ameliorating mechanical hyperalgesia, was about twice fold higher than expected if the interaction between morphine and recombinant Ph1 was merely additive. Treatment with the combination at doses necessary to reach 50% of MPE caused no spontaneous nor forced motor alterations. Conclusion: The combinatorial use of recombinant Ph1 and morphine allows significant and effective dose reduction of both agents, which has translational potential for opioid-sparing approaches in pain management related to cancer.

Isobolographic analysis reveals antinociceptive synergism between Phα1ß recombinant toxin and morphine in a model of cancer pain in C57BL/6J mice

Background: Phoneutria nigriventer venom contains Phα1ß. This toxin and its recombinant form have a remarkable analgesic potential that is associated with blockage of voltage-gated calcium channels and TRPA1 receptors. Although morphine is a mainstay drug to treat moderate and severe pain related to cancer, it has serious and dose-limiting side effects. Combining recombinant Phα1ß and morphine to treat pain is an interesting approach that has been gaining attention. Therefore, a quantitative and reliable method to establish the strength of the antinociceptive interaction between these two substances is necessary. The present study was designed to investigate the nature of the functional antinociceptive (analgesic) interaction between Phα1ß recombinant toxin and morphine in a model of cancer pain. Methods: Melanoma was produced by intraplantar inoculation of B16-F10 cells into the right paw of C57BL/6J mice. Von Frey filaments measured the paw-withdrawal threshold after intrathecal administration of morphine, recombinant Phα1ß, and their combination. Thermal hyperalgesia was assessed using Hargreaves apparatus. The degree of interaction was evaluated using isobolographic analysis. Spontaneous and forced motor performance was assessed with the open-field and rotarod tests, respectively. Results: Co-administration of recombinant Phα1ß and morphine synergistically reverses the melanoma-induced mechanical hyperalgesia. The potency of the mixture, measured as the effective dose to reach 50% of maximum possible effect (MPE) in ameliorating mechanical hyperalgesia, was about twice fold higher than expected if the interaction between morphine and recombinant Phα1ß was merely additive. Treatment with the combination at doses necessary to reach 50% of MPE caused no spontaneous nor forced motor alterations. Conclusion: The combinatorial use of recombinant Phα1ß and morphine allows significant and effective dose reduction of both agents, which has translational potential for opioid-sparing approaches in pain management related to cancer.(AU)

Interaction of acetyl-CoA carboxylase enzyme inhibiting herbicides with auxin herbicides on ryegrass / Interação de herbicidas inibidores da enzima acetil-CoA carboxilase com herbicidas auxínicos sobre azevém

This study aimed to evaluate the antagonistic effect of the mixture ofacetyl coenzyme-A carboxylase (ACCase) enzyme inhibiting herbicides and auxin herbicides in Lolium multiflorum and to determine mechanisms to mitigate this possible effect. The first experiments were conducted by associating the herbicide clethodim (108 g a.i. ha1), quizalofop-p-ethyl (54 g a.i. ha1), and clethodim + quizalofop-p-ethyl (108+54 g a.i. ha1) with 2,4-D (1005 g a.e. ha1) or triclopyr (720 g a.e. ha1), in addition to the sole application of the respective graminicides. Another experiment included clethodim (54; 81; 108; 162; 216 g a.i. ha1), quizalofop-p-ethyl (27; 40.5; 54; 81; 108 g a.i. ha1), and clethodim + quizalofop-p-ethyl (54+27; 81+40.5; 108+54; 162+81; 216+108 g a.i. ha1) mixed with 2,4-D (1005 g a.e. ha1), or triclopyr (720 g a.e. ha1), in addition to the control treatments without herbicide application. In the second experiment, herbicides clethodim (108 g a.i. ha1), quizalofop-p-ethyl (54 g a.i. ha1), and clethodim + quizalofop-p-ethyl (108+54 g a.i. ha1) in combination with the herbicides 2,4-D (1005 g a.e. ha1) or triclopyr (720 g a.e. ha1)had malathion (1000 g a.i. ha1) or glyphosate (720 g a.e. ha1) mixed, in addition to the sole applications of the graminicides. The herbicide clethodim + quizalofop-p-ethyl did not present an antagonistic interaction with the auxin herbicides, and obtained 85% weed control. To obtain control similar to the sole application of this graminicide, the dose of the herbicide clethodim needs to be increased by 20%. However, the mixture of the herbicide quizalofop-p-ethyl with 2,4-D and triclopyr affects the ryegrass control. The use of strategies that increase the absorption of ACCase herbicides or the inhibition of P450 enzymes are ways to mitigate the antagonistic effect caused by the association of the two auxin herbicides.(AU)

O objetivo do trabalho foi avaliar o efeito antagônico da mistura de herbicidas inibidores da enzima ACCase e herbicidas auxínicos em Lolium multiflorum e determinar mecanismos de mitigação deste possível efeito. No primeiro momento foram conduzidos experimentos associando o herbicida clethodim (108 g i.a. ha-1), quizalofop-p-ethyl (54 g i.a. ha-1) e clethodim + quizalofop-p-ethyl (108 + 54 g i.a. ha-1) com 2,4-D (1005 g e.a. ha-1) ou triclopyr (720 g e.a. ha-1), além da aplicação isolada dos respectivos graminicidas. Outro experimento contou com clethodim (54; 81; 108; 162; 216 g i.a ha-1), quizalofop-p-ethyl (27; 40,50; 54; 81; 108 g i.a ha-1) e clethodim + quizalofop-p-ethyl (54 + 27; 81 + 40,50; 108 +54; 162 +81; 216 + 108 g i.a ha-1) em mistura com 2,4-D (1005 g e.a ha-1) ou triclopyr (720 g e.a. ha-1), além das testemunhas sem aplicação herbicida. No segundo momento os herbicidas clethodim (108 g i.a. ha-1), quizalofop-p-ethyl (54 g i.a. ha-1) e clethodim + quizalofop-p-ethyl (108 + 54 g i.a. ha-1) em associação com os herbicidas 2,4-D (1005 g e.a ha-1) ou triclopyr (720 g e.a. ha-1), contaram com adição de malathion (1000 g i.a. ha-1) ou glyphosate (720 g e.a. ha-1), além das aplicações isoladas dos graminicidas. O herbicida clethodim + quizalofop-p-ethyl não apresentou interação antagônica com os herbicidas auxínicos, obtendo controle de 85%. Já para o herbicida clethodim é necessário o aumento de dose em 20 % é capaz de obter controle similar a aplicação isolada deste graminicida. Porém para o herbicida quizalofop-p-ethyl a mistura com os herbicidas 2,4-D e triclopyr repercute na diminuição do controle do azevém. O uso de estratégias que aumente a absorção do herbicida inibidor de ACCase ou a inibição das enzimas P450 são formas de mitigar o efeito antagônico causado pela associação destes dois tipos de herbicidas.(AU)

Caesalpinia pulcherrima seed galactomannan on rheological properties of dairy desserts / Efeito da galactomanana da semente de Caesalpinia pulcherrima sobre as propriedades reológicas de sobremesas lácteas

