Cross-genera amplification and identification of Colpodella sp. with Cryptosporidium primers in fecal samples of zoo felids from northeast China

Abstract The protozoans include many intracellular human pathogens. Accurate detection of these pathogens is necessary to treat the diseases. In clinical epidemiology, molecular identification of protozoan is considered a more reliable and rapid method for identification than microscopy. Among these protozoans, Cryptosporidium considered being one of the important water-borne zoonotic pathogens and a major cause of a diarrheal disease named cryptosporidiosis in humans, domestic animals, and wild animals. This study was aimed to identify Cryptosporidium in zoo felids (N= 56) belonging to different zoo of China, but accidentlly Colpodella was encountered in the zoo felids sample and phylogenetic data confirmed this unexpected amplification from fecal samples using two-step nested-PCR. Phylogenetic analysis revealed the fact about the specific primers used previously by many researchers and cross-genera amplification. We came to know that genetically sequenced amplicon gives more accurate identification of species. This study suggests more investigation on Colpodella which has been neglected previously but gains the attention of researchers after identified from humans and animals and has been known to correlate with neurological symptoms in patients.

Resumo Os protozoários incluem muitos patógenos humanos intracelulares. A detecção acurada desses patógenos é necessária para tratar as doenças. Na epidemiologia clínica, a identificação molecular de protozoários é considerada o método de identificação mais confiável e rápido do que a microscopia. Entre esses protozoários, o Cryptosporidium é considerado um dos importantes patógenos zoonóticos transmitidos pela água e uma das principais causas de uma doença diarreica denominada criptosporidiose em humanos, animais domésticos e selvagens. Este estudo teve como objetivo identificar Cryptosporidium em zoofelídeos (N = 56) pertencentes a diferentes zoológicos da China, mas acidentalmente Colpodella foi encontrada na amostra de zoofelídeos e os dados filogenéticos confirmaram essa amplificação inesperada de amostras fecais usando nested-PCR em duas etapas. A análise filogenética revelou o fato sobre os primers específicos usados anteriormente por muitos pesquisadores e a amplificação entre gêneros. Ficamos sabendo que o amplicon sequenciado geneticamente fornece uma identificação mais acurada das espécies. Este estudo sugere mais investigação sobre Colpodella, que foi negligenciada anteriormente, mas ganha a atenção dos pesquisadores depois de identificada em humanos e animais e é conhecida por se correlacionar com sintomas neurológicos em pacientes.

Cross-genera amplification and identification of Colpodella sp. with Cryptosporidium primers in fecal samples of zoo felids from northeast China / Amplificação cruzada de gêneros e identificação de Colpodella sp. com iniciadores de Cryptosporidium em amostras fecais de zoofilia do nordeste da China

The protozoans include many intracellular human pathogens. Accurate detection of these pathogens is necessary to treat the diseases. In clinical epidemiology, molecular identification of protozoan is considered a more reliable and rapid method for identification than microscopy. Among these protozoans, Cryptosporidium considered being one of the important water-borne zoonotic pathogens and a major cause of a diarrheal disease named cryptosporidiosis in humans, domestic animals, and wild animals. This study was aimed to identify Cryptosporidium in zoo felids (N= 56) belonging to different zoo of China, but accidentlly Colpodella was encountered in the zoo felids sample and phylogenetic data confirmed this unexpected amplification from fecal samples using two-step nested-PCR. Phylogenetic analysis revealed the fact about the specific primers used previously by many researchers and cross-genera amplification. We came to know that genetically sequenced amplicon gives more accurate identification of species. This study suggests more investigation on Colpodella which has been neglected previously but gains the attention of researchers after identified from humans and animals and has been known to correlate with neurological symptoms in patients.

Os protozoários incluem muitos patógenos humanos intracelulares. A detecção acurada desses patógenos é necessária para tratar as doenças. Na epidemiologia clínica, a identificação molecular de protozoários é considerada o método de identificação mais confiável e rápido do que a microscopia. Entre esses protozoários, o Cryptosporidium é considerado um dos importantes patógenos zoonóticos transmitidos pela água e uma das principais causas de uma doença diarreica denominada criptosporidiose em humanos, animais domésticos e selvagens. Este estudo teve como objetivo identificar Cryptosporidium em zoofelídeos (N = 56) pertencentes a diferentes zoológicos da China, mas acidentalmente Colpodella foi encontrada na amostra de zoofelídeos e os dados filogenéticos confirmaram essa amplificação inesperada de amostras fecais usando nested-PCR em duas etapas. A análise filogenética revelou o fato sobre os primers específicos usados anteriormente por muitos pesquisadores e a amplificação entre gêneros. Ficamos sabendo que o amplicon sequenciado geneticamente fornece uma identificação mais acurada das espécies. Este estudo sugere mais investigação sobre Colpodella, que foi negligenciada anteriormente, mas ganha a atenção dos pesquisadores depois de identificada em humanos e animais e é conhecida por se correlacionar com sintomas neurológicos em pacientes.

Cross-genera amplification and identification of Colpodella sp. with Cryptosporidium primers in fecal samples of zoo felids from northeast China / Amplificação cruzada de gêneros e identificação de Colpodella sp. com iniciadores de Cryptosporidium em amostras fecais de zoofilia do nordeste da China

The protozoans include many intracellular human pathogens. Accurate detection of these pathogens is necessary to treat the diseases. In clinical epidemiology, molecular identification of protozoan is considered a more reliable and rapid method for identification than microscopy. Among these protozoans, Cryptosporidium considered being one of the important water-borne zoonotic pathogens and a major cause of a diarrheal disease named cryptosporidiosis in humans, domestic animals, and wild animals. This study was aimed to identify Cryptosporidium in zoo felids (N= 56) belonging to different zoo of China, but accidentlly Colpodella was encountered in the zoo felids sample and phylogenetic data confirmed this unexpected amplification from fecal samples using two-step nested-PCR. Phylogenetic analysis revealed the fact about the specific primers used previously by many researchers and cross-genera amplification. We came to know that genetically sequenced amplicon gives more accurate identification of species. This study suggests more investigation on Colpodella which has been neglected previously but gains the attention of researchers after identified from humans and animals and has been known to correlate with neurological symptoms in patients.(AU)

