Erythrogram and oxidative stress in confined cattle fed with Brachiaria sp hay and supplemented with antioxidants / Eritrograma e estresse oxidativo em bovinos confinados alimentados com feno de Brachiaria sp. e suplementados com antioxidantes

Brachiaria sp contains sporidesmin that can be oxidized by lipoperoxidation and cause oxidative stress. In the present study we evaluated the effects of different antioxidants on lipoperoxidation of erythrocytes from Nelore cattle fed with Brachiaria sp hay. The experimental design was entirely randomized, in which 40 whole male cattle were divided into five treatments (G1: control - no supplementation; G2: selenium and vitamin E supplementation; G3: zinc supplementation; G4: selenium supplementation and G5: vitamin E supplementation) and allocated in feedlot pens for 105 days. The samples heparinized and withethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) were obtained every 28 days for hematological and oxidative stress evaluation (0, 28 56, 84 and 105 days). In the erythrogram total erythrocyte count, hemoglobin, and hematocrit (Ht) were measured. For the evaluation of oxidative stress, in order to analyze the characteristics of the erythrocyte membrane, the thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), total glutathione (GSH-T), glutathione peroxidase (GSH-Px), catalase (CAT) and superoxide dismutase (SOD) were determined. The results showed that regardless of the treatment there was no oxidative stress during the experimental confinement period and that the joint association of selenium and vitamin E in the bovine diet provided a lower incidence of deleterious alterations on erythrocytes.

As Brachiaria sp contêm esporidesminas que podem ser oxidadas por lipoperoxidação e ocasionar estresse oxidativo. No presente estudo foram avaliados os efeitos de diferentes antioxidantes na lipoperoxidação dos eritrócitos de bovinos da raça Nelore, alimentados com feno de Brachiaria sp. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, em que 40 bovinos machos, inteiros, foram divididos, em cinco tratamentos (G1: controle - sem suplementação; G2: suplementação de selênio e vitamina E; G3: suplementação de zinco; G4: suplementação de selênio e G5: suplementação de vitamina E) e alocados em baias de confinamento, por 105 dias. As amostras de plasma heparinizado ou com ácido etilenodiamino tetra-acético (EDTA) foram obtidas a cada 28 dias para avaliação hematológica e de estresse oxidativo (0, 28 56, 84 e 105 dias). No eritrograma foi mensurado a contagem total de eritrócitos, a hemoglobina e o volume globular (VG). Para a avaliação do estresse oxidativo, com o objetivo de analisar as características da membrana do eritrócito foram determinadas as substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), glutationa total (GSH-T), glutationa peroxidase (GSH-Px), catalase (CAT) e superóxido dismutase (SOD). Os resultados demonstraram que independente do tratamento não houve estresse oxidativo durante o período do confinamento experimental e que a associação conjunta de selênio e vitamina E na dieta dos bovinos proporcionaram menor incidência de alterações deletérias sobre os eritrócitos.

Toxicidade do 2,4 diclorofenoxiacético em juvenis de Rhamdia quelen

Um dos herbicidas mais comumente usados na agricultura é o ácido 2,4 diclorofenoxiacético, seu uso indiscriminado tem gerado aumento da poluição das águas, causando grandes preocupações ambientais. O objetivo do presente estudo foi determinar os efeitos toxicológicos do herbicida 2,4-D em juvenis de Rhamdia quelen (jundiá). Para tal, 96 exemplares de Rhamdia quelen foram submetidos a um teste agudo (96h) de exposição ao herbicida 2,4 D nas concentrações crescentes de 0,0 (grupo controle); 15; 30 e 45 mg/L. Para cada concentração foram feitas 4 réplicas, com 6 exemplares cada. Após 96 horas, os animais foram pesados, medidos e anestesiados para a coleta de sangue para as análises hematológicas, sendo quantificados: o número de eritrócitos, leucócitos, trombócitos e monócitos. Em seguida, os animais foram eutanasiados e laparatomizados para a coleta dos músculos e fígados destinados às análises histomorfométricas e bioquímicas. Para histomorfometria, fígado e músculo foram isolados limpos e pesados sendo submetidos a técnicas histológicas de rotina, corados e avaliados quanto ao Índice hepatossomático (IHS) e Fator de condição (FC). Um fragmento hepático, foi destinado análise enzimática da Lipoperoxidação oxidativa (LPO), Acetilcolinesterase (AChE) e Proteínas totais (PT). As análises hematológicas mostraram que o 2,4-D provoca alteração no número de leucócitos, monócitos e trombócitos, em todas as concentrações em comparação ao grupo controle (não exposto). Já o valor médio de eritrócitos foi de 1,6x106µL-1 . O 2,4-D não alterou significativamente o diâmetro das fibras musculares, porém o herbicida nas concentrações de 30 e 45mg/L reduziu e aumentou, respectivamente, o número de hepatócitos quando comparado ao grupo controle (não exposto). A atividade da LPO hepática não foi alterada pelo 2,4-D em nenhuma concentração utilizadas. Similarmente, não foi evidenciada inibição da atividade da Acetilcolinesterase (AChE) hepática nos animais expostos ao 2,4-D. Todavia, nas concentrações de 30 e 45mg/L do 2,4-D foi observada redução da proteína total. As alterações encontradas em Rhamdia quelen expostos a 2,4-D indicam que, agudamente a exposição ao herbicida promove principalmente danos hepáticos e hematológicos, indicando maior vulnerabilidade destes tecidos ao herbicida a curto prazo. É provável que a exposição crônica possa elevar o dano e provocar maiores alterações em outros tecidos. Os resultados obtidos neste trabalho demonstrarão o grau de toxicidade do herbicida e serão apresentados em dois capítulo que irão contribuir com novas pesquisas desenvolvidas com ensaios toxicológicos utilizando o herbicida 2,4-D, os dados irão auxiliar na compreensão dos comportamentos morfométricos, histológicos, hematológicos e bioquímicos de juvenis da espécie Rhamdia quelen, expostos a uma contaminação aguda pelo herbicida 2,4-D.

