Evaluation of antioxidant, photoprotective and antinociceptive activities of Marcetia macrophylla extract: potential for formulation of sunscreens / Avaliação da atividade antioxidante, photoprotetora e antinociceptiva de Marcetia macrophylla: potencial formulação fotoprotetora

The antioxidant, photoprotective and antinociceptive Marcetia macrophylla active extract was investigated as an active ingredient in a sunscreen cream formulation. Thus, the M. macrophylla extract showed IC50 of 3.43 mg/ml of the antioxidant (DPPH∙ scavenging test) and Sun Protection Factor of 20.25 (SPF/UV-B, at 250 µg/ml) and UV-A of 78.09% (photobleaching trans-resveratrol test). The antinociceptive activity was superior to all standards tested using the in vivo acetic acid-induced writhing test (99.14% at the dose of 200 mg/kg) and the high-performance liquid chromatography coupled with diode array detector and mass spectroscopy multi-stage (HPLC-DAD-MS/MS) enabled the structural characterization of the quercetin-3-O-hexoside, quercetin-3-O-pentoside and quercetin-3-O-desoxihexoside. The pharmaceutical formulation containing the Marcetia macrophylla crude active extract was prepared and the physicochemical tests (organoleptic characteristics, pH analysis and centrifugation), the in vitro UVB (sun protection factor, SPF) and UVA (β-carotene) using the spectroscopic method were investigated. The formulation showed satisfactory results concerning the physicochemical parameters evaluated and active against the UV test. Thus, M. macrophylla showed biological activities with potential use in pharmaceutical preparations.

O extrato bruto de Marcetia macrophylla mostrou atividade antioxidante, fotoprotetora e antinociceptiva, sendo em seguida investigado como ingrediente ativo em uma formulação fotoprotetora. Assim, o extrato de M. macrophylla apresentou atividade antioxidante com IC50 de 3,43 mg/mL (teste de sequestro do DPPH∙) e Fator de Proteção Solar de 20,25 (FPS/UV-B, 250 µg/mL) e UV-A de 78,09% (teste de fotobranqueamento do trans-resveratrol). A atividade antinociceptiva usando o teste in vivo de contorções abdominais induzidas por ácido acético foi superior a todos os padrões testados (99,14% na dose de 200 mg/Kg). A análise por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a detector de fotodiodos e espectroscopia de massas multi-estágio (CLAE-DAD-EM/EM) possibilitou a caracterização dos flavonoides quercetina-3-O-hexosídeo, quercetina-3-O-pentosídeo e quercetina-3-O-desoxihexosídeo. A formulação farmacêutica contendo o extrato ativo bruto de Marcetia macrophylla foi preparada e os testes físico-químicos (características organolépticas, análise de pH e centrifugação), o UVB in vitro (fator de proteção solar, FPS) e UVA (β-caroteno) foram investigados. A formulação apresentou resultados satisfatórios frente aos parâmetros físico-químicos avaliados e ativos contra UV. Assim, M. macrophylla apresentou atividades biológicas com potencial uso em preparações fitofarmacêuticas.

Evaluation of antioxidant, photoprotective and antinociceptive activities of Marcetia macrophylla extract: potential for formulation of sunscreens

Abstract The antioxidant, photoprotective and antinociceptive Marcetia macrophylla active extract was investigated as an active ingredient in a sunscreen cream formulation. Thus, the M. macrophylla extract showed IC50 of 3.43 mg/ml of the antioxidant (DPPH scavenging test) and Sun Protection Factor of 20.25 (SPF/UV-B, at 250 µg/ml) and UV-A of 78.09% (photobleaching trans-resveratrol test). The antinociceptive activity was superior to all standards tested using the in vivo acetic acid-induced writhing test (99.14% at the dose of 200 mg/kg) and the high-performance liquid chromatography coupled with diode array detector and mass spectroscopy multi-stage (HPLC-DAD-MS/MS) enabled the structural characterization of the quercetin-3-O-hexoside, quercetin-3-O-pentoside and quercetin-3-O-desoxihexoside. The pharmaceutical formulation containing the Marcetia macrophylla crude active extract was prepared and the physicochemical tests (organoleptic characteristics, pH analysis and centrifugation), the in vitro UVB (sun protection factor, SPF) and UVA (-carotene) using the spectroscopic method were investigated. The formulation showed satisfactory results concerning the physicochemical parameters evaluated and active against the UV test. Thus, M. macrophylla showed biological activities with potential use in pharmaceutical preparations.

Resumo O extrato bruto de Marcetia macrophylla mostrou atividade antioxidante, fotoprotetora e antinociceptiva, sendo em seguida investigado como ingrediente ativo em uma formulação fotoprotetora. Assim, o extrato de M. macrophylla apresentou atividade antioxidante com IC50 de 3,43 mg/mL (teste de sequestro do DPPH) e Fator de Proteção Solar de 20,25 (FPS/UV-B, 250 µg/mL) e UV-A de 78,09% (teste de fotobranqueamento do trans-resveratrol). A atividade antinociceptiva usando o teste in vivo de contorções abdominais induzidas por ácido acético foi superior a todos os padrões testados (99,14% na dose de 200 mg/Kg). A análise por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a detector de fotodiodos e espectroscopia de massas multi-estágio (CLAE-DAD-EM/EM) possibilitou a caracterização dos flavonoides quercetina-3-O-hexosídeo, quercetina-3-O-pentosídeo e quercetina-3-O-desoxihexosídeo. A formulação farmacêutica contendo o extrato ativo bruto de Marcetia macrophylla foi preparada e os testes físico-químicos (características organolépticas, análise de pH e centrifugação), o UVB in vitro (fator de proteção solar, FPS) e UVA (-caroteno) foram investigados. A formulação apresentou resultados satisfatórios frente aos parâmetros físico-químicos avaliados e ativos contra UV. Assim, M. macrophylla apresentou atividades biológicas com potencial uso em preparações fitofarmacêuticas.

Evaluation of antioxidant, photoprotective and antinociceptive activities of Marcetia macrophylla extract: potential for formulation of sunscreens / Avaliação da atividade antioxidante, photoprotetora e antinociceptiva de Marcetia macrophylla: potencial formulação fotoprotetora

Abstract The antioxidant, photoprotective and antinociceptive Marcetia macrophylla active extract was investigated as an active ingredient in a sunscreen cream formulation. Thus, the M. macrophylla extract showed IC50 of 3.43 mg/ml of the antioxidant (DPPH∙ scavenging test) and Sun Protection Factor of 20.25 (SPF/UV-B, at 250 µg/ml) and UV-A of 78.09% (photobleaching trans-resveratrol test). The antinociceptive activity was superior to all standards tested using the in vivo acetic acid-induced writhing test (99.14% at the dose of 200 mg/kg) and the high-performance liquid chromatography coupled with diode array detector and mass spectroscopy multi-stage (HPLC-DAD-MS/MS) enabled the structural characterization of the quercetin-3-O-hexoside, quercetin-3-O-pentoside and quercetin-3-O-desoxihexoside. The pharmaceutical formulation containing the Marcetia macrophylla crude active extract was prepared and the physicochemical tests (organoleptic characteristics, pH analysis and centrifugation), the in vitro UVB (sun protection factor, SPF) and UVA (β-carotene) using the spectroscopic method were investigated. The formulation showed satisfactory results concerning the physicochemical parameters evaluated and active against the UV test. Thus, M. macrophylla showed biological activities with potential use in pharmaceutical preparations.