Os protozoários incluem muitos patógenos humanos intracelulares. A detecção acurada desses patógenos é necessária para tratar as doenças. Na epidemiologia clínica, a identificação molecular de protozoários é considerada o método de identificação mais confiável e rápido do que a microscopia. Entre esses protozoários, o Cryptosporidium é considerado um dos importantes patógenos zoonóticos transmitidos pela água e uma das principais causas de uma doença diarreica denominada criptosporidiose em humanos, animais domésticos e selvagens. Este estudo teve como objetivo identificar Cryptosporidium em zoofelídeos (N = 56) pertencentes a diferentes zoológicos da China, mas acidentalmente Colpodella foi encontrada na amostra de zoofelídeos e os dados filogenéticos confirmaram essa amplificação inesperada de amostras fecais usando nested-PCR em duas etapas. A análise filogenética revelou o fato sobre os primers específicos usados anteriormente por muitos pesquisadores e a amplificação entre gêneros. Ficamos sabendo que o amplicon sequenciado geneticamente fornece uma identificação mais acurada das espécies. Este estudo sugere mais investigação sobre Colpodella, que foi negligenciada anteriormente, mas ganha a atenção dos pesquisadores depois de identificada em humanos e animais e é conhecida por se correlacionar com sintomas neurológicos em pacientes.(AU)

Cross-genera amplification and identification of Colpodella sp. with Cryptosporidium primers in fecal samples of zoo felids from northeast China / Amplificação cruzada de gêneros e identificação de Colpodella sp. com iniciadores de Cryptosporidium em amostras fecais de zoofilia do nordeste da China

Abstract The protozoans include many intracellular human pathogens. Accurate detection of these pathogens is necessary to treat the diseases. In clinical epidemiology, molecular identification of protozoan is considered a more reliable and rapid method for identification than microscopy. Among these protozoans, Cryptosporidium considered being one of the important water-borne zoonotic pathogens and a major cause of a diarrheal disease named cryptosporidiosis in humans, domestic animals, and wild animals. This study was aimed to identify Cryptosporidium in zoo felids (N= 56) belonging to different zoo of China, but accidentlly Colpodella was encountered in the zoo felids sample and phylogenetic data confirmed this unexpected amplification from fecal samples using two-step nested-PCR. Phylogenetic analysis revealed the fact about the specific primers used previously by many researchers and cross-genera amplification. We came to know that genetically sequenced amplicon gives more accurate identification of species. This study suggests more investigation on Colpodella which has been neglected previously but gains the attention of researchers after identified from humans and animals and has been known to correlate with neurological symptoms in patients.

Resumo Os protozoários incluem muitos patógenos humanos intracelulares. A detecção acurada desses patógenos é necessária para tratar as doenças. Na epidemiologia clínica, a identificação molecular de protozoários é considerada o método de identificação mais confiável e rápido do que a microscopia. Entre esses protozoários, o Cryptosporidium é considerado um dos importantes patógenos zoonóticos transmitidos pela água e uma das principais causas de uma doença diarreica denominada criptosporidiose em humanos, animais domésticos e selvagens. Este estudo teve como objetivo identificar Cryptosporidium em zoofelídeos (N = 56) pertencentes a diferentes zoológicos da China, mas acidentalmente Colpodella foi encontrada na amostra de zoofelídeos e os dados filogenéticos confirmaram essa amplificação inesperada de amostras fecais usando nested-PCR em duas etapas. A análise filogenética revelou o fato sobre os primers específicos usados ​​anteriormente por muitos pesquisadores e a amplificação entre gêneros. Ficamos sabendo que o amplicon sequenciado geneticamente fornece uma identificação mais acurada das espécies. Este estudo sugere mais investigação sobre Colpodella, que foi negligenciada anteriormente, mas ganha a atenção dos pesquisadores depois de identificada em humanos e animais e é conhecida por se correlacionar com sintomas neurológicos em pacientes.

Desafios na andrologia de espécies selvagens, com ênfase em felídeos / Challenges in wild species andrology, with an emphasis on felids

Na prática, compreender a anatomia reprodutiva, a fisiologia e o comportamento do macho, da espécie selvagem com a qual se está trabalhando, é essencial para a avaliação andrológica e para a reprodução bem sucedida. Neste artigo damos especial ênfase à andrologia de felídeos selvagens. O profissional pode ser chamado para solucionar problemas quando a espécie apresenta dificuldade de reprodução em cativeiro e/ou encontra-se ameaçada de extinção. Baixas taxas de fertilidade e de prenhez podem estar associadas ao macho, com influências do estresse pelo cativeiro, nutrição inadequada e erros de manejo reprodutivo. E também, as instituições que mantêm essas espécies sob cuidado humano poderão ser auxiliadas no manejo reprodutivo com o exame andrológico periódico, que pode ser acompanhado de criopreservação de sêmen para formação ou manutenção de um banco de reserva genômica. Como componente de um programa holístico de conservação, incluindo os estudos de ecologia de campo, esta estratégia fortalece ainda mais o vínculo entre as populações ex situ e in situ.(AU)

In practice, understanding the male reproductive anatomy, physiology and the behavior, of the wild species that you are working, is essential for andrological assessment and successful reproduction. In this article we give special emphasis to the andrology of wild felids. The professional can be called to solve problems when the species has difficulty reproducing in captivity and/or is threatened with extinction. Low fertility and pregnancy rates may be associated with the male, with influences from stress in captivity, inadequate nutrition and reproductive management errors. Also, the institutions that keep these species under human care can be assisted in reproductive management with periodic andrological examination, which can be accompanied by semen cryopreservation for the formation or maintenance of a genome resource bank. As a component of a holistic conservation program, including field ecology studies, this strategy further strengthens the link between ex situ and in situ populations.(AU)

Pyometra in a tiger (Panthera tigris)

