Rubiadin exerts an acute and chronic anti-inflammatory effect in rodents

Abstract: Rubiadin is identified as a bioactive anthraquinone that exists in some quinone rich plants. The current research was carried out to evaluate the potential anti-inflammatory impact of Rubiadin in acute and chronic inflammation test models in rodents. The anti-inflammatory activity of Rubiadin was examined in cotton pellet-induced granuloma and carrageenan-induced edema as chronic and acute inflammation models in rats. TNF- level and histopathological changes were assessed using sampled foot tissue of rat in the acute model. Also, the IL-1 level was assessed in the chronic model. One-way ANOVA (post hoc Tukeys) analysis was used for comparing the groups. Rubiadin (0.5 mg/kg, i.p.) induced a significant reduction in TNF level and the paw edema compared to the control group in carrageenan test. Also, it was observed that the anti-inflammatory activity of Rubiadin (0.5 mg/kg, i.p.) is comparable to mefenamic acid (30 mg/kg, i.p.) as the standard drug. Rubiadin was effective in granuloma induced by cotton pellet concerning the granuloma and transudate formation amount. Rubiadins anti-inflammatory effects were associated with a significant IL-1 decrease in this model. The results suggest that Rubiadin as a natural compound can possess significant peripheral anti-inflammatory impacts.

Resumo A rubiadina é identificada como uma antraquinona bioativa que existe em algumas plantas ricas em quinonas. A presente pesquisa foi realizada para avaliar o potencial impacto anti-inflamatório da rubiadina em modelos de teste de inflamação aguda e crônica em roedores. A atividade anti-inflamatória da rubiadina foi examinada em granuloma induzido por pellet de algodão e edema induzido por carragenina como modelos de inflamação crônica e aguda em ratos. O nível de TNF- e as alterações histopatológicas foram avaliados usando amostra de tecido do pé de rato no modelo agudo. Além disso, o nível de IL-1 foi avaliado no modelo crônico. A análise ANOVA de uma via (post hoc de Tukey) foi usada para comparar os grupos. A rubiadina (0,5 mg / kg, i.p.) induziu uma redução significativa no nível de TNF e no edema da pata em comparação com o grupo de controle no teste de carragenina. Além disso, foi observado que a atividade anti-inflamatória da rubiadina (0,5 mg / kg, i.p.) é comparável ao ácido mefenâmico (30 mg/kg, i.p.) como o fármaco padrão. A rubiadina foi eficaz no granuloma induzido por pellet de algodão no que diz respeito à quantidade de granuloma e formação de transudato. Os efeitos anti-inflamatórios da rubiadina foram associados a uma redução significativa de IL-1 nesse modelo. Os resultados sugerem que a rubiadina como um composto natural pode ter impactos anti-inflamatórios periféricos significativos.

Rubiadin exerts an acute and chronic anti-inflammatory effect in rodents / A Rubiadina exerce um efeito anti-inflamatório agudo e crônico em roedores

Rubiadin is identified as a bioactive anthraquinone that exists in some quinone rich plants. The current research was carried out to evaluate the potential anti-inflammatory impact of Rubiadin in acute and chronic inflammation test models in rodents. The anti-inflammatory activity of Rubiadin was examined in cotton pellet-induced granuloma and carrageenan-induced edema as chronic and acute inflammation models in rats. TNF-α level and histopathological changes were assessed using sampled foot tissue of rat in the acute model. Also, the IL-1β level was assessed in the chronic model. One-way ANOVA (post hoc Tukey’s) analysis was used for comparing the groups. Rubiadin (0.5 mg/kg, i.p.) induced a significant reduction in TNF α level and the paw edema compared to the control group in carrageenan test. Also, it was observed that the anti-inflammatory activity of Rubiadin (0.5 mg/kg, i.p.) is comparable to mefenamic acid (30 mg/kg, i.p.) as the standard drug. Rubiadin was effective in granuloma induced by cotton pellet concerning the granuloma and transudate formation amount. Rubiadin's anti-inflammatory effects were associated with a significant IL-1β decrease in this model. The results suggest that Rubiadin as a natural compound can possess significant peripheral anti-inflammatory impacts.

A rubiadina é identificada como uma antraquinona bioativa que existe em algumas plantas ricas em quinonas. A presente pesquisa foi realizada para avaliar o potencial impacto anti-inflamatório da rubiadina em modelos de teste de inflamação aguda e crônica em roedores. A atividade anti-inflamatória da rubiadina foi examinada em granuloma induzido por pellet de algodão e edema induzido por carragenina como modelos de inflamação crônica e aguda em ratos. O nível de TNF-α e as alterações histopatológicas foram avaliados usando amostra de tecido do pé de rato no modelo agudo. Além disso, o nível de IL-1β foi avaliado no modelo crônico. A análise ANOVA de uma via (post hoc de Tukey) foi usada para comparar os grupos. A rubiadina (0,5 mg / kg, i.p.) induziu uma redução significativa no nível de TNF α e no edema da pata em comparação com o grupo de controle no teste de carragenina. Além disso, foi observado que a atividade anti-inflamatória da rubiadina (0,5 mg / kg, i.p.) é comparável ao ácido mefenâmico (30 mg/kg, i.p.) como o fármaco padrão. A rubiadina foi eficaz no granuloma induzido por pellet de algodão no que diz respeito à quantidade de granuloma e formação de transudato. Os efeitos anti-inflamatórios da rubiadina foram associados a uma redução significativa de IL-1β nesse modelo. Os resultados sugerem que a rubiadina como um composto natural pode ter impactos anti-inflamatórios periféricos significativos.

Rubiadin exerts an acute and chronic anti-inflammatory effect in rodents / A Rubiadina exerce um efeito anti-inflamatório agudo e crônico em roedores

Rubiadin is identified as a bioactive anthraquinone that exists in some quinone rich plants. The current research was carried out to evaluate the potential anti-inflammatory impact of Rubiadin in acute and chronic inflammation test models in rodents. The anti-inflammatory activity of Rubiadin was examined in cotton pellet-induced granuloma and carrageenan-induced edema as chronic and acute inflammation models in rats. TNF-α level and histopathological changes were assessed using sampled foot tissue of rat in the acute model. Also, the IL-1β level was assessed in the chronic model. One-way ANOVA (post hoc Tukeys) analysis was used for comparing the groups. Rubiadin (0.5 mg/kg, i.p.) induced a significant reduction in TNF α level and the paw edema compared to the control group in carrageenan test. Also, it was observed that the anti-inflammatory activity of Rubiadin (0.5 mg/kg, i.p.) is comparable to mefenamic acid (30 mg/kg, i.p.) as the standard drug. Rubiadin was effective in granuloma induced by cotton pellet concerning the granuloma and transudate formation amount. Rubiadin's anti-inflammatory effects were associated with a significant IL-1β decrease in this model. The results suggest that Rubiadin as a natural compound can possess significant peripheral anti-inflammatory impacts.(AU)

A rubiadina é identificada como uma antraquinona bioativa que existe em algumas plantas ricas em quinonas. A presente pesquisa foi realizada para avaliar o potencial impacto anti-inflamatório da rubiadina em modelos de teste de inflamação aguda e crônica em roedores. A atividade anti-inflamatória da rubiadina foi examinada em granuloma induzido por pellet de algodão e edema induzido por carragenina como modelos de inflamação crônica e aguda em ratos. O nível de TNF-α e as alterações histopatológicas foram avaliados usando amostra de tecido do pé de rato no modelo agudo. Além disso, o nível de IL-1β foi avaliado no modelo crônico. A análise ANOVA de uma via (post hoc de Tukey) foi usada para comparar os grupos. A rubiadina (0,5 mg / kg, i.p.) induziu uma redução significativa no nível de TNF α e no edema da pata em comparação com o grupo de controle no teste de carragenina. Além disso, foi observado que a atividade anti-inflamatória da rubiadina (0,5 mg / kg, i.p.) é comparável ao ácido mefenâmico (30 mg/kg, i.p.) como o fármaco padrão. A rubiadina foi eficaz no granuloma induzido por pellet de algodão no que diz respeito à quantidade de granuloma e formação de transudato. Os efeitos anti-inflamatórios da rubiadina foram associados a uma redução significativa de IL-1β nesse modelo. Os resultados sugerem que a rubiadina como um composto natural pode ter impactos anti-inflamatórios periféricos significativos.(AU)

Inflammation reduction potential of nanostructured lipid carriers encapsulated with rat's bone marrow cells' lysate / Potencial de redução da inflamação de carreadores lipídicos nanoestruturados encapsulados com lisado de células de medula óssea de ratos