Resumo O extrato bruto de Marcetia macrophylla mostrou atividade antioxidante, fotoprotetora e antinociceptiva, sendo em seguida investigado como ingrediente ativo em uma formulação fotoprotetora. Assim, o extrato de M. macrophylla apresentou atividade antioxidante com IC50 de 3,43 mg/mL (teste de sequestro do DPPH∙) e Fator de Proteção Solar de 20,25 (FPS/UV-B, 250 µg/mL) e UV-A de 78,09% (teste de fotobranqueamento do trans-resveratrol). A atividade antinociceptiva usando o teste in vivo de contorções abdominais induzidas por ácido acético foi superior a todos os padrões testados (99,14% na dose de 200 mg/Kg). A análise por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a detector de fotodiodos e espectroscopia de massas multi-estágio (CLAE-DAD-EM/EM) possibilitou a caracterização dos flavonoides quercetina-3-O-hexosídeo, quercetina-3-O-pentosídeo e quercetina-3-O-desoxihexosídeo. A formulação farmacêutica contendo o extrato ativo bruto de Marcetia macrophylla foi preparada e os testes físico-químicos (características organolépticas, análise de pH e centrifugação), o UVB in vitro (fator de proteção solar, FPS) e UVA (β-caroteno) foram investigados. A formulação apresentou resultados satisfatórios frente aos parâmetros físico-químicos avaliados e ativos contra UV. Assim, M. macrophylla apresentou atividades biológicas com potencial uso em preparações fitofarmacêuticas.

Total phenolic and flavonoid contents, antioxidant, and α-glucosidase inhibitory activities of several big chili (Capsicum annuum L.) genotypes / Conteúdo fenólico total e flavonóide, atividades antioxidantes e inibitórias da α-glucosidase de vários genótipos de pimentão (Capsicum annuum L.)

ABSTRACT: Big chili has the largest fruit size compared to other types of chili. In addition to having a spicy taste, big chilies contain other beneficial biochemicals such as phenolics, flavonoids, antioxidants, and α-glucosidase inhibitors that have the potential to be developed for functional tropical plants. Information on the content is still not widely found. Therefore, this study identified biochemical compounds (TPC, TFC, DPPH, FRAP, AGI) in several genotypes of big chili peppers. From October to November 2021, we conducted a study using the microplate reader method. We repeated the experiment three times. The research design used was a completely randomized design with a single factor genotype. A total of 22 genotypes of big chili were used in this study. The big chili genotype F6074136-2-3-2-3 had the highest content of α-glucosidase inhibitor and antioxidant FRAP compared to other genotypes 67.62% and 71.20 mol TE/g extract. The genotypes CK 12 and F6074077-1-1-3-1 indicated the highest phenolic and flavonoid contents. The correlation between biochemical parameters showed that TPC-AGI and TPC-DPPH were significantly negatively correlated. The conclusion is that the information in this study can be the basis for the development of functional tropical plants in future research.

RESUMO: O pimentão grande tem o maior tamanho de fruta em comparação com outros tipos de pimentão. Além de ter um sabor picante, os pimentões grandes contêm outros bioquímicos benéficos, como fenólicos, flavonóides, antioxidantes e inibidores de α-glicosidase, que têm potencial para serem desenvolvidos para plantas tropicais funcionais. Informações sobre o conteúdo ainda não são amplamente encontradas. Portanto, este estudo teve como objetivo identificar compostos bioquímicos (TPC, TFC, DPPH, FRAP, AGI) em diversos genótipos de pimentão. O estudo foi conduzido de outubro a novembro de 2021 usando o método do leitor de microplaca. Os dados obtidos foram repetidos três vezes. O desenho de pesquisa usado foi um desenho inteiramente casualizado com um genótipo de fator único. Um total de 22 genótipos de pimentão grande foi usado neste estudo. O genótipo big chili F6074136-2-3-2-3 apresentou o maior teor de inibidor de α-glucosidase e antioxidante FRAP em comparação com outros genótipos 67,62% e 71,20 mol TE / g de extrato. O maior teor de fenólicos e flavonóides neste estudo foi indicado pelos genótipos CK 12 e F6074077-1-1-3-1. A correlação entre os parâmetros bioquímicos mostrou que TPC-AGI e TPC-DPPH foram significativamente correlacionados negativamente. Conclui-se que as informações deste estudo podem servir de base para o desenvolvimento de plantas tropicais funcionais em pesquisas futuras.

Evaluation of antioxidant, photoprotective and antinociceptive activities of Marcetia macrophylla extract: potential for formulation of sunscreens / Avaliação da atividade antioxidante, photoprotetora e antinociceptiva de Marcetia macrophylla: potencial formulação fotoprotetora

The antioxidant, photoprotective and antinociceptive Marcetia macrophylla active extract was investigated as an active ingredient in a sunscreen cream formulation. Thus, the M. macrophylla extract showed IC50 of 3.43 mg/ml of the antioxidant (DPPH∙ scavenging test) and Sun Protection Factor of 20.25 (SPF/UV-B, at 250 µg/ml) and UV-A of 78.09% (photobleaching trans-resveratrol test). The antinociceptive activity was superior to all standards tested using the in vivo acetic acid-induced writhing test (99.14% at the dose of 200 mg/kg) and the high-performance liquid chromatography coupled with diode array detector and mass spectroscopy multi-stage (HPLC-DAD-MS/MS) enabled the structural characterization of the quercetin-3-O-hexoside, quercetin-3-O-pentoside and quercetin-3-O-desoxihexoside. The pharmaceutical formulation containing the Marcetia macrophylla crude active extract was prepared and the physicochemical tests (organoleptic characteristics, pH analysis and centrifugation), the in vitro UVB (sun protection factor, SPF) and UVA (β-carotene) using the spectroscopic method were investigated. The formulation showed satisfactory results concerning the physicochemical parameters evaluated and active against the UV test. Thus, M. macrophylla showed biological activities with potential use in pharmaceutical preparations.(AU)

O extrato bruto de Marcetia macrophylla mostrou atividade antioxidante, fotoprotetora e antinociceptiva, sendo em seguida investigado como ingrediente ativo em uma formulação fotoprotetora. Assim, o extrato de M. macrophylla apresentou atividade antioxidante com IC50 de 3,43 mg/mL (teste de sequestro do DPPH∙) e Fator de Proteção Solar de 20,25 (FPS/UV-B, 250 µg/mL) e UV-A de 78,09% (teste de fotobranqueamento do trans-resveratrol). A atividade antinociceptiva usando o teste in vivo de contorções abdominais induzidas por ácido acético foi superior a todos os padrões testados (99,14% na dose de 200 mg/Kg). A análise por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a detector de fotodiodos e espectroscopia de massas multi-estágio (CLAE-DAD-EM/EM) possibilitou a caracterização dos flavonoides quercetina-3-O-hexosídeo, quercetina-3-O-pentosídeo e quercetina-3-O-desoxihexosídeo. A formulação farmacêutica contendo o extrato ativo bruto de Marcetia macrophylla foi preparada e os testes físico-químicos (características organolépticas, análise de pH e centrifugação), o UVB in vitro (fator de proteção solar, FPS) e UVA (β-caroteno) foram investigados. A formulação apresentou resultados satisfatórios frente aos parâmetros físico-químicos avaliados e ativos contra UV. Assim, M. macrophylla apresentou atividades biológicas com potencial uso em preparações fitofarmacêuticas.(AU)

Phenotypic diversity of pea (Pisum sativum L) varieties and the polyphenols, flavonoids, and antioxidant activity of their seeds / Diversidade fenotípica de variedades de ervilha (Pisum sativum L) e polifenóis, flavonóides e atividade antioxidante de suas sementes