Background: Captive tigers can live a long life, around 26 years. Among the diseases described some of non-infectious origin are quite common, such as chronic kidney disease, spondylosis, and biliary cysts or tumors. On the other hand, pyometra has been frequently reported in lions, who have a higher risk of developing the disease than tigers and leopards. Pyometra is a disease with few descriptions in tigers and it may be related to the physiological features of the species. The animal is listed as Endangered on the International Union for the Conservation of Nature Red List of Threatened. The present report aims to describe the diagnosis and treatment of pyometra in a captive tigress. Case: A 7-year-old entire female tiger (Panthera tigris) weighing 140 kg was presented with a 3-day history of anorexia and prostration. For clinical examinations, collection of laboratory and imaging tests, the patient initially underwent dissociative anesthesia to allow catheterization of the cephalic vein and intravenous general anesthesia for orotracheal intubation followed by anesthetic maintenance in isoflurane. On general physical examination, the animal had normal colored mucosa, vital parameters within normal limits, and a body condition score of 6 on a scale of 9. There was no presence of vulvar secretion. The blood count and the biochemical exams showed values within the normal range for the species. The chest X-ray in the right and left views did not demonstrate pulmonary abnormalities. Ultrasonographic examination of the abdomen showed distension of the uterine body and horns, which have intraluminal hyperechoic fluid content without flocculation. Based on the imaging exam, the diagnosis was suggestive of pyometra. Exploratory celiotomy was performed via ventral midline, confirming the condition, which was treated by ovariohysterectomy. The surgical technique was performed as described for therapeutic ovariohysterectomy in dogs and cats. Culture of uterine content identified Escherichia coli. The histological analysis identified diffuse endometritis associated with follicular cysts. The tiger had complete recovery without any complications. The patient was releasing 13 days after the surgical procedure and in the last contact four months after the surgery, it was in perfect health conditions. Discussion: Pyometra in large exotic felids has been occasionally reported, mainly in animals more than 10 years of age. Although the tigress in the report is estimated to be seven years old. The patient in question started with anorexia and prostration and as there was already a history of cystic endometrial hyperplasia, a possible pyometra was suspected, despite being uncommon in the species. There was not vaginal discharge. The definitive diagnosis was by means of ultrasound examination and ovariohysterectomy was performed. Abdominal surgery for these large felids is complex, due to the intra-abdominal volume the flank approach or by laparoscopic is suggested, however in this case a ventral midline incision was performed without intercurrences and complications in the post-operative period. The surgical technique like that used in small animals was effective for the treatment of pyometra in the tigress with the use of ovariohysterectomy. Culture of uterine content identified Escherichia coli, which has been the most commonly isolated pathogen in pyometra of large felids. It was concluded that, as in bitches with pyometra, early diagnosis and surgical treatment is ideal for the patient's recovery.

Urethral obstruction secondary to Staphylococcus felis chronic urethritis and hepatoid gland adenoma in a captive ocelot (Leopardus pardalis)

A male adult ocelot (Leopardus pardalis) kept under human care developed anuria, which progressed to death. Grossly, the urinary bladder was markedly dilated and filled with red discolored urine containing blood clots. In addition, the animal had a hepatoid cell adenoma adjacent to the urethra, which likely caused partial urethral occlusion. Microscopically, there was a predominantly neutrophilic, fibrinous and hemorrhagic urethritis, cystitis, and pyelonephritis with intralesional gram-positive cocci. Microbiologic culture followed by MALDI-TOF MS analysis resulted in the identification of isolates from the urine and urethra as Staphylococcus felis.(AU)

Daily and seasonal activity patterns of a felid assemblage in a forest-grassland mosaic in southern Brazil / Padrões de atividade diários e sazonais de uma assembleia de felinos em um mosaico de floresta-campo no sul do Brasil

The mechanisms of ecological segregation involved in the coexistence between Neotropical felids are the key to support strategies for conservation. Due to their inconspicuous and elusive behavior, camera trapping constitute a strategic, non-invasive method to study these species. The present work aimed to evaluate the daily and seasonal activity patterns of four felid species: Leopardus guttulus (Hensel, 1872), L. pardalis (Linnaeus, 1758), L. wiedii (Schinz, 1821) and Puma concolor (Linnaeus, 1771), in the Papagaios-de-Altitude Private Protected Area, state of Santa Catarina, southern Brazil. Data were collected from January 2018 to December 2019, using 25 sites of camera traps among the study area. We collected 624 independent records from L. guttulus (108), L. pardalis (55), L. wiedii (77) and P. concolor (384) in a sampling effort of 12,266 camera-traps/day. All species analysed showed a non-uniform distribution of daily activity, when considering the two years. We report the peak of seasonal activity for all species between the months of June and September, coinciding with the Araucaria nut harvest in the study area, and with the increase in populations of small rodents. We also report a high overlap between the activity patterns of the four species. The daily and seasonal activity patterns of the species in this study seem to reflect the intrinsic dynamics of the Araucaria Forest, as well as possible adaptations to prey availability.(AU)

Os mecanismos de segregação ecológica envolvidos na coexistência entre felídeos neotropicais são a chave para subsidiar estratégias para sua conservação. Por apresentarem comportamento inconspícuo e esquivo, as armadilhas fotográficas constituem um método não invasivo estratégico para estudá-los. O presente trabalho buscou avaliar o padrão de atividade diário e sazonal de quatro espécies de felídeos: Leopardus guttulus (Hensel, 1872), L. pardalis (Linnaeus, 1758), L. wiedii (Schinz, 1821) e Puma concolor (Linnaeus, 1771), na RPPN Papagaios-de-Altitude, no estado de Santa Catarina, sul do Brasil. Coletamos os dados através de 25 sítios de armadilhas fotográficas na área de estudo. Obtivemos 624 registros independentes de L. guttulus (108), L. pardalis (55), L. wiedii (77) e P. concolor (384) em um esforço amostral de 12.266 armadilhas/dia. Todas as espécies analisadas apresentaram distribuição de atividade diária não uniforme, quando considerados os dois anos. Relatamos o pico de atividade sazonal de todas as espécies entre os meses de junho a setembro, coincidindo com a safra de pinhão na região, e com o aumento nas populações de pequenos roedores. Também relatamos uma alta sobreposição entre os padrões de atividade das quatro espécies. A atividade diária e sazonal das espécies neste estudo parece refletir as dinâmicas intrínsecas da Floresta Ombrófila Mista, além de possíveis adaptações à disponibilidade de presas.(AU)