Dairy desserts containing Caesalpinia pulcherrima seed galactomannan were evaluated to determine their static and dynamic rheological behaviors. Variations in consistency index (k), flow behavior (n), yield stress and thixotropy of the desserts indicated that the galactomannan caused an increase in the shear stress and apparent viscosity of the system. All samples exhibited shear-thinning behavior with flow behavior index values (n) between 0.06 and 0.37. Dynamic rheological behavior was evaluated for MD (high solid levels) and MD/2 (half the amount of solids) groups, and both G and G moduli were depended on the frequency. The MD and MD/2 groups showed variations in the elastic modulus (G) throughout the temperature range (mainly at 50 °C), showing greater sensitivity at high temperatures. C. pulcherrima galactomannan was able to promote synergism with starch, milk protein and sucrose and to improve the development of stronger and more resistant gels.(AU)

Sobremesas lácteas contendo galactomanana de semente de Caesalpinia pulcherrima tiveram suas propriedades reológicas estáticas e dinâmicas avaliadas. As variações nos índices de consistência (K) e comportamento de fluxo (n), assim como na tensão inicial de fluxo e na tixotropia das sobremesas mostraram o efeito da galactomanana sobre a tensão de cisalhamento e viscosidade aparente dos sistemas lácteos. Todas as sobremesas exibiram comportamento pseudoplástico, com índices de comportamento de fluxo (n) variando entre 0,06 e 0,37. A reologia dinâmica dos grupos MD (alto teor de sólidos) e MD/2 (metade do teor de sólidos), mostrou G > G e módulos dependentes da frequência e da temperatura. Alterações químicas nos componentes das sobremesas foram observadas a 50° C em virtude da maior sensibilidade dos valores de G e G a partir dessa temperatura. A galactomanana de C. pulcherrima contribuiu para o desenvolvimento de géis mais fortes e resistentes nas sobremesas lácteas, bem como mostrou sinergismo com amido, proteína do leite e sacarose.(AU)

Combined effects of garlic essential oil and allyl isothiocyanate against Escherichia coli O157: H7 in vitro and in pork sausage / Efeito combinado de óleo essencial de alho e isotiocianato de alila contra Escherichia coliO157: H7 in vitro e em linguiça suína

Escherichia coli O157:H7 is a toxigenic serotype of E. coli and has been associated with foodborne outbreaks involving meat products, vegetables and fresh produces worldwide. Salts for curing are usually employed as antimicrobials in the production of pork sausages. However, salts do not have a significant inhibitory effect on enterobacteria. Due to the growing demand for natural foods, the use of essential oils has been proposed as natural antimicrobials in food. This study aimed to evaluate the effects of garlic essential oil (GO) and allyl isothiocyanate (AITC) against E. coli O157:H7 in vitro and in pork sausage. The Minimal Inhibitory Concentration (MIC) and Minimal Bactericidal Concentration (MBC) of these oils, alone and in combination, against E. coli O157:H7 were determined. Pork sausage was inoculated with 8log CFU/g E. coli O157:H7 and different combinations of GO and AITC. A control group was performed without essential oils. Sausages were packaged and stored at 6°C for 20 days. E. coli O157:H7 population and instrumental color (L*, a*, b*, C* and hue) determinations were performed at 5-day intervals. AITC showed lower MIC and MBC than GO. When combined, AITC and GO showed a synergistic effect. Treatments T3 and T4 showed 1,01log CFU and 1,87log CFU reduction of E. coli O157:H7 compared to control. The redness and the chroma of sausages treated with AITC and GO increased during storage. Together, GO and AITC caused minor changes in taste and flavor of sausages, and were able to reduce the population of E. coli O157:H7 and to maintain the red color of sausage during storage.

Escherichia coli O157:H7 é um sorotipo toxigênico de E. coli associado mundialmente a surtos de doenças alimentares causadas por produtos cárneos. Os sais de cura são normalmente empregados como antimicrobianos na fabricação de linguiças, entretanto, possuem pouco efeito inibitório sobre enterobactérias como E. coli. Devido à crescente demanda por produtos naturais, o uso de óleos essenciais tem sido proposto como antimicrobiano natural em alimentos. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do óleo essencial de alho (GO) e isotiocianato de alila (AITC) contra E. coli O157:H7 in vitro e em linguiça. As concentrações inibitória mínima (MIC) e bactericida mínima (MBC) dos óleos, isolados e em combinação, contra E. coli O157:H7 foram determinadas in vitro. Lotes de linguiça foram inoculados com 8log UFC/g E. coli O157:H7 e diferentes concentrações de GO + AITC e estocados a 6°C por 20 dias. Contagens de E. coli O157:H7 e determinação de cor instrumental (L*, a*, b*, C* e hue) foram realizadas a cada 5 dias. Nos testes in vitro, AITC mostrou maior ação inibitória que GO, havendo efeito sinérgico dos óleos quando combinados. Os tratamentos T3 e T4 mostraram redução de 1,01log UFC e 1,87log UFC de E. coli O157:H7 comparados ao controle. A intensidade de cor vermelha e a saturação de cor aumentaram durante a estocagem nas linguiças adicionadas de óleos essenciais. A adição dos óleos GO + AITC causou mínima alteração no sabor e na aparência das linguiças e foi capaz de reduzir a população de E. coli O157:H7 no produto cárneo, mostrando potencial para uso como conservante natural nesse tipo de alimento.

Combined effects of garlic essential oil and allyl isothiocyanate against Escherichia coli O157: H7 in vitro and in pork sausage / Efeito combinado de óleo essencial de alho e isotiocianato de alila contra Escherichia coliO157: H7 in vitro e em linguiça suína

Escherichia coli O157:H7 is a toxigenic serotype of E. coli and has been associated with foodborne outbreaks involving meat products, vegetables and fresh produces worldwide. Salts for curing are usually employed as antimicrobials in the production of pork sausages. However, salts do not have a significant inhibitory effect on enterobacteria. Due to the growing demand for natural foods, the use of essential oils has been proposed as natural antimicrobials in food. This study aimed to evaluate the effects of garlic essential oil (GO) and allyl isothiocyanate (AITC) against E. coli O157:H7 in vitro and in pork sausage. The Minimal Inhibitory Concentration (MIC) and Minimal Bactericidal Concentration (MBC) of these oils, alone and in combination, against E. coli O157:H7 were determined. Pork sausage was inoculated with 8log CFU/g E. coli O157:H7 and different combinations of GO and AITC. A control group was performed without essential oils. Sausages were packaged and stored at 6°C for 20 days. E. coli O157:H7 population and instrumental color (L*, a*, b*, C* and hue) determinations were performed at 5-day intervals. AITC showed lower MIC and MBC than GO. When combined, AITC and GO showed a synergistic effect. Treatments T3 and T4 showed 1,01log CFU and 1,87log CFU reduction of E. coli O157:H7 compared to control. The redness and the chroma of sausages treated with AITC and GO increased during storage. Together, GO and AITC caused minor changes in taste and flavor of sausages, and were able to reduce the population of E. coli O157:H7 and to maintain the red color of sausage during storage.(AU)