Pea (Pisum sativum L.) is the fourth leading legume crop in the world, and its demand is increasing. In this study, the morphological characteristics (seed shape, seed surface, seed coat color, hilum color, cotyledon color, 100-seed weight and color values), total phenolic content (TPC), total flavonoid content (TFC), 2,2-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate) (ABTS) free radical scavenging capacity and ferric reducing antioxidant power (FRAP) of 75 pea cultivars were investigated. Results showed rich genetic diversity and a wide range of phenolic contents and antioxidant activities. Sixteen varieties enriched with phenolic contents and high antioxidant activities were screened out. A significant correlation was reported among color values, TPC, TFC, ABTS and FRAP. Principal component analysis (PCA) extracted four principal components with a total cumulative contribution of 81.29%. Hierarchical cluster analysis based on the four extracted principal components resulted in a dendrogram dividing the peas into three groups. In addition, dark pea seeds have potential as a functional food in addition to their traditional role in providing dietary protein and fibre. This study provided a scientific basis for the breeding of pea varieties, development of new products and improvement of pea resource utilization.(AU)

A ervilha (Pisum sativum L.) é a quarta cultura de leguminosas líder no mundo e sua demanda está aumentando. Neste estudo, as características morfológicas (forma da semente, superfície da semente, cor da casca, cor do hilo, cor do cotilédone, peso de 100 sementes e valores de cor), teor fenólico total (TPC), teor de flavonóides totais (TFC), 2,2. A capacidade de eliminação de radicais livres de ‘-azinobis- (3-etilbenzotiazolino-6-sulfonato) (ABTS) e o poder antioxidante redutor de ferro (FRAP) de 75 cultivares de ervilha foram investigados. Os resultados mostraram rica diversidade genética e uma ampla gama de conteúdos fenólicos e atividades antioxidantes. Dezesseis variedades enriquecidas com conteúdo fenólico e alta atividade antioxidante foram descartadas. Uma correlação significativa foi encontrada entre os valores de cores, TPC, TFC, ABTS e FRAP. A análise de componentes principais (PCA) extraiu quatro componentes principais com uma contribuição total acumulada de 81, 29%. A análise hierárquica de agrupamento foi baseada nos quatro componentes principais extraídos resultou em um dendrograma dividindo as ervilhas em três grupos. Assim, as sementes de ervilha escura têm potencial como alimento funcional, além de seu papel tradicional no fornecimento de proteína e fibra dietética. Este estudo fornece uma base científica para a criação de variedades de ervilha, desenvolvimento de novos produtos e melhoria da utilização de recursos de ervilha.(AU)

Cardiac Indicators, Serum Antioxidant Activity, and Growth Performance as Affected by Hawthorn Extract (Crateagus oxyacantha) in Pulmonary Hypertensive Chickens

Hawthorn has been traditionally used to improve blood circulation and medicating cardiac disorders as well as blood stasis and elimination of pulmonary hypertension. An experiment was conducted to evaluate the effect of different levels of hawthorn extract in the drinking water on cardiac indicators, serum antioxidant activity, growth and immunity of pulmonary hypertensive broilers reared at high altitude and prone to ascites. A total of 225 one-day-old unsexed broiler chicks (Ross308) were randomly assigned to 15 floor pens. A basal corn-soy based diet was formulated for all treatments. The treatments consisted of the addition of 0, 0.1, or 0.2 mL of hawthorn extract per liter of drinking water. Both levels of hawthorn flavonoid extract significantly (p 0.05) improved feed intake, body weight gain and FCR, and significantly (p 0.05) reduced abdominal fat, liver, and heart relative weights, as well as the number of birds affected with PHS compared with the controls. RV and TV were significantly (p 0.05) lower in hawthorn flavonoid extract fed birds than the controls in addition of significantly (p 0.05) lower TBARS but higher NO serum levels. In conclusion, hawthorn flavonoid extract may effectively be used as an herbal medicine to prevent pulmonary hypertension and cardiac disorders in chickens.(AU)

Cardiac Indicators, Serum Antioxidant Activity, and Growth Performance as Affected by Hawthorn Extract (Crateagus oxyacantha) in Pulmonary Hypertensive Chickens

Hawthorn has been traditionally used to improve blood circulation and medicating cardiac disorders as well as blood stasis and elimination of pulmonary hypertension. An experiment was conducted to evaluate the effect of different levels of hawthorn extract in the drinking water on cardiac indicators, serum antioxidant activity, growth and immunity of pulmonary hypertensive broilers reared at high altitude and prone to ascites. A total of 225 one-day-old unsexed broiler chicks (Ross308) were randomly assigned to 15 floor pens. A basal corn-soy based diet was formulated for all treatments. The treatments consisted of the addition of 0, 0.1, or 0.2 mL of hawthorn extract per liter of drinking water. Both levels of hawthorn flavonoid extract significantly (p 0.05) improved feed intake, body weight gain and FCR, and significantly (p 0.05) reduced abdominal fat, liver, and heart relative weights, as well as the number of birds affected with PHS compared with the controls. RV and TV were significantly (p 0.05) lower in hawthorn flavonoid extract fed birds than the controls in addition of significantly (p 0.05) lower TBARS but higher NO serum levels. In conclusion, hawthorn flavonoid extract may effectively be used as an herbal medicine to prevent pulmonary hypertension and cardiac disorders in chickens.

Potencial inibitório in vitro de chás comerciais e da quercetina sobre a atividade de acetilcolinesterase cerebral em cães / The inhibitory potential in vitro of commercial teas and quercetin on cerebral acetylcholinesterase activity in dogs

Com o aumento na expectativa de vida dos animais de companhia há um maior aparecimento de doenças neurodegenerativas, como a Disfunção Cognitiva Canina (DCC). A DCC apresenta diversas semelhanças à Doença de Alzheimer (DA) presente em seres humanos. Entre estas semelhanças é possível citar o nível reduzido de acetilcolina, o que justifica a busca por tratamentos que tenham como foco, a inibição da acetilcolinesterase (AChE), enzima responsável pela degradação deste neurotransmissor. Neste trabalho foi avaliado o potencial inibitório dos chás de maçã, de hortelã e de chá verde sobre a atividade de AChE presente em cérebro de cães. O chá verde foi o chá mais eficaz na inibição desta enzima, apresentando uma IC50 de aproximadamente 1.7 mg/mL. A quercetina, flavonol que segundo a literatura está presente no chá verde e ausente nos chás de maçã e hortelã, pode ser um dos constituintes responsáveis por esta inibição. Desta forma, também foi avaliado o potencial anticolinesterásico da quercetina em cérebro canino, obtendo-se uma IC50 de 0,41 mM. Uma vez que a quercetina já tem sido utilizada na medicina veterinária para outros fins, o potencial anticolinesterásico deste flavonol em cérebro canino mostra-se de grande relevância para os estudos da DCC.

Canine Cognitive Dysfunction (CCD) is a neuodegenerative disease with very similar characteristics to humans Alzhemer’s disease. Currently, the increase of pets life expectancy leads to the more frequent appearance of neurodegenerative diseases in these species. Among the main hypotheses for the appearance of CCD has the reduction of acetylcholine levels in the synaptic cleft. This hypothesis justifies many researches that search CCD treatment based on acetylcholinesterase (AChE) inhibition, an acetylcholine degrading enzyme. In this work, inhibitory potential of some commecial teas (apple tea, peppermint tea and green tea) toward brain AChE activity of dogs was evaluated. Green tea is tea more effective to inhibit this enzyme, getting a IC 50 of approximately 1.7 mg / mL. Quercetin, flavonol which according to the literature is present in green tea and absent in apple and peppermint teas, may be one of the molecules that contribute to AChE inhibition. In this way, quercetn anticholinesterase potential in canine brain was also evaluated, obtaining an IC 50 of 0.41 mM. Since quercetin has already been used in veterinary medicine for other fins, the anticholinesterase potential of this flavonol toward canine brain is of great relevance for CCD studies.