Full confluency, serum starvation, and roscovitine for inducing arrest in the G0/G1 phase of the cell cycle in puma skin-derived fibroblast lines

The puma population is constantly decreasing, and cloning by somatic cell nuclear transfer can be used to conserve the species. One of the factors determining the success of the development of cloned embryos is the cell cycle stage of the donor cells. We evaluated the effects of full confluency (~100%), serum starvation (0.5% serum), and roscovitine (15 µM) treatments on the cell cycle synchronization in G0/G1 of puma skin-derived fibroblasts by flow cytometric analysis. Also, we assessed the effects of these synchronization methods on morphology, viability, and apoptosis levels using microscopy tools. The results showed that culturing the cells to confluence for 24 h (84.0%), 48 h (84.6%), and 72 h (84.2%) and serum starvation for 96 h (85.4%) yielded a significantly higher percentage of cells arrested in the G0/G1 (P < 0.05) phase than cells not subjected to any cell cycle synchronization method (73.9%). Nevertheless, while serum starvation reduced the percentage of viable cells, no difference was observed for the full confluence and roscovitine treatments (P > 0.05). Moreover, roscovitine for 12 h (78.6%) and 24 h (82.1%) was unable to synchronize cells in G0/G1 (P > 0.05). In summary, full confluency induces puma fibroblast cell cycle synchronization at the G0/G1 stage without affecting cell viability. These outcomes may be valuable for planning donor cells for somatic cell nuclear transfer in pumas.(AU)

Neospora caninum e toxoplasma gondii: revisão de literatura / Neospora caninum and toxoplasma gondii: review of literature / Neospora caninum y toxoplasma gondii: revisión de literatura

A Neospora caninum e a Toxoplasma gondii são os agentes etiológicos que causam a Neosporose e a Toxoplasmose, respectivamente. Estas duas doenças são consideradas de grande importância econômica e de distribuição mundial, que acometem tanto animais de produção quanto animais domésticos. Apresentam sinais clínicos inespecíficos, sendo a Neosporose frequentemente associada ao abortamento em fêmeas. Ambas enfermidades costumavam ser confundidas, dificultando o diagnóstico. São causadas por protozoários cosmopolitas de ciclos biológicos heteróxenos. O Toxoplasma gondii é responsável por doença clínica em cães e gatos, enquanto o Neospora caninum acomete somente cães. Além disso, não há, até o momento, relatos de Neosporose em humanos, diferente da Toxoplasmose. Ocasionalmente esta pode ocorrer em coiotes, suínos, ovinos, caprinos, equinos, cervídeos e bubalinos. Anticorpos contra Neospora tem sido descrito em raposas, camelos e felídeos. O objetivo da presente revisão, é elucidar a forma de transmissão, sinais clínicos, diagnóstico, tratamento e controle de ambas as doenças, mostrando suas semelhanças, afim de que se possa diagnosticá-las corretamente.(AU)

Neospora caninum and toxoplasma gondii are agents of great economic importance and worldwide distribution that affect production and domestic animals. They present nonspecific clinical signs, and neosporosis is a disease that frequently causes abortion in females, which is considered current, because both used to be confused, making diagnosis difficult. They are protozoan, cosmopolitan, of heterogeneous biological cycles. Toxoplasma gondii is responsible for clinical disease in dogs and cats, while Neospora caninum affects only dogs. Furthermore, there are no reports to date of neosporosis in humans, other than toxoplasmosis. Occasionally it may occur in coyotes, pigs, sheep, goats, horses, deer, and bubaline. Antibodies to Neospora have been described in foxes, camels, and felids. This review aims to elucidate the transmission, clinical signs, diagnosis, treatment, and control of both diseases, showing their similarities, so that they can be correctly diagnosed.(AU)

Neospora caninum y Toxoplasma gondii son los agentes etiológicos que causan Neosporosis y Toxoplasmosis, respectivamente. Estas dos enfermedades se consideran de gran importancia económica y de distribución mundial, afectando tanto al ganado como a los animales domésticos. Presentan signos clínicos inespecíficos y la neosporosis se asocia con frecuencia al aborto en mujeres. Ambas dolencias solían ser erróneas, lo que hacía difícil el diagnóstico. Son causados por protozoos cosmopolitas de ciclos biológicos heterogéneos. Toxoplasma gondii es responsable de enfermedades clínicas en perros y gatos, mientras que Neospora caninum sólo ataca a perros. Además, no se han notificado casos de Neosporosis en humanos hasta el momento, diferente de Toxoplasmosis. Ocasionalmente esto puede ocurrir en coyotes, cerdos, ovejas, cabras, caballos, ciervos y bubalinos. Se han notificado anticuerpos contra la Neospora en zorros, camellos y felinos. El propósito de esta revisión es dilucidar la forma de transmisión, los signos clínicos, el diagnóstico, el tratamiento y el control de ambas enfermedades, mostrando sus similitudes, de manera que puedan ser diagnosticadas correctamente.(AU)

Colheita de sêmen e inseminação artificial em onças-pintadas (Panthera onca) / Semen collection and artificial insemination in jaguars (Panthera onca)

A onça-pintada encontra-se classificada como "quase ameaçada" na lista vermelha de animais ameaçados da União Internacional para Conservação da Natureza (IUCN), com tendência ao declínio na América Latina, o que pode afetar o fluxo gênico elevando o risco de endogamia. Técnicas de reprodução assistida (TRAs) como colheita de sêmen e inseminação artificial (IA), são ferramentas que podem se tornar essenciais a manutenção da diversidade genética desses animais. A colheita de sêmen pode ser realizada por eletroejaculação (EEJ) ou colheita farmacológica (CF), sendo que podem ser aplicadas individualmente ou associadas, embora EEJ tenha se mostrado mais eficiente em inseminação artificial (IA) com sêmen a fresco. Para realização de IA a utilização de progestina oral (altrenogest), seguida da aplicação de gonadotropinas exógenas (Gonadotropina Coriônica equina-eCG e Hormônio Luteinizante suíno-pLH), tem se mostrado eficiente, promovendo ovulações consistentes. IA intratubárica (IA-IT) mostrou-se eficiente, tendo a vantagem de utilizar sêmen com baixo número de espermatozoides. O sucesso alcançado com o nascimento do primeiro filhote de Panthera onca utilizando TRAs se deve a vários fatores, dentre eles, a utilização de um novo protocolo hormonal ajustado à espécie; e a utilização da IA-IT, que possibilitou a utilização de sêmen com reduzido número de espermatozoides viáveis por inseminação.(AU)

