Canine transmissible venereal tumor with spontaneous remission: case study with emphasis on clinical and cytopathological exams to monitor tumor evolution / Tumor venéreo transmissível canino com remissão espontânea: estudo de caso com ênfase aos exames clínico e citopatológico para monitoramento da evolução tumoral

The canine transmissible venereal tumor (TVTC) is a neoplasm transmitted mainly through copulation and with a high incidence in stray dogs in Brazil. In the process of tumor evolution of TVTC, the progression, stationary and regression phases are recognized. The host immunity is related to the disease's biological behavior, however, spontaneous regression observation in cases of naturally occurring TVTC is uncommon. A canine patient was attended, after beeing rescued from the street, due to an ulcerated mass in the external genitália and tick infestation. Cytopathological examination, which diagnosed TVTC, and laboratory tests that showed mild anemia and severe thrombocytopenia were performed. In view of the impossibility of carrying out other exams, it was made the presumptive diagnosis of canine monocytic ehrlichiosis (CME), and treatment was instituted. During follow-up it was observed quick improvement in clinical signs and laboratory changes, as well as a reduction in tumor mass. A new cytopathological evaluation was carried out, and was verified increase in mature lymphocytes and plasmocytes in the midst of the tumor cells, finding compatible with the stationary phase of the disease. From that moment on, it was decided to perform only clinical and cytopathological follow-up. In the following evaluations, continuous clinical remission and cytopathological findings compatible with those described in the regression phase were observed, until its complete remission. It is considered that the improvement in the general health of the patient after the treatment of CME is related to the spontaneous regression of TVTC, and that simultaneous performance of serial clinical and cytopathological exams may be feasible and useful for monitoring the stages of evolution of TVTC.

O tumor venéreo transmissível canino (TVTC) é uma neoplasia transmitida principalmente através da cópula, com elevada incidência em cães errantes no Brasil. No processo de evolução tumoral do TVTC, são reconhecidas as fases de progressão, estacionária e de regressão. O estado imunológico do hospedeiro está relacionado ao comportamento biológico da doença, contudo, a observação de regressão espontânea em casos de TVTC de ocorrência natural é incomum. Foi atendida uma paciente canina, resgatada da rua, por apresentar massa ulcerada na genitália externa e infestação por carrapatos. Foram realizados exame citopatológico, que diagnosticou TVTC, e exames laboratoriais que evidenciaram anemia discreta e grave trombocitopenia. Com isso e diante da impossibilidade de realizar outros exames, foi também estabelecido o diagnóstico presuntivo de erlichiose monocítica canina (EMC) e instituído tratamento para a hemoparasitose. Durante o acompanhamento, foi observada rápida melhora dos sinais clínicos e das alterações laboratoriais, bem como a redução espontânea da massa tumoral. Em sequência, foi realizada nova avaliação citopatológica do TVTC e verificado o aumento quantitativo de linfócitos maduros e plasmócitos, em meio as células tumorais, achado compatível com a fase estacionária da doença. A partir desse momento, optou-se por realizar apenas acompanhamento clínico e avaliação citopatológica da neoplasia. Foram observados contínua remissão clínica e achados microscópicos compatíveis com a fase de regressão do tumor, até sua remissão completa. Pondera-se que a melhora na saúde geral da paciente após o tratamento da EMC esteja relacionada à regressão espontânea do TVTC, e que realização simultânea de exames clínico e citopatológico seriados pode ser viável e útil ao acompanhamento das fases de evolução do TVTC.

Otite média e interna com extensão para tronco encefálico em buldogue francês / Otitis media and internal with brainstem extension in a French bulldog

Background: Otitis is a frequent condition in dogs, with a multifactorial etiology covering primary causes, predisposing and perpetuating factors. It is characterized by an inflammatory process of structures that make up the auditory system, with prevalence data ranging from 15 to 20%, which can occur in any age group and without sex predisposition. According to the location, it can be classified as uni or bilateral, affecting the outer, middle and / or inner ear, the latter two being associated with neurological changes such as vestibulopathy, facial nerve paresis and Horner's syndrome. The morbidity and mortality of otitis media and internal may increase with delay in diagnosis, resulting in delay in the correct treatment, and the extension to brainstem is described in felines and considered rare in dogs. The present study aims to report an atypical case of otitis media and internal, with extension to the brain parenchyma in a brachycephalic dog. Case: A 3-year-old bitch French Bulldog was seen, weighing 12 kg, with a history of vomiting, apathy, nystagmus, ataxia and acute evolution hemiparesis. As a result of adoption, it was not known about the animal's morbid past. On special physical and clinical examination, depressed mental status, changes in postural reactions, nostril stenosis with unilateral mucopurulent nasal discharge, corneal ulcer, palpebral and labial ptosis, absence of eyelid reflex and spontaneous strabismus were observed, all of these findings observed on the left side of the face. No signs of otitis external to otoscopy were found. The clinical signs found characterize left facial nerve paresis and peripheral and central vestibulopathy. Otitis media / internal and meningoencephalitis were suspected. Hemogram, serum biochemistry (glucose, urea, creatinine, alanine aminotransferase, total proteins, albumin, globulin, alkaline phosphatase, gamma glutamyltransferase, phosphorus, total bilirubin, cholesterol and total calcium), urinalysis, rapid tests for erlichiosis, anaplasms , borreliosis, heartworm, distemper and leishmaniasis, CSF analysis, neurological panel performed by PCR (Polymerase Chain Reaction) that tested the animal for Bartonellosis, Lyme Disease (Borrelia burgdorferi), Blastomyces dermatitidis, Cryptococcus sp., Virus West Nile, Distemper, Toxoplasmosis, Neosporose and Coccidioides sp. using conjunctival swab, whole blood, urine and CSF samples. The samples were negative for all of these tests. As an image exam, brain magnetic resonance was performed. In the latter, otitis media and left internal was observed with extension of the lesion to the brain parenchyma. CSF analysis showed cytological changes compatible with a non-suppurative inflammatory process, mild pleocytosis with predominantly mononuclear leukocyte infiltrate. As a form of treatment, antibiotic therapy and total ablation of the auditory canal with lateral bulectomy were performed, showing good results with reduced clinical symptoms. Discussion: It is concluded that although the diagnosis of otitis media and internal with extension to brainstem is more common in cats, it should be included as a differential for central vestibular disorders in dogs, and that the diagnosis together with early and effective treatment are important, since that the evolution of the infection to the central nervous system represents a risk to the patient.

Neurite aguda do nervo trigêmeo em Pastor Alemão / Acute trigeminal nerve neuritis in German Shepherd

Background: Trigeminal nerve is composed by ophthalmic, maxillary and mandibular portion, presenting sensory and motor functions. Its most common conditions include vascular, neoplastic, infectious and inflammatory causes. Neuritis is an inflammation caused by a primary nerve injury that can progress to demyelination and even degeneration of nerve fibers. The present report aims to describe an unusual case of a female dog, German Shepherd breed, with acute manifestation of trigeminal nerve neuritis whose etiology may be associated with erlichiosis, since infection with Ehrlichia spp. through serological test was verified. Case: A 3-year-old female German Shepherd, weighing 26.8 kg and not neutered, was attended at Veterinary Hospital Dr. Halim Atique - UNIRP, São José do Rio Preto, SP, Brazil presenting apathy, sialorrhea and polydipsia for seven days. The tutor reported an episode of foamy and yellowish vomit three days ago and ixodidiosis last week. Physical examination revealed flaccid open-mouthed posture, with mild bilateral masseter and moderate temporal muscle atrophy. Water was offered to the animal and it was observed that it could not properly seize, confirming a false polydipsia. The neurological examination revealed a slight decrease in head sensitivity, difficulty in chewing and seizure of food. It was not observed alterations in the other pairs of cranial nerves or other neurological parameters (postural reactions and spinal reflexes), and the diagnose of bilateral dysfunction of the trigeminal nerve was based on the affected neuroanatomic region. On neurological examination, other lesions of the nervous system were ruled out, suggesting an isolated manifestation of the trigeminal nerve. CBC revealed anemia, intense thrombocytopenia and leukocytosis by neutrophilia. Radiographic examination ruled out the possibility of trauma due to the absence of mandible fracture and also temporomandibular joint alterations. Masseter and temporal muscle biopsy were performed, and myositis