Bone marrow-derived mesenchymal stromal cells (BMSCs) have been used for treating inflammatory disorders. Due to the large size of BMSCs compared to nanoparticles, BMSCs cannot be loaded into the nanoparticles. It is hypothesized that BMSCs lysate loading into the nanocarriers will effectively deliver cellular contents and regulatory elements of BMSCs at the injury site. This study aimed to investigate nanostructured lipid carriers (NLC) loading with BMSCs lysate through basic characterization and morphological analysis. Moreover, this study was mainly designed to investigate the role of NLC loaded BMSCs lysate in reducing inflammation via in-vitro and in-vivoassays. The in-vitro study involves cell viability assays, p53, annexin V and VEGF expression through ELISA and immunocytochemistry, real-time BAX, caspase-3, IL-6, IL-8, TOP2A, PCNA, and Ki-67 gene expression analysis. Additionally, to evaluate in-vivo anti-inflammatory activity, the carrageenan-induced rat paw oedema model was used. In-vitro results showed that NLC loaded BMSCs lysate increased cell viability, decreased apoptosis and pro-inflammatory genes expression and up-regulated angiogenesis and proliferation in H2O2 pre-stimulated cells. Findings of the in-vivo assay also indicated a reduction in rat's paw oedema volume in NLC-loaded BMSCs lysate, and downregulation of BAX, Caspase-3, IL-6, and IL-8 was observed. Enhanced expressions of TOP2A, PCNA, and Ki-67 were obtained. Concluding the results of this study, NLC-loaded BMSCs lysate could reduce inflammation and possibly regenerate damaged tissue mainly via increasing cell viability, angiogenesis and proliferation, and reducing apoptosis and pro-inflammatory cytokines.

Células estromais mesenquimais derivadas da medula óssea (BMSCs) têm sido utilizadas para o tratamento de distúrbios inflamatórios. Devido ao grande tamanho das BMSCs em comparação com as nanopartículas, as BMSCs não podem ser carregadas nas nanopartículas. Supõe-se que o carregamento de lisado de BMSCs no nanocarriers será eficaz na entrega de conteúdos celulares e elementos reguladores de BMSCs no local da lesão. Este estudo teve como objetivo investigar a carga de carreador lipídico nanoestruturado (NLC) com lisado de BMSCs através de caracterização básica e análise morfológica. Além disso, este trabalho foi projetado, principalmente, para investigar o papel do lisado de BMSCs carregado com NLC na redução da inflamação por meio de ensaios anti-inflamatórios in vitro e in vivo. O estudo in vitro envolve ensaios de viabilidade celular, expressão de p53, anexina V e VEGF por ELISA e imunocitoquímica e expressão gênica em tempo real de BAX, caspase-3, IL-6, IL-8, TOP2A, PCNA e Ki-67 . Além disso, para avaliar a atividade anti-inflamatória in vivo,o modelo de edema de pata de rato induzido por carragenina foi utilizado. Os resultados in vitro mostraram que o lisado de BMSCs carregadas com NLC aumentou a viabilidade celular, diminuiu a apoptose e a expressão de genes pró-inflamatórios e aumentou a angiogênese e proliferação em células pré-estimuladas com H2O2. Os achados do ensaio in vivo também indicaram uma redução no volume do edema da pata de rato no lisado de BMSCs carregado com NLC, entretando, foi observada a regulação negativa de BAX, Caspase-3, IL-6 e IL-8. Expressões aumentadas de TOP2A, PCNA e Ki-67 foram obtidas. Assim, concluindo os resultados do estudo, é possível afirmar que o lisado de BMSCs carregado com NLC pode reduzir a inflamação e possivelmente regenerar o tecido danificado principalmente por meio do aumento da viabilidade celular, angiogênese e proliferação e redução da apoptose e citocinas pró-inflamatórias.

Antinociceptive and anti-inflammatory activities of Hymenaea martiana Hayne (Fabaceae) in mice

Abstract Hymenaea martiana is a species popularly known in Northeastern Brazil as jatobá and used in folk medicine to treat pain and inflammation. The aim of this work was to evaluate the antinociceptive and anti-inflammatory activity of H. martiana. In the present study, we carried out an investigation about the effects of the crude ethanolic extract (Hm-EtOH) and the ethyl acetate fraction (Hm-AcOEt) in models of nociception and inflammation in mice. Chemical (acetic acid-induced writhing and formalin) and thermal stimuli (hot plate) were used for the evaluation of antinociceptive activity, while for the anti-inflammatory profile paw edema induced by carrageenan was used, along with leukocyte migration to the peritoneal cavity. The presence of the flavonoid astilbin in the samples was characterized through HPLC-DAD-MS analysis. Hm-EtOH and Hm-AcOEt (100, 200 and 400 mg.kg-1, i.p.) significantly reduced the number of abdominal contortions and decreased the paw licking time in the formalin test. In the hot plate, the extract increased the latency time of animals. Hm-EtOH and Hm-AcOEt inhibited significantly the increase in the edema after the administration of carrageenan. Hm-EtOH and Hm-AcOEt inhibited leukocyte migration in the peritonitis test. HPLC-DAD-MS analysis of Hm-EtOH and Hm-AcOEt revealed the presence of the flavonoid astilbin in the samples. According to the results of this study, both Hm-EtOH and Hm-AcOEt have antinociceptive and anti-inflammatory activities, which could be related with the presence of flavonoid in the extracts. The results reinforce the popular use of this plant.

Resumo Hymenaea martiana é uma espécie popularmente conhecida no Nordeste do Brasil como jatobá e usada na medicina popular para tratar a dor e a inflamação. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antinociceptiva e anti-inflamatória de H. martiana. No presente estudo, foram avaliados os efeitos do extrato etanólico bruto (Hm-EtOH) e da fração acetato de etila (Hm-AcOEt) em modelos de nocicepção e inflamação em camundongos. Foram utilizados estímulos químicos (contorções abdominais induzidas por ácido acético e teste da formalina) e estímulo térmico (teste da placa quente) para avaliação da atividade antinociceptiva, enquanto no perfil anti-inflamatório foi utilizado o teste do edema de pata induzido por carragenina e migração de leucócitos para a cavidade peritoneal. A presença do flavonoide astilbina nas amostras foi caracterizada através de análise por CLAE-DAD-EM. Hm-EtOH e o Hm-AcOEt (100, 200 e 400 mg.kg-1, i.p.) reduziram significativamente o número de contorções abdominais e diminuíram o tempo de lambida da pata no teste da formalina. No teste da placa quente, houve aumento do tempo de latência dos animais. Hm-EtOH e Hm-AcOEt inibiram significativamente o aumento do edema após a administração de carragenina, bem como inibiram a migração de leucócitos no teste de peritonite. A análise por CLAE-DAD-EM de Hm-EtOH e Hm-AcOEt revelou a presença do flavonoide astilbina nas amostras. De acordo com os resultados deste estudo, tanto Hm-EtOH quanto o Hm-AcOEt possuem atividades antinociceptiva e anti-inflamatória, o que pode estar relacionado à presença do flavonoide. Os resultados reforçam o uso popular desta planta.

Antinociceptive and anti-inflammatory activities of Hymenaea martiana Hayne (Fabaceae) in mice / Atividade antinociceptiva e anti-inflamatória de Hymenaea martiana Hayne (Fabaceae) em camundongos

Hymenaea martiana is a species popularly known in Northeastern Brazil as "jatobá" and used in folk medicine to treat pain and inflammation. The aim of this work was to evaluate the antinociceptive and anti-inflammatory activity of H. martiana. In the present study, we carried out an investigation about the effects of the crude ethanolic extract (Hm-EtOH) and the ethyl acetate fraction (Hm-AcOEt) in models of nociception and inflammation in mice. Chemical (acetic acid-induced writhing and formalin) and thermal stimuli (hot plate) were used for the evaluation of antinociceptive activity, while for the anti-inflammatory profile paw edema induced by carrageenan was used, along with leukocyte migration to the peritoneal cavity. The presence of the flavonoid astilbin in the samples was characterized through HPLC-DAD-MS analysis. Hm-EtOH and Hm-AcOEt (100, 200 and 400 mg.kg-1, i.p.) significantly reduced the number of abdominal contortions and decreased the paw licking time in the formalin test. In the hot plate, the extract increased the latency time of animals. Hm-EtOH and Hm-AcOEt inhibited significantly the increase in the edema after the administration of carrageenan. Hm-EtOH and Hm-AcOEt inhibited leukocyte migration in the peritonitis test. HPLC-DAD-MS analysis of Hm-EtOH and Hm-AcOEt revealed the presence of the flavonoid astilbin in the samples. According to the results of this study, both Hm-EtOH and Hm-AcOEt have antinociceptive and anti-inflammatory activities, which could be related with the presence of flavonoid in the extracts. The results reinforce the popular use of this plant.