Potencial inibitório in vitro de chás comerciais e da quercetina sobre a atividade de acetilcolinesterase cerebral em cães / The inhibitory potential in vitro of commercial teas and quercetin on cerebral acetylcholinesterase activity in dogs

Com o aumento na expectativa de vida dos animais de companhia há um maior aparecimento de doenças neurodegenerativas, como a Disfunção Cognitiva Canina (DCC). A DCC apresenta diversas semelhanças à Doença de Alzheimer (DA) presente em seres humanos. Entre estas semelhanças é possível citar o nível reduzido de acetilcolina, o que justifica a busca por tratamentos que tenham como foco, a inibição da acetilcolinesterase (AChE), enzima responsável pela degradação deste neurotransmissor. Neste trabalho foi avaliado o potencial inibitório dos chás de maçã, de hortelã e de chá verde sobre a atividade de AChE presente em cérebro de cães. O chá verde foi o chá mais eficaz na inibição desta enzima, apresentando uma IC50 de aproximadamente 1.7 mg/mL. A quercetina, flavonol que segundo a literatura está presente no chá verde e ausente nos chás de maçã e hortelã, pode ser um dos constituintes responsáveis por esta inibição. Desta forma, também foi avaliado o potencial anticolinesterásico da quercetina em cérebro canino, obtendo-se uma IC50 de 0,41 mM. Uma vez que a quercetina já tem sido utilizada na medicina veterinária para outros fins, o potencial anticolinesterásico deste flavonol em cérebro canino mostra-se de grande relevância para os estudos da DCC.(AU)

Canine Cognitive Dysfunction (CCD) is a neuodegenerative disease with very similar characteristics to humans Alzhemers disease. Currently, the increase of pets life expectancy leads to the more frequent appearance of neurodegenerative diseases in these species. Among the main hypotheses for the appearance of CCD has the reduction of acetylcholine levels in the synaptic cleft. This hypothesis justifies many researches that search CCD treatment based on acetylcholinesterase (AChE) inhibition, an acetylcholine degrading enzyme. In this work, inhibitory potential of some commecial teas (apple tea, peppermint tea and green tea) toward brain AChE activity of dogs was evaluated. Green tea is tea more effective to inhibit this enzyme, getting a IC 50 of approximately 1.7 mg / mL. Quercetin, flavonol which according to the literature is present in green tea and absent in apple and peppermint teas, may be one of the molecules that contribute to AChE inhibition. In this way, quercetn anticholinesterase potential in canine brain was also evaluated, obtaining an IC 50 of 0.41 mM. Since quercetin has already been used in veterinary medicine for other fins, the anticholinesterase potential of this flavonol toward canine brain is of great relevance for CCD studies.(AU)

Desenvolvimento Físico e Neurocomportamental de Prole de Ratas Wistar após Tratamento com Ipriflavona durante a Lactação Plena / Physical and neurobehavioral development of rat offspring after maternal exposure to ipriflavoneduring lactation

A Ipriflavona (7-isopropoxi-3-fenil-4H-benzopiran-4-ona), um derivado sintético da isoflavona daidzeína, com ação estrogênica comprovada tem sido utilizado por mulheres com objetivo de aumentar a densidade óssea e prevenir a perda óssea. Estudos de toxicologia reprodutiva no período pré-implantacional apontam indícios de toxicidade, interferindo na implantação do blastocisto. Também foi demonstrado que a ipriflavona interfere na via de sinalização Hedgehog, importante no período de desenvolvimento embrionário. Estudos demonstram que as isoflavonas são transferidas para o leite materno o que poderia ocasionar danos a prole. Porém não foram encontrados estudos de toxicologia no período de lactação e desenvolvimento das crias utilizando-se da ipriflavona, sendo este o objetivo desse trabalho. Para o estudo foram utilizadas 48 ratas Wistar. Os animais foram distribuídos aleatoriamente em quatro grupos experimentais (n = 12): controle experimental e tratados I, II e III. O grupo controle experimental recebeu via intragástrica, duas vezes ao dia, do 2º ao 16º dia de lactação, 1 ml de água destilada e os grupos tratados receberam; pelo mesmo procedimento, 1 ml de suspensão aquosa de ipriflavona nas doses de 300, 1500 e 3000mg/kg/dose, respectivamente. As variáveis maternas analisadas foram: presença de sinais clínicos de toxicidade; ganho de peso corporal e consumo de ração. Foram observados comportamentos maternais como: postura de amamentação, organização e manutenção do ninho, ato de recuperar, recolher filhotes e lambê-los. Os filhotes foram analisados quanto ao desenvolvimento físico e reflexológico. Como variáveis de desenvolvimento físico foram analisados: peso corporal, abertura dos olhos, desdobramento das orelhas, aparecimento de lanugo e pêlos, erupção dos incisivos superiores e inferiores, a abertura vaginal ou descida dos testículos...(AU)

The Ipriflavone (7-isopropoxy-3-phenyl-4H-benzopyran-4-one), a synthetic derivative of the isoflavone daidzein, with proven estrogenic activity has been used by women in order to increase bone density and prevent bone loss. Reproductive toxicology studies in the pre-implantation show signs of toxicity, which interferes with implantation of the blastocyst. It was also shown that ipriflavone affects the Hedgehog signaling pathway, important during embryonic development. Studies show that isoflavones are transferred to breast milk which can cause damage to offspring. However no studies were found in toxicology during lactation and development of offspring using the ipriflavone, which is the aim of this work. For the study were used 48 female rats. The animals were randomly divided into four groups (n = 12) experimental control and treated I, II and III. The experimental control group received intragastrically, twice a day, from the 2nd to the 16th days of lactation, 1 ml of distilled water and the treated groups received, by the same procedure, 1 ml of water suspension of ipriflavone at doses of 300, 1500 and 3000mg / kg / dose, respectively. Maternal variables were analyzed: presence of clinical signs of toxicity, body weight gain and feed intake. Maternal behaviors were observed as: breastfeeding posture, organization and maintenance of the nest, the act of recovering, collect pups and licking them. The pups were assessed for physical development and reflexology. As physical variables were analyzed: body weight, eye opening, unfolding of the ears, and appearance of lanugo hair, eruption of upper and lower incisors, the vaginal opening or descent of the testicles. For observing the reflexology development were made the following tests: grip, posture response, dodging the abyss, orientation, and negative geotaxis. In the experimental model studied ipriflavone showed no signs of maternal toxicity, or changes in the physical and reflexology development of offspring.(AU)

Desenvolvimento Físico e Neurocomportamental de Prole de Ratas Wistar após Tratamento com Ipriflavona durante a Lactação Plena / Physical and neurobehavioral development of rat offspring after maternal exposure to ipriflavoneduring lactation

A Ipriflavona (7-isopropoxi-3-fenil-4H-benzopiran-4-ona), um derivado sintético da isoflavona daidzeína, com ação estrogênica comprovada tem sido utilizado por mulheres com objetivo de aumentar a densidade óssea e prevenir a perda óssea. Estudos de toxicologia reprodutiva no período pré-implantacional apontam indícios de toxicidade, interferindo na implantação do blastocisto. Também foi demonstrado que a ipriflavona interfere na via de sinalização Hedgehog, importante no período de desenvolvimento embrionário. Estudos demonstram que as isoflavonas são transferidas para o leite materno o que poderia ocasionar danos a prole. Porém não foram encontrados estudos de toxicologia no período de lactação e desenvolvimento das crias utilizando-se da ipriflavona, sendo este o objetivo desse trabalho. Para o estudo foram utilizadas 48 ratas Wistar. Os animais foram distribuídos aleatoriamente em quatro grupos experimentais (n = 12): controle experimental e tratados I, II e III. O grupo controle experimental recebeu via intragástrica, duas vezes ao dia, do 2º ao 16º dia de lactação, 1 ml de água destilada e os grupos tratados receberam; pelo mesmo procedimento, 1 ml de suspensão aquosa de ipriflavona nas doses de 300, 1500 e 3000mg/kg/dose, respectivamente. As variáveis maternas analisadas foram: presença de sinais clínicos de toxicidade; ganho de peso corporal e consumo de ração. Foram observados comportamentos maternais como: postura de amamentação, organização e manutenção do ninho, ato de recuperar, recolher filhotes e lambê-los. Os filhotes foram analisados quanto ao desenvolvimento físico e reflexológico. Como variáveis de desenvolvimento físico foram analisados: peso corporal, abertura dos olhos, desdobramento das orelhas, aparecimento de lanugo e pêlos, erupção dos incisivos superiores e inferiores, a abertura vaginal ou descida dos testículos...