Escherichia coli O157:H7 é um sorotipo toxigênico de E. coli associado mundialmente a surtos de doenças alimentares causadas por produtos cárneos. Os sais de cura são normalmente empregados como antimicrobianos na fabricação de linguiças, entretanto, possuem pouco efeito inibitório sobre enterobactérias como E. coli. Devido à crescente demanda por produtos naturais, o uso de óleos essenciais tem sido proposto como antimicrobiano natural em alimentos. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do óleo essencial de alho (GO) e isotiocianato de alila (AITC) contra E. coli O157:H7 in vitro e em linguiça. As concentrações inibitória mínima (MIC) e bactericida mínima (MBC) dos óleos, isolados e em combinação, contra E. coli O157:H7 foram determinadas in vitro. Lotes de linguiça foram inoculados com 8log UFC/g E. coli O157:H7 e diferentes concentrações de GO + AITC e estocados a 6°C por 20 dias. Contagens de E. coli O157:H7 e determinação de cor instrumental (L*, a*, b*, C* e hue) foram realizadas a cada 5 dias. Nos testes in vitro, AITC mostrou maior ação inibitória que GO, havendo efeito sinérgico dos óleos quando combinados. Os tratamentos T3 e T4 mostraram redução de 1,01log UFC e 1,87log UFC de E. coli O157:H7 comparados ao controle. A intensidade de cor vermelha e a saturação de cor aumentaram durante a estocagem nas linguiças adicionadas de óleos essenciais. A adição dos óleos GO + AITC causou mínima alteração no sabor e na aparência das linguiças e foi capaz de reduzir a população de E. coli O157:H7 no produto cárneo, mostrando potencial para uso como conservante natural nesse tipo de alimento.(AU)

EFEITO DA ASSOCIAÇÃO DE TIABENDAZOL, LEVAMISOL E IVERMECTINA IN VITRO COM ACETATO DE CARVACRILA EM EMULSÃO COM E SEM MATRIZ DE ALGINATO DE SÓDIO SOBRE Haemonchus contortus

A resistência dos parasitos aos anti-helmínticos comerciais tem impulsionado a pesquisa de novas formas de controle, dentre essas o uso de biocompostos, associação de compostos e modificações de formulação. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da associação dos anti-helmínticos sintéticos, tiabendazol (TBZ), levamisol (LEV) e ivermectina (IVM) com acetato de carvacrila (AC) em emulsão com e sem matriz de alginato de sódio sobre Haemonchus contortus. As emulsões foram avaliadas quanto a estabilidade, tamanho de partícula, potencial Zeta, eficiência de encapsulamento e liberação. O efeito anti-helmíntico das emulsões foi avaliado no teste de eclosão de ovos (TEO) para AC e TBZ e teste de desenvolvimento larvar (TDL) para AC, IVM e LEV, utilizando H. contortus multirresistente, isolado Kokstad. O efeito das emulsões sobre os ovos foi visualizado por microscopia confocal de varredura a laser (MCL). Os resultados foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e seguido pelo teste Tukey (P<0,05). A concentração efetiva para inibir 50% da eclosão dos ovos (CE50) no TEO foi calculada a partir do programa SPSS 17.0 para Windows. As emulsões foram avaliadas pelo índice de combinação (IC) por meio do programa CompuSyn 1.0. As emulsões de AC com TBZ (TBZ/AC) com e sem matriz apresentaram perfil multimodal, com sua maioria em escala nanométrica. O potencial Zeta mostrou maior estabilidade nas emulsões com matriz. A eficiência de encapsulamento da matriz de alginato de sódio em TBZ/AC foi de 80,25% e LEV/AC de 89,73%. No TEO, AC apresentou CE50 de 0,65 mg/mL, TBZ de 0,01 mg/mL, TBZ/AC sem matriz apresentou IC médio de 0,55 e TBZ/AC com matriz de 0,36, demonstrando sinergismo em ambos. No TDL, a IVM apresentou CE50 de 8,4 x 10-4 mg/mL, LEV 0,014 mg/mL e AC 0,38 mg/mL. IVM/AC apresentou IC médio de 0,75, LEV/AC sem matriz de 0,4 e LEV/AC com matriz 0,93. Na MCL dos ovos no tratamento com TBZ (0,05 mg/mL) não houve formação de larva. Nos ovos tratados com AC (8 mg/mL) evidenciou-se larva em formação eclodindo; em TBZ/AC sem matriz foi visualizada larva não completamente formada, cascas de ovos rompidas; nos ovos tratados com TBZ/AC com matriz evidenciou-se a ausência da estrutura da casca de ovos e larvas desenvolvidas e imóveis. Conclui-se que a emulsão TBZ/AC apresentou interação sinérgica e com a adição da matriz de alginato o efeito foi potencializado, com exceção da maior concentração testada. Além disso, a matriz trouxe estabilidade ao produto encorajando seu aperfeiçoamento para obtenção de eficácia mais elevada.

Parasite resistance to commercial anthelmintics has driven the search for new forms of control, including the use of biocompounds, the combination of compounds, and formulation modifications. The present study aimed to evaluate the effect of the association of synthetic anthelmintics, thiabendazole (TBZ), levamisole (LEV), and ivermectin (IVM) with carvacryl acetate (CA) in emulsion with and without sodium alginate matrix on Haemonchus contortus. Emulsions were evaluated for stability, particle size, Zeta potential, encapsulation efficiency, and release. The anthelmintic effect of the emulsions was evaluated in the egg hatch test (EHT) for CA and TBZ and larval development test (LDT) for CA, IVM, and LEV, using multiresistant H. contortus, isolated from Kokstad. The effect of emulsions on eggs was visualized by confocal laser scanning microscopy (CLSM). The results were submitted to analysis of variance (ANOVA) and followed by the Tukey test (P<0.05). The effective concentration to inhibit 50% of egg hatching (EC50) in the EHT was calculated using the SPSS 17.0 program for Windows. Emulsions were evaluated by the combination index (CI) using the CompuSyn 1.0 program. The emulsions of CA with TBZ (TBZ/CA) with and without matrix showed a multimodal profile, with most of them on the nanometric scale. Zeta potential showed greater stability in matrix emulsions. The encapsulation efficiency of the sodium alginate matrix in TBZ/CA was 80.25% and LEV/CA was 89.73%. In EHT, CA had EC50 of 0.65 mg/mL, TBZ of 0.01 mg/mL, TBZ/CA without matrix showed mean CI of 0.55, and TBZ/CA with the matrix of 0.36, demonstrating synergism in both. In LDT, IVM presented EC50 of 8.4 x 10-4 mg/mL, LEV 0.014 mg/mL and CA 0.38 mg/mL. IVM/CA had a mean CI of 0.75, LEV/CA without the matrix of 0.4, and LEV/CA with the matrix of 0.93. In the CLSM of eggs treated with TBZ (0.05 mg/mL), there was no larvae formation. Eggs treated with CA (8 mg/mL) showed larvae in formation, hatching; in TBZ/CA without matrix, larva not completely formed, broken eggshells were visualized; in eggs treated with TBZ/CA with matrix, the absence of eggshell structure and developed and immobile larvae was evident. It is concluded that the TBZ/CA emulsion showed a synergistic interaction and with the addition of the alginate matrix the effect was enhanced, except for the highest concentration tested. In addition, the matrix brought stability to the product, encouraging its improvement to obtain higher efficacy.