Hymenaea martiana é uma espécie popularmente conhecida no Nordeste do Brasil como "jatobá" e usada na medicina popular para tratar a dor e a inflamação. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antinociceptiva e antiinflamatória de H. martiana. No presente estudo, foram avaliados os efeitos do extrato etanólico bruto (Hm-EtOH) e da fração acetato de etila (Hm-AcOEt) em modelos de nocicepção e inflamação em camundongos. Foram utilizados estímulos químicos (contorções abdominais induzidas por ácido acético e teste da formalina) e estímulo térmico (teste da placa quente) para avaliação da atividade antinociceptiva, enquanto no perfil anti-inflamatório foi utilizado o teste do edema de pata induzido por carragenina e migração de leucócitos para a cavidade peritoneal. A presença do flavonoide astilbina nas amostras foi caracterizada através de análise por CLAE-DAD-EM. Hm-EtOH e o Hm-AcOEt (100, 200 e 400 mg.kg-1, i.p.) reduziram significativamente o número de contorções abdominais e diminuíram o tempo de lambida da pata no teste da formalina. No teste da placa quente, houve aumento do tempo de latência dos animais. Hm-EtOH e Hm-AcOEt inibiram significativamente o aumento do edema após a administração de carragenina, bem como inibiram a migração de leucócitos no teste de peritonite. A análise por CLAE-DAD-EM de Hm-EtOH e Hm-AcOEt revelou a presença do flavonoide astilbina nas amostras. De acordo com os resultados deste estudo, tanto Hm-EtOH quanto o Hm-AcOEt possuem atividades antinociceptiva e anti-inflamatória, o que pode estar relacionado à presença do flavonoide. Os resultados reforçam o uso popular desta planta.

Caryocar villosum attenuates inflammation by inhibiting CXCL1 activation and peripheral hyperalgesia through opioid pathway modulation / Caryocar villosum atenua a inflamação ao inibir a ativação de CXCL1 e a hiperalgesia periférica por meio da modulação da via opioide

The oil of Caryocar villosum is used in Amazonian folk medicine to treat pain and inflammatory conditions. So, we assessed the anti-inflammatory and antinociceptive properties of the ethanolic extract obtained from the fruit peels of this species. The acetic acid-induced writhing, carrageenan-induced mechanical hyperalgesia, formalin, carrageenan-induced paw edema and carrageenan-induced peritonitis tests were used on mice. The C. villosum ethanolic extract significantly inhibited the number of abdominal writhes, mechanical hyperalgesia and paw licking time in the second phase of the formalin test. At a dose of 300 mg kg-1, the extract also significantly reduced the volume of edema formed in the late phase and reduced the recruitment of leukocytes and neutrophils in the peritoneal cavity, as well as CXCL1 chemokine levels. It is suggested that the extract attenuates the leukocyte recruitment by inhibiting the CXCL1 activation. The peripheral antinociceptive activity occured through opioid pathway modulation because pretreatment with C. villosum ethanolic extract reversed the naltrexone-induced antinociception.(AU)

O óleo de Caryocar villosum é usado na medicina popular amazônica para tratar dores e condições inflamatórias. Assim, avaliamos as propriedades antiinflamatórias e antinociceptivas do extrato etanólico obtido das cascas dos frutos desta espécie. Os testes de contorções induzidas por ácido acético, hiperalgesia mecânica induzida por carragenina, formalina, edema de pata induzido por carragenina e peritonite induzida por carragenina foram usados em camundongos. O extrato etanólico de C. villosum obtido das cascas dos frutos inibiu significativamente o número de contorções abdominais, a hiperalgesia mecânica e o tempo de lambida da pata na segunda fase do teste de formalina. Na dose de 300 mg kg-1, o extrato também reduziu significativamente o volume de edema formado na fase tardia e reduziu o recrutamento de leucócitos e neutrófilos na cavidade peritoneal, bem como os níveis de quimiocina CXCL1. Sugere-se que o extrato atenua o recrutamento de leucócitos por meio da inibição da ativação de CXCL1. A atividade antinociceptiva periférica ocorre por meio da modulação da via opioide pois o pré-tratamento com o extrato etanólico de C. villosum reverteu a antinocicepção induzida pela naltrexona.(AU)

Antinociceptive and anti-inflammatory activities of Hymenaea martiana Hayne (Fabaceae) in mice / Atividade antinociceptiva e anti inflamatória de Hymenaea martiana Hayne (Fabaceae) em camundongos

Hymenaea martiana is a species popularly known in Northeastern Brazil as "jatobá" and used in folk medicine to treat pain and inflammation. The aim of this work was to evaluate the antinociceptive and anti-inflammatory activity of H. martiana. In the present study, we carried out an investigation about the effects of the crude ethanolic extract (Hm-EtOH) and the ethyl acetate fraction (Hm-AcOEt) in models of nociception and inflammation in mice. Chemical (acetic acid-induced writhing and formalin) and thermal stimuli (hot plate) were used for the evaluation of antinociceptive activity, while for the anti-inflammatory profile paw edema induced by carrageenan was used, along with leukocyte migration to the peritoneal cavity. The presence of the flavonoid astilbin in the samples was characterized through HPLC-DAD-MS analysis. Hm-EtOH and Hm-AcOEt (100, 200 and 400 mg.kg-¹, i.p.) significantly reduced the number of abdominal contortions and decreased the paw licking time in the formalin test. In the hot plate, the extract increased the latency time of animals. Hm-EtOH and Hm-AcOEt inhibited significantly the increase in the edema after the administration of carrageenan. Hm-EtOH and Hm-AcOEt inhibited leukocyte migration in the peritonitis test. HPLC-DAD-MS analysis of Hm-EtOH and Hm-AcOEt revealed the presence of the flavonoid astilbin in the samples. According to the results of this study, both Hm-EtOH and Hm-AcOEt have antinociceptive and anti-inflammatory activities, which could be related with the presence of flavonoid in the extracts. The results reinforce the popular use of this plant.

Hymenaea martiana é uma espécie popularmente conhecida no Nordeste do Brasil como “jatobᔠe usada na medicina popular para tratar a dor e a inflamação. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antinociceptiva e anti inflamatória de H. martiana. No presente estudo, foram avaliados os efeitos do extrato etanólico bruto (Hm-EtOH) e da fração acetato de etila (Hm-AcOEt) em modelos de nocicepção e inflamação em camundongos. Foram utilizados estímulos químicos (contorções abdominais induzidas por ácido acético e teste da formalina) e estímulo térmico (teste da placa quente) para avaliação da atividade antinociceptiva, enquanto no perfil anti-inflamatório foi utilizado o teste do edema de pata induzido por carragenina e migração de leucócitos para a cavidade peritoneal. A presença do flavonoide astilbina nas amostras foi caracterizada através de análise por CLAE-DAD-EM. Hm-EtOH e o Hm-AcOEt (100, 200 e 400 mg.kg-¹, i.p.) reduziram significativamente o número de contorções abdominais e diminuíram o tempo de lambida da pata no teste da formalina. No teste da placa quente, houve aumento do tempo de latência dos animais. Hm-EtOH e Hm-AcOEt inibiram significativamente o aumento do edema após a administração de carragenina, bem como inibiram a migração de leucócitos no teste de peritonite. A análise por CLAE-DAD-EM de Hm-EtOH e Hm-AcOEt revelou a presença do flavonoide astilbina nas amostras. De acordo com os resultados deste estudo, tanto Hm-EtOH quanto o Hm-AcOEt possuem atividades antinociceptiva e anti-inflamatória, o que pode estar relacionado à presença do flavonoide. Os resultados reforçam o uso popular desta planta.

Antinociceptive and anti-inflammatory activities of Hymenaea martiana Hayne (Fabaceae) in mice / Atividade antinociceptiva e anti inflamatória de Hymenaea martiana Hayne (Fabaceae) em camundongos

Hymenaea martiana is a species popularly known in Northeastern Brazil as "jatobá" and used in folk medicine to treat pain and inflammation. The aim of this work was to evaluate the antinociceptive and anti-inflammatory activity of H. martiana. In the present study, we carried out an investigation about the effects of the crude ethanolic extract (Hm-EtOH) and the ethyl acetate fraction (Hm-AcOEt) in models of nociception and inflammation in mice. Chemical (acetic acid-induced writhing and formalin) and thermal stimuli (hot plate) were used for the evaluation of antinociceptive activity, while for the anti-inflammatory profile paw edema induced by carrageenan was used, along with leukocyte migration to the peritoneal cavity. The presence of the flavonoid astilbin in the samples was characterized through HPLC-DAD-MS analysis. Hm-EtOH and Hm-AcOEt (100, 200 and 400 mg.kg-¹, i.p.) significantly reduced the number of abdominal contortions and decreased the paw licking time in the formalin test. In the hot plate, the extract increased the latency time of animals. Hm-EtOH and Hm-AcOEt inhibited significantly the increase in the edema after the administration of carrageenan. Hm-EtOH and Hm-AcOEt inhibited leukocyte migration in the peritonitis test. HPLC-DAD-MS analysis of Hm-EtOH and Hm-AcOEt revealed the presence of the flavonoid astilbin in the samples. According to the results of this study, both Hm-EtOH and Hm-AcOEt have antinociceptive and anti-inflammatory activities, which could be related with the presence of flavonoid in the extracts. The results reinforce the popular use of this plant.(AU)