The Ipriflavone (7-isopropoxy-3-phenyl-4H-benzopyran-4-one), a synthetic derivative of the isoflavone daidzein, with proven estrogenic activity has been used by women in order to increase bone density and prevent bone loss. Reproductive toxicology studies in the pre-implantation show signs of toxicity, which interferes with implantation of the blastocyst. It was also shown that ipriflavone affects the Hedgehog signaling pathway, important during embryonic development. Studies show that isoflavones are transferred to breast milk which can cause damage to offspring. However no studies were found in toxicology during lactation and development of offspring using the ipriflavone, which is the aim of this work. For the study were used 48 female rats. The animals were randomly divided into four groups (n = 12) experimental control and treated I, II and III. The experimental control group received intragastrically, twice a day, from the 2nd to the 16th days of lactation, 1 ml of distilled water and the treated groups received, by the same procedure, 1 ml of water suspension of ipriflavone at doses of 300, 1500 and 3000mg / kg / dose, respectively. Maternal variables were analyzed: presence of clinical signs of toxicity, body weight gain and feed intake. Maternal behaviors were observed as: breastfeeding posture, organization and maintenance of the nest, the act of recovering, collect pups and licking them. The pups were assessed for physical development and reflexology. As physical variables were analyzed: body weight, eye opening, unfolding of the ears, and appearance of lanugo hair, eruption of upper and lower incisors, the vaginal opening or descent of the testicles. For observing the reflexology development were made the following tests: grip, posture response, dodging the abyss, orientation, and negative geotaxis. In the experimental model studied ipriflavone showed no signs of maternal toxicity, or changes in the physical and reflexology development of offspring.

The effects of dietary flavonoid supplementation on the antioxidant status of laying hens

Ninety-six 28-week-old Lohmann White laying hens were utilized to test the antioxidant effects of flavonoids (hesperidin, naringin, and quercetin at 0.5 g/kg diet) during an 8-wk experimental period. At the end of the experiment blood samples were collected to determine total protein, cholesterol, and malondialdehyde (MDA) serum levels as well as activities of glutathione reductase (GR), glutathione peroxidase (GSH-Px), glutathione-S-transferase (GST), and superoxide dismutase (SOD) and level of glutathione (GSH) in erythrocyte lysates. Data were analyzed using one-way ANOVA. Naringin supplementation did not alter serum cholesterol concentration, whereas hesperidin and quercetin supplementations decreased serum cholesterol concentration. Naringin and quercetin supplementations did not affect serum protein concentration. All flavonoids decreased MDA concentration as well as increased GSH-Px, GR, GST, and SOD activities and GSH level, being quercetion superior to hesperidin and naringin. In conclusion, flavonoids, especially quercetin, exert antioxidant activity, which may help improve wellbeing when laying hens are exposed to stressors.

The effects of dietary flavonoid supplementation on the antioxidant status of laying hens

Ninety-six 28-week-old Lohmann White laying hens were utilized to test the antioxidant effects of flavonoids (hesperidin, naringin, and quercetin at 0.5 g/kg diet) during an 8-wk experimental period. At the end of the experiment blood samples were collected to determine total protein, cholesterol, and malondialdehyde (MDA) serum levels as well as activities of glutathione reductase (GR), glutathione peroxidase (GSH-Px), glutathione-S-transferase (GST), and superoxide dismutase (SOD) and level of glutathione (GSH) in erythrocyte lysates. Data were analyzed using one-way ANOVA. Naringin supplementation did not alter serum cholesterol concentration, whereas hesperidin and quercetin supplementations decreased serum cholesterol concentration. Naringin and quercetin supplementations did not affect serum protein concentration. All flavonoids decreased MDA concentration as well as increased GSH-Px, GR, GST, and SOD activities and GSH level, being quercetion superior to hesperidin and naringin. In conclusion, flavonoids, especially quercetin, exert antioxidant activity, which may help improve wellbeing when laying hens are exposed to stressors.(AU)

High resveratrol or quercetin concentrations reduce the oscillation index of frozen goat semen / Altas concentrações de resveratrol ou quercetina reduzem o índice de oscilação do sêmen congelado caprino

The aim of this study was to evaluate the effect of different concentrations of trans-resveratrol or quercetin on the ability of goat sperm to withstand being frozen. Six pools of semen obtained from six male goats were processed with different concentrations of resveratrol or quercetin (Experiment 1: 0, 15, 25, 50, 75 or 100µM resveratrol; Experiment 2: 0, 15, 25, 50, 75 or 100µM quercetin) and frozen. After thawing, the semen was evaluated for sperm kinematics, plasma membrane and acrosome integrity, morphology and oxidative stress following 0 and 1h of incubation. Immediately after thawing (0h), wobble (oscillation index) in the groups treated with 100µM of quercetin or resveratrol was lower (P<0.05) than in those treated with 0 and 25µM resveratrol and 0µM quercetin, respectively. After 1h of incubation, the total motility in treatments with 15, 50 and 75µM quercetin, as well as the plasma membrane integrity in all quercetin concentrations were lower (P<0.05) than at 0h. In opposition, the linearity of semen samples treated with 100µM quercetin and the straightness of those treated with 75 and 100µM quercetin were lower (P<0.05) at 0h than at 1h after thawing. Thus, it can be concluded that resveratrol and quercetin at high concentrations (100µM) transiently reduce the wobble of goat sperm submitted to frozen storage, and that quercetin (75 and 100µM) increases the linearity and straightness over time, which can be favorable for fertility.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de diferentes concentrações de transresveratrol ou quercetina sobre a capacidade dos espermatozoides caprinos de resistirem à congelação. Seis pools de sêmen, obtidos de seis reprodutores caprinos, foram processados com diferentes concentrações de resveratrol ou quercetina (Experimento 1: 0, 15, 25, 50, 75 ou 100µM de resveratrol; Experimento 2: 0, 15, 25, 50, 75 ou 100µM de quercetina) e congelados. Após o descongelamento, o sêmen foi avaliado quanto à cinética espermática, à integridade das membranas plasmática e acrossomal, à morfologia e ao estresse oxidativo nos tempos zero e uma hora de incubação. Imediatamente após a descongelação (zero hora), o wobble (índice de oscilação) nos grupos tratados com 100µM de quercetina ou de resveratrol foi menor (P<0,05) do que nos tratados com 0 e 25µM de resveratrol e com 0µM de quercetina, respectivamente. Após uma hora de incubação, a motilidade total dos tratamentos com 15, 50 e 75µM de quercetina, assim como a integridade de membrana plasmática em todas as concentrações de quercetina, foi menor (P<0,05) do que à zero hora. Em oposição, a linearidade das amostras de sêmen tratadas com 100µM de quercetina e a retilinearidade daquelas tratadas com 75µM e 100µM de quercetina foram menores (P<0,05) à zero hora do que à uma hora após descongelação. Assim, pode-se concluir que o resveratrol e a quercetina, em concentrações elevadas (100µM), reduzem, transitoriamente, o índice de oscilação de espermatozoides caprinos submetidos à congelação e que a quercetina (75 e 100µM) aumenta a linearidade e a retilinearidade ao longo do tempo, o que pode ser favorável à fertilidade.(AU)

High resveratrol or quercetin concentrations reduce the oscillation index of frozen goat semen / Altas concentrações de resveratrol ou quercetina reduzem o índice de oscilação do sêmen congelado caprino