Neurite aguda do nervo trigêmeo em Pastor Alemão / Acute trigeminal nerve neuritis in German Shepherd

Background: Trigeminal nerve is composed by ophthalmic, maxillary and mandibular portion, presenting sensory and motor functions. Its most common conditions include vascular, neoplastic, infectious and inflammatory causes. Neuritis is an inflammation caused by a primary nerve injury that can progress to demyelination and even degeneration of nerve fibers. The present report aims to describe an unusual case of a female dog, German Shepherd breed, with acute manifestation of trigeminal nerve neuritis whose etiology may be associated with erlichiosis, since infection with Ehrlichia spp. through serological test was verified. Case: A 3-year-old female German Shepherd, weighing 26.8 kg and not neutered, was attended at Veterinary Hospital Dr. Halim Atique - UNIRP, São José do Rio Preto, SP, Brazil presenting apathy, sialorrhea and polydipsia for seven days. The tutor reported an episode of foamy and yellowish vomit three days ago and ixodidiosis last week. Physical examination revealed flaccid open-mouthed posture, with mild bilateral masseter and moderate temporal muscle atrophy. Water was offered to the animal and it was observed that it could not properly seize, confirming a false polydipsia. The neurological examination revealed a slight decrease in head sensitivity, difficulty in chewing and seizure of food. It was not observed alterations in the other pairs of cranial nerves or other neurological parameters (postural reactions and spinal reflexes), and the diagnose of bilateral dysfunction of the trigeminal nerve was based on the affected neuroanatomic region. On neurological examination, other lesions of the nervous system were ruled out, suggesting an isolated manifestation of the trigeminal nerve. CBC revealed anemia, intense thrombocytopenia and leukocytosis by neutrophilia. Radiographic examination ruled out the possibility of trauma due to the absence of mandible fracture and also temporomandibular joint alterations. Masseter and temporal muscle biopsy were performed, and myositis…(AU)

Detection of a putative novel genotype of Ehrlichia sp. from opossums (Didelphis aurita) from Brazil / Detecção de um suposto novo genótipo de Ehrlichia sp. em gambás (Didelphis aurita) do Brasil

Erlichiosis affects humans and animals worldwide. Its distribution and prevalence depends on the presence of tick vectors and hosts in one geographic area. The aim of the present study was to investigate the occurrence of Ehrlichiaspp. and Anaplasma spp. in opossums (Didelphis sp.) from the State of Rio de Janeiro, southeast Brazil. Blood samples from 37 animals were tested for these two pathogens using molecular methods. One animal (2.7%) was positive for Ehrlichia sp. by 16S rRNA-based nested PCR. In a phylogenetic analysis based on the 16S rRNA gene using the maximum likelihood method and the GTRGAMMA+I evolutionary model, we detected a novel Ehrlichia sp. genotype closely related to genotypes of E. canis previously reported in dogs from Brazil. To the authors knowledge, this is the first molecular detection of Ehrlichia sp. in opossums from this State in the southeastern region of the country.(AU)

A erliquiose afeta seres humanos e animais em todo o mundo. Sua distribuição e prevalência dependem da presença de vetores de carrapatos e hospedeiros em uma área geográfica. O objetivo do presente estudo foi investigar a ocorrência de Ehrlichia sp. e Anaplasma sp. em gambás (Didelphis sp.) do Estado do Rio de Janeiro, sudeste do Brasil. Amostras de sangue de 37 animais foram testadas para estes dois patógenos usando métodos moleculares. Um animal (2,7%) foi positivo para Ehrlichia sp. baseado em 16S rRNA-nested PCR. Em uma análise filogenética baseada no gene 16S rRNA usando o método de máxima verossimilhança e o modelo evolutivo GTRGAMMA + I, detectamos um novo genótipo de Ehrlichia sp. intimamente relacionado a genótipos de E. canis previamente relatados em cães do Brasil. Para o conhecimento dos autores, esta é a primeira detecção molecular de Ehrlichia sp. em gambás deste estado na região sudeste do país.(AU)

Detection of a putative novel genotype of Ehrlichia sp. from opossums (Didelphis aurita) from Brazil / Detecção de um suposto novo genótipo de Ehrlichia sp. em gambás (Didelphis aurita) do Brasil

Erlichiosis affects humans and animals worldwide. Its distribution and prevalence depends on the presence of tick vectors and hosts in one geographic area. The aim of the present study was to investigate the occurrence of Ehrlichia spp. and Anaplasma spp. in opossums (Didelphis sp.) from the State of Rio de Janeiro, southeast Brazil. Blood samples from 37 animals were tested for these two pathogens using molecular methods. One animal (2.7%) was positive for Ehrlichia sp. by 16S rRNA-based nested PCR. In a phylogenetic analysis based on the 16S rRNA gene using the maximum likelihood method and the GTRGAMMA+I evolutionary model, we detected a novel Ehrlichia sp. genotype closely related to genotypes of E. canis previously reported in dogs from Brazil. To the authors knowledge, this is the first molecular detection of Ehrlichia sp. in opossums from this State in the southeastern region of the country.(AU)

A erliquiose afeta seres humanos e animais em todo o mundo. Sua distribuição e prevalência dependem da presença de vetores de carrapatos e hospedeiros em uma área geográfica. O objetivo do presente estudo foi investigar a ocorrência de Ehrlichia sp. e Anaplasma sp. em gambás (Didelphis sp.) do Estado do Rio de Janeiro, sudeste do Brasil. Amostras de sangue de 37 animais foram testadas para estes dois patógenos usando métodos moleculares. Um animal (2,7%) foi positivo para Ehrlichia sp. baseado em 16S rRNA-nested PCR. Em uma análise filogenética baseada no gene 16S rRNA usando o método de máxima verossimilhança e o modelo evolutivo GTRGAMMA + I, detectamos um novo genótipo de Ehrlichia sp. intimamente relacionado a genótipos de E. canis previamente relatados em cães do Brasil. Para o conhecimento dos autores, esta é a primeira detecção molecular de Ehrlichia sp. em gambás deste estado na região sudeste do país.(AU)

Detection of a putative novel genotype of Ehrlichia sp. from opossums (Didelphis aurita) from Brazil

Abstract Erlichiosis affects humans and animals worldwide. Its distribution and prevalence depends on the presence of tick vectors and hosts in one geographic area. The aim of the present study was to investigate the occurrence of Ehrlichia spp. and Anaplasma spp. in opossums (Didelphis sp.) from the State of Rio de Janeiro, southeast Brazil. Blood samples from 37 animals were tested for these two pathogens using molecular methods. One animal (2.7%) was positive for Ehrlichia sp. by 16S rRNA-based nested PCR. In a phylogenetic analysis based on the 16S rRNA gene using the maximum likelihood method and the GTRGAMMA+I evolutionary model, we detected a novel Ehrlichia sp. genotype closely related to genotypes of E. canis previously reported in dogs from Brazil. To the authors knowledge, this is the first molecular detection of Ehrlichia sp. in opossums from this State in the southeastern region of the country.

Resumo A erliquiose afeta seres humanos e animais em todo o mundo. Sua distribuição e prevalência dependem da presença de vetores de carrapatos e hospedeiros em uma área geográfica. O objetivo do presente estudo foi investigar a ocorrência de Ehrlichia sp. e Anaplasma sp. em gambás (Didelphis sp.) do Estado do Rio de Janeiro, sudeste do Brasil. Amostras de sangue de 37 animais foram testadas para estes dois patógenos usando métodos moleculares. Um animal (2,7%) foi positivo para Ehrlichia sp. baseado em 16S rRNA-nested PCR. Em uma análise filogenética baseada no gene 16S rRNA usando o método de máxima verossimilhança e o modelo evolutivo GTRGAMMA + I, detectamos um novo genótipo de Ehrlichia sp. intimamente relacionado a genótipos de E. canis previamente relatados em cães do Brasil. Para o conhecimento dos autores, esta é a primeira detecção molecular de Ehrlichia sp. em gambás deste estado na região sudeste do país.