The jaguar is classified as "near threatened" according International Union for Conservation of Nature red list, with a decreasing trend in the population of Latin America, increasing the risk of inbreeding. Assisted reproduction techniques (ARTs), such as semen collection and artificial insemination (AI), are tools that can become essential to maintain the genetic diversity of jaguars. Semen collection can be performed by electroejaculation (EEJ) or pharmacological collection (PC); and can be applied individually or associated, however EEJ was more efficient for artificial insemination (AI) with fresh semen. To perform Artificial Insemination (AI), oral progestin (altrenogest) followed exogenous gonadotropins (Gonadotropin Chorionic equine-eCG e Hormone Luteinizing porcine-pLH) application was efficient, promoting consistent ovulations. Similarly, laparoscopic oviductal insemination (IA-IT) was efficient, with the advantage to use low viable spermatozoa number by insemination. The success of jaguar cub birth using ARTs is due to several factors, among than, a new hormonal protocol adjusted to the species; and the use of IA-IT, which allowed the reduction in the number of sperm by insemination.(AU)

Reprodução ex situ de felinos silvestres e seus desafios / Challenges of ex situ reproduction in wild cats

A reprodução ex situ de felinos silvestres assegura a sobrevivência das espécies ameaçadas por meio do estabelecimento e manutenção de populações viáveis em cativeiro. O conhecimento da biologia reprodutiva básica é essencial para o desenvolvimento de planos de manejo reprodutivo (PMRs) eficientes, seja pela reprodução natural ou pela aplicação de técnicas de reprodução assistida (TRAs). Os PMRs visam garantir a representatividade das espécies quanto à variabilidade genética e demográfica baseada nos studbooks. Entretanto, o pareamento de animais selecionados pelos PMRs deve levar em conta, além de fatores genéticos e demográficos, fatores comportamentais e o fenótipo dos animais, uma vez que pode haver consequências negativas caso descendentes de gerações futuras sejam reintroduzidos na natureza. As TRAs estão cada vez mais sendo desenvolvidas para auxiliar na manutenção de populações geneticamente viáveis ex situ que possam contribuir geneticamente com populações in situ. A criopreservação de sêmen e a inseminação artificial (IA) são as TRAs utilizadas atualmente pelos PMR nacionais e internacionais, no entanto, são muitos os desafios para que as populações cativas se reproduzam de maneira adequada visando a manutenção de uma população viável que possa contribuir com populações de vida livre no futuro.(AU)

Reproductive management plans are essential to ensure that imperiled populations maintain adequate genetic and demographic variability and remain representative of the species as a whole. Basic reproductive biology knowledge is essential for the development of efficient reproductive management plans (PMPs), either through natural breeding or through assisted reproductive techniques (ARTs). The PMPs aim to ensure the representativeness of the species in terms of genetic and demographic variability based on studbooks. However, the specific animal pairings should be maintaining adequate genetic, behavioral and the phenotype of the animals, ensuring proper reintroduction of animals into the wild. ARTs have been explored as a means to enhance the conservation of endangered species, focused on maintaining genetic diversity through enhanced animal propagation. Semen cryopreservation and artificial insemination (AI) are used by national and international PMRs, however, there are many challenges for captive populations reproduction in order to maintain a viable population that can contribute for freeliving populations in the future.(AU)

Natural infection and molecular detection of Cytauxzoon felis in a free-ranging Puma concolor in the state of Goiás, Brazil / Infecção natural e detecção molecular de Cytauxzoon felis em Puma concolor de vida livre no estado de Goiás, Brasil

The puma (Puma concolor Linnaeus, 1771), the most widely distributed felid species in the Americas, can be found in all Brazilian biomes. Nevertheless, few studies have focused on hemoparasites in this species. Cytauxzoon felis, a hemoparasite that can infect domestic cats, has also been described in wild felids in Brazil. To the best of our knowledge, this study is the first to diagnose the natural infection and molecular detection of C. felis in a P. concolor in the state of Goiás. This animal presented non-regenerative anemia and inclusion suggestive of piroplasmids within red blood cells. The amplified 551 bp fragment of partial Piroplasmida 18S rRNA gene sequence was 100% identical to corresponding sequences of C. felis available in GenBank. No specific treatment for cytauxzoonosis was administered, and after rehabilitation, the animal was reintroduced into the wild. This finding provides some evidence that P. concolor may act as a natural host of the parasite. The epidemiology, vector and pathogenicity of this hemoparasite in wild and domestic cats in Brazil deserves further investigation.

O puma (Puma concolor Linnaeus, 1771) tem a maior distribuição entre os felídeos das Américas e é encontrado em todos os biomas do Brasil. No entanto, poucos estudos têm se concentrado nos hemoparasitos nesta espécie. Cytauxzoon felis, um hemoparasito que pode infectar gatos domésticos, também foi descrito em felídeos selvagens no Brasil. A saber, este estudo é o primeiro diagnóstico de infecção natural e detecção molecular de C. felis em um P. concolor do estado de Goiás. Este animal apresentou anemia arregenerativa e inclusão de piroplasmídeos nos glóbulos vermelhos. A amplificação do fragmento de 551 pb da sequência parcial do gene Piroplasmorida 18S rRNA foi 100% idêntica a sequências correspondentes de C. felis disponíveis no GenBank. Nenhum tratamento específico para citauxzoonose foi administrado e, após a reabilitação, o animal foi reintroduzido na natureza. Essa descoberta fornece algumas evidências de que P. concolor pode atuar como um hospedeiro natural do parasito. A epidemiologia, vetor e patogenicidade deste hemoparasito em gatos selvagens e domésticos no Brasil merecem uma investigação mais aprofundada.