Hymenaea martiana é uma espécie popularmente conhecida no Nordeste do Brasil como “jatobᔠe usada na medicina popular para tratar a dor e a inflamação. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antinociceptiva e anti inflamatória de H. martiana. No presente estudo, foram avaliados os efeitos do extrato etanólico bruto (Hm-EtOH) e da fração acetato de etila (Hm-AcOEt) em modelos de nocicepção e inflamação em camundongos. Foram utilizados estímulos químicos (contorções abdominais induzidas por ácido acético e teste da formalina) e estímulo térmico (teste da placa quente) para avaliação da atividade antinociceptiva, enquanto no perfil anti-inflamatório foi utilizado o teste do edema de pata induzido por carragenina e migração de leucócitos para a cavidade peritoneal. A presença do flavonoide astilbina nas amostras foi caracterizada através de análise por CLAE-DAD-EM. Hm-EtOH e o Hm-AcOEt (100, 200 e 400 mg.kg-¹, i.p.) reduziram significativamente o número de contorções abdominais e diminuíram o tempo de lambida da pata no teste da formalina. No teste da placa quente, houve aumento do tempo de latência dos animais. Hm-EtOH e Hm-AcOEt inibiram significativamente o aumento do edema após a administração de carragenina, bem como inibiram a migração de leucócitos no teste de peritonite. A análise por CLAE-DAD-EM de Hm-EtOH e Hm-AcOEt revelou a presença do flavonoide astilbina nas amostras. De acordo com os resultados deste estudo, tanto Hm-EtOH quanto o Hm-AcOEt possuem atividades antinociceptiva e anti-inflamatória, o que pode estar relacionado à presença do flavonoide. Os resultados reforçam o uso popular desta planta.(AU)

Fractions of Selaginella convoluta (Arn) Spring (Selaginellaceae) attenuate the nociceptive behavior events in mice / Frações de Selaginella convoluta (Ar) Spring (Selaginellaceae) atenuam a resposta nociceptiva em camundongos

Selaginella convoluta (Arn.) Spring is a species popularly known as "jericó", and used in folk medicine as analgesic and anti-inflammatory. This study aimed to investigate in mice the antinociceptive and anti-inflammatory activities of the hexane (Sc-Hex) and chloroform (Sc-CHCl3) fractions (100, 200 and 400 mg/kg) obtained by partition of crude ethanol extract from S. convoluta. The preliminary phytochemical analysis of the fractions was performed. Antinociceptive activity was evaluated by writhing, formalin and hot-plate tests. Anti-inflammatory activity was evaluated using carrageenan-induced pleurisy. The rota-rod test was used to evaluate motor coordination. Preliminary phytochemical screening showed that the Sc-Hex and the Sc-CHCl3 were positive for the presence of flavonoids, anthracene derivatives, quinones, triterpenes and steroids. Inhibition of writhing was observed for fractions tested. The Sc-Hex at all doses tested was effective in reducing the nociceptive behavior produced by formalin only in the second phase. However, the Sc-CHCl3 decreased the paw licking time in the first and second phases. In the hot plate no significant effect was observed for any fraction. In the rota-rod test, treated mice did not demonstrate any significant motor performance changes. In the carrageenan-induced pleurisy, Sc-CHCl3 (200 mg/kg) reduced cell migration to the pleural cavity. These results reveal the antinociceptive properties of S. convoluta , which support, in part, its traditional use, since the fractions did not presented significant activity in the inflammatory response profile. We further verify that this antinociceptive effect could be by activation of nociceptive peripheral pathway.(AU)

Selaginella convoluta é uma espécie popularmente conhecida como "jericó", e usada na medicina popular como analgésica e anti-inflamatória. Este estudo teve como objetivo investigar em camundongos as atividades antinociceptiva e anti-inflamatória das frações hexânica (Sc-Hex) e clorofórmica (Sc-CHCl3) (100, 200 e 400 mg/kg) obtidas por partição do extrato etanólico bruto de S. convoluta . A análise fitoquímica preliminar das frações foi realizada. A atividade antinociceptiva foi avaliada pelos testes de contorções abdominais, formalina e placa quente. A atividade anti-inflamatória foi avaliada usando pleurisia induzida por carragenina. O teste do rota-rod foi utilizado para avaliar a coordenação motora. A triagem fitoquímica preliminar mostrou que Sc-Hex e Sc-CHCl3 apresentaram reação positiva para a presença de flavonoides, derivados antracênicos, quinonas, triterpenos e esteroides. A inibição das contorções foi observada para as frações testadas. Sc-Hex em todas as doses testadas foi efetivo na redução do comportamento nociceptivo produzido pela formalina somente na segunda fase. No entanto, Sc-CHCl3 diminuiu o tempo de lambida da pata na primeira e segunda fases. Na placa quente, nenhum efeito significativo foi observado para qualquer fração. No teste do rota-rod os camundongos tratados não demonstraram mudanças significativas na coordenação motora. Na pleurisia induzida por carragenina, Sc-CHCl3 (200 mg/kg) reduziu a migração celular para a cavidade pleural. Estes resultados revelam a propriedade antinociceptiva de S. convoluta, justificando, em parte, seu uso tradicional, uma vez que os extratos não apresentaram atividade significativa no perfil de resposta inflamatória. Verificamos ainda que esse efeito antinociceptivo mostrou-se ligado à ativação da via periférica nociceptiva.(AU)

Fractions of Selaginella convoluta (Arn.) Spring (Selaginellaceae) attenuate the nociceptive behavior events in mice

Abstract Selaginella convoluta (Arn.) Spring is a species popularly known as jericó, and used in folk medicine as analgesic and anti-inflammatory. This study aimed to investigate in mice the antinociceptive and anti-inflammatory activities of the hexane (Sc-Hex) and chloroform (Sc-CHCl3) fractions (100, 200 and 400 mg/kg) obtained by partition of crude ethanol extract from S. convoluta. The preliminary phytochemical analysis of the fractions was performed. Antinociceptive activity was evaluated by writhing, formalin and hot-plate tests. Anti-inflammatory activity was evaluated using carrageenan-induced pleurisy. The rota-rod test was used to evaluate motor coordination. Preliminary phytochemical screening showed that the Sc-Hex and the Sc-CHCl3 were positive for the presence of flavonoids, anthracene derivatives, quinones, triterpenes and steroids. Inhibition of writhing was observed for fractions tested. The Sc-Hex at all doses tested was effective in reducing the nociceptive behavior produced by formalin only in the second phase. However, the Sc-CHCl3 decreased the paw licking time in the first and second phases. In the hot plate no significant effect was observed for any fraction. In the rota-rod test, treated mice did not demonstrate any significant motor performance changes. In the carrageenan-induced pleurisy, Sc-CHCl3 (200 mg/kg) reduced cell migration to the pleural cavity. These results reveal the antinociceptive properties of S. convoluta , which support, in part, its traditional use, since the fractions did not presented significant activity in the inflammatory response profile. We further verify that this antinociceptive effect could be by activation of nociceptive peripheral pathway.

Resumo Selaginella convoluta é uma espécie popularmente conhecida como jericó, e usada na medicina popular como analgésica e anti-inflamatória. Este estudo teve como objetivo investigar em camundongos as atividades antinociceptiva e anti-inflamatória das frações hexânica (Sc-Hex) e clorofórmica (Sc-CHCl3) (100, 200 e 400 mg/kg) obtidas por partição do extrato etanólico bruto de S. convoluta . A análise fitoquímica preliminar das frações foi realizada. A atividade antinociceptiva foi avaliada pelos testes de contorções abdominais, formalina e placa quente. A atividade anti-inflamatória foi avaliada usando pleurisia induzida por carragenina. O teste do rota-rod foi utilizado para avaliar a coordenação motora. A triagem fitoquímica preliminar mostrou que Sc-Hex e Sc-CHCl3 apresentaram reação positiva para a presença de flavonoides, derivados antracênicos, quinonas, triterpenos e esteroides. A inibição das contorções foi observada para as frações testadas. Sc-Hex em todas as doses testadas foi efetivo na redução do comportamento nociceptivo produzido pela formalina somente na segunda fase. No entanto, Sc-CHCl3 diminuiu o tempo de lambida da pata na primeira e segunda fases. Na placa quente, nenhum efeito significativo foi observado para qualquer fração. No teste do rota-rod os camundongos tratados não demonstraram mudanças significativas na coordenação motora. Na pleurisia induzida por carragenina, Sc-CHCl3 (200 mg/kg) reduziu a migração celular para a cavidade pleural. Estes resultados revelam a propriedade antinociceptiva de S. convoluta, justificando, em parte, seu uso tradicional, uma vez que os extratos não apresentaram atividade significativa no perfil de resposta inflamatória. Verificamos ainda que esse efeito antinociceptivo mostrou-se ligado à ativação da via periférica nociceptiva.