Detection of a putative novel genotype of Ehrlichia sp. from opossums (Didelphis aurita) from Brazil

Abstract Erlichiosis affects humans and animals worldwide. Its distribution and prevalence depends on the presence of tick vectors and hosts in one geographic area. The aim of the present study was to investigate the occurrence of Ehrlichia spp. and Anaplasma spp. in opossums (Didelphis sp.) from the State of Rio de Janeiro, southeast Brazil. Blood samples from 37 animals were tested for these two pathogens using molecular methods. One animal (2.7%) was positive for Ehrlichia sp. by 16S rRNA-based nested PCR. In a phylogenetic analysis based on the 16S rRNA gene using the maximum likelihood method and the GTRGAMMA+I evolutionary model, we detected a novel Ehrlichia sp. genotype closely related to genotypes of E. canis previously reported in dogs from Brazil. To the authors knowledge, this is the first molecular detection of Ehrlichia sp. in opossums from this State in the southeastern region of the country.

Resumo A erliquiose afeta seres humanos e animais em todo o mundo. Sua distribuição e prevalência dependem da presença de vetores de carrapatos e hospedeiros em uma área geográfica. O objetivo do presente estudo foi investigar a ocorrência de Ehrlichia sp. e Anaplasma sp. em gambás (Didelphis sp.) do Estado do Rio de Janeiro, sudeste do Brasil. Amostras de sangue de 37 animais foram testadas para estes dois patógenos usando métodos moleculares. Um animal (2,7%) foi positivo para Ehrlichia sp. baseado em 16S rRNA-nested PCR. Em uma análise filogenética baseada no gene 16S rRNA usando o método de máxima verossimilhança e o modelo evolutivo GTRGAMMA + I, detectamos um novo genótipo de Ehrlichia sp. intimamente relacionado a genótipos de E. canis previamente relatados em cães do Brasil. Para o conhecimento dos autores, esta é a primeira detecção molecular de Ehrlichia sp. em gambás deste estado na região sudeste do país.

Corpo estranho esofágico em paciente canino - Relato de caso / Esophageal foreign body in a canine patient - Case report / Cuerpo extraño esofágico en paciente canino - Relato de caso

Os corpos estranhos esofágicos (CEE), ocasionados geralmente por objetos pontiagudos, são comuns em cães, sendo uma das causas que frequentemente levam à regurgitação e disfagia. Seu tratamento consiste na remoção endoscópica ou cirúrgica do corpo estranho e tratamento de suas complicações. Relata-se um caso clínico de corpo estranho esofágico em paciente canino mestiço, de um ano, atendido no Hospital Veterinário da Universidade Paranense, apresentando histórico de ingestão de osso e regurgitação por um período de três dias anteriores à consulta, diagnosticado com CEE por meio do histórico e de radiografias torácicas obtidas durante seu internamento. O tratamento consistiu na remoção cirúrgica do CEE e tratamento sintomático das complicações e patologias concomitantes desenvolvidas ao longo do período pós-operatório, incluindo-se piotórax, babesiose e erliquiose. O método cirúrgico de remoção do corpo estranho esofágico no paciente canino relatado permitiu uma abordagem terapêutica e diagnóstica, proporcionando completa remoção do CEE e resolução da perfuração esofágica secundária.(AU)

Esophageal foreign bodies (EFB), usually caused by sharp objects, are common in dogs, being one of the causes frequently leading to regurgitation and dysphagia. Treatment consists in endoscopic or surgical removal and treatment of any resulting complications. This is a report of a clinical case of esophageal foreign body in a one-year-old mixed-breed dog treated in the Teaching Veterinary Hospital of Universidade Paranense, with a history of bone ingestion and regurgitation for a period of three days prior to the visit. The EFB diagnosis was reached based on the history and chest radiographs obtained during hospitalization. The treatment consisted of the surgical removal of the EFB, symptomatic treatment of complications and concomitant conditions developed during the postoperative period, including pyothorax, babesiosis and erlichiosis. The surgical removal of the esophageal foreign body in the reported case allowed a therapeutic and diagnostic approach, providing the complete removal of the EFB and the resolution of a secondary esophageal perforation.(AU)

Los cuerpos extraños esofágicos (CEE), ocasionados generalmente por objetos puntiagudos, son comunes en perros, siendo una de las causas que frecuentemente conduce a la regurgitación y disfagia. Su tratamiento consiste en la remoción endoscópica o quirúrgica del cuerpo extraño y el tratamiento de sus complicaciones. Se relata un caso clínico de cuerpo extraño esofágico en paciente canino mestizo, de un año, atendido en el Hospital Veterinario de la Universidad Paranaense, presentando histórico de ingestión de hueso y regurgitación por un período de tres días anteriores a la consulta, diagnosticado con CEE por medio del histórico y de radiografías torácicas obtenidas durante su internamiento. El tratamiento consistió en la remoción quirúrgica del CEE y tratamiento sintomático de las complicaciones y patologías concomitantes desarrolladas a lo largo del período postoperatorio, incluyendo piotórax, babesiosis y erliquiosis. El método quirúrgico de remoción del cuerpo extraño esofágico en el paciente canino relatado permitió un abordaje terapéutico y diagnóstico, proporcionando completa remoción del CEE y resolución de la perforación esofágica secundaria.(AU)

Corpo estranho esofágico em paciente canino - Relato de caso / Esophageal foreign body in a canine patient - Case report / Cuerpo extraño esofágico en paciente canino - Relato de caso

Os corpos estranhos esofágicos (CEE), ocasionados geralmente por objetos pontiagudos, são comuns em cães, sendo uma das causas que frequentemente levam à regurgitação e disfagia. Seu tratamento consiste na remoção endoscópica ou cirúrgica do corpo estranho e tratamento de suas complicações. Relata-se um caso clínico de corpo estranho esofágico em paciente canino mestiço, de um ano, atendido no Hospital Veterinário da Universidade Paranense, apresentando histórico de ingestão de osso e regurgitação por um período de três dias anteriores à consulta, diagnosticado com CEE por meio do histórico e de radiografias torácicas obtidas durante seu internamento. O tratamento consistiu na remoção cirúrgica do CEE e tratamento sintomático das complicações e patologias concomitantes desenvolvidas ao longo do período pós-operatório, incluindo-se piotórax, babesiose e erliquiose. O método cirúrgico de remoção do corpo estranho esofágico no paciente canino relatado permitiu uma abordagem terapêutica e diagnóstica, proporcionando completa remoção do CEE e resolução da perfuração esofágica secundária.(AU)

Esophageal foreign bodies (EFB), usually caused by sharp objects, are common in dogs, being one of the causes frequently leading to regurgitation and dysphagia. Treatment consists in endoscopic or surgical removal and treatment of any resulting complications. This is a report of a clinical case of esophageal foreign body in a one-year-old mixed-breed dog treated in the Teaching Veterinary Hospital of Universidade Paranense, with a history of bone ingestion and regurgitation for a period of three days prior to the visit. The EFB diagnosis was reached based on the history and chest radiographs obtained during hospitalization. The treatment consisted of the surgical removal of the EFB, symptomatic treatment of complications and concomitant conditions developed during the postoperative period, including pyothorax, babesiosis and erlichiosis. The surgical removal of the esophageal foreign body in the reported case allowed a therapeutic and diagnostic approach, providing the complete removal of the EFB and the resolution of a secondary esophageal perforation.(AU)

Los cuerpos extraños esofágicos (CEE), ocasionados generalmente por objetos puntiagudos, son comunes en perros, siendo una de las causas que frecuentemente conduce a la regurgitación y disfagia. Su tratamiento consiste en la remoción endoscópica o quirúrgica del cuerpo extraño y el tratamiento de sus complicaciones. Se relata un caso clínico de cuerpo extraño esofágico en paciente canino mestizo, de un año, atendido en el Hospital Veterinario de la Universidad Paranaense, presentando histórico de ingestión de hueso y regurgitación por un período de tres días anteriores a la consulta, diagnosticado con CEE por medio del histórico y de radiografías torácicas obtenidas durante su internamiento. El tratamiento consistió en la remoción quirúrgica del CEE y tratamiento sintomático de las complicaciones y patologías concomitantes desarrolladas a lo largo del período postoperatorio, incluyendo piotórax, babesiosis y erliquiosis. El método quirúrgico de remoción del cuerpo extraño esofágico en el paciente canino relatado permitió un abordaje terapéutico y diagnóstico, proporcionando completa remoción del CEE y resolución de la perforación esofágica secundaria.(AU)

ASSOCIAÇÃO DA REATIVIDADE PARA Ehrlichia canis EM CADELAS DIAGNOSTICADAS COM PIOMETRA E PROTEINÚRIA.