Research for anti - Toxoplasma gondii antibodies in free-living ducks (Cairina moschata) from Rio de Janeiro, RJ, Brazil / Pesquisa de anticorpos anti - Toxoplasma gondii em patos (Cairina moschata) em vida livre do Rio de Janeiro, RJ, Brasil

Toxoplasmosis is a zoonosis determined by the protozoan Toxoplasma gondii with wide geographic distribution, which affects homeothermic animals, with felids being their definitive hosts and other mammals and birds being their intermediate hosts. Regarding the Latin American bird species Cairina moschata, there are few reports in Brazil of the exposure of these animals to this protozoan. Based on the above, this study aimed to report for the first time the exposure of C. moschata to infection by this parasite in Rio de Janeiro, Brazil, determining the serological frequency of anti-T. gondii antibodies in birds of this species. Sixty-seven specimens of C. moschata were captured in the vicinity of the Rio de Janeiro Zoo, and these animals at the time of capture were sorted by gender and type of feather. Blood samples from these animals were obtained by venipuncture to obtain the serum. The serum samples were subjected to IFAT for anti-T. gondii IgG. In general, the frequency of positive results was 58.21% (n=39), with a statistically significant association (p<0.05) between the animals with adult plumage and seropositivity. The exposure of ducks to T. gondii in the vicinity of the Zoo may indicate contamination of this area with protozoan oocysts.

Toxoplasmose é uma zoonose determinada pelo protozoário Toxoplasma gondii de ampla distribuição geográfica, que acomete animais homeotérmicos, sendo os felídeos os seus hospedeiros definitivos, e outros mamíferos e aves os seus hospedeiros intermediários. Em relação à espécie de ave latino-americana Cairina moschata, há poucos relatos no Brasil da exposição desses animais a esse protozoário. Mediante o exposto, este estudo teve como objetivo relatar pela primeira vez a exposição de C. moschata à infecção por esse parasito no Rio de Janeiro, Brasil, determinando a frequência sorológica de anticorpos anti-T. gondii em aves dessa espécie. Foram capturados, nos arredores do Zoológico do Rio de Janeiro, 67 espécimes de C. moschata, sendo esses animais, no momento da captura, triados pelo gênero e pelo tipo de pena. Amostras de sangue desses animais foram obtidas por venopunção para obtenção do soro. As amostras de soro foram submetidas à RIFI para pesquisa de anticorpos IgG anti-T. gondii. De forma geral, a frequência de positividade evidenciada foi de 58,21% (n=39), sendo observada associação estatística significativa (P<0,05) entre animais com plumagem de adultos e soropositividade. A exposição dos patos a T. gondii nos arredores do zoológico pode indicar a contaminação dessa área com oocistos do protozoário.

Avaliação histopatológica das principais lesões testiculares em gatos adultos submetidos à orquiectomia eletiva / Histopathological evaluation of the main testicular lesions in adult cats submitted to elective orchiectomy

O estudo das lesões testiculares em felinos é essencial no diagnóstico das doenças reprodutivas, uma vez que as gônadas podem apresentar alterações importantes, mesmo quando macroscopicamente normais. Assim, este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar as principais lesões testiculares em gatos adultos submetidos à orquiectomia eletiva, determinando as lesões de maior frequência. Para isso, foram utilizados 25 gatos machos, adultos, com idade entre um e dois anos. Todos os animais eram provenientes do Programa de Controle Populacional de Animais de Estimação Pelo Método de Esterilização Cirúrgica, do Hospital Veterinário da Universidade Federal de Uberlândia (HOVET-UFU). Após a orquiectomia, os testículos foram coletados e enviados ao Setor de Patologia Animal do HOVET-UFU, onde foram separados dos seus respectivos epidídimos. Foram obtidas as dimensões de comprimento, altura, largura, peso e volume de cada testículo. Esses foram então fixados em formalina 10%, por 24 horas, e clivados nas regiões cranial, média e caudal. Os fragmentos foram submetidos ao processamento para inclusão em parafina e coloração em hematoxilina e eosina. Mesmo sem alterações macroscópicas significativas, a maioria dos gatos avaliados no estudo exibiu alguma lesão testicular, sendo a degeneração testicular e a fibrose intersticial as mais comuns. Desta forma, destaca-se a importância da histopatologia no diagnóstico de alterações testiculares em animais considerados saudáveis.

The study of testicular lesions in felines is essential in the diagnosis of reproductive diseases, since, the gonads can present important alterations, even when they are macroscopically normal. Thus, the present work aimed to evaluate the main testicular injuries in adult cats submitted to elective orchiectomy, determining the most frequent ones. For this, 25 adult male cats, aged between one and two years, were used. All animals came from the Pet Population Control Program through the Surgical Sterilization Method of the Veterinary Hospital of the Federal University of Uberlândia (HOVET-UFU). After the orchiectomy, the testicles were collected and sent to the Animal Pathology Sector of HOVET-UFU, where they were separated from their respective epididymis. The dimensions of length, height, width, weight, and volume of each testicle were obtained. These were then fixed in 10% formalin for 24 hours, and cleaved in the cranial, middle, and caudal regions. The fragments were submitted to processing for inclusion in paraffin and staining by hematoxylin and eosin. Even without significant macroscopic changes, most cats evaluated in the present study showed some testicular damage, with testicular degeneration and interstitial fibrosis being the most common. Therefore, the importance of histopathology in the diagnosis of testicular alterations in animals considered healthy is highlighted.