Efeito da antibioticoterapia intramamária combinada ou não a sistêmica em vacas com mastite subclínica no momento da secagem

A mastite bovina é a doença mais preocupante e onerosa que afeta a pecuária leiteira ao redor do mundo, além de ser a principal causa do uso de antimicrobianos em fazendas leiteiras. Estratégias para a prevenção da mastite bovina, veem sendo estudadas ao longo dos anos, a fim, de minimizar os impactos econômicos da doença dentro do sistema produtivo. Investimentos em estratégias preventivas, para a doença continuam sendo a melhor escolha. Dentre as estratégias de prevenção, a terapia da vaca seca é um dos pilares chaves para a diminuição da incidência de casos de mastite no período seco e no pós-parto, principalmente nas vacas com mastite subclínica na secagem. O objetivo do presente estudo, compreende avaliar o efeito da associação entre antibioticoterapia intramamária para vaca seca e antibioticoterapia sistêmica sobre a taxa de cura celular e bacteriológica de vacas com quarto mamário com mastite subclínica na secagem. No momento da secagem as vacas foram selecionadas obedecendo cinco critérios para participar do estudo: (1) ter um quarto mamário com escorre maior ou igual a uma cruz no California Mastitis Test, (2) não ter sinal clínico de enfermidades, (3) ter período seco previsto de no mínimo 40 dias e no máximo 80 dias, (4) não estar com mastite clínica no momento da secagem e (5) não estar sob tratamento com antibióticos. As vacas de cada rebanho foram blocadas de acordo com a ordem de parto e escorre no CMT, sendo distribuídas aleatoriamente a um dos seguintes tratamentos: os animais do grupo controle n= 31 (IMM) receberam na secagem somente terapia IMM, com antibiótico vaca seca a base de cloridrato de ceftiofur 500 mg (Spectramast vaca seca, Pfizer saúde animal) e selante de tetos a base de subnitrato de bismuto 4 gramas (Teatseal, Zoetis). O grupo tratado n= 31 (IMM + parenteral), recebeu além da terapia vaca seca, a aplicação em dose única, pela via intra-muscular de 4.4 mg/Kg de sulfato de gentamicina (Pangram, Virbac). Vacas com mastite subclínica na secagem submetidas a associação entre antibiótico IMM com sistêmico tendem a apresentar menor ECS e redução de crescimento bacteriano no pós-parto. Mais estudos são necessários para confirmar este efeito. A perda de condição corporal entre a secagem e as primeiras semanas pós-parto, assim como quadros de hiperqueratose severa, provocam aumento do ECS no pós parto.

Bovine mastitis is the most worrying and costly disease that affects dairy farming around the world. In addition, to being the main cause of the use of antimicrobials in dairy farms. Strategies for the prevention of bovine mastitis have been studied over the years to minimize the economic impacts of the disease within the production system. Investments in preventive strategies for the disease remain the best choice. Among the prevention strategies, dry cow therapy is one of the key pillars for reducing the incidence of cases of mastitis in the dry period and postpartum, especially in cows with subclinical mastitis at dry-off. The objectives of the present study, is to evaluate the effect of the association between intramammary antibiotic therapy for dry cows and systemic antibiotic therapy on the cellular and bacteriological cure rate of cows with a mammary quarter with subclinical mastitis at dry-off. At the time of drying, cows were selected according to five criteria to participate in the study: (1) have a mammary quarter with scorre greater or equal a one in the California Mastitis Test, (2) no clinical sign of disease, (3) dry period of at least 40 days and maximum 80 days, (4) without clinical mastitis at the time of drying and (5) not being treated with antibiotics. The cows in each herd were blocked according to the order of parturition and scorre in the CMT, being randomly assigned to one of the following treatments: animals in the control group n=31 (IMM) received only intramammary therapy in drying, with dry cow antibiotic 500 mg ceftiofur hydrochloride (Dry Cow Spectramast, Pfizer animal health) and 4 gram bismuth subnitrate teat sealant (Teatseal, Zoetis). The treated group n=31 (IMM + parenteral) received, in addition to dry cow therapy, a single dose of 4.4 mg/Kg of gentamicin sulfate (Pangram, Virbac) by intramuscular. Cows with subclinical mastitis during drying submitted to an association between intramammary antibiotic and systemic antibiotic during dry-off tend to have lower ECS and higher bacterial cure rate in the postpartum period. More studies are needed to confirm this effect. The loss of body condition between dry-off and the first weeks postpartum and severe hyperkeratosis causes an increase in ECS in the postpartum period.

Synergistic effects of sulbactam in multi-drug-resistant Acinetobacter baumannii

Abstract Acinetobacter baumannii is a frequently isolated etiologic agent of nosocomial infections, especially in intensive care units. With the increase in multi-drug resistance of A. baumannii isolates, finding appropriate treatment alternatives for infections caused by these bacteria has become more difficult, and available alternate treatments include the use of older antibiotics such as colistin or a combination of antibiotics. The current study aimed to evaluate the in vitro efficacy of various antibiotic combinations against multi-drug resistant A. baumannii strains. Thirty multi-drug and carbapenem resistant A. baumannii strains isolated at the Ankara Training and Research Hospital between June 2011 and June 2012 were used in the study. Antibiotic susceptibility tests and species-level identification were performed using conventional methods and the VITEK 2 system. The effects of meropenem, ciprofloxacin, amikacin, tigecycline, and colistin alone and in combination with sulbactam against the isolates were studied using Etest (bioMérieux) in Mueller-Hinton agar medium. Fractional inhibitory concentration index (FIC) was used to determine the efficacy of the various combinations. While all combinations showed a predominant indifferent effect, a synergistic effect was also observed in 4 of the 5 combinations. Synergy was demonstrated in 43% of the isolates with the meropenem-sulbactam combination, in 27% of the isolates with tigecycline-sulbactam, and in 17% of the isolates with colistin-sulbactam and amikacin-sulbactam. No synergy was detected with the sulbactam-ciprofloxacin combination and antagonism was detected only in the sulbactam-colistin combination (6.66% of the isolates). Antibiotic combinations can be used as an alternative treatment approach in multi-drug resistant A. baumannii infections.(AU)