One of the most commonly used herbicides in agriculture is 2.4-dichlorophenoxyacetic acid, its indiscriminate use has generated an increase in water pollution, causing great environmental concerns. The aim of the present study was to determine the toxicological effects of the 2.4-D herbicide on juveniles of Rhamdia quelen (jundiá). For this purpose, 96 specimens of Rhamdia quelen were submitted to an acute test (96h) of exposure to the 2.4-D herbicide at increasing concentrations of 0.0 (control group); 15; 30 and 45 mg/L. For each concentration, 4 replicates were made, with 6 copies each. After 96 hours, the animals were weighed, measured and anesthetized for blood collection for hematological analysis, and the number of erythrocytes, leukocytes, thrombocytes and monocytes was quantified. Then, the animals were euthanized and laparatomized to collect the muscles and livers for histomorphometric and biochemical analysis. For histomorphometry, liver and muscle were isolated clean and weighed and subjected to routine histological techniques, stained and evaluated for hepatosomatic index (HSI) and condition factor (CF). A liver fragment was destined for enzymatic analysis of Oxidative Lipoperoxidation (OLP), Acetylcholinesterase (AChE) and Total Proteins (TP). Hematological analysis showed that 2.4-D causes changes in the number of leukocytes, monocytes and thrombocytes at all concentrations compared to the control group (not exposed). The mean value of erythrocytes was 1.5x106µL-1 . 2.4-D did not significantly change the diameter of muscle fibers, but the herbicide at concentrations of 30 and 45mg/L reduced and increased, respectively, the number of hepatocytes when compared to the control group (no exposed). The activity of hepatic LPO was not altered by 2.4-D at any of the concentrations used. Similarly, there was no evidence of inhibition of hepatic Acetylcholinesterase (AChE) activity in animals exposed to 2.4-D. However, at concentrations of 30 and 45mg/L of 2.4-D, a reduction in total protein was observed. The changes found in Rhamdia quelen exposed to 2.4- D indicate that acute exposure to the herbicide mainly promotes liver and hematological damage, indicating greater vulnerability of these tissues to the herbicide in the short term. It is likely that chronic exposure can increase the damage and cause greater changes in other tissues. The results obtained in this work will demonstrate the degree of toxicity of the herbicide and will be presented in two chapters that will contribute to new researches developed with toxicological tests using the 2.4-D herbicide, the data will help to understand the morphometric, histological, hematological behaviors and biochemicals of juveniles of the species Rhamdia quelen, exposed to an acute contamination by the 2.4-D herbicide.

ADIÇÃO DE CARNOSINA COMO ANTIOXIDANTE EM SÊMEN BOVINO CONGELADO

A criopreservação de sêmen é uma tecnologia de grande importância na área reprodutiva, por possibilitar melhor disseminação genética de touros, consequentemente aumentando a produtividade dos rebanhos comercias nacionais, por ser a técnica com maior custo-benefício é a mais utilizada, porém ainda se tem algumas dificuldades a qual deve-se solucionar para obter maior produção. A excessiva produção de radicais livres após o descongelamento é uma delas, com o objetivo amenizar os danos causados pelas moléculas dos radicais livres adicionou-se a proteína carnosina que possui propriedades antioxidativas ao diluente de congelação. Foram utilizados os ejaculados de 5 touros da raça nelore de idade superior a 24 meses com fertilidade comprovada, cada animal foi coletado 3 vezes somando-se 15 ejaculados, posteriormente cada amostra foi subdividida em a 4 parcelas: Grupo controle (sem carnosina), CAR1 (100ng/ml), CAR2 (200ng/ml) e CAR3(300ng/ml), as amostras foram envasadas em palhetas de 0,5ml com concentração de 30 milhões de espermatozoides vivos e submetidas ao processo de congelamento lento convencional, onde as palhetas foram acomodadas em uma caixa térmica sob refrigeração de 5ºC por 4 horas, passado o tempo de resfriamento as palhetas foram relocadas para uma caixa de isopor com nitrogênio líquido a uma distância de 5cm da superfície do liquido por 20 minutos e posteriormente mergulhadas no nitrogênio líquido a uma temperatura de -196ºC e armazenadas em botijão criogênico. Todas as amostras foram submetidas as análises em dois momentos, após o descongelamento a 37ºC por 30 segundos (M0) e após o teste de termo regulação rápida (M30) onde uma parcela da amostra é incubada a 46ºC por 30 minutos. Em ambos os momentos as amostras passaram por avaliação pelo CASA para análise da cinética espermática e pela avaliação do citômetro de fluxo para averiguar as injúrias estruturais ocasionadas pelos radicais livres. As avaliações estatísticas foram realizadas através do software SAS utilizando a análise de variância entre os grupos. Não houve alterações nos padrões de motilidade gerais, porém as médias do grupo mais concentrado (300ng/ml) foi observado taxas de células vivas melhores no momento de descongelamento (controle = 55,56 ± 22,37 e CAR3 = 60,91 ± 19,38). A carnosina não demostrou estatisticamente efetividade na proteção contra os danos causados pelos radicais livres em nenhuma das concentrações utilizadas, porém também não ocasionaou danos as células espermáticas.

The cryopreservation of a technology of great importance in the reproductive area, as it allows a better genetic dissemination of bulls, is consequently impaired in the tests of herds of national traders, as it is the most cost-effective technique, it is the most used, but still has some difficulties to qualify problems for greater production. An excessive production of free radicals after thawing is one of them, with the objective of causing damage caused by free radical molecules, applied to a fleshy protein that has antioxidant properties and freezing diluents. Ejaculates from 5 bulls aged over 24 months with proven fertility were used, each animal was collected 3 times with the command 15 ejaculates, afterwards each sample was subdivided into 4 parcels: Control group (without carnosine), CAR1 (100ng / ml), CAR2 (200ng / ml) and CAR3 (300ng / ml), as the samples were packaged in 0.5 ml palettes with a concentration of 30 million live sperm and subjected to a conventional slow freezing process, where the palettes were accommodated in a thermal box under 5ºC refrigeration for 4 hours, after the cooling time as reeds were relocated to a Styrofoam box with liquid nitrogen at a distance of 5cm from the liquid surface for 20 minutes and after drying in liquid nitrogen at a temperature of -196ºC and stored in a cryogenic cylinder. All samples were subjected to analysis in two moments, after thawing at 37ºC for 30 seconds (M0) and after the rapid thermodynamics test (M30) where a portion of the sample is incubated at 46ºC for 30 minutes. At both times, the tests were evaluated by CASA for analysis of sperm kinetics and by the evaluation of the flow cytometer for average, according to injuries occasionally shown by free radicals. How the statistics were performed using the SAS software, using an analysis of variation between groups. There were no changes in the general mobility patterns, however the media of the most concentrated group (300ng / ml) were observed better live cell rates at the time of thawing (control = 55.56 ± 22.37 and CAR3 = 60.91 ± 19 38). Carnosine does not demonstrate statistically effectiveness in protecting against damage caused by free radicals in any of the applications used, but it also does not cause damage such as sperm cells.