Effects of environmental enrichment on behavioral expression of pumas (Puma concolor) under human care / Efeitos do enriquecimento ambiental na expressão comportamentalde onças-pardas (Puma concolor) mantidas sob cuidados humanos

The maintenance of pumas under human care imposes different conditions from those found in the natural environment, which may result in stress and impaired welfare. The objective was to evaluate the effects of environmental enrichment on the welfare of four jaguar specimens (Puma concolor), kept under human care. The enrichment techniques addressed were food, sensory, and mixed (physical-cognitive) enrichment. The research was divided into three phases: Phase 1, pre-enrichment; Phase 2, application of enrichment; and Phase 3, post-enrichment. The observation of the activities was performed using the focal animal method, and the behaviors were recorded to compose an ethogram. The sampling effort totaled 96 hours, with a 24-hour observation time for each specimen. During phases 2 and 3, the animals showed increased expression of natural behaviors, increased exploration and interaction with the enclosure, as well as, with other individuals. In addition, the applied activities provided cognitive challenges and reduced the animals' idle time. Although puma 4 showed stereotyped behavior, during the three phases of this study, this individual was healthy and active. Thus, the results demonstrate the beneficial effects of environmental enrichment on the well-being of pumas held in captivity.(AU)

A manutenção de onças-pardas mantidas sob cuidados humanos impõe condições diferentes daquelas encon-tradas no ambiente natural, o que pode resultar em estresse e prejuízo ao bem-estar. Objetivou-se avaliar os efeitos do enriquecimento ambiental no bem-estar de quatro espécimes de Onça-parda (Puma concolor), mantidos sob cuidados humanos. As técnicas de enriquecimento abordadas foram o enriquecimento alimentar, sensorial e misto (físico-cogni-tivo). A pesquisa foi dividida em três fases: Fase 1; Pré-enriquecimento, Fase 2; Aplicação dos enriquecimentos e Fase 3; Pós-enriquecimento. A observação das atividades foi realizada através do método animal focal, sendo registrados os comportamentos para composição de um etograma. O esforço amostral totalizou 96 horas, com o tempo de observação de 24 horas para cada espécime. Durante as fases 2 e 3, os animais apresentaram aumento da expressão de comporta-mentos naturais, aumento da exploração e interação com o recinto, assim como, com os outros indivíduos. Além disso, as atividades aplicadas proporcionaram desafios cognitivos e reduziram o tempo ocioso dos animais. Embora a Onça-parda 4 tenha apresentado comportamento estereotipado, durante as três fases deste estudo, este indivíduo mostrou-se saudável e ativo. Dessa forma, os resultados demonstram os efeitos benéficos do enriquecimento ambiental no bem-estar de onças-pardas mantidas em cativeiro.(AU)

Infection by Aelurostrongylus abstrusus in a wild Leopardus wiedii (Carnivora: Felidae): case report / Infecção por Aelurostrongylus abstrusus em Leopardus wiedii(Carnivora: Felidae) de vida livre: Relato de caso

Aelurostrongylus abstrusus, popularly known as "feline pulmonary worm", it is a nematode that affects the respiratory system of felines causing aelurostrongylosis. This parasite can be found in the host's bronchi and pulmonary arteries. The clinical signs presented vary according to the animal's immune response and severity of the infection, the host might present apathy, dyspnea, syncope, wheezing, sneezing, among others. This report aims to describe a case of aelurostrostrilylosis in a feline of wildlife threatened of extinction. The animal, Leopardus wiedii (Schinz, 1821), popularly known as Margay, was found in an urban perimeter in the municipality of Anchieta, state of Santa Catarina (SC) in Brazil and attended at the Veterinary Clinic CLINIVET, of the University of the West of Santa Catarina - UNOESC, campus of São Miguel do Oeste (SC). In the initial clinical evaluation, the patient presented with deambulatory difficulties, biological samples were collected for further investigation. In the coproparasitological exam, parasitism was diagnosed by A. abstrusus, however the animal did not present any clinical signs related to the respiratory system. The results of this report indicate that the species L. wiedii, diagnosed with subclinical infection, can act as a wild reservoir for A. abstrusus, serving as a source of infection for other species of wild felids and also for domestic ones. This highlights the importance of effective public policies for the conservation, management and study of diseases that affect wild cats, especially species that need more urgent attention, that is, those threatened of extinction.(AU)

Aelurostrongylus abstrusus, popularmente conhecido como "verme pulmonar felino", é um nematoide que aco-mete o sistema respiratório dos felinos causando aelurostrongilose. Este parasita pode ser encontrado nos brônquios e arté-rias pulmonares do hospedeiro. Os sinais clínicos apresentados variam de acordo com a resposta imune do animal e gravi-dade da infecção, podendo o hospedeiro apresentar apatia, dispneia, síncope, sibilos, espirros, entre outros. Este relato tem como objetivo descrever um caso de aelurostrongilose em um felino silvestres ameaçado de extinção. O animal, Leopardus wiedii (Schinz, 1821), popularmente conhecido como gato maracajá, foi encontrado no perímetro urbano do município de Anchieta, estado de Santa Catarina (SC), Brasil e atendido na Clínica Veterinária CLINIVET, da Universidade do Oeste de Santa Catarina - UNOESC, campus de São Miguel do Oeste (SC). Na avaliação clínica inicial o paciente apresentava dificuldade de locomoção, foram coletadas amostras biológicas para posterior investigação. No exame coproparasitológico foi diagnosticado parasitismo por A. abstrusus, porém o animal não apresentou nenhum sinal clínico relacionado ao sis-tema respiratório. Os resultados deste relato indicam que a espécie L. wiedii, diagnosticada com infecção subclínica, pode atuar como reservatório silvestre para A. abstrusus, servindo como fonte de infecção para outras espécies de felinos silves-tres e também para os domésticos. Isso destaca a importância de políticas públicas efetivas para a conservação, manejo e estudo das doenças que acometem os felinos selvagens, principalmente as espécies que necessitam de atenção mais urgente, ou seja, aquelas ameaçadas de extinção.(AU)