ASSOCIAÇÃO ENTRE LACTONAS MACROCÍCLICAS CONTRA HAEMONCHUS CONTORTUS

A resistência de nematodas gastrointestinais (NGIs) aos anti-helmínticos (AHs) químicos é um problema de caráter global, não havendo métodos alternativos suficientemente efetivos. Frente a isso, há a associação de diferentes AHs e o uso de moduladores de resistência. Porém, a associação de diferentes AHs pode ser inefetivo em situações de resistência à múltiplas drogas, enquanto que o uso de moduladores ainda é limitado pela alta variabilidade de resposta clínica, toxicidade e diferença de farmacocinética entre o modulador e a droga. Posto isso, outra alternativa que pode possibilitar o aumento de eficácia contra NGIs resistentes é associação de moléculas pertencentes ao mesmo grupo químico. Possível efeito aditivo, sinérgico ou antagônico, pode ser observado nas associações, sendo resultado das distintas farmacocinéticas, farmacodinâmicas e interações com mecanismos moleculares de resistência. No entanto, a metodologia estatística normalmente empregada pode limitar a observação dos efeitos, isso, considerando apenas o uso da média simples da eficácia obtida, compara a média simples esperada, de acordo com a associação das moléculas em uma única proporção. Portanto, o presente trabalho teve por objetivo verificar se há efeito aditivo, antagônico ou sinérgico, da associação de diferentes lactonas macrocíclicas (LMs) contra Haemonchus contortus. Larvas infectantes (L3) de dois isolados, caracterizados como sensível (RsHco1) e resistente (FAMEZHco1) à ivermectina, foram utilizados no teste de inibição da migração larval (TIML). Após estimada a concentração efetiva sobre 50% da população (EC50) de abamectina (ABA), eprinomectina, (EPR), ivermectina (IVM) e moxidectina (MOX), para ambos os isolados, as associações foram delineadas pelo modelo cúbico especial e quadrático de experimento de mistura simplex-centroid. Efeito sinérgico foi observado na associação EPR+MOX contra o isolado sensível e nas associações EPR+MOX e IVM+MOX contra o isolado resistente, sendo também observado efeito antagônico da associação EPR+IVM+MOX. No isolado sensível foi verificado aumento de inibição em proporções maiores de EPR e em proporções menores das demais drogas, comparada à mistura de referência (mistura das quatro LMs em igual proporção 0,25:1), enquanto que para o isolado resistente inibição superior à da mistura de referência foi observada em maiores proporções de IVM e em menores proporções de MOX e EPR. O efeito sinérgico de EPR+MOX, contra o isolado sensível, de ABA+IVM, EPR+MOX e IVM+MOX, contra o isolado resistente, e o efeito antagônico de EPR+IVM+MOX, são dependentes da associação de drogas com diferentes potências e das proporções utilizadas, sendo EPR e IVM as moléculas de maior impacto nesses efeitos.

The resistance of gastrointestinal nematodes (NGIs) to chemical anthelmintics (AHs) is a global problem, with no sufficiently effective alternative methods. Faced with this, there is the association of different AHs and the use of resistance modulators. However, the association of different AHs can be ineffective in situations of resistance to multiple drugs, while the use of modulators is still limited by the high variability of clinical response, toxicity and pharmacokinetic difference between the modulator and the drug. That said, another alternative that can enable increased efficiency against resistant NGIs is the association of molecules belonging to the same chemical group. Possible additive, synergistic or antagonistic effect, can be observed in the associations, resulting from the different pharmacokinetics, pharmacodynamics and interactions with molecular mechanisms of resistance. However, the statistical methodology normally used can limit the observation of effects, this, considering only the use of the simple average of the obtained efficiency, compares the simple average expected, according to the combination of the molecules in a single proportion. Therefore, the present study aimed to verify whether there is an additive, antagonistic or synergistic effect, of the combination of different macrocyclic lactones (MLs) against Haemonchus contortus. Infectious larvae (L3) from two isolates, characterized as sensitive (RsHco1) and resistant (FAMEZHco1) to ivermectin, were used in the larval migration inhibition test (TIML). After estimating the effective concentration on 50% of the population (EC50) of abamectin (ABA), eprinomectin, (EPR), ivermectin (IVM) and moxidectin (MOX), for both isolates, the combinations were outlined by the special cubic and quadratic model simplex-centroid mixing experiment. Synergistic effect was observed in the EPR + MOX combination against the sensitive isolate and in the EPR + MOX and IVM + MOX combinations against the resistant isolate, and an antagonistic effect of the EPR + IVM + MOX combination was also observed. In the sensitive isolate, an increase of inhibition was observed in higher proportions of EPR and in smaller proportions of the other drugs, compared to the reference mixture (mixture of the four LMs in equal proportion - 0.25: 1), whereas for the resistant isolate superior inhibition that of the reference mixture was observed in higher proportions of IVM and in lower proportions of MOX and EPR. The synergistic effect of EPR + MOX, against the sensitive isolate, of ABA + IVM, EPR + MOX and IVM + MOX, against the resistant isolate, and the antagonistic effect of EPR + IVM + MOX, are dependent on the association of drugs with different potencies and proportions used, with EPR and IVM being the molecules with the greatest impact on these effects.

Phytochemical analysis and modulation in aminoglycosides antibiotics activity by Lantana camara L / Análise fitoquímica e modulação sobre a atividade antibiótica de aminoglicosídeos por Lantana camara L

Several plants have been evaluated not only for alone antimicrobial activity, but as resistance-modifying agent. This work is the first on the modulation of antibiotic activity by Lantana camara L. extracts against multiresistant strains of Escherichia coli and Staphylococcus aureus. The antibacterial activities of leaf and root ethanol extracts alone or in association with aminoglycosides were determined against bacterial strains by a microdilution test. The minimum inhibitory concentration (MIC) of the extracts was compared with of the aminoglycosides. Phytochemical prospection revealed the presence of quinones, steroids, flavonoids, saponins, tannins, triterpenoids and alkaloids. The results showed antibacterial activities of the extracts and synergistic effects combined with aminoglycosides. The most expressive effects were obtained with root extract but gentamicin or but neomycin against E. coli with MICs decreased (312 to 5 µg mL-1). The data from this study are indicative of the antibacterial activity of L. camaras extracts and its potential in modifying the resistance of aminoglycosides analyzed.(AU)

Este trabalho relata a modulação da atividade antibiótica por extratos de Lantana camara L. frente a linhagens multirresistentes de Escherichia coli e Staphylococcus aureus. Diversas plantas têm sido avaliadas não somente para a atividade antimicrobiana, mas também para a capacidade de modificar a resistência antibiotica. Atividades antibacterianas dos extratos etanólicos das folhas e raízes isoladamente ou em associação com aminoglicosídeos foram determinadas contra linhagens bacterianas por teste de microdiluição. As concentrações inibitórias mínimas (CIM) dos extratos foram comparadas com a dos aminoglicosídeos. A prospecção fitoquímica revelou a presença de quinonas, esteroides, flavonoides, saponinas, taninos, triterpenoides e alcaloides. Os resultados mostraram atividade antibacteriana dos extratos e efeitos sinérgicos combinados com aminoglicosídeos. Os efeitos mais expressivos foram obtidos pelo extrato das raízes em associação com a gentamicina ou neomicina, contra E. coli Ec27 com diminuições das CIMs (312-5 g mL-1). Os dados deste estudo são indicativos da atividade antibacteriana dos extratos de L. camara e seu potencial para modificar a resistência aos aminoglicosídeos analisados.(AU)