The aim of this study was to evaluate the effect of different concentrations of trans-resveratrol or quercetin on the ability of goat sperm to withstand being frozen. Six pools of semen obtained from six male goats were processed with different concentrations of resveratrol or quercetin (Experiment 1: 0, 15, 25, 50, 75 or 100µM resveratrol; Experiment 2: 0, 15, 25, 50, 75 or 100µM quercetin) and frozen. After thawing, the semen was evaluated for sperm kinematics, plasma membrane and acrosome integrity, morphology and oxidative stress following 0 and 1h of incubation. Immediately after thawing (0h), wobble (oscillation index) in the groups treated with 100µM of quercetin or resveratrol was lower (P<0.05) than in those treated with 0 and 25µM resveratrol and 0µM quercetin, respectively. After 1h of incubation, the total motility in treatments with 15, 50 and 75µM quercetin, as well as the plasma membrane integrity in all quercetin concentrations were lower (P<0.05) than at 0h. In opposition, the linearity of semen samples treated with 100µM quercetin and the straightness of those treated with 75 and 100µM quercetin were lower (P<0.05) at 0h than at 1h after thawing. Thus, it can be concluded that resveratrol and quercetin at high concentrations (100µM) transiently reduce the wobble of goat sperm submitted to frozen storage, and that quercetin (75 and 100µM) increases the linearity and straightness over time, which can be favorable for fertility.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de diferentes concentrações de transresveratrol ou quercetina sobre a capacidade dos espermatozoides caprinos de resistirem à congelação. Seis pools de sêmen, obtidos de seis reprodutores caprinos, foram processados com diferentes concentrações de resveratrol ou quercetina (Experimento 1: 0, 15, 25, 50, 75 ou 100µM de resveratrol; Experimento 2: 0, 15, 25, 50, 75 ou 100µM de quercetina) e congelados. Após o descongelamento, o sêmen foi avaliado quanto à cinética espermática, à integridade das membranas plasmática e acrossomal, à morfologia e ao estresse oxidativo nos tempos zero e uma hora de incubação. Imediatamente após a descongelação (zero hora), o wobble (índice de oscilação) nos grupos tratados com 100µM de quercetina ou de resveratrol foi menor (P<0,05) do que nos tratados com 0 e 25µM de resveratrol e com 0µM de quercetina, respectivamente. Após uma hora de incubação, a motilidade total dos tratamentos com 15, 50 e 75µM de quercetina, assim como a integridade de membrana plasmática em todas as concentrações de quercetina, foi menor (P<0,05) do que à zero hora. Em oposição, a linearidade das amostras de sêmen tratadas com 100µM de quercetina e a retilinearidade daquelas tratadas com 75µM e 100µM de quercetina foram menores (P<0,05) à zero hora do que à uma hora após descongelação. Assim, pode-se concluir que o resveratrol e a quercetina, em concentrações elevadas (100µM), reduzem, transitoriamente, o índice de oscilação de espermatozoides caprinos submetidos à congelação e que a quercetina (75 e 100µM) aumenta a linearidade e a retilinearidade ao longo do tempo, o que pode ser favorável à fertilidade.(AU)

EFEITO DO FLAVONOIDE AGATHISFLAVONA NA MODULAÇÃO DA RESPOSTA GLIAL E NA POPULAÇÃO DE NEURÔNIOS CORTICAIS EM MODELO IN VITRO DE TRAUMATISMO CRANIOENCEFÁLICO

Em um primeiro momento, utilizou-se a prospecção científica para a avaliação ao nível mais alto de desenvolvimento em artigos científicos sobre pesquisa com o flavonoide agathisflavona. A pesquisa prospectiva resultou em 81 produções científicas expressas em diversos periódicos, submetidas por diferentes países, com aumento no número de publicações verificado na última década. Entre as atividades biológicas do flavonoide agathisflavona, já demonstradas, estão efeito hepatoprotetor, antiprotozoario, antibiótico, antiviral, imunomodulador, neurogênico e neuroprotetor. Nesta perspectiva, foi possível investigar os avanços no estudo do flavonoide agathisflavona para desenvolvimento de novas terapêuticas. Em um segundo momento, testou-se os efeitos da agathisflavona em um modelo in vitro de TCE. O TCE é uma patologia multifatorial, sendo causa importante de incapacitação em seres humanos e animais. A depender do estresse mecânico causado pelo TCE, os astrócitos reagem com mudanças complexas de fenótipo e função conhecidas como astrogliose. Em casos de dano tecidual severo, os astrócitos proliferam na área imediatamente adjacente à lesão e se entrelaçam formando a cicatriz glial que, apesar de importante para mitigar o dano inicial do TCE também interfere na posterior regeneração do SNC. O flavonoide agathisflavona tem demonstrado efeito neuroprotetor, neurogênico e imunomodulador, o que pode ser benéfico em situações de TCE. Neste estudo foram investigados os efeitos do flavonoide agathisflavona em um modelo in vitro de TCE em culturas primárias de córtex cerebral embrionário murino em termos de modulação da resposta astrocitária, integridade de neurônios e modulação de fatores neurotróficos e imunomodulatórios. Comparado com os controles, tratamento com agathisflavona (1 µM) diminuiu a expressão de GFAP e espessamento de processos astrocitários observado nas culturas lesionadas, e gerou um aumento no número de corpos de neurônios e crescimento de neuritos que adentram a lesão. Agathisflavona (0,1 e 1 µM) também induziu aumento na expressão de fatores neurotróficos NGF e GDNF, assim como da enzima arginase-1, associada com microglias de perfil neuroprotetor M2. Os resultados encontrados no presente estudo demonstram que o flavonoide agathisflavona modula a resposta astrocitária e formação de cicatriz glial, estimulando a recomposição da rede neural em um modelo in vitro de TCE, o que pode ser considerado para terapia de TCE.

Initially, scientific prospecting was used for evaluation at the highest level of development in scientific papers on research with the flavonoid agathisflavone. The prospective research resulted in 81 scientific productions expressed in several journals, submitted by different countries, with an increase in the number of publications verified in the last decade. Among the biological activities of the flavonoid agathisflavone, already demonstrated, are hepatoprotective, antiprotozoal, antibiotic, antiviral, immunomodulatory, neurogenic and neuroprotective effect. In this perspective, it was possible to investigate the advances in the study of the flavonoid agathisflavone for the development of new therapeutics. In a second step, the effects of agathisflavone on an in vitro model of TBI were tested. ECT is a multifactorial pathology, being an important cause of incapacitation in humans and animals. Depending on the mechanical stress caused by TBI, astrocytes react with complex phenotype and function changes known as astrogliosis. In cases of severe tissue damage, astrocytes proliferate in the area immediately adjacent to the lesion and intertwine forming a glial scar which, while important to mitigate the initial damage of the TBI, also interferes with the subsequent regeneration of the CNS. The flavonoid agathisflavone has demonstrated neuroprotective, neurogenic and immunomodulatory effects, which may be beneficial in situations of TBI. In this study we investigated the effects of flavonoid agathisflavone on an in vitro model of TBI in primary cultures of murine embryonic cerebral cortex in terms of modulation of astrocytic response, neuron integrity and modulation of neurotrophic and immunomodulatory factors. Compared with the controls, treatment with agathisflavone (1 M) decreased GFAP expression and thickening of astrocyte processes observed in the injured cultures, and generated an increase in the number of neuron bodies and neurite outgrowth that entered the lesion. Agathisflavone (0.1 and 1 M) also induced increased expression of NGF and GDNF neurotrophic factors, as well as the arginase-1 enzyme, associated with M2 neuroprotective profile microglia. The results found in the present study demonstrate that the flavonoid agathisflavone modulates the astrocytic response and glial scar formation, stimulating the neural network recomposition in an in vitro model of TBI, which can be considered for TBI therapy.