Erliquiose, piometra e proteinúria são afecções comuns na clínica de pequenos animais. O objetivo desse trabalho foi avaliar a associação entre piometra e proteinúria em cadelas com reatividade para Ehrlichia canis, além de traçar o perfil laboratorial e ultrassonográfico de cadelas com essas afecções. Foram incluídas no estudo cadelas diagnosticadas com piometra e proteinúria (G1; n= 30); apenas com piometra (G2; n= 30), apenas com proteinúria (G3; n=32) e cadelas que não apresentavam proteinuria nem piometra (G4; n=38). Todas as cadelas foram submetidas a exames hematológicos, urinálise, ultrassonografia abdominal e ELISA para detecção de anticorpos anti Ehrlichia canis, pelo teste de imunoadsorção enzimática indireta (ELISA). Das 130 cadelas estudadas, 60 (46,2%) foram reativas ao teste ELISA sem associação estatística significativa entre as três afecções. Dentre os parâmetros analisados destacou-se nos valores médios, aumento da leucometria global (32892/L) e RPC (1.04), hipoalbuminemia (2.47 g/dL) e densidade urinária diminuída (1021) no G1. E no G3 observou-se a ALT aumentada (119.50 UI/L). O estudo permitiu observar uma alta frequência de cadelas sorologicamente reativas à E. canis na população estudada, observando-se alterações de alguns parâmetros laboratoriais em animais que apresentaram proteinuria e piometra concomintantemente. A albumina pode não alterar em animais reativos à E. canis e com proteinúria. Não foi observada diferença estatística nas avaliações ultrassonográficas. Não foram observadas diferenças significativas na comparação dos perfis de cadelas com piometra ou proteinúria reativas ou não à E. canis. O grupo sorreativos e sem doença concomitante demonstrou que pode não ocorrer manifestação de sinais clínicos e alterações em exames complementares.

Erlichiosis, pyometra and proteinuria are common conditions in small animal clinics. The objective of this study was to evaluate the association between pyometra and proteinuria in female dogs with reactivity to Ehrlichia canis, and to trace the laboratory and ultrasound profile of dogs with these conditions. Bitches diagnosed with pyometra and proteinuria (G1; n = 30); only with pyometra (G2; n = 30), only with proteinuria (G3; n = 32) and bitches that had no proteinuria or pyometra (G4; n = 38). All dogs were submitted to hematological exams, urinalysis, abdominal ultrasonography and ELISA to detect antibodies against Ehrlichia canis by the indirect enzyme immunosorbent test (ELISA). Of the 130 bitches studied, 60 (46.2%) were reactive to the ELISA without significant statistical association between the three conditions. Among the analyzed parameters stood out the mean values, increase in white blood cel count (WBC) (32892 /L) and UPC (1.04), hypoalbuminemia (2.47 g/dL) and decreased urinary density (1021) in G1. And in G3 increased ALT (119.50 IU/L) was observed. The study allowed to observe a high frequency of serologically reactive E. canis bitches in the studied population, observing alterations of some laboratory parameters in animals that presented concomitantly proteinuria and pyometra. Albumin may not change in animals reactive to E. canis and with proteinuria. No statistical difference was observed in the sonographic evaluations. No significant differences were observed in the comparison of female dogs profiles with piometra or proteinuria reactive or not to E. canis. The group that had been reactive serum and without concomitant disease demonstrated that there may be no manifestation of clinical signs and alterations in complementary exams.

DIAGNÓSTICO DE Ehrlichia spp. EM CÃES ASSINTOMÁTICOS

A Ehrlichia canis é um importante agente infeccioso em cães, de difícil controle devido a distribuição do seu vetor, o Rhipicephalus sanguineus. Sendo transmitida de um cão para outro pelo repasto sanguíneo do carrapato vetor, que pela hematofagia ingere o agente de um cão infectado contendo mórulas nas células parasitadas. Durante o repasto sanguíneo, os componentes da saliva do carrapato atuam na resposta imune local do hospedeiro, diminuindo a resposta do tipo Th1. Essa supressão favorece a resposta do tipo Th2, possibilitando que a infecção se instale. Desse modo o animal gera alterações hematológicas e bioquímicas inespecíficas dificultando o diagnóstico, que muitas vezes é feito de forma presuntiva. Induzindo ao uso de medicação desnecessária podendo gerar complicações na eficácia do tratamento devido ao favorecimento de resistência a antibióticos. É importante esclarecer e estudar sobre os meios de diagnósticos e as associações necessárias, para evitar tratamentos desnecessários, especialmente em casos assintomáticos. O diagnóstico definitivo requer o uso de técnicas mais sensíveis como técnicas moleculares e não somente considerar o hemograma completo e testes sorológicos qualitativos. Visto que a disseminação de casos de erliquiose entre a população canina e as limitações das técnicas convencionais de diagnóstico, identificação e diferenciação de microrganismos podem promover equívocos no diagnóstico de doenças infecciosas, pretende-se explorar outros meios de diagnósticos disponíveis em cães assintomáticos com alterações hematológicas, visando esclarecer e conscientizar sobre a forma como os tratamentos contra hemoparasitoses estão sendo administrados.

Ehrlichia canis is an important infectious agent in dogs, difficult to control due to the distribution of its vector, Rhipicephalus sanguineus. Being transmitted from one dog to another by the blood meal of the vector tick, which by hematophagy ingests the agent of an infected dog containing morulae in the parasitized cells. During blood meal, the components of the tick's saliva act on the host's local immune response, decreasing the Th1-type response. This suppression favors the Th2-type response, allowing the infection to settle. In this way, the animal generates nonspecific hematological and biochemical changes, making the diagnosis difficult, which is often presumptively made. Inducing the use of unnecessary medication, which can lead to complications in the effectiveness of the treatment due to favoring resistance to antibiotics. It is important to clarify and study the means of diagnosis and the necessary associations, to avoid unnecessary treatments, especially in asymptomatic cases. The definitive diagnosis requires the use of more sensitive techniques such as molecular techniques and not only considering the complete blood count and qualitative serological tests. Since the spread of cases of ehrlichiosis among the canine population and the limitations of conventional techniques for the diagnosis, identification and differentiation of microorganisms can promote misunderstandings in the diagnosis of infectious diseases, it is intended to explore other means of diagnosis available in asymptomatic dogs with hematological changes, aiming to clarify and raise awareness about how treatments against hemoparasitosis are being administered.