Ação antimicrobiana de produtos naturais e sintéticos e efeito sinérgico com penicilina, in vitro, contra Corynebacterium pseudotuberculosis biovar ovis

Infecções por Corynebacterium pseudotuberculosis são comuns em pequenos ruminantes e representam risco ocupacional para humanos. Pelas opções de tratamentos serem escassas e apresentarem alto índice de recidiva ou baixa eficácia, a busca por novas alternativas se torna importante. Alguns compostos sintéticos - como os dideoxinucleotídeos (ddNTPs) - e naturais - como própolis, cinamaldeído, eugenol, carvacrol e timol - possuem efeito antimicrobiano comprovado para diferentes bactérias e fungos, porém não existem estudos em isolados de C. pseudotuberculosis. Foram realizados testes in vitro por cultivo em diluição seriada de cada um dos componentes supracitados para determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM), além de utilizá-los em conjunto com a penicilina para avaliação de possível sinergismo. A 23-dideoxiadenosina, 23-dideoxiguanina, própolis e cinamaldeído apresentaram ação antimicrobiana quando utilizados separadamente e também efeito sinérgico em conjunto com a penicilina. Estes resultados indicam potencial de utilização destes quatro produtos como alternativas de tratamento de C. pseudotuberculosis.

Corynebacterium pseudotuberculosis infections are common in small ruminants and present as an occupational hazard for humans. Treatment options are scarce and present high chances of recurrence or low efficacy, making the demand for new alternatives important. Some synthetic compounds, like dideoxynucleotides (ddNTPs), and natural compounds, such as propolis, cinnamaldehyde, eugenol, thymol and carvacrol, have verified antimicrobial effect for multiple strains of bacteria and fungi, but not against C. pseudotuberculosis. In vitro tests by culture in serial dilution of each compound mentioned were performed to determine a Minimum Inhibitory Concentration and Minimum Bactericidal Concentration (MIC and MBC), besides tests using them in association with penicillin for evaluation of possible synergism. 23-dideoxyadenosine, 23-dideoxyguanine, propolis and cinnamaldehyde presented antimicrobial action when used separately as well as synergic effect associated with penicillin. These results indicate a potential for therapeutic use of the four products as treatment options for C. pseudotuberculosis.

Prospecção e toxicidade de óleos essenciais de plantas da família Lamiaceae em Pseudomonas spp. isoladas de cães e perfil de resistência da bactéria

As afecções dermatológicas apresentam grande importância em pequenos animais, destacando-se as infecções pelo gênero Pseudomonas, que se apresenta resistente a maioria dos antimicrobianos utilizados na clínica médica. A resistência bacteriana é fonte de preocupação, aumentando as pesquisas em busca de novas opções terapêuticas, como as plantas medicinais, podendo-se citar a Família Lamiaceae. Assim, o objetivo do trabalho foi verificar a casuística de Pseudomonas aeruginosa em amostras de otites de cães recebidas pelo Laboratório Regional de Diagnóstico (LRD),determinar o perfil de resistência de Pseudomonas spp.a antimicrobianos e aos óleos essenciais de Origanum vulgare, Origanum majorana e Rosmarinus officinalis, avaliar um possível sinergismo dos óleos com antimicrobianos, assim como determinar a composição química dos óleos e a citotoxicidade destes em células MDBK e em espermatozóides, através dos métodos CASA e citometria de fluxo. Para o levantamento da casuística de otites registradas no LRD, avaliou-se todas as fichas de 2010 a 2018 de cães, sendo selecionadas aquelas com isolamento deP. aeruginosa. Os óleos essenciais utilizados no estudo, foram obtidos através de hidrodestilação por arraste à vapor, sendo testados nas concentrações de250g/mL-1.Para o antibiograma (Kirby-Bauer,1966) utilizou-se 13 fármacos, sendo que para avaliação da susceptibilidade de Pseudomonas spp. aos óleos essenciais e para a associação dos antimicrobianos com os óleos, o método de difusão em disco foi usado.Para avaliação da citotoxicidade, utilizou-se células renais (MDBK) e células espermáticas, sendo a toxicidade de MBDK avaliada pelo método MTT e dos espermatozóides por CASA e citometria de fluxo.P. aeruginosa esteve presente em 11% das amostras de otite canina recebidas entre 2010 e 2018 no LRD. Os isolados caninos de Pseudomonas spp. apresentaram alta taxa de multiresistência (46,7%)aos antimicrobianos, em especial aos B-lactâmicos, sendo sensíveis para Quinolonas, Gentamicina e Imipenem. Os óleos essenciais inibiram Pseudomonas spp., formando halos de inibição maiores para OERO seguido de OEOM e OEOV. Quando se avalio uos óleos essenciais com os antimicrobianos, observou-se sinergismo em 90% das associações. OEOV e OEOM apresentaram composição majoritária de Gamma-Terpinene, 4-Terpineol e Alpha-Terpinene, enquanto em OERO destacaram-se Cineole, Alpha-Pinene e Camphor. Todos os óleos apresentaram citotoxicidade alta à partir de 0,24 g/mL-1 para MDBK, sendo OERO o mais citotóxico.No CASA, observou-se aumento na motilidade das células espermáticas nas concentrações de 20g/mL-1 e 40g/mL-1 em 0 e 24hs de exposição ao OEOV sendo que ocorreu redução destas à partir de 160g/mL-1. OEOM na concentração de 20g/mL-1 não alterou MT e MP, Distância média percorrida, Amplitude do deslocamento lateral da cabeça e Frequência do batimento flagelar cruzado, independente do tempo de exposição. Houve aumento da fluidez total nas concentrações de 20 a 40g/mL-1 e fluidez viável em 40 e 80g/mL-1 para OEOV e OEOM.Na citometria de fluxo, os parâmetros avaliados não sofreram alterações significativas na concentração de 20 a 40g/mL-1 de OEOV nas 24hs de exposição, havendo para OEOM, alterações significativas à partir da concentração de 40g/mL-1, em 0 e 24 horas.As alterações provocadas pelas concentrações maiores dos óleos sugerem toxicidade, assim como evidenciam os possíveis mecanismos de ação a serem explorados para aplicação farmacológica dos óleos da família Lamiaceae, em especial Origanum vulgare.