Adição de quercetina e progesterona ao sêmen equino

As variações e dificuldades em manter os parâmetros espermáticos da célula equina após manipulação (resfriamento e congelamento) nos leva a uma busca por substâncias que possam ser adicionadas aos meios de diluição de sêmen com o intuito de manter ou ainda melhorar a viabilidade celular. Com esse intuito, a presente dissertação testou, em dois experimentos, a adição de quercetina e progesterona ao sêmen equino. No experimento referente a adição da quercetina foram utilizados 10 cavalos da raça Crioula com idades entre 4 e 8 anos; a coleta de sêmen foi realizada com vagina artificial e 3 ejaculados de cada animal foi obtido (totalizando 30 ejaculados). As amostras foram submetidas a 5 diferentes tratamentos (0; 0,25mM; 0,5mM; 0,75mM e 1mM) de quercetina adicionadas previamente ao diluente de congelamento. As análises referentes aos parâmetros cinéticos da célula foram avaliadas de maneira subjetiva por uma pessoa treinada em microscópio contraste-fase e os parâmetros referentes a viabilidade da população espermática foram obtidos através de citometria de fluxo. A análise estatística realizada a partir dos dados obtidos não demonstrou diferença significativa entre os tratamentos e o controle (P > 0,05). O experimento referente a adição de progesterona foi realizado em duas etapas; a primeira etapa consistiu na realização de um teste de toxicidade do sêmen as diferentes concentrações do hormônio. A coleta do sêmen foi realizada com vagina artificial de um total de 10 cavalos da raça Crioula com idades entre 4 e 10 anos; posteriormente a isso as amostras foram submetidas a resfriamento até a temperatura de 5°C e adicionados os tratamentos contendo 7 diferentes concentrações de progesterona (0; 1; 2,5; 5; 10; 100 e 1000 ng/mL) em 3 tempos de exposição (0,5h; 3h e 24h). A segunda etapa consistiu na criopreservação do sêmen obtidos através de vagina artificial de 15 cavalos da raça Crioula com idades entre 4 e 10 anos. Os ejaculados foram submetidos aos tratamentos com 5 concentrações diferentes de progesterona (0; 1; 5; 10 e 100 ng/mL) adicionados ao meio diluente de criopreservação previamente ao congelamento. As análises em ambas as fases do experimento, dos parâmetros cinéticos espermáticos foram feitas pelo Sistema Computadorizado de Análise de Sêmen (CASA), bem como em ambas as avaliações feitas por citometria de fluxo referentes a viabilidade da população espermática.A análise estatística realizada posteriormente ao teste de toxicidade, ou seja, com o sêmen resfriado demonstrou melhora estatística (P < 0,05) nas concentrações de 5 e 1000 ng/mL no período de 3h de exposição em parâmetros relacionados com velocidade e distância percorrida do espermatozoide (DAP, DCL, DSL, VAP, VCL, VSL). Houve também aumento significativo na reação de acrossoma após 24 horas de exposição na concentração de 5 ng/mL e diminuição significativa (P < 0,05) da peroxidação lipídica (LPO) nas concentrações de 10, 100 e 1000 ng/mL também no período de 24 horas. Os dados obtidos das amostras pós-descongelamento demonstraram uma diminuição (P <0,05) da produção de espécies reativas de oxigênio (ROS), entretanto os outros parâmetros avaliados não diferiram estatisticamente do controle. A partir de todos os dados obtidos nos dois experimentos é possível afirmar que a adição de quercetina e progesterona ao meio de diluição, previamente a criopreservação não é interessante, uma vez que não impõe melhoras significativas na qualidade espermáticas; entretanto a adição de progesterona ao sêmen fresco resfriado demonstrou ações benéficaspara imediata utilização do sêmen, como hiperativação,capacitação e ação anti-oxidante.

The variations and difficulties on maintaining the equine sperm parameters after manipulation (cooling and cryopreservation) take the scientists in a journey researching for substances that are able to be added to the dilution semen medium in order to keep or improve sperm viability. That being said, the present study has tested, in two different experiments, the addition of quercetin and progesterone to the equine semen. In the quercetin experiment, 10 Crioulo horses with ages between 4 and 10 years old were used, semen collection were performed with artificial vagina and 3 ejaculates of each animal were obtained (totalizing 30 ejaculates). The samples were submitted to 5 different treatments (0; 0,25mM; 0,5mM; 0,75mM and 1mM) of quercetin added in the freezing medium before the cryopreservation process. The analyzes concerning kinect sperm parameters were assessed in a subjective manner by a trained person in phase-contrast microscope and the parameters related to sperm population viability were examined by flow cytometry. Statistical analysis made from data obtained did not showed significant difference between treatments and the control (P > 0,05). The progesterone addition experiment was performed in two phases; the first phase consisted in the realization of a sperm toxicity test to the different hormonal concentrations. Semen collection was also realized with artificial vagina in a total of 10 Crioulo horses in ages between 4 to 10 years; posteriorly semen samples were submitted to cooling process until reach 5°C and adding the treatments containing 7 different progesterone concentrations (0; 1; 2,5; 5; 10; 100 e 1000 ng/mL) in 3 different times of exposition (0,5h; 3h e 24h). The second phase consisted in the sperm cryopreservation from 15 Crioulo horses collected with artificial vagina and with ages between 4 to 10 years. The ejaculates undergone to 5 different concentrations of progesterone (0; 1; 5; 10 e 100 ng/mL) added to freezingmedium previously to the cryopreservation process. In both analysis concerning progesterone experiment, kinect parameters were obtained by the Computer Assistant Sperm Analysis (CASA), as well as the flow cytometer tests regarding viable sperm population were utilized. The statistical data showed that after the toxicity test, with cooled semen, a significant improvement (P < 0,05) with the concentrations of 5 and 1000 ng/mL for 3-hour of exposition in velocity and average distance sperm parameters (DAP, DCL, DSL, VAP VCL, VSL). There was a significant raising on acrosome reaction at the 24-hour exposition time with the 5 ng/mL concentration treatment and also a significant decrease (P < 0,05) of lipid peroxidation (LPO) in the concentrations of 10, 100 and 1000 ng/mL in the 24-hour time of exposition. Information collected from thawing samples demonstrated an impairment (P < 0,05) in the reactive oxygen species, however the other parameters assessed did not differ from the control. From these data obtained in both experiments it is possible for us to conclude that the addition of quercetin to the freezing medium before the cryopreservation it is not interesting, once it does not presents significant improvements in sperm quality. On the other hand, the addition of progesterone to the fresh cooled semen demonstrated beneficial actions for the immediate use of semen, such as hyperactivation, capacitation and anti-oxidant effects.