Induced aerocystitis and hemato-immunological parameters in Nile tilapia fed supplemented diet with essential oil of Lippia alba / Aerocistite induzida e parâmetros hemato-imunológicos em tilápia do Nilo suplementada com óleo essencial de Lippia alba

The present study evaluated the dietary supplementation with essential oil of Lippia alba on the hemato-immunological parameters of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) submitted to acute inflammation induced by carrageenin injection in the swim bladder. For a period of 45 days, 96 fish were divided in four treatments in triplicate, as follows: fish fed supplemented diet with essential oil of L. alba (4 mL kg-1 dry ration) injected with carrageenin; fish fed supplemented diet with cereal alcohol injected with carrageenin; fish fed unsupplemented diet with essential oil injected with carrageenin; fish fed unsupplemented diet and noninjected. Cortisol levels, erythrogram, leukogram and the inflammatory infiltrate were analyzed 6 h after inflammatory stimulus. Carrageenin-injected fish showed acute inflammatory reaction in the swim bladder characterized by higher infiltrate of neutrophils and monocytes. The circulating neutrophils number was significantly higher in fish fed L. alba when compared to other treatments. No difference in cortisol levels was found. For dose, time and administration form tested, supplementation with essential oil of L. alba did not present anti-inflammatory activity. On the other hand, influence of dietary supplementation was observed on the neutrophils number after induced aerocystitis highlighting its immunomodulatory characteristic.(AU)

O presente estudo avaliou a suplementação dietária com óleo essencial de Lippia alba sobre os parâmetros hemato-imunológicos em tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) submetidas à inflamação aguda induzida por carragenina na bexiga natatória. Pelo período de 45 dias, 96 peixes foram divididos em quarto tratamentos em triplicata: a) peixes suplementados com óleo esencial de L. alba (4 mL kg-1 de ração) injetados com carragenina; b) peixes suplementados com álcool de cereais injetados com carragenina; peixes não suplementados com óleo essencial injetados com carragenina; c) peixes não suplementados não injetados. Os níveis de cortisol, eritrograma, leucograma e o infiltrado inflamatório foram analisados seis horas após o estímulo inflamatório. Peixes injetados com carragenina apresentaram reação inflamatória aguda na bexiga natatória caracterizada por maior infiltrado de neutrófilos e monócitos. O número de neutrófilos circulantes foi significativamente maior nos peixes suplementados com L. alba quando comparado aos outros tratamentos. Não houve diferença nos níveis de cortisol. Para a dose, o tempo e a forma de administração testada, a suplementação com óleo essencil de L. alba não apresentou atividade anti-inflamatória. Por outro lado, foi constatada influência da suplementação dietária no número de neutrófilos após a aerocistite enfatizando a sua característica imunomoduladora.(AU)

Induced aerocystitis and hemato-immunological parameters in Nile tilapia fed supplemented diet with essential oil of Lippia alba / Aerocistite induzida e parâmetros hemato-imunológicos em tilápia do Nilo suplementada com óleo essencial de Lippia alba

The present study evaluated the dietary supplementation with essential oil of Lippia alba on the hemato-immunological parameters of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) submitted to acute inflammation induced by carrageenin injection in the swim bladder. For a period of 45 days, 96 fish were divided in four treatments in triplicate, as follows: fish fed supplemented diet with essential oil of L. alba (4 mL kg-1 dry ration) injected with carrageenin; fish fed supplemented diet with cereal alcohol injected with carrageenin; fish fed unsupplemented diet with essential oil injected with carrageenin; fish fed unsupplemented diet and noninjected. Cortisol levels, erythrogram, leukogram and the inflammatory infiltrate were analyzed 6 h after inflammatory stimulus. Carrageenin-injected fish showed acute inflammatory reaction in the swim bladder characterized by higher infiltrate of neutrophils and monocytes. The circulating neutrophils number was significantly higher in fish fed L. alba when compared to other treatments. No difference in cortisol levels was found. For dose, time and administration form tested, supplementation with essential oil of L. alba did not present anti-inflammatory activity. On the other hand, influence of dietary supplementation was observed on the neutrophils number after induced aerocystitis highlighting its immunomodulatory characteristic.(AU)

O presente estudo avaliou a suplementação dietária com óleo essencial de Lippia alba sobre os parâmetros hemato-imunológicos em tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) submetidas à inflamação aguda induzida por carragenina na bexiga natatória. Pelo período de 45 dias, 96 peixes foram divididos em quarto tratamentos em triplicata: a) peixes suplementados com óleo esencial de L. alba (4 mL kg-1 de ração) injetados com carragenina; b) peixes suplementados com álcool de cereais injetados com carragenina; peixes não suplementados com óleo essencial injetados com carragenina; c) peixes não suplementados não injetados. Os níveis de cortisol, eritrograma, leucograma e o infiltrado inflamatório foram analisados seis horas após o estímulo inflamatório. Peixes injetados com carragenina apresentaram reação inflamatória aguda na bexiga natatória caracterizada por maior infiltrado de neutrófilos e monócitos. O número de neutrófilos circulantes foi significativamente maior nos peixes suplementados com L. alba quando comparado aos outros tratamentos. Não houve diferença nos níveis de cortisol. Para a dose, o tempo e a forma de administração testada, a suplementação com óleo essencil de L. alba não apresentou atividade anti-inflamatória. Por outro lado, foi constatada influência da suplementação dietária no número de neutrófilos após a aerocistite enfatizando a sua característica imunomoduladora.(AU)

Fractions of Selaginella convoluta (Arn.) Spring (Selaginellaceae) attenuate the nociceptive behavior events in mice

Abstract Selaginella convoluta (Arn.) Spring is a species popularly known as jericó, and used in folk medicine as analgesic and anti-inflammatory. This study aimed to investigate in mice the antinociceptive and anti-inflammatory activities of the hexane (Sc-Hex) and chloroform (Sc-CHCl3) fractions (100, 200 and 400 mg/kg) obtained by partition of crude ethanol extract from S. convoluta. The preliminary phytochemical analysis of the fractions was performed. Antinociceptive activity was evaluated by writhing, formalin and hot-plate tests. Anti-inflammatory activity was evaluated using carrageenan-induced pleurisy. The rota-rod test was used to evaluate motor coordination. Preliminary phytochemical screening showed that the Sc-Hex and the Sc-CHCl3 were positive for the presence of flavonoids, anthracene derivatives, quinones, triterpenes and steroids. Inhibition of writhing was observed for fractions tested. The Sc-Hex at all doses tested was effective in reducing the nociceptive behavior produced by formalin only in the second phase. However, the Sc-CHCl3 decreased the paw licking time in the first and second phases. In the hot plate no significant effect was observed for any fraction. In the rota-rod test, treated mice did not demonstrate any significant motor performance changes. In the carrageenan-induced pleurisy, Sc-CHCl3 (200 mg/kg) reduced cell migration to the pleural cavity. These results reveal the antinociceptive properties of S. convoluta , which support, in part, its traditional use, since the fractions did not presented significant activity in the inflammatory response profile. We further verify that this antinociceptive effect could be by activation of nociceptive peripheral pathway.

Resumo Selaginella convoluta é uma espécie popularmente conhecida como jericó, e usada na medicina popular como analgésica e anti-inflamatória. Este estudo teve como objetivo investigar em camundongos as atividades antinociceptiva e anti-inflamatória das frações hexânica (Sc-Hex) e clorofórmica (Sc-CHCl3) (100, 200 e 400 mg/kg) obtidas por partição do extrato etanólico bruto de S. convoluta . A análise fitoquímica preliminar das frações foi realizada. A atividade antinociceptiva foi avaliada pelos testes de contorções abdominais, formalina e placa quente. A atividade anti-inflamatória foi avaliada usando pleurisia induzida por carragenina. O teste do rota-rod foi utilizado para avaliar a coordenação motora. A triagem fitoquímica preliminar mostrou que Sc-Hex e Sc-CHCl3 apresentaram reação positiva para a presença de flavonoides, derivados antracênicos, quinonas, triterpenos e esteroides. A inibição das contorções foi observada para as frações testadas. Sc-Hex em todas as doses testadas foi efetivo na redução do comportamento nociceptivo produzido pela formalina somente na segunda fase. No entanto, Sc-CHCl3 diminuiu o tempo de lambida da pata na primeira e segunda fases. Na placa quente, nenhum efeito significativo foi observado para qualquer fração. No teste do rota-rod os camundongos tratados não demonstraram mudanças significativas na coordenação motora. Na pleurisia induzida por carragenina, Sc-CHCl3 (200 mg/kg) reduziu a migração celular para a cavidade pleural. Estes resultados revelam a propriedade antinociceptiva de S. convoluta, justificando, em parte, seu uso tradicional, uma vez que os extratos não apresentaram atividade significativa no perfil de resposta inflamatória. Verificamos ainda que esse efeito antinociceptivo mostrou-se ligado à ativação da via periférica nociceptiva.