Dermatological conditions are of great importance in small animals, especially Pseudomonas infections, which are resistant to most antimicrobials used in medical practice. Bacterial resistance is a source of concern, increasing research in search of new therapeutic options, such as medicinal plants, including the Family Lamiaceae. The objective of this study was to verify the Pseudomonas aeruginosa casuistry in samples of dog otitis received by the Regional Diagnostic Laboratory (LRD), to determine the resistance profile of Pseudomonas spp. To antimicrobials and to the essential oils of Origanum vulgare, Origanum majorana and Rosmarinus officinalis, to evaluate a possible synergism of the oils with antimicrobial agents, as well as to determine the chemical composition of the oils and the cytotoxicity of these oils in MDBK cells and in spermatozoa through the CASA and flow cytometry methods. For the study of the sample of otites registered in the LRD, all the records from 2010 to 2018 of dogs were evaluated, and those with P. aeruginosa isolation were selected. The essential oils used in the study were obtained by steam distillation and were tested at concentrations of 250g / mL-1. For the antibiogram (Kirby-Bauer, 1966) 13 drugs were used, and for the evaluation of the susceptibility of Pseudomonas spp. essential oils and the association of antimicrobials with oils, the disc diffusion method was used. To evaluate cytotoxicity,renal cells (MDBK) and sperm cells were used, and the toxicity of MBDK was evaluated by MTT and spermatozoa by CASA and flow cytometry. P. aeruginosa was present in 11% of the canine otitis samples received between 2010 and 2018 in the LRD. Canine isolates of Pseudomonas spp. presented a high rate of multiresistance (46.7%) to antimicrobials, especially B-lactams, being sensitive for Quinolones, Gentamycin and Imipenem. The essential oils inhibited Pseudomonas spp., Forming larger inhibition halos for OERO followed by OEOM and OEOV. When evaluating the essential oils with antimicrobials, synergism was observed in 90% of the associations. OEOV and OEOM presented the majority composition of Gamma-Terpinene, 4-Terpineol and Alpha-Terpinene, while in OERO they stood out Cineole, Alpha-Pinene and Camphor. All oils showed high cytotoxicity from 0.24 g / mL-1 to MDBK, OERO being the most cytotoxic. At CASA, increased sperm cell motility at concentrations of 20g / mL-1 and 40g / mL-1 at 0 and 24 hours of OEOV exposure was observed, with a reduction of 160g / mL-1. OEOM at the concentration of 20 g / mL-1 did not alter MT and MP, mean distance traveled, amplitude of the lateral displacement of the head and frequency of the crossed flagellar beat, regardless of the time of exposure. There was an increase in total fluidity at concentrations of 20 to 40 g / mL-1 and viability at 40 and 80 g / mL for OEOV and OEOM. In the flow cytometry,the parameters evaluated did not undergo significant changes in the OEOV concentration of 20 to 40 g / mL-1 in the 24 hours of exposure, with OEOM, significant changes from the concentration of 40 g / mL, in 0 and 24 hours. The changes caused by the higher concentrations of the oils suggest toxicity, as well as evidence the possible mechanisms of action to be explored for the pharmacological application of the oils of the family Lamiaceae, especially Origanum vulgare.

Atividade antimicrobiana do ácido úsnico e usnato frente a isolados clínicos de mastite caprina e bovina

A utilização indiscriminada de antibióticos em animais dos rebanhos com finalidade produtiva é uma realidade que favorece a seleção de bactérias resistentes, dentre elas Staphylococcus aureus. Esse microrganismo é um dos principais agentes causadores da mastite, que é uma inflamação da glândula mamária. Diante disso, o desenvolvimento de alternativas terapêuticas de controle dessa enfermidade se faz necessário. Dessa forma os líquens e seus derivados, como ácido úsnico e o usnato de potássio, e sua utilização em nanopartículas apresentam uma promissora alternativa para o tratamento da mastite caprina e bovina. Portanto, o presente estudo visou analisar a atividade antimicrobiana do ácido úsnico e usnato de potássio em isolados clínicos de mastite caprina e bovina. Para isso foram utilizados 10 isolados de mastite clínica (cinco caprino e cinco bovino), ATCCs 25923-MSSA e 33591-MRSA. A atividade antimicrobiana da oxacilina, do ácido úsnico, do usnato de potássio e das nanopartículas de oxacilina e ácido úsnico foi realizada pelo método de microdiluição em caldo. Além disso, foi feito a análise de formação do biofilme. Os isolados que apresentaram melhores resultados foram utilizados no ensaio de influência na formação do biofilme. A avaliação sinérgica, pelo método Checkerboard foi feita com a oxacilina e com o usnato de potássio. No presente trabalho foi verificado a ação antimicrobiana para todas substâncias testadas, sendo que a nanopartícula de ácido úsnico foi a que apresentou os melhores resultados. O usnato de potássio se mostrou efetivo na interferência da formação do biofilme para todos os isolados, incluindo a ATCC 25923. Nos testes de sinergismo, foi verificado concentrações sinérgicas que culminaram com uma redução de aproximadamente 80% na concentração do antibiótico padrão. Dessa forma, as substancias testadas (oxacilina, usnato de potássio, ácido úsnico, nanopartícula de oxacilina e nanopartícula de ácido úsnico) podem ser utilizadas como agentes mitigadores da mastite caprina e bovina, de modo que os melhores efeitos ocorreram na nanopartícula de ácido úsnico. Além disso, a produção do biofilme dos isolados clínicos de Staphylococcus aureus foi reduzida pela ação do usnato de potássio, enquanto a interação da oxacilina com o usnato de potássio apresentou efeito sinérgico relevante. Em relação a nanopartícula de usnato de potássio, houve atividade antimicrobiana.

The indiscriminate use of antibiotics in animals of productive herds is a reality that favors the selection of resistant bacteria, among them Staphylococcus aureus. This microorganism is one of the main causative agents of mastitis, which is an inflammation of the mammary gland. Therefore, the development of therapeutic alternatives to control this disease is necessary. Thus, lichens and their derivatives, such as usnic acid and potassium usnate, and its use in nanoparticles present a promising alternative for the treatment of caprine and bovine mastites. Therefore, the present study aimed to analyze the antimicrobial activity of usnic acid and potassium usnate in clinical isolates of caprine and bovine mastitis. For this purpose, 10 clinical mastitis isolates (five goats and five cattle), ATCC's 25923-MSSA and 33591-MRSA were used. The antimicrobial activity of oxacillin, usnic acid, potassium usnate and oxacillin and usnic acid nanoparticles was performed by the broth microdilution method. In addition, biofilm formation analysis was performed. The isolates that presented the best results were used in the biofilm formation influence test. The synergistic evaluation by the Checkerboard method was done with oxacillin and with the potassium usnate. In the present work the antimicrobial action was verified for all substances tested, and the nanoparticle of usnic acid was the one that presented the best results. Potassium unate was shown to be effective in the interference of biofilm formation for all isolates, including ATCC 25923. In the synergism tests, synergistic concentrations were found which culminated with an approximately 80% reduction in the standard antibiotic concentration. Thus, the tested substances (oxacillin, potassium usnate, usnic acid, oxacillin nanoparticle and usnic acid nanoparticle) can be used as mitigators agents for caprine and bovine mastitis, so that the best effects occurred on the nanoparticle of usnic acid. In addition, the biofilm production of the clinical isolates of Staphylococcus aureus was reduced by the action of the potassium usnate, while the interaction of oxacillin with the potassium usnate showed a synergistic effect. Regarding the nanoparticle of potassium usnate, there was antimicrobial activity.