Efeito da quercetina na maturação in vitro de oócitos caprinos

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da quercetina como antioxidante alternativo à cisteamina na maturação in vitro. Ovários caprinos foram transportados do matadouro local para laboratório em solução salina a 0,9%, a 30°C, até três horas após o abate. Após a colheita, os oócitos foram avaliados e divididos em três grupos: Grupo CIS, onde os oócitos foram imersos em meio MIV base: TCM-199, suplementado com EGF (10 g/mL), FSH/LH (10 L/mL), soro de ovelha em estro (100 L/mL) e cisteamina (10 L/mL); nos Grupos Q4 ou Q8, os oócitos foram imersos em meio base isento de cisteamina, suplementado com 4 M ou 8 M de quercetina, respectivamente. A MIV dos oócitos foi realizada a 38,5°C em atmosfera umidificada de 5% de CO2 em ar, durante 24 horas. Os grupos CIS e Q4 apresentaram a mesma porcentagem de células cumulus expandidas, mas o grupo Q8 foi significativamente menor que os demais grupos (P<0,05). A taxa de retração de oócitos no grupo Q8 foi maior (P<0,05) do que os tratamentos adicionais. Em relação à expansão das células do cumulus, o tratamento com 8 M de quercetina apresentou menor proporção de oócitos expandidos com grau 1 (Total) do que os tratamentos adicionais (P<0,05). A percentagem de oócitos MII foi maior no grupo Q4 do que no grupo CIS (P<0,05), mas os grupos CIS e Q8 foram semelhantes. A taxa de apoptose foi maior no grupo CIS do que nos grupos adicionais (P<0,05). Os oócitos dos grupos CIS e Q4 apresentaram os mesmos níveis de espécies reativas de oxigênio (ERO) e glutationa (GSH). Além disso, os oócitos maturados com 4 M de quercetina apresentaram maior atividade mitocondrial do que os oócitos maturados nos grupos CIS e Q8 (P<0,05). Em conclusão, 4 M de quercetina pode ser utilizada como alternativa à cisteamina na maturação in vitro de oócitos de caprinos, pois, a mesma resultou em taxas de maturação oocitária de caprinos maiores que àquelas obtidas com cisteamina, mantendo constantes os níveis de expansão das células do cumulus, glutationa, ERO, além, de elevar a atividade mitocondrial. Contudo, a concentração de 8 M, levou à redução dos níveis de ERO, GSH e atividade mitocondrial oocitária, demonstrando menor viabilidade celular.

The objective of this study was to evaluate the effect of quercetin as an alternative antioxidant to cysteamine during in vitro maturation. Ovary goats were transported from the local slaughterhouse to the laboratory in 0.9% saline at 30 ° C until three hours after slaughter. After collection, the oocytes were evaluated and divided into three groups: CIS Group, where the oocytes were immersed in MIV medium: TCM-199, supplemented with EGF (10 g / mL), FSH / LH (10 L / mL), Estrus sheep serum (100 L / mL) and cysteamine (10 L / mL); In Groups Q4 or Q8, oocytes were immersed in cysteamine-free base medium, supplemented with 4 M or 8 M quercetin, respectively. The IVM of the oocytes was performed at 38.5 ° C in humidified atmosphere of 5% CO2 in air for 24 hours. The CIS and Q4 groups presented the same percentage of expanded cumulus cells, but the Q8 group was significantly lower than the other groups (P <0.05). The oocyte retraction rate in the Q8 group was higher (P <0.05) than the additional treatments. In relation to the expansion of cumulus cells, treatment with 8 M quercetin presented a lower proportion of expanded oocytes with grade 1 (Total) than the additional treatments (P <0.05). The percentage of MII oocytes was higher in the Q4 group than in the CIS group (P <0.05), but the CIS and Q8 groups were similar. The rate of apoptosis was higher in the CIS group than in the additional groups (P <0.05). Oocytes from the CIS and Q4 groups showed the same levels of reactive oxygen species (ROS) and glutathione (GSH). In addition, oocytes matured with 4 M quercetin showed higher mitochondrial activity than mature oocytes in the CIS and Q8 groups (P <0.05). In conclusion, 4 M of quercetin can be used as an alternative to cysteamine in the in vitro maturation of goat oocytes, as it resulted in rates of oocyte maturation of goats larger than those obtained with cysteamine, maintaining constant levels of cell expansion Of the cumulus, glutathione, ERO, in addition to elevating mitochondrial activity. However, the concentration of 8 M led to the reduction of ROS levels, GSH and oocyte mitochondrial activity, demonstrating lower cell viability.

Nanoemulsões encapsulando quercetina produzidas pelo método do ponto de inversão da emulsão (EIP): estabilidade físico-química e avaliação da atividade antioxidante in vitro e em produto cárneo

DE CARLI, C. Nanoemulsões encapsulando quercetina produzidas pelo método do ponto de inversão da emulsão (EIP): estabilidade físico-química e avaliação da atividade antioxidante in vitro e em produto cárneo. 2017. 139 f. Dissertação (Mestrado) Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos, Universidade de São Paulo, Pirassununga, 2017. A quercetina é um flavonoide com alta atividade antioxidante reconhecida. Devido a este fato, a indústria alimentícia tem buscado alternativas para a aplicação deste bioativo como antioxidante em matrizes alimentícias. No entanto, incorporar a quercetina em formulações alimentícias pode ser desafiador, pois sua molécula tem relativo grau de hidrofobicidade. Os métodos de encapsulação em nanoemulsões podem tornar viável a proteção do flavonoide, bem como permitir sua dispersibilidade em meios aquosos . O objetivo do presente trabalho foi produzir nanoemulsões (fase oleosa: óleo de girassol) encapsulando quercetina pelo método do ponto de inversão da emulsão (EIP, emulsion inversion point), determinando parâmetros de operação que viabilizem um futuro escalonamento do processo, e a realização de um estudo de caso sobre a incorporação das nanodispersões em patê de frango. Os parâmetros de produção que foram avaliados foram : tipo e concentração de tensoativo (razão SOR, razão tensoativo:óleo), concentração de óleo, concentração de cosolvente e velocidade de agitação. Foram produzidas nanoemulsões utilizando dois tensoativos diferentes, Tween 80 e Brij 30. As porcentagens de quercetina encapsulada foram 0,15 e 0,30% (m/m). Dentre estas, a concentração de 0,30% foi a mais viável para a aplicação no patê de frango, por apresentar melhor distribuição de tamanho de gotícula (diâmetro hidrodinâmico), não apresentar variação significativa de oxidação lipídica e maior conservação da quercetina encapsulada por um período de 90 dias. Os valores de tensão interfacial obtidos mostram que a quercetina provoca abaixamento da tensão interfacial do sistema, o que pode indicar que a quercetina forma um complexo com os tensoativos utilizados, fato que influencia decisivamente na sua localização nas nanogotas. Das formulações testadas para patê de frango contendo quercetina, apenas a formulação usando quercetina livre não apresentou boa avaliação nos itens cor e sabor. Tal resultado justifica a necessidade da incorporação da quercetina em nanoemulsões para não causar alterações sensoriais no produto.

DE CARLI, C. Nanoemulsions encapsulating quercetina produced by the emulsion inversion point method (EIP): physicochemical stability and evaluation of in vitro antioxidant activity and after incorporation in meat product. 2017. 139 f. Dissertation (Master) Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos, Universidade de São Paulo, Pirassununga, 2017. Quercetin is a flavonoid with recognized high antioxidant activity Due to this fact, the food industry has been trying to use it as an alternative as a preservative in food matrices. However, incorporating quercetin into food formulations may be challenging due to its relative degree of hydrophobicity. Encapsulation methods in nanoemulsions may render the protection of the flavonoid viable, as well as enable its dispersibility in aqueous media. The objective of the present study was to produce nanoemulsions (oil phase: sunflower oil) encapsulating quercetin by the emulsion inversion point method (EIP), determining operating parameters that enable a future process scale-up. A case study on the incorporation of nanodispersions into chicken patê was also carried out. The production parameters evaluated were: type and concentration of surfactant (SOR ratio, surfactant:oil ratio), soybean oil concentration, cosolvent concentration and stirring speed. Nanoemulsions were produced using two different surfactants, Tween 80 and Brij 30. The percentages of encapsulated quercetin were 0.15 and 0.30% (m / m). Among these, the concentration of 0.30% was the most feasible for application in chicken pâté, since it presented better droplet size distribution (hydrodynamic diameter), did not present significant variation of lipid oxidation and higher capacity of preserving encapsulated quercetina for a period of 90 days. The interfacial tension values obtained show that quercetin lowered the interfacial tension of the system, which may indicate that quercetin forms a complex with the surfactants used, a fact that decisively influences its location in the nanodroplets. Among the formulations tested in chicken pâté containing quercetin, only the formulation using free quercetin did not show good acceptance evaluation on the color and taste itens. Such an evaluation was important as it justifies the need for the incorporation of quercetin into nanoemulsions in order to not cause significant sensorial changes in the product.