EFEITOS DA INTERAÇÃO ENTRE TEMPERATURA E OXIGÊNIO DISSOLVIDO EM JUVENIS DE PACU Piaractus mesopotamicus (HOLMBERG 1887)

O pacu P. mesopotamicus é uma espécie que pelas suas características, apresenta grande potencial para cultivos intensivos, nos quais o oxigênio dissolvido (OD) é um dos principais limitantes. Além disso, o cultivo dessa espécie em regiões de clima subtropical, onde ocorre ampla variação térmica, a interação de fatores como o OD e a temperatura podem causar alterações bioquímicas e fisiológicas nos peixes. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi verificar os efeitos da interação entre diferentes temperaturas e níveis de OD nos parâmetros hematológicos e de estresse oxidativo em juvenis de pacu. Foram realizados 2 experimentos (EXP): EXP 1 - interação entre diferentes temperaturas (~18, ~23 e ~28 °C) e níveis de OD (~2 - hipóxia, ~4,5 hipóxia moderada e ~7 mg OD L-1 normóxia) por um período de 12 h. Imediatamente após esse período foram coletadas amostras de sangue, brânquias, fígado, músculo e cérebro de 9 peixes por tratamento. No EXP 2 os peixes foram expostos a interação entre as mesmas temperaturas supracitadas, hipóxia e normóxia (~2 e ~7 mg OD L-1) durante 12 h. Ao final desse período foram submetidos a diferentes velocidades de reoxigenação, abrupta (0,5 h) e gradual (5 h). Após 1, 3 e 12 h do final da reoxigenação foram coletadas amostras de sangue (n=9), e em 1 e 12 h também amostras de brânquias e fígado. Os resultados demonstram que os efeitos da interação entre diferentes temperaturas e níveis de OD em juvenis de pacu são órgão específicos. A análise dos parâmetros sanguíneos durante a exposição a diferentes temperaturas e níveis de hipóxia indicaram alterações mais evidentes na glicose e pH sanguíneos. A reoxigenação abrupta a 23 e 28 ºC levou a alterações na glicose sanguínea e na maior temperatura no lactato sanguíneo em até 3 h. Entretanto, na temperatura de 23 ºC o aumento do lactato sanguíneo ocorreu após 3h e se manteve elevado até 12 h após o fim da reoxigenação.Uma indução da condição pró oxidante foi observada no fígado, músculo e cérebro ix impulsionado pela interação de diferentes temperaturas e níveis de hipóxia 1 evidenciado pelo aumento nos níveis de dano oxidativo (lipoperoxidação - LPO e conteúdo de tióis proteicos - PSH) associados a uma inibição do sistema de defesa antioxidante (capacidade antioxidante total - ACAP e glutationa-S-transferase - GST). Com relação às velocidades de reoxigenação, juvenis de pacu mantidos em 18 °C foram capazes de se adaptar melhor com uma reoxigenação abrupta, evidenciada pelos menores níveis de dano oxidativo (LPO) nas brânquias e no fígado. Após 12 h do final da reoxigenação apenas os peixes mantidos em 23 °C e submetidos a reoxigenação abrupta e aqueles mantidos em 28 °C e submetidos a reoxigenação gradual apresentaram todos os parâmetros sanguíneos dentro dos níveis basais. Sendo assim, a interação entre diferentes temperaturas e níveis de OD por um período de 12 h causam distúrbios metabólicos, ácido base, além de induzir estresse oxidativo. Entretanto, essa espécie demonstrou ser tolerante à hipóxia e à reoxigenação, apresentando 100% de sobrevivência. Peixes mantidos entre 23 e 28 °C e submetidos à reoxigenação gradual são menos susceptíveis a danos oxidativos. Um período de 12 h é suficiente para restabelecer os parâmetros bioquímicos e fisiológicos dependendo da temperatura e velocidade de reoxigenação que foram submetidos os pacus.

The pacu, P. mesopotamicus, is a species that, due to its characteristics, has great potential for intensive culture, in which dissolved oxygen (DO) is one of the main limitations. In addition, the culture of this species in regions of subtropical climate, where there is wide thermal variation, the interaction of factors such as DO and temperature can cause biochemical and physiological changes in fish. Thus, the aim of this study was to verify the effects of interaction between different temperatures and DO levels on hematological parameters and oxidative stress in pacu juveniles. Two experiments were carried out (EXP): EXP 1 - interaction between different temperatures (~ 18, ~ 23 and ~ 28 ° C) and DO levels (~ 2 - hypoxia, ~ 4.5 - moderate hypoxia and ~ 7 mg DO L-1 normoxia) for a period of 12 h. Immediately after this period, blood, gills, liver, muscle and brain samples were collected from 9 fish per treatment. In EXP 2 the fish were exposed to interaction between the same temperatures mentioned above, hypoxia and normoxia (~ 2 and ~ 7 mg OD L-1) for 12h. At the end of this period, they were submitted to different speeds of reoxygenation: abrupt (0.5 h) and gradual (5 h). After 1, 3 and 12 h of the end of reoxygenation blood samples were collected (n=9), as well as samples of gills and liver at 1 and 12 h. The results demonstrate that the effects of the interaction between different temperatures and DO levels in pacu juveniles are organ specific. The analysis of blood parameters during exposure to different temperatures and levels of hypoxia indicated more evident changes in blood glucose and pH. The abrupt reoxygenation at 23 and 28 ºC provoked changes in blood glucose and at the highest temperature in blood lactate in up to 3 hours. However, at 23 ºC, the blood lactate increase occurred after 3 h and remained elevated until 12 hours after the end of reoxygenation. An induction of pro oxidant condition was observed in the liver, muscle and brain driven by the interaction of different temperatures and hypoxia levels,xi evidenced by increase in oxidative damage levels (lipoperoxidation 1 - LPO and protein thiol content - PSH) associated with an inhibition of antioxidant defense system (total antioxidant capacity - ACAP and glutathione-S-transferase - GST). Regarding reoxygenation speeds, pacu juveniles kept at 18 °C were able to adapt better with abrupt reoxygenation, evidenced by the lower oxidative damage levels (LPO) in the gills and liver. After 12 h from the end of reoxygenation, only fish kept at 23 °C and subjected to abrupt reoxygenation and those kept at 28 °C and subjected to gradual reoxygenation showed all blood parameters within baseline levels. Thus, the interaction between different temperatures and DO levels for a period of 12 h causes metabolic and acid base disturbances, in addition to inducing oxidative stress. However, this species proved to be tolerant to hypoxia and reoxygenation. Fish kept between 23 and 28 °C and subjected to gradual reoxygenation are less susceptible to oxidative damage, present 100% survival. A period of 12 h is sufficient to reestablish the biochemical and physiological parameters depending on the temperature and speed of reoxygenation that were submitted the pacu.

EFEITO DA L-CARNITINA EM DILUENTE PARA CRIOPRESERVAÇÃO DO SÊMEN OVINO

Este estudo avaliou o efeito de três diferentes concentrações de L-carnitina (LC) em diluidores de sêmen de ovinos contendo ou não gema de ovo para criopreservação. Quatro carneiros da raça Santa Inês foram utilizados durante a estação reprodutiva. O sêmen foi avaliado quanto à sua qualidade e concentração e posteriormente diluído e armazenado em palhetas. Utilizaram-se dois diluidores, TRIS-gema ou o meio comercial optiXcell IMV, totalizando seis grupos experimentais: IMV - (0, 5 e 10 mM LC) e TRIS - (0, 5 e 10 mM LC). Após o processo de diluição, congelamento-descongelamento e durante incubação a 38 ºC por 3 h, os seguintes parâmetros foram avaliados: cinética espermática, teste hiposmótico, integridade da membrana plasmática, estado de capacitação e nível de lipoperoxidação. O diluidor IMV comprometeu a cinética espermática, com índices menores de VSL, VCL, LIN, WOB e STR, em comparação com o diluidor TRIS (P <0,05). A suplementação de 10 mM de LC afetou positivamente o parâmetro VAP no TRIS e no VSL no diluidor IMV. De fato, a adição de 5 mM de LC melhorou o parâmetro STR no diluidor IMV. Nos grupos suplementados com LC, o IMV teve maior (P <0,05) estresse oxidativo que os tratamentos TRIS. Em conclusão, embora a LC tenha afetado alguns parâmetros isolados, sua suplementação no diluidor de sêmen não teve efeito benéfico consistente sobre o espermatozóide pós-descongelamento e durante toda a incubação por até 3 horas, independentemente do diluente utilizado. O diluidor optiXcell IMV comprometeu a cinética espermática e apresentou maior estresse oxidativo comparado ao extensor TRIS.

This study assessed the effect of three different concentrations of L-carnitine (LC) in sheep semen extenders containing or not egg yolk for cryopreservation. Four Santa Inês rams were used during the breeding season. Semen was evaluated regarding its quality and concentration and later diluted and stored in frozen straws. Two extenders were used, either TRIS-egg yolk or the commercial optiXcell IMV medium (without egg yolk protein), totaling six experimental groups: IMV (0, 5 and 10 mM LC) and TRIS (0, 5 and 10 mM LC). After the freezing-thawing process and throughout incubation at 38 ºC for up to 3 h, several parameters were evaluated: sperm kinetics, hypoosmotic, plasma membrane integrity, capacitation status and lipid peroxidation level. The IMV extender compromised sperm kinetics, with significantly lower indices of VSL, VCL, LIN, WOB and STR, compared to the TRIS extender (P < 0.05). The supplementation of 10 mM LC positively affected the VAP parameter in TRIS and VSL in IMV extender. Indeed, the addition of 5 mM LC improved the STR parameter in IMV extender. In the groups supplemented with LC, IMV had greater (P < 0.05) oxidative stress than TRIS treatments. In conclusion, although LC affected some isolated parameters, its supplementation in semen extender had no consistently beneficial effect on freezing-thawing ram sperm and throughout incubation for up to 3 h, regardless to the extender used. The commercial optiXcell IMV medium extender compromised sperm kinetics and it had greater oxidative stress compared to the TRIS extender.

Semente do urucum como fonte de antioxidantes em dieta com óleo de linhaça para vacas leiteiras

Objetivou-se avaliar o efeito da adição da semente de urucum e de óleo de linhaça na dieta de vacas leiteiras, sobre o consumo e a digestibilidade de matéria seca e dos nutrientes, a composição, perfil lipídico e estabilidade oxidativa do leite, atividade antioxidante no sangue e no leite. O experimento foi conduzido no Setor de Ensino/Pesquisa e Extensão em Bovinocultura de Leite da Fazenda Experimental de Iguatemi. Foram utilizadas quatro vacas da raça holandesa, confinadas em sistema tie stall, com peso vivo médio de 566±64 kg e 120±43 dias de lactação, distribuídas em um quadrado Latino 4 × 4, em esquema fatorial 2 × 2. As dietas experimentais foram: 1) controle, sem adição semente de urucum e sem suplementação de óleo de linhaça; 2) com adição de semente de urucum (1,5% na MS), sem suplementação óleo de linhaça; 3) com suplementação de óleo de linhaça (3% na MS), sem adição semente de urucum, 4) com adição de semente de urucum (1,5% na MS) e com suplementação de óleo de linhaça (3% na MS), cuja proporção volumoso:concentrado foi de 60:40. Foram determinados o consumo e digestibilidade aparente da matéria seca (MS), matéria orgânica (MO), cinzas, proteína bruta e fibra em detergente neutro (FDN), parâmetros sanguíneos, atividade antioxidante no sangue e no leite, perfil de ácidos graxos, composição e estabilidade oxidativa do leite. A adição de semente de urucum reduziu o consumo de MS, a produção leite e a secreção diária de proteína e lactose (P<0,05). A semente de urucum aumentou o teor de gordura e sólidos totais no leite (P<0,05). Não houve efeito (P>0,05) da semente de urucum na digestibilidade da matéria seca e dos nutrientes. A suplementação de óleo sem semente de urucum diminuiu o teor de gordura no leite (P<0,05). A suplementação de óleo aumentou o consumo de EE, digestibilidade de EE (P<0,05), houve tendência de aumentar a digestibilidade de PB (P=0,09) e diminuir a digestibilidade da FDN (P=0,07). A adição de semente de urucum aumentou a concentrações dos AGCC (C6:0 e C8:0) (P<0,05), na ausência de óleo de linhaça, enquanto na presença de óleo reduziu a concentração dos AG C18:2 n6t e n-6. O óleo de linhaça reduziu a concentração dos AGCM (P<0,05), e aumentou AGCL (P<0,05), apresentou tendência a reduzir os AGS (P=0,08) e AGMI (P=0,08), e aumentar AGPI (P=0,06) no leite. Também houve aumento do AG n-3 (P>0,05) e redução da razão n-6/n-3 (P>0,05), tendência de aumentar o HDL no sangue (P=0,08) e dienos conjugados no leite (P=0,07) com a suplementação de lipídeos. A produção leite corrigida para gordura não foi influenciada pela adição de semente de urucum e a suplementação de óleo (P>0,05). Desta forma, conclui-se que adição de semente de urucum de 1,5% da MS não influenciou a capacidade antioxidante do leite. A suplementação de óleo de linhaça melhorou o perfil de ácidos graxos no leite, aumentando a concentração de n-3. A associação da semente de urucum e óleo linhaça não influenciou os parâmetros avaliados.

The objective was to evaluate the effect of annatto seed (Bixa orellana L) and linseed oil in diet of dairy cows, on the intake and digestibility of dry matter and nutrients, composition, lipid profile and oxidative stability of milk, antioxidant activity in blood and milk. The experiment was carried out in the Teaching / Research and Extension Milk Cattle Production System of the Iguatemi Experimental Farm. Four lactating Holstein cows (566 ± 64 kg of body weight and 120 ± 43 days in milk) were housed in a tie stall barn and assigned to a 4x4 Latin square design, with a 2×2 factorial arrangement. The experimental diets were: 1) control, without addition of annatto seed addition and linseed oil supplementation; 2) annatto seed addition (1.5% in DM), without linseed oil supplementation; 3) linseed oil supplementation (3% in DM), without annatto seed addition, 4) annatto seed addition (1.5% in DM) and linseed oil supplementation (3% in MS), whose forage: concentrate ratio was 60:40. There were evaluated intake and apparent digestibility of dry matter (DM), organic matter (OM), ash, crude protein (CP), ether extract (EE) and neutral detergent fiber (NDF), blood parameters, antioxidant activity in blood and milk, fatty acid profile, composition and oxidative stability of the milk. The annatto seed addition reduced DM intake, and yield of milk, protein and lactose yield (P<0.05). Annatto seed increase of fat and solids contents (P<0.05). Annatto seed did not show effect (P>0.05) on DM and nutrient digestibility. The oil supplementation without annatto seed decreased milk fat content (P<0.05). The linseed oil supplementation increased EE intake, EE digestibility (P<0.05), there was a tendency to increase CP digestibility (P=0.09) and to decrease NDF digestibility (P=0.07). Annatto seed increased SCFA (C6:0 and C8:0) concentration (P<0.05), in the absence of linseed oil, whereas in the oil presence it reduced the AG 18:2 n6t and omega-6 concentrations. Additionally, oil supplementation reduced MCFA (P<0.05), increased LCFA (P<0.05) in milk and showed a tendency to reduce SFA (P=0.07) and MUFA (P=0.08), as well as to increase PUFA (P=0.06). There was also an increase in omega-3 FA (P>0.05) and a reduction in the omega-6/omega-3 ratio (P>0.05), a tendency to increase HDL in the blood (P=0.08), and conjugated diene hydroperoxides in milk (P=0.07) with lipid supplementation. The production of 3.5% fat-corrected milk production was not affected by the annatto seed addition and oil supplementation (P>0.05). Thus, it was concluded that 1.5% of annatto seed addition in DM did not influence the milk antioxidant capacity. The linseed oil supplementation improved the fatty acid profile in milk, increasing the omega-3 concentration. The association of annatto seed and linseed oil did not influence the evaluated parameters.

Efeito oxidante do imidacloprido em abelhas melíferas (Apis mellifera L.) e potencial ação antioxidante da cafeína

Pesticidas são considerados um dos principais fatores do declínio populacional das abelhas e substâncias antioxidantes podem auxiliar na proteção desses insetos contra esses produtos. Foram avaliados o efeito oxidante do imidacloprido em abelhas melíferas (Apis mellifera L.) e a ação antioxidante da cafeína. Foram usadas seis dietas à base de xarope (água e açúcar 1:1), controle (apenas xarope); xarope com adição de 0,1 ng de imidacloprido/abelha; xarope com adição de 0,3 ng de imidacloprido/abelha; xarope com 5 g/mL de cafeína; xarope com adição de 5 g/mL cafeína e 0,1 ng de imidacloprido/abelha; xarope com adição de 5 g/mL cafeína e 0,3 ng de imidacloprido/abelha. Após 72 horas da alimentação, foi preparado homogenato do tórax e avaliados: atividade das enzimas glutationa peroxidase (GPx) e catalase (CAT), concentrações de glutationa reduzida (GSH), glutationa oxidada (GSSG), estado oxidativo dos nucleotídeos de piridina (NAD(P)H) e grupos tióis de proteínas, além da formação de malondialdeído (MDA), um indicador de lipoperoxidação. Foi avaliada a sobrevida média de 360 abelhas recém-emergidas (1°dia), alimentadas com as dietas experimentais até às 72 horas, e o consumo médio da dieta por abelha. O imidacloprido aumentou a atividade da GPx em relação ao controle nas duas doses testadas, apresentando um efeito dose-dependente, e o mesmo foi observado com a cafeína. A adição de cafeína juntamente com 0,3 ng de imidacloprido/abelha, estimulou ainda mais a atividade da enzima. Observou-se também aumento na atividade da CAT pelas duas doses do imidacloprido e pela cafeína em relação ao controle. A adição da cafeína não alterou o efeito das doses do inseticida sobre a CAT. Nenhum dos tratamentos alterou a razão entre as concentrações de GSH e GSSG (GSH/GSSG) ou a concentração de NAD(P)H. Foi observada uma redução significante na concentração de grupo tióis de proteínas em relação ao grupo controle nas abelhas tratadas com as duas doses do imidacloprido, e a adição de cafeína protegeu contra a oxidação desses grupos. Para a concentração de MDA, observou-se aumento dose-dependente do imidacloprido em relação ao controle. A cafeína diminuiu parcialmente esse efeito, indicando que inibiu a lipoperoxidação. A sobrevida média das abelhas durante 72 horas não foi alterada por nenhum dos tratamentos. O consumo das dietas foi maior para as abelhas tratadas com 0,3 ng de imidacloprido/abelha. Os resultados do presente estudo indicam que o imidacloprido provocou danos oxidativos nas abelhas melíferas, enquanto que a cafeína atuou como antioxidante, e ainda, que as abelhas melíferas têm o consumo estimulado quando o alimento estiver intoxicado com o imidacloprido

Pesticides are the main factors in the population decline of bees and antioxidant substances may aid in protecting these insects against these products. The oxidizing effect of imidacloprid in honey bees (Apis mellifera L.) and the antioxidant action of caffeine were evaluated. Six diets based on syrup (water and sugar 1: 1), control (syrup only) were used; syrup with addition of 0.1 ng imidacloprid/bee; syrup with addition of 0.3 ng imidacloprid/bee; Syrup with 0.5 g/mL caffeine; syrup with addition of 5 g/mL caffeine and 0.1 ng imidacloprid/bee; syrup with addition of 5 g/mL caffeine and 0.3 ng imidacloprid/bee. After 72 hours of use, the activity of glutathione peroxidase (GPx) and catalase (CAT), concentrations of reduced glutathione (GSH), oxidized glutathione (GSSG), oxidative state of pyridine nucleotides (NAD(P)H) and thiol groups of protein, besides the production of malondialdehyde (MDA), an indicator of lipoperoxidation. The longevity of 360 freshly emerged bees (1st day), fed experimental diets, was evaluated. Imidacloprid increased GPx activity compared to the control, in a dose-dependent manner, and the same and was observed with caffeine. The addition of caffeine with 0.3 ng of imidacloprid/bee stimulated the activity of the enzyme. There was an increase in CAT activity by the two doses of imidacloprid in relation to the control and also by caffeine. The addition of caffeine did not alter the effect of doses of the insecticide on the CAT activity. The GSH:GSSG ratio or the NAD(P)H concentration were not affected. A significant reduction in the concentration of thiol group of proteins was observed in the two groups of imidacloprid relative to the control group, and the addition of caffeine protected against the oxidation of these groups. Imidacloprid caused a dose-dependent increase in the MDA concentration while the addition of caffeine partially decreased this effect, indicating that it inhibited the lipoperoxidation. The average survival of the bees during 72 hours was not altered by any of the treatments. Diets consumption was higher for bees treated with 0.3 ng imidacloprid/bee. The results of the present study indicate that imidacloprid caused oxidative damage in honey bees, whereas the caffeine acted as an antioxidant, and also that the consumption is stimulated when the food is intoxicated with imidacloprid

SUPLEMENTAÇÃO DE SELÊNIO ORGÂNICO SOBRE A QUALIDADE DA CARNE E ESTABILIDADE OXIDATIVA DE FRANGOS CRIADOS EM AMBIENTE TERMONEUTRO E SUBMETIDOS AO ESTRESSE POR CALOR NO PERÍODO PRÉ-ABATE

O selênio (Se) é um micronutriente essencial para o crescimento e manutenção do organismo animal. Está presente no organismo como selenometionina ou selenocisteína nas proteínas e tem como principal função a proteção dos lipídios das membranas e outros constituintes celulares contra a lesão oxidativa. O objetivo do trabalho foi suplementar dietas comerciais para frangos de corte com selênio orgânico sobre desempenho, qualidade da carne e estabilidade oxidativa de frangos de corte criados em ambiente termoneutro e submetidos ao estresse térmico. Foram realizados 2 experimentos, sendo o primeiro de 1 à 42 dias de idade, no qual as aves foram criadas em conforto térmico e um segundo experimento, onde as aves submetidas ao estresse térmico no período pré-abate (42 a 49 dias de idade). Foram utilizados 1440 pintos de corte, machos, distribuídos aleatoriamente em um delineamento inteiramente casualizado com 3 tratamentos e 12 repetições, compondo 36 unidades experimentais. As dietas experimentais foram compostas por dieta suplementada com 0,3 ppm de selênio de fonte inorgânica, dieta suplementada com 0,3 ppm de selênio de fonte orgânica, dieta suplementada com 0,6 ppm de selênio de fonte orgânica. A fonte inorgânica utilizada foi o selenito de sódio (45,6%) e a fonte orgânica foi o seleno-hidroxi-metionina (HMSeBA - ácido 2-hidroxi-4-metil-selenio-butanoico). A suplementação de fontes e níveis de Se não influenciou (p>0,05) o desempenho produtivo dos frangos de corte e manteve o balanço oxidativo dos frangos de corte e os atributos funcionais da carne de frangos. O nível de 0,6ppm de HMSeBA resultou em maior rendimento de carcaça e peito (p<0,05). A suplementação de selenito de sódio ou HMSeBA nos níveis recomendados preservou a carne refrigerada ou congelada da oxidação lipídica. A suplementação de fontes e níveis de Se não influenciou (p>0,05) a ocorrência e severidade das lesões macroscópicas decorrentes das miopatias white striping e wooden breast em peitos de frangos de corte. Houve uma maior substituição por colágeno no tecido muscular dos peitos de frangos de corte suplementados com selenito de sódio. A suplementação de HMSeBA reduziu a gravidade e frequência das lesões histopatológicas observadas nas amostras de peito. No período pré-abate, em que as aves foram submetidas ao estresse por calor, a suplementação de HMSeBA não influenciou (p>0,05) os níveis de HSP70, a estabilidade oxidativa e o rendimento de carcaça e de cortes comerciais. A suplementação 0,6 ppm de HMSeBA na dieta de frangos de corte submetidos ao estresse térmico pré-abate preveniu a queda do pH e resultou na menor (p<0,05) perda de água na carne do peito e reduziu (p<0,05) a formação de malondialdeído na carne congelada por 60 dias. Níveis mais elevados de Se podem ser necessários para garantir a permeabilidade da membrana de frangos mantidos em ambientes adversos no período ante mortem. Fontes orgânicas podem ser adicionadas às dietas em níveis mais elevados e podem ser uma estratégia interessante para diminuir a ocorrência das miopatias e para a cadeia avícola incorporar um nutriente essencial na carne de frangos.

Selenium (Se) is an essential micronutrient for the growth and maintenance of the animal organism. It is found in the organism as selenomethionine or selenocysteine in proteins and its main function is to protect membrane lipids and other cellular constituents against oxidative damage. The aim of this study was to supplement commercial diets for broilers with organic selenium on performance, meat quality and oxidative stability of broilers reared in thermoneutral environment and submitted to thermal stress. Two trials were carried out, the first from 1 to 42 days of age, in which the birds were raised in thermal comfort and the second one the birds underwent thermal stress in the pre-slaughter period (42 to 49 days of age). 1440 male chicks were distributed in a completely randomized design with 3 treatments and 12 replicates, totaling 36 experimental units. The diets: 1) Supplemented with 0.3 ppm of selenium from inorganic source; 2) Supplemented with 0.3 ppm of selenium from organic source and 3) Supplemented with 0.6 ppm of selenium from organic source. The inorganic source was sodium selenite (45.6%) and the organic source was selenohydroxy methionine (HMSeBA-2-hydroxy-4-methyl selen-butanoic acid). The supplementation of different sources and levels of Se did not influence (p>0.05) the productive performance of broilers and maintained the oxidative balance of broilers and the functional attributes of broiler meat. The 0.6ppm level of HMSeBA showed higher carcass and breast yield (p<0.05). Sodium selenite or HMSeBA supplementation at the recommended levels preserved the cooled or frozen meat from lipid oxidation. The supplementation of sources and levels of Se did not influence (p<0.05) the occurrence and severity of macroscopic lesions from white striping and wooden breast myopathies in breasts of broilers. There was a higher replacement of collagen in breast muscle tissue of broilers supplemented with sodium selenite. The supplementation with HMSeBA decreased the severity of histopathologic lesions seen in breast samples. In the pre-slaughter period, in which birds underwent heat stress, HMSeBA supplementation did not influence (p>0.05) HSP70 levels, oxidative stability, carcass yield and commercial cut-up. The supplementation of 0.6 ppm of HMSeBA in the diet of broilers submitted to pre-slaughter heat stress avoided pH drop and resulted in lower (p<0.05) water loss in the breast meat and reduced (p<0.05) the amount of malondialdehyde in frozen meat for 60 days. Higher levels of Se may be required to ensure membrane permeability of broilers kept in adverse environments in the ante-mortem period. Organic sources can be added to diets at higher levels and may be an interesting strategy to reduce occurrence of myopathies and to poultry industry to incorporate an essential nutrient into poultry meat.

Efeito de antioxidantes sobre o estresse oxidativo e a qualidade do leite de vacas Holandesas

Foram conduzidos três experimentos para avaliar o efeito da suplementação de antioxidantes naturais em vacas leiteiras em diferentes estágios de lactação recebendo dietas ricas em ácidos graxos poli-insaturados. No primeiro experimento foram avaliadas vacas em início de lactação. Este período é associado principalmente ao balanço energético negativo pelo aumento repentino das exigências nutricionais junto com uma baixa ingestão de matéria seca. Além disso, doenças são correlacionadas, pois há aumento na concentração de ácido beta-hidroxibutirato e ácidos graxos não esterificados no plasma sanguíneo. O total de 20 vacas multíparas da raça Holandês com cânulas ruminais foi dividido em duas dietas: (1) dieta COFO (controle) com perfusão 250 g de óleo de linhaça/d no abomaso; e (2) dieta FMFO (com 136 g farelo de linhaça na matéria seca) com perfusão de 250 g de óleo de linhaça no abomaso. Em um fatorial simples (2 níveis: COFO e FMFO) e análises de variância com medidas repetidas foram conduzidas para todos os dados. As vacas foram submetidas aos procedimentos experimentais do sétimo dia ao 28o após o parto, e durante os dias 28 aos 49 de lactação, as vacas receberam uma dieta basal. A ingestão de MS expressa em kg/d e em porcentagem no peso vivo aumentou para vacas alimentadas com FMFO quando comparadas com COFO. Consequentemente, o balanço energético negativo foi melhor nos animais tratados com FMFO. No segundo experimento, foram avaliadas vacas em meio lactação recebendo erva-mate (EMa) a qual possui antioxidantes naturais. O trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar os efeitos de níveis crescentes de EMa na alimentação de vacas leiteiras e o efeito da EMa na digestibilidade e qualidade do leite. Os animais foram distribuídos em um duplo quadrado latino 4 × 4, cada período experimental foi de 21 dias, sendo 14 dias para adaptação e sete dias para coleta de dados e amostras. Os tratamentos experimentais foram: 1) ração-controle sem suplementação de EMa (CONT); 2) ração-controle + suplementação com 250 g de EMa/dia (250EM); 3) ração-controle + suplementação de 500 g de EMa/dia (500EM); 4) ração-controle + suplementação de 750 g de EMa/dia (750EM). O poder de redução da erva mate no leite mostrou efeito linear positivo (P=0,04) em relação ao controle e efeito linear decrescente foi observado com a lactose (P=0.0001) e no N-ureico (P=0,04) para os níveis de inclusão de EMa. A digestibilidade de extrato etéreo também apresentou efeito linear positivo (P=0,05). Os resultados sugerem que a inclusão de EMa foi capaz de aumentar o poder de redução do leite das vacas demonstrando ser um aditivo viável para o aumento do poder antioxidante. Apesar da redução linear de lactose no leite e consequentemente sólidos totais, a EMa não alterou a produção de leite. Em função da oxidação dos ácidos graxos do leite, a inclusão de antioxidantes na alimentação animal é uma alternativa para reduzir oxidação dos AGPI presentes no leite, evitar a formação de compostos tóxicos e, ainda, melhorar a saúde dos animais que os consomem. No terceiro experimento, estudou-se a inclusão de vitamina E e erva mate na dieta de vacas leiteiras recebendo grãos de soja com objetivo de mensurar a transferência do antioxidante para o leite. Foram utilizadas quatro vacas multíparas da raça Holandês (549 ± 57 kg de peso corporal e 62 ± 15 dias em lactação) distribuídas em quadrado latino (4×4) com quatro dietas e quatro períodos experimentais. As dietas experimentais foram: 1) Dieta-controle sem suplementação de EMa e de vit. E; 2) Dieta-controle + suplementação de 350 UI de vit E/kg de MS/dia; 3) Dieta controle + suplementação de 3% de EMa/kg de MS/dia; 4) Dieta-controle + suplementação de 350 UI de vit E/kg de MS/dia + suplementação de 3% de EMa/kg de MS/dia. Cápsulas contendo 10 g de óxido de titânio (via sonda esofágica) foram inseridas no rúmen, após a alimentação da manhã (9h00min) para determinação do fluxo fecal e da digestibilidade. O período experimental foi de 28 dias, sendo 21 dias de adaptação e sete dias de coleta. A ingestão de vit E diminuiu a ingestão de MS e outros nutrientes, enquanto a EMa teve efeito positivo sobre o consumo e a digestibilidade de MS. O consumo de EMa não aumentou a produção de leite, até mesmo diminuindo a concentração de proteína e sólidos totais no leite. Nenhuma alteração foi observada para a composição em ácidos graxos e nos antioxidantes TBARS, dienos conjugados e polifenóis. Entretanto, a suplementação de EMa aumentou o poder de redução do leite. Concluiu-se assim que a erva mate pode ser capaz de substituir a suplementação de vit E na transferência do poder antioxidante para o leite.

Three experiments were conducted to evaluated the supplementation of natural antioxidant in dairy cows in different lactation stage fed rich diet of polyunsaturated fatty acids. In the first experiment evaluated dairy cows in early lactation. The period between delivery and lactation peak is commonly associated to negative energy balance (NEB) due to a rapid increase in of nutritional requirements coupled with a low dry matter intake. Futhermore, diseases are correlated with concentrated volume of beta-hydroxybutyrate acid (BHBA) and non-esterified fatty acids (NEFA) in plasma. A total of 20 multiparous dairy cows fitted with rumen cannulas were stratified by groups in two treatments: (1) control diet with 250 g flax oil/d infused in the abomasum (n=10, COFO); and (2) diet with 136 g/kg flax meal (n=10, FMFO) in the dry matter (DM) with 250 g flax oil/d infused in the abomasum. All data were analyzed using the MIXED procedure of SAS, release 9.2. A one-way factorial (2 levels: COFO and FMFO) analysis of variance with repeated measure was conducted for all data. Cows were subjected to experimental treatments from day 7 to 28 of post-partum and fed a common total mixed diet from day 28 to 49 of lactation. Intake of DM, expressed in kg/d and as a percentage of BW was increased for cows fed FMFO when compared with cows fed COFO. Likewise, the NEB was less severe for cows fed FMFO. However, thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) increased when cows fed flax meal.The second experiment evaluated cows in middle lactation receiving yerba mate (YM) that has good levels of natural antioxidants. The study was to evaluate the effects of increasing levels of YM in dairy cows and the effect of YM in digestibility and quality of milk. The animals were distributed in a double Latin square 4x4, each experimental period was 21 days, 14 days for adaptation and seven days to harvest data and samples. The treatments were: 1) control diet without supplementation YM (CONT); 2) diet + supplementation with 250 g of YM / day (250EM); 3) diet + supplementation of 500 g of YM / day (500EM); 4) control diet + supplementation of 750 g of YM / day (750EM). The reduction (P = 0.04) of yerba mate in milk showed a positive linear effect on the control and decreasing linear effect was observed with lactose (P = 0.0001) and urea (P = 0.04) for levels inclusion of YM. The ether extract digestibility (P = 0.05) also had a positive linear effect. Our results suggest that the inclusion of EMA was able to increase the power reduction of milk cows demonstrated to be a viable additive for increasing the antioxidant power. Despite the linear reduction of lactose in milk and consequently total solids, YM did not affect milk production. After we studied the inclusion of vitamin E (vit E) and yerba mate (YM) in the diet of dairy cows fed soybeans to compare the transfer of the antioxidant for milk. There were four multiparous Holstein cows (549 ± 57 kg body weight and 62 ± 15 days in milk) distributed in Latin square (4 × 4) with four treatments and four experimental periods. The treatments were: 1) Control diet without supplementation YM and vit E; 2) diet plus supplementation of 350 IU of vit E / kg DMI per day; 3) diet plus supplementation of 3% of YM / kg IMS per day; 4) diet plus supplementation of 350 IU of vit E / kg IMS daily supplementation + 3% of YM / kg IMS per day. Capsules containing 10 g of titanium oxide was inserted into the rumen (by gavage) after the morning feeding (9h00min) for determination of fecal flow and digestibility. The experimental period was 21 days and then seven days of collection. The intake of vit E reduces DM intake and other nutrients, while YM had a positive effect on the intake and digestibility of MS. The intake of YM did not increase milk production, even decreasing the concentration of protein and total solids in milk. No change was observed for the fatty acid composition and TBARS antioxidants, conjugated diene and polyphenols. However, supplementation of YM increased the power reduction of milk. We can conclude that yerba mate can replace the supplementation of vit E is even better than the vit E in the transfer of the antioxidant power to the milk.

Methylene blue improves hemodynamic shock but increases lipoperoxidation in severe acute pancreatitis pig model / Azul de metileno melhora as condições hemodinâmicas do choque circulatório, mas aumenta a peroxidação lipídica em um modelo suino de pancreatite aguda grave

PURPOSE: Study hemodynamic pattern and lipoperoxidation during methylene blue (MB) treatment on taurocholate - enterokinase induced acute pancreatitis (AP). METHODS: Thirty pigs were equally divided in control group; MB group; AP group; MB previous AP group; and MB after 90 min of induced AP group. MB was given iv in a bolus dose (2mg.kg-1) followed by maintenance dose (2 mg.kg-1.h-1). Hemodynamic parameters were recorded continuously during 180 min by Swan-Ganz catheter. Blood samples were taken every 60 min to determine arterial and venous nitrate, malondialdehyde (MDA) and amylase. Pancreatic tissue was removed for histopathologic study. RESULTS: In AP group MBP and CO decreased over time 33 percent (p<0.05) and 52 percent (p<0.05), respectively. In MB previous induced-AP group, there was 70 minutes delay (p<0.05) to decrease MBP and CO. In MB group arterial and venous nitrite decreased (p<0.05) over time. MB infusion increased (p>0.05) serum MDA when associated to AP. After induced AP, MB did not reverse MBP and CO decrease. There was no difference in serum amylase and necro-hemorrhagic findings with MB treatment. CONCLUSIONS: In this taurocholate-induced AP model MB treatment delayed hemodynamic shock and decreases serum nitrate levels but increases serum MDA levels. No volemic replacement was done and it may have been a mitigated factor to a poor tissue perfusion and impairment microcirculation. Further investigations are needed to elucidate MB treatment role during AP treatment.(AU)

OBJETIVO: estudar o perfil hemodinâmico e a lipoperoxidação durante o tratamento com azul de metileno (AM) de pancreatite aguda (PA) induzida por taurocolato-enteroquinase. MÉTODOS: Trinta porcos foram igualmente divididos em: grupo controle, grupo AM; grupo PA; grupo AM prévio à PA; grupo AM após 90 minutos após a indução da PA. O AM foi administrado sob a forma de bolus EV (2mg.kg-1) seguido por dose de manutenção (2 mg.kg-1.h-1). Os parâmetros hemodinâmicos foram registrados continuamente durante 180 min com auxílio de cateter de Swan-Ganz. Amostras sanguíneas foram colhidas a cada 60 min para a determinação arterial e venosa de nitrato, malondialdeido (MDA) and amilase. Removeu-se tecido pancreático para estudo histopatológico. RESULTADOS: No grupo PA a pressão arterial media (PAM) e o débito cardíaco (DC) diminuíram respectivamente 33 por cento (p<0.05) e 52 por cento (p<0.05) no decorrer do tempo. No grupo AM prévio à indução da PA ocorreu 70 minutes de demora (p<0.05) para as diminuições da PAM e DC. No grupo AM houve diminuição temporal do nitrato arterial e venoso (p<0.05). A infusão de AM aumentou os valores de MDA sérico quando associado a PA (p>0.05). Após a indução da PA a infusão de AM não reverteu as quedas da PA e DC. Não houve diferenças nos níveis de amilase sérica e achados histológicos com o tratamento com o azul de metileno. CONCLUSÕES: No presente modelo de PA induzida por taurocolato o AM retardou o desenvolvimento do choque circulatório, diminuiu os níveis de nitrato mas aumentou os níveis de MDA. Não se realizou nenhum tipo de reposição volêmica que poderia melhorar a perfusão tecidual e melhora da microcirculação. Investigações adicionais são necessárias para elucidar o papel terapêutico do AM no tratamento da PA aguda.(AU)

Avaliação de dois modelos experimentais de isquemia e reperfusão cerebral em ratos com oclusão temporária carotídea associada ou não à oclusão vertebral

PURPOSE: To evaluate reproducibility of two experimental brain ischemia and reperfusion models. METHODS: Sixty rats were randomly distributed to three experimental groups: I - (20) temporary clipping of the left carotid artery; II - (20) cauterization of vertebral arteries and temporary clipping of the left carotid artery; "Sham" - (20) simulation group, with neither ischemia nor reperfusion. All animals had permanent occlusion of right carotid artery and the three groups were subdivided into two reperfusion periods: A - 60 minutes e B - 120 minutes. Parameters verified were: mean systemic arterial blood pressure and carotid blood flow measurement; brain malondialdehyde measurement by TBARS assay and histological evaluation of the brain hemisphere submitted to ischemia and reperfusion. A supplementary brain angiography study was also conducted on 5 additional animals. RESULTS: There was no significant difference in brain malondialdehyde dose and in frequency and severity of histological brain alterations among the three groups. In groups GI and GII, mean arterial blood pressure was significantly higher during the ischemia period. Blood flow in the periods before and after clipping increased in Groups IA and IIB, decreased in Group IB and did not alter in Group IIA. Supplementary study angiographs showed blood supply to brain through collateral circulation. CONCLUSION: The ischemia and reperfusion models studied did not show consistent change in brain injury markers as far as lipoperoxide production and histological damage are concerned.

OBJETIVO: Avaliar a reprodutibilidade de dois modelos experimentais de isquemia e reperfusão cerebral. MÉTODOS: 60 ratos foram distribuídos, aleatoriamente, em três grupos experimentais, com 20 animais cada: I - pinçamento temporário de artéria carótida esquerda; II - cauterização prévia das artérias vertebrais e pinçamento temporário da artéria carótida esquerda; simulado - sem isquemia nem reperfusão. Todos os animais tiveram oclusão definitiva de artéria carótida direita e os três grupos foram subdivididos em dois períodos de reperfusão: A - 60 minutos e B - 120 minutos. Os parâmetros verificados foram: medidas de pressão arterial média sistêmica e fluxo sangüíneo carotídeo; medida de malondialdeído cerebral através do teste TBARS e avaliação histológica do hemisfério cerebral submetido à isquemia e reperfusão. Foi feito também um estudo complementar com angiografia cerebral em 5 animais adicionais. RESULTADOS: Não houve diferenças significativas nas dosagens de malondialdeído cerebral e na freqüência e gravidade das alterações histológicas cerebrais entre os três grupos. Nos grupos GI e GII, a PAM foi significantemente maior no período de isquemia. O fluxo sangüíneo entre os períodos pré e pós-pinçamento aumentou nos grupos IA e IIB, diminuiu no grupo IB e no grupo IIA manteve-se inalterado. As angiografias do estudo complementar mostraram aporte sangüíneo para cérebro através de circulação colateral. CONCLUSÃO: Os modelos de isquemia e reperfusão estudados não demonstraram alterações consistentes de marcadores de lesão cerebral, seja quanto à produção de lipoperóxidos ou de lesões histológicas.