Atividade antimicrobiana do tianfenicol sobre bactérias patogênicas de peixes

Os surtos de bacterioses na piscicultura são imprevisíveis, por essa razão é necessário dispor de opções terapêuticas eficazes para reduzir a morbidade e mortalidade. Para que a terapia seja eficaz, a escolha do antimicrobiano deve se basear nas informações farmacocinéticas do fármaco no hospedeiro, nas condições de produção e na sensibilidade do patógeno. No Brasil, atualmente só dois antimicrobianos são legalizados para uso na aquicultura, a oxitetraciclina (OTC) e o florfenicol (FFC), os quais muitas vezes são ineficazes. Destes, somente o FFC é autorizado para tratar bacterioses em tilápia-do-Nilo, a espécie mais produzida no país. Este cenário nos levou a investigar a atividade antimicrobiana do tianfenicol (TAF) contra as principais bactérias patogênicas de peixes cultivados no Brasil. Foi determinada a concentração inibitória mínima (CIM) e a concentração bactericida mínima (CBM) do TAF para 49 cepas isoladas de surtos de bacteriose ocorridos no período 2011 a 2017 em três estados. Adicionalmente, avaliou-se a atividade antimicrobiana do TAF (G1: 10 mg/kg), do FFC (G2: 10 mg/kg) e da combinação do TAF com o FFC (G3: TAF+FFC: 5 + 2,5 mg/kg e G4: 2,5 + 1,25 mg/kg) no tratamento de aeromonose em tilápia-do-Nilo experimentalmente infectadas com Aeromonas hydrophila. Como resultado do estudo in vitro, mais da metade das cepas testadas foram sensíveis ao TAF, sendo que os gêneros Aeromonas, Lactococcus e Vibrio foram os mais sensíveis. No estudo in vivo, o TAF foi eficaz no tratamento da aeromonose em tilápia-do-Nilo, tanto isolado como combinado. Os grupos G1, G2, G3, G4 e o controle apresentaram uma taxa de sobrevivência de 88,33 ± 11,55%; 70 ± 10%; 73,33 ± 11,55%; 85,93 ± 5,13% e 3,33 ± 5,77%, respectivamente, sendo todos diferentes do controle (p < 0,001). Os resultados do estudo sugerem que o TAF pode ser uma boa opção de tratamento de aeromonose, lactococose e vibriose em peixes. Além disso, a combinação do TAF com o FFC apresentou um efeito sinérgico, mostrando que é possível reduzir a quantidade de antimicrobiano e obter o mesmo efeito terapêutico.

Outbreaks of bacterial diseases in fish farm are unpredictable; therefore, it is necessary to have effective therapeutic options to reduce the morbidity and mortality. For effective therapy, the anticipated pharmacokinetics and antibacterial activity of the antimicrobial in the target fish species under the given conditions must be considered before decide which antimicrobial to use. In Brazil, only two antimicrobials are approved for use in aquaculture, oxytetracycline (OTC) and florfenicol (FFC), which are often innefective. Moreover, only FFC is approved for use to treat bacterial diseases in Nile tilapia, the main specie in Brazil. This scenario led us to investigate the antibacterial activity o thiamphenicol (TAP) against the main bacteria infecting fishes in Brazil. Minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) of TAP were determined for 49 strains isolated from diseases outbreaks registered during 2011 2017 in three States. Additionally the antibacterial activity of TAP (10 mg kg-1), FFC (10 mg kg-1) and TAF combined with FFC (G3: TAF+FFC: 5 + 2.5 mg kg-1 e G4: 2.5 + 1.25 mg kg-1) against Aeromonas hydrophila in Nile tilapia aeromoniosi models were evaluated. More than half of the tested strains were in vitro sensitive to TAP, being TAP highly potent against Aeromonas, Lactococcus, and Vibrio. The in vivo therapy with TAP alone and combined with FFC was effective to treat aeromoniosis in Nile tilapia. Groups G1, G2, G3, G4 and control had survival rate of 88.33 ± 11.55%; 70 ± 10%; 73.33 ± 11.55%; 85.93 ± 5.13% e 3.33 ± 5.77%, respectively, all being different from the control (p < 0,001). These findings suggest the potential of TAP as a treatment option for aeromoniosis, lactococcosis and vibriosis. The combination of TAF and FFC has a synergy effect, showing that it is possible to reduce the amount of antimicrobial while maintaining the therapeutic effectiveness.

Atividade antibacteriana de extratos aquosos de açafrão, cominho, estragão, endro e tomilho

Os registros das eficientes propriedades de conservação das especiarias constam desde a Antiguidade, porém acredita-se que o uso dessas ervas tenha ocorrido antes mesmo do domínio da cocção com fogo. No cenário atual, o crescente interesse do consumidor pela qualidade e composição dos produtos disponíveis no mercado junto com os questionamentos sobre a segurança do uso de aditivos químicos e a preocupação com suas implicações na saúde pública, motivam a busca e valorização de compostos antimicrobianos naturais. Diante disso, o presente trabalho objetivou verificar a ação antimicrobiana dos extratos aquosos de açafrão (Curcuma longa), cominho (Cuminum cyminum), estragão (Artemisia dracunculus), endro (Anethum graveolens) e tomilho (Thymus vulgaris) de forma individual e combinada sobre Samonella Tiphymurium, Samonella Enteritidis, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus e Bacillus subtilis utilizando semeadura em superfície com Ágar Nutriente, após incubação a 35ºC de 24 e 48 horas. Por meio dos resultados obtidos, foi possível observar os fenômenos de sinergismo e antagonismo entre os extratos, destacando-se a combinação sinérgica entre cominho e tomilho, capaz de inibir três das cinco bactérias empregadas. Salmonella Enteritidis apresentou maior sensibilidade entre os micro-organismos testados e o maior halo de inibição registrado resultou da ação do extrato de endro adicionado ao extrato de tomilho sobre Salmonella Typhimurium.(AU)

Records of effective conservation properties of spices date from the Antiquity period, but it is believed that the use of these herbs occurred even before the advent of cooking techniques. In the present scenario, the growing consumer interest in quality and composition of the products available in the market along with the questions about the safety of using chemical additives and the concern about its public health implications motivate the search and recovery of natural antimicrobial compounds. Therefore, this study aimed to verify the antimicrobial activity of aqueous turmeric (Curcuma longa), cumin (Cuminum cyminum), tarragon (Artemisia dracunculus), dill (Anethum graveolens) and thyme (Thymus vulgaris) extracts individually and combined on Samonella Tiphymurium, Samonella Enteritidis, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus and Bacillus subtilis previously seeded on the surface of plates containing Nutrient agar, followed by incubation at 35°C for 24/48 hours. Through the results obtained, we observed the phenomena of synergism and antagonism between extracts, highlighting the synergistic combination of cumin and thyme, sufficient to inhibit three of the five bacteria used. Salmonella Enteritidis showed greater sensitivity among the micro-organisms tested and the highest recorded inhibition zone resulted from the combined extract of dill and thyme action on Salmonella Typhimurium.(AU)