ALTERAÇÕES HEMATOLÓGICAS GERAIS EM CÃES DIAGNOSTICADOS COM Erlichia canis POR PCR OU SOROLOGIA

A Erliquiose Monocítica Canina no Brasil vem apresentando casuística crescente em hospitais e clínicas veterinárias. Devido a necessidade de realizar um diagnóstico rápido para melhor bem estar do animal, existe a necessidade de mais conhecimento sobre as alterações hematológicas presentes em animais com suspeita de Erliquiose canina. Essas informações podem ser de grande ajuda para o médico veterinário, especialmente em casos com sintomatologia inespecífica, que podem evoluir para um quadro de prognóstico reservado a ruim. O presente projeto possuiu como objetivo geral, avaliar as alterações hematológicas em cães atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Santo Amaro, apresentando trombocitopenia e diagnosticados com Ehrlichia canis. Os objetivos específicos foram: (1) Correlacionar os dados encontrados no hemograma dos cães com diagnostico molecular e sorológico positivo para E. canis; (2) Correlacionar os dados encontrados no hemograma dos cães com diagnostico sorológico positivo para E. canis. Os 54 (cinquenta e quatro) cães foram divididos em 3 grupos para análise deste estudo científico, sendo distribuídos da seguinte maneira: Grupo 1: cães apresentando alterações clínicas ou trombocitopenia no hemograma e com diagnostico molecular e sorológico positivo para E. canis; Grupo 2: cães apresentando alterações clínicas trombocitopenia no hemograma e com diagnostico sorológico positivo para E. canis; Grupo 3: cães apresentando alterações clínicas ou trombocitopenia no hemograma e negativo no diagnostico molecular e sorológico para E. canis. Com este estudo pode-se concluir que: a) a trombocitopenia e a anemia são os mais importantes achados hematológicos em todas as fases da enfermidade, podendo também ocorrer a pancitopenia; b) animais positivos em PCR apresentaram anemia e trombocitopenia mais intensas, porém a RIFI se mostrou uma excelente opção diagnóstica para animais em fase crônica da enfermidade; c) testes moleculares e sorológicos são úteis e devem ser utilizados em conjunto com a história clínica do animal com fim de diagnosticar e diferenciar a doença entre as fases aguda, crônica e assintomática.

The Canine Monocytic Erlichiosis in Brazil has presented increasing casuistry in hospitals and veterinary clinics. Due to the need to perform a rapid diagnosis for better animal welfare, there is a need for more knowledge about the hematological alterations present in animals with suspected canine erlichiosis. This information can be of great help to the veterinarian, especially in cases with nonspecific symptomatology, which may progress to a predicted bad condition. The present project aimed to evaluate the hematological changes in dogs treated at the Veterinary Hospital of the Santo Amaro University, presenting thrombocytopenia and diagnosed with Ehrlichia canis. The specific objectives were: (1) To correlate the data found in the hemogram of dogs with positive molecular and serological diagnosis for E. canis; (2) Correlate the data found in the hemogram of dogs with positive serological diagnosis for E. canis. The 54 dogs were divided into 3 groups for analysis of this scientific study, being distributed as follows: Group 1: dogs presenting clinical alterations or thrombocytopenia in the blood count and with positive molecular and serological diagnosis for E. canis; Group 2: dogs presenting clinical alterations or thrombocytopenia on the blood count and positive serological diagnosis for E. canis; Group 3: dogs presenting clinical alterations or thrombocytopenia in the blood count and negative in the molecular and serological diagnosis for E. canis. With this study, it can be concluded that: a) thrombocytopenia and anemia are the most important hematological findings in all phases of the disease, and pancytopenia may also occur; b) positive animals in PCR showed more intense anemia and thrombocytopenia; however, RIFI proved to be an excellent diagnostic option for animals in the chronic phase of the disease; c) Molecular and serological tests are useful and should be used in conjunction with the animal's clinical history in order to diagnose and differentiate the disease between the acute, chronic and asymptomatic phases.

DIAGNÓSTICO PATOLÓGICO E MOLECULAR DA INFECÇÃO POR Ehrlichia canis EM CANINOS DE MINAS GERAIS

A erliquiose monocítica canina (EMC) é uma doença infecciosa causada pela bactéria Ehrlichia canis, com sinais clinicos relacionados a aplasia de medula óssea e trombocitopenia. As lesões de necropsia são inespecíficas, podendo ocorrer hemorragias disseminadas, esplenomegalia, hepatomegalia e linfoadenomegalia. Microscopicamente, os achados dependem da fase clínica da doença, mas, frequentemente, ocorrem hemorragias multifocais, infiltrado linfoplasmocitário perivascular e vasculite em vários tecidos, baço com hiperplasia da polpa branca, pneumonia intersticial, glomerulonefrite membranosa e aplasia de medula óssea. O diagnóstico baseia-se nas manifestações clínicas, nas lesões de necropsia e no achado de inclusões riquetsiais em citoplasma de monócitos e linfócitos, as quais são raras e visualizadas somente na fase aguda da doença. Desta forma, o objetivo deste estudo foi descrever as principais lesões observadas na EMC, validar uma PCR em tecidos para o diagnóstico molecular da erliquiose canina e identificar a cepa de E. canis circulante em cães no Sul de Minas Gerais. Tecidos de quarenta caninos encaminhados para necropsia no Setor de Patologia Veterinária da UFLA foram submetidos a histopatologia e Nested-PCR. Destes, 28 apresentaram lesões compatíveis e PCR positivo para EMC e 12 animais diagnosticados com outras doenças foram negativos na PCR para EMC (controle negativo). Na PCR realizada em amostras de baço e rim, 14 cães (50%) foram positivos em ambos os órgãos, 16 (57,1%) positivos no baço e 26 caninos (92,8%) positivos no rim. As lesões macroscópicas mais frequentes na EMC foram edemas e hemorragias generalizadas, anemia e icterícia, lesões de insuficiência renal crônica (uremia), linfadenomegalia, esplenomegalia e hepatomegalia. Microscopicamente hemorragias e trombose multifocal, hemossiderose acentuada em baço, linfonodo e medula óssea, aplasia de medula óssea, nefrite intersticial linfoplasmocitária, glomerulonefrite membranosa e congestão acentuada com atrofia de cordões de hepatócitos foram os achados mais importantes. Necrose fibrinoide de paredes vasculares e vasculite foram observadas em cinco animais (17,8%). A sequência obtida de E. canis, quando comparada com as sequências dos fragmentos dos genes disponíveis no GenkBank, obtiveram 95,9% de identidade com a cepa E. canis Jake (NC_007354.1) e 95,6% com a cepa Oklahoma (NR_118741.1). A nested-PCR associada às lesões se mostrou efetiva para o diagnóstico da EMC.

Canine monocytic erliquiosis (CME) is an infectious disease caused by the bacterium Ehrlichia canis, with clinical signs related to bone marrow aplasia and thrombocytopenia. Necropsy lesions are nonspecific and disseminated hemorrhages, splenomegaly, hepatomegaly and lymphoadenomegaly may occur. The microscopic findings depends on the clinical phase of the disease, but often occur multifocal hemorrhages, perivascular lymphoplasmocytary infiltration and vasculitis in various tissues, spleen with white pulp hyperplasia, interstitial pneumonia, membranous glomerulonephritis and bone marrow aplasia. The diagnosis is based on clinical manifestations, necropsy lesions and the ricketsian inclusions in the cytoplasm of monocytes and lymphocytes, which are rare and visualized only in the acute phase of the disease. Thus, the aim of this study was to describe the main lesions observed in CME, validate a tissue PCR for the molecular diagnosis of canine erlichiosis and identify the circulating E. canis strain in dogs in southern of Minas Gerais, Brazil. Tissues from 40 canines referred for necropsy in the Veterinary Pathology Sector of UFLA were submitted to histopathology and Nested-PCR avaliation. Of these, 28 had compatible lesions and positive PCR for CME and 12 animals diagnosed with other diseases were negative in PCR for EMC (negative control). In the PCR performed on spleen and kidney samples, 14 dogs (50%) were positive in both organs, 16 (57,1%) positive in the spleen and 26 canines (92.8%) positive in the kidney. The CME most frequent macroscopic lesions were edema and generalized hemorrhages, anemia and jaundice, lesions of chronic renal failure (uremia), lymphadenomegaly, splenomegaly and hepatomegaly. Microscopically hemorrhages and multifocal thrombosis, severe hemosiderosis in the spleen, lymph node and bone marrow, bone marrow aplasia, interstitial lymphoplasmocyte nephritis, membranous glomerulonephrite and severe congestion with atrophy of hepatocytes were the most important findings. Fibrinoid necrosis and vasculitis were observed in five animals (17.8%). The sequence obtained from E. canis when compared with the sequences of fragments of genes available in GenkBank, obtained 95.9% identity with the E. canis strain Jake (NC_007354.1) and 95.6% with the Oklahoma strain (NR_118741.1). The nested PCR associated with the lesions was effective for the diagnosis of CME.

Achados clínicos e laboratoriais em cães naturalmente infectados pela Ehrlichia canis

Diante da importância e da alta prevalência da erlichiose na clínica médica de pequenos animais, foram avaliados 20 cães de ambos os sexos, variadas raças, idades e naturalmente infectados pela Ehrlichia canis que apresentaram sinais clínicos sugestivos da doença e positivos ao teste sorológico como método diagnóstico, atendidos no Hospital Veterinário da Prefeitura de Recife- PE no período de setembro de 2017 a maio de 2018. Foram coletados 4 ml de sangue sendo utilizados 1,5 ml para o teste sorológico e hemograma e 2,5 ml para a analise bioquímica. 75% dos animais apresentaram apatia, 50% vômito, 45% secreção ocular e 5% distúrbio hemorrágico. Os valores para hemácias, hemoglobina e hematócrito foram abaixo dos valores de referência, contudo ocorreu uma variabilidade elevada nas variáveis bastonetes e eosinófilos, com valores dos desvios padrão superiores às médias correspondentes, e valores razoavelmente elevados no desvio padrão, nas variáveis segmentados, linfócitos e monócitos. Para as variáveis (PPT, ureia, ALT, AST, FA, e Fósforo) verificou-se que os resultados apresentaram-se dentro dos valores de referência. No entanto, a variabilidade se mostrou elevada na fosfatase alcalina com valor do desvio padrão superior à média correspondente e foram razoavelmente elevadas nas variáveis uréia, creatinina e AST. As proteínas plasmáticas totais encontraram-se elevadas em 55% dos pacientes, seguido da ureia com 20%, ALT, FA e fósforo cada um com 15%. Valores inferiores à referência foram registrados em 50% dos pacientes com relação ao cálcio, 35% na albumina e 5% fósforo. Nas demais variáveis a maioria dos pacientes foi classificada com valor normal. Conclui- se que os sinais clínicos e alterações laboratoriais encontrados nos cães naturalmente infectados pela Ehrlichia canis não são sinais específicos para diagnóstico da doença sendo necessário utilizar outros meios como ferramenta diagnóstica.

In view of the importance and the high prevalence of erlichiosis in the clinical practice of small animals, we evaluated 20 dogs of both sexes, several breeds, ages and naturally infected by Ehrlichia canis, which presented clinical signs suggestive of the disease and positive to the serological test as diagnostic method , attended at the Veterinary Hospital of the Municipality of Recife, PE, Brazil, from September 2017 to May 2018. Four ml of blood were collected, using 1.5 ml for the serological test and the blood count and 2.5 ml for the biochemical analysis. 75% of the animals presented apathy, 50% vomiting, 45% ocular secretion and 5% hemorrhagic disorder. The values for red blood cells, hemoglobin and hematocrit were below the reference values, however, there was a high variability in rod and eosinophil variables, with values of standard deviations higher than the corresponding mean values, and fairly high values in the standard deviation, segmented variables, lymphocytes and monocytes. For the variables (PPT, urea, ALT, AST, FA, and Phosphorus) the results were found to be within the reference values. However, the variability was elevated in alkaline phosphatase with a standard deviation value higher than the corresponding mean and were reasonably high in the urea, creatinine and AST variables. Total plasma proteins were elevated in 55% of patients, followed by 20% urea, ALT, FA and phosphorus, each with 15%. Values lower than the reference were recorded in 50% of patients with respect to calcium, 35% in albumin and 5% phosphorus. In the other variables, the majority of patients were classified as normal. It is concluded that the clinical signs and laboratory abnormalities found in dogs naturally infected by Ehrlichia canis are not specific signs for the diagnosis of the disease and other means must be used as a diagnostic tool.

PERFIL EPIDEMIOLÓGICO, CLÍNICO E LABORATORIAL DE ANIMAIS COM SUSPEITA CLÍNICA DE HEMOPARASITOSE ATENDIDOS NO HOSPITAL VETERINÁRIO DE UBERABA-MG UBERABA, MG 2019

RESUMO A hemoparasitose causada pela Babesia canis é uma importante doença que possui alta casuística na clínica médica veterinária, podendo levar o paciente à óbito. É uma moléstia que ocasiona sinais clínicos semelhantes e inespecíficos a outras enfermidades como erliquiose, rangeliose e anaplasmose, dificultando assim um diagnóstico preciso. Além disso, possui como fator de risco a presença de carrapatos, que também é transmissor de outras enfermidades. Com isso, o presente trabalho objetivou avaliar os critérios clínicos e fatores de risco que levaram os clínicos a suspeitarem da hemoparasitose e correlaciona-los com os perfis hematológico, parasitológico e sorológico dos animais suspeitos de babesiose canina atendidos no Hospital Veterinário de Uberaba (HVU). 77 animais suspeitos de hemoparasitose foram separados em dois grupos: com sinais compatíveis (GCSC n=7) e sem sinais compatíveis (GSSC n=70) e os dados clínicos, epidemiológicos, hematológico, parasitário (P) e sorológico (S) foram obtidos e tabulados. Notou-se que sexo, idade e raça não difeririam entre os grupos e que os sinais clínicos e/ou fatores de risco mais predominantes no GCSC foram presença de carrapatos (100%), esplenomegalia (42,85%), icterícia (14,28%). As alterações hematológicas prevalentes no GCSC foram anemia normocítica normocrômica (57,14%), eosinopenia (71,43%), leucocitose (57,14%) e trombocitopenia (85,71%) enquanto que no GSSC observou-se os eritrograma normal (47,14%), neutrofilia (42,85%), leucopenia (12,85%) e trombocitopenia (55,71%). A positividade parasitológica foi observada apenas no GSSC (4,28%). No exame sorológico detectou-se presença de anticorpos anti-Babesia em 71,43% e 77,15% dos animais do GCSC e GSSC, respectivamente. Após a separação dos subgrupos S1(P-S-), S2 (P+S+), S3 (P-S+) e S4 (P+S-) pode-se notar que no GCSC, houve predomínio da anemia normocítica normocrômica nos animais do S1 (100% - 2/2) e no S3 (40% - 3/5), e no GSSC a normalidade eritrocitária foi a mais prevalente no S1 (68,75% - 11/16) e S3 (39,21% - 20/51). Nas alterações leucocitárias, observou-se desvio à esquerda regenerativo em 50% (1/2) dos cães do GCSC no S1 e 60% (3/5) no S3 e no GSSC, em 43,75% (7/16) dos animais do S1. A normalidade leucocitária predominou nos subgrupos S2 e S3 do GSSC. Trombocitopenia foi observada em 100% dos cães do GCSC pertencentes ao S1 e 80% (4/5) do S3, e no GSSC em 50% (8/16) no S1, 66,67% (2/3) no S2 e 56,86% (29/51) no S3. Com os resultados obtidos concluiu-se que para diagnóstico da babesiose canina, é necessário não apenas avaliar os achados clínicos e hematológicos dos animais, como também realizar exames laboratoriais específicos, a fim de instituir um tratamento adequado ao paciente.