Coloboma eyelid in cats - treatment with carbon dioxide cryosurgery

Background: Eyelid colobomas are congenital and developmental disorders. Generally, they affect the temporal portion of the upper eyelids of cats, bilaterally. This ocular defect is accompanied by trichiasis associated with pain and ulcerative keratitis. Any breed can be affected and it has been reported in Domestic Shorthair, Persian, Burmese, Mongrel cats and captive felids. The objective of this case report is to describe the technique of dioxide carbon cryosurgery for the treatment of eyelid coloboma in felines. Cases: Seven mongrel cats (14 eyes) with bilateral eyelid coloboma were included in this study, 5 females and 2 males, with a median age of 5 months (range 6-8 months). The patients presented with blepharospasm, bilateral mucopurulent ocular discharge and eyelid coloboma extension of 30-50% in the upper eyelid, resulting in severe trichiasis of both eyes. In 5 cats, 1 or both eyes were diagnosed with keratitis and superficial corneal ulcers. Surgical treatment with general anaesthesia was applied. The pre anaesthesia protocol included acepromazine 0.05 mg/kg with methadone 0.2 mg/kg, followed by intravenous propofol and maintenance with isoflurane and oxygen. An ophthalmological cryocautery unit was utilised with carbon dioxide as the cryogenic agent and a retinal cryoprobe of 3.2 mm diameter tip, reaching -50ºC for the procedure. The method used was a double cycle of freezing and thawing for 60 s in the margins of eyelid agenesis. Epilation of hairs was made after freezing with eyelash tweezers. Immediately after the surgical procedure, an Elizabethan collar was placed to safeguard the area and anti-inflammatory therapy with meloxicam 0.1 mg/kg once daily for 3 days was prescribed. Antibiotic ointment every 6 h (chloramphenicol and associations) was also prescribed for topical application. Two weeks post-operatively, hyperaemia, oedema and skin wounds at the margins were observed. After 30 days these clinical signs were minimal. No signs of pain were observed post-operatively. The follow-up was 90 days and the trichiasis was resolved in all cats. Discussion: Usually, young cats are affected with eyelid colobomas. The age of the patients in this study was between 6-8 months. Eyelid colobomas are repaired with a variety of blepharoplastic procedures and the choice depends on the size and position of the defect. Generally, larger defects require more extensive reconstructive procedures. All techniques can have post-operative complications. Suture dehiscence, skin flap necrosis and facial deformation can occur with traditional surgical techniques. Furthermore, posterior hair growth in the margins can lead to new trichiasis. Cryosurgery was chosen and performed as the temperature of -20°C is sufficient to destroy hair follicles, without surgical incisions, avoiding scar formation. Hence, sutures are not necessary in cryosurgery procedures. Carbon dioxide is a good cryogenic agent for the purpose of this procedure. In the cases described, no recurrence of hair growth was observed in the follow-up period of 90 days. Nevertheless, a good aesthetic appearance was maintained. Therefore, the use of carbon dioxide cryosurgery is an effective and safe alternative for treatment of eyelid coloboma in cats. To our knowledge, no paper has described the use of carbon dioxide cryosurgery for the correction of palpebral agenesis in felines and other species as a single treatment. This technique is easy to perform, has good aesthetic and functional results and can be considered a treatment option for this congenital condition.

Hormona anti-Mülleriana en felinos domésticos / Anti-Müllerian hormone in domestic felids

La hormona anti-Mülleriana (HAM) es una glicoproteína dimérica de 140 kDa que pertenece a la superfamilia del factor de crecimiento transformante ß. La HAM es producida por las células de Sertoli de los testículos fetales siendo responsable de la regresión de los conductos müllerianos durante la diferenciación sexual masculina. En la hembra la HAM circula a niveles casi indetectable al nacer, con un ligero aumento en los primeros años de vida hasta la pubertad cuando se expresa en las células de la granulosa de folículos preantrales y antrales pequeños del ovario. En hembras adultas, la HAM actúa como un regulador autocrino y paracrino inhibiendo el reclutamiento de folículos primordiales y reduciendo la respuesta a la hormona folículo estimulante. En el gato doméstico el número de estudios de HAM es muy escaso quedando aún abundantes aspectos por definir en la especie. También la validación de un único inmunoensayo que permita la comparación de valores séricos entre los trabajos es necesaria. El objetivo de esta revisión fue explicar aspectos básicos de la fisiología de la HAM y resumir las principales publicaciones en el gato doméstico. Finalmente, se proponen aplicaciones prácticas para esta hormona en la especie.(AU)

O hormônio anti-Mülleriano (HAM) é uma glicoproteína dimérica de 140 kDa que pertence a superfamília do fator de crescimento transformador ß. O HAM é produzido pelas células de Sertoli dos testículos fetais, sendo responsável pela regressão dos ductos de Müller durante a diferenciação sexual masculina. Na fêmea, o HAM circula a níveis quase indetectáveis ao nascimento, com um ligeiro aumento nos primeiros anos de vida até a puberdade, quando se expressa nas células da granulosa de folículos préantrais e antrais pequenos do ovário. Nas fêmeas adultas, o HAM atua como um regulador autócrino e parácrino inibindo o recrutamento de folículos primordiais e reduzindo a resposta ao hormônio folículoestimulante. No gato doméstico o número de estudos do HAM é muito escasso, faltando vários aspectos a serem definidos na espécie. Também é necessária a validação de um único imunoensaio que permita a comparação de valores séricos entre trabalhos. O objetivo desta revisão foi explicar aspectos básicos da fisiologia do HAM e resumir as principais publicações no gato doméstico. Finalmente, se propõe aplicações práticas para este hormônio na espécie.(AU)

Temporal and spatial segregation of top predators (Felidae) in a Mexican tropical Biosphere Reserve

ABSTRACT Jaguars, Panthera onca (Linnaeus, 1758), and pumas, Puma concolor (Linnaeus, 1771) are the largest felids in the neotropics. Both can overlap in niche axes (time, space and prey), and are therefore potentially competing species. Segregation mechanisms presented by a low overlap in one of these axes of niche can facilitate the coexistence. Our aim was to analyze jaguar and puma temporal and spatial overlap for understanding their segregation mechanisms. Between 2015 and 2017, twenty-six camera trap stations were located in five habitat types of El Cielo Biosphere Reserve (ECBR) in northeastern Mexico. Temporal activity was analyzed using circular statistics and time overlap analysis. Spatial overlap was calculated with the Pianka index and a selectivity habitat analysis. Our results showed that jaguars and pumas were nocturnal and that the temporal overlap was high (4 = 0.77). We found an intermediate spatial overlap (Pianka index = 0.61). Jaguars were more selective and preferred the deciduous forest. In comparison, pumas preferred oak-pine forest, but also used oak and deciduous forest. Our results indicate that spatial segregation best explains the coexistence of jaguars and pumas in our study area, probably due to both habitat diversity in the reserve and the generalist habits of the puma.