Acute inflammation and hematological response in Nile tilapia fed supplemented diet with natural extracts of propolis and Aloe barbadensis / Inflamação aguda e resposta hematológica em tilápias do Nilo alimentadas com extratos naturais de própolis e Aloe barbadensis suplementados na dieta

This study evaluated the acute inflammatory response induced by carrageenin in the swim bladder of Nile tilapia supplemented with the mixture of natural extracts of propolis and Aloe barbadensis (1:1) at a concentration of 0.5%, 1% and 2% in diet during 15 days. Thirty-six fish were distributed into four treatments with three replicates: fish supplemented with 0.5% of admix of extracts of propolis and Aloe (1:1) injected with 500 µg carrageenin; fish supplemented with 1% of admix of extracts of propolis and Aloe (1:1) injected with 500 µg carrageenin; fish supplemented with 2% of admix of extracts of propolis and Aloe (1:1), injected with 500 µg carrageenin and unsupplemented fish injected with 500 µg carrageenin. Six hours after injection, samples of blood and exudate from the swim bladder of fish were collected. It was observed an increase in the leukocyte count in the swim bladder exudate of fish supplemented with extracts of propolis and Aloe injected with carrageenin. The most frequent cells were macrophages followed by granular leukocytes, thrombocytes and lymphocytes. Supplementation with propolis and Aloe to 0.5% caused a significant increase in the number of cells on the inflammatory focus mainly macrophages, cells responsible for the phagocytic activity in tissues, agent of innate fish immune response.(AU)

Este estudo avaliou a resposta inflamatória aguda induzida por carragenina na bexiga natatóriade tilápia do Nilo suplementada com a mistura dos extratos naturais de própolis e Aloe barbadensis (1:1), nas concentrações de 0,5%, 1% e 2% na dieta durante o período de 15 dias. Trinta e seis peixes foram distribuídos em quatro tratamentos com três repetições: peixes suplementados com 0,5% da mistura dos extratos de própolis e Aloe (1:1) injetados na bexiga natatória com 500 µg de carragenina; peixes suplementados com 1% da mistura dos extratos de própolis e Aloe (1:1) injetados na bexiga natatória com 500 µg de carragenina; peixes suplementados com 2% da mistura dos extratos de própolis e Aloe (1:1) injetados na bexiga natatória com 500 µg de carragenina e peixes não suplementados injetados na bexiga natatória com 500 µg de carragenina. Seis horas após as injeções foram coletadas amostras de sangue e exsudato da bexiga natatória dos peixes. Foi observado aumento na contagem de leucócitos no exsudato da bexiga natatória de peixes suplementados com os extratos de própolis e Aloe injetados com carragenina. As células mais frequentes foram os macrófagos seguidos pelos leucócitos granulares, trombócitos e linfócitos. A suplementação com própolis e Aloe a 0,5% provocou aumento significativo no número de células no foco inflamatório, principalmente dos macrófagos, células responsáveis pela atividade fagocitária nos tecidos, agente da resposta imune inata nos peixes.(AU)

ATIVIDADE ANTIEDEMATOGÊNICA, ANTI-INFLAMATÓRIA, TOXICOLÓGICA E PERFIL MODULATÓRIO DA INDOMETACINA INCORPORADA A NANOPARTÍCULA SÍLICA MESOPOROSA

ALMEIDA-JUNIOR, Silvio. Atividade antiedematogênica, anti-inflamatória e toxicológica da indometacina incorporada a nanopartícula sílica mesoporosa. 2019. Dissertação (mestrado em Ciência Animal) Universidade de Franca Franca-SP. As nanopartículas de sílica mesoporosa tem se mostrado de fácil conjugação, sendo promissoras para a entrega de medicamentos em órgãos alvos e quando associadas a anti-inflamatórios tem a capacidade de potencializar seus efeitos. Frente a isso, nós avaliamos o efeito anti-inflamatório e toxicológico da indometacina incorporada a nanopartícula de sílica mesoporosa (IND+NP). Para tanto, o potencial anti-inflamatório foi avaliado pelos ensaios de migração celular induzida por carragenina, edema de pata induzido por carragenina, modulação de óxido nítrico, citocinas IL-6, IL-10 e TNF-, e a toxicidade em macrófagos peritoneais, ensaio de locomoção, danos gástricos, sangue oculto e dosagens de marcadores hepáticos e renais. IND+NP reduziu no processo inflamatório o número de células polimorfonucleares de 64 para 94% quando incorporada, no ensaio de migração celular, na dose de 10 mg/kg. A indometacina sozinha provocou danos gástricos macroscópicos, a presença de sangue oculto nas fezes e aumento dos níveis de ALT, por outro lado, a incorporação as nanopartículas eficientemente inibiu os danos gástricos e hepáticos causados pela indometacina. Ambos, indometacina e IND+NP não modularam a produção de IL-6 e TNF- induzida por LPS, não alteraram os níveis de AST, creatinina e ureia, e não apresentaram alterações histopatológicas em mucosa gástrica. Por outro lado, no ensaio de edema de pata a IND+NP reduziu 21% do edema frente a 35% da indometacina podendo ser relacionado a inibição do infiltrado observado apenas para indometacina, como também apenas indometacina modulou a produção de IL-10. Na avaliação dos níveis de óxido nítrico, indometacina eficientemente reduziu a produção estimulada por LPS, contudo não foi possível avaliar IND+NP nas mesmas concentrações devido a citotoxicidade em macrófagos peritoneais. Em suma, a incorporação de indometacina a nanopartículas de sílica mesoporosa eficientemente aumentou a atividade da indometacina observada nos de migração celular, como também inibiu os danos gástricos e hepáticos associados ao uso de indometacina.

ALMEIDA-JUNIOR, Silvio. Antiedematogenic, anti-inflammatory and toxicological activity of indomethacin incorporated into mesoporous silica nanoparticle. 2019. Dissertação (mestrado em Ciência Animal) Universidade de Franca Franca-SP. Mesoporous silica nanoparticles have been shown to be easy to conjugate, being promising for the delivery of drugs to target organs, and when associated with antiinflammatory drugs, they have the ability to potentiate their effects. In view of this, /we evaluated the anti-inflammatory and toxicological effects of indomethacin incorporated into the mesoporous silica nanoparticle (IND + NP). For this, the anti-inflammatory potential was evaluated by assays of carrageenan-induced cell migration, carrageenaninduced paw edema, nitric oxide modulation, IL-6, IL-10 and TNF- cytokines, and peritoneal macrophage toxicity, locomotion test, gastric damage, occult blood and measurements of hepatic and renal markers. IND + NP reduced the number of polymorphonuclear cells in the inflammatory process from 64 to 94% when incorporated in the cell migration assay at a dose of 10 mg / kg. On one hand indomethacin alone caused macroscopic gastric damage, the presence of occult blood in the stools and increased ALT levels. On the other hand, incorporating the nanoparticles efficiently inhibited the gastric and liver damage caused by indomethacin. Both, indomethacin and IND + NP did not modulate the production of IL-6 and TNF- induced by LPS, did not alter the levels of AST, creatinine and urea, and did not present histopathological alterations in gastric mucosa. On the other hand, in the paw edema assay, IND + NP reduced 21% of edema compared to 35% of indomethacin and may be related to the inhibition of the infiltrate observed only for indomethacin, as well as only indomethacin modulated the production of IL-10. In the assessment of nitric oxide levels, indomethacin efficiently reduced the production stimulated by LPS, however it was not possible to evaluate IND + NP at the same concentrations due to cytotoxicity in peritoneal macrophages. In short, the incorporation of indomethacin to mesoporous silica nanoparticles efficiently increased the activity of indomethacin seen in cell migration, as well as inhibiting gastric and liver damage associated with the use of indomethacin.

INVESTIGAÇÃO DO EFEITO INIBITÓRIO DO EXTRATO HIDROALCOÓLICO DA Cunila spicata Benth. SOBRE A MIGRAÇÃO CELULAR INDUZIDA POR AGENTES FLOGÍSTICOS NAS VIAS AÉREAS DE CAMUNDONGOS

A asma é uma doença respiratória, caracterizada por uma inflamação crônica das vias aéreas, destacando-se em diferentes regiões do Brasil. Fatores genéticos, poluição do meio ambiente, estilo de vida, tabagismo entre outros estão relacionados a esta patologia que desencadeia sintomas como sibilo, asfixia, tosse, levando a supressão de ar. O uso de plantas no tratamento de enfermidades é tão antigo quanto a espécie humana, que tem optado pelo uso de recursos vegetais. Dentre esses recursos está a planta Cunila spicata, (Lamiaceae), chamada de poejo-do-campo, é utilizada na medicina popular para afecções do sistema respiratório e digestório. Ainda que a espécie seja largamente utilizada na terapia alternativa para sintomas respiratórios e, devido ao grande potencial na biodiversidade que o nosso país possui, estudos mais detalhados tornam-se importantes na descoberta de novos fármacos, aprimoramento da terapêutica, bem como na garantia da segurança de quem utiliza. No presente trabalho foi analisada a composição fitoquímica da C. spicata e investigados os efeitos inibitórios do extrato hidroalcoólico da C. spicata (EHCS) sobre a migração de células inflamatórias nas vias aéreas de camundongos. A obtenção do EHCS foi realizada por extração assistida por ultrassom, concentrado em rotaevaporador e seco em estufa. A análise fitoquímica foi através de cromatografia gasosa com espectrometria de massa. Para os estudos in vivo, camundongos Balb-c (25 a 35 g) foram pré-tratados por gavagem com PBS (controle negativo, CN), prednisolona 4 mg/Kg (controle positivo) e diferentes doses (30, 100 e 300 mg/kg) do EHCS. Os animais foram submetidos à nebulização com agentes pró-inflamatórios das vias aéreas tais como carragenina, histamina, capsaicina, bradicinina e composto 48/80 e após 2 horas eutanasiados para a realização do lavado broncoalveolar, onde foi coletado o líquido que foi previamente introduzido nos pulmões submetidas a sedimentação em câmara de suta, para a leitura do número total de células em câmara de Neubauer e preparadas lâminas para contagem de células diferenciais, por microscopia. Foram identificados quatorze fitocompostos, sendo os principais, 2-Bornanone, mentofurano e canfeno no EHCS. Dentre os grupos de animais tratados com o EHCS, todos apresentaram inibição máxima (IM) significativas ao serem desafiados com agentes pró-inflamatórios por nebulização. Os que receberam carragenina, a IM foi de 72,77 ± 3,88% (300 mg/Kg), em relação ao CN. Houve predominância de linfócitos (59,18 ± 4,07%). Para o grupo histamina a IM foi de 64,03 ± 4,33% (300 mg/Kg), em relação ao CN, com predominância no número de macrófagos (76,53 ± 2,78%). No grupo submetido à capsaicina, a IM apresentada, foi de 38,90 ± 11,31% (300 mg/Kg), ocorrendo uma maior migração de macrófagos (80,98 ± 3,44%) na maior dose. Para os animais expostos à bradicinina a IM foi de 48,63 ± 3,95% (300 mg/Kg) com predominância de macrófagos (64,33 ± 10,04%). No grupo que recebeu composto 48/80 houve IM de 40,25 ± 5,30% (100 mg/Kg), com maior ocorrência de macrófagos (72,97 ± 4,23%). Não foram encontradas eosinófilos. Deste modo, conclui-se que, apesar do(s) mecanismo(s) de ação, o EHCS reduziu a inflamação das vias aéreas, sustentando seu uso etnofarmacológico.

Asthma is a respiratory disease characterized by a chronic airway inflammation, observed in different Brazilian regions. Genetic predisposition, environmental pollution, lifestyle, smoking habit, among others, are some factors which are related to this disease, carrying on symptoms such as wheezing, asphyxia and cough. The use of plants on treatment of diseases is as old as human species, which has opted for the use of plant resources. Among that resources, there is the Cunila spicata (Lamiaceae), popularly known as poejo-do-campo, that is a plant used in popular medicine to treat respiratory and gastrointestinal diseases. Even that this species is widely used in popular medicine in cases of respiratory symptoms and, considering the biodiversity of the Brazil, it is important to discover new drugs, improving therapeutics and ensuring safety for consumers. In this study, it was analyzed the phytochemical composition of the C. spicata and investigated the inhibitory effects of the hydroalcoholic extracts from C. spicata (EHCS) on migration of inflammatory cells in airway of mice. The EHCS was obtained by extraction assisted by ultrasound, concentrated in a rotary evaporator and oven dried. The phytochemical analysis was achieved using gas chromatography and mass spectrometry. To perform in vivo studies, Balb-c mice (25 -35 g) were pretreated by gavage with PBS (negative control, NC), prednisone 4mg/Kg (positive control) and different doses of EHCS (30, 100 and 300 mg/kg) within treated group. The mice were submitted to nebulization with proinflammatory agents such as carrageenan, histamine, capsaicin, bradykinin and 48/80 compound. After 2 hours, the mice were euthanized to perform broncoalveolar lavage to obtain samples. The obtained liquid sample was submitted to sedimentation using the Suta chamber. Total number of cells were counted on the Neubauer chamber and differential count were performed by microscopy. Fourteen phytocomponents were identified on EHCS, which the main are 2-Bornanone, menthofuran and camphene. Among mice from the treated group, all of them presented a significant maximal inhibition (MI) when exposed to proinflammatory agents by nebulization. Mice that received carrageenan, MI was 72,77 ± 3,88% (300 mg/Kg) in comparison to CN and there was a predominance of lymphocytes (59,18 ± 4,07%). MI in histamine group was 64,03 ± 4,33% (300 mg/Kg) in comparison to CN and there was a predominance of macrophages (76,53 ± 2,78%). In capsaicin group, MI was 38,90 ± 11,31% (300 mg/Kg) and occurred a greater migration of macrophages (80,98 ± 3,44%) at the highest dose. In mice exposed to bradykinin, MI was 48,63 ± 3,95% (300 mg/Kg) with macrophages predominance (64,33 ± 10,04%) while in the 48/89 compound group, IM was 40,25 ± 5,30% (100 mg/Kg) with a greater migration of macrophages (72,97 ± 4,23%). Eosinophils were not observed. It is possible to conclude that, despite the mechanism of action, the EHCS reduced airway inflammation, supporting its ethnopharmacological uses.

AVALIAÇÃO DAS ATIVIDADES ANTI-INFLAMATÓRIA E ANTINOCICEPTIVA DO ÓLEO ESSENCIAL DE MYRCIARIA TENELLA O. BERG

Atualmente, o maior objetivo das pesquisas relacionadas ao tratamento da dor e afecções inflamatórias, condições relacionadas a um elevado grau de morbidade e mortalidade na rotina clínica veterinária, tem sido o desenvolvimento de novas substâncias com maior eficácia, menor toxicidade e menor custo econômico que os fármacos atualmente disponíveis, sendo que os compostos extraídos de plantas medicinais, especialmente das plantas aromáticas, têm despertado notável interesse de pesquisadores, no que tange seus aspectos químicos e potenciais propriedades farmacológicas. O objetivo do presente estudo foi avaliar a ação do óleo essencial de folhas de Myrciaria tenella (OETM) na dor e inflamação agudas, em modelos in vivo, em camundongos da linhagem Swiss, e em cultura celular in vitro, além da avaliação da citotoxicidade, de forma a aprofundar o conhecimento sobre suas propriedades, mecanismos e toxicidade. Para os ensaios biológicos in vivo, o OEMT foi administrado oralmente a camundongos Swiss machos, mostrando ação contra a nocicepção induzida quimicamente (modelos de contorções abdominais induzidas por ácido acético e formalina) e contra a nocicepção induzida mecanicamente (modelo de Von Frey), onde a redução na concentração das citocinas pró-inflamatórias IL-6, TNF-, IL-1 e de PGE2, além do aumento da citocina anti-inflamatória IL-10 responderam pelo aumento do limiar nociceptivo demonstrado pelo OEMT no modelo de Von Frey. OEMT não induziu prejuízo motor ou sedação nos animais, confirmando sua ação antinociceptiva. O efeito antiinflamatório de OEMT foi verificado pelo seu efeito anti-edematogênico no modelo de edema de pata induzido por carragenina, mas não no edema induzido por histamina ou serotonina, e pela redução na produção de IL-6, TNF- e NO em cultura de macrófagos, além da inibição da atividade enzimática de ambas as isoformas de COX (COX-1 e COX-2), apresentando seletividade para COX-1. OEMT não produziu toxicidade em cultura de macrófagos e fibroblastos. Em síntese, OETM demonstrou efeito anti-inflamatório in vivo e in vitro sobre diferentes mediadores inflamatórios, respondendo pela sua atividade antinociceptiva, além de demonstrar segurança em nível celular.

Currently, the main objective of research related to the treatment of pain and inflammatory, conditions related to a high degree of morbidity and mortality in the veterinary clinical routine, has been the development of new substances with greater efficiency, less toxicity and less economic cost than the drugs currently available, and the compounds extracted from medicinal plants, especially from aromatic plants, have aroused notable interest of researchers, regarding their chemical aspects and potential pharmacological properties. The aim of the present study was to evaluate the action of the essential oil of Myrciaria tenella leaves (OETM) on acute pain and inflammation, in vivo models, in Swiss mice, and in cell culture in vitro, in addition to the evaluation of cytotoxicity, in order to deepen the knowledge about its properties, mechanisms and toxicity. For in vivo biological assays, the OEMT was administered orally to male Swiss mice, showing action against chemically induced nociception (models of abdominal contortions induced by acetic acid and formalin) and against mechanically induced nociception (Von Frey model), where the reduction in the concentration of the pro-inflammatory cytokines IL-6, TNF- and IL-1 and PGE2, in addition to the increase in the anti-inflammatory cytokine IL-10 accounted for the increase in the nociceptive threshold shown by the OEMT in the Von Frey model. OEMT did not induce motor damage or sedation in animals, confirming its antinociceptive action. The antiinflammatory effect of OEMT was verified by its anti-edematogenic effect in the model of paw edema induced by carrageenan, but not in histamine or serotonin-induced edema, and by the reduction in the production of IL-6, TNF- and NO in macrophage culture, in addition to inhibiting the enzymatic activity of both isoforms of COX (COX-1 and COX-2), showing selectivity for COX-1. OEMT did not produce toxicity in macrophage and fibroblast culture. In summary, OETM demonstrated anti-inflammatory effect in vivo and in vitro on different inflammatory mediators, accounting for its antinociceptive activity, in addition to demonstrating safety at the cellular level.

EFEITO DE EXTRATOS DE PRÓPOLIS VERDE E GEOPRÓPOLIS DE ABELHA CANUDO (Scaptotrigona sp.) E JANDAÍRA (Melipona subnitida) NA RESPOSTA INFLAMATÓRIA E VIABILIDADE DE TRANSPLANTES CUTÂNEOS ALOGÊNICOS E AUTÓLOGOS

A própolis e a geoprópolis são produtos resinosos elaborados a partir de exsudatos, óleos e resinas colhidas de plantas pelas abelhas. Esses produtos são conhecidos por apresentarem efeitos biológicos e são utilizados por populares devido às propriedades medicinais, inclusive no tratamento de feridas. Objetivou-se avaliar o efeito do extrato hidroalcoólico de própolis verde (EHPv), geoprópolis de abelha canudo, Scaptotrigona sp., (EHG-Can) e geoprópolis de abelha jandaíra, Melipona subnitida, (EHG-Jan) sobre a inflamação aguda, inflamação crônica por corpo estranho, cicatrização e transplante cutâneo alogênico e autólogo em ratos wistar. Para tanto, foram utilizados 36 ratos adultos saudáveis, de ambos os sexos, distribuídos em cinco grupos: animais tratados com formulação contendo 20% de EHPv; tratados com 20% de EHG-Can; tratados com 20% de EHG-Jan; grupo controle positivo (GC+) com fármaco registrado, e; apenas veículo como controle negativo (GC-). Anteriormente as análises in vivo, foi feita uma análise físico-química das para caracterização preliminar dos extratos. A inflamação aguda foi induzida por carragenina a 1% (n = 36), a inflamação crônica foi realizada por corpo estranho (lâmina de vidro) (n = 16) e a cicatrização foi acompanhada a partir de ferida circular de 8 mm de diâmetro (n = 16). Os transplantes (n = 20) foram feitos com a incisão e realocação de dois enxertos cutâneos quadrados (1cm2), um para autoenxerto e outro para aloenxerto, respectivamente. Sobre o teor de flavonoides, amostra do grupo EHG-Jan apresentou a maior quantidade (p<0,05), EHPv quantidade intermediária e a do grupo EHG-Can apresentou a menor. Verificou-se um efeito positivo antiedematoso pronunciado do EHPv, moderado efeito nos grupos EHG-Can e EHG-Jan. Na inflamação crônica, o grupo EHG-Jan destacou-se por acelerar a formação do granuloma. Houve aceleração da cicatrização com reepitelização completa por efeito dos extratos EHPv e EHG-Can em 16 dias. Os extratos aumentaram a proteção das áreas lesionadas e induziram retardo na rejeição (necrose) dos enxertos autólogos. De modo similar, porém menos acentuado ocorreu com os transplantes alogênicos. Provavelmente as diversas classes químicas, com substâncias biologicamente ativas específicas, presentes na geoprópolis foram responsáveis pelo satisfatório desempenho nas análises. Além disso, é provável que o efeito protetor contra infecções oportunistas tenha colaborado com os bons resultados. Os extratos hidroalcoólicos de própolis e geoprópolis apresentaram efeitos positivos sobre os processos inflamatórios e reparo de ferida, assim como promoveram proteção do enxerto e retardo na rejeição.

Propolis and geopropolis are resinous products elaborated starting from exudates, oils and picked resins of plants by the bees. Those products are known for they present biological effects and they are used for popular due to the medicinal properties, besides in the treatment of wounds. The aim of this work was to evaluate the effect of the hydroalcoholic extract of green propolis (HEP), canudo bee geopropolis (Scaptotrigona sp.) (HEG-Can) And the geopropolis of bee jandaíra (Melipona subnitida) (HEG-Jan) on acute inflammation, chronic inflammation, cicatrization of wounds and autogenic and allogenic skin flaps. 36 healthy adult wistar rats, of both sexes, were distributed in five groups: treated animals with formulation containing 20% of; agreements with 20% of HEG-Can; agreements with 20% of HEG-Jan; group positive control (CG+) with pharmaceutical products registered as a positive control group (CG +); only vehicle as a negative control (CG-). Previously the analyses in vivo, was made a physical-chemical analysis for preliminary characterization of the extracts. The acute inflammation was induced by 1% carrageenan, chronic inflammation caused by a foreign body (circular sight glass) and wound healing was accompanied starting from wound circular of 8mm of diameter. Transplants were made with the incision and reallocation of two grafts cutaneous squares (1cm2), first to autograft and second to allograft, respectively. On the flavonoides content, the HEG-Jan group has a large amount (p<0.05), an intermediate amount of HEP and a lower amount of HEG-Can. HEP presented a pronounced effect on the acute inflammation (anti-edematous effect), moderate effect of the HEP-Can and HEG-Jan groups was registered. In chronic inflammation, the group HEG-Jan accelerated the process of formation of the granuloma when compared to the other extracts (HEP and HEP- Can). In healing wounds, there was acceleration of the cicatrization due to effect of the extracts of HEP and HEP-Can in 16 days. The extracts show the protection of the skin graft area and discreet retard in the graft rejection (necrosis) of the autografts. In a similar way, however fewer accentuated it happened with the allografts. The several chemical classes of the geopropolis were probably responsible for the satisfactory acting in the analyses. Possibly the effects are biologically related to the presence of substances specific active. Besides, it is probable that the protecting effect against infections opportunists has collaborated with the sastisfatory results. The hydroalcoholic extracts of propolis from geopropolis have positive effects on the inflammatory processes and I repair of wound, as well as they promoted protection of the graft and retard in the graft rejection.

Evaluation of antinociceptive and anti-inflammatory activities of the topical preparation of Cipura paludosa (Iridaceae) / Avaliação das atividades antinociceptiva e anti-inflamatória de preparação tópica de Cipura paludosa (Iridaceae)

Alho do mato (Cipura paludosa, Iridaceae) is a medicinal plant found in the Amazon rain forest, North of Brazil. It has been used to treat algic, inflammatory and infectious processes. The aim of this study was to evaluate the anti-inflammatory and antinociceptive action of the crude Cipura paludosa ethanolic extract at concentrations ranging between 2.0 and 4.0% in Oil and Water cream formulations for topical use. The physical-chemical stability of the formulations was monitored over a six-month period with the use of accelerated stability tests. In order to evaluate the anti-inflammatory and antinociceptive activities, we used a paw edema test induced by carrageenan and a formalin test, respectively. The paw edema test showed that there was a statistical difference in the control group in relation to the treatments. The formalin test did not confirm antinociceptive action of the treatments with the extract in the early phase of the test. However, statistical difference was confirmed for the treatments in relation to the control in the late phase. The antinociceptive and anti-inflammatory activities of Cipura paludosa preparations, as demonstrated in the results, at least partially support the ethno-medical uses of this plant.

Allho do mato (Cipura paludosa, Iridaceae) é uma planta medicinal encontrada na floresta Amazônica, norte do Brasil. Essa planta tem sido usada para tratar dores, processos inflamatórios e infecciosos. O objetivo do estudo foi avaliar a ação anti-inflamatória e antinociceptiva do extrato bruto etanólico de Cipura paludosa, nas concentrações que variaram entre 2,0 e 4,0%, em formulações de cremes óleo e água de uso tópico. A estabilidade físico-química das formulações foi monitorada ao longo de um período de seis meses, com a aplicação de ensaios de estabilidade acelerada. A fim de avaliar as atividades anti-inflamatória e antinociceptiva, utilizou-se um teste de edema de pata induzido por carragenina e um teste de formalina, respectivamente. O teste de edema de pata mostrou que houve uma diferença significativa no grupo controle em relação aos tratamentos. O teste da formalina não confirmou efeito antinociceptivo dos tratamentos com o extrato, na primeira fase do ensaio. No entanto, a diferença estatística foi confirmada para os tratamentos em relação ao controle na segunda fase. As atividades antinociceptiva e anti-inflamatória das preparações com Cipura paludosa confirmam de forma parcial o uso etno-médico desta planta.