ABSTRACT Haemoparasitosis caused by Babesia canis is an important disease that has a high number of cases in the veterinary medical clinic and can lead the patient to death. It is a disease that causes similar and nonspecific clinical signs to other diseases such as erlichiosis, rangeliosis and anaplasmosis, thus hindering an accurate diagnosis. In addition, its risk factor is the presence of ticks, which are also transmitters of other diseases. Thus, the present study aimed to evaluate the clinical criteria and risk factors that led clinicians to suspect hemoparasitosis and to correlate them with the hematological, parasitological (P) and serological profiles (S) of animals suspected of canine babesiosis seen at the Veterinary Hospital of Uberaba (HVU). 77 animals suspected of hemoparasitosis were separated into two groups: with compatible signals (GCSC n=7) and without compatible signals (GSSC n=70) and clinical, epidemiological, hemoatological, parasitic and serological data were obtained and tabulated. It was noted that gender, age and race would not differ between groups and that the most prevalent clinical signs and / or risk factors in the GCSC were ticks (100%), splenomegaly (42,85%), jaundice (14,28%). The hematological changes prevalent in the GCSC were normocytic normochromic anaemia (57,14%), eosinopenia (71,43%), leukocytosis (57,14%) and thrombocytopenia (85,71%) and in GSSC normal erythrogram (47,14%), neutrophilia (42,85 %), leucopenia (12,85%) and thrombocytopenia (55,71%). Blood smear was performed which was positive only in GSSC (4,28%). Serological examination revealed anti-Babesia antibodies in 71,43% e 77,15% of GCSC and GSSC animals, respectively. After the separation of the subgroups S1 (P-S-), S2 (P + S +), S3 (P-S +) and S4 (P + S-), it can be noted that in GCSC, there was a predominance of normochromic normocytic anaemia in S1 animals (100% -2/2) and S3 (40% 3/5), and in GSSC erythrocyte normality was the most prevalent in S1 (68.75% - 11/16) and S3 (39,21% - 20/51). In leukocyte alterations, neutrophilia leukocytosis was observed with the presence of left deviation regenerative in 50% (1/2) of GCSC dogs in S1 and 60% (3/5) in S3, and GSSC in 43,75 % (7/16) of S1 animals. Leukocyte normality predominated in GSSC subgroups S2 and S3. Thrombocytopenia was observed in 100% of GCSC dogs belonging to S1 and 80% (4/5) of S3, and in GSSC in 50% (8/16) in S1, 66,67% (2/3) in S2 and 56,86% (29/51) in S3. With the obtained results it was concluded that for diagnosis of canine babesiosis, it is necessary not only to evaluate the clinical and haematological findings of the animals, but also to perform specific laboratory exams, in order to establish an appropriate treatment to the patient.

CARACTERIZAÇÃO CLÍNICA, ANATOMOPATOLÓGICA E HEMATOLÓGICA DE CÃES NATURALMENTE INFECTADOS PELO VÍRUS DA CINOMOSE E SUA DETECÇÃO NO NÓ SINOATRIAL PELA TÉCNICA DE PCR

A cinomose é uma doença sistêmica viral e endêmica que acomete mamíferos terrestres e aquáticos e grandes felinos, sendo que a espécie mais acometida é o cão. Outras doenças, como a Erlichiose Canina (EC) pode ocorrer concomitantemente com a cinomose pelo seu caráter imunossupressor. Objetivou-se analisar os achados clínicos e hematológicos (leucograma, plaquetograma e eritrograma) de cães sorologicamente positivos para cinomose, e avaliar a ocorrência concomitante de cinomose e EC. Outro objetivo foi identificar o vírus da cinomose canina no nó sinoatrial (NSA) de cães sorologicamente positivos para cinomose, através da reação em cadeia da polimerase, precedida de transcrição reversa (RT-PCR), além de analisar os achados macroscópicos e histológicos da cinomose no coração e outros tecidos. Foram selecionados 22 cães com sintomatologia sugestiva de cinomose. Amostras de sangue foram coletadas e submetidas à análise automatizada. Realizou-se ainda testes sorológicos para confirmação do diagnóstico de cinomose e EC. Todos os 22 cães que foram selecionados apresentando sintomatologia sugestiva de cinomose foram soropositivos e, destes, cinco (29,41%) foram soropositivos para erlichiose concomitantemente. Os dados hematológicos dos 17 cães soropositivos somente para a cinomose demonstraram que estes animais apresentaram discreta anemia normocítica normocrômica e leucocitose com neutrofilia. Animais com cinomose e erlichiose eram jovens e apresentaram valores de leucócitos dentro da normalidade e leve trombocitopenia. Quanto à vacinação, 5/22 (22,7%) possuía vacinação completa, segundo protocolo estabelecido no Hospital Veterinário da Universidade Federal de Uberlândia. Dos cães estudados, 7/22 (31,8%) não eram vacinados. 6/22 (27,2%) dos cães, possuía vacinação incompleta e 4/22 (18,18%) não possuía informação a este respeito. Alterações cardíacas macroscópicas e microscópicas, principalmente dilatação cardíaca e miocardite, são frequentemente observadas em cães com cinomose. Somente um (5,88%) cão apresentou fragmento alvo de 319 bp para cinomose utilizando os primers VCC1 e VCC2, no nó sinoatrial. Conclui-se que o VCC pode localizar-se no nó sinoatrial de cães naturalmente infectados, como demonstrado neste estudo pela técnica de RT-PCR, reforçando a hipótese de que o VCC é capaz de provocar lesões inflamatórias no nó sinoatrial dessa espécie. Inclusões virais nas células epiteliais da bexiga são importante achado microscópico para diagnóstico da cinomose.

Distemper is a systemic viral disease and endemic that affects terrestrial and aquatic mammals and big felines, but the most affected species is the dog. Other diseases, such as Canine Erlichiosis (CE) can occur concomitantly with distemper due to its immunosuppressive character. The objective was to analyze the clinical and hematological findings (leukogram, plaque, and erythrogram) of dogs serologically positive for distemper, and to evaluate the concomitant occurrence of distemper and CE. Another objective was to identify the canine distemper virus in the sinoatrial node (SAN) of dogs serologically positive for distemper, through the polymerase chain reaction, preceded by reverse transcription (RT-PCR), and to analyze macroscopic and histological findings of distemper in the heart and other tissues. Twenty-two dogs with symptomatology suggestive of distemper were selected. Samples of blood were collected and submitted to automated analysis. Serological tests were also performed to confirm the diagnosis of distemper and CE. All 22 dogs that were selected presenting symptomatology suggestive of distemper were seropositive and, of these, five (29.41%) were seropositive for concomitant erlichiosis. The hematological data of the 17 seropositive dogs only for the distemper showed that these animals showed a mild normochromic normocytic anemia and leukocytosis with neutrophilia. Animals with distemper and erlichiosis were young and had leukocyte values within normal range and mild thrombocytopenia. Most dogs with distemper were not vaccinated. Right heart dilation was observed in 13 dogs (76.47%) and left concentric hypertrophy in two dogs (11.76%). Microscopically, lymphocytic myocarditis was observed in four (23.53%) dogs and 41.18% (7/17) presented viral inclusion corpuscles in the bladder epithelium. Only one (5.88%) dog presented a 319 bp target fragment for distemper using primers VCC1 and VCC2 at the sinoatrial node. It is concluded that VCC can be located in the sinoatrial node of naturally infected dogs, as demonstrated in this study by the RT-PCR technique, reinforcing the hypothesis that distemper virus is capable of causing inflammatory lesions in the sinoatrial node of this species. Macroscopic and microscopic cardiac changes, mainly cardiac dilation and myocarditis, are frequently observed in dogs with distemper. Viral inclusions in bladder epithelial cells are an important microscopic finding for the diagnosis of distemper.

Detecção molecular de Ehrlichia canis em cães e em órgãos de seus respectivos carrapatos

A erliquiose canina apresenta elevada ocorrência na rotina da clínica médica de pequenos animais. Esta bactéria multiplica-se nas células epiteliais do intestino, nos hemócitos e nas células das glândulas salivares do carrapato Riphicephalus sanguineus, onde ocorre a transmissão transestadial e provavelmente não ocorre transmissão transovariana. O objetivo do presente estudo foi detectar molecularmente Ehrlichia canis em amostras de linfonodos e medulas ósseas de cães e nos intestinos, ovários e glândulas salivares de seus respectivos carrapatos R. sanguineus. Assim, 720 artrópodes fêmeas (dez de cada animal) foram removidos dos 72 cães examinados. Em seguida, foram efetuadas punções aspirativas de linfonodos e medulas ósseas. Após a dissecação dos carrapatos, seus órgãos (intestinos, ovários e glândulas salivares), bem como as amostras puncionadas de linfonodos e medulas ósseas dos cães foram testadas por meio da Reação em Cadeia da Polimerase (nested-PCR) para amplificaçãode um fragmento do gene 16S do ácido ribonucleico ribossomal (rRNA) de E. canis e testados também por meio da PCR em Tempo Real Quantitativa (qPCR) para E. canis, baseada em um fragmento do gene dsb. A detecção por meio da nested-PCR foi de 80,5% nos linfonodos e 44,4% nas medulas ósseas, havendo diferença significativa (p<0,05). Já em relação às nested-PCRs dos órgãos dos carrapatos, observamos positividade de 22% nos intestinos, 11% nos ovários e 7% nas glândulas salivares . Na qPCR a detecção foi de 70,8% e 44,4% nos linfonodos e medulas ósseas, respectivamente (p<0,05) e de 31,9% nos intestinos, 10,0% nos ovários e 15, 2% nas glândulas salivares dos carrapatos estudados. As cargas parasitárias médias nos linfonodos foram de 1473,79 Cópias de um fragmento do gene dsbde E. canis/µL, nas medulas ósseas de 2080,09 Cópias/µL e nos intestinos, ovários e glândulas salivares as quantificações foram de 1211,53 Cópias/µL, 2602,01 Cópias/µL e de 49,23 Cópias/µL respectivamente. Nós concluímos que houve maior detecção molecular em linfonodos tanto na nested -PCR quanto na qPCR e que a bactéria estava presente e a níveis quantificáveis pela primeira vez em ovários de R. sanguineus sensu lato.

The canine erlichiosis presents a high level of occurrence in the routine of the medical clinic of small animals. This bacteria multiplies in the epithelial cells of the intestine, in the hemocytes and in the salivary glands of the tick Riphicephalus sanguineus, where there is a transestadial transmission and probably does not occur a transovarial transmission. The objective of our study was to molecularly detect Ehrlichia canis in samples of lymph nodes and bone marrow of dogs and in the intestines, ovaries and salivary glands of their respective ticks R. sanguineus. Therefore, 720 female arthropods (ten of each animal) were removed from the 72 evaluated dogs. Next, aspirative punches were made of lymph nodes e bone marrow. After the dissection of the ticks, their organs (intestines, ovaries and salivary glands), like the punches samples of lymph nodes and bone marrow of the dogs were tested by Polymerase Chain Reaction (nested-PCR) for amplification of the gene 16S rRNA of E. canis and also tested by the Quantitative Real Time PCR (qPCR) to E. canis, based on a fragment of the gene dsb. The detection of the refer pathogen by the nested-PCR was 80,5% in lymph nodes and 44,4% in bone marrows, showing a significant difference (p<0,05). ). In relation to the nested-PCRs of the ticks organs, we observed positivity of 22% on the intestines, 11% on the ovaries and 7% on the salivary glands. In the qPCR the detection was of 70,8% and 4 4,4% on the lymph nodes e bone marrows, respectively (p<0,05) and of 31,9% on the intestines, 10,0% on the ovaries and 15, 2% on the salivary glands of the studied ticks. The absolute quantification on the lymph nodes and bone marrow of the dogs was of1473,79 Copies of a fragment of the gene dsb of E. canis/µL, in bone marrows of 2080,09 copies/µL and in the intestines, ovaries and salivary glands the quantification were of 1211,53 copies/µL, 2602,01 copies/µL and of 49,23 copies/µL respectively. We concluded that there was a major molecular detection on lymph nodes on the nested-PCR as much as the qPCR and that the bacteria was present and in quantifiable levels for the first time in ovaries of R. sanguineus sensu lato.

ELETROFORESE DAS PROTEÍNAS SÉRICAS E URINÁRIAS DE CÃES COM ERLIQUIOSE SUBCLÍNICA

A erliquiose é uma hemoparasitose que acomete cerca de 20 a 30% dos cães atendidos nas clínicas veterinárias do Brasil, podendo levá-los ao óbito. Predomina nas regiões mais quentes do planeta devido ao fato de seu hospedeiro intermediário, um artrópode, prevalecer nos locais de altas temperaturas. Em função da gravidade da enfermidade para os animais e ao potencial zoonótico da doença, estudos envolvendo as possíveis alterações renais são essenciais para o diagnóstico e prognóstico da doença. Neste ensaio, objetivou-se avaliar as proteínas séricas e urinárias de cães com erliquiose na fase subclínica, por meio da técnica de eletroforese em gel de poliagrilamida contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE). Os animais foram devidamente distribuídos em grupo controle (GC), 18 cães saudáveis e grupo doente (GD), integrado por 17 cães acometidos por erliquiose subclínica, sendo que o diagnóstico da infecção foi confirmado ou excluído levando-se em conta a associação de exames clínicos, sorológicos e PCR. Os resultados mostraram que os cães na fase subclínica da erliquiose apresentaram alterações laboratoriais como, trombocitopenia, hiperglobulinemia com hipoalbuminemia compensatória e aumento de proteínas totais, além de anemia. A partir do traçado eletroforético sérico, concluiu-se que os cães infectados na fase subclínica apresentaram elevação na concentração de transferrina, IgG de cadeia pesada, haptoglobina, alfa 1-glicoproteína ácida e proteína de peso molecular 23 kDa. A análise do traçado eletroforético urinário dos animais experimentais, associada com o resultado da UPC, o qual revela proteinúria limítrofe nos indivíduos doentes, demonstraram que existem lesões renais, tanto em nível glomerular quanto tubular, em cães com erliquiose na fase subclínica, entretanto, mais estudos se fazem necessários para esclarecer e detalhar melhor as referidas lesões.

Ehrlichiosis is a hemoparasitosis that affects around 20 to 30% of dogs treated at veterinary clinics in Brazil, which may lead the animal to death. It predominate in the warmer regions of planet because of its intermediate host, an arthropod, that lives in high temperature regions. Due to the severity of the disease to animals and its zoonotic potencial, studies involving the possibles renal disorders are essential for the diagnosis and patient's prognosis. In this trial aimed to evaluate serum and urinary proteins of dogs with ehrliquiosis in the subclinical stage, by electrophoresis in poliacrilamida gel containing sodium dodecyl sulfate (SDS-PAGE). The animals were divided into control group (CG), 18 health dogs and sick group (SG), the last one with 17 dogs with diagnosis of erlichiosis subclinical, and the diagnosis of infection was conformed or excluded by association of clinical exams, serological tests and PCR. The results showed that dogs on the subclinical stage of ehrlichiosis had laboratory changes as thrombocytopenia, hyperglobulinemia associated with compensatory hypoalbuminemia and increased total protein, and anemia. From the serum electrophoresis, it was concluded that the infected dogs in subclinical phase had increased concentration of transferrin, the heavy chain of IgG, haptoglobin, alpha 1-acid glycoprotein and protein molecular weight 23 kDa. The analysis of urinary electrophoretic trace of the experimental animals, the result associated with the UPC, which shows borderline proteinuria in diseased dogs, showed that there renal lesions, both as tubular glomerular level, in dogs with erliquiosis in the subclinical stage, however, more studies are needed to clarify and better detail these injuries.

Fase aguda da ehrlichiose monocítica canina: um estudo retrospectivo de 10 anos / Acute phase of canine monocitic ehrlichiosis: a ten years study

Um levantamento de mais de dez anos (janeiro de 1990 a maio de 2000) dos casos de Ehrlichiose Monocítica Canina (CME) diagnosticados pela presença de mórula de E. canis em células monocelulares no esfregaço de sangue periférico, no Hospital Veterinário da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da UNESP, campus de Botucatu, demonstrou maior incidência da doença em fase aguda nos meses mais quentes do ano. As principais alterações hematológicas encontradas foram anemia não-regenerativa de grau moderado, hipoproteinemia, trombocitopenia, leucopenia por neutropenia e linfopenia absolutas(AU)

A ten-years study (from january 1990 to may 2000) of the canine Monocitic Ehrlichiosis (CME) diagnosed by the presence of the Erlichia canis morulae in mononuclear cells at the Clinical Laboratory of the Hospital Veterinário da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, in Botucatu, Brazil, showed an increased frequency of the disease in the acute phase, during the warm seasins of the year. Some of the more important hematological findings were: an arregenerative moderate anemia, hipoproteinemia, thrombocytopenia and leucopenia with absolute neutropenia and lymphopenia(AU)