Citometria de Fluxo em andrologia: da pesquisa básica para a rotina clínica / Flow citometry in andrology: from basic research to clinical routine

Os primeiros estudos de espermatozoides com citometria de fluxo com espermatozoides iniciaram no final da década de 1970. Com os avanços tecnológicos, hoje contamos com equipamentos com alta sensibilidade e eficiência que, em conjunto com amplo catálogo de sondas fluorescentes, podemos mensurar com alta precisão características celulares. Como exemplo, destacam-se dano em membrana plasmática, atividade mitocondrial, produção de espécies reativas de oxigênio, dano ao DNA espermático e muito mais. Na presente revisão, as potencialidades e limitação para a implementação da citometria de fluxo na análise seminal de espécies domésticas são exploradas e comentadas.

The first flow cytometry studies with spermatozoa were published in the late 1970s. With the technological advances in the following years, today we have equipments with high sensitivity and efficiency that, together with a large number of commercially available fluorescent probes, allow us to measure different cell characteristics with high accuracy. Some of the most evaluated characteristics are plasma membrane damage, mitochondrial activity, production of reactive oxygen species, sperm DNA damage, and much more. In this review, the potentials and limitations for the implementation of flow cytometry in the seminal analysis of domestic species are explored and commented.

Influência de um ácido graxo adicionado ao diluente seminal sobre a integridade da membrana plasmática de espermatozoides caprinos criopreservados / Influence of a fatty acid added to the seminal extender on the integrity of the plasmatic membrane of cryopreserved caprine sperm

The objective of this study was to evaluate the antioxidant effects of supplementing different concentrations (0.5μM, 5μM and 50μM) of polyunsaturated fatty acid, arachidonic acid to the TRIS-yolk diluter on the integrity of the plasma membrane during the cryopreservation of goat sperm. For this purpose, four Anglo-nubian goats were used, in which five samples / animal were collected, using artificial vagina. After evaluating the swirling and motility of the ejaculates, the pool was made, then diluted in TRIS-Gem and divided according to the treatments. After processing, the samples were packaged in 0.25mL straws and cryopreserved using the TK3000® machine. Defrosting occurred after at least 5 days of storage in a cryogenic cylinder. Then, the integrity of the plasma membrane of goat sperm post cryopreservation was carried out, using the double staining method, where carboxyfluorescein diacetate (DCF) and propidium iodide (IP) were used. The data were analyzed and the results of the researched variable were subjected to analysis of variance (ANOVA) using the general linear models procedure (Proc GLM) and the Duncan test was used to compare the means, with a 5% probability. The analyzes were performed using the Statistical Analysis System program (SAS Institute Inc, 2013). After analysis, it was observed that the control group had the best percentage, and differed significantly (p<0.05) from the treatment with 50μM of arachidonic acid. It was concluded that the 50μM arachidonic acid concentration is not effective to maintain the integrity of the plasma membrane, and to minimize the oxidative stress of cryopreservation.

Influência de um ácido graxo adicionado ao diluente seminal sobre a integridade da membrana plasmática de espermatozoides caprinos criopreservados / Influence of a fatty acid added to the seminal extender on the integrity of the plasmatic membrane of cryopreserved caprine sperm

The objective of this study was to evaluate the antioxidant effects of supplementing different concentrations (0.5μM, 5μM and 50μM) of polyunsaturated fatty acid, arachidonic acid to the TRIS-yolk diluter on the integrity of the plasma membrane during the cryopreservation of goat sperm. For this purpose, four Anglo-nubian goats were used, in which five samples / animal were collected, using artificial vagina. After evaluating the swirling and motility of the ejaculates, the pool was made, then diluted in TRIS-Gem and divided according to the treatments. After processing, the samples were packaged in 0.25mL straws and cryopreserved using the TK3000® machine. Defrosting occurred after at least 5 days of storage in a cryogenic cylinder. Then, the integrity of the plasma membrane of goat sperm post cryopreservation was carried out, using the double staining method, where carboxyfluorescein diacetate (DCF) and propidium iodide (IP) were used. The data were analyzed and the results of the researched variable were subjected to analysis of variance (ANOVA) using the general linear models procedure (Proc GLM) and the Duncan test was used to compare the means, with a 5% probability. The analyzes were performed using the Statistical Analysis System program (SAS Institute Inc, 2013). After analysis, it was observed that the control group had the best percentage, and differed significantly (p<0.05) from the treatment with 50μM of arachidonic acid. It was concluded that the 50μM arachidonic acid concentration is not effective to maintain the integrity of the plasma membrane, and to minimize the oxidative stress of cryopreservation.(AU)

Evaluation of the chemical, physical and nutritional composition and sensory acceptability of different sweet potato cultivars / Avaliação da composição química, nutricional e da aceitabilidade sensorial de diferentes cultivares de batata-doce

The aim of the study was to evaluate the chemical, physical and nutritional composition and sensory acceptability of different sweet potato cultivars to classify the best genotypes for human consumption. We evaluated ten genotypes extracted from the Germplasm bank of Midwest State University, Brazil. The cultivars were evaluated regarding their sensory acceptability and chemical (reducing sugar; nonreducing sugar; total sugar; pH; total soluble solids; titratable acidity; total soluble solids/titratable acidity ratio; and instrumental colour) and nutritional composition (moisture; ash; protein; lipid; carbohydrate; energy value; total carotenoid; and ascorbic acid). Greater scores (p < 0.05) for overall acceptance were obtained for the white pulp genotypes Amorano, Júlia, UGA 45, and UGA 49. There was a statistical difference (p < 0.05) in the chemical and nutritional composition of sweet potatoes, except for the pH values. Generally, tuber have a light colour (values of L* greater than 50) with a yellow shade (b*) and green subshade (negative a* values). The exception was noticed in the UGA 34 genotype, which presented a higher red shade (positive a* value) and a yellow subshade. The cultivars more indicated for human consumption were the UGA 34 (favorable nutritional profile), UGA 45 (better acceptability and favorable chemical and nutritional composition), and Amorano (better acceptability and favorable chemical composition). On the other hand, the UGA 29 genotype may be characterized as the less appropriated for consumption. That, due to its less acceptance from the consumers and an inferior chemical and nutritional characterization. We conclude that the Brazilian sweet potato cultivars more indicated for human consumption are the UGA 34, UGA 45 and Amorano, considering that present more favorable chemical, nutritional and sensory acceptability characteristics. The UGA 29 genotype may be characterized as less recommended for consumption.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a composição química, física e nutricional e a aceitabilidade sensorial de diferentes cultivares de batata-doce, visando classificar os melhores genótipos para o consumo humano. Foram avaliados 10 genótipos extraídos do Banco de Germoplasma da UNICENTRO, Guarapuava, PR. Os cultivares foram avaliados em relação à aceitabilidade sensorial e à composição química (açúcares redutores; açúcares não redutores; açúcares totais; pH; sólidos solúveis totais; acidez titulável; relação sólidos solúveis totais/acidez titulável; cor instrumental) e nutricional (umidade; cinzas; proteína; lipídio; carboidrato; energia; carotenoides totais e; ácido ascórbico). Maiores notas (p < 0,05) para aceitação global foram verificadas para os genótipos de polpa creme Amorano, Júlia, UGA 45 e UGA 49. Houve diferença estatística (p < 0,05) na composição química e nutricional das batatas-doces, com exceção dos valores de pH (p > 0,05). Em geral, os tubérculos apresentaram cor clara (valores de L* maiores que 50%), com tom de amarelo (b*) e subtom de verde (valores de a* negativos). Exceção foi verificada para o genótipo UGA 34, que apresentou maior tom de vermelho (valor de a* positivo) e subtom de amarelo. As cultivares mais indicadas para o consumo humano foram UGA 34 (perfil nutricional favorável), UGA 45 (melhor aceitabilidade e favorável composição química e nutricional) e Amorano (melhor aceitabilidade e favorável composição química). Contrariamente, o genótipo UGA 29 pode ser caracterizado como o menos propício ao consumo. Isso, porque apresentou menor aceitação pelos consumidores, além de inferior caracterização química e nutricional. Conclui-se que as cultivares de batata-doce brasileiras mais indicadas para consumo humano são a UGA 34, UGA 45 e Amorano, considerando que apresentam características químicas, nutricionais e de aceitabilidade sensorial mais favoráveis...(AU)

Evaluation of the chemical, physical and nutritional composition and sensory acceptability of different sweet potato cultivars / Avaliação da composição química, nutricional e da aceitabilidade sensorial de diferentes cultivares de batata-doce

The aim of the study was to evaluate the chemical, physical and nutritional composition and sensory acceptability of different sweet potato cultivars to classify the best genotypes for human consumption. We evaluated ten genotypes extracted from the Germplasm bank of Midwest State University, Brazil. The cultivars were evaluated regarding their sensory acceptability and chemical (reducing sugar; nonreducing sugar; total sugar; pH; total soluble solids; titratable acidity; total soluble solids/titratable acidity ratio; and instrumental colour) and nutritional composition (moisture; ash; protein; lipid; carbohydrate; energy value; total carotenoid; and ascorbic acid). Greater scores (p < 0.05) for overall acceptance were obtained for the white pulp genotypes Amorano, Júlia, UGA 45, and UGA 49. There was a statistical difference (p < 0.05) in the chemical and nutritional composition of sweet potatoes, except for the pH values. Generally, tuber have a light colour (values of L* greater than 50) with a yellow shade (b*) and green subshade (negative a* values). The exception was noticed in the UGA 34 genotype, which presented a higher red shade (positive a* value) and a yellow subshade. The cultivars more indicated for human consumption were the UGA 34 (favorable nutritional profile), UGA 45 (better acceptability and favorable chemical and nutritional composition), and Amorano (better acceptability and favorable chemical composition). On the other hand, the UGA 29 genotype may be characterized as the less appropriated for consumption. That, due to its less acceptance from the consumers and an inferior chemical and nutritional characterization. We conclude that the Brazilian sweet potato cultivars more indicated for human consumption are the UGA 34, UGA 45 and Amorano, considering that present more favorable chemical, nutritional and sensory acceptability characteristics. The UGA 29 genotype may be characterized as less recommended for consumption.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a composição química, física e nutricional e a aceitabilidade sensorial de diferentes cultivares de batata-doce, visando classificar os melhores genótipos para o consumo humano. Foram avaliados 10 genótipos extraídos do Banco de Germoplasma da UNICENTRO, Guarapuava, PR. Os cultivares foram avaliados em relação à aceitabilidade sensorial e à composição química (açúcares redutores; açúcares não redutores; açúcares totais; pH; sólidos solúveis totais; acidez titulável; relação sólidos solúveis totais/acidez titulável; cor instrumental) e nutricional (umidade; cinzas; proteína; lipídio; carboidrato; energia; carotenoides totais e; ácido ascórbico). Maiores notas (p 0,05). Em geral, os tubérculos apresentaram cor clara (valores de L* maiores que 50%), com tom de amarelo (b*) e subtom de verde (valores de a* negativos). Exceção foi verificada para o genótipo UGA 34, que apresentou maior tom de vermelho (valor de a* positivo) e subtom de amarelo. As cultivares mais indicadas para o consumo humano foram UGA 34 (perfil nutricional favorável), UGA 45 (melhor aceitabilidade e favorável composição química e nutricional) e Amorano (melhor aceitabilidade e favorável composição química). Contrariamente, o genótipo UGA 29 pode ser caracterizado como o menos propício ao consumo. Isso, porque apresentou menor aceitação pelos consumidores, além de inferior caracterização química e nutricional. Conclui-se que as cultivares de batata-doce brasileiras mais indicadas para consumo humano são a UGA 34, UGA 45 e Amorano, considerando que apresentam características químicas, nutricionais e de aceitabilidade sensorial mais favoráveis...

Electrical conductivity as an indicator of damage due to low temperatures in beans leaves / Condutividade elétrica como indicador de danos por temperaturas baixas em folhas de feijão

The electrical conductivity test indirectly evaluates cell membrane disorganization by quantifying the electrolytes released into the water after tissue imbibing. The objective of this work was to evaluate methodological variations in the electrical conductivity test, for it to serve as an indicator of low temperature-induced damages and estimate the cold tolerance of bean plants. Cultivar IPR Uirapuru plants were subjected to minimum temperatures of 4°C, 2°C, 0°C, -1°C, -2°C, -3°C, and -4°C for 1 h in a growth chamber under controlled conditions. After the treatment period, the response of plants to cold stress was evaluated by determination of the total protein content, and catalase (CAT) and ascorbate peroxidase (APX) enzymatic activities, and evaluation of photosystem II (Fm/Fv) efficiency and leaf anatomy. These results were compared with those obtained in the electrical conductivity test, which was performed in plants under cold stress as well as under a non-stress environment, with 2, 4, 6, and 8 leaf discs immersed in 30 mL of distilled water for 24 h in BOD, at temperatures of 25°C, 30°C, and 35°C. Analysis of variance was performed using a completely randomized design, and for electrical conductivity, a number of discs × cold stress temperature combinations were used for each soak temperature. The averages were compared using the Turkeys test at 5% and 10% probability. Pearson correlation coefficient (r) between the conductivity averages and other cold stress evaluation data was also performed. The results showed a marked reduction in the ratio (Fv/Fm) only in the treatments at -3°C and -4°C, which indicated tissue death. At temperatures below 0°C, there was a collapse of the leaf blade tissues, and it was not possible to differentiate the palisade parenchyma from the spongy parenchyma in the treatments at -2°C, -3°C, and -4°C. There was an increase in the protein content since the temperature -3°C...(AU)

O teste de condutividade elétrica avalia de forma indireta a desorganização da membrana celular, pela quantificação dos eletrólitos liberados na água após a embebição dos tecidos. Assim, o objetivo do trabalho foi avaliar as variações de metodologias no teste de condutividade elétrica como indicador de danos por temperaturas baixas para estimar a tolerância ao frio de plantas de feijão preto. Dessa forma, as plantas da cultivar IPR Uirapuru foram submetidas às temperaturas mínimas de 4°C, 2°C, 0°C, -1°C, -2°C, -3°C e -4°C, por uma hora, em câmara de crescimento sob condições controladas. Após esse período, a resposta das plantas ao estresse por frio foi avaliada pela determinação do teor de proteínas totais, atividade enzimática da catalase (CAT) e da ascorbato peroxidase (APX), além da avaliação da eficiência do fotossistema II (Fv/Fm) e da anatomia foliar. Esses resultados foram comparados com os obtidos no teste de condutividade elétrica o qual foi realizado nas plantas após o estresse frio e em plantas não estressadas (ambiente) com 2, 4, 6 e 8 discos foliares imersos em 30 ml de água destilada, mantidos por 24 horas em B.O.D nas temperaturas de 25°C, 30°C e 35°C. A análise de variância foi realizada em delineamento inteiramente casualizado, e para condutividade elétrica utilizou-se fatorial número de discos x temperatura de estresse ao frio para cada temperatura de embebição separadamente. As médias foram comparadas pelo teste Tukey a 5 e 10% de probabilidade. Realizou-se a correlação de Pearson (r) entre as médias de condutividade e os demais testes de avaliação do estresse por frio. Nos resultados observou-se acentuada redução da relação (Fv/Fm) apenas nos tratamentos -3°C e -4°C indicando morte dos tecidos. Para temperaturas inferiores a 0°C houve colapso dos tecidos do limbo foliar, não sendo possível diferenciar o parênquima paliçádico do parênquima esponjoso nos tratamentos -2, -3 e -4°C...(AU)

Electrical conductivity as an indicator of damage due to low temperatures in beans leaves / Condutividade elétrica como indicador de danos por temperaturas baixas em folhas de feijão

The electrical conductivity test indirectly evaluates cell membrane disorganization by quantifying the electrolytes released into the water after tissue imbibing. The objective of this work was to evaluate methodological variations in the electrical conductivity test, for it to serve as an indicator of low temperature-induced damages and estimate the cold tolerance of bean plants. Cultivar IPR Uirapuru plants were subjected to minimum temperatures of 4°C, 2°C, 0°C, -1°C, -2°C, -3°C, and -4°C for 1 h in a growth chamber under controlled conditions. After the treatment period, the response of plants to cold stress was evaluated by determination of the total protein content, and catalase (CAT) and ascorbate peroxidase (APX) enzymatic activities, and evaluation of photosystem II (Fm/Fv) efficiency and leaf anatomy. These results were compared with those obtained in the electrical conductivity test, which was performed in plants under cold stress as well as under a non-stress environment, with 2, 4, 6, and 8 leaf discs immersed in 30 mL of distilled water for 24 h in BOD, at temperatures of 25°C, 30°C, and 35°C. Analysis of variance was performed using a completely randomized design, and for electrical conductivity, a number of discs × cold stress temperature combinations were used for each soak temperature. The averages were compared using the Turkey’s test at 5% and 10% probability. Pearson correlation coefficient (r) between the conductivity averages and other cold stress evaluation data was also performed. The results showed a marked reduction in the ratio (Fv/Fm) only in the treatments at -3°C and -4°C, which indicated tissue death. At temperatures below 0°C, there was a collapse of the leaf blade tissues, and it was not possible to differentiate the palisade parenchyma from the spongy parenchyma in the treatments at -2°C, -3°C, and -4°C. There was an increase in the protein content since the temperature -3°C...

O teste de condutividade elétrica avalia de forma indireta a desorganização da membrana celular, pela quantificação dos eletrólitos liberados na água após a embebição dos tecidos. Assim, o objetivo do trabalho foi avaliar as variações de metodologias no teste de condutividade elétrica como indicador de danos por temperaturas baixas para estimar a tolerância ao frio de plantas de feijão preto. Dessa forma, as plantas da cultivar IPR Uirapuru foram submetidas às temperaturas mínimas de 4°C, 2°C, 0°C, -1°C, -2°C, -3°C e -4°C, por uma hora, em câmara de crescimento sob condições controladas. Após esse período, a resposta das plantas ao estresse por frio foi avaliada pela determinação do teor de proteínas totais, atividade enzimática da catalase (CAT) e da ascorbato peroxidase (APX), além da avaliação da eficiência do fotossistema II (Fv/Fm) e da anatomia foliar. Esses resultados foram comparados com os obtidos no teste de condutividade elétrica o qual foi realizado nas plantas após o estresse frio e em plantas não estressadas (ambiente) com 2, 4, 6 e 8 discos foliares imersos em 30 ml de água destilada, mantidos por 24 horas em B.O.D nas temperaturas de 25°C, 30°C e 35°C. A análise de variância foi realizada em delineamento inteiramente casualizado, e para condutividade elétrica utilizou-se fatorial número de discos x temperatura de estresse ao frio para cada temperatura de embebição separadamente. As médias foram comparadas pelo teste Tukey a 5 e 10% de probabilidade. Realizou-se a correlação de Pearson (r) entre as médias de condutividade e os demais testes de avaliação do estresse por frio. Nos resultados observou-se acentuada redução da relação (Fv/Fm) apenas nos tratamentos -3°C e -4°C indicando morte dos tecidos. Para temperaturas inferiores a 0°C houve colapso dos tecidos do limbo foliar, não sendo possível diferenciar o parênquima paliçádico do parênquima esponjoso nos tratamentos -2, -3 e -4°C...

Avaliação dos níveis plasmáticos do peptídeo natriurético NT-proBNP em cães da raça Poodle em diferentes estágios da doença valvar crônica mitral / Evaluation of plasma levels of NT-proBNP natriuretic peptide in Poodle dogs at different stages of chronic mitral valve disease

A doença valvar crônica mitral (DVCM) é comum em cães e pode não causar sintomas clínicos da insuficiência cardíaca (IC) durante anos. O peptídeo natriurético tipo B (BNP) é armazenado nos miócitos ventriculares e secretado para circulação com seu fragmento NT-proBNP, quando ocorre aumento. Este estudo avaliou os níveis plasmáticos do peptídeo natriurético NT-proBNP em cães da raça Poodle em diferentes estágios da DVCM, seguindo as diretrizes do American College of Veterinary Internal Medicine (ACVIM, 2009). Amostras de sangue foram coletadas para determinação do biomarcador NT-proBNP para comparação entre grupos. As medianas do NT-proBNP nos grupos estudados foram: 551pmol/L (controle), 302pmol/L (grupo B1), 1.033pmol/L (grupo B2), 954pmol/L (grupo C) e 5.541pmol/L (grupo D). Mediante o uso de um ponto de corte ideal de >709pmol/L, foi possível identificar os cães com aumento cardíaco verdadeiro daqueles sem aumento cardíaco, com sensibilidade de 75% e especificidade de 100%. O NT-proBNP aumentou de acordo com o avanço dos estágios da DVCM, sendo os estágios B2, C e D aqueles com valores mais elevados desse biomarcador. Para o estágio B2, a mensuração do NT-proBNP mostrou ser uma excelente ferramenta para diagnosticar precocemente o aumento cardíaco em cães da raça Poodle.(AU)

Chronic mitral valve disease (CMVD) is common in dogs, it may not cause clinical symptoms of heart failure (HF) for years. The type B natriuretic peptide (BNP) is stored in the ventricular myocytes and secreted for circulation with its NT-proBNP fragment, when an increase occurs. This study evaluated the plasma levels of the NT-proBNP natriuretic peptide in Poodles at different stages of CMVD, following the guidelines of the American College of Veterinary Internal Medicine (ACVIM, 2009). Blood samples were collected for determination of NT-proBNP biomarker for comparison between groups. This median NT-proBNP in the studied groups were: 551pmol/L (Control), 302pmol/L (Group B1), 1,033pmol/L (Group B2), 954pmol/L (Group C) and 5,541pmol/L (Group D). Using an ideal cutoff of > 709pmol/L it was possible to identify dogs with true heart enlargement of those without a cardiac increase with sensitivity of 75% and specificity of 100%. NT-proBNP increased according to the progress of the stages of CMVD, being that stages B2, C and D, with the highest values of the biomarker. To stage B2, the NT-proBNP measurement proved to be an excellent tool for early diagnosis of cardiac enlargement in Poodles.(AU)

Use of aqueous extract of noni in extender for sheep semen freezing / Utilização do extrato aquoso de noni em diluente para congelação de sêmen ovino

The study aimed to evaluate the action of aqueous extract of noni in an extender for sheep semen freezing. Treatments differed in inclusion of aqueous extract of noni in the extender: T1 ˗ no addition; T2 ˗ 24µg/mL; T3 ˗ 72µg/mL; and T4 ˗ 120µg/mL. Ejaculates were collected, diluted in the four treatments, and frozen. After thawing, the semen was subjected to a thermoresistance test and evaluated for subjective motility, vigor, membrane integrity assessment by hypo-osmotic swelling test, live-dead assay, computer-assisted sperm analysis and the status of sperm capacitation and acrosome reaction. Data were subjected to ANOVA, and then to Student Newman Keuls's test at 5% significance level. In the thermoresistance test after two hours of incubation, motility in T4 (120µg/mL) was lower than in the other treatments, with no differences in the HoS test in either diluted semen or in the semen evaluated immediately post-thawing, while for the other times, treatments showed similar responses. Regarding the motility parameters, a difference was observed for progressive motility, curvilinear velocity, average path velocity, and amplitude of lateral head displacement. As to the sperm capacitation status, a difference was observed between treatments for the sperm capacitated with intact acrosome.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar a ação do extrato aquoso de noni em diluente para congelação de sêmen de carneiro. Os tratamentos diferiram quanto à inclusão de extrato aquoso de noni ao meio diluidor em: T1˗ sem adição de extrato; T2˗ 24µg/mL ; T3- 72µg/mL e 120µg/mL. Por meio de vagina artificial, 16 ejaculados foram coletados, diluídos entre os quatro tratamentos e congelados. Após o descongelamento, o sêmen foi submetido ao teste de termorresistência e avaliado quanto à motilidade subjetiva, ao vigor espermático, à integridade de membrana pelo teste hiposmótico, bem como ao teste supravital, à análise de sêmen assistida por computador (CASA) e ao status de capacitação espermática e de reação acrossomal. Os dados foram submetidos a uma análise de variância, seguida pelo teste de Student-Newman-Keuls com 5% de significância. No teste de termorresistência, após duas horas de incubação, a motilidade do T4 (120µg/mL) apresentou-se inferior aos demais tratamentos. Não houve diferença significativa no teste HOS tanto para o sêmen diluído quanto para o sêmen avaliado imediatamente pós-descongelação; para as demais horas, os tratamentos apresentaram comportamento semelhante. Para os parâmetros de cinética, foi observada diferença estatística para motilidade progressiva, velocidade curvilinear, velocidade do percurso médio e amplitude de deslocamento lateral da cabeça. Quanto ao estado de capacitação espermática, observou-se diferença entre os tratamentos para espermatozoide capacitado com acrossomo intacto.(AU)

Use of aqueous extract of noni in extender for sheep semen freezing / Utilização do extrato aquoso de noni em diluente para congelação de sêmen ovino

The study aimed to evaluate the action of aqueous extract of noni in an extender for sheep semen freezing. Treatments differed in inclusion of aqueous extract of noni in the extender: T1 ˗ no addition; T2 ˗ 24µg/mL; T3 ˗ 72µg/mL; and T4 ˗ 120µg/mL. Ejaculates were collected, diluted in the four treatments, and frozen. After thawing, the semen was subjected to a thermoresistance test and evaluated for subjective motility, vigor, membrane integrity assessment by hypo-osmotic swelling test, live-dead assay, computer-assisted sperm analysis and the status of sperm capacitation and acrosome reaction. Data were subjected to ANOVA, and then to Student Newman Keuls's test at 5% significance level. In the thermoresistance test after two hours of incubation, motility in T4 (120µg/mL) was lower than in the other treatments, with no differences in the HoS test in either diluted semen or in the semen evaluated immediately post-thawing, while for the other times, treatments showed similar responses. Regarding the motility parameters, a difference was observed for progressive motility, curvilinear velocity, average path velocity, and amplitude of lateral head displacement. As to the sperm capacitation status, a difference was observed between treatments for the sperm capacitated with intact acrosome.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar a ação do extrato aquoso de noni em diluente para congelação de sêmen de carneiro. Os tratamentos diferiram quanto à inclusão de extrato aquoso de noni ao meio diluidor em: T1˗ sem adição de extrato; T2˗ 24µg/mL ; T3- 72µg/mL e 120µg/mL. Por meio de vagina artificial, 16 ejaculados foram coletados, diluídos entre os quatro tratamentos e congelados. Após o descongelamento, o sêmen foi submetido ao teste de termorresistência e avaliado quanto à motilidade subjetiva, ao vigor espermático, à integridade de membrana pelo teste hiposmótico, bem como ao teste supravital, à análise de sêmen assistida por computador (CASA) e ao status de capacitação espermática e de reação acrossomal. Os dados foram submetidos a uma análise de variância, seguida pelo teste de Student-Newman-Keuls com 5% de significância. No teste de termorresistência, após duas horas de incubação, a motilidade do T4 (120µg/mL) apresentou-se inferior aos demais tratamentos. Não houve diferença significativa no teste HOS tanto para o sêmen diluído quanto para o sêmen avaliado imediatamente pós-descongelação; para as demais horas, os tratamentos apresentaram comportamento semelhante. Para os parâmetros de cinética, foi observada diferença estatística para motilidade progressiva, velocidade curvilinear, velocidade do percurso médio e amplitude de deslocamento lateral da cabeça. Quanto ao estado de capacitação espermática, observou-se diferença entre os tratamentos para espermatozoide capacitado com acrossomo intacto.(AU)

Avaliação dos níveis plasmáticos do peptídeo natriurético NT-proBNP em cães da raça Poodle em diferentes estágios da doença valvar crônica mitral / Evaluation of plasma levels of NT-proBNP natriuretic peptide in Poodle dogs at different stages of chronic mitral valve disease

A doença valvar crônica mitral (DVCM) é comum em cães e pode não causar sintomas clínicos da insuficiência cardíaca (IC) durante anos. O peptídeo natriurético tipo B (BNP) é armazenado nos miócitos ventriculares e secretado para circulação com seu fragmento NT-proBNP, quando ocorre aumento. Este estudo avaliou os níveis plasmáticos do peptídeo natriurético NT-proBNP em cães da raça Poodle em diferentes estágios da DVCM, seguindo as diretrizes do American College of Veterinary Internal Medicine (ACVIM, 2009). Amostras de sangue foram coletadas para determinação do biomarcador NT-proBNP para comparação entre grupos. As medianas do NT-proBNP nos grupos estudados foram: 551pmol/L (controle), 302pmol/L (grupo B1), 1.033pmol/L (grupo B2), 954pmol/L (grupo C) e 5.541pmol/L (grupo D). Mediante o uso de um ponto de corte ideal de >709pmol/L, foi possível identificar os cães com aumento cardíaco verdadeiro daqueles sem aumento cardíaco, com sensibilidade de 75% e especificidade de 100%. O NT-proBNP aumentou de acordo com o avanço dos estágios da DVCM, sendo os estágios B2, C e D aqueles com valores mais elevados desse biomarcador. Para o estágio B2, a mensuração do NT-proBNP mostrou ser uma excelente ferramenta para diagnosticar precocemente o aumento cardíaco em cães da raça Poodle.(AU)

Chronic mitral valve disease (CMVD) is common in dogs, it may not cause clinical symptoms of heart failure (HF) for years. The type B natriuretic peptide (BNP) is stored in the ventricular myocytes and secreted for circulation with its NT-proBNP fragment, when an increase occurs. This study evaluated the plasma levels of the NT-proBNP natriuretic peptide in Poodles at different stages of CMVD, following the guidelines of the American College of Veterinary Internal Medicine (ACVIM, 2009). Blood samples were collected for determination of NT-proBNP biomarker for comparison between groups. This median NT-proBNP in the studied groups were: 551pmol/L (Control), 302pmol/L (Group B1), 1,033pmol/L (Group B2), 954pmol/L (Group C) and 5,541pmol/L (Group D). Using an ideal cutoff of > 709pmol/L it was possible to identify dogs with true heart enlargement of those without a cardiac increase with sensitivity of 75% and specificity of 100%. NT-proBNP increased according to the progress of the stages of CMVD, being that stages B2, C and D, with the highest values of the biomarker. To stage B2, the NT-proBNP measurement proved to be an excellent tool for early diagnosis of cardiac enlargement in Poodles.(AU)

Microscopic sperm head damage and abnormalities as heat stress indicators in Australian Merino rams (Ovis aries) in Northern Patagonia, Argentina / Danos e anormalidades microscópicas das cabeças espermáticas como indicadores de estresse por calor em carneiros Merino Australiano (Ovis aries) da Patagônia Norte, Argentina

In Northern Patagonia, the mating season starts on March 15th, when rams are submitted to summer temperatures. Exposure of rams to heat stress increases the prevalence of microscopic damage to spermatozoa, morphological abnormalities, and reductions in fertility. This study assesses the adaptive capabilities of six unshorn and six shorn Australian Merino rams, half of which were treated in a heat chamber for eight hours for five days, gradually reaching a temperature of up to 40 °C. Microscopic damage, abnormalities and ultramicroscopic alterations of the plasma membrane and the acrosome of sperm head were analysed. There were significant differences in the percentage of tailless spermatozoa and proximal cytoplasmic droplets between post-treatment periods. Temperature primarily affected the shorn rams and the sperm heads during spermiogenesis. Submicroscopic alterations were observed when the plasma membrane was present in the anterior segment. These alterations can be intact, waved, or dilated. When the plasma membrane was absent, the acrosome might be intact, dilated, and waved. In addition, the outer acrosomal membrane may completely lose its contents or have a nude nucleus. The plasma membrane assumes a waved shape as a result of the effect of temperature on the epididymis. According to this study, the tailless head, proximal cytoplasmic droplets, and the ultramicroscopic categories studied were robust indicators of semen heat stress. After ten weeks, the sperm head recovered its normal shape. Unshorn rams are better adapted to summer heat stress than shorn ones. Microscopy and transmission electron microscopy alterations have been shown to be excellent indicators of thermal stress in Australian Merino rams and may be useful tools to help sheep farmers choose when to begin the mating season, which will vary depending on the environmental conditions of the summer.(AU)

Na Patagônia Norte, os ovinos têm sua estação de acasalamento iniciada em 15 de março, portanto, ficam sujeitos às temperaturas do verão. A exposição de carneiros a estresse térmico aumenta a prevalência de danos microscópicos e anomalias morfológicas nos espermatozoides, que implica uma redução na fertilidade. Este trabalho avaliou a capacidade adaptativa de carneiros Merino Australiano com lã (N = 6) e tosquiados (N = 6): metade ficou ao ar livre e outra metade foi mantida em uma câmara climática por oito horas, durante cinco dias, chegando gradualmente a uma temperatura máxima de 40 °C. Foram analisados danos microscópicos, anormalidades e alterações ultramicroscópicas da membrana plasmática e do acrossoma da cabeça dos espermatozoides. Os resultados microscópicos confirmaram a existência de diferença significativa na porcentagem de espermatozoides sem cauda e com gota citoplasmática proximal, entre os ejaculados pós-tratamento. A temperatura afetou os carneiros tosquiados, principalmente a cabeça de seus espermatozoides, durante a espermatogênese. Alterações submicroscópicas foram observados na membrana plasmática quando ela estava presente no segmento anterior: quando não intacta, ficava ondulada ou dilatada. Quando a membrana plasmática estava ausente, o acrossoma podia se apresentar ondulado ou dilatado. Além disso, sob efeito do calor, a membrana acrossomal externa pode perder completamente seu conteúdo ou apresentar núcleo desnudo. A membrana plasmática assume uma forma ondulada pelo efeito da temperatura no epidídimo. Depois de dez semanas, a cabeça dos espermatozoides recuperou sua forma normal. Como demonstrado neste estudo, a cabeça sem cauda, as gotas citoplasmáticas proximais e as categorias ultramicroscópicas estudadas são indicadores do efeito do estresse térmico no sêmen, e os carneiros com maior cobertura de lã se adaptam melhor ao estresse por calor. Alterações de microscopia e de microscopia eletrônica de transmissão têm se mostrado excelentes indicadores de estresse por calor em carneiros Merino Australiano e podem ser ferramentas úteis para ajudar criadores de ovelhas a escolher quando começar a época de acasalamento, o que irá variar de acordo com as condições ambientais do verão.(AU)

Microscopic sperm head damage and abnormalities as heat stress indicators in Australian Merino rams (Ovis aries) in Northern Patagonia, Argentina / Danos e anormalidades microscópicas das cabeças espermáticas como indicadores de estresse por calor em carneiros Merino Australiano (Ovis aries) da Patagônia Norte, Argentina

In Northern Patagonia, the mating season starts on March 15th, when rams are submitted to summer temperatures. Exposure of rams to heat stress increases the prevalence of microscopic damage to spermatozoa, morphological abnormalities, and reductions in fertility. This study assesses the adaptive capabilities of six unshorn and six shorn Australian Merino rams, half of which were treated in a heat chamber for eight hours for five days, gradually reaching a temperature of up to 40 °C. Microscopic damage, abnormalities and ultramicroscopic alterations of the plasma membrane and the acrosome of sperm head were analysed. There were significant differences in the percentage of tailless spermatozoa and proximal cytoplasmic droplets between post-treatment periods. Temperature primarily affected the shorn rams and the sperm heads during spermiogenesis. Submicroscopic alterations were observed when the plasma membrane was present in the anterior segment. These alterations can be intact, waved, or dilated. When the plasma membrane was absent, the acrosome might be intact, dilated, and waved. In addition, the outer acrosomal membrane may completely lose its contents or have a nude nucleus. The plasma membrane assumes a waved shape as a result of the effect of temperature on the epididymis. According to this study, the tailless head, proximal cytoplasmic droplets, and the ultramicroscopic categories studied were robust indicators of semen heat stress. After ten weeks, the sperm head recovered its normal shape. Unshorn rams are better adapted to summer heat stress than shorn ones. Microscopy and transmission electron microscopy alterations have been shown to be excellent indicators of thermal stress in Australian Merino rams and may be useful tools to help sheep farmers choose when to begin the mating season, which will vary depending on the environmental conditions of the summer.(AU)

Na Patagônia Norte, os ovinos têm sua estação de acasalamento iniciada em 15 de março, portanto, ficam sujeitos às temperaturas do verão. A exposição de carneiros a estresse térmico aumenta a prevalência de danos microscópicos e anomalias morfológicas nos espermatozoides, que implica uma redução na fertilidade. Este trabalho avaliou a capacidade adaptativa de carneiros Merino Australiano com lã (N = 6) e tosquiados (N = 6): metade ficou ao ar livre e outra metade foi mantida em uma câmara climática por oito horas, durante cinco dias, chegando gradualmente a uma temperatura máxima de 40 °C. Foram analisados danos microscópicos, anormalidades e alterações ultramicroscópicas da membrana plasmática e do acrossoma da cabeça dos espermatozoides. Os resultados microscópicos confirmaram a existência de diferença significativa na porcentagem de espermatozoides sem cauda e com gota citoplasmática proximal, entre os ejaculados pós-tratamento. A temperatura afetou os carneiros tosquiados, principalmente a cabeça de seus espermatozoides, durante a espermatogênese. Alterações submicroscópicas foram observados na membrana plasmática quando ela estava presente no segmento anterior: quando não intacta, ficava ondulada ou dilatada. Quando a membrana plasmática estava ausente, o acrossoma podia se apresentar ondulado ou dilatado. Além disso, sob efeito do calor, a membrana acrossomal externa pode perder completamente seu conteúdo ou apresentar núcleo desnudo. A membrana plasmática assume uma forma ondulada pelo efeito da temperatura no epidídimo. Depois de dez semanas, a cabeça dos espermatozoides recuperou sua forma normal. Como demonstrado neste estudo, a cabeça sem cauda, as gotas citoplasmáticas proximais e as categorias ultramicroscópicas estudadas são indicadores do efeito do estresse térmico no sêmen, e os carneiros com maior cobertura de lã se adaptam melhor ao estresse por calor. Alterações de microscopia e de microscopia eletrônica de transmissão têm se mostrado excelentes indicadores de estresse por calor em carneiros Merino Australiano e podem ser ferramentas úteis para ajudar criadores de ovelhas a escolher quando começar a época de acasalamento, o que irá variar de acordo com as condições ambientais do verão.(AU)

Can centrifugation force compromise the plasmatic membrane, acrosome and DNA integrity of goat spermatozoa? / A força de centrifugação pode comprometer a integridade de membrana plasmática, acrossomal e DNA de espermatozoides caprinos?

Protocols for cooling or freezing goat semen usually recommend centrifugation for seminal plasma removal. However, little is known about the effect of this process on goat sperm viability and functionality. The present study evaluated the effects of centrifugation force on the plasma membrane, acrosomes, and DNA integrity of goat semen. Four ejaculates from each of the four different Anglo Nubian male goats were used. Semen samples were obtained using artificial vagina, and immediately after collection, ejaculates were diluted using Ringer's sodium lactate solution and split into three groups: Control (CG, without centrifugation), G1 (centrifugation 600 x g/10 min), G2 (centrifugation 1200 x g/10 min). After centrifugation, seminal plasma was removed, the sperm pellets were resuspended using Tris-egg yolk extender (80 x 106 spermatozoa/mL) and the sperm morphology was analyzed. Samples were cooled at 5°C for 5, 24, 36, and 48 h and then sperm plasma membrane and acrosome integrity (PMAI, %) and sperm DNA fragmentation index (SDF, %) were evaluated at each time-point, using a flow cytometer. Additionally, sperm movement was determined using computer semen analysis (CASA) after 5, 24, and 48 h of refrigeration period. The semen centrifugation did not induce additional sperm morphology defect or reduction in sperm kinetics in the experimental groups. Differences were not observed (p > 0.05) in PMAI and SDF among different groups, in any of each time-point of the cooling process. In conclusion, centrifugation, even at high speeds, did not affect goat sperm integrity and functionality when submitted to refrigeration process. (AU)

A maior parte dos protocolos de refrigeração e criopreservação do sêmen caprino recomenda o uso de centrifugação para remoção do plasma seminal. No entanto, não existe consenso sobre o risco que esse tipo de processamento pode ocasionar à viabilidade espermática. Nesse contexto, o presente trabalho investigou os possíveis efeitos deletérios da centrifugação sobre a integridade estrutural e DNA de espermatozoides caprinos. Para a pesquisa foram selecionados quatro reprodutores para colheita de sêmen (n = 4 ejaculados/bode). Cada ejaculado foi fracionado em três alíquotas iguais, diluídas em ringer e divididas em três grupos: Controle (GC, não centrifugado), G1 (centrifugação a 600 g/10 minutos) e G2 (centrifugação a 1200 g/10 minutos). As amostras seminais por grupo foram diluídas em meio Tris gema respeitando-se a concentração final de 80 milhões de espermatozoides/mL e foram submetidas à avaliação de morfologia espermática. Todas as amostras foram acondicionadas a 5°C, sendo analisadas nos momentos 5, 24, 36 e 48 horas do processo de refrigeração por meio da avaliação da integridade de membrana plasmática e acrossomal (MPAI, %) e índice de fragmentação de DNA (IDF, %). Adicionalmente, a cinética espermática foi avaliada com o emprego de um sistema computadorizado de análise (CASA) nos momentos 5, 24 e 48 horas da refrigeração. A centrifugação não induziu a manifestação de defeitos morfológicos ou redução significativa da cinética de espermatozoides caprinos. Não foram observadas diferenças para a integridade de membrana plasmática e para o índice de fragmentação de DNA quando comparados, respectivamente, GC, G1 e G2 em cada um dos quatro momentos experimentais. Conclui-se que mesmo quando empregadas altas forças de rotação não ocorre lesão à ultraestrutura dos espermatozoides caprinos submetidos ao processo de refrigeração.(AU)

Can centrifugation force compromise the plasmatic membrane, acrosome and DNA integrity of goat spermatozoa? / A força de centrifugação pode comprometer a integridade de membrana plasmática, acrossomal e DNA de espermatozoides caprinos?

Protocols for cooling or freezing goat semen usually recommend centrifugation for seminal plasma removal. However, little is known about the effect of this process on goat sperm viability and functionality. The present study evaluated the effects of centrifugation force on the plasma membrane, acrosomes, and DNA integrity of goat semen. Four ejaculates from each of the four different Anglo Nubian male goats were used. Semen samples were obtained using artificial vagina, and immediately after collection, ejaculates were diluted using Ringer's sodium lactate solution and split into three groups: Control (CG, without centrifugation), G1 (centrifugation 600 x g/10 min), G2 (centrifugation 1200 x g/10 min). After centrifugation, seminal plasma was removed, the sperm pellets were resuspended using Tris-egg yolk extender (80 x 106 spermatozoa/mL) and the sperm morphology was analyzed. Samples were cooled at 5°C for 5, 24, 36, and 48 h and then sperm plasma membrane and acrosome integrity (PMAI, %) and sperm DNA fragmentation index (SDF, %) were evaluated at each time-point, using a flow cytometer. Additionally, sperm movement was determined using computer semen analysis (CASA) after 5, 24, and 48 h of refrigeration period. The semen centrifugation did not induce additional sperm morphology defect or reduction in sperm kinetics in the experimental groups. Differences were not observed (p > 0.05) in PMAI and SDF among different groups, in any of each time-point of the cooling process. In conclusion, centrifugation, even at high speeds, did not affect goat sperm integrity and functionality when submitted to refrigeration process. (AU)

A maior parte dos protocolos de refrigeração e criopreservação do sêmen caprino recomenda o uso de centrifugação para remoção do plasma seminal. No entanto, não existe consenso sobre o risco que esse tipo de processamento pode ocasionar à viabilidade espermática. Nesse contexto, o presente trabalho investigou os possíveis efeitos deletérios da centrifugação sobre a integridade estrutural e DNA de espermatozoides caprinos. Para a pesquisa foram selecionados quatro reprodutores para colheita de sêmen (n = 4 ejaculados/bode). Cada ejaculado foi fracionado em três alíquotas iguais, diluídas em ringer e divididas em três grupos: Controle (GC, não centrifugado), G1 (centrifugação a 600 g/10 minutos) e G2 (centrifugação a 1200 g/10 minutos). As amostras seminais por grupo foram diluídas em meio Tris gema respeitando-se a concentração final de 80 milhões de espermatozoides/mL e foram submetidas à avaliação de morfologia espermática. Todas as amostras foram acondicionadas a 5°C, sendo analisadas nos momentos 5, 24, 36 e 48 horas do processo de refrigeração por meio da avaliação da integridade de membrana plasmática e acrossomal (MPAI, %) e índice de fragmentação de DNA (IDF, %). Adicionalmente, a cinética espermática foi avaliada com o emprego de um sistema computadorizado de análise (CASA) nos momentos 5, 24 e 48 horas da refrigeração. A centrifugação não induziu a manifestação de defeitos morfológicos ou redução significativa da cinética de espermatozoides caprinos. Não foram observadas diferenças para a integridade de membrana plasmática e para o índice de fragmentação de DNA quando comparados, respectivamente, GC, G1 e G2 em cada um dos quatro momentos experimentais. Conclui-se que mesmo quando empregadas altas forças de rotação não ocorre lesão à ultraestrutura dos espermatozoides caprinos submetidos ao processo de refrigeração.(AU)

Comparação de diluidores comerciais na motilidade, funcionalidade e integridade da membrana plasmática do espermatozoide bovino / Comparison of commercial diluents on motility, functionality and integrity of plasma membrane of bovine spermatozoa

O objetivo do estudo foi comparar o efeito de três diluidores comerciais (Tryladil®, Botu-Bov® e OptiXcell®) na qualidade doespermatozoide bovino após o processo de criogenia. Para tal, foram utilizados oito touros da raça Nelore (2 ejaculados/touro).As amostras de sêmen fresco, diluído e pós-descongelamento foram avaliadas, comparando os parâmetros de motilidade total,vigor, funcionalidade da membrana (HOST) e integridade da membrana (eosina). Os dados foram expressos em média e desviopadrão. As variáveis foram submetidas às análises de ANOVA e Tukey ou teste de Friedman e Dunns, dependendo da normalidade(p 0,05). Os achados mostram que no momento da diluição não houve diferença (p0,005) entre os diluidores comerciais nosparâmetros avaliados (exceto integridade da membrana plasmática). No entanto, no momento do pós-descongelamento osespermatozoides criopreservados utilizando-se o diluidor Tryladil® apresentaram maiores valores (p0,005) referentes a integridade efuncionalidade da membrana plasmática comparado aos diluídos em Botu-Bov® e OptIXcell®. Os parâmetros relacionados a cinéticaespermática (motilidade e vigor) não se diferiram (p0,005) entre os diluidores comerciais utilizados. Em conclusão, no momentopós-descongelamento o diluidor Tryladil® apresentou os melhores resultados nos parâmetros de integridade e funcionalidade damembrana plasmática. Sendo assim, recome

The main of the study was to compare the quality of frozen bull semen processed with three different commercially extenders (Tryladil®, Botu-Bov® and OptiXcell®). For this, eight Nelore bulls (two ejaculate per bull). Sperm samples were analyzed fresh, diluted and frozen-thawed. The parameters analyzed were total motility, sperm vigor, functional integrity of sperm plasma membrane (HOST) and plasma membrane integrity (eosin). Date were expressed as mean and standard deviation. The variables were subjected to ANOVA (Tukey test) or Friedman (Dunns test) test according to normality (p< 0,05). The results indicate that there was no difference (p˃0,005) among all treatments in the parameters evaluated (except plasma membrane integrity) at dilution moment. However, Tryladil extender promoted an increase (p˂0,005) in functional and integrity of sperm plasma membrane compared with others extenders at the post-thawing analyze. After thawing, there was no difference (p˃0,005) among all treatments in the kinetic parameters. In conclusion, the Tryladil® extender promoted an increase in functional and integrity of frozen-thawed sperm plasma membrane. Therefore, the Tryladil® extender is recommended to be use as an extender for Nelore bull sperm cryopreservation.(AU)

Avaliação da qualidade fisiológica de sementes florestais através do teste de condutividade elétrica / Evaluation of the physiological quality of forest seeds species through the electrical conductivity test

A avaliação da condutividade elétrica é um dos testes mais rápidos na avaliação da qualidade de sementes, assim, o objetivo foi verificar a qualidade fisiológica de sementes de oito espécies florestais por meio do teste de condutividade elétrica massal e, se este é eficiente para tal, correlacionando-o com a germinação. O delineamento foi inteiramente casualizado com 4 repetições de 25 sementes, avaliando-se os períodos de embebição (2, 4, 6, 8, 24 e 48 horas). Após cada período, realizou-se a leitura da condutividade, sendo que em seguida as mesmas sementes foram postas para germinar com intuito de correlacionar os valores de condutividade com a germinação. Foi realizada a análise de correlação entre condutividade elétrica e germinação dentro de cada período de embebição. O teste de condutividade elétrica massal se mostrou eficiente para avaliação da qualidade das sementes das espécies estudadas, quando comparado ao teste padrão de germinação, podendo ser uma alternativa rápida para avaliação da qualidade fisiológica de sementes florestais.

The evaluation of the electrical conductivity is one of the rapid tests in the assessment of quality seeds, so the goal was to evaluate the physiological quality efficiency of eight forest species seeds through the individual electrical conductivity test and the efficiency of this. The design was completely randomized with 4 replications of 25 seeds, evaluating the soaking periods (2, 4, 6, 8, 24 and 48 hours). After each period, there was the reading of conductivity, and then the seeds were germinated in order to correlate the conductivity values with germination. The test of the individual electrical conductivity was efficient to evaluate the quality of the seeds.

Avaliação da qualidade fisiológica de sementes florestais através do teste de condutividade elétrica / Evaluation of the physiological quality of forest seeds species through the electrical conductivity test

A avaliação da condutividade elétrica é um dos testes mais rápidos na avaliação da qualidade de sementes, assim, o objetivo foi verificar a qualidade fisiológica de sementes de oito espécies florestais por meio do teste de condutividade elétrica massal e, se este é eficiente para tal, correlacionando-o com a germinação. O delineamento foi inteiramente casualizado com 4 repetições de 25 sementes, avaliando-se os períodos de embebição (2, 4, 6, 8, 24 e 48 horas). Após cada período, realizou-se a leitura da condutividade, sendo que em seguida as mesmas sementes foram postas para germinar com intuito de correlacionar os valores de condutividade com a germinação. Foi realizada a análise de correlação entre condutividade elétrica e germinação dentro de cada período de embebição. O teste de condutividade elétrica massal se mostrou eficiente para avaliação da qualidade das sementes das espécies estudadas, quando comparado ao teste padrão de germinação, podendo ser uma alternativa rápida para avaliação da qualidade fisiológica de sementes florestais.(AU)

The evaluation of the electrical conductivity is one of the rapid tests in the assessment of quality seeds, so the goal was to evaluate the physiological quality efficiency of eight forest species seeds through the individual electrical conductivity test and the efficiency of this. The design was completely randomized with 4 replications of 25 seeds, evaluating the soaking periods (2, 4, 6, 8, 24 and 48 hours). After each period, there was the reading of conductivity, and then the seeds were germinated in order to correlate the conductivity values with germination. The test of the individual electrical conductivity was efficient to evaluate the quality of the seeds.(AU)

Maternal plasma levels of vascular endothelial growth factor and interleukin-6 in the term-pregnant and non-pregnant rats

Female reproductive functions are associated with changes in the level of systemic cytokines which play pivotal roles during ovulation, development of corpus luteum, embryo implantation, and labor. Although many studies reported elevated level of VEGF during early pregnancy and IL-6 at the onset of labors, there is still incomplete elucidation of the level of these systemic cytokines in the very-late pregnancy or in the non-pregnant states. The purpose of this study was to determine the maternal plasma level of vascular endothelial growth factor (VEGF) and interleukin-6 (IL-6) in the term-pregnant and non-pregnant rats to see if their levels are changed at the very end of pregnancy. Blood samples were collected from twelve term-pregnant rats and compared by aged-matched seven non-pregnant rats. Plasma was separated carefully from all samples and the concentrations of VEGF and IL-6 were determined by ELISA techniques. The plasma concentration of VEGF was significantly higher in the non-pregnant rats (0.237 pg/ ml) than in the term-pregnant (0.2 pg/ ml; P < 0.001). The plasma concentration of IL-6 was significantly higher in the term-pregnant rats (50.12 pg/ ml) than in the non-pregnant ones (40.19 pg/ ml; P < 0.05). These findings suggest that the level of VEGF is decreased few days before labor possibly to decrease the ovarian blood flow and to cause luteolysis while the level of IL-6 is increased at the end of pregnancy possibly to cause a local inflammation. Together, these changes are necessary to stimulate the onset of labor.

Maternal plasma levels of vascular endothelial growth factor and interleukin-6 in the term-pregnant and non-pregnant rats

Female reproductive functions are associated with changes in the level of systemic cytokines which play pivotal roles during ovulation, development of corpus luteum, embryo implantation, and labor. Although many studies reported elevated level of VEGF during early pregnancy and IL-6 at the onset of labors, there is still incomplete elucidation of the level of these systemic cytokines in the very-late pregnancy or in the non-pregnant states. The purpose of this study was to determine the maternal plasma level of vascular endothelial growth factor (VEGF) and interleukin-6 (IL-6) in the term-pregnant and non-pregnant rats to see if their levels are changed at the very end of pregnancy. Blood samples were collected from twelve term-pregnant rats and compared by aged-matched seven non-pregnant rats. Plasma was separated carefully from all samples and the concentrations of VEGF and IL-6 were determined by ELISA techniques. The plasma concentration of VEGF was significantly higher in the non-pregnant rats (0.237 pg/ ml) than in the term-pregnant (0.2 pg/ ml; P < 0.001). The plasma concentration of IL-6 was significantly higher in the term-pregnant rats (50.12 pg/ ml) than in the non-pregnant ones (40.19 pg/ ml; P < 0.05). These findings suggest that the level of VEGF is decreased few days before labor possibly to decrease the ovarian blood flow and to cause luteolysis while the level of IL-6 is increased at the end of pregnancy possibly to cause a local inflammation. Together, these changes are necessary to stimulate the onset of labor